遗传学
国家“211”工程重点建设院校
动物遗传学综述报告及学习心得体会
题目：不孕不育
姓名：冯晋川
学号：20145064
年级：2014级
学院：动物科技学院
专业：动物科学
指导教师：刘海峰
不孕不育
[摘要]:根据目前研究显示，造成女性不孕不育的遗传病主要有Rosewater氏综合征和多囊卵巢综合征（PCOS）。造成男性不孕不育的遗传病主要有Klineflter氏综合征、XX男性综合征（XXmales）无睾丸症（Anorchia）、Kallmann氏综合征和Y染色体变异，本文主要介绍了XX男性综合征（XXmales）和Y染色体变异的病因及其遗传学意义。
[关键词]：不孕不育 46XX 大Y小Y
一、46XX男性综合征
1、简介
46.XX男性综合征,又称46.XX皋丸发育不良(testicular disorder of sex development),也称为性反转综合征(SRS)是一种性别发育异常的人类遗传疾病，主要表现为患者性腺性别与染色体性别不相符，其临床分型包括46.XX男性性反转和46,XY女性性反转两类。其发生率在男性新生儿发病率约为1/20000。
2、患者临床表型
46，XX 男性综合征平均身高较正常人低。患者身高稍低于中国男性平均身高( 169. 7 cm) 。一般来说，如果青春期性腺发育不全，由于雄激素缺乏导致骨骺闭合延迟，会导致身高增加，因此低促性腺激素性性腺功能不全或者 Kallman 综合征患者身材细长。实验室检查发现，46，XX 男性综合征患者睾酮水平下降或在正常低限，促性腺
激素水平显著升高
3、病因的遗传研究
目前，46.XX男性的遗传学机制还不明确，主要有以下机制理论: （1）Yp-Xp易位假说:Y染色体断臂远端易位到父源X染色体短臂远端，该异位片段长度有异质性并通过5RY基因编码Y染色体假性常染色体区和皋丸决定因子。文献报道大约90%的46.XX男性患者是由于父源生殖细胞在减数分裂过程中X-Y染色体同源之间末端异常交换（Yp-Xp）导致携带SRY基因的Y染色体易位到X染色体上所致，从而使患者表现为男性表型。
（2）靶基因突变假说:研究认为SRY基因决定男性性别分化受位于X 染色体上抑制和Y染色体上激活的双重调控，使SRY基因抑制某个常染色体基因表达，使结构基因在没有SRY基因激活下自发启动表现为46.XX的男性。
（3）SRY下游SRY相关HMG框基因9过度表达:SU等发现SRY位于Y 染色体短臂邻近假性常染色体区1，负性调节常染色体Z位点，其可关闭男性决定基因。当SRY的某些突变或基因缺失可能发生Z位点发生退行性变而不能关闭男性决定基因，从而表现正常男性表型和皋丸发育。
3、检查方法
（1）外周血淋巴细胞染色体核型分析：采用本遗传代谢中心实验室外周血常规检测方法，抽取外周血3ml,置于肝素抗凝后进行外周血
淋巴细胞培养后，染色体制备并G显带。按照人类细胞遗传学国际命名体制,标准进行核型分析诊断。
（2）SRY、ZFY、ZFX基因检测：
1、引物的设计与合成 SRY 基因 PCR 引物序列正向引物
2、外周血基因组 DNA 提取肝素抗凝外周血参照试剂公司提供的方法步骤提取外周血粒细胞基因组 DNA。
3、目的基因片段 PCR 扩增采用 Biomltra 梯度 PCR 仪对所有外周血基因组 DNA 模板进行目的基因片段进行 PCR扩增反应。
4、目的基因片段电泳检测经 PCR 扩增的目的基因片段产物行 2%琼脂糖凝胶水平恒压电泳，然后在紫外透视仪下观察目的条带并及时拍照存档。
4、讨论
因46.XX男性性反转综合征的临床异质性，因此尽早确定染色体、性腺及外生殖器性别等相关异常是诊治SRY阳性46.XX男性综合征的主要原则。总之，该类患者可能涉及不同的细胞遗传学异常，所以对于男性生殖器发育异常、无精子症等患者需进行染色体核型分析，SRY 和AZF等相关基因检测，有利于了解该类患者的遗传学病因，为明确诊断和治疗提供科学依据。对于SRY阳性的46.XX患者因皋丸发育不良、缺乏生精能力但其间质细胞仍具有一定的内分泌功能，成年后可有正常的性冲动和性生活。因此，对于此类患者，尽管不能生育，亦可给雄激素替代治疗，以维持足够性欲，提高生活质量。同时建议行产前诊断时，
当产前超声与细胞遗传学结果不一致时，应予以重视避免
46, XX男性综合征患儿的出生.
二、Y染色体变异
1、简介
Y染色体上有与男性性别决定密切相关的基因存在,而Y染色体的大小变化较大,是介于F组和G组大小的近端着丝粒染色体。Y染色体长臂远端的2/3为结构异色质,容易发生形态学的变化，从而导致 Y染色体数目或结构的异常。Y染色体大于或等于18号染色体称之为大Y,小于或等于21号染色体称之为小Y。
2、Y染色体对男性生育的影响
关于 Y 染色体长度变异对男性生育障碍的影响及其临床效应，目前众说纷纭，观点上存在争论
（1）大多数学者认为大Y核型由于异染质中 DNA 过多重复而造成（剂量效应），影响正常的有丝分裂发生程序，致使基因调节及细胞分化异常，干扰正常细胞分裂，具备临床效应
（2）还有少数人认为大 Y 核型仅属于多态性，无临床意义，认为小 Y 可能同时合并无精子因子基因的微小缺失，理论上不论合并AZF 缺失与否，小 Y 均会对生精及胚胎发育造成影响。如果小 Y 同时合并 AZF 区域缺失，则导致Yq11 常染色质与 Yq12 异染色质共同缺失，更容易导致精子生成障碍。
3、实验探究
由于对于 Y 染色体多态性是否具备效应观点上存在争论。所以
对于染色体多态性变异携带者出现的反复流产等不良妊娠结局是否与多态性有关，尚需功能基因组学验证，对某家医院进行的一次统计。病例分为 2 组:
A 组是男性不育患者( 指未能使女方受孕)
B 组包括配偶曾有不良孕产结局或配偶本次妊娠羊穿刺显示胎儿染色体异常或变异，不良孕产结局包括既往自然流产、胚胎停育、多发流产、畸形儿生育史、死胎死产史等。检测其血淋巴细胞的核型（既大Y小Y）
探究结果：
（1）大小Y核型的临床效应均表现为无精症、少精症以及胚胎停育、自然流产等不良妊娠结局
（2）在男性不育组，大 Y 及小 Y 的检出率差异不大，无统计学意
义。
（3）而在不良妊娠相关组，大 Y 检出率高于小 Y( P =0.0002)
推测：由于大 Y 携带者仅仅是异染色质区域 DNA 重复，使得女方受孕相对容易，小Y 携带者会导致 q11 遗传物质丢失或合并 AZF缺失，更易导致精子生成障碍使女方不孕
3、总结
Y 染色体长度变异可能具备某些潜在的、未被认知的临床效应，其与男性不育及不良妊娠结局是否关联目前尚不明确。而这次统计由于Y 染色体多态性变异检出率缺乏与正常人群检出率的比较，故Y 染色体多态性与男性生育障碍是否真正相关尚需验证。研究还需继续进行
[参考文献]
学习心得
这次遗传学的读书报告我们小组选的课题是不孕不育，这是一个非常贴近生活的课题。通过这次读书报告不仅扩宽了我们的知识面同时也让我了解到了查阅文献的好处与重要性。
在确定课题后我们小组进行了明确的分工，每个人都选择了一到两个方面的内容，然后各自查阅相关文献去制作PPT，最后再由组长将每个人制作的PPT进行合并，这样不仅大大的提高了学习效率，同时也让组内的每个同学都参与进来锻炼了我们的团队合作能力。最后我们小组的报告形式也是集体报告，每个人上去讲述自己制作的部分，让下面听得同学也能够得到更好的理解。
在学习内容上，通过这次读书报告我们了解了许多有关不孕不育的知识。而我个人则是对46XX男性综合征和大小Y染色体变异有了深入的了解。造成不孕不育的病因有很多，其中46XX男性综合征和大小Y染色体变异是两个遗传学病因。而46XX男性综合征的病因遗传研究尚不明确，通过查阅相关文献和论坛，大多数人比较偏向于Yp-Xp 易位假说，该假说认为“Y染色体断臂远端易位到父源X染色体短臂远端，该异位片段长度有异质性并通过SRY基因编码Y染色体假性常染色体区和睾丸决定因子。”文献报道大约90%的46.XX男性患者是
由于父源生殖细胞在减数分裂过程中X-Y染色体同源之间末端异常交换（Yp-Xp）导致携带SRY基因的Y染色体易位到X染色体上所致，从而使患者表现为男性表型。而对于大小Y染色体变异，大多数学者认为大Y核型由于异染质中 DNA 过多重复而造成（剂量效应），影响正常的有丝分裂发生程序，致使基因调节及细胞分化异常，干扰正常细胞分裂，具备临床效应。总的来说造成不孕不育的种种病因正在逐渐被人们探索出来，尽管现在存在诸多争议并且不孕不育的现象愈发频繁，但我相信通过努力人类一定可以攻克这个难题。
总的来说这次读书报告给了我非常大的收益，开阔了我的视野，同时也锻炼我和小组成员之间合作与交流能力，而让我感触最深的是查阅文献所带给我们知识与能力的锻炼以及增强了我们对前沿课题的兴趣。最后希望老师能多为我们提供这样的平台，让大家能够发挥自主学习的能力调动对学习的积极性和主动性。