浅论胎盘滋养层细胞的功能

浅论胎盘滋养层细胞的功能

胎盘有两大重要功能，内分泌功能与侵袭功能，其功能与滋养层的结构密不可分。在妊娠早期胚泡埋入子宫内膜之后，滋养层细胞分化成两个主要的细胞谱系，即绒毛滋养层( villoustrophoblasts，VTS) 和绒毛外滋养层( extravilloustrophoblasts，EVTs) 。绒毛滋养层包括两种细胞，与内膜接触的滋养层细胞迅速增殖，滋养层增厚，细胞分化为内外两层。外层细胞互相融合，细胞间界限消失，称为合体滋养层，起到强大的内分泌作用; 内层细胞界限清楚，由单层立方细胞组成，称为细胞滋养层，其不断分裂，补充进入合体滋养层。二者构成绒毛结构，运输营养物质给胎儿; 此外，细胞滋养层绒毛的尖端可以分化成另一种类型的滋养层细胞称为绒毛膜外滋养层细胞，绒毛膜外滋养层细胞对母体子宫上皮的黏附与侵入行为是胎盘形成的前提。

1 侵袭功能

EVT 细胞的侵袭性迁移行为是胎盘形成、发育及妊娠顺利完成的基本要素。EVT 细胞首先迁移到母体子宫蜕膜，然后侵入到子宫肌层的螺旋动脉壁内，并沿着螺旋动脉壁进行迁移，启动血管重塑的过程，建立母胎循环联系。细胞介导的血管重塑由螺旋动脉穿过蜕膜板进入母体叶，最终在母胎之间形成一种高流量、低阻力的脉管系统，在胎儿小叶绒毛处进行物质交换，保证对胎盘充足的血液灌注，满足胎儿的生长发育和对氧气及营养物质的需求。

EVT 细胞的侵袭性迁移功能受到体内微环境的精确调节，有多种蛋白酶和黏附分子直接或间接地参与了滋养层细胞的浸润和黏附过程，这些因子之间可以相互作用，共同参与血管重塑过程的调节，对妊娠结果产生重要的影响。

1. 1 金属基质蛋白酶

EVT 细胞之所以具有强大的侵袭功能，是因为它能够分泌金属基质蛋白酶( MMPS) ，其中金属蛋白酶-2( MMP-2) 和金属蛋白酶-9( MMP-9) 是妊娠期EVT 细胞侵袭的关键酶。EVT 细胞分泌的这些胶原酶可以降解弹力蛋白、胶原以及层粘连蛋白，从而能够侵入子宫蜕膜的细胞外基质，整合到肌层螺旋动脉壁内。现有研究表明，趋化因子-6( CXCL-6) 通过抑制基质MMP-2 活性来抑制人早孕胎盘滋养层细胞的迁移和侵袭。

1. 2 激活素A

激活素A 是一种多功能的生长因子，近年来发现滋养层细胞通过分泌激活素A 来上调MMP-2 和MMP-9 的表达从而促进滋养层细胞向子宫蜕膜浸润，同时刺激胎盘激素的产生，对早期胎盘形成发挥重要的作用。

1. 3 解整合素-金属蛋白酶

解整合素- 金属蛋白酶( a disintegrin andmetalloproteinase，ADAM) 是一类属含锌蛋白酶超家族的跨膜蛋白，定位在滋养层细胞中。ADAMs 分子作为多功能蛋白，通过其分子内在的催化、细胞黏附和细胞内信号的转导从而在妊娠系统中发挥作用，包括参与精卵识别和融

合、组织发育及细胞迁移浸润等。适量的ADAMs 对于妊娠过程是必要的，但ADAMs 的过量表达会使诱发人绒毛膜癌，使滋养层细胞的浸润能力下降，同时增强细胞间的黏附。上述结果表明，ADAMs 可能在胎盘发生过程中对滋养层细胞发挥非常重要的调节功能。

2 内分泌功能

产妇机体能够维持妊娠、孕育胎儿依赖于胎盘强大的内分泌功能。在早期的母胎界面中，胎盘滋养层细胞按两种途径分化: 一是绒毛内滋养途径，包括细胞滋养层细胞融合形成合体滋养层; 二是在绒毛外滋养途径，细胞滋养层细胞在子宫内壁增生，相互接触并锚定，参与螺旋动脉的重构。在怀孕的前 3 个月，胎儿胎盘单位在低氧环境中发育，此阶段合体滋养细胞分泌大量活性物质，如甾体类激素、神经肽类激素、生长因子、细胞因子等多种生物活性物质。这些物质在母胎循环中影响母体的新陈代谢，增加母胎循环流量的活力，母体通过局部自分泌或旁分泌的机理与来自母胎循环的信号调控来发挥其分泌功能。

2. 1 甾体类激素

妊娠最初分泌雌激素和孕激素的组织是黄体，随着黄体不断退化，胎盘逐渐成为内分泌的主要组织。孕激素在合体滋养层细胞中转化为孕酮，人胎盘滋养层细胞可以从C-19 前身合成雌激素，对胚泡的发育起到至关重要的作用。

2. 2 调节肽

2. 2. 1 促性腺激素释放激素( gonadotropinreleasinghormone，

GnRH) 胎盘产生的GnRH 与下丘脑产生的GnRH 在化学结构和生物学活性上是完全相同的。GnRH 主要分布于胎盘绒毛的细胞滋养层中，尚未发现合体滋养层细胞有分泌GnRH 的功能。研究发现GnRH 受体基因在胎盘绒毛的两层滋养层细胞中均有表达，其表达量的变化与人绒毛膜促性腺激素( hCG)的分泌量相一致，表明GnRH 有营养黄体、维持早孕、调控其他激素分泌的重要功能。

2. 2. 2 hCG hCG 是一类糖蛋白家族，包括促黄体生成素、促甲状腺激素和卵泡刺激素，有影响胎盘植入、血管重塑以及营养黄体、促进黄体分泌孕酮的作用。现有假说表明hCG 涉及肿瘤细胞抗细胞凋亡的作用，这一作用与激素的结构有关，正常约37. 5 kDa 分子质量的hCG 是由合体滋养层产生的，而相对分子质量

38. 5 ～ 40 kDa 的hCG 是由某些癌细胞分泌而来=，如绒毛膜癌、侵蚀性葡萄胎等，可能是游离-hCG 的增多与滋养层细胞未发育成熟相关。

2. 2. 3 促肾上腺皮质激素释放激素( corticotropinreleasing factor，CRF) CRF 的mRNA 于妊娠早期的胎盘中就有所表达，随胎龄逐渐增大，CRF 由胎盘合体滋养层细胞分泌[15]，是胎儿胎盘循环强有力的血管扩张剂，对妊娠期的应激信号起着放大作用。它通过与前列腺素、催产素、皮质激素和雌激素等多种内分泌激素的相互作用，形成分娩启动的正反馈环。

2. 2. 4 神经肽-Y( neuropeptide-Y，NPY) NPY 及其受体主要分布于胎盘绒毛的细胞滋养层。孕妇通常具有高水平的NPY，其水平在分

娩时发生明显的变化，实验发现，胎盘中NPY 可能参与调节局部血管的收缩和子宫肌的肌紧张调节。

2. 2. 5 卵泡抑素( follistatin，FS) 合体滋养层细胞可以分泌这种含半胱氨酸的单链糖基化多肽，它对胎盘自主分泌的hCG、孕酮无明显调节作用，但对激活素诱导的hCG、孕酮合成有显著的抑制作用。

2. 3 生长因子

2. 3. 1 表皮生长因子( epidermal growth factor，EGF)EGF 是最早被发现的生长因子，EGF 及其受体分布在细胞滋养层和合体滋养层。胎盘是胎儿与母体之间进行物质交换的重要器官，胎盘发育过程中滋养层细胞的浸润有助于建立高效的母-胎之间物质交换。胎盘发展受到多种因素调节，这些因素中一个或者多个发生异常就会影响到胎盘的功能维持和胎盘的完整性，EGF 就是其中一个重要的因子。有研究发现，EGF对滋养层细胞的增殖、分化、细胞能量代谢、激素合成与分泌、侵袭和迁移等多种生物学行为均存在调控，妊娠期间母-胎界面EGF 表达水平的异常可能是造成滋养细胞侵袭性迁移不足、胎盘形成不良、流产等疾病的重要原因。

2. 3. 2 胰岛素样生长因子( insulin-iike growth factors，IGFs) IGFs 是一类含67 ～ 70 个氨基酸的单链多肽类物质，原位杂交实验证实IGF-Ⅰ的mRNA 主要在合体滋养层细胞中表达， IGF-Ⅱ的mRNA 主要在细胞滋养层细胞中表达。IGF-Ⅰ已经显示出刺激EVT 细胞的迁移和入侵，从而影响胎盘发育和胎儿生长的作用。近年来，在胎盘的两层滋养层细胞和基质细胞中还发现了可与IGFs 结合的特殊

滋养层细胞

滋养层细胞 科技名词定义 中文名称：滋养层细胞 英文名称：trophoblast;trophoblastic layer 定义：哺乳动物胚泡的外层细胞，不能发育成胚体，只能发育成胚外结构。 所属学科：遗传学（一级学科）；发育遗传学（二级学科） 本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 在胚胎发育成桑椹胚后，桑椹胚进一步发育，细胞开始出现分化。聚集在胚胎的一端，个体较大的细胞，称为内细胞团（innercellmass，ICM），将来发育成胎儿的各种组织，而沿透明带内壁扩展和排列的，个体较小的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘。所以做基因诊断时，通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病，这样不会影响胎儿发育。 滋养层 科技名词定义 中文名称：滋养层 英文名称：trophoblast 定义：哺乳动物围绕胚泡形成的胚外层上皮。将来形成绒毛的外层，和母体组织共同组成胎盘。 所属学科：细胞生物学（一级学科）；细胞分化与发育（二级学科） 本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布 滋养层 滋养层trophoblast为哺乳类早期胚泡壁的单层细胞所形成的薄膜。

是因为以后从母体摄取胎儿营养起重要作用而有此名。植入时滋养层局部增生肥厚（极端滋养层）侵着于子宫壁的组织内，并将一部分子宫壁溶解吸收。内胚层和中胚层分化之后，它虽然相当于外胚层，但与胚体形成部的胎儿外胚层是有区别的，所以有称滋养外胚层（trophectoderm）的。滋养外胚层不久被胚外体壁中胚层贴附，这样合起来的两层（广义的体壁层）称为滋养膜（滋养层和滋养膜使用上不一定明确区别）。又滋养膜相当于卵生羊膜类的浆膜，所以也仍可称为浆膜。在人的滋养层一部分形成发达的海绵状构造，包围于植入胚的周围。称此为合体滋养层（sy- ncytialtrophoblast）或海绵滋养层（spongiotro- phoblast）。相反，而与胚胎直接相邻的一层称为细胞滋养层（cytotrophoblast）。海绵滋养层将成为合胞体，认为它能吸收与其相接腔中的母体组织分解物。

浅论胎盘滋养层细胞的功能

浅论胎盘滋养层细胞的功能 胎盘有两大重要功能，内分泌功能与侵袭功能，其功能与滋养层的结构密不可分。在妊娠早期胚泡埋入子宫内膜之后，滋养层细胞分化成两个主要的细胞谱系，即绒毛滋养层( villoustrophoblasts，VTS) 和绒毛外滋养层( extravilloustrophoblasts，EVTs) 。绒毛滋养层包括两种细胞，与内膜接触的滋养层细胞迅速增殖，滋养层增厚，细胞分化为内外两层。外层细胞互相融合，细胞间界限消失，称为合体滋养层，起到强大的内分泌作用; 内层细胞界限清楚，由单层立方细胞组成，称为细胞滋养层，其不断分裂，补充进入合体滋养层。二者构成绒毛结构，运输营养物质给胎儿; 此外，细胞滋养层绒毛的尖端可以分化成另一种类型的滋养层细胞称为绒毛膜外滋养层细胞，绒毛膜外滋养层细胞对母体子宫上皮的黏附与侵入行为是胎盘形成的前提。 1 侵袭功能 EVT 细胞的侵袭性迁移行为是胎盘形成、发育及妊娠顺利完成的基本要素。EVT 细胞首先迁移到母体子宫蜕膜，然后侵入到子宫肌层的螺旋动脉壁内，并沿着螺旋动脉壁进行迁移，启动血管重塑的过程，建立母胎循环联系。细胞介导的血管重塑由螺旋动脉穿过蜕膜板进入母体叶，最终在母胎之间形成一种高流量、低阻力的脉管系统，在胎儿小叶绒毛处进行物质交换，保证对胎盘充足的血液灌注，满足胎儿的生长发育和对氧气及营养物质的需求。

EVT 细胞的侵袭性迁移功能受到体内微环境的精确调节，有多种蛋白酶和黏附分子直接或间接地参与了滋养层细胞的浸润和黏附过程，这些因子之间可以相互作用，共同参与血管重塑过程的调节，对妊娠结果产生重要的影响。 1. 1 金属基质蛋白酶 EVT 细胞之所以具有强大的侵袭功能，是因为它能够分泌金属基质蛋白酶( MMPS) ，其中金属蛋白酶-2( MMP-2) 和金属蛋白酶-9( MMP-9) 是妊娠期EVT 细胞侵袭的关键酶。EVT 细胞分泌的这些胶原酶可以降解弹力蛋白、胶原以及层粘连蛋白，从而能够侵入子宫蜕膜的细胞外基质，整合到肌层螺旋动脉壁内。现有研究表明，趋化因子-6( CXCL-6) 通过抑制基质MMP-2 活性来抑制人早孕胎盘滋养层细胞的迁移和侵袭。 1. 2 激活素A 激活素A 是一种多功能的生长因子，近年来发现滋养层细胞通过分泌激活素A 来上调MMP-2 和MMP-9 的表达从而促进滋养层细胞向子宫蜕膜浸润，同时刺激胎盘激素的产生，对早期胎盘形成发挥重要的作用。 1. 3 解整合素-金属蛋白酶 解整合素- 金属蛋白酶( a disintegrin andmetalloproteinase，ADAM) 是一类属含锌蛋白酶超家族的跨膜蛋白，定位在滋养层细胞中。ADAMs 分子作为多功能蛋白，通过其分子内在的催化、细胞黏附和细胞内信号的转导从而在妊娠系统中发挥作用，包括参与精卵识别和融

滋养层细胞的制备

1．器材 眼科镊子；眼科剪；平皿；200目筛；小烧杯；细胞计数板；离心管2．试剂 双抗；DMEM(DMEM/F12)；FBS；胰蛋白酶(0.25%)；Ⅰ-胶原酶(0.1%)；PBS；75%酒精；0.4%台盼蓝； 3．方法步骤 3.1．滋养层的分离 (1)将剥离下的组织放入75%酒精中10s，用含双抗的PBS冲洗2次，取出组织放入含有双抗的PBS缓冲液中，4℃保存，6-8 小时内带回实验室。 (2)将采集的胎盘样品用75%的酒精表面消毒后迅速的移入到新鲜的含双抗的PBS缓冲液中冲洗2-3次，移入无菌间内的超净工作台内。无菌双抗PBS缓冲液冲洗3 次，用眼科剪小心剥离胎膜、尿囊膜、毛细血管等与绒毛膜紧密相连组织，无菌双抗PBS缓冲液冲洗3次。 (3)用眼科剪剪成1-3mm3的组织小块，含双抗的PBS悬浮沉淀漂洗3 次，每次3 min。加入等体积于组织样品的0. 25 %胰蛋白酶消化液，37℃恒温震荡箱消化10 min，弃上清。再加入等样品20-30 倍的0.25%胰蛋白酶和0. 1 %胶原酶1:1 复合消化液，37℃消化30 min，收集上清液。将剩余组织再次加入复合消化液 5 min，直至大部分组织被消化成细胞悬液，收集每次消化后的上清液加入等体积含10%血清的培养基终止消化。 (4)将所得到的细胞悬液通过200 目的不锈钢筛网。

(5) 1200 r/min,离心5 min,用完全培养基重悬离心沉淀的细胞,将细胞悬液浓度调整至5~6X105个/mL。 (6)置于37℃5% CO2培养箱中培养；隔日更换培养基一次以去除血细胞和其它无法贴壁的成分，待细胞贴壁后更换培养液，此后每3d 更换培养液1 次。直至首次传代。 3.2．滋养层的纯化与传代 纯化过程与传代培养同时进行。当原代培养的滋养层细胞贴壁生长到90%以上汇合度时应进行传代。首次传代前24 小时更换培养液。 (1)反复贴壁法 将原代培养的细胞用0. 25%胰蛋白酶消化后，制成不含血清的细胞悬液，接种到培养瓶内，静止20 min；镜下观察部分细胞贴壁（稍加摇荡也不浮起），由于在无血清培养液内成纤维细胞比上皮细胞贴壁快，此时的贴壁细胞主要为成纤维细胞，上皮细胞大多数悬浮在培养液内，然后将培养液（含未贴壁细胞）吸到另一培养瓶内，加入含血清的培养液继续培养；再次制备不含血清的细胞悬液，重复以上操作传代培养3 次，可获得较高浓度的胎盘滋养层细胞。 (2)消化排除法 将原代培养的细胞用0. 25%胰蛋白酶消化液（含0. 02% EDTA）加入培养的细胞中，镜下见纤维样细胞缩短变圆，部分细胞脱壁，立即加入含有血清的培养液终止消化。轻轻振摇培养瓶后，倒掉液体，用含血清的培养液清洗瓶内贴壁的细胞，最后向瓶内加入含血清的培养液后继续培养，等下次传代时重复以上操作。这样重复传代 5 次即可

浅谈滋养层细胞在胚胎植入中的作用

题目：浅谈滋养层细胞在胚胎植入中的作用院-系：生命科学与技术学院 专业：08生科 姓名： 学号： 上课时段：周二（10、11）

浅谈滋养层细胞在胚胎植入中的作用 摘要：胚胎植入是哺乳动物生殖的关键环节, 是一个非常复杂的过程。本文通过滋养层细胞的来源、生长、功能分化对滋养层细胞进行了概要的叙述，并对滋养层细胞在胚胎植入中的作用的阐述,为进一步阐明胚胎植入的分子机制提供思路。 关键词：胚胎植入；滋养层细胞 Abstract:Embryo implantation is an important and complicated physiological process in mammalian reproduction.The paper introduce embryo implantation by elaborating the origin growth, functional differentiation of trophoblast cells .The aim of the review is to suppor t some idea oft he molecule mechanism in the embryo implantat ion by expatiating the role of embryonic tr ophocytes in imbedding. Key words: trophcyte; embryo implantation; 胚胎植入(emb ryo imp lan tat ion) 是指从卵子受精到胚泡着床的一系列细胞或分子生物学事件, 主要包括游离胚泡(f ree b lastocyst)、粘附和穿透(at tachmen t and penet rat ion)以及胎盘形成(p lacen tat ion) 。这一过程受许多因素的精确调节。激素、细胞因子、生长因子、粘附分子和细胞外基质均参与调节哺乳动物胚胎植人过程。在整个胚胎植入过程中,这些调节因素的表达、合成与分布状态沿着一定的空间和时间顺序发生变化, 而且它们之间存在着广泛的联系[1]。能否成功的植入取决于胚泡侵入性和子宫内膜接受性的密切合作。位于胚胎外围的滋养层细胞在胚胎侵入过程中发挥着关键的作用, 它通过分泌系列细胞因子和激素行使妊娠识别作用, 还通过分泌这些因子、激素的作用使胚胎对子宫内膜发生粘附及侵入的作用[2]。 1.1 滋养层细胞的来源 早期胚胎发育至囊胚时, 胚体细胞分为两层,外层细胞为滋养层细胞( t

妊娠滋养细胞疾病讲稿(定)

妊娠滋养细胞疾病 讲课人：刘惠宁 概述 妊娠滋养细胞疾病（gestational trophoblastic disease ,GTD）是一组来源于胎盘绒毛滋养细胞的疾病 葡萄胎 侵蚀性葡萄胎 绒毛膜癌 胎盘部位滋养细胞肿瘤(少见) 妊娠滋养细胞肿瘤（gestational trophoblastic tumor, GTT）系指葡萄胎以外的全部病变 各种滋养细胞肿瘤之间相互关系如下图所示 异位妊娠…………………… 良性绒毛病变妊娠滋养细胞肿瘤

妊娠滋养细胞疾病 妊娠滋养细胞疾病的研究历史 我国三千多年前古史记载：一妇女生子六百，称“水泡状鬼胎” 公元前4个世纪，希波克拉底将葡萄胎描述为“子宫的水肿” 1700年，第一次使用hydatid （水泡）和mole （胎块）这两个术语 1895年，Felix Marchand 指出葡萄胎能进一步发展为绒毛膜癌 1929年，发现患者尿中可检测到过量分泌的绒毛膜促性腺激素（HCG），不久后又产生了血HCG的测定方法 1956年，首次报道了妊娠滋养细胞肿瘤的化疗 葡萄胎（Hydatidiform mole） 一、定义 葡萄胎亦称水泡状胎块，是指妊娠后胎盘绒毛滋养细胞增生，间质水肿，终末绒毛形成大小不一的水泡，水泡间借蒂相连成串，形如葡萄，故此得名。T1 (一) 完全性葡萄胎（complete hydatidiform mole，CHM） 胎盘绒毛全部受累，具有较高的恶变率。 (二) 部分性葡萄胎（partial hydatidiform mole，PHM） 胎盘绒毛部分受累，还保留部分胎盘组织，或同时有胎儿及附属物。恶变罕见。 二、相关因素 葡萄胎的发病原因尚不清楚 （一）完全性葡萄胎 1.地域、种族差异表1 2.营养不良VitA、胡萝卜素、动物脂肪酸 3.年龄﹥40岁或<20岁表2 问题１ 4.重复性葡萄胎史表3

人类胎盘滋养层细胞的分化与妊娠相关疾病

人类胎盘滋养层细胞的分化与妊娠相关疾病 王红梅研究员中国科学院动物研究所北京 100101 摘要 “胎盘是人类了解得最少的人类器官，”美国国家儿童健康和人类发展研究所（National Institute of Child Health and Human Development，NICHD）的主管Alan Guttmacher博士说，“在科学界人们大多忽视了胎盘的存在。”但无可争辩的是，胎盘不仅对妊娠期间孕妇和胎儿的健康尤为重要，而且对分娩后母亲和后代终生的健康也具有极其重要的作用。在胎儿发育过程中，胎盘既作为胎儿寄生于母体的中介，又在一定程度上充当了胎儿的肾脏、肝脏、胃肠道以及呼吸、内分泌和免疫等系统。但目前对人胎盘的了解却惊人的缺乏。发育生物学通常关注个体的发育而忽略胎盘的发育，细胞生物学则很少将滋养层细胞作为研究体系来探讨胎盘内部多种非常重要并有趣的生物学事件，这些因素导致很长一段时间里关于胎盘的研究仍停留在组织形态学观察的层面。随着现代生物学的不断发展，胎盘生物学的研究已经从组织形态学层面上升到细胞生物学和分子生物学层面，并逐渐走向组学和系统生物学时代。人类对胎盘认识的深入也必将为妊娠相关疾病的诊断与治疗以及健康婴儿的诞生提供重要的理论基础。 1.人类胎盘的主要功能 胎盘作为胎儿与母体进行营养物质和气体交换的场所，是哺乳动物进化出来的一个临时内分泌器官[1-3]。胎盘的最主要功能是提供并维持胚胎最优的生长环境。具体表现为两个方面：一是优良环境的建立，即母体子宫与胎儿血液循环和物质交换系统的建立；二是这一环境的维持，即胎儿生长微环境的维持。 母体与胎儿物质交换依赖于胎儿和母体血液循环双向联系的建立。一方面，胎盘绒毛树的生长极大增加了胎儿与母体的接触表面积，绒毛树内部发生的胎儿血管通过绒毛的半透屏障与母血进行物质交换；另一方面，蜕膜化的子宫内膜血管的通透性和内径都会显著增加，血管壁被胎盘滋养层细胞所改建，使得营养丰富的动脉血更容易地灌注到绒毛间隙中，从而保证胎盘绒毛树最大程度地与母血进行物质交换[4]。 胎儿生长微环境的维持则表现为妊娠状态的维持和胎儿免疫耐受的维持。妊娠状态的维持主要依靠孕酮对子宫内膜蜕膜化状态的维持和对宫缩反应的抑制作用来实现。孕酮由卵巢黄体大量合成和分泌。在正常月经周期中，黄体在排卵之后两周退化，孕酮水平也随之下降。在妊娠初期，胎盘分泌的人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）能够延长黄体分泌孕酮的周期[5]。这种黄体响应hCG分泌孕酮的机制将会持续到妊娠的第5-7周，之后胎盘代替黄体发挥分泌孕酮的功能[6]。胎盘除了分泌hCG和孕酮之外，还会分泌多种与妊娠和胎儿生长发育相关的激素，共同调节和维持胎儿生长微环境的稳态。 胎盘在母-胎免疫耐受的建立和维持中发挥重要作用。对母亲而言，胎儿是半同种异体，因此，成功的妊娠需要母体免疫系统必须产生和维持对胎儿的免疫耐受。在母-胎界面，胎盘滋养层细胞是母体与胎儿之间的第一道屏障，同时绒毛外细胞滋养层细胞向蜕膜局部侵袭，参与胎盘血管重塑。母体子宫蜕膜中富集大量的免疫细胞，包括50-70%的子宫自然杀伤细胞（uNK）、10-20%的单核巨噬细胞（MФ）、10-15%的T细胞以及少量的树突状细胞（DC）

囊胚滋养层细胞活检技术的优势及操作解析

囊胚滋养层细胞活检技术的优势及操作解析 【引用本文】高英卓，杨大磊，冯迪，等.囊胚滋养层细胞活检技术的优势及操作解析［J］.中国实用妇科与产科杂志，2020,36(9):884-887. 作者：高英卓，杨大磊，冯迪，王秀霞，李达 1990年Handyside团队首次对携带不同X-连锁隐性遗传病基因的两对夫妇的胚胎进行了检测，筛选合适的胚胎性别并种植后顺利妊娠。如今植入前遗传学检测（PGT）技术已广泛应用于全世界的生殖中心并得到了迅速的发展。PGT技术是指在体外受精-胚胎移植技术的基础上，通过对配子或胚胎进行活检，获取部分遗传学物质进行染色体和（或）基因学检测，诊断其是否存在单基因缺陷、非整倍体或染色体拷贝数异常等，选择正常胚胎植入子宫，从而获得健康的子代。PGT技术的成功实施需要依赖可靠的活检技术获取可用于检测的胚胎遗传物质，而活检的过程对胚胎而言是一项侵入性的操作，活检是否成功将直接影响到PGT 的最终结局。随着分子生物学技术的不断发展，虽然部分检测已经可以使用无创或微创的方式进行遗传物质的获取，但其检测结果的准确性尚存争议。因此，目前仍以有创方式获取遗传物质为主，即活检技术。PGT活检技术根据活检时间可分为极体活检、卵裂球活检与囊胚滋养层细胞活检：极体活检是在取卵当天（或受精后第1天）获取极体用于遗传学检测，可以检测母源性的染色体非整倍体和易位，但无法检测父源性遗传缺陷；卵裂球活检则是在受精后第3天（6~8个细胞阶段），获取1~2个细胞进行遗传学检测；囊胚滋养层细胞活检是在受精

后第5天或第6天，胚胎发育至囊胚阶段时，获取5~10个滋养层细胞用于遗传学检测。 1 囊胚滋养层细胞活检技术的优势 1.1 胚胎损伤小卵裂球活检是从6~8个细胞中抽取1~2个细胞用于遗传学检测，而囊胚滋养层细胞活检则是在数百个细胞中抽取5~10个滋养层细胞用于检测。已有证据表明，卵裂球活检可能会损害胚胎的发育潜能及种植能力。此外，卵裂球活检时，为了使卵裂球之间连接变得松散，需要利用无Ca2+/Mg2+的缓冲液处理胚胎，利用时差显微培养系统观察发现这一操作会延迟胚胎致密化和成囊过程，并降低种植率。滋养层细胞将来会发育成胎盘或胎膜，不直接参与胎儿形成。因此，滋养层细胞活检可有效避免损伤内细胞团，进而减小活检操作对胚胎发育的影响。 1.2 诊断准确性高囊胚滋养层细胞活检用于遗传学检测的细胞数量（5~10个）远多于卵裂球活检（1~2个），提高了诊断准确性，降低了扩增失败的风险。 由于滋养层细胞活检技术自身的显著优势以及极体活检和卵裂球活检技术自身的局限性，结合近些年囊胚培养和囊胚冷冻技术的逐渐成熟，滋养层细胞活检技术已成为目前应用最为广泛的活检技术。 2 囊胚滋养层细胞活检技术的操作解析

滋养层细胞肿瘤

滋养层细胞肿瘤 一、葡萄胎 葡萄胎亦称水泡状胎块，其病因和本质尚未完全阐明。目前多数学者认为是一种良性滋养叶肿瘤，但仍有少数学者认为是一种病理性妊娠。 病理变化 肉眼观，薄壁透明囊性葡萄样物，相互间有细蒂相连，形如葡萄串。完全性葡萄胎（70%）是指所有绒毛都形成葡萄状，无胎儿或附属物。部分性葡萄胎（30%）是指部分绒毛形成葡萄状，仍有部分正常绒毛，且常伴有或不伴有胎儿或其附属物。镜下：三个特点：1）绒毛因间质水肿而增大，并有水泡形成；2）间质血管消失或稀少；3）滋养层细胞（合体细胞，细胞滋养层细胞）有不同程度的增生，并具有一定的异型性。 临床病理联系 子宫增大超过正常妊娠月份，但无胎心音；胎盘激素分泌增多（HCG↑）。彻底清宫后可痊愈。约15%可恶变为侵蚀性葡萄胎，3%恶变为绒毛膜癌，部分性葡萄胎的恶变率很低。 二、侵蚀性葡萄胎 也称恶性葡萄胎（malignant mole），多数继发于葡萄胎之后。与良性葡萄胎不同之处是前者水泡状绒毛侵入子宫肌层，引起组织破坏、大出血或转移，。此外滋养层细胞增生及异型程度比良性葡萄胎显著。 临床表现： 1）葡萄胎排出后，血和尿妊娠试验持续不正常； 2）阴道持续或间断不规则流血； 3）胸片示肺内往往有转移灶； 4）阴道可出现紫蓝色结节。 三、绒毛膜癌（choricocarinoma） 是滋养层细胞的高度恶性肿瘤。50%继发于葡萄胎，25%继发于自然流产，20%发生于正常妊娠，5%以上发生于早产或异位妊娠。主要临床表现是葡萄胎、流产或足月产后阴道持续不规则流血，血及尿中HCG浓度显著升高。 病理变化 肉眼观，子宫不规则增大，柔软，表面可见一个或多个紫蓝色结节，切面可见肿瘤呈喑红色、出血坏死的肿块充塞宫腔，或浸润肌层，或呈息肉状布满子宫内膜面。镜下，癌组织由分化不良的两种滋养层细胞组成：即细胞滋养层细胞和合体滋养层细胞.细胞滋养层细胞胞浆丰富，淡染，细胞境界清楚，核空泡状；合体滋养细胞体积大，胞浆红染并互相融合，核椭圆形。绒癌组织无间质，常呈广泛出血坏死。不形成绒毛结构。 绒癌易侵入血管，故主要为血行转移，最多见为肺，次为阴道，脑，肝等.

滋养细胞肿瘤

滋养细胞肿瘤 滋养细胞肿瘤是一组来源于胎盘滋养细胞的疾病，一般分为：葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌及胎盘部位滋养细胞肿瘤。 一、葡萄胎 葡萄胎是一种良性滋养细胞肿瘤，葡萄胎因妊娠后胎盘绒毛滋养细胞增生、间质水肿，而形成大小不一的水泡，其间借蒂相连成串，状如葡萄，也叫水泡状胎块。特点：病变局限于子宫腔内，不侵入肌层，也不发生远处转移。可分为：完全性葡萄胎和部分性葡萄胎。 （一）、病因 葡萄胎发生原因迄今不明，假说很多，但只能解释部分现象。 由于葡萄胎多见于亚洲各国，有人认为可能和种族因素因素有关；营养状况，如：饮食中缺乏维生素A及其前体胡萝卜素、动物脂肪，以及社会经济因素是可能的高危因素；也有不少作者认为葡萄胎与病毒感染有关；内分泌失调及孕卵缺损：有的作者认为葡萄胎的发生与卵巢功能衰退有关，故多见于大于40岁的妇女；更多的作者认为其发生与孕卵的异常有关；前次妊娠有葡萄胎史细胞遗传因素：完全性葡萄胎的染色体基因均来自父系，但其线粒体DNA仍为母系来源。90%的完全性葡萄胎染色体核型为46XX；10%的为46XY。部分性葡萄胎染色体核型90%以上为三倍体，最常见的是：69XXY，69XYY。 （二）、病理特点： 完全性葡萄胎：绒毛不同程度的水肿扩张；绒毛轮廓规则，滋养细胞增生；间质水肿或间质内胎源性血管消失；无胎儿及其附属物或胎儿痕迹。 部分性葡萄胎：仅部分绒毛水肿；绒毛轮廓不规则，滋养细胞增生程度较轻，且局限于合体滋养细胞；常合并胚胎或胎儿组织；间质内可见胎源性血管及其中的有核红细胞。 （三）临床表现： 1．完全性葡萄胎： （1）停经后阴道流血：反复阴道流血，如在排出的血液中见到小水泡则诊断即可确立； （2）子宫异常增大、变软：HCG异常升高，子宫大于停经月份；但亦有近一半的患者子宫相当于停经月份或小于停经月份； （3）腹痛； （4）妊娠剧吐及妊娠期高血压疾病征象； （5）卵巢黄素化囊肿：常在葡萄胎清除后2~4个月自行消失； （6）甲状腺功能亢进征象：约7%可出现，常HCG异常升高，T3、T4升高； 2．部分性葡萄胎：与完全性症状相似但较轻。 3．转归：完全性：子宫局部侵犯和远处转移的发生率为15%和4%。部分性：一般不发生转移，约4%的发展为持续性滋养细胞疾病 高危因素：1、HCG〉100，000U/L； 2、子宫体积明显大于相应月份； 3、卵巢黄素化囊肿直径〉6cm； 4、年龄大于40岁； 5、重复性葡萄胎； 6、病理类型以小葡萄为主； 7、第二次刮宫滋养细胞仍有高度增生。 （四）诊断与鉴别诊断： 1．诊断： HCG：正常妊娠在孕10~12周HCG达到高峰，而葡萄胎通常高于正常妊娠的HCG值，