小黑豆乳清蛋白和多肽的提取及其功能性研究

小黑豆乳清蛋白和多肽的提取及其功能性研究

【摘要】：本文以小黑豆为原料得到的小黑豆乳清水。经膜技术分离纯化后得到小黑豆乳清蛋白。利用单酶水解和双酶复合酶解法制备小分子乳清多肽,通过体外抗S180和H22肿瘤细胞实验筛选出抗肿瘤效果好的多肽。对该多肽和蛋白的体内免疫功能、抗S180肿瘤、抗皮肤乳头瘤和抗化学性肝癌进行了系统研究。结果表明：1、试验用絮凝离心法对小黑豆乳清水进行预处理,最佳工艺条件为：pH8.0、CaCl2加入量15ml·-1、温度40℃。再经微滤、超滤得到小黑豆乳清蛋白。经SephadexG-50凝胶分析表明,本工艺制得的小黑豆乳清蛋白分子量范围在6.0KD-10.0KD的占到50.3%,高于10.0KD的大分子约占45%。

2.小黑豆与黄大豆乳清水和蛋白组成的比较分析表明,小黑豆乳清水中的乳清蛋白、灰分、总糖含量均高于大豆乳清水；通过电泳分析表明,小黑豆乳清蛋白和大豆乳清蛋白的分子量主要分布在30.0KD以下,小黑豆乳清蛋白中的BBI含量高于大豆乳清蛋白。3、以小黑豆乳清蛋白为底物,用单一蛋白酶和双酶复合酶解制备小黑豆乳清多肽。细菌酸性蛋白酶单酶水解制备的多肽得率最高,可达97%。双酶复合水解多肽得率最高的为先胃蛋白酶处理后细菌酸性蛋白酶处理,其多肽得率为6

3.36%。经SephadexG-25凝胶层析分析表明,本工艺所得乳清多肽的主要成分是小于1KD的多肽,占80%以上。4、本研究对多种多肽进行体外抗肿瘤实验,得到以下结论：木瓜蛋白酶水解制备的多肽对S180、H22肿瘤细胞的抑制效果最显著。针对这一最佳抗肿

瘤效果,设计了木瓜蛋白酶水解制备多肽的正交试验,得到最佳多肽制备工艺为：加酶量5000U/g蛋白,pH6.0,处理温度为65℃。5、本研究对小黑豆乳清蛋白及多肽进行免疫功能试验。试验发现,小黑豆乳清蛋白及多肽对小鼠免疫器官无明显抑制作用。在相同剂量时,75℃处理组抑制荷瘤小鼠各项免疫功能下降的作用明显好于65℃处理,且呈一定的量效关系；多肽组提高免疫效果优于蛋白组,但多肽剂量与抗肿瘤效果呈负相关关系。6、用乳清蛋白及多肽饲喂小鼠,进行抗S180、抗皮肤乳头瘤和抗肝癌前期病变实验。抗S180结果显示,75℃蛋白高剂量组抗肿瘤的效果优于65℃蛋白组,抑瘤率达41.8%。蛋白和多肽高剂量组的抑皮肤乳头瘤效果较好,抑瘤效果与蛋白或多肽的浓度呈正相关。抗肝癌的结果显示,ProteAX多肽组抑制肝癌细胞生长的效果优于木瓜多肽组,抑癌效果与多肽浓度呈正相关。小黑豆乳清蛋白及多肽均有预防肿瘤的作用。【关键词】：小黑豆乳清蛋白蛋白酶水解小黑豆乳清多肽抗肿瘤功能

【学位授予单位】：山西大学

【学位级别】：硕士

【学位授予年份】：2013

【分类号】：TS201.2

【目录】：中文摘要11-13ABSTRACT13-15第一章绪论15-231.1小黑

豆及乳清蛋白的概述15-171.1.1小黑豆的资源及分布151.1.2小黑豆与常规大豆乳清水中的营养成分及利用情况15-161.1.3豆乳清蛋白的主要组成及性质16-171.2豆乳清蛋白的研究现状17-191.2.1乳清蛋白的组成及研究现状17-191.2.2豆乳清蛋白的提取方法研究现状191.2.3小黑豆乳清蛋白的加工利用及功能性研究现状191.3多肽抗肿瘤的研究进展19-201.4本论文的研究意义及主要内容20-231.4.1研究意义201.4.2研究内容20-23第二章小黑豆中乳清蛋白的提取及分析23-332.1前言232.2试验材料与仪器232.2.1试验材料与试剂232.2.2试验仪器232.3试验方法23-272.3.1小黑豆和黄大豆乳清水中部分营养成分的测定方法23-242.3.2小黑豆与黄大豆乳清蛋白的提取工艺路线242.3.3小黑豆中球蛋白与清蛋白的分离方法242.3.4小黑豆乳清水的加工处理方法24-252.3.5小黑豆与黄大豆乳清蛋白组成分析25-272.4结果与讨论27-312.4.1黄大豆与小黑豆乳清水中部分营养成分的比较分析272.4.2乳清水絮凝离心预处理的最佳条件27-282.4.3加工预处理过程对乳清水中乳清蛋白含量及几种营养成分的影响28-292.4.4小黑豆与黄大豆乳清蛋白分子量分析结果29-312.5本章小结31-33第三章功能性小黑豆乳清多肽的制备及体外抗肿瘤研究33-513.1前言333.2试验材料与仪器333.2.1试验材料333.2.2试验仪器333.3试验方法33-373.3.1功能性乳清多肽所用蛋白酶的筛选方法33-343.3.2多肽含量、氨基酸态氮的测定方法34-353.3.3多肽分子量的凝胶层析分析方法353.3.4酶解最佳工艺条件的研究35-363.3.5体外抑制S_(180)肿瘤、H_(22)肿瘤生长的研究方法36-373.4结果与讨

论37-493.4.1不同蛋白酶制备的多肽化学指标及分子量分析结果37-393.4.2木瓜蛋白酶最佳水解条件的确定39-413.4.3胃蛋白酶与细菌酸性蛋白酶双酶水解正交试验分析结果41-443.4.4不同酶解多肽抑制S_(180)肿瘤生长的结果44-463.4.5不同酶解多肽抑制H_(22)肿瘤生长的结果46-493.5本章小结49-51第四章小黑豆乳清蛋白及多肽的免疫实验研究51-564.1概述514.2试验材料与仪器514.3试验方法51-534.3.1动物分组和造型51-524.3.2免疫器官指数的测定524.3.3非特异性免疫指标-白细胞数量的测定524.3.4细胞免疫实验-迟发型变态反应52-534.3.5体液免疫实验-鸡红细胞做免疫原的血清溶血素测定法534.3.6统计分析534.4结果与讨论53-554.4.1小黑豆乳清蛋白及多肽对小鼠免疫器官及胰脏的影响53-544.4.2小黑豆乳清蛋白及多肽对小鼠非特异性免疫及特异性免疫的影响54-554.5本章小结55-56第五章小黑豆乳清蛋白及多肽的小鼠抗肿瘤实验研究56-675.1概述565.2试验材料与仪器56-575.2.1主要试剂与材料56-575.2.2实验动物及肿瘤细胞株575.3研究方法57-605.3.1小黑豆乳清蛋白抗S_(180)肿瘤的研究方法57-585.3.2黑豆乳清蛋白及多肽预防皮肤乳头瘤的研究方法58-595.3.3小黑豆乳清多肽对化学致肝癌前期病变的预防研究59-605.4结果与讨论60-665.4.1小黑豆乳清蛋白抗S_(180)肿瘤的作用研究结果60-615.4.2黑豆乳清蛋白及多肽对皮肤乳头瘤的预防作用61-625.4.3小黑豆乳清多肽对化学致肝癌前期病变的预防作用62-665.5本章小结66-67参考文献67-71攻读学位期间取得的成果71-72致谢72-73个人简况及联系方式73-75 本论文购买请联系页

小分子肽在高血压中的作用

小分子肽在高血压中的作用 摘要：心血管生物活性多肽是维持人体生命活动最重要的物质基础，它们在调节和整合心血管系统的生长发育及疾病的发生发展等方面均起到了重要的作用。小分子活性多肽是心血管活性多肽的一大类，具有分子量小（相对分子质量一般小于10000）、结构简单、组织分布广泛、生物效应多样、合成与代谢迅速和免疫原性低等特点，是心血管自稳态调节的最重要成分，其功能紊乱具有重要的发病学意义。高血压是最常见的心血管疾病之一，神经、体液因素网络调节异常和平衡失调以及心血管局部旁/自分泌功能紊乱是高血压病的发病基础，高血压发病过程中多种小分子活性肽参与其中，如肾素-血管紧张素系统（renin angiotensin system, RAS）、钠尿肽（natriuretic peptides，NPs）、内皮素等，以及新发现的Apelin、偶联因子6（Coupling Factor 6）等，形成复杂的网络调节系统，共同参与高血压的发生和发展。对小分子活性肽在高血压中作用的研究，可进一步认识高血压的发病机制，以小分子活性肽为靶点防治高血压可能具有广阔的临床应用前景。 近年心血管分子生物学、反向生理学、反向药理学和反向药物学以及孤儿G蛋白偶联受体策略的应用极大促进了心血管活性多肽的发现及其功能的研究，开拓了生物活性分子研究的新领。这些活性多肽大多都是小分子物质，称作小分子肽，是心血管自稳态调节的最重要成分，其功能紊乱具有重要的发病学意义。近年来，心血管活性多肽对高血压调节作用及在高血压发生机制及诊断、治疗和早期干预措施中的作用正被大家重视，其基础和临床研究不断取得新的进展，已成为当前生命科学研究中最活跃、发展最迅速的领域之一。本文将主要从最近几年在小分子活性肽的生物学效应、参与高血压发病的机理以及其在高血压中可能具有的临床应用等方面的研究作一论述。 一、肾素-血管紧张素体系（renin angiotensin system, RAS） 肾素-血管紧张素系统（renin angiotensin system, RAS）)是人体经典的循环调节系统，通过对心脏、血管、肾脏的调节维持机体水、电解质及血压的平衡，是人类生理功能的一个重要调节机制。它的过度激活是高血压和其他心血管疾病发展的重要决定因素，并因此成为高血压治疗的重要靶点。近年来发现组织中包括血管壁、心脏、中枢神经、肾皮质髓质中亦有肾素一血管紧张素系统，这又引申出新的RAAS的作用机制：局部组织性RAS，它在细胞中通过自分泌、旁分泌和胞分泌各自在其组织细胞发挥作用。随着近年来研究的深入，又发现了血管紧张素转换酶(ACE)的同族物——ACE2以及ACE的各种旁代谢产物如血管紧张素1-9(Angl-9)、血管紧张素1-7(Ang 1-7)以及Ang 1-7的受体Mas等，其中ACE2、Ang 1-7成为研究的热点，它们在血压调节中发挥着与ACE、AngⅡ相抗衡的作用，目前被看成是心血管系统保护因子。 Ang1-7是近年发现的Ang新成员，在ACE2、脯氨基内肽酶、中性肽酶等酶的作用下水解水解Ang II、Ang I产生，与G蛋白偶联Mas受体结合，从而形成ACE2-Ang(1-7)-Mas轴，拮抗传统RAS中关键轴ACE-Ang lI-AT1的生物学活性，在体内发挥广泛的生物学效应，如强大的利钠利尿作用，具有强大的舒张血管、抗细胞增殖等作用，以及增强缓激肽效应发挥降低血压的作用。新的RAS体系参与血压调控主要依赖于ACE与AngⅡ，ACE2与Ang(1-7)两条途径，一条起升压效应；另一条对抗前一路径，引起血压下降。ACE与ACE2一旦失衡，将使体内血压改变。在ACE2相对缺乏状态，AngⅡ作用占优势，导致血管收缩增强，引发高血压。 大量研究已表明，肾素-血管紧张素系统在高血压的发病以及高血压所引起的心脏和血管重塑等病理生理过程中发挥了重要的作用。心肌重塑是高血压最常见、最重要的并发症，它是导致多种心血管疾病独立的危险因子。最近发现，ACE2-Ang（1-7）-AT1轴在抑制心肌重塑方面发挥重要的作用。用慢病毒携带ACE2基因体内转染自发性高血压大鼠（SHR），ACE2基因

大豆肽的制备实验报告doc

大豆肽的制备实验报告 篇一：高中生物常规实验的总结 篇二：大豆豆粕及其多肽制备工艺 大豆豆粕及其多肽制备工艺 摘要阐述了大豆多肽的应用、发酵法制备大豆豆粕的特性，介绍豆粕蛋白直接发酵制备大豆多肽的方法，以供参考。 关键词大豆；豆粕；多肽；发酵法 大豆在提取豆油后可得到豆粕，豆粕是生产牲畜和家禽饲料的主要原料，或用于制作食品、化妆品、抗菌素。豆粕的价格变化很大，相关的产业链长，影响的范围也很广。美国和日本都在大豆豆粕的理论研究上有所突破。美国为了研究水解蛋白，成立了专门的研究机构和使用蛋白肽的工厂；日本在水解产物的去苦和水解工艺上有所进展。20世纪60年代，我国对大豆豆粕进行了研究，大豆豆粕作为新兴产业具有非常大的市场潜力。大豆豆粕很有可能成为我国绿色饲料的添加剂，从而代替饲料中的抗生素药物[1]。从大豆豆粕中提取的大豆多肽具有广泛的用途。 1大豆多肽的应用 1.1营养疗效食品 大豆多肽在食用时易于吸收，适合于病人(转自：小草范文网:大豆肽的制备实验报告)在大病初愈之后服用，有利于吸收和增强体质。为了符合老人的饮食习惯和心理，

用大豆多肽作基础再加上全脂奶粉和蜂蜜，就能做出适合老年人饮食用的奶粉[2-3]。 1.2普通食品 大豆多肽具有良好的吸湿和保湿功能，水溶性高，可改善豆类制品口感和风味，用延长糕点保质期，在酸性环境中具有发泡效果，可生产酸性饮料等[4-5]。 1.3运动员食品 恰当的活动影响和充沛的卵白质增补可增加运动员的肌肉量，从而可以提高运动员体内的能量。在此阶段里，供应消化吸收性优越的多肽作肌肉卵白质的原料会对运动员有一定的帮助。大豆多肽易于在活动中被吸收，延缓心理的压力，增强活力，有利于运动员补充体力[6]。 2发酵法制备大豆豆粕的特性 2.1理化特性 ，具有良好的溶解性，它 篇三：大豆肽制备及其营养功能研究进展 大豆肽的制备及其营养功能研究进展 Advancement of preparation of soybean peptide and its nutritional function 摘要：大豆肽是大豆蛋白水解后，由3～6个氨基酸残基组成的低肽混合物，分子量在1000 U以下。为了提高大豆蛋白资源的利用率，降低大豆肽的成本，本文综述了以

小分子肽多肽

百病本源——神奇的小分子肽（免疫球蛋白小分子肽） 益寿康免疫球蛋白小分子肽 配料表：胶原蛋白肽、牛初乳冻干粉、葡萄糖、安赛蜜、卵白蛋白 规格：75g（5g×15） 用量：请在医生的指导下服用。（温馨小提示：本品一定要用温水冲调，记着是温水哦） 本品每袋含免疫球蛋白1Gg 抗体含量560mg 免疫球蛋白来源于“黄金奶源带”的牛初乳中提取；牛初乳到加工车间加工过程不超过20分钟，以保证营养含量和抗体含量不流失。 胶原蛋白肽：胶原蛋白肽来源于深海鳕鱼身上提取的。是由胶原或明胶经蛋白酶降解处理后制成的一种胶原蛋白前体产品，比普通胶原蛋白分子量小，更易消化吸收。针对于人体衰老细胞分裂、衰竭、萎缩，微整形术后损伤、新细胞再生受阻、细胞生长变异、增生等多项细胞修复功能障碍问题研发的医生营养。 大量国内外研究证明，胶原蛋白肽具有多种功效，例如抑制血管紧张素转化酶活性，具有抗氧化活性，能消除自由基，减少膝关节或髋关节等骨关节炎患者的疼痛，增强骨密度，维持骨代谢平衡等。 益寿康免疫球蛋白中的肽是以小分子肽的形式出现。小分子肽又称寡肽，或称为低聚肽，一般由2～10个氨基酸组成，拥有很多独特的生物活性，是蛋白质结构的功能片断，在生物体内具有重要的生理功能，小分子肽可介导细胞与细胞、蛋白质与蛋白质、细胞与蛋白质及其他非肽类药物、蛋白调控因子与基因表达之间的相互作用。所以，小分子肽虽然在生物体中含量较少，但活性强、作用大，是细胞分化、识别、免疫、应激、衰老及分子进化等一切生命过程的参与者或调节因子。 小分子肽的优势： 抑制——抑制细胞变性，增强人体免疫力。 激活——激活细胞活性，有效清除对人体有害的自由基。 修复——修复人体变性细胞，改善细胞新陈代谢。 促进——促进、维持细胞正常平衡的新陈代谢。 A、四大优势 1.直接 直接吸收，不需要消化，直接作用于细胞，激活细胞活性，修复基因。 2.快速 快速吸收，如同针剂。主动吸收，运送营养。100%吸收，无排泄废物。 3.全面 调控人体八大系统，使人体器官达到最佳运转机制。 4.安全 与人体自身分泌的完全一样，对人体无任何毒副作用。 B、五大作用 作用一：健壮筋骨，预防风湿、类风湿、骨质疏松、松骨、骨膜、滑膜、关节等。 作用二：提高免疫力，预防白血病、白癜风、牛皮癣、甲亢、癌症等。 作用三：延缓机体衰老，恢复心、肝、肺、肾等脏器功能。 作用四：修复受损组织，包括胃肠粘膜、鼻粘膜、口腔粘膜、眼角膜、视网膜、虹膜等。 作用五:修复肝损伤，改善心脑血管、促进造血和代谢功能，调节内分泌，术后和化疗后体能恢复等。

膜分离工艺分离大豆多肽的特点

膜分离工艺分离大豆多肽的特点

大豆多肽是以豆粕或大豆分离蛋白为原料经蛋白酶水解、分离并精制而成的蛋白质水解产物。传统多肽的分离方法有吸附沉淀、溶媒、萃取、离子交换法等,这些工艺往往繁杂,提取时间长,消耗大量原料,能耗高,产品回收率低。 随着生物技术的发展和对大豆肽结构和功能研究的深入,对大豆 肽产品的分离研究也有了迅速发展,出现了许多高效的分离纯化技术 和手段。其中应用新的就是膜分离技术。膜分离技术是采用高分子膜以外界能量或化学位差为推动力,对双组分或多组分的溶质和溶剂进 行分离、分级、提纯和浓缩的技术。 目前,多种类型膜分离技术在生化产品应用中协同发展,超滤、纳滤、微滤技术联用,取长补短,实行多级分离是大豆多肽分离纯化的发展趋势。 膜分离工艺在大豆多肽中的特点： 1)在超滤膜分离过程中,膜的表面特性是膜的重要性质,料液的通量随时间而减小的趋势并不严重,操作20min后膜通量基本不下 降,50min后方下降26.5%。透过液中蛋白质的浓度随时间变化增大。 2)为保持较高的产品得率,超滤浓缩倍数应控制在4.5～5倍之间为宜。

3)膜分离工艺具有简单、产品得率高、质量好、运行费用低、投资不高等特点,可显著提高企业的经济效益和产品的市场竞争力。 德兰梅勒利用膜分离技术为生物制药、食品饮料、发酵行业、农产品深加工、植物提取、石油石化、环保水处理、空气除尘、化工等行业提供分离、纯化、浓缩的综合解决方案，满足不同客户的高度差异化需求。帮助客户进行生产工艺的上下游技术整合与创新，帮助企业节省投资、降低运行费用、减少单位消耗、提供产品质量、清洁生产环境，助力企业产业升级。

美极客小分子肽-徐老师

美极客小分子肽-徐老师 要想知道获得健康，那么就要知道人类为什么会生病，是吗？从根源找起。徐老师微信：746894458我们人体是由什么组成的？细胞对吗？那么我们人类就不该有成千上万种病，而是只有一种病，那就是细胞故障，我们的细胞生病了为什么我们的细胞会生病呢？细胞得不到需要的营养，因为我闷偏食，喜欢的就拼命吃，不喜欢得一口不吃，又因为平时我们吃的东西都含有一定得毒素，时间一长造成了毒素超载，从而细胞就生病了了！我们身体的毒素只有20%通过排便系统排出来的。剩下得80%都将进入我们得血液里，最后导致疾病，那么得病了怎么办？ 世界卫生组织告诉我们说，治愈疾病的最有效的途径就是修复细胞，改善细胞，激活细胞，如何做到这些呢，那就是要补充能够合成肽的物质，叫做活性肽。徐老师微信：746894458什么是肽？肽是两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物，是介于大分子蛋白质和氨基酸之间的一段最具活性、最易吸收、生理功能效价高的一种崭新营养。分子量段在5000~180之间的才能称为“肽”。分子量段在5000~3000之间的肽称为“大肽”；分子量段在3000~1000之间的肽称为“多肽”，分子量段在1000~180之间的称为“小肽”、“寡肽”、“低聚肽”，也称为小分子活性多肽，一般由

2~6个氨基酸组成。生物学家将肽称为“氨基酸链”，将小分子活性多肽统称为“生物活性肽”。“酶法多肽”是生物活性肽中一类具有极强活性和多样性，具有天然绿色食品属性，功效营养成份最完整的小分子活性肽。到现在，人们已发现100多种存在于人体的肽，对于多肽的研究和利用，在世界范围内已经出现了一个空前的繁荣景象。肽的特点就是直接吸收不需要经过肠胃消化，第二就是快速吸收，喝下去5-10分钟就进入我们所有器官血液，徐老师微信：746894458肽是构成人体细胞的基本材料，人体的一切活性物质都是以肽的形式存在，没有肽生命就会停止。科学家研究发现，30岁以后，活性肽在体内的分泌量会逐渐下降，尤其是生存环境的破坏以及不健康的生活方式导致现代人严重缺肽，缺肽会导致细胞逐渐萎缩，分裂减缓，并失去原有的活力，这时组织器管慢慢萎缩，功能渐渐退化，身体开始快速衰老并且疾病丛生。人体各个领域，包括激素，神经，生殖及细胞的更新，代谢，生长，修复，以及各个器官和细胞得生理功能都有肽的参与，所以我们要健康就要立刻补肽，是不是，很多运动员或者健美人士都知道要补蛋白质，所以去喝那些桶装蛋白质粉，其实他们不知道直接喝蛋白质作用不是很大，为什么呢？第一就是液体蛋白，人体分解它的能力很弱，第二呢，液体蛋白遇酸就会变性，而我闷得胃是不是酸性的，所以大多数的蛋白质都被破坏了！而只有小分

大豆小分子肽详细介绍

大豆多肽 大豆多肽(soy peptide) ,即肽基大豆蛋白水解产物( peptide - based soy protein hydroly-sate)的简称。它来源于大豆蛋白质的酶解产物，是大豆蛋白质经蛋白酶作用后，再经特殊处理而得到的蛋白质水解产物。大豆中的蛋白质含量高，质量好，营养价值很高，与牛肉的营养价值大致相当。大豆蛋白质所含必需氨基酸种类全面，数量丰富,必需氨基酸模式(氨基酸比值)与人体需求较接近,消化率也较高。大豆多肽通常是由3~6个氨基酸组成的低肽混合物,相对分子质量分布以低于1000D的为主，主要出峰位置在相对分子量300 -700D范围内。其氨基酸的组成与大豆球蛋白十分相似，必需氨基酸的平衡良好,含量也很丰富,因此营养价值很高。 大豆多肽的特点 (一)黏度较低，溶解度较高 大豆蛋白的黏度随浓度的增加而显著增加。因此，大豆蛋白的浓度不能提得太高,超过13%就会形成凝胶状。若加工成酸性蛋白饮料时，pH值接近4.5左右(大豆蛋白的等电点)时就会产生沉淀。而大豆多肽则没有上述缺点。它的黏度较低而溶解度较高，这是因为水解物的分子量减小了；水解后产生了一些可离解的氨基和羧基基团,增加了水解物的亲水性。与大豆蛋白质相比，大豆多肽具有以下特点:①即使在高浓度时,其黏度较低:②在较宽的pH值范围内仍能保持溶解状态;③吸湿性与保湿性好。大豆多肽的这些性质有利于开发新产品。 (二)渗透压不高 大豆多肽溶液的渗透压的大小处于大豆蛋白与同一组成氨基酸混合物之间。当一种溶液的渗透压比体液高时,易使人体消化道周围组织细胞中的水分向胃肠腔内移动而出现腹泻。氨基酸类食品口服易发生这类问题。大豆多肽的渗透压比氨基酸的低得多。因此，大豆多肽可作为口服营养液使用。 (三)吸湿性，保湿性强 大豆多肽的吸湿性和保湿性比胶原蛋白多肽和丝蛋白多肽更强,这一特性非常适合于日 用化学工业用来配制护发膏及护发霜。 (四)能调节产品质构 大豆多肽具有抑制蛋白质形成凝胶的特性,可用来调整食品的硬度与质构。例如，水产品肉禽蛋白质及大豆蛋白质在加热时会形成凝胶，或面粉在形成面团时都会使质构变硬，如果添加一定量的大豆多肽,就会起到软化凝胶的作用。这一特性，可应用于火腿、香肠、鱼糕等高蛋白食品的软化。 大豆多肽的功能特性 大豆多肽即“多肽基大豆蛋白水解物"的简称,是大豆蛋白质经蛋白酶作用或微生物技术

设计一个制作抗小分子多肽单克隆抗体的流程

实验生物学考试 部门：研发姓名：王晓婧8．叶敏设计一个制作抗小分子多肽单克隆抗体的流程 用杂交瘤技术制备抗小分子多肽单克隆抗体的主要步骤如下（示意图见下图）： 1、获得免疫的B淋巴细胞 用此小分子多肽作为抗原注射进小鼠体内，使其淋巴细胞产生相应的抗体。对小鼠做三次免疫，并在取其脾脏的前三天做一次加强免疫，可使得到的抗体亲和力较好，此过程中不用分离脾脏中的B细胞和T细胞，因为与骨髓瘤融合的过程本身就是一个选择B细胞的过程。 取与免疫小鼠同系的小鼠的骨髓瘤细胞，可用不分泌型和酶缺陷型，现多用酶缺陷型，缺乏TK（胸腺嘧啶核苷激酶）和HGPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）。 2、融合 可用化学融合法和电融合法等。常用的化学融合剂为PEG（聚乙二醇），其分子量越大，融合率越高，但同时毒性也越强，故用作细胞融合剂的PEG一般选用分子量为4000及以下的，在pH8.0～pH8.8左右的碱性环境中。电融合用电脉冲，无毒且融合率也高。 3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基（培养基中加次黄嘌呤HyPoxanthine H，氨基喋呤Aminoopterin A及胸腺嘧啶Thymidine T）。在HAT 培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏TK和HGPRT，不能利用补救途径合成DNA，而只能利用谷酰胺与尿核苷酸单磷酸合成DNA，这一途径又被氨基喋呤所阻断，故不可避免的要死亡。 停用HAT培养基后，用HT培养基。未融合的B细胞和T细胞在正常培养的情况下都会自然消亡。 这样，只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了TK和HGPRT，并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能增殖。 4、筛选 在HA T培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此必须进行筛选。常用酶联免疫吸附测定（ELISA），筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞。 5、克隆化 对于检测抗体阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化，否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌

小分子肽电泳

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽 [日期：2007-02-13] 来源：[字体：大中小] SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽 第四军医大学学报2000年第21卷第6期 石继红赵永同王俊楼韩苇颜真张英起 摘要：目的 研究SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）显示小分子多肽的方法.方法观察不同方法处理的样品，上样量对电泳结果的影响及对分子量标准（M r2512～16949）进行直线回归分析.结果样品的不同处理条件未见有差异；在该实验系统条件下上样样品为每孔5～10μg较佳；分子量标准直线回归系数r=-0.962.结论样品处理方便；上样量少；在160 g·L-1 T，60 g·kg-1 C较低的丙烯酰胺含6 mol·L-1脲的分离胶中能够显示M r为2512的多肽，是 一种显示小分子多肽的较好方法. 关键词：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；肽；蛋白质 0引言

20世纪60年代Shapiro建立了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法之后，Weber，Glossmann和Douglas等人进行了多次改进，已显示出了在分离、鉴定和纯化蛋白质方面的优越性，但对于M r小于10000的蛋白质来说是无能为力的［1］. 20世纪80年代初Sch?gger等［2］应用脲分离蛋白质复合体亚单位的11种蛋白质，但分离效果不甚理想且重复性较差.之后他们又进行了系统地研究和摸索，能够分离较大M r范围内的蛋白质.随着生物技术的飞速发展和基因工程药物的大量涌现，具有高生物活性的小分子多肽的分离、纯化和鉴定已显得尤为突出.我们在进行基因工程药物的开发研制中，对SDS-PAGE方法进行了多次改进，在较低的丙烯酰胺浓度下取得了理想的结果.此法所需仪器简单，操作方便，重现性好，时间短，只需微克量的多肽便可显带且能迅速估计出其M r，值得进一步推广和利 用. 1材料和方法 1．1试剂和仪器SDS、脲、甘油、过硫酸铵均为分析纯，西安化学试剂厂出品；丙烯酰胺（分析纯）为汕头市光华化学厂产品；N，N′-甲叉双丙烯酰胺（分析纯）为浙江黄岩人民化工厂生产；tris（分析纯）为成都试剂厂出品；TEMED为BIO-RAD产品；Tricine(Ultra pure Grade)为Solon Ind产品. BIO-RAD小型垂直式电泳附件模具；FD-201 稳压稳流电泳仪（上海医用分析仪器厂）. 1．2肽分子质量标准肽分子质量标准的M r范围2512～16949为Pharmacia lKB 公司产品. 胸腺肽α1是美国加州圣马刁市赛生药品公司产品（商品名“ZADAXIN”），是一乙酰化的多肽，M r为3108，pI 3.8. 经Sephadex G-25柱去除所含的甘露醇，然后冷冻干 燥，用样品缓冲液配成所需样品. 1．3方法 1．3．1电泳贮存液的配制阳极缓冲液中Tris为0.2 mol·L-1用HCl调pH值至8.9.阴极缓冲液为0.1 mol·L-1的Tris，0.1 mol·L-1的Tricine和0.01 g·L-1的SDS溶液，其pH 值约为8.25. 胶缓冲液为3.0 mol·L-1的Tris和0.03 g·L-1的SDS，用HCl调pH值至8.4. 称取48 g丙烯酰胺和1.5 g N，N′-甲叉双丙烯酰胺溶于100 mL纯水中，溶解混匀后经4号滤纸过滤即得到495 g·L-1 T，30 g·kg-1 C的贮存液；称取46.5 g丙烯酰胺和3.0 g N，N′-甲叉双丙烯酰胺溶于100 mL纯水中，同样得到495 g·L-1 T，60 g·kg-1 C的贮存液（T 代表丙烯酰胺的总浓度，C代表交联度）.

小分子肽在抗衰老领域的应用

现代社会压力大、竞争强，很多人都会出现一些亚健康状态。人们长期身心压力过大，容易引起气血不足、情绪不稳定、失眠多梦、内分泌失调等各种疾病。随着大健康产业的发展，人们都知道了补苦瓜多肽就是补健康，但苦瓜多肽的应用有多广？您知道吗？ 其实，苦瓜多肽作为我们人体中的活性物质，有着不可替代的作用，它的应用很广泛。 想要改善亚健康需要足够的免疫力，而小分子活性苦瓜多肽富含多种人体所需的氨基酸、维生素、微量元素，是增强免疫的首选。服用小分子活性苦瓜多肽后，营养足够，免疫力提高，再加上适度的体育锻炼，身体也能恢复到最佳状态。 苦瓜多肽与衰老 在我们皮肤的真皮组织中，70%-85%都是胶原蛋白。食用胶原蛋白苦瓜多肽，其独特的结构能强劲锁住水分，防止水分流失，让皮肤保持湿润、水嫩状态。胶原蛋白苦瓜多肽进入皮肤后，可修复断裂老化的弹力纤维网，使皮肤弹性恢复，减缓皮肤衰老。 高血压是常见的慢性病，也是引发心脑血管病主要的危险因素。高血压的本质是血管的硬化和弹性变差，小分子活性苦瓜多肽不需消化可直接被人体吸收利用，补充后可增强血管的弹性和心脏的收缩力，缓解高血压的症状，提升免疫力，修复身体受损组织。 苦瓜多肽与高血脂 苦瓜多肽分子量非常小，可以直接吸收，且吸收率非常高。进入身体后，苦瓜多肽会发挥自身作用，把更多血脂从组织器官运回肝脏，这样经过肝脏代谢后，多余的血脂就可以排出体外了。 苦瓜多肽与肝脏

小分子苦瓜多肽无需吸收，可直接渗透到肝细胞，刺激肝细胞，改善肝细胞的功能和活力，促进脂肪代谢运转，清除肝脏周围的脂肪，消除脂肪肝，减轻肝的代谢负担，发挥保肝作用。 苦瓜多肽与保健品和药物 苦瓜多肽既不是药，也不是保健品，既没有药物的毒性，也没有药物的副作用，苦瓜多肽是一种具有重要生物学功能的细胞营养物质。它是人体本身存在而且缺乏和需要的一种特殊物质。苦瓜多肽治病，也就是营养治病，它是以“调”、“补”来治病，治病时，不仅对人体没有任何的化学损伤和毒害，而且会补充人体缺乏的营养物质，以其生理功能治病并引起健康的连锁反应。用苦瓜多肽来调节人体，使人体臻于健康，将是划时代的大健康革命和全人类的福音。

多肽及小分子药物北京市重点实验室

四实验室简介四多肽及小分子药物北京市重点实验室 多肽及小分子药物北京市重点实验室2005年获北京市教委二北京市科委批准三在北京市和学校的大力支持下,依托化学生物学与药学院,取得了可喜的成绩,在2007年中期检查和2009年验收时均被评为优秀三本实验室针对血栓二肿瘤二骨质疏松和重金属中毒等疾病,研究多肽及小分子药物先导结构二筛选和发明候选药物,为普惠健康保障体系提供具有自主知识产权的抗/溶血栓二抗肿瘤二抗骨质疏松和排体内重金属的新药三同时,本实验室也向国内外科研机构和制药企业输送既懂药物设计二合成二鉴定,又懂药效学二药物毒理,以及机制研究的硕士和博士,形成本实验室的特色三 本实验室现有教授3名,博士生导师2名,副教授9名,平均年龄40岁,人员队伍结构合理三40岁以下骨干均有博士学位二留学经历二发表国外SCI论文经历和在研项目等,构成本重点实验室的4项优势三本实验室研究成果,自2005年以来共发表国外SCI论文113篇(IF=2~5),其中5篇受刊物邀请为封面文章发表三申请国家发明专利304项(授权152项,公开71项,申请81项),转让专利及技术6项,金额500余万;与企业联合培养人才3次,金额65万三 本实验室获省部级科技进步二等奖1项,获省部级高等教育教学二等奖2项三出版国内专著1部二2007年参编英文专著1章二2009年受美国Wiley出版社邀请,撰写英文专著‘Pharmaceutical Bioassay“,已全球发行三该专著被国外前40名高校中的12所学校,如Stanford二Cambridge等大学图书馆收藏三2012年受国外INTECH 出版社邀请,参编骨质疏松症专著三出版英文教材2部三 本实验室借助开放课题与中国台湾地区二欧美等地的制药企业与科研院所展开合作交流,共同发表SCI文章25篇三与台湾等3家制药企业联合培养人才,每年获经济效益100万元人民币三 重点实验室是人才培养的重要平台三本重点实验室与企业联合培养1名博士后,现已出站,1人在站三招收博士研究生30名,16人已获学位;招收硕士研究生188名,119人已获学位,本科生/高起专1600余人三已经构成每年培养6名博士二20名硕士和200名大学生的规模,为社会二国家单位和企业输送高水平人才三实验室目前有3300M2,并购置了各种相关的大型仪器,例如,计算机辅助药物设计的Discovery studio2.1和Cerius24.11的工作站二300二500二800MNMR等3台磁共振仪;ESR顺磁共振仪;ESI?MS?MS二MALDI?TOF二Q?TOF二FT?MS,以及ICP等6台质谱仪;UV二二极管阵列二荧光二蒸发光散射等各种检测器的高效液相色谱仪,以及制备型高效液相色谱仪;TEM二SEM二AFM等显微镜;骨密度仪等生物活性评价仪器,设备总值近9000万三

大豆多肽的加工工艺

大豆多肽的加工工艺 一、工艺流程 脱脂大豆粕T浸泡T磨浆分离T胶体磨T精滤T超滤T预处理T酶水解T 分离一脱苦、脱色一脱盐一杀菌一浓缩一干燥 二、工艺要点说明 超渺茫地生产大豆分离蛋白，用于生产大豆分离蛋白的原料必须是低变性的脱脂大豆粕，要经过弱大碱浸泡，磨浆分离、细磨、精滤和超滤得到一定浓度的大豆分离蛋白溶液，与传统的碱提酸沉法相比，该法获得的大豆分离蛋白溶液，可溶性糖分少，离子含量少，灰分少，是目前较为先进的生产大豆分离蛋白的方法。 1、预处理 因为大豆球蛋白分子具有相当紧密的结构，这种极其致密的结构对酶水解具 有很强的抵抗力，所以在酶解大豆蛋白时必须适当进行预处理，使其中的蛋白质复杂结构被打开而形成一条直链，那些原来在分子内部包藏而不易与酶发生作用的部位，由于分子结构的松散而暴露出来，从而使蛋白水解酶的作用点大大增加，加快了蛋白质的酶解，试验证明：在90°C下加热10min，既可防止大豆蛋白溶液粘度升高又可大大提高其水解度。 2、蛋白酶水解 为了确定最佳的酶解反应条件，我们固定反应时的pH值为7.5，以酶添加量、反应温度、反应时间及底物浓度为试验因素，各取三水平，以水解度DH为指标，选用L9 (34)正交表安排试验。实验证明：酶用量为E/S=4%，水解反应温度为45C，作用时间为12h和底物浓度为4%。 3、分离 该工序是通过调节蛋白酶解液的pH值为4.3，使未水解的蛋白质沉淀而去 除，而分离得到纯净的酸性水解物溶液，试验表明在最佳反应条件下，水解率可咼达95%o 4、脱苦、脱色 经分离后的大豆蛋白酶解物是低分子肽类和游离氨基酸混合物，并且其中的 带芳香侧链或长链烷基侧链的疏水性氨基酸的肽类是苦味肽，为了改善大豆多肽的口感和滋气味，必须除去苦味肽和游离氨基酸。本工艺采用活性碳吸附法来进行脱苦、脱色，最佳反应条件是碳液=1: 10，T=40C，Ph=3.0经处理后，口味得到明显改善，色泽透明澄清，达到令人满意的效果。 5、脱盐

小分子肽对运动的影响

小分子肽对运动能力的影响 2010人体一班张亮1041062 随着现今科学研究技术的发展，我们也越来越多的研究到了一些小分子物质。而小分子肽的研究在近两年也越来越多，其目前研究的主要功能有参与酶的合成，改善中间代谢，控制DNA的转录，合成特异蛋白等。本文将综述小分子肽在运动中的抗疲劳和抗氧化的作用。 关键词：小分子肽；运动能力；抗疲劳；抗氧化； 一：抗疲劳 研究表明，许多蛋白质水解产物具有多种生理活性的多肽多肽具有抗氧化、抗衰老、降血压、降血脂等多种生理功效。目前我国在大豆多肽的研究开发中主要研究多为大豆小分子多肽与生理功能的关系。[1] 疲劳是由运动引起机体一系列生化改变而导致的肌肉力量的降低。评价疲劳的方法包括耐力试验和生化指标的检测。耐力试验通过测定机体持续运动至力竭的时间可以反映机体的耐力。当肌肉剧烈运动时,机体内氧化作用大大加强,产生一系列氧自由基,可导致肌肉和肝脏中脂质过氧化产物增多而引起细胞或组织损伤,也是机体疲劳的原因之一。[3]通过对小鼠灌胃小分子肽，测定小鼠的力竭游泳时间以及耐缺氧能力的研究，发现大豆小分子肽(分子量300～700Da)的中、高剂量组小鼠负重游泳时间明显延长,高剂量组具有明显耐缺氧能力。并且高剂量组小鼠运动后血乳酸含量与对照组比较明显降低。肝糖原和血尿素氮含量与对照组比较差异无统计学意(P > 0.05)。而中、高剂量组的大鼠的血红细胞SOD 活力明显高于对照组(P < 0.05) ,而肝脏组织SOD酶活性有升高趋势,但差异无统计学意义(P > 0.05) [2]。说明小分子肽具有抗疲劳的能力。 二：抗氧化 我国目前对小分子肽研究的主要问题在于多肽与生理功能的关系，对抗氧化以及抗衰老的作用仅见体外实验报道。 目前一般认为，机体的衰老与自由基有很大的关系。机体在正常代谢过程中可以产生多种活性氧，如超氧阴离子（O 2-）、羟自由基(OH)、过氧化氢(H202)等，其中OH与机体中的多不饱和脂肪酸(LH)作用，可以产生LPO。LPO的最终化谢产物，如小分子的醛、酮等可以与生物大分子作用，使其失去生理功能，最终导致机体损伤。生物体内的抗氧化物酶，如SOD、GSH—Px可以清除活性氧，对生物体起保护作用，因此SOD、GSH—P活性大小，LPO浓度的高低可反映出机体被氧化损伤的程度。[4] 有关实验表明，大豆小分子肽可明显增加血红细胞(Hb)SOD、GSH—Px)活性，而对肝组织中二酶的活性却不明显，对MDA含量的抑制作用亦不明显。有关活性肽的抗氧化机制还不清楚，可能是通过加SOD、GSH—Px的活性，加快体内自由基的清除，从而抑制肝脏内过氧化脂质的二级分解产物MDA的含量，有利于保护细胞免受过氧化损伤，对自由基有关的疾病有一定的防治作用。但具体是哪种物质对抗氧化起主要作用，尚需进一步的研究。[4] 结论：大豆小分子多肽具有抗疲劳作用，其抗疲劳机制可能通过提高肝糖原的储备、降低血乳酸含量，通过增强 SOD 活性，抑制氧自由基的释放及提高免疫功能发挥抗疲劳作用。其抗疲劳机制的阐明为进一步开发利用奠定理论和实验基础。[5] 小分子肽的抗氧化作用机理可能有以下两大类型：(1) 小分子肽间接作用于自由基本身。具体又可以分为两种：①小分子肽直接作用于抗氧化酶。通过提高体内原有抗氧化酶如：SOD、GSH—Px等的活性，间接发挥抗氧化作用。②小分子肽络合产生活性氧所必需的金属离子。小分子肽结构中羟基可以与产·OH等自由基所必需的金属离子(如 Fe2+、 Cu2+

大豆多肽特性

大豆多肽特性及其应用现状 文章出处：中国食品添加剂发布时间：2006-03-26 大豆多肽特性及其应用现状 我国是大豆的故乡，在大豆蛋白利用方面有着悠久的历史，开发了很多大豆制豆。但由于其产品自身功能的一些缺陷使得它们的应用受到了很大的影响，如，大豆蛋白溶解度低，无法作为功能性成分在乳制品、饮料、糖果等食品体系中加以利用；又如大豆蛋白具有一定的抗原性，而且其消化率和生物效价远不及牛奶、鸡蛋等动物性蛋白。所有这些都大大限制了大豆蛋白的利用领域。为了改善大豆蛋白的功能特性，拓宽其应用领域，开发其潜力。因此提出了大豆蛋白水解，即大豆多肽的研究开发。大豆蛋白水解研究起始于上世纪60年代，当时采用酸、碱化学试剂在一定温度下促使蛋白质分子的肽链断裂形成小分子物质。由于酸、碱水解法存在许多不足之处，如营养成分损失、水解无特异性、副反应多、水解产物感官性能差等。因此这方面的研究进展缓慢。直到80年代酶化学的迅猛发展，美国、日本对于大豆蛋白的酶解工艺和酶解过程的感官特性、功能特性及营养价值改善的研究取得了较大的进展。随着大豆深加工产品功能食品在国外不断被开发出来。国内在这方面也进行了广泛的研究。 大豆多肽的功能特性 大豆肽是大豆蛋白经水解后，由3-6个氨基酸残基组成的低肽混合物，分子量为1000Dalton左右。大豆肽作为一种新的大豆制品之所以广受关注，主要是由于其众多的优良特性。 易消化吸收以及较好的营养特性 现代生物代谢研究表明，人类摄食蛋白质经消化管酶作用后，并不一定完全以游离氨基酸形式吸收，更多的是以低肽形式吸收，通过试验证实了低肽比氨基酸更易、更快被机体吸收利用，低肽的吸收率比氨基酸高，因而大豆多肽可以作为那些由通常饮食不能充分满足蛋白质营养需求的特殊条件的人员的食品。大豆多肽的氨基酸结构几乎完全与大豆蛋白一样，必需氨基酸平衡良好，含量丰富，即它保留了原蛋白的营养特性，而且通过蛋白质的改性作用消除了原蛋白中的一些营养抑制因子，这在一定程度上增加了它的吸收利用效率。高溶解度和低粘度大豆多肽作为食品原料的合适性在于其粘度和溶解度。大豆蛋白质的粘度随着浓度的增高而急剧升高，这是因为大豆蛋白溶液在浓度为10%以上时经高温处理，易于

微生物发酵肽的分离与提取

微生物发酵肽的分离与提取 豆粕发酵制备大豆肽的研究 院系：生科131 姓名：王博祥 学号：20130154119

目录 1大豆 (2) 1.1 大豆肽的功能特性 (2) 1.2 大豆肽的生产 (3) 2发酵大豆多肽及其功能研究 (3) 2.1材料 (3) 2.2方法及结果分析 (4) 3发酵法生产大豆肽的工艺 (5) 3．1 菌种及原料 (5) 3．2 发酵法基本工艺： (5) 3．2．1 工艺流程： (5) 3．2．2 步骤 (5) 3．3 发酵法生产大豆肽的特点 (6) 3．3．1 改善口感 (6) 3．3．2 原料的充分利用 (6) 3．3．3 降低大豆肽生产成本 (7) 4前景 (7) 5参考文献 (7)

摘要： 大豆肽是指将大豆蛋白水解成3 个氨基酸的多肽，分子量在1 000Da左右。以豆粕为原料。采用发酵法生产大豆肽，通过微生物作用对某些苦味肽基团进行修饰和重组，使小肤之间、小肽与氨基酸之间发生移接、重排．制得的大豆肽具有较好的生理特性和加工特性，克服了酶解法产品苦味大和1：2感差等缺点，产品广泛用于食品、医药工业。 关键词：大豆肽；发酵；大豆蛋白；蛋白酶 Study on Producing Sovbcan Peptides by Fermenting with Soybean Cake wangjianfu (Shenyang Agricultural University Land and Environment Institute，Liaoning Shenyang 110161) Abstract：Soybean peptides iS produced by hydrolyzing soybean protein into peptides with 3～6 amino acidresidues．Its molecular weight iS about 1 000 Da．During the process of producing soybean peptides with soybean concentration，microorgan isms can decorate an d recombine some structures of bitter peptides，SO the structures of peptides and between the peptides and amino acid residues wiI be changed and resetted ，and we can get soybean peptides with good functional properties and physiological activities．It conquers some defects，such as large bittemess and bad taste．The product Can be used in the fields of food an d medication． Key words：soybe aJ1 peptides；fermentation；soybean protein；proteolytic enzymes 1大豆 1.1 大豆肽的功能特性 大豆多肽是以大豆为基本原料．通过现代生物技术将大豆球蛋白转化为小分子肽。小分子大豆多肽不仅有很好的溶解性、低粘度、抗凝胶形成性，而且在体内消化吸收快．2～3个氨基酸组成的低肽比游离氨基酸有更好的吸收性能．能够完整地通过肠道吸收，作为生物活性肽在组织水平上引起机体的生物学效应。大豆肽蛋白质利用率高，还具有低抗原性．不会产生过敏反应。此外还具有能促