对照标准内毒素

内毒素（大肠杆菌0113：H10）

对照标准内毒素（CSE）

标准内毒素对照液可用于鲎试剂准备对照组或用于高温去热原研究。重组前存放在2-8℃。下面将会介绍高温去热原的使用方法。

注意：对照标准内毒素瓶看起来是空的。近距离检视，可见每只瓶内有网状内毒素。如果有任何关于制作和使用对照标准内毒素的问题，请联系CAPE GOD联合有限公司。

试验材料：

1.标准内毒素对照，0.5微克/瓶，（批号#E0005）

2.鲎试剂检测用水。用于注射或冲洗用（无菌）的无菌水或其他可用作鲎试剂检查用水的

水。（参见裂解物包装插页）。

3.刻度为5ml的一次性无菌吸管。

4.石蜡膜“M”?。（美国国家容器）

5.稀释管（用高温或无菌的去热原玻璃试管，一次性聚苯乙烯塑料）

*用鲎试剂试验对一次性用品进行内毒素杂质和干扰物（吸附和/或可萃取的）测试。

试验步骤：

1）去除金属瓶盖和瓶塞。

2）在瓶内注入鲎试剂检查用水。推荐使用体积为5ml.但不同体积可用于达到设计的存液浓度。

a.用吸管进行重组，先打开瓶塞混入足够空气打破真空，后去除瓶塞加入鲎试剂检查用水。

用石蜡膜封口。

3）剧烈摇晃试管一分钟，5-10分钟内移到室温下30-60分钟。

4）重组对照标准内毒素置于2-8℃下不超过四个星期。不能冷冻。

5）第一次稀释前摇晃对照标准内毒素30秒，然后制作适量的设计用浓度。此稀释液可用于三种存液浓度的十倍稀释液（用5ml重组时为100ng/ml）。连续两倍稀释液可用于检测鲎试剂敏感度或者为浊度法和显色基质法制作适当的稀释液。稀释过程中需振荡。效价

给定的对照标准内毒素的效价由特定批次的鲎试剂与最近美国食品与药品管理局和美国药典的参照标准内毒素测定。效价是用来转换对照标准内毒素单位ng/ml 到EU/ml.可参见CAPE GOD联合有限公司的效价试验证明。详见顾客服务和网址https://www.wendangku.net/doc/682432284.html,.提出要求时请提供对照标准内毒素和鲎试剂检测试剂的产品批号。

有效去热原指导方法

推荐使用两种方法使用对照标准内毒素，批号E0005和E0125，来指导去热原步骤。以下是AB两种方法（重组或去除）。

方法A

1)去除每只瓶标签、金属锯齿封口和瓶塞，用双层铝锡泊纸封住瓶口。

2)留至少两只瓶做为阳性对照组。

3)放置供试瓶到高温炉中备用有效性测试。

4)在去热原的最后阶段，收集好瓶子用于试验。

5)根据插页的背面指导方法进行重组过程和对照。

6)根据插页，检测所有未知瓶子，包括溶解物。

7)计算出对照组合试验组的内毒素减少率（用对照组浓度除以实验组浓度）。若算出的值

是1000或大于1000，那加热器达到了3-log或者是更多的减少。

方法B

1)根据页面背后的步骤重组一只瓶子

2)加入极少剂量的对照标准内毒素稀释液到材料中用于去热原。加入大量备用试剂至

少去除3log.考虑任何稀释液加入到恢复增加的内毒素和任何没有吸收的内毒素此容器中。至少包含两只恢复对照组。

3)将材料根据步骤去热原

4)用最小剂量的鲎试剂检查用水从材料中恢复对照标准内毒素。

5)照上法测试鲎试剂检查用水。

6)照A法中的第七步计算出内毒素的减少量。

**注意：去热原的步骤和有效性已经发表在一些论文中，部分可见文献参考。

细菌内毒素

细菌内毒素检查法 一、细菌内毒素检查法的定义： ●本法是利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝聚反应的机理，以判断供试品中的细菌内毒素限度是否符合规定的一种方法。 二、背景介绍： ●1、细菌内毒素 ●2、热原 ●3、鲎 1、细菌内毒素 ●细菌内毒素是一种革兰氏阴性细菌细胞壁的产物，当其死亡或菌体裂解时释放出的一类具有多种生物活性的毒性物质 特性： ●（1）.致热性：内毒素作用人体细胞，使之释放内源性热原，刺激下丘脑体温调节中枢，引起发热反应。 ●（2）.耐热性：需250度干热30分钟才能彻底灭活。 ●（3）.分子极性：多糖链亲水，脂肪链疏水，在水中呈不均匀分布。 ●（4）.鲎反应：能与鲎试剂发生多级酶促反应，形成凝胶。 2、热原 2.1热原是指临床上引起哺乳动物发热反应的物质 2.2 细胞分裂素（IL-1, IL-2, IL-6, IL-8 ） 内源性热原｛ 产生细胞分裂素的物质 内毒素热原 外源性热原｛非内毒素热原（病毒、细菌、真 菌、抗体-抗原复合物、细胞分裂素） 2.3热原和内毒素的关系： 2.3.1热原是否就是内毒素？ 在学术上仍有争议，热原不仅是细菌内毒素。但在药检的范畴，细菌内毒素是主要的热原物质，可以说无内毒素就无热原，控制内毒素就是控制热原。 3、鲎 3.1鲎(horseshoe crab)是一类与三叶虫(现在只有化石)一样古老的动物。鲎的祖先出现在地质历史时期古生代的泥盆纪，当时恐龙尚未崛起，原始鱼类刚刚问世，随着时间的推移，与它同时代的动物或者进化、或者灭绝，而惟独只有鲎从4 亿多年前问世至今仍保留其原始而古老的相貌，所以鲎有―活化石‖之称。又具有很高的药用价值。 3.2鲎试剂 鲎的血液中含有铜离子，它的血液是蓝色的。鲎血液颜色呈蓝色，是因为鲎血浆的主要成分是血蓝蛋白。这种蓝色血液的提取物——―鲎试剂‖。鲎试剂是由海洋生物鲎的血液提取物制成的―鲎试剂‖，能够准确、快速地检测人体是否因细菌感染而致病；鲎试剂在制药行业中，用于检测细菌内毒素。目前使用的鲎试剂分为美洲鲎试剂和东方鲎鲎试剂两大类。

中华人民共和国国家标准细菌内毒素检测方法

医用输液、输血、注射器具细菌内毒素检验方法 中华人民共和国国家标准 GB/T14233.2—93 1993-03-16发布 一、定义及适用范围:本法系列用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应 的机理，以判断供试品中内毒素限量是否符合规定的一种方法。 用以代替家兔法对供试品进行热原初试。本法仅适用于一次性使用输液器、输血器。其他产品可参照使用。 二、主要设备:超净工作台、电热干燥箱、恒温水浴。 三、试剂 1、细菌内毒素国家标准品：用于仲裁鲎试剂灵敏度和试验中阳性对照。 2、细菌内毒素工作标准品：用于标定鲎试剂灵敏度和试验中阳性对照。 3、鲎试剂：灵敏度为0.25EU/ml，规格为0.5ml。 4、无热原水：内毒素含量小于0.05EU/ml。 四、试验前准备 1、器具除热原:与试验液接触的所有器具均应除热原。玻璃器具置电热干燥箱内250℃干烤至少60min；塑料器具置30%双氧水中浸泡 4h，再用无热原水冲洗后于60℃烘干备用。 2、鲎试剂灵敏度测定 （1）试验前应核对使用批号鲎试剂的灵敏度，应符合规定。 （2）灵敏度测定：根据标示的灵敏度范围，将细菌内毒素工作 标准品用无热原水以1→2等比稀释，选择能出现阳性和阴性结果的4个连续稀释液。取同一批号鲎试剂若干支，分别按标示量

加入无热原水溶解为鲎试剂溶解液。取10mm×75mm试管若干 支，分别加入0.1ml鲎试剂溶解液，加入内毒素稀释液0.1ml，每一稀释液平行操作4管，轻轻振动试管混匀内容物，封闭管 口，置37±1℃恒温水浴中保温60±2min观察结果。最高浓度的4管应均为阳性，最低浓度的4管应为阴性。 五、试验方法 1、供试品数量 :同一批号至少3个单位供试品。 2、浸提介质:无热原水。 3、供试液制备:在无菌条件下，每套输液器内腔注入10ml，输血器内腔注入15ml浸提介质，反复荡洗5次后两端密封，置37±1℃恒温箱中保温2h，取出后将供试液汇集至一无热原具塞玻璃容器内。供试液贮存应不超过2h。 4、试验步骤:将鲎试剂和细菌内毒素工作标准品分别按标示量加入无热原水溶解。细菌内毒素工作标准品逐次稀释至0.5Eu/ml，供作阳性对热。取10mm×75mm试管6支，其中供试品管2支各加入0.1ml 内毒素工作标准品稀释液，阴性对照管2支各加入0.1ml无热原水，阳性对照管2支各加入0.1ml内毒素工作标准品稀释液，再逐一加入0.1ml鲎试剂溶解液。轻轻混匀试管内容物，封闭管口，垂直放入37±1℃水浴中保温60±2min，轻轻取出，观察结果。 5、结果判定 1)、将试管缓慢倒转180°，管内容物呈坚实凝胶者为阳性，记录为（+），不呈凝胶状或虽呈凝胶状但不能保持完整者为阴性，记录为（-）。

粗糙度对比Ra、Rz、RMS、国内外标准对照

表面粗糙度高度参数有3种： 1.轮廓算数平均偏差： 轮廓算数平均偏差Ra是指在取样长度L内，被测轮廓上各点到基准线的距离Yi的绝对值的算数平均平均值。 2.微观不平度十点高度： 微观不平度十点高度Rz是指在取样长度L内，被测轮廓上五个最大轮廓峰高Ypi的平均值与五个最大轮廓谷底Yvi的平均值之和。 3.轮廓最大高度： 轮廓最大高度Ry是指在取样长度L内，被测轮廓的峰顶线与轮谷线之间的距离。 表征微观不平度高度特性的评定参数Ra、Rz、Ry的数值愈大则表面越粗糙。 在高度评定参数中，Ra的概念颇为直观，Ra值反应实际轮廓微观几何形状特性的信息量最大，且Ra值用触针式电动轮廓仪测量比较容易。因此对于光滑表面和半光滑表面，普遍采用Ra作为评定参数。但受测量仪器的限制，极光滑和极粗糙的表面不能用Ra评定。 评定参数Rz的概念较为直观，Rz值通常用非接触式的光切显微镜测量。但Rz值只反应取样长度内峰高和谷底的十个点，不能反应峰顶的尖锐和平顿的几何形状特性，因此Rz值不如Ra值反应得微观几何形状特性全面。 评定参数Ry的概念简单，Ry值得测量方便，但Ry值不及Rz、Ra值反应的微观几何形状特性全面。Ry值与Ra、Rz值连用控制微观不平度的谷深用来评定某些不允许出现较大加工痕迹和受交变应力作用的表面。 RMS值实际就是有效值，就是一组统计数据的平方的平均值的平方根。 因为RMS系统是英制单位 一般的有： RMS*25.4/1000=RA 举例: RMS64 = 64*25.4/1000= RA 1.6 几个常用的如下: RMS250 = RA6.4 RMS125 = RA3.2 RMS64 = RA1.6 RMS32 = RA0.8 表面粗糙度外国与中国标准对照 N1－－0.025um；N2－－0.05um；N3－－0.1um； N4－－0.2um；N5－－0.4um；N6－－0.8um； N7－－1.6um；N8－－3.2um；N9－－6.3um； N10－－12.5um；N11－－25um； 日本表面粗糙度的老标准。 对应关系：

细菌内毒素检查标准操作规程..

细菌内毒素检查标准操作规程 1 简述 1.1 本规范适用于中国药典2005年版附录中细菌内毒素检查法一凝胶法和光度测定法。后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行实验。当 测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。 1.2 供试品细菌毒素限值的确定。 （一）药典中有规定的，按供试品各论中规定限值； （二）尚无标准规定的，按以下公式确定供试品内毒素限值： L=K/M 式中 L为供试品的细菌内毒素限值，以EU/ml、EU/mg、EU/U表示。 K为按规定的给药途径，人用每公斤体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/kg/h表示。其中注射剂，K=5EU/kg/h；放射性药品注射剂，K=2.5EU/kg/h；鞘内用注射剂， K=0.2EU/kg/h。 M为人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量，以ml/kg/h、ml/kg/h、U/kg/h表示。药品人用最大剂量可参阅国家批准的药品说明书和《临床用药须知》等权威著作，中国人 均体重按60kg计算，注射时间小于1小时的按1小时计。按人用剂量计算限值时，如遇特殊情况，可根据生产和临床用实际情况做必要调整，但需说明理由。 1.3 供试品最大有效稀释倍数的确定 供试品的最大有效稀释倍数（MV D）按下式计算： MV D=C?L/λ L为供试品的细菌内毒素限值；C为供试品溶液的浓度。当L以EU/ml表示时，C等于1.0ml/ml；当L的单位以EU/mg或EU/U表示时，C为供试品制备成溶液后的浓度，单位为mg/ml 或U/ml。如供试品为注射用无菌粉末或原料药，则MV D取1，可计算供试品的最小有效稀释浓度C: λ/L。

国内外汽油标准对比

我国汽油标准与国外汽油标准的对比 目前国际上较为先进的汽油质量标准分为美、欧、日、《世界燃油规范》四大标准体系。其中，欧盟汽油标准和《世界燃油规范》最具影响力，被许多国家引用。 1.欧盟汽油标准 EN 228汽油质量标准是欧洲统一实施的汽油标准。EN 228标准主要由两部分组成,第一部分限定了密度、辛烷值以及硫含量、苯含量等指标的最大值。第二部分根据气候和季节将汽油的挥发性划分成不同的等级，分别执行。由于欧洲国家较多，具体情况差别较大，因此欧洲一些先进国家在满足欧洲统一法规的大前提下，又制定了符合自己国情的实施标准。 为了进一步降低汽车污染物的排放， EN 228-2002汽油质量标准（与欧Ⅲ排放法规相对应），将汽油硫含量降到150μg/g、芳烃含量降到42%、要求苯含量不大于1.0%，铅含量不大于5 mg/L，并对各种氧化物的含量加以限制。2005年，欧洲将开始执行欧Ⅳ排放标准，将清洁汽油中的硫含量降为50μg/g，芳烃、苯、烯烃含量分别降为35%、1.0% 和18%。2007年10月1日起推行无硫汽油(欧Ⅴ排放标准)，使硫含量低于10μg/g，并出台了EN 228-2008汽油质量标准，于2009年1月1日开始强制执行，该标准为最新的欧盟汽油标准。欧盟汽油规格主要指标的变化见表1。 2. 《世界燃油规范》 《世界燃油规范》是美国汽车制造商协会（AAMA）、欧洲汽车制造商协会（ACEA）、日本汽车制造商协会（JAMA）根据所属的30个汽车公司的研究成果联合发表的，主要是汽车制造商和发动机制造商针对环保要求，对汽车燃料提出的基本要求。世界燃油规范要求清洁汽油降低硫含量，减少尾气中SO x的排放，抑制尾气转化器中催化剂中毒；降低烯烃含量，避免发动机进油系统和喷嘴堵塞，减少发动机进气阀和燃烧室中生成沉积物，减少汽车尾气中1,3－丁二烯的排放，避免汽油辛烷值分布不均；降低苯和芳烃含量，减少致癌物；降低蒸汽压和T90，减少挥发性有机化合物（VOC）、毒物（TOX）的排放；提高辛烷值，提高汽车动力性能，减少污染物的排放。 2006年9月，世界燃油规范进行了第四次修订，将无铅汽油标准划分为四类：

常用国内外材料的标准及牌号对照

一. 常用国内外紧固件材料的标准及牌号对照 表<-> 钢中国GB 美国ASTM 德国DIN 日本工业JIS 英国BS 种标准种类代号标准种类代号标准种类代号牌号标准种类代号标准种类代号A194 Gr.1 Gr.2 GB669 45 Gr.2H G4051 S43C 4882 Gr.2H S45C Gr.2HM GB669 35 A307 Gr.A G3101 SS4l 5708 SS41 碳 素GB669 20 Gr．B G4051 S20C 1769 钢GB669 25 S25C GB669 30 A325 1 型1654 Cq85 1.1172 CG4051 S33C 8189 2 型 3A型 3B型 3C型 3D型 3E型 3F 型 YB6 1Cr5Mo A193 Gr．B5 G4107 SNB5 Gr．B6 GBl220 1Crl3 Gr．B6X 17440 X15Crl3 1.4024 4882 Gr．B6 GB307735CrMOA A193 Gr．B7 17200 42CrMo4 1.7225 G4107 SNB7 4882 Gr．B7 合 金 Gr．B7M 钢 和 YB6 15CrM01V Gr．B16 17240 21CrMoV57 1.7709 SNBl6 Gr．B16 不 GBl220 0Crl8Ni9 GL B8 17440 X5CrNi189 1.4301 G4303 SUS-304 GL.B8 锈 钢 Gr．B8A GBl220 1Crl8NillNb Gr．B8C X10CrNiNbl89 1.4550 SUS-347 Gr.B8C Gr．B8CA GBl220 0C17Nil2M02 Gr．B8M X5CrNiMo1810 l.4401 SUS-316 Gr.B8M Gr．B8MA Gr．B8N Gr.B8NA

2019质量环境职业健康安全管理体系标准条款对照表

质量、环境、职业健康安全管理体系标准对照表(Q)GB/T19001-2016（质量）(E)GB/T24001-20016（环境）ISO45001-2018（职业健康安全）标准内容标准内容标准内容 1、2范围、规范性引用文件1、2范围、规范性引用文件1、2范围、规范性引用文件 3术语和定义3术语和定义3术语和定义 4组织环境4组织所处的环境4组织环境 4.1理解组织及其环境 4.2理解相关方的需求和期望4.3确定质量管理的范围 4.4质量管理体系及其过程4.1理解组织及其所处的环境 4.2理解相关方的需求和期望 4.3确定环境管理体系的范围 4.4环境管理体系 4.1理解组织及其环境 4.2理解员工及其他相关方的需求和 期望 4.3确定职业健康安全管理体系的范 围 4.4职业健康安全管理体系 5领导作用5领导作用5领导作用与员工参与

(Q)GB/T19001-2016（质量）(E)GB/T24001-20016（环境）ISO45001-2018（职业健康安全） 5.1领导作用和承诺 5.1.1总则； 5.1.2以顾客为关注焦点 5.2方针 5.2.1制定质量方针； 5.2.2沟通质量方针 5.3组织的岗位、职责和权限5.1领导作用与承诺 5.2环境方针 5.3组织的角色、职责和权限 5,1领导作用与承诺 5.2职业健康安全方针 5.3组织的岗位、职责和权限 5.4员工协商和参与 6策划6策划6策划 6.1应对风险和机遇的措施6.2质量目标及实现的策划6.3变更的策划6.1应对风险和机遇的措施 6.1.1总则； 6.1.2环境因素； 6.1.3合规义务； 6.1.4措施策划 6.1应对风险和机遇的措施 6.1.1总则 6.1.2危险源辨识及风险和机遇评估 6.1.2.1危险源辨识 6.1.2.2职业健康安全风险和其它职

QCB细菌内毒素工作标准品标定操作规程

QCB细菌内毒素工作标准品标定操作规程

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标题： 1.目的 2.范围 3.职责 4.参考资 料 5.定义 6.细菌内 毒素工 作标准 品效价 的标定标题：正文 规范细菌内毒素工作标准品效价的标定程序，确保细菌内毒素检查结果的可靠性。 适用于质监处药理室对细菌内毒素工作标准品效价的标定。 质监处药理室分析人员负责本规程的实施和完成相关记录。 USP版附录85； CP版附录Ⅺ E 。 细菌内毒素检查法：本法系利用从鲎的变形细胞中提取的试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的含量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。 鲎试剂：是鲎变形细胞的溶出物经提取而成。 鲎试剂灵敏度：在本检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度，用EU/ml表示。 细菌内毒素检查用水(BET水)：系指与灵敏度为0.03EU/ml 或更高灵敏度的鲎试剂在37±1 ?C 条件下24小时不产生凝集反应的灭菌注射用水。 细菌内毒素参考标准品(RSE)：RSE 是USP细菌内毒素参考标准品，每瓶有10,000个USP 内毒素单位。 细菌内毒素工作标准品(CSE)：是除RSE 之外的内毒素标准品。 反应终点浓度：是指系列递减的内毒素浓度中最后一个呈现阳性结果的浓度。 一、试剂、材料与仪器设备 试剂： 鲎试剂批号、灵敏度、规格、生产商。 细菌内毒素检查用水(BET水) 批号、规格、生产商。 细菌内毒素工作标准品(CSE) 批号、效价、生产商。 细菌内毒素参考标准品(RSE) 批号、效价、生产商。 材料及仪器设备： 电热恒温水箱型号、设备编号。 电热鼓风干燥箱型号、设备编号。 正文 漩涡混合器型号。 无热原试管规格：10?75mm。 无热原玻璃瓶规格：25ml。 无热原玻璃吸管规格：1ml、2ml、5ml、10ml。

国内外标准对应表

标准号标准名称标准号标准名称 GB 9706.1-2007 (IEC 60601-1:1988+A1:1991+A2:1995,IDT) 医用电气设备第1部分：安全通用 要求 IEC 60601-1：2005 Medical electrical equipment - Part 1: General requirements for basic safety and essential performance GB 9706.15:-2008 (IEC 60601-1-1:2000,IDT) 医用电气设备第1-1部分：安全通用 要求并列标准：医用电气系统安全要 求 IEC 60601-1-1:2000 Medical electrical equipment - Part 1-1: General requirements for safety - Collateral standard: Safety requirements for medical electrical systems YY 0505:2005 (IEC 60601-1-2:2001,IDT) 医用电气设备第1-2部分：安全通用 要求并列标准：电磁兼容要求和试验 IEC 60601-1-2:2007 Medical electrical equipment - Part 1-2: General requirements for basic safety and essential performance - Collateral standard: Electromagnetic compatibility - Requirements and tests GB 9706.12-1997 (IEC 60601-1-3:1994,IDT) 医用电气设备第一部分：安全通用 要求三、并列标准：诊断X射线设 备辐射防护通用要求 IEC 60601-1-3：2008 Medical electrical equipment - Part 1-3: General requirements for basic safety and essential performance - Collateral Standard: Radiation protection in diagnostic X-ray equipment YY/T 0708-2009 (IEC 60601-1-4:2000,IDT) 医用电气设备第1-4部分：安全通用 要求并列标准：可编程医用电气系统 IEC 60601-1-4：2000 Medical electrical equipment - Part 1-4: General requirements for safety - Collateral Standard: Programmable electrical medical systems / / IEC 60601-1-6:2010 Medical electrical equipment -

细菌内毒素检测标准操作

细菌内毒素检测（凝胶法）标准操作 目的：规范细菌内毒素的检测操作，保证细胞质量。 范围：适用于所有从治疗中心发放的细胞（包括CIK、DC、干细胞等）内毒素限量检测。 责任人：质量检测人员 材料： 一、电热干燥箱除外源性内毒素用，温度应能达到180℃。 二、恒温水浴箱或适宜的恒温器（37℃±1℃）。 三、水银温度计，精度在1℃以下，量程不小于50℃。 四、旋涡混合器。 五、可调式移液器 六、0.25EU/ml鲎试剂。 七、细菌内毒素工作品。 八、凝胶法细菌内毒素检查用水。 九、实验用具无热原吸头（1000μl、200μl）、带铝盖的凝集管（10mm×75mm）、试管架、计时器、75%酒精棉球、封口膜、剪刀、镊子、砂轮。所用玻璃器皿使用前须经250℃干烤至少1小时或180℃干烤至少4小时。 操作方法 一、取样 1、细胞发放前3天，取细胞培养液约2ml，分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右，如不立即试验4℃存放（可存放多长时间）。 2、细胞发放当天，取细胞生理盐水混悬液约2ml，分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右，如不立即试验4℃存放。（可存放多长时间）。 3、取样应以无菌操作技术取样，所用器材在使用前应无热原或已去除热原。 二、鲎试剂灵敏度复核 鲎试剂灵敏度复核的目的是考察鲎试剂的灵敏度是否正确、考察检验人员操作方法是否正确及实验条件是否符合规定。 在使用一批新的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进

行鲎试剂灵敏度复核实验。 （一）实验操作 1、细菌内毒素工作品溶液的制备 取细菌内毒素工作品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，开启过程中应防止玻璃屑落入瓶内。 按照工作品说明书，加入规定量的细菌内毒素检查用水溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严，置旋涡混合器上混合15分钟。然后用倍倍稀释方式进行稀释，即0.5ml各浓度工作品溶液+0.5ml检查用水（以下稀释方式同此法），制备成4个浓度的细菌内毒素标准溶液，即2.0λ、0.5λ、0.25λ（λ为所复核的鲎试剂的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟。 2、待复核鲎试剂的准备 取0.1ml/支的鲎试剂18支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内。每支加入0.1ml检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解，避免产生气泡。若待复核鲎试剂的规格不是0.1ml/支时，取若干支按其标示量加入检查用水复溶，充分溶解后将鲎试剂溶液混合在一起，然后每0.1 ml分装到10mm×75mm凝集管中，要求至少分装18管备用。 3、加样 将已充分溶解的待复核鲎试剂18支（管）放在试管架上，排成5列，其中4列4支（管），1列2支（管）。4支（管）4列每列每支分别加入0.1ml的2λ、λ、0.5λ和0.25λ的内毒素标准溶液；另2支（管）加入0.1ml检查用水。 4、加样结束后，将鲎试剂用封口膜封口，轻轻振动混匀，避免产生气泡，连同试管架放入37℃±1℃水浴或适宜恒温器中，试管架保持水平状态，保温60±2分钟。 5、观察并记录结果。将试管架从水浴或适宜恒温器中轻轻取出，避免振动，将每管拿出缓缓倒转180°观察，管内形成凝胶，并且凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为（＋）；未形成凝胶或凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记录为（－）。 （二）实验结果计算

细菌内毒素标准品标定

1.试剂和样品 鲎试剂（生产厂家：湛江安度斯生物有限公司，批号：1112202，灵敏度：0.125EU/ml， 规格：0.1 ml/支） 细菌内毒素检查用水（生产厂家：湛江安度斯生物有限公司，批号：1106130， 规格：5 ml/支） 细菌内毒素工作标准品（P=160EU/支，生产厂家：中国药品生物制品检定所 批号：150601-201174） 细菌内毒素国家标准品（10000 EU/支，生产厂家：中国药品生物制品检定所 批号：150600-200707） 2.操作步骤 2.1细菌内毒素国家标准品稀释、细毒内毒素工作标准品稀释 将细菌内毒素国家标准品用1ml细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合仪上混合15分钟，然后制备成4个浓度的标准内毒素溶液，即0.25 EU/ml、0.125 EU/ml、0.0625 EU/ml和0.03 EU/ml备用，每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。具体稀释步骤如下： 10000 8.12.010 8.1 2.01 5.1 5.00.25 1 10.125 1 10.0625 1 10.03 待复核的细菌内毒素工作标准品标示效价为160 EU，用1ml细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合仪上混合15分钟，然后制备成4个浓度的内毒素溶液，即640倍（0.25 EU/ml）、1280倍（0.125 EU/ml）、2560倍（0.0625 EU/ml）和5120倍（0.03 EU/ml）备用，每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。具体稀释步骤如下： 160 8.12.016 5.0 5.08 4.1 2.01 5.1 5.00.25 1 10.125 1 10.0625 1 10.03 以上细菌内毒素国家标准品和细菌内毒素工作标准品需同时进行。 2.2加样 取规格为0.1ml/支的鲎试剂36支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，70%异丙醇棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内。每支加入0.1ml检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解，避免产生气泡将准备好的鲎试剂取其中18（管）放在试管架上，排成5列，其中4列4支（管），1列2支（管），4支（管）4列每列每支分别加入0.1ml的2λ、λ、0.5λ和0.25λ的内毒素标准溶液；另2支（管）加入0.1ml检查用水。加样具体操作如下表： 国家标准品浓度（EU/ml）0.25 0.125 0.0625 0.03 细菌内毒素 检查用水 平行管1（ml）0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 平行管2（ml）0.1 0.1 0.1 0.1 平行管3（ml）0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 平行管4（ml）0.1 0.1 0.1 0.1 将准备好的另外18（管）鲎试剂放在另一个试管架上，排成5列，其中4列4支（管），1列2支（管），4支（管）4列每列每支分别加入0.1ml的640倍、

国内外常用钢材标准牌号对照表20200711165902.doc

国内外常用钢材标准牌号对照表 种中国日本美国英国德国法国前苏联类CB JIS AISI 、ASTM BS DIN NF ΓOCT Q235-A · F SS41 A36、A283C Ust37-2 Q235-A SS41A、B Rst37-2 CT2 20 S20C C1020 En2C C22 C20 20 碳35 S35C C1035 En8A C35 XC38 35 素钢 20g SB42 A285、Gr.B A414、Gr.B 1633Gr.B Ast41 A42C 20K 20（管道用）STPG38、42 A106 、A53 st35.4 16Mn S M50B SM22 1633．Gr.1 st52-3 16Γ 低A516 、 合16MnR SPV36 A515、Gr·60、19Mn5 金Gr·70 钢 15MnV HTP57VW A225 、Gr.A A225、Gr.B 40Mn C1036 En15B 40MnA 40Mn5 40Γ 40Cr SCr4 5140 E n18 S117 41Cr4 38C4 40X 12CrMo A335 、P2 A213、Gr.B 3064-660 1501-620 13CrMo44 12CD4 12XM STT42 15CrMo STC42 A387、Gr.B 1653 16CrMo44 15CD4 15XM STB42 35CrMo SCM3 E4132 E4135 En19B 34CD4 35CD4 35XM 高0Cr13 SUS410 410S S41000 X7Cr13 Z6C13 08X13 合金0Cr18Ni9 SUS304 304 S30400 304S15 X5CrNi189 ZCN18.09 08X18H10 钢 0Cr18Ni10Ti SUS321 321 S32100 321S12 321S20 X10CrNiTi189 Z6CNT18.10 08X18H10T 0Cr17Ni12Mo2 SUS316 316 S31600 316S16 X5CrNiMo1810 Z6CND17.13 08X17H13M2

中国药典2010版附录XII E 细菌内毒素检查法

中国药典2010版附录XII E 细菌内毒素检查法 本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。 细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。 本试验操作过程应防止微生物和内毒素的污染。 细菌内毒素的量用内毒素单位（EU ）表示，1EU 与1 个内毒素国际单位（IU ）相当。 细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中的赏试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。 细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.O15EU／ml（用于凝胶法）或0.005EU / ml （用于光度侧定法）且对内毒素试验无干扰作用的灭菌注射用水。 试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃ 、30 分钟以上 ) 去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。若使用塑料器械，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。 供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。一般要求供试品溶液的pH 值在6.0～8.0的范围内。对于过酸、过碱或本身有缓冲能力的供试品，需调节被测溶液（或其稀释液）的pH 值，可使用酸、碱溶液或适宜的缓冲液调节pH 值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。 内毒素限值的确定药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定： L=K / M 式中 L 为供试品的细菌内毒素限值，一般以EU /ml、EU / mg 或EU / U （活性单位）表示； K 为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU / ( kg 2 h ）表示，注射剂K = 5EU/(kg?h ) ，放射性药品注射剂K=2.5EU / （kg2 h ) ，鞘内用注射剂K = 0.2EU / （kg2 h ) ； M 为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml / ( kg 2 h ）、mg / ( kg 2 h ）或U / ( kg 2 h ）表示，人均体重按60kg 计算，人体表面积按1.62m2计算。注射时

SMP-QC--细菌内毒素标准品与检测试剂标准管理规程

SMP-QC--细菌内毒素标准品与检测试剂标准管理规程

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1.0 目的 1.1建立细菌内毒素标准品与检验试剂的管理标准操作规程。 2.0 范围 2.1适用于公司细菌内毒素标准品与检测试剂的采购、接收、保存、使用、销毁、去热原物品的存放、鲎试剂灵敏度复核及工作标准品效价的标定。 3.0 职责 3.1质量控制（QC）部对本操作规程实施负责。 4.0 定义 4.1细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。 4.2 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准物质标定其效价，用于试验中灵敏度的复核、干扰试验及各种阳性对照。 4.3 细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品应使用由中国药品生物制品检定所统一发放的标准品。 5.0 规程 5.1细菌内毒素标准品与检测试剂的采购 5.1.1细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品按一年的使用量做计划。 5.1.2鲎试剂、缓冲液、细菌内毒素检查用水、无热原吸头、无热原安瓿等按半年的使用量做计划，从可靠的供应商处购买，如湛江安度斯生物有限公司、湛江博康海洋生物有限公司。 5.2细菌内毒素标准品与检测试剂的接收 5.2.1细菌内毒素标准品与检测试剂购回后，由生测组组长协同采购管理人员验收。5.2.2 验收项目包括：运输条件、内包装、名称、数量、规格、有效期、生产厂家及外观检查等是否复核请购要求或相应规定，如购买的是细菌内毒素工作标准品，则必须有厂家提供的内毒素工作标准品效价分析证明书，验收不合格的试剂或标准品直接由采购退货处理或按相关标准操作规程销毁处理。 5.2.3试剂登记项目包括：试剂名称、批号、数量、规格、有效期、生产厂家、接收时间等。 5.3细菌内毒素标准品与检测试剂的保存 5.3.1登记过的试剂才能进行保存。

粗糙度对比Ra、Rz、RMS、国内外标准对照

表面粗糙度高度参数有3种: 1. 轮廓算数平均偏差： 轮廓算数平均偏差Ra是指在取样长度L内，被测轮廓上各点到基准线的距离Yi的绝对值的 算数平均平均值。 2. 微观不平度十点高度： 微观不平度十点高度Rz是指在取样长度L内，被测轮廓上五个最大轮廓峰高Ypi的平均值 与五个最大轮廓谷底Yvi的平均值之和。 3. 轮廓最大高度： 轮廓最大高度Ry是指在取样长度L内，被测轮廓的峰顶线与轮谷线之间的距离。 表征微观不平度高度特性的评定参数Ra Rz、Ry的数值愈大则表面越粗糙。 在高度评定参数中，Ra的概念颇为直观，Ra值反应实际轮廓微观几何形状特性的信息量最 大，且Ra值用触针式电动轮廓仪测量比较容易。因此对于光滑表面和半光滑表面，普遍采用Ra作为评定参数。但受测量仪器的限制，极光滑和极粗糙的表面不能用Ra评定。 评定参数Rz的概念较为直观，Rz值通常用非接触式的光切显微镜测量。但Rz值只反应取 样长度内峰高和谷底的十个点，不能反应峰顶的尖锐和平顿的几何形状特性，因此Rz值不 如Ra值反应得微观几何形状特性全面。 评定参数Ry的概念简单，Ry值得测量方便，但Ry值不及Rz、Ra值反应的微观几何形状 特性全面。Ry值与Ra、Rz值连用控制微观不平度的谷深用来评定某些不允许出现较大加工痕迹和受交变应力作用的表面。 RMS直实际就是有效值，就是一组统计数据的平方的平均值的平方根。 因为RMS系统是英制单位 一般的有： RMS*25.4/1000=RA 举例： RMS64 = 64*25.4/1000= RA 1.6 几个常用的如下

RMS250 = RA6.4 RMS125 = RA3.2 RMS64 = RA1.6 RMS32 = RA0.8 表面粗糙度外国与中国标准对照 N1 ---- 0.025um；N2 ---- 0.05um; N3 ----- O.lum ; N4 ---- 0.2um；N5 ---- 0.4um ; N6 ----- 0.8um； N7 ---- 1.6um；N8 ---- 3.2um ; N9 ----- 6.3um； N10 --- 12.5um ；N11 ---- 25um 日本表面粗糙度的老标准。 对应关系： ▽: Ra25?12.5 ； ▽▽: Ra6.3 ?3.2 ； ▽▽▽:Ra1.6 ?0.4 ； ▽▽▽▽:Ra0.2 ?0.0013。 说明： 上面的数值依次为： 1.6S、3.2S、6.3S、12.5S、25S、50S、100S

细菌内毒素工作标准品检验操作规程

细菌内毒素工作标准品检验操作规程部门质量控制部题目细菌内毒素工作标准品检验操作规程起草审阅批准 共2页编号 HY/02-ZK-203 执行日期页码第1页 细菌内毒素工作标准品检验操作规程 一、范围:本标准规定了细菌内毒素工作标准品的测定方法和操作要求; 适用于本公司细菌内毒素工作标准品、细菌内毒素质控品的质检测定。二、引用标准:2010年版《中国药典》附录“细菌内毒素检查法” 三、要求:1、操作环境:温度不得高于26?，湿度不得高于75%; 2、标准品:细菌内毒素国家标准品。 五、操作步骤: 3(效价测定以国家标准品为基准，随机取本品2支，使用同一批鲎试剂参考品测定，2支反应终点的均值应与国家标准品的效价相平行或一致。 3.1 凝胶法 3.1.1 根据鲎试剂灵敏度的标示值(λ)，将细菌内毒素国家标准品用检查用水溶解，在旋涡混合器上混合15分钟，然后制备成4个浓度的标准内毒素溶液，即2λ、λ、0.5λ和0.25λ备用,每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。 3.1.2 设待复核的细菌内毒素工作标准品效价为P，用1ml检查用水溶解，在旋涡混合器上混合15分钟，然后制备成6个浓度的内毒素溶液，即(P/4λ)倍、(P/2λ)倍、(P/λ)倍、(2P/λ)倍、(4P/λ)倍和(8P/λ)倍备用,每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒。 3.1.3 细菌内毒素国家标准品和细菌内毒素工作标准品稀释须同时进行。

3.1.4 按《细菌内毒素检查法》项下操作，每一个内毒素浓度平行做4管。如细菌内毒素国家标准品和细菌内毒素工作标准品的最大浓度4管均为阳性，最低浓度4管均为阴性，按下式计算细菌内毒素国家标准品反应终点浓度的几何平均值(E)和细菌内毒素工作标准品反应终点浓度对应的稀释倍数的几何平均值(D)。 -1其中E=1g(?X/4) 式中 X为细菌内毒素国家标准品反应终点浓度的对数值(1g); -1D=1g(?X/4) 1 式中 X为细菌内毒素工作标准品反应终点浓度对应的稀释倍数的对数值(1g)。1 则待复核细菌内毒素工作标准品的效价的测定值为Pc=E×D。 C 3.3 效价的确定 计算多次试验结果的几何平均值，记为标准品的标识值P，计算结果有小数位 时取整数部分。 六、质量记录: 1 《细菌内毒素工作标准品检验原始记录》 HY/02-ZK-203-01 湛江博康海洋生物有限公司记录编号:HY/02-ZK-203-01 细菌内毒素工作品效价标定记录 检验操作规程编号:HY/02-ZK-202 日期: 室温: 湿度: 试剂名称生产单位批号效价/灵敏度细菌内毒素国家标准品中国药品生物制品检定所待检细菌内毒素工作品湛江博康海洋生物有限公司 鲎试剂湛江博康海洋生物有限公司细菌内毒素检查用水湛江博康海洋生物 有限公司实验操作 细菌内毒素国家标准品:

药典三部(2015版)-通则-1143细菌内毒素检查法

1143 细菌内毒素检查法 本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。 细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度试验结果为准。 本试验操作过程应防止内毒素的污染。 细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示，1EU与1个内毒素国际单位（IU）相当。 细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度、标定细菌内毒素工作标准品的效价，干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏度复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验。 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏度复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验。 细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准，其内毒素含量小于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005EU/ml（用于光度测定法），且对内毒素试验无干扰作用。 试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃、30分钟以上）去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。若使用塑料器皿，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器具。 供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。必要时，可调节被测溶液（或其稀释液）的pH值，一般供试品溶液和鲎试剂混合后溶液的pH值在6.0～8.0的范围内为宜，可使用适宜的酸、碱溶液或缓冲溶液调节pH值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。 内毒素限值的确定药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公

SMP-QC-0030-00细菌内毒素标准品与检测试剂标准管理规程

1.0 目的 1.1建立细菌内毒素标准品与检验试剂的管理标准操作规程。 2.0 范围 2.1适用于公司细菌内毒素标准品与检测试剂的采购、接收、保存、使用、销毁、去热原物品的存放、鲎试剂灵敏度复核及工作标准品效价的标定。 3.0 职责 3.1质量控制（QC）部对本操作规程实施负责。 4.0 定义 4.1细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。 4.2 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准物质标定其效价，用于试验中灵敏度的复核、干扰试验及各种阳性对照。 4.3 细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品应使用由中国药品生物制品检定所统一发放的标准品。 5.0 规程 5.1细菌内毒素标准品与检测试剂的采购 5.1.1细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品按一年的使用量做计划。 5.1.2鲎试剂、缓冲液、细菌内毒素检查用水、无热原吸头、无热原安瓿等按半年的使用量做计划，从可靠的供应商处购买，如湛江安度斯生物有限公司、湛江博康海洋生物有限公司。 5.2细菌内毒素标准品与检测试剂的接收 5.2.1细菌内毒素标准品与检测试剂购回后，由生测组组长协同采购管理人员验收。5.2.2 验收项目包括：运输条件、内包装、名称、数量、规格、有效期、生产厂家及外观检查等是否复核请购要求或相应规定，如购买的是细菌内毒素工作标准品，则必须

有厂家提供的内毒素工作标准品效价分析证明书，验收不合格的试剂或标准品直接由采购退货处理或按相关标准操作规程销毁处理。 5.2.3试剂登记项目包括：试剂名称、批号、数量、规格、有效期、生产厂家、接收时间等。 5.3细菌内毒素标准品与检测试剂的保存 5.3.1登记过的试剂才能进行保存。 5.3.2标准品、缓冲液于冰箱中冷藏保存，不得冷冻。鲎试剂的保存见厂家的说明书。 5.3.3细菌内毒素检查用水、无热原吸头、无热原安瓿等应存放在去热原物品专柜中，此柜仅存放已去热原的物品。 5.3.4若使用的为细菌内毒素国家标准品，复溶后应在瓶上贴上开口签。标明开口日期和使用人，封口，直立于冰箱中冷藏2～8℃保存，一般不得过14天，或根据生产厂家的建议进行保存。若为细菌内毒素工作标准品，为一次性使用。 5.3.5使用过的缓冲液、复溶后的鲎试剂在瓶上标明开瓶日期，用封口膜封口，保持直立，于-20℃保存3个月，或根据生产厂家的建议进行。 5.4鲎试剂复核及工作标准品的标定 5.4.1鲎试剂灵敏度的复核见《细菌内毒素凝胶检查法标准操作规程》。 5.4.1.1每购入一批新的鲎试剂应进行鲎试剂灵敏度检查，当鲎试剂灵敏度复核要求，方可用于细菌内毒素检查试验。 5.4.1.2如果该批鲎试剂灵敏度不符合要求，则换用国家标准品进行灵敏度复核试验。 5.4.1.3换用国家标准品后，鲎试剂灵敏度符合要求，则认为该批鲎试剂符合要求。所用到的工作标准品应进行销毁，并将结果反馈给生产厂家。 5.4.1.4换用国家标准品后，鲎试剂灵敏度仍不符合要求，判该批鲎试剂不符合要求，不得使用。与生产厂家联系退货处理。 5.4.2工作标准品标定 5.4.2.1 以EU为单位的工作标准品标化 5.4.2.1.1国家标准品标准溶液的制备 取国家标准品一支，轻弹瓶壁使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上滑痕，75%酒精棉球擦拭后开启，开启过程中防止玻璃屑落入瓶内。开启后按规格加入规定量的无热源水溶解内容物，用封口膜封严，置旋涡混合器上混悬30min。然后进行稀释，制备