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动物生理学实验

动物生理学实验
动物生理学实验

实验一生理学常用器械的识别与使用

作者:陈锐来源:本站时间:2008-3-14

实验一动物生理学常用器械识别及使用

目的:识别常用器械,并掌握常用器械的正确使用方法。

实验内容:1. 动物生理学实验概述

2. 动物生理学实验常用仪器、设备

3. 动物生理实验常用手术器械

作业:

1.手术刀的执刀方法有哪几种?

2.绘出持钳和松钳法的示意图?

第1 章动物生理学实验概述

《生理学》是一门实验性学科,《生理学》的发展和它的每一项新理论的建立都借助于大量的动物实验,并获得了大量实验的支持。因此学习《动物生理学》必须亲自做一做实验,才能更好地理解和掌握它的基本理论。

1.1 动物生理学实验课的教学内容和目的

《动物生理学》是高等农业院校动物生产类(含畜牧、水产、名特经济动物养殖)、动物医学、生物和生物技术专业本科必修的专业基础课,它将在理论上和实验技能上为后续课程的学习打下必要的基础。

为了适应现代教育、教学思想,融传授知识和能力培养为一体,《动物生理学实验》课除了讲授经典的生理学实验外,还特别注重对学生的获取知识的能力;观察、分析问题的能力;科学研究的实事求是作风、严肃认真的工作态度和团结协作精神的训练和培养。因此《动物生理学实验》课拟使学生通过对经典生理学实验的学习,掌握《动物生理学实验》的仪器、设备的基本操作;熟悉和掌握《动物生理学实验》的基本技术;掌握观察、纪录实验结果和收集、整理、实验数据的方法。通过多个实验项目同时观察或综合性实验,进一步强化、规范实验操作、掌握实验方法;重点培养学生分析、综合和逻辑推理的能力。通过探索(研究)性实验设计的训练,使学生掌握实验设计的基本原理、原则;掌握撰写科学研究论文的基本方法。

1.2 动物生理学实验及其方法

动物生理学实验是利用一定的仪器设备和方法,人为地控制某些因素再现动物机体的某些生命活动过程,或将一些感官难以观察到的内在的、迅速而微小变化着的生命活动展现、记录下来,便于人们观察、分析和研究。

因为《动物生理学》是研究动物机体生命活动(机能)及其规律的一门科学,因此动物生理学实验的对象一般都是机能正常的“活体” ,而且这种“活体”的特征在动物机体的整体、器官、及细胞等不同水平上有不同的表现形式。

动物生理学实验的方法一般根据动物的组织器官是在整体条件下进行实验,还是将其解剖取下,置于人工环境条件下进行实验,可分为在体实验方法和离体实验方法。

1.3 动物生理学实验课的要求

1.3.1 实验前

(1)仔细阅读《动物生理学实验》中的有关内容,了解本次实验的目的、要求,充分理解本次实验的原理、熟悉实验项目、操作步骤和程序,了解实验的注意事项。

(2)结合实验阅读相关理论知识,必要时还需要查阅一定的资料,做到充分理解实验原理与方法,力求提高实验课的效果。

(3)预测本次实验结果,对预测的结果尽可能地作出合理的解释。

(4)估计本次实验可能发生的问题,并思考解决问题的应急措施。

1.3.2 实验时

(1)遵守实验室规则。

(2)爱惜实验动物和标本,使其保持良好的兴奋性;节约药品、水、电,确保实验完成。

(3)按程序正确操作仪器和手术器械,按实验步骤进行实验。

(4)认真观察和纪录实验结果,并加上必要的标记、文字说明;实验过程中还要思考出现了什么样的结果?为什么会有这些结果?这些结果有何意义?若出现非预期结果,还应分析其原因,尽可能地及时解决。

(5)实验中要有耐心,必须等前一项实验基本恢复正常后,才能进行下一项实验,注意观察实验的全过程。

1.3.3 实验后

(1)实验完成后要及时关闭仪器和设备的电源;按规定整理实验器具和实验动物。

(2)及时整理实验纪录,分析实验结果,作出实验结论。

(3)认真撰写实验报告,按时交给教师批阅。

有关实验过程的观察、实验结果的记录、处理及表示方法还可下面有关内容:

①实验过程的观察

实验观察应注意对实验的整个过程的观察,从引进欲检验因素之前一直观察到引进欲检验因素之后产生变化的终结,或从撤消欲检验因素后直到其功能恢复到正常为止的全过程的观察。注意实验中的变化过程及引入欲检验因素的时间、出现变化的时间和恢复到正常水平的时间进行准确的记录。要等前一项实验结果恢复正常后再进行下一项实验。观察要特别注意有无出现非预期结果或“反常”现象?在排除了错误的不合理的结果之后,应对其进行分析,进一步实验是否有新的发现和新理论的得出。

②实验结果的记录

结果的纪录也应做到系统、客观和准确。要重视原始记录,预先拟定好原始记录的方式和内容。记录的方式可是文字、数字、表格、图形、照片、录像及影片等。严禁擅自撕页或涂改,切不能用整理后的记录替代原始记录,要保持记录的原始性和真实性。

③实验结果的处理

实验结果必须进行整理和分析,才能从中发现问题,揭示其变化的规律性,及其影响因素。

Ⅰ原始资料的类型

实验中得到的结果数据称原始资料,分为两大类:计量资料,计数资料。

计量资料以数值大小来表示某种变化的程度,如血压值、呼吸频率、尿量、血流量等,这类资料可从测量仪器中读出,也可通过测量所描记的曲线得到。计数资料是清点数目所得到的结果,如动物存活或死亡的数目、有效或无效等。

Ⅱ对原始资料的分析和处理

在取得一定数量标本的原始资料后,即可进行生物统计学处理,得到可用来对实验结果某些规律性进行评价的数值。有些数值如率、比、平均值、标准差、标准误、相关系数等,被称为统计指标。经统计学处理的结果数据可制成一定的统计表或统计图,以便研讨所获得的各种变化规律。其次,还可作相应的统计学显著性检验或计算某些特征参数等。

在分析和判断实验结果时,决不能有研究者的偏见,或者在计算均数或率时任意将资料取舍。必须实事求是,不能人为地强求实验结果符合自己的假说,而应该根据实验结果去修正假说,使假说上升为理论。

④研究(实验)的结论

科学研究经过实验设计、实验与观察、数据处理,对实验结果进行由表及里的分析,就可做出研究

总结、得出结论,并写出论文。这个结论要回答原先建立的假说是否正确,并对实验中发现的现象用所搜集到的资料做出理论解释。研究结论是从实验观察结果概括或归纳出来的判断。结论内容要严谨、精炼、准确。

⑤动物生理学实验报告的撰写

实验报告是对实验的全面总结;是理论联系实际和应用知识的重要环节,是对学生撰写科学论文能力的初步培养,可为今后的科学研究打下良好的基础。实验报告要文字简练、条理清楚、观点明确、字迹清楚,正确使用标点符号。实验报告有一定的格式:

动物生理学实验报告应包括:

姓名班级日期

实验序号及实验题目

实验目的

实验原理

实验动物

实验方法和步骤

实验结果

分析与讨论

第2章动物生理学实验常用仪器、设备

随着科学技术的发展,先进的科学仪器设备在动物生理学研究中广泛地利用,才使我们对生命活动的有了更为本质的认识。因此学习和掌握动物生理常用仪器、设备的使用方法,对做好动物生理实验也十分重要。进行动物生理学实验所需的仪器总体上可分为四大系统(图2-1)。

(1) 刺激系统: 是对欲研究的对象施加刺激,引起其生理功能变化(即产生兴奋)的一套仪器设备。但生理实验中应用最多的还是电刺激,因为电刺激较容易控制、对组织没有或损伤很小、引导方便、可重复使用。电刺激系统包括电子刺激器、刺激隔离器和各种电极。

(2) 引导、换能系统:生理功能变化的信号只有用一定的仪器设备显示、记录下来才有研究的价值,因此需要有一定的装置能将其引导到显示、记录仪器上。若生理信号是电信号,引导系统可能是引导电极,包括记录单细胞活动的玻璃微电极和记录一群细胞电活动的金属电极;若生理现象为其它能量形式时,如机械收缩、压力、振动、温度和某种化学成分变化等,都需要将原始生理信号转换为电的信号,加以引导,这就是各种形式的换能器。

(3) 信号调节放大系统:有的生理信号较为微弱,尚需进行适当的放大。信号调节系统是是一种放大器或放大器的组合,对信号基线的位置和输出信号幅度的高低(增益,信号的Y轴)进行调节。最原始的经典仪器是各式各样的杠杆、玛利式气鼓、各种检压计等。现代仪器设备包括示波器、记录仪中的放大器部分和专用的前置放大器、微电极放大器等。

(4) 显示与记录系统:有用纸带记录、显示屏记录或显示信号的仪器。通过调节相关的旋钮调节走纸速度或扫描速度(信号的X轴)将信号扩展开来。记纹鼓是一种较为原始的经典记录仪。由于计算机技术的发展,计算机生物信号采集处理系统已在生理学实验中广泛应用,有替代刺激器、放大器、示波器和记录仪的趋势。

2.1 刺激系统

2.1.1电子刺激器

电子刺激器是能产生一定波形的电脉冲仪(器)。

2.1.1.1 刺激器方式:

单刺激:可为默认选择(计算机)或为手控刺激,即按1次手动开关,就输出一次刺激脉冲。

双刺激、连续刺激:当选择双刺激或连续刺激时,刺激器会按照实验者设定的刺激参数连续输出

刺激脉冲,何时开始,何时终止可以人工控制。

串刺激:在每一个刺激周期内包含2个或2个以上的一串刺激脉冲。

2.1.1.2 刺激器参数:

刺激强度:以矩形方波的波幅(方波的高度)表示。可用电压或电流强度表示,电流强度一般从几μA~几十mA,电压可在200 V以内。实验过程中,过强或过弱的刺激都应避免,因为过弱的刺激不能引起组织功能变化;过强的刺激可引起组织内电解和热效应而损伤和破坏组织。在双刺激中,两个刺激脉冲的强度可以相等,也可以不等。

刺激(持续)时间:以矩形方波的波宽表示。一般刺激持续时间从几十μs~数s ,并采用正负双向刺激方波。

刺激频率:相对于连续刺激而言,表示单位时间内所含主周期的个数,单位为Hz ,如5 Hz 、20 Hz ,也可用主周期的时间来表示,如0.2 s,0.05s等。在使用连续刺激时,刺激频率一般少于1000次/s。一般组织器官的功能实验的刺激频率在60~100 次/s为宜。

串长:表示以重复的频率不断地输出数个(一连串)刺激脉冲的(持续)时间。在串长内可调节刺激脉冲的个数和间隔(波间隔t)。

同步输出:有时为了保证实验的精确性,要求整个实验系统保持同步工作,如要求在刺激器发出刺激脉冲稍前时间内,能发出一个尖脉冲(同步脉冲)去触发示波器或其它仪器使它们能同步工作。

延迟:表示从同步脉冲到刺激脉冲出现的时间差(T1)。调节延迟,可使刺激脉冲或由刺激脉冲引起的生理反应能在荧光屏上的适当位置展现,以便观察和记录。

串间隔:在连续的串刺激中,一串刺激脉冲连续出现时的时间间隔(T2)。它可以等于延迟(T1),也可以不等。

在计算机生物信号采集处理系统中,上述参数可出现在(1)模式,包括正电压刺激、负电压刺激、正电流刺激及负电流刺激;(2)方式;(3)延时;(4)波宽;(5)波间隔;(6)频率;(7)强度1及强度2(对双刺激时);(8)主周期;(9)程控增量,表示程控刺激参数的增量或减量。

2.1.2电极

电极依其使用目的不同,可分为普通电极、保护电极、乏极化电极、微电极等多种。

(1)普通电极通常是在一绝缘管的前端安装二根电阻很小的金属丝(常用银丝或不锈钢丝、钨丝),其露出绝缘管部分的长度仅5 mm左右,金属丝各连有一条导线,可与刺激器的输出端(作刺激电极用时)或放大器的输入端(作引导、记录电极用时)相接。使用此种电极时,应注意电极不要碰到周围的组织(图2.1-3)。

(2)保护电极其结构与普通电极相似,特点是前端的银丝嵌在电木保护套中,使用此种电极刺激在体神经干时,可保护周围组织不受刺激(图2.1-3)。

(3)锌铜弓(叉) 锌铜弓实际是一个带有简单锌铜电化学电池的双极刺激电极,常用来检查坐骨神经腓肠肌标本的机能状况。是平行排列的一根粗锌丝(片)和一根粗铜丝(片),二者的顶端焊接在一起,固定于电木管内,当锌铜弓与湿润的活体组织接触时,由于Zn较Cu活泼,易失去电子形成正极。使细胞膜超极化;Cu得电子成为负极,使细胞膜去极化而兴奋。电流按Zn→活体组织→Cu的方向流动。注意:用锌铜弓检查活体标本时,组织表面必需湿润(图2.1-3)。

(4)神经一肌肉标本盒

结构: 在进行蟾蜍坐骨神经干动作电位、兴奋不应期、以及传导速度的测定实验中,为了保持神经干的良好机能状态。必需使用神经标本盒(图2.1-4)。标本盒通常用有机玻璃制成,盒内有两根导轨,导轨上有5~7个装有银丝电极的有机玻璃滑块,电极滑块可以在导轨上随意移动,用以调节电极间的距离。每个电极滑块通过导线与标本盒侧壁的一个接线柱相联,其中一对作刺激电极,l~2对作记录电极,记录电极与刺激电极间的电极接地。有的标本盒盒盖上装有小尺,用以测量电极间的距离。

有的实验室设计的标本盒中还可安装肌肉标本,并把张力换能器装在标本盒内,可同时记录肌肉动作电位和肌肉收缩曲线,使用十分方便。

使用及注意事项

①滑块电极的银丝必需保持清洁,如有污垢可用浸有任氏液的棉球轻轻擦拭,仍不能清除时,可用细砂纸轻轻擦净。

②移动滑块电极时动作要轻,以免将电极与接线柱间的导线弄断。

③实验时标本应经常保持湿润,标本安好后应将上盖盖好。标本两端的扎线要悬空。

(6)微电极有金属微电极和玻璃微电极。

①金属微电极:常用银丝、白金丝、不锈钢、碳化钨丝在酸性溶液中电解腐蚀而成,尖端以外部分用漆或玻璃绝缘。有双极或单极引导电极,多用于细胞外记录和皮层诱发电位等。

②玻璃微电极: 有单、双、多管,用硬质的毛细玻璃管拉制而成。用于细胞内记录时,其尖端需小于0.5 μm;用于细胞外记录时,其尖端可为1~5 μm 。微电极内常充灌3 mol/L KCl溶液,从电极的粗端插入银-氯化银电极丝.

2.2 引导、换能系统

2.2.1 机械引导(传动)装置

(1) 肌动描记杠杆、肌动器

肌动描记杠杆是用记纹鼓记录肌肉收缩活动最常用的传动装置。通过改变杠杆动力臂和阻力臂的比例,即可调节描记曲线的大小(图2.2-1)。

肌动器是固定并刺激蛙类神经肌肉标本的装置(图2.2-1),有平板式和槽式。

(2) 描记气鼓(玛利气鼓)是随气体压力变化而起伏运动的传动装置(图2.2-2)。通常用来描记呼吸运动及器官容积的变化。它是一个带有中空侧管的金属圆皿,其上覆盖一层薄橡胶膜,在膜中央粘

上一描笔支架。当侧管中的气体压力改变时,可使像胶膜起落,从而带动膜上的描笔描记出相应曲线。

(3) 检压计是检测压力变化的装置,为一“U”形玻璃管,内装水银或水(图2.2-3)。在检压计“U”形管一端的液面上加上装有描笔的浮标,当另一端所连接的液体系统内的压力发生改变时,浮标随水银柱升降而上下移动,即可在记纹鼓上描记出相应曲线。水检压计所用的“U”形管一般内径较粗,且内盛有颜色水,一般用于测量低压变化,如静脉压或胸内负压。

2.2.2 换能器

换能器也叫传感器,是一种能将一种能量形式转变为另一种形式的器件装置。生理学实验常用的换能器是将一些非电信号(如机械、光、温度、化学等的变化)转变为电信号,然后输入不同的仪器进行测量、显示、记录,以便对其所代表的生理变化作深入的分析。换能器的种类很多,这里仅介绍几种。

2.2.2.1张力(机械一电)换能器

(1) 原理及结构:张力换能器是利用某些导体或半导体材料在外力作用下发生变形时,其电阻会发生改变的“应变效应”原理,将这些材料做成薄的应变片,配对(R1R3及R2R4)分别贴于金属弹性悬梁臂的两侧,两组应变片中间联一可调电位器R5,并与一5V直流电源相接,构成惠斯登桥式电路(图2.2-4)。当外力(肌肉收缩)作用于悬梁臂的游离端并使其发生轻度弯曲时,则一组应变片的受拉变长,电阻增加;另一组受压缩短,电阻减小。由于电桥臂电阻值的改变,使电桥失去了平衡产生电位差,即有微弱的电流输出。将此电流输入示波器、记录仪或计算机生物信号采集处理系统经放大,就能驱动描笔绘出张力变化(肌肉收缩)的全过程。

机械一电换能器的灵敏度和量程决定于应变元件的厚度,悬梁臂越薄越灵敏,但量程的范围也越小。因此,这种换能器的规格应根据所作实验来决定,蛙腓肠肌实验的量程应在100 g以上,肠平滑肌实验应在25 g,小动物心肌乳头肌实验应在1 g以下。

(2) 使用方法:根据测量方向,将换能器固定在合适的支架上,既要保证受力方向和力敏感悬梁(弹簧片)的平面垂直,又要保证换能器的受力方向正确。

换能器初次与记录仪(或生物信号采集处理系统)配合使用时,需要定标。将换能器水平固定在合适的支架上。换能器和主机接通电源,预热10 min,按等重量(满量程的1/5)加砝码到满量程,此时在记录仪上得到相应的等距离的标定线(注意在正式标定前,先用满量程砝碼预压两次。换能器的辅助调零电位器在传感器外壳边面沉孔中)。

(3)使用注意事项;

①正式记录前,换能器应预热10~30 min,以确保精度。

②换能器调零时,不得用力太大。

③实验时不能用猛力牵拉或用力扳弄换能器的悬梁臂,以免损坏换能器。测力时过负荷量不得超过满量的20 %。

④防止生理盐水等溶液渗入换能器。

2.2.2.2压力换能器

(1) 原理和结构:压力换能器是将各种压力变化(如动、静脉血压,心室内压等)转换为电信号。然后将这些电信号输入前级放大器或示波器,原理同前,电信号输出的大小与外加压力大小成线性关系。

压力换能器的结构如图2.2-5,头端是一个半球形的结构,内充抗凝剂稀释液,其内面后部为薄片状的应变元件,组成桥式电路。其前端有两个侧管,一个用于排出里面的气体,另一个与血管套管相连。

(2) 使用及注意事项:

①注意换能器的工作电压与供电电压是否一致和压力测量范围。对超出检测,范围的待测压力不能进行测量。

②进行液体耦合压力测量时,先将换能器透明球盖内充满用生理盐水稀释的抗凝剂稀释液,注意将透明球盖及测压导管内的气泡排净,以免引起压力波变形失真。注液时应首先检查导管是否通畅,避免阻塞形成死腔,引起高压而损坏换能器。

③压力换能器在使用时应固定在支架上,尽可能保证液压导管的开口处与换能器的感压面在同一水平面上,或有一个固定的距离,不得随意改变其位置,以免引起静水柱误差。

④将换能器与主机连接好,启动并预热15~30 min,将系统调到零位即可进行测量。换能器结构中有调零电位器,可以单独调节零点位置。也可与记录仪或计算机配合调整。测量中如需要进行零位校准,可采用两个医用三通阀分别接于换能器两个接嘴上,其中一个用来沟通大气压即可。

⑤为了使测量结果准确,使用前需要标定。

⑥严禁用注射器从侧管向闭合测压管道内推注液体;避免碰撞,要轻拿轻放,以免断丝;用后洗净并放在干燥无菌、无毒、无腐蚀的容器内保存。

2.3信号调节放大系统-生物电放大器

从生物体各器官引导出的生物电信号特性差异很大,一般在几十μV~几十mV,且记录环境中常常掺杂有同级或更大量级的干扰信号,要得到满意的结果必须借助生物电放大器从中提取微弱的的生物信号,再输入示波器或记录仪才能显示、记录,因此常用的生物电放大器必须是①差分式平

衡放大,有较高的抗市电干扰能力,信号/噪声比值大;②最大放大倍数不小于1000倍;③频率响应从0~100 Hz;④低噪声,整机噪音不大于15 μV。⑤仪器本身不受静电及磁场的干扰。2.4 显示、记录系统

生理学实验中,各种生理信号都需要进行记录才能进行观察、测量和分析。经典的记录装置是记纹鼓。现代生理学实验中常用的记录仪器有示波器与示波照相机、生理记录仪。

2.4.1二道生理记录仪

生理记录仪具有灵敏度高、适用范围广等优点。配接合适的换能器或引导电极,可以记录血压、心电、脑电;心音;呼吸;胃肠平滑肌、心肌、骨骼肌收缩等多种生理活动的变化,并以曲线形式直接描记在记录纸上,供分析用。由于生理记录仪描记系统的频率响应不十分理想,一般小于

100Hz.故在记录快速变化的生物电信号(如神经干动作电位)方面还要受到限制。

目前常用的记录仪有LMS—2A或LMS—2B型二导生理记录仪,MJ—3三道生理记录仪,SJ—42多道生理记录仪等。现以LMS—2B为例,介绍其面板控制和使用方法。

2.4.1.1 LMS—2B生理二道记录仪的基本结构

仪器由记录部分、FG直流(后级)放大器、FD多功能(前级)放大器和FY-2血压(前级)放大器组成(图2.4-1,2.4-2)。

2.4.1.2 仪器的使用

(1) 仪器使用前的准备

①将电源开关、两个后级FG直流放大器的通/断开关和前级放大器FD—2、FY—2的测量开关及输出的通/断开关都置于“关”或“断”。按下控制纸速的“停” 键;将前级放大器的灵敏度均置于最低档。

②接上准备使用的换能器和输入线,将输入线短路。

③将仪器可靠地接地。

④安装记录纸,铺平压在压纸轮下。

[注意]安装记录纸的过程中切勿碰到记录笔尖,以免影响记录性能。

(2) 仪器调试

①接通电源,指示灯亮,放下抬笔架。选择较慢的走纸速度,

②调节描笔的位置:插入FG放大器输入线并使输入短路。打开FG后级放大器开关(于通),调节FG放大器的调零旋钮,使描笔居中。按下侧面板的0.5V电压校对按键,调节FG灵敏度暗调旋钮,使笔尖偏转10 mm。

FY—2血压放大器的调试(图2.4-3): 拔出FG放大器的输入线,FY—2血压放大器的输出开

关置于”通” 。调节FY—2血压放大器的直流平衡暗调旋钮,并改变灵敏度,使记录笔保持居中(不要调节FG放大器的调零旋钮)。

调节压力换能器的平衡: 将FY—2血压放大器的测量开关置“通”,当压力换能器的负荷为零(压力腔与大气相通)时,调节压力换能器的平衡暗调旋钮,改变FY-2血压放大器的灵敏度,使记录笔保持居中(不要调节FG放大器的调零旋钮和FY—2血压放大器的直流平衡暗调旋钮)。

校对放大器增益: 将FY—2血压放大器灵敏度调至12 kPa/cm(或1.2 kPa/cm),按下12 kPa 校对按键(或1.2 kPa),描笔应偏转1 cm,否则可能是放大器的放大倍数不准或标准信号不准。如要校准,应由专业修理人员完成。

④FD—2多功能放大器的调试

确定FD—2多功能放大器的输入线短路,输出开关置于”通”;拔出FG放大器的输入线。调节FD—2多功能放大器的直流平衡暗调旋钮,并改变灵敏度,使记录笔保持居中(不要调节FG放大器的调零旋钮)。

调节张力换能器的平衡: FD—2多功能放大器的测量开关置” 通”,张力换能器的负荷为零,调节张力换能器的平衡暗调旋钮,改变FD—2多功能放大器的灵敏度,使记录笔保持

居中(不要调节FG放大器的调零旋钮和FD—2多功能放大器的直流平衡暗调旋钮)。平衡后可用砝码定标。

校对放大器的电压增益: 将FD—2多功能放大器的测量开关置”断”,接上电压信号输入线并短路,时间常数置”DC”。调节FD—2多功能放大器的直流平衡暗调钮,并改变灵敏度,使记录笔保持居中(不要调节FG放大器的调零旋钮)。改变FD—2多功能放大器灵敏度调至1 mV/cm,按下1 mV校对按键,描笔应偏转1cm,否则可能是放大器的放大倍数不准或标准信号不准。如要校准,应由专业修理人员完成。

放大器的高频特性,由“滤波”旋扭控制,分为10、30、100、l kHz 和OFF 五档,放大器的低频特性由“时间常数”旋扭控制,分DC(直流)、2、0.2、0.02、0.002 s五档,其相应的低端截止频率为0,0.08,0.8,8,80 Hz。视被测信号的频谱选择合适的带宽,若不记录被测信号的直流成分时,不要采用DC档。记录几种不同的生物信号时FD—2多功能放大器的带宽参数设置:被测项目滤波(H2) 时间常数(s)

心电(ECG) 100 2

肌电(EMG) lk 0.02

脑电100 0.2

脉搏30 2

呼吸10 DC

放大器的灵敏度,由“灵敏度”开关和“时间常数”开关共同决定,当“时间常数”开关置于“DC”档时,放大器的灵敏度为直流灵敏度,等于“灵敏度”开关上各档的灵敏度(0.02、0.05……10 mV/cm)X 50,即直流灵敏度为1、2.5、5……500 mV/cm;当“时间常数”开关置于其他档时,放大器灵敏度即为交流灵敏度,为“灵敏度”开关上所示的值。实验时视被测信号幅度大小,灵敏度可由最低档“10”开始,逐渐增高,直至记录幅度满意为止。如果被测信号大于200 mV而小于1000 mV时,则可使用所配的单芯屏蔽输入电缆直接由FG输入插孔输入,进行描记。FD—2放大器内部提供1 mV和50 μV的直流校对电压,“1 mV”主要用于直流灵敏度校对,“50 μV”主要用于交流灵敏度校对。

2.4.1.3 仪器使用注意事项

(1) 仪器的放大器灵敏度高,开关接通以前,一定要使前级放大器输入端接上换能器或输入线,并使输入线短路,“灵敏度”开关置于最低档,防止干扰信号的输入损坏描笔。

(2) 仪器应良好接地。

(3) 停机时将各种开关均置于“断”,使笔尖不离开记录纸面,将压纸轮抬起

(4) 若仪器较长时间不使用时,应取下各类输入连线,并将备用有机玻璃清洗槽放在笔尖上。将墨水壶内的墨水全部用滴管吸出,再用酒精清洗笔尖管道,套上仪器的布防护罩保持整机的清洁。

第3章动物生理实验常用手术器械

3.1 动物生理实验常用手术器械

3.1.1 常用手术器械

动物生理学实验常用手术器械与医学外科手术器械大致相同,但也有一些专用器械.现仅介绍常规的手术器械。

(1) 手术刀手术刀主要用来切开皮肤和脏器。手术刀片有圆刃、尖刃和弯刃三种。刀柄也分多种,最常用的是4号刀柄和7号刀柄(图3.1-1)。可根据手术部位、性质的需要自由拆装和更换变钝或损坏的手术刀片(图3.1-2)。持刀的方式有4种(图3.1-3),其中“执弓式”是一种常用的的持

刀方式。其动作范围广泛而灵活,用于腹部、颈部或股部的皮肤切口。

(2) 手术剪和粗剪刀手术剪分钝头剪、尖头剪。其尖端有直、弯之分。主要用于剪皮肤、肌肉等软组织。也可用来分离组织,即利用剪刀尖插入组织间隙,分离无大血管的结缔组织。另外,还有一种小型的眼科剪,主要用于剪血管和神经等软组织。一般说来,深部操作宜用弯剪,不致误伤。剪线大多为钝头直剪,剪毛用钝头、尖端上翘的。正确执剪姿势是用拇指与无名指持剪,食指置于手术剪的上方(图3.1-4)。粗剪刀,为普通的剪刀。在蛙类的实验中,常用来剪蛙的脊柱、骨和皮肤等粗硬组织。

(3) 手术镊手术镊种类很多,名称也不统一,常用的有无齿镊和有齿镊两种,用于夹住或提起组织,以便剥离、剪断或缝合。有齿镊用于提起皮肤、皮下组织、筋膜、肌腱等较坚韧的组织,使其不易滑脱。但有齿镊不能用以夹持重要器官,以免造成损伤。无齿镊用于夹持神经、血管、肠壁或其他脏器,较脆弱组织,而不致使之受损伤。正确执镊方法如图3.1-5,用力适当地把持着。

(4) 血管钳血管钳又称止血钳,有直、弯、带齿和蚊式钳等数种。主要用于夹血管或止血点,以达止血的目的。也用于分离组织、牵引缝线,把持或拔缝针等。正确持钳和持剪方法相同(图3.1-6)。开放血管钳的方法是利用右手已套入血管钳的拇指与无名指相对挤压,继而两指向相反的方向旋开,放开血管钳(图3.1-7)。

(5) 骨钳在打开颅腔和骨髓腔时,用于咬切骨质。

(6)颅骨钻用于开颅时钻孔。

(7) 气管插管急性动物实验时,插入气管,以保证呼吸通畅,或做人工呼吸。将一端接气鼓或换能器,可记录呼吸运动。

(8) 血管插管有动脉插管和静脉插管。一些小型动物的动脉插管可用16号输血针头磨平来替代。在急性实验时插入动脉,另一端接压力换能器或水银检压计,以记录血压。静脉插管插入静脉后固

定,以便在实验过程中随时用注射器向静脉血管中注入药物和溶液。

(9) 金属探针专门用来毁坏蛙类脑和脊髓。

(10) 玻璃分针专用于分离神经与血管等组织。

(11) 蛙心夹使用时将夹的前端在蛙心室舒张时夹住心室尖,尾端用线系在换能器(或扛杆)上。

(12) 动脉夹用于阻断动脉血流。

(13) 蛙板一块20 cm×15 cm的木板,用于固定蛙类。

各种手术器械使用后,都应及时清洗,齿间、轴间的血迹也应用小刷刷洗干净。洗净后用干布擦拭干,忌用火烤烘干或重击。久置不用的金属器械应檫油保护。

3.1.2手术器械的消毒方法

在慢性实验中,手术器械必须进行事前消毒。常用的灭菌和消毒方法有煮沸消毒法、高压蒸汽消毒法和化学药品消毒法。

(1) 煮沸消毒法是比较简单方便的消毒方法,除要求速干的物品外,可广泛地应用于多种物品的消毒。一般用蒸馏水加热,水沸3-5分钟后将器械放到消毒锅内,等到第二次水沸时计算时间,15分钟可以将一般的细菌杀灭,但不能杀灭具有顽强抵抗力的细菌芽胞。对怀疑有芽胞污染的器械,必须煮沸60分钟以上。有时为了提高消毒效果,可在水中加入2% 碳酸氢钠,可以提高水的沸点至102~105 ℃左右。这样,既可以加强灭菌能力,并能防止金属器械生锈(但对橡胶制品有害)。煮沸灭菌时,器械或物品应放在水面以下,煮沸器的盖子应关闭严密,以保持沸水的温度。

(2) 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌法需要特制的灭菌器。通常用蒸汽压15~20 lb/in2,温度可达121.6~126.6 ℃,维持30分钟左右,能杀灭所有的细菌,包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞,因此是比较可靠的灭菌方法。更高的压力或更长的时间,并无必要,相反有可能损坏物品的质量,尤其不宜于橡胶制品和锐利器械的灭菌。

(3)化学药品消毒法做为灭菌的手段,化学药品消毒法,并不理想,其消毒的能力受药物的浓度、温度、作用时间等因素的影响。但化学药品消毒法不需特殊设备,使用方便,尤其对于某些不宜用热力灭菌的用品的消毒,仍不失为一个有用的补充手段。

器械在浸泡入化学消毒剂之前,应该将沾染污物洗净,尤其是油脂覆盖的器械,妨碍化学药品对器械的消毒作用,所以应该事先仔细将油脂擦净。

为了避免化学消毒剂对组织的有害作用,消毒后的器械在使用前应该用开水冲洗干净。

常用的化学消毒剂有:①LJ-强化戊二醛(加入亚硝酸钠可防锈),②70%酒精(不适宜金属器械的消毒),③0.1%新洁而灭(加入亚硝酸钠可防锈),④酶皂溶液,⑤甲醛溶液等。浸泡金属器械的时间不应小于30 min,除酒精、新洁尔灭外,其它消毒剂消毒的器械在使用前应注意用无菌盐水冲洗干净。

3.2 实验动物、实验用动物及其选择

现代生物学实验中,实验动物是指根据实验的需要,有目的、有计划地进行人工饲养、繁殖及科学培育而成的动物。供科学研究、教学、生产、检测等方面使用的实验对象和材料。实验动物必需具有明确的生物学特性和清楚的遗传背景,并且是在对其身上携带的微生物、寄生虫严格控制下培育和驯化出来的。实验动物按遗传学分类有:①近交系实验动物,即纯系动物;②封闭群动物;③杂交一代动物(F1代)。按微生物控制程度分级有:①一级,普通动物;②二级,清洁级动物;③三级,无特定病原体动物,即SPF动物;④四级,无菌动物,即GF动物。

3.2.1 实验动物的种类和特性

(1) 蟾蜍与蛙

蟾蜍与蛙属于两栖纲,无尾目类,变温动物。易饲养和捕捉,一般是野外捕捉后直接供实验室使用。也可短期饲养于潮湿地方,几天可以不食或喂以草和昆虫等。

因蟾蜍和蛙的一些基本的生命活动与恒温动物相似,而且离体组织器官所需的生活条件比较简单,容易控制和掌握,因此被广泛用于生理学科研和教学中。用蟾蜍(蛙)腓肠肌和坐骨神经可观察外周神经及其肌肉的功能,研究兴奋性、兴奋、兴奋的传导和传递、肌肉的收缩等基本生理现象。蟾蜍(蛙)离体心脏可用于研究心脏的生理功能。利用蟾蜍(蛙)的整体实验可进行脊休克、脊髓反射、反射弧、微循环等研究。蟾蜍还可用于生殖生理、药理学、胚胎发育、免疫学等的研究。(2) 家兔

哺乳纲,啮齿目,兔科。家兔品种很多,常用的有①青紫兰兔:体质强壮,适应性强,易于饲养,生长快;②中国本地兔(白家兔):抵抗力不如青紫兰兔;③新西兰白兔是近年引进的大型优良品种,成熟体重可达4~4.5kg;④大耳白兔:耳朵长而大,血管清晰,皮肤白色,但抵抗力较差;

家兔性情温顺,灌胃、取血方便;由于兔耳缘静脉浅表,易暴露,是静脉给药的最佳部位;兔的减压神经在颈部与迷走神经、交感神经分开而单独成为一束,常用于心血管反射活动、呼吸运动调节、泌尿功能调节的研究;兔的消化道运动活跃,典型可用于消化道运动及平滑肌特性的研究。兔的大脑皮层运动区机能定位已具有一定的雏形,因此兔也常用于大脑皮层功能定位和去大脑僵直、神经放电活动等实验。此外,家兔还用于免疫学、药理学、毒理学、生殖生理学、眼科以及临床疾病的研究。

(3 ) 小白鼠

哺乳纲,啮齿目,鼠科。体型较小,成熟早,繁殖力强,小鼠性情温顺,易于捕捉,操作方便。小鼠实验研究资料丰富、参考对比性强;其实验结果的科学性、可靠性和重复性高,被广泛用于各类科研实验中,如用于生理学小脑功能障碍等实验;药理学、肿瘤学、遗传学、免疫学以及临床疾病的实验研究。

(4) 大白鼠

哺乳纲,啮齿目,鼠科。性情不如小白鼠温顺,受惊吓或捕捉方法粗暴时,表现凶暴,易咬人。但具有小白鼠其它优点,因此也用途广泛。大鼠离体器官可进行大鼠离体静态肺顺应性实验;整体可用于胃酸分泌、胃排空、垂体、肾上腺系统的研究。大鼠还用于生殖生理、胚胎学、营养学、药理学、毒理学、肿瘤学以及遗传学的实验研究。大鼠大脑各部的生理功能立体定位已相当成熟和标准化,是研究中枢神经系统的极好材料。

(5) 豚鼠

哺乳纲,啮齿目,豚鼠科,又称荷兰猪。豚鼠耳蜗管发达,听觉灵敏,在生理学上,用于耳蜗微音器电位的实验,也用于临床听力的实验研究。除此之外,还用于离体心脏及肠、子宫平滑肌实验,其乳头肌和心房肌常用于心肌细胞电生理特性及动作电位的实验,也用于传染病、变态反应、维生素C缺乏等实验研究。

(6) 猫

哺乳纲,食肉目,猫科。猫的血压较稳定,大脑和小脑均很发达,头盖骨和脑的形状固定,是脑神经生理学的较好实验动物。猫眼能按照光线的强弱变化而灵敏地调节瞳孔大小。生理学实验中,同样用电极探针插入猫大脑各部位的生理学研究方面现已完全标准化,可以在清醒条件下研究神经递质等活性物质的释放和条件反射,外周神经与中枢神经的联系。还可做去大脑僵直、交感神经的瞬膜和虹膜反应以及呼吸、心血管反射的调节实验等。此外,猫也用于药理学和临床疾病的实验研究。

(7) 狗

哺乳纲,肉食目,犬科。狗听觉、嗅觉灵敏,反应敏捷,对外界环境适应能力强。易饲养,可调教,能很好地配合实验研究的需要。狗具有发达的血液循环与神经系统,内脏构造及其比例与人的

相似,是较理想的实验动物。在生理学中常用于心血管系统、脊髓传导、大脑皮层功能定位、条件反射、内分泌腺摘除和各种消化系统功能的实验研究。狗还用于药理学、毒理学、行为学、肿瘤学、核医学以及临床某些疾病的研究。狗特别应用于实验外科学的研究,是临床探索新手术方法和观察手术疗效的首选实验动物。

(8) 山羊

属于哺乳纲,偶蹄目,牛科,羊亚科喜粗食,易饲养,性格温顺,具有复胃,颈静脉表浅。多用于采血、心电图、复胃消化生理及其微生物的观察等。

(9) 猪

属于哺乳纲,偶蹄目,猪科数量多,易饲养,嗅觉灵敏,对外界环境适应能力强,常用于巴氏小胃、血液循环系统及病理、药理实验。

猪在解剖学、生理学、疾病发生机制等方面与人极为相似,因此在生理科学领域中的应用率越来越高。作为实验用的小型猪、微型猪是发展的方向,我国已培养出若干种小型和微型猪品系。由于长期小群体内近亲繁育,因此基因纯合度相对较高,遗传稳定性高,实验重复性好,性情温顺。(10) 鸡

鸟纲,鸟形目,鸡的品种很多。鸡虽飞翔力已退化,但习惯于四处觅食,食性广。鸡听觉敏锐,白天视力敏锐,易受惊扰。鸡食道中部有扩张而成的素囊;鸡肺为海绵状紧贴于肋骨上,肺上有9个气囊;无肺胸膜及横隔膜;鸡无膀胱,尿少,由泄殖腔随粪便排出;尿呈白色,为尿酸或尿酸盐,呈磷痟稀粥样附在粪的表面;鸡的凝血机制好,红细胞有核。

3.2.2 实验动物的选择

生理学实验中做好动物的选择和准备关系到实验的成败。除了按照不同实验的特殊要求选择相应的种属、品种、品系微生物学背景外,对个体的选择首先要挑选健康的动物。其次,应根据实验内容和要求,结合动物解剖生理特点挑选(见前述)。有时为充分利用动物,节省时间和经费,在不影响实验结果的情况下,可利用同一动物完成不同的实验内容。此外,在动物饲养时还应对饲料加以控制,包括营养素要求及搭配、合理加工、无发霉变质等;设备标准化,如饲养环境的温度、湿度、光照、空气清洁度、噪音控制等也应做进一步了解和管理。

在进行慢性动物实验时,常选择年轻健康的动物。在手术前数周内训练动物,使其熟悉实验环境。实验前12小时停止喂食物,但需喂水。实验时应实行无菌操作,实验后需精心护理和喂养。

3.3 实验动物的编号﹑捉拿﹑固定方法

3.3.1 动物编号方法

大动物多用挂牌法或用铝环固定在耳朵上,牌或环上有编号;羊或猪多用耳缺法(图3.3-1),原则是左个右十,上三下一, 如:右耳下边有两个缺口,左耳上方有两个缺口下方有一个缺口,则编号为27号。

小动物可用苦味酸或硝酸银涂于体表不同部位(图3.3-2)。原则是:先左后右,从前到后。用单一颜色可标记1~10号,若用两种颜色配合使用,其中一种颜色代表个位数,另一种代表十位数,可编到99号。

3.3.2 动物捉拿和固定方法

在实验过程中,为了手术操作方便,顺利进行实验项目的观察记录,必须将动物麻醉和固定在特制的实验台上(图3.3-3)。固定动物的方法一般多采用仰卧位,它适用作颈、9胸、腹、股等部位

的实验;俯卧位适用于作脑和脊髓部位的实验。

(1) 狗的捆绑与固定至少由2~3人进行。捆绑前实验者应先对其轻柔抚摸,避免使其惊恐或激怒;用一条粗棉绳兜住上、下颌,在上颌处打一结(勿太紧),再绕回下颌打第二个结,然后将绳引向头后部,在颈项上打第三个结且在其上打一活结(图3.3-4)。切记住兜绳时,要注意观察狗的动向,以防被其咬伤。如狗不能合作,须用长柄狗头钳夹持其颈部,并按倒在地,以限制其头部活动,再按上述方法捆绑其嘴。捆嘴后使其侧卧,一人固定其肢体,另一人注射麻醉药。此时,应注意狗可能出现挣扎,甚至大小便俱下,以及由于这种捆绑动作往往致使狗呼吸急促,甚至屏气等问题。待动物进入到麻醉状态后,立即松捆,以防窒息。

将麻醉好的狗仰卧置于实验台上,用特制的狗头夹固定狗头(图3.3-3)。固定前将狗舌拽出口外,避免堵塞气道。将狗嘴伸入铁圈,再将直铁杆插入上、下颌之间,再下旋铁杆,使弯形铁条紧压犬的下颌(仰卧固定)或压在鼻梁上(俯卧固定)。再将狗头夹固定在手术台上。

固定好狗头后,取绳索用其一端分别绑在前肢的腕关节上部和后肢的踝关节上部,绳索的另一端分别固定在实验台同侧的固定钩上。固定两前肢时,亦可将两根绳索交叉从犬的背后穿过并将对侧前肢压在绳索下,分别绑在实验台两例的固定钩上。若采取俯卧位固定时,绑前肢的绳索可不交叉,直接绑在同侧的固定钩上。

(2) 兔捉持家兔时只须实验者和助手将其抓牢或按住即可。正确捉持方法为:一手抓住家兔颈背部皮肤,轻轻提起,另一手托住其臀部,使其呈坐位姿势(图3.4-6)。

兔可固定在兔盒或兔台上(3.4-7)。在手术台上用兔头夹固定头部(图3.3-3A),把嘴套入铁圈内,调整铁圈至最适位置然后将兔头夹的铁柄固定在手术台上。或用一根较粗棉线绳一端打个活结套住兔的两只上门齿,另一端栓在实验台前端的铁柱上。做颈部手术时,可将一粗注射器筒垫于动物的项下,以抬高颈部,便于操作。兔的四肢固定和狗相同。

(3) 小鼠、大鼠实验者右手捉住小鼠尾,鼠会本能地向前爬行。左手攥紧鼠颈背部皮肤,使其腹部向上,拉直躯干,并以左手小指和掌部夹住其尾固定在左手上(图3.3-8)。可作腹腔麻醉。亦可用金属筒、有机玻璃筒或铁丝笼式固定器固定,露出尾部,作尾静脉注射。

捉持大鼠的方法基本同小鼠。大鼠在惊恐或激怒时会咬人,捉拿时可戴防护手套,或用厚布盖住鼠身作防护,握住整个身体,并固定头骨,防止被咬伤。动作应轻柔,切忌粗暴。也可用钳子夹持。最后再根据需要,将大鼠置于固定笼内或捆绑四肢。

(4) 豚鼠右手横握豚鼠腹前部,左手轻托后肢(图3.3-9)。

(5) 蛙实验者一手拇指、食指和中指控制蛙两前肢,无名指和小指压住两后肢(图3.3-10)。

3.4 实验动物的给药方法

3.4.1 经口投药法

(1) 口服法

口服法是将能溶于水并且在水溶液中较稳定的药物放入动物饮水中,不溶于水的药物混于动物饲料内,由动物自行摄入。该方法技术简单,给药时动物接近自然状态,不会引起动物应激反应,适用于多数动物慢性药物干预实验,如抗高血压药物的药效、药物毒性测试等。其缺点是动物饮水和进食过程中,总有部分药物损失,药物摄入量计算不准确,而且由于动物本身状态、饮水量和摄食不同,药物摄入量不易保证,影响药物作用分析的准确性。

(2) 灌服法

灌服法是将动物适当固定,强迫动物摄入药物。这种方法能准确把握给药时间和剂量,及时观察动物的反应,适合于急性和慢性动物实验,但经常强制性操作易引起动物不良生理反应,甚至操作不当引起动物死亡。故应熟练掌握该项技术。强制性给药方法主要有两种:

①固体药物口服

一人操作时用左手从背部抓住动物头部,同时以拇、食指压迫动物口角部位使其张口,右手用镊子夹住药片放于动物舌根部位,然后让动物闭口吞咽下药物。

②液体药物灌服

小白鼠与大白鼠一般由一人操作,左手捏持小白鼠头、颈、背部皮肤,或握住大白鼠以固定动物,使动物腹部朝向术者,右手将连接注射器的硬质胃管由口角处插入口腔,用胃管将动物头部稍向背侧压迫,使口腔与食管成一直线,将胃管沿上颚壁轻轻插入食道,小白鼠一般用3 cm,大白鼠一般用5 cm的胃管(图3.4-1)。插管时应注意动物反应,如插入顺利,动物安静,呼吸正常,可注入药物;如动物剧烈挣扎或插入有阻力,应拔出胃管重插,如将药物灌入气管,可致动物立即死亡。

给家兔灌服时宜用兔固定箱或由两人操作。助手取坐位,用两腿夹住动物腰腹部,左手抓免双耳,右手握持前肢,以固定动物;术者将木制开口器横插入兔口内并压住舌头,将胃管经开口器中央小孔沿上腭壁插入食道约15 cm,将胃管外口置一杯水中,看是否有气泡冒出,检测是否插入气管,确定胃管不在气管后,即可注入药物(图3.4-2)。

3.4.2 注射给药

(1) 淋巴囊注射

青蛙与蟾蜍皮下有多个淋巴囊,注射药物易于吸收,适合于该类动物全身给药。常用注射部位为胸、腹和股淋巴囊。为防止注入药物自针眼处漏出,胸淋巴囊注射时应将针头刺入口腔,由口腔组织穿刺到胸部皮下,注入药物。股淋巴囊注射时应由小腿刺入,经膝关节穿刺到股部皮下,注射药液量一般为0.25~0.5 m1(图3.4-3)。

(2) 皮下注射

皮下注射是将药物注射于皮肤与肌肉之间,适合于所有哺乳动物。实验动物皮下注射一般应由两人操作,熟练者也可一人完成。由助手将动物固定,术者用左手捏起皮肤,形成皮肤皱褶,右手

持注射器刺入皱褶皮下,将针头轻轻左右摆动,如摆动容易,表示确已刺入皮下,再轻轻抽吸注射器,确定没有刺入血管后,将药物注入(图3.4-4)。拔出针头后应轻轻按压针刺部位,以防药液漏出,并可促进药物吸收。鸽、禽类常选用翼下注射。

(3) 肌肉注射

肌肉血管丰富,药物吸收速度快,故肌内注射适合于几乎所有水溶性和脂溶性药物,特别适合于狗、猫、兔等肌肉发达的动物。而小白鼠、大白鼠、豚鼠因肌肉较少,肌肉注射稍有困难,必要时可选用股部肌肉。鸟类选用胸肌或腓肠肌。肌内注射一般由两人操作,小动物也可由一人完成。助手固定动物,术者用左手指轻压注射部位,右手持注射器刺入肌肉,回抽针栓,如无回血,表明未刺入血管,将药物注入,然后拔出针头,轻轻按摩注射部位,以助药物吸收。

(4) 腹腔注射

腹腔吸收面积大,药物吸收速度快,故腹腔注射适合于多种刺激性小的水溶性药物的用药,并且是啮齿类动物常用给药途径之一。腹腔注射穿刺部位一般选在下腹部正中线两侧,该部位无重要器官。腹腔注射可由两人完成,熟练者也可一人完成。助手固定动物,并使其腹部向上,术者将注射器针头在选定部位刺入皮下,然后使针头与皮肤成45o°角缓慢刺入腹腔,如针头与腹内小肠接触,一般小肠会自动移开,故腹腔注射较为安全(图3.4-5)。刺入腹腔时,术者可有阻力突然减小的感觉,再回抽针栓,确定针头未刺入小肠、膀胱或血管后,缓慢注入药液。

(5) 静脉注射

静脉注射将药物直接注入血液,毋需经过吸收阶段,药物作用最快,是急、慢性动物实验最常用的给药方法。静脉注射给药时,不同种类的动物由于其解剖结构的不同,应选择不同的静脉血管。

①兔耳缘静脉注射

将家兔置于兔固定箱内,没有兔固定箱时可由助手将家兔固定在实验台上,并特别注意兔头不能随意活动。剪除兔耳外侧缘被毛,用乙醇轻轻擦拭或轻揉耳缘局部,使耳缘静脉充分扩张。用左手拇指和中指捏住兔耳尖端,食指垫在兔耳注射处的下方(或以食指、中指夹住耳根,拇指和无名指捏住耳的尖端),右手持注射器由近耳尖处将针(6号或7号针头)刺入血管(图3.3-7,3.4-6)。再顺血管腔向心脏端刺进约1cm,回抽针栓,如有血表示确已刺入静脉,然后由左手拇指、食指和中指将针头和兔耳固定好。右手缓慢推注药物入血液。如感觉推注阻力很大,并且局部肿胀,表示针头已滑出血管,应重新穿刺。注意兔耳缘静脉穿刺时应尽可能从远心端开始,以便重复注射。

②小白鼠与大白鼠尾静脉注射

小白鼠尾部有三根静脉,两侧和背部各一根,两侧的尾静脉更适合于静脉注射。注射时先将小白鼠置于鼠固定筒内或扣在烧杯中,让尾部露出,用乙醇或二甲苯反复擦拭尾部或浸于40~50℃的温水中加热1分钟,使尾静脉充分扩张。术者用左手拉尾尖部,右手持注射器(以4号针头为宜)将针

头刺入尾静脉,然后左手捏住鼠尾和针头,右手注入药物(图3.4-7)。如推注阻力很大,局部皮肤变白,表示针头未刺入血管或滑脱,应重新穿刺,注射药液量以0.15 m1/只为宜。幼年大白鼠也可做尾静脉注射,方法与小白鼠相同,但成年大白鼠尾静脉穿刺困难,不宜采用尾静脉注射。

③狗前肢头静脉注射狗前肢小腿前内侧有较粗的头静脉和后肢外侧小隐静脉,是狗静脉注射较方便的部位。注射时先剪去该部位被毛,以酒精消毒。用压脉带绑扎肢体根部,或由助手握紧该部位,使头静脉充分扩张。术者左手抓住肢体末端,右手持注射器刺入静脉,此时可见明显回血,然后放开压脉带,左手固定针头,右手缓慢注入药物(图3.4-8)。

④家禽静脉注射家禽可选择翼下肱静脉或蹼间静脉(图3.4-9)进行注射给药。方法同于其它动物。

3.6 实验动物的取血与处死方法

3.6.1 实验动物的采(取)血方法

血液常被比喻为观察内环境的窗口,在需要检测内环境变化的生理实验中常需要采取血液样本。因实验动物解剖结构和体型大小差异,及所需血量的不同,取血方法不尽相同。

(1) 兔

①耳中央动脉取血乙醇涂擦耳中央动脉部位,使其充分扩张,用注射器刺入耳中央动脉抽取动脉血样,一次性取血时也可用刀片切一小口,让血液自然流出,收取血样;取血后用棉球压迫局部,予以止血。

②股动脉取血将家兔仰卧位固定。术者左手以动脉搏动为标志,确定穿刺部位,右手将注射器针头刺入股动脉,如流出血为鲜红色,表示穿刺成功,应迅速抽血,拔出针头,压迫止血。

③耳缘静脉取血耳缘静脉可供采取少量静脉血样,方法与前述耳缘静脉注射给药相似。

④心脏穿刺取血将家兔仰卧位固定,剪去心前区被毛,用碘酒消毒皮肤。术者用装有7号针头的注射器,在胸骨左缘第三肋间或在心跳搏动最显著部位刺入心脏,刺入心脏后血液一般可自动流入注射器,或者边刺入边抽吸,直至抽出血液。抽血后迅速拔出针头。心脏取血可获得较大量的血样。

[注]:如需要抗凝血样时,应事先在注射器或毛细管内加入适量抗凝剂,如枸橼酸钠或肝素,将它

门均匀浸润注射器或毛细管内壁,然后烘干备用。

(2) 大白鼠和小白鼠

①断尾取血固定动物,露出尾部,用二甲苯擦拭尾部皮肤或将鼠尾浸于45~50℃的热水中数分钟,使其血管充分扩张,然后擦干,剪去尾尖数毫米,让血自行流出,也可从尾根向尾尖轻轻挤压,促进血液流出,同时收集血样,取血后用棉球压迫止血。该方法取血量较少(图3.6-1)。

②眼球后静脉丛取血术者用左手抓持动物,拇指、中指从背侧稍用力捏住头颈部皮肤,阻断静脉回流,食指压迫动物头部以固定,右手将一特制的毛细吸管(45o)自内眦部(眼睑和眼球之间)插入,并沿眼眶壁向眼底方向旋转插进,直至有静脉血自动流入毛细吸管,取到需要的血样后,拔出吸管(图3.6-2) 。

③心脏取血适用于取血量较大时,方法与家兔心脏取血相同,但所用针头可稍短。

(3) 狗一般采用前肢头静脉取血,方法同静脉注射给药。

(4) 家禽可采用切断颈总动脉和颈静脉一次性取血,或从翼下肱静脉、蹼间静脉取血。

3.6.2 实验动物的处死方法

(1) 颈椎脱臼法颈椎脱臼常用于小白鼠,术者左手持镊子或用拇指、食指固定鼠头后部,右手捏住鼠尾,用力向后上方牵拉,听到鼠颈部喀嚓声即颈椎脱位、脊髓断裂,鼠瞬间死亡(2) 断头、毁脑法断头、毁脑常用于蛙类。可用剪刀剪去头部,或用金属探针经枕骨大孔破坏脑和脊髓而致死。大鼠和小鼠也可用断头法处死,术者需戴手套,两手分别抓住鼠头与鼠身,拉紧并暴露颈部,由助手持剪刀,从颈部剪断鼠头。

(3) 空气拴塞法术者用50~100 ml注射器,向静脉血管迅速注入空气,气体栓塞血管而使动物死亡。使猫与家兔致死的空气量为10~20 m1,狗为70~150 m1。

(4) 放血法①鼠可用摘除眼球,从眼眶动静脉大量放血而致死。

②家兔和猫可在麻醉状态下切开颈部,分离出颈总动脉,用止血钳或动脉夹夹闭两端,在其中间剪断血管后,缓慢打开止血钳或动脉夹,轻压胸部可迅速放出大量血液,动物立即死亡。

③狗在麻醉状态下,可横向切开股三角区,切断股动静脉,血液喷出,同时用自来水冲洗出血部位,防止血液凝固,几分钟后动物死亡。

3.7 组织分离和插管术

3.7.1除去被毛

在动物手术前,应将手术部位的被毛去除,以利于手术进行。根据不同实验需要可采用不同的去除被毛方法。

(1) 剪毛法这是生理教学实验中常用的方法,适合于急性实验。用弯头剪或粗剪刀,剪毛范围需大于切口的长度。剪毛时需用一手将皮肤绷平,另一手持剪刀贴于皮肤,逆着毛的朝向剪毛。剪下的毛应立即浸泡入水中,以免到处飞扬。

(2) 拔毛法大、小鼠皮下注射或家兔子耳缘静脉注射取血时常用此法。操作时,将动物固定后,用拇指、食指将所需部位被毛拔去,涂上一层凡士林,可更清楚地显示出血管。

(3) 剃毛法大动物慢性手术时采用。先用刷子沾湿肥皂水将需去毛的被毛充分浸润透,然后用剃毛刀顺被毛进行剃毛。若采用电动剃刀,则逆被毛方向剃毛。

(4) 脱毛法采用化学脱毛剂将动物的被毛脱去。此方法常用于大动物作无菌手术,观察动物局部

动物生理学实验指导

生理学实验指导 广州中医药大学生理教研室

目录 编写说明 (2) 总论 (3) 一、绪言 (3) 二、常用仪器介绍 (4) 三、生理学实验常用溶液及配制方法 (17) 四、动物实验的基本操作技术 (19) 实验一反射弧分析 (30) 刺激与反应,兴奋与兴奋性 实验二 (30) 实验三 (31) 神经干动作电位的引导 实验四红细胞渗透脆性试验 (34) 实验五红细胞沉降率(血沉)试验 (34) 实验六影响血液凝固的因素 (35) 实验七 ABO血型鉴定 (36) 实验八蛙心兴奋传导系统分析 (37) 期前收缩和代偿间歇 实验九 (38) 实验十蛙心灌流 (41) 实验十一人体心电图、心音图、动脉搏动图同步描记 (43) 实验十二兔减压神经放电 (44) 实验十三蛙肠系膜微循环的观察 (45) 实验十四动脉血压的神经和体液调节 (46) 实验十五呼吸运动的调节 (47) (49) 实验十六、胸内负压的测定 实验十七兔膈肌放电 (49) 实验十八胃肠运动的观察 (51) 实验十九尿生成的影响因素 (52) 实验二十损毁小鼠小脑的观察 (54) 实验二十一小白鼠脊髓半横切的观察 (55) 实验二十二人体脑电观察 (55) 实验二十三自行设计实验 (56)

编写说明 生理学是一门实验性科学。生理实验课是生理学教学中的重要部分。生理 学实验教学除验证课堂讲授的理论内容外,着重培养学生的实验技能,并通过实 验培养学生科学的思维方法和科学的工作态度,提高学生的科学素质。 《生理学实验指导》是根据普通高等教育中医药类规划教材《生理学教学 大纲》而编写的。编写中既注意突出中医特色,也注意遵循科学性、系统性、逻 辑性及内容的先进性等基本原则。实验内容既有人体功能的检测,也有各种动物 实验。实验项目包括了细胞、分子水平;器官、系统水平;整体水平。既有微观 分析,又有宏观综合。实验技术既保留传统的研究方法,更加强电生理技术,尤 其是注重计算机在实验中的应用。为了提高学生综合分析的能力,《指导》还增 加了学生自行设计实验项目。 《指导》的实验项目共23项,教师应根据七年制和五年制本科生理教学计 划,尽量安排实施。 由于时间仓促和水平有限,《指导》若有不足之处,亟盼教师们和同学们提 出宝贵意见。 广州中医药大学生理教研室 2001.12

动物生理学复习题

动物生理学复习题 第一章绪论 一、名词解释: 新陈代谢适应性正反馈负反馈 二、问答: 1.人体及动物生理学的研究从那几个水平进行的,它们之间有何联系? 2.生命现象的基本生理特征有哪些? 3.人体及动物的生理机能的调节方式如何?其各自的特点如何? 4.简述人体及动物生理学生理学研究的实验方法。 第二章神经肌肉生理 一、名词解释: 时值、超射、阈值、阈电位、动作电位、静息电位、兴奋性、兴奋和抑制、局部反应、易化扩散、终板电位、刺激和反应、强直收缩 二、问答题 1.简述刺激的特征? 2.阈电位的实质是什么? 3.电刺激神经时,为什么兴奋首先发生在阴极下? 4.电刺激神经干时,引发动作电位前,神经纤维膜先要产生局部反应,这种局部反应有何生理意义?其特点有哪些? 5.神经纤维兴奋后兴奋性的变化是怎样的? 6.静息电位、动作电位及其离子基础是什么? 7.简述易化扩散及其特点。 8.在神经纤维膜产生动作电位时,怎样理解Na+呈现再生式内流? 9.动作电位的组成,各组分持续时间及产生原理是什么? 10.怎样理解动作产生和传导的“全或无”性质? 11.神经冲动传导的局部电流学说是什么? 12.神经冲动传导的局部电流学说是什么? 13.跳跃式传导是怎样发生的? 14.怎样利用神经干复合动作电位来将神经纤维进行分类?这种方法一般将神经纤维分为几类? 15.神经干双动作电位是如何纪录到的?为什么一般情况下纪录到的动作电位波形是不对称的? 16.如何区别局部电位和动作电位? 17.神经肌肉接点的结构如何?兴奋在神经肌肉接点上是怎样传递的? 18.怎样理解兴奋神经肌肉接点的传递过程中,乙酰胆碱是量子性释放的? 19.在神经肌肉接点中,胆碱酯酶的生理作用是什么?去极阻滞是如何引起的? 20.三联体的结构和机能是什么? 21.简述兴奋—收缩耦联过程?

动物生理学实验设计

动物生理学实验设计 班级:09级生物技术本一班 小组成员:李水琴姚燕兵罗泉清龙伟雄 实验设计内容 一、课题名称:静脉注射和口服等量生理盐水对小白鼠尿量的影响 二、实验目的:通过对小白鼠注射和口服等量生理盐水,了解尿液生 成过程,进一步熟悉掌握肾小管的功能。 三、基本原理: 生理盐水对尿液的影响:加大了血液中水的含量,冲淡了血 液,增加人体的排尿量.肾脏为了维持体内水的平衡,通过生 成尿液来实现.尿的生成来源于血浆,通过肾小球的滤过,肾 小管的吸收,肾小管的徘汇和分泌这三个过程来完成.在这 三个过程中,除了生成尿液外,肾脏同时根据体内水分的多 少对尿量进行调节,而保持水的平衡,维持人的正常生活.

四、材料与用品:小白鼠数只、生理盐水200ml、25%氨基甲酸乙酯 溶液、纱布、棉线、注射器、试管、试管夹等五、注意事项: 1.实验前给小白鼠多喂些食物,或用导尿管向小白鼠胃中灌入40—50ml 清水,以增加其基础尿流量; 2.实验中需多次进行耳缘静脉注射,注射时应从耳缘静脉远端开始,逐步移近耳根。手术的创口不宜过大,防止动物的体温下 降,影响实验; 3.输尿管手术的难度较大,应注意防止导管被血凝块堵塞,或被扭曲而阻断尿液的流通。 六、方法与步骤: 1、小白鼠抓取、称重、麻醉:抓取3只体型相近、健康指数大致 一致的小白鼠称重,然后用25%氨基甲酸乙酯溶液(按1g/kg 或4ml/kg用量),从耳缘静脉注入,小白鼠麻醉成功后,使其仰卧并用绳固定在兔台上备用,并标号、记录数据; 2、分别对上述上三只小白鼠进行注射、口服30ml等量生理盐水 和空白对照处理;

3、在胱底部找到并分离两侧输尿管,在输尿管靠近膀胱处用细线 结扎,另穿一细线打松结备用,略等片刻,待输尿管充盈后,提起结扎细线,在管壁上用眼科剪剪一小斜口,从斜口向肾脏方向插入口径适当的预先充满生理盐水的输尿管插管,结扎固定,用试管收集尿液。 4、三小时后,每隔半小时,观察小白鼠尿量变化(滴/分),做 好记录,并绘制成曲线图观察。

动物生理学习题及参考答案

人体及动物生理学练习题(作业) 第一章绪论 一、填空题: 1正反馈是指反馈信息对起。 2反射弧是由,,,,和五个部分组成。 3体液包括和。 4反射活动包括和两大类。 5体液调节的特点是反应速度慢、作用时间。 6自身调节的特点是:调节作用较,对刺激的敏感性。 二、选择题: 1.下列各种实验中,何种属于急性实验方法。() A离体蛙心灌流实验 B狗食管瘘假饲实验 C临床胃液分析实验 D血液常规检查 2.维持机体稳态的重要途径是:() A正反馈调节 B负反馈调节 C神经调节 D 体液调节 三、名词解释: 1可兴奋组织 2稳态 3反馈 【参考答案】 一、填空题 1、控制信息加强作用 2、感受器传入神经中枢传出神经效应器 3、细胞内液细胞外液 4、条件反射非条件反射 5、持久 6、局限较小 二、选择题 1、A 2、B 三、名词解释 1可兴奋组织在接受刺激后迅速产生特殊生物电反应的组织 被称作可兴奋组织。 2稳态内环境理化性质维持相对恒定的状态,称为稳态。 3反馈:在人体生理功能自动控制原理中,受控部分不断的将 信息回输到控制部分,以纠正或调节控制部分对受控部分的 影响,从而实现自动而精确的调节,这一过程称之为反馈。 反馈有正反馈与负反馈之分。受控部分的反馈信息,对控制 部分的控制信息起促进或增强作用者称正反馈,与此相反, 反馈信息对控制信息起减弱作用者,称为负反馈。 第二章细胞的基本功能 一、填空题: 1.静息电位是外流形成的电-化学平衡电位,静息电位绝对值称超极化。 2.冲动达到神经-肌肉接头处,使突触前膜释放,使终板膜主要对的通透性增加。3.骨骼肌收缩时,胞浆内的钙离子升高,其主要来源于。4.横桥具有ATP酶的作用,当它与蛋白结合后才被激活。5.骨骼肌收缩和舒张过程中,胞浆内钙离子浓度的升高主要是由于钙离子由中释放,而钙离子浓度的降低,主要是由于肌浆网结构中活动的结果。 6.细胞去极化后向原来的极化状态恢复的过程称为。7.肌肉收缩是肌丝向肌丝滑行的结果。 8.骨骼肌细胞兴奋-收缩耦联的中介物质是。 9.钠离子泵是一种酶,它能分ATP解释出能量以形成和维持细胞内外的正常分布状态。 10.终板膜上乙酰胆碱受体通道开放时,可允许和同时通过,结果造成终板膜去极化,形成终板电位。 11.第二信使物质主要通过两条途径影响细胞功能:一是通过直接激活各种,引起磷酸化反应,二是提高胞浆中浓度。 12.如果化学信号与膜受体结合后激活了膜内的促速G 蛋白(Gs),则Gs与GTP的复合物可以增强的活性,后者可使胞浆中的ATP 迅速转化为。 13.细胞内的cAMP 可以激活一种依赖于cAMP 的,后者进而使多种功能蛋白质发生反应。 14.与cAMP 生成相关的G 蛋白有两种:一种是,它和cAMP 的复合物可增强腺苷酸环化酶的活性,一种是,它和cAMP 的复合物可减弱腺苷酸环化酶的活性。 二、选择题: 1.当静息电位的数值向膜内负值加大的方向变化时,称作膜的:()A极化 B去极化 C复极化 D反极化 E超极化2.神经-肌肉接头信息传递的主要方式是:() A化学性突触传递 B局部电流 C非典型化学性突触传递 D 非突性传递 E电传递 3.神经-肌肉接头兴奋传递的递质是:() A.NE B. Ach C.5-HT D.多巴胺 E.血管活性肠肽4.骨骼肌的肌质网终末池可储存:() A钠离子 B钾离子 C钙离子D镁离子E、Ach 5.肌细胞兴奋-收缩耦联的耦联因子是:() A钙离子B钠离子C镁离子D钾离子ENE 6.与单纯扩散相比,易化扩散的特点是:() A顺浓度梯度差转运B不消耗生物能 C需要膜蛋白的帮助 D是水溶性物质跨膜扩散的主要方式E是离子扩散的主要方式 7.常用的钠通道阻断剂是:() A同箭毒碱 B阿托品 C 四乙胺 D异搏定 E 河豚毒素8.常用的钾通道阻断剂是:() A河豚毒素 B 四乙胺 C 哇巴因 D 锰离子 E 异搏定 9.判断组织兴奋性的高低的常用指标是:()

动物生理学实验思考题

实验二:坐骨神经标本的制作 1、毁坏脑颅----单毁随。保持静止,麻醉蟾蜍,减少痛苦。 2、脑颅+脊髓----双毁随。排除中枢神经对腓肠肌的m 影响。 3、完整的标本:坐骨神经脊柱骨+坐骨神经+腓肠肌+股骨头或胫腓骨头 4、任氏液的作用:它包括钾离子,钙离子、钠离子,氯离子,碳酸氢根和磷酸二氢根等等。 维持其正常生理机能,维持细胞渗透压稳定,保持内环境稳态,相当于机体中的组织液。 5、注意事项:用锌铜弓刺激时神经干要悬空,切勿接触其他物体。如果神经干结扎不好, 通电断电时会引起腓肠肌收缩,需要重新结扎。剥过皮的保本不可和皮肤,赃物接触6、如何保持机能正常:1、金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌2、保持湿润,常加任氏 液,最好先泡一会. 实验三四:骨骼肌单收缩和收缩特性 1定义: 阈强度或阈刺激,即产生动作电位所需的最小刺激强度,作为衡量组织兴奋性高低的指标。强度小于阈值的刺激,称为阈下刺激;阈下刺激不能引起兴奋或动作电位,但并非对组织细胞不产生任何影响。 最适刺激强度 有了阈刺激也就是刺激导致的电位变化已经达到了阈电位,这样就会有动作电位的产生,从而形成局部电位 因为骨骼肌收缩是许多神经纤维共同作用的结果,当刺激在一定范围内增大时,兴奋的神经纤维增多,多支配的骨骼肌肌纤维也会随之增多,收缩增强 活的神经肌肉组织具有兴奋性,能接受刺激发生兴奋反应。标志单一细胞兴奋性大小的刺激指标一般常用阈值即强度阈值表示,阈值是指在刺激作用时间和强度-时间变化率固定不变的条件下,能引起组织细胞兴奋所需的最小刺激强度,达到这种强度的刺激称为阈刺激。单一细胞的兴奋性是恒定的,但是不同细胞的兴奋性并不相同。因此,对于多细胞的组织来说,在一定范围内,刺激与反应之间表现并非“全或无”的关系。坐骨神经和腓肠肌是多细胞组织,当单个方波电刺激作用于坐骨神经或腓肠肌时,如果刺激强度太小,则不能引起肌肉收缩,只有当刺激强度达到阈值时,才能引起肌肉发生最微弱的收缩,这时引起的肌肉收缩称阈收缩(只有兴奋性高的肌纤维收缩)。以后随着刺激强度的增加,肌肉收缩幅度也相应增大,这种刺激强度超过阈值的刺激称为阈上刺激。当刺激强度增大到某一数值时,肌肉出现最大收缩反应。如再继续增大刺激强度,肌肉的收缩幅度不再增大。这种能使肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度称为最适强度,具有最适强度的刺激称为最大刺激。最大刺激引起的肌肉收缩称最大收缩(所有的肌纤维都收缩)。由此可见,在一定范围内,骨骼肌收缩的大小取决于刺激的强度,这是刺激与组织反应之间的一个普遍规律。 2单收缩 潜伏期、动作电位产生及传导至神经肌肉接头,再到肌纤维 收缩期、 舒张期 3两个刺激:刺激间隔小于单收缩的时程而大于不应期,则出现两个收缩反应的重叠,称为收缩的总和。 4串刺激:当后一收缩发生在前一收缩的收缩期,各自的收缩则完全融合肌肉出现持续的收缩状态,称为完全强直收缩。

动物生理学实验报告思考题答案

竭诚为您提供优质文档/双击可除动物生理学实验报告思考题答案 篇一:动物生理学实验报告 实验日期:年月日室温:大气压: 实验序号:一实验名称:动物生理学实验基础知识介绍 一、实验目的 掌握生理学实验的基本方法和技术,了解是生理学实验设计的基本原则,培养科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风,通过书写实验报告,提高分析、归纳问题及文字表达能力。 二、实验原理 生理学是建立在实验和观察基础上的学科,生理学实验是生理学理论知识的依据与来源。生理学实验方法一般可分为离体实验法和在体实验法两类。在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。生理学实验仪器一般由刺激系统、探测系统、信号调节系统和记录系统四大部分组成。 三、主要仪器、试剂、材料及装置图 1、手术器械:手术刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼

科镊、毁髓针、止血钳、玻璃分针等2、生理仪器:生物信 息采集系统、刺激器、示波器、传感器、肌槽、蛙心夹等3、试剂:任氏液、台氏液、乙酰胆碱、肾上腺素等 四、实验步骤、现象及记录 1、教师提出生理学实验的要求 2、讲解生理学的常规实验方法 3、展示生理学仪器和器械,并简单讲解用途 五、实验结果及数据处理 六、实验讨论及思考题解答 1、生理学实验的重要性在于何地?生理学实验有什么 具体的要求和规则? 答:生理学实验的重要性在于学习生理学的实验方法及科学的思维方法,有助于提高学生的实验能力、分析能力、创新能力和科学素养。生理学实验要求:实验前认真预习实验指导,复习相关理论知识;实验中,认真听讲,按要求进行各项实验操作,仔细认真求实的记录实验数据;实验后,整理实验台面,处理实验废弃物和实验动物,检查实验设备及器械,认真分析实验数据,撰写实验报告。 2、生理学实验报告的一般格式、内容和要求是什么? 答:格式与内容参照楚雄师院化生系化学与生命科学实验室实验报告的标准格式内容。填写实验报告要求数据真实,不允许编造数据,认真分析总结实验中的问题。

人体解剖及动物生理学实验报告神经干复合动作电位

人体解剖及动物生理学实验报告 神经干复合动作电位 【实验题目】 神经复合动作电位 1、蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)阈值和最大幅度的测定 2、蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)传导速度的测定 3、蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)不应期的测定 【实验目的】 确定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)的 1、临界值和最大值 2、传导速度 3、不应期(包括绝对不应期和相对不应期) 【实验原理】 神经系统对维持机体稳态起着重要作用,动作电位(AP)是神经系统进行通信联系所采用的信号。多个神经元的轴突集结成束形成神经,APs沿感觉神经经外周传向中枢或沿运动神经由中枢传向外周。坐骨神经干由上百根感觉神经和运动神经组成,分别联系腿部的感受器和效应器(骨骼肌)。如果电刺激一根离体的坐骨神经干,通过细胞外引导方式,就能记录到神经干复合动作电位(CAP)。一个CAP是一系列具有不同兴奋性的神经纤维产生的多个AP的总和。刺激强度越大,兴奋的神经纤维数目就越多,CAP的幅度也就越大。与胞内引导得到的单细胞AP相比,CAP是双相电位,逐级递增(非全或无),并且幅度较小。 阈电位是指一个刚刚能观测到的CAP,所对应的刺激为阈刺激。在一定范围内增加刺激强度,CAP幅度相应增大。最大CAP所对应的最小刺激电位即最大刺激。 动作电位可以沿神经以一定的速度不衰减地传导,传导速度的快慢基于多种因素,这些因素决定了生物体对其坏境的适应性。它们包括神经的直径、有无髓鞘、温度等等。

神经在一次兴奋过程中,其兴奋性将发生一个周期性的变化,最终恢复正常。兴奋的周期性变化,依次包括绝对不应期、相对不应期等等。绝对不应期内,无论多么强大的刺激都不能引起神经再一次兴奋;相对不应期内,神经兴奋性较低,较大的刺激能够引起兴奋。绝对不应期决定了神经发放冲动(动作电位)的最高频率,保证了动作电位不能叠加(区别于局部电位),以及单向传导(只能有受刺激部位向远端传导,不能返回)的特性。不应期的产生依赖于细胞膜上特定离子通道的特点,如钠、钾离子通道。 【实验方法】 1、制作蟾蜍坐骨神经干标本 (1)双毁髓处死蟾蜍后,剥去皮肤,暴露腰骶丛神经,游离大腿肌肉之间的坐骨神经干及其下行到小腿的两个分支:胫神经和腓神经,三段结扎,剪去无关分支后离体。注意保持神经湿润。 (2)将神经搭于标本盒内,保证神经与电极充分接触,中枢端接触刺激电极S1和S2,外周端接触记录电极R1-R5,之间接触接地电极。 (3)刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极S1和S2,插头接生物信号采集系统RM6240的刺激输出插口;信号输入倒显得红色和绿色夹子分别连接记录电极(绿色夹子在前,引导出正向波形,即出现的第一个波峰向上),黑色夹子连接接地电极,插头接通道A、蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)临界和最大幅度的确定 (1)打开信号采集软件,从“实验”菜单中选取“神经干动作电位”,出现自动设置的界面,各项参数已设置好,界面中只有一个采集通道,对应仪器面板上的通道1(因此信号输入线应连接在通道1)。 (2)检查装置链接正确,确定装置是否正常工作,以及神经是否具有活性。采用刺激强度1V,刺激时程0.2ms,延时5ms,刺激模式为单刺激。选择“同步触发”,按下“开始刺激”后,正常情况下屏幕上会出现一个双相电位即CAP。 (3)降低刺激强度,确定CAP的阈电位。记录刺激阈值及CAP幅度(波峰与波谷之间的差值)。 (4)以0.05V或更小的间隔,逐渐增大刺激强度,观察CAP幅度的变化,同时,记录刺激电位及对应的CAP幅度,直到CAP达到稳定,即最大值(神经标本在正常生理活性时,1V 以内的刺激强度即可引起最大的CAP)。

动物生理学实验报告

专业班级:学号:姓名:同组人: 实验日期:年月日室温:大气压: 实验序号:一实验名称:动物生理学实验基础知识介绍 一、实验目的 掌握生理学实验的基本方法和技术,了解是生理学实验设计的基本原则,培养科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风,通过书写实验报告,提高分析、归纳问题及文字表达能力。 二、实验原理 生理学是建立在实验和观察基础上的学科,生理学实验是生理学理论知识的依据与来源。生理学实验方法一般可分为离体实验法和在体实验法两类。在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。生理学实验仪器一般由刺激系统、探测系统、信号调节系统和记录系统四大部分组成。 三、主要仪器、试剂、材料及装置图 1、手术器械:手术刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、止血钳、玻璃分针等 2、生理仪器:生物信息采集系统、刺激器、示波器、传感器、肌槽、蛙心夹等 3、试剂:任氏液、台氏液、乙酰胆碱、肾上腺素等 四、实验步骤、现象及记录 1、教师提出生理学实验的要求 2、讲解生理学的常规实验方法 3、展示生理学仪器和器械,并简单讲解用途 五、实验结果及数据处理 六、实验讨论及思考题解答 1、生理学实验的重要性在于何地生理学实验有什么具体的要求和规则 答:生理学实验的重要性在于学习生理学的实验方法及科学的思维方法,有助于提高学生的实验能力、分析能力、创新能力和科学素养。生理学实验要求:实验前认真预习实验指导,复习相关理论知识;实验中,认真听讲,按要求进行各项实验操作,仔细认真求实的记录实验数据;实验后,整理实验台面,处理实验废弃物和实验动物,检查实验设备及器械,认真分析实验数据,撰写实验报告。 2、生理学实验报告的一般格式、内容和要求是什么 答:格式与内容参照楚雄师院化生系化学与生命科学实验室实验报告的标准格式内容。填写实验报告要求数据真实,不允许编造数据,认真分析总结实验中的问题。 3、举例5种常用手术器械的名称、持握方法和用途。 4、举例3种生理学实验常用仪器设备的性能和主要用途。

人体及动物生理学实验报告二

实验题目:骨骼肌生理姓名:王超杰 合作者: 唐用 组别:第一组 日期:5月8日 室温:24.5℃

【实验目的】: 确定肌肉收缩的 A、阈水平、最大收缩和刺激强度与肌肉收缩幅度之间的关系 B、三个时期:潜伏期、缩短期和舒张期 C、刺激频率与收缩之间的关系 【实验方法】: 1、双毁髓法处死蟾蜍,剥离神经干保留腓肠肌和膝关节。结扎,保持湿润。将标本放入标 本盒内,连接张力换能器。在试验过程中注意标本休息,连接RM6240生物信号采集系统。 2、选择菜单栏刺激强度对骨骼肌的收缩的影响,更改相应数据,测量肌肉收缩的阈水平、 最大收缩和刺激强度与肌肉收缩幅度之间的关系 1)连接通道一,检查神经的活性,测试仪器是否正常工作 2)开始记录,可适当调零,开始刺激 3)当收缩幅度不再变化时,停止刺激,停止记录 4)应用测量工具,确定收缩的阈水平和最大收缩和其对应的最小刺激强度,记录下收 缩幅度,刺激和放大器的参数设置,绘制刺激强度与肌肉收缩幅度之间的关系曲线3、测量肌肉收缩的三个时期:潜伏期、缩短期和舒张期 1)展开上一实验最大刺激强度对应的收缩,测量三个时期 2)复至少三次 3)计算平均值和标准差 4、测量刺激频率与收缩之间的关系 1)打开信号采集软件,关闭通道3 和4,保留通道1 和2,分别对应肌肉收缩信号和肌 肉动作电位信号。示波状态下修改参数设置:采集频率20kHz;通道1:通道模式为 张力,扫描速度400ms/div,灵敏度7.5g (可根据收缩幅度合理选择),放大器时间常数 设为直流,滤波频率100Hz;通道2:通道模式为生物电,扫描速度400ms/div,灵敏 度2mv,放大器时间常数0.001s,滤波频率1kHz。刺激模式为串单单刺激,波宽1ms, 延时20ms,选择一定的刺激脉冲个数(10-60 个,避免让肌肉受到过多的刺激)和刺激 强度(阈上刺激强度即可,不必达到最大刺逐渐减小刺激间隔,直到第二个CAP开始 减小,进入相对不应期 2)开始记录,开始刺激 3)观察肌肉收缩的总和现象,确定肌肉收缩的最小融合频率,观察肌肉动作电位 与收缩的关系,测量并记录不同频率引起肌肉收缩的幅度 【实验结果与讨论】:见附图一:Physiology Lab #4 Skeletal Muscle Physiology 实验A:测量肌肉收缩的阈水平、最大收缩和刺激强度与肌肉收缩幅度之间的关系

动物生理学课后习题

第一章绪论 判断: 1.只要刺激达到一定强度,组织一定会发生反应。 2.组织兴奋性越高,其所需的刺激阈值越大。 3.组织对刺激反应越快,其兴奋性越高。 选择:1 以下关于兴奋性的概念,哪一项正确? A 兴奋性可分为兴奋和抑制 B 兴奋性是组织细胞对刺激发生反应的特性。 C 兴奋性是组织细胞能兴奋的特性。 D 兴奋性是组织细胞受刺激发生兴奋的能力。 2 . 衡量组织兴奋性的高低指标是 A 引起动作电位所需刺激的强度 B 动作电位的大小 C 动作电位的传导速度 3 . 组织器官的活动加强称为: A 兴奋性 B 兴奋 C 紧张 4. 阈刺激是:A 能引起反应的刺激 B能引起反应的最大刺激强度 C能引起反应的最小刺激强度 填空:1.刺激必须具备以下三个条件,即()、()和(),才能引起反应。 2.生命活动的基本特征包括()。 3.引起细胞兴奋的刺激阈值越小,其兴奋性()。 4.动物生理学的基本研究方法是()方法,归纳起来可分为()和()两类。 5.急性实验可分为()和()两类。 6.一次刺激后,细胞兴奋性变化的四个阶段依次为()、()、()和()。 思考题:1、*简述细胞兴奋性的变化。 2、简述刺激与反应的关系。试述神经细胞兴奋时兴奋性变化的过程及其生理意义. (1)过程: 兴奋性发生周期性变化,依次为:绝对不应期,相对不应期,超常期和低常期。①绝对不应期:兴奋性为零,阈刺激无限大,钠通道失活。②相对不应期:兴奋性从无到有,阈上刺激可再次兴奋,钠通道部分复活。③超常期:兴奋性高于正常,阈下刺激即可引起兴奋,膜电位接近阈电位水平,钠通道基本复活。④低常期:兴奋性低于正常,钠泵活动增强,膜电位低于静息电位水平。 (2)生理意义:由于绝对不应期的存在,动作电位不会融合。 作业: 判断:1. 与体液调节相比,神经调节的特点是迅速而精细。 2.机体机能的稳定状态是正反馈的调节结果。 3. 机体最重要最完善的调节方式是神经--体液调节。 填空:1.凡是反馈信息抑制神经调节或体液调节的称为()反馈;反之,称为()反馈。2.机体功能的调节有()、()和()三种方式,其中()是最重要最完善的

动物生理学实验

?麻醉注意事项 ?1、麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径。 ?2、密切观察动物麻醉状态及反应,以便准确判断麻醉深度。 ?3、如麻醉较浅,动物出现挣扎或呼吸急促等,需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一。 ?4、麻醉过程中,应随时保持呼吸道通畅,并注意保温。 ?5、在手术操作复杂、创伤大、实验时间较长或麻醉深度不理想等情况下,可配合局部浸润麻醉或基础麻醉。 ?6、实验中注意液体的输入量及排出量,维持体液平衡,防止酸中毒及肺水肿的发生。 实验一血液的组成 [实验原理] 血液是由液态的血浆和悬浮于血浆中的血细胞组 成。血细胞占全血的体积比称为红细胞 压积,又叫红细胞比容。 要求与思考题 1.血浆与血清有哪些区别? 血浆与血清的区别是不含纤维蛋白原,某些凝血因子以及血小板释放因子 实验二血红蛋白的测定 [实验原理] 由于血红蛋白的颜色,常随结合的氧量多少而改变,因而不利于比 色,但血红蛋白与稀盐酸作用后,能使亚铁血红素变成不易变色的棕色

的高铁血红蛋白,用水稀释后可与标准比色板比色,从而测得血红蛋白含量。 [注意事项] 1.血液和盐酸作用的时间不可少于10分钟,否则,血红蛋白 不能充分转变成高铁血红蛋白,使结果偏低。 2.加蒸馏水时,开始可以稍多加几滴,随后则不能过快,以 防稀释过头。 3.比色时最好在自然光下,而不应在黄色光下进行,以免影 响结果。 4.整个实验过程中均应注意避免起泡 实验三红细胞的脆性试验 [实验原理] 如环境渗透压继续下降,红细胞会因继续膨胀而破裂, 释放血红蛋白,称之为溶血。红细胞膜对低渗溶液具有一 定的抵抗力,红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大,红细胞在 低渗溶液中越不容易发生溶血,即红细胞渗透脆性越小。 凡上层溶液开始微呈淡红色,而极大部分红细胞下沉,称开始溶血或最小抗力(红细胞的最小抵抗力)。 凡液体呈均匀红色,管底无红细胞下沉,则称完全溶血或最大抗力(红细胞的最大抵抗力) [注意事项]

动物生理学实验思考题

实验二:坐骨神经标本得制作 1、毁坏脑颅---—单毁随.保持静止,麻醉蟾蜍,减少痛苦. 2、脑颅+脊髓-—--双毁随。排除中枢神经对腓肠肌得m 影响。 3、完整得标本:坐骨神经脊柱骨+坐骨神经+腓肠肌+股骨头或胫腓骨头 4、任氏液得作用:它包括钾离子,钙离子、钠离子,氯离子,碳酸氢根与磷酸二氢根等等.维 持其正常生理机能,维持细胞渗透压稳定,保持内环境稳态,相当于机体中得组织液。 5、注意事项:用锌铜弓刺激时神经干要悬空,切勿接触其她物体。如果神经干结扎不好,通 电断电时会引起腓肠肌收缩,需要重新结扎。剥过皮得保本不可与皮肤,赃物接触 6、如何保持机能正常:1、金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌2、保持湿润,常加任氏 液,最好先泡一会、 实验三四:骨骼肌单收缩与收缩特性 1定义: 阈强度或阈刺激,即产生动作电位所需得最小刺激强度,作为衡量组织兴奋性高低得指标. 强度小于阈值得刺激,称为阈下刺激;阈下刺激不能引起兴奋或动作电位,但并非对组织细胞不产生任何影响。? 最适刺激强度 有了阈刺激也就就是刺激导致得电位变化已经达到了阈电位,这样就会有动作电位得产生,从而形成局部电位 因为骨骼肌收缩就是许多神经纤维共同作用得结果,当刺激在一定范围内增大时,兴奋得神经纤维增多,多支配得骨骼肌肌纤维也会随之增多,收缩增强 活得神经肌肉组织具有兴奋性,能接受刺激发生兴奋反应。标志单一细胞兴奋性大小得刺激指标一般常用阈值即强度阈值表示,阈值就是指在刺激作用时间与强度—时间变化率固定不变得条件下,能引起组织细胞兴奋所需得最小刺激强度,达到这种强度得刺激称为阈刺激。单一细胞得兴奋性就是恒定得,但就是不同细胞得兴奋性并不相同。因此,对于多细胞得组织来说,在一定范围内,刺激与反应之间表现并非“全或无"得关系.坐骨神经与腓肠肌就是多细胞组织,当单个方波电刺激作用于坐骨神经或腓肠肌时,如果刺激强度太小,则不能引起肌肉收缩,只有当刺激强度达到阈值时,才能引起肌肉发生最微弱得收缩,这时引起得肌肉收缩称阈收缩(只有兴奋性高得肌纤维收缩).以后随着刺激强度得增加,肌肉收缩幅度也相应增大,这种刺激强度超过阈值得刺激称为阈上刺激。当刺激强度增大到某一数值时,肌肉出现最大收缩反应。如再继续增大刺激强度,肌肉得收缩幅度不再增大。这种能使肌肉发生最大收缩反应得最小刺激强度称为最适强度,具有最适强度得刺激称为最大刺激.最大刺激引起得肌肉收缩称最大收缩(所有得肌纤维都收缩)。由此可见,在一定范围内,骨骼肌收缩得大小取决于刺激得强度,这就是刺激与组织反应之间得一个普遍规律. 2单收缩 潜伏期、动作电位产生及传导至神经肌肉接头,再到肌纤维 收缩期、 舒张期 3两个刺激:刺激间隔小于单收缩得时程而大于不应期,则出现两个收缩反应得重叠,称为收缩得总与。 4串刺激:当后一收缩发生在前一收缩得收缩期,各自得收缩则完全融合肌肉出现持续得收缩状态,称为完全强直收缩。 5注意事项:为保持机能稳定,制作好标本后要在任氏液中浸泡10分钟,试验过程中要不断滴加任氏液为避免肌肉过度疲劳,刺激要有间隔时间。

动物生理学课后习题

动物生理学课后习题 第一章绪论判断:1.只要刺激达到一定强度,组织一定会发生反应。 2.组织兴奋性越高,其所需的刺激阈值越大。3.组织对刺激反应越快,其兴奋性越高。选择:1 以下关于兴奋性的概念,哪一项正确? A 兴奋性可分为兴奋和抑制 B 兴奋性是组织细胞对刺激发生反应的特性。 C 兴奋性是组织细胞能兴奋的特性。 D 兴奋性是组织细胞受刺激发生兴奋的能力。 2 . 衡量组织兴奋性的高低指标是 A 引起动作电位所需刺激的强度 B 动作电位的大小C 动作电位的传导速度 3 . 组织器官的活动加强称为: A 兴奋性B 兴奋 C 紧张4. 阈刺激是:A 能引起反应的刺激 B 能引起反应的最大刺激强度 C 能引起反应的最小刺激强度填空:1.刺激必

须具备以下三个条件,即、和,才能引起反应。2.生命活动的基本特征包括。3.引起细胞兴奋的刺激阈值越小,其兴奋性。 4.动物生理学的基本研究方法是方法,归纳起来可分为和两类。 5.急性实验可分为和两类。 6.一次刺激后,细胞兴奋性变化的四个阶段依次为、、和。思考题:1、*简述细胞兴奋性的变化。2、简述刺激与反应的关系。试述神经细胞兴奋时兴奋性变化的过程及其生理意义. (1) 过程:兴奋性发生周期性变化,依次为:绝对不应期,相对不应期,超常期和低常期。 ①绝对不应期:兴奋性为零,阈刺激无限大,钠通道失活。②相对不应期:兴奋性从无到有,阈上刺激可再次兴奋,钠通道部分复活。③超常期:兴奋性高于正常,阈下刺激即可引起兴奋,膜电位接近阈电位水平,钠通道基本复活。 ④低常期:兴奋性低于正常,钠泵活动增强,膜电位低于静息电位水平。(2)生理意义:于绝对不应期的存在,动作

动物生理学实验指导(生院)

动物生理学实验指导 张素华编 动物科技学院生理实验室

第一部分实验总论 第一节绪论 一、实验目标与要求 通过实验使学生初步掌握生理学实验的一些基本操作技能,学会检查人体功能活动的一些测试方法,验证和巩固某些基本理论知识,培养认真、负责、严谨求实的态度和团结协作的良好作风,增强对事物进行观察、比较、分析和综合的能力。为此要求: 1.实验前应仔细阅读实验指导,了解本次实验的目标、原理、步骤等,并复习有关理论知识。 2.实验时要按照实验指导及教师的指示进行操作和观察,客观、及时地记录实验现象或结果,并联系讲授内容进行思考。 3.实验后须及时整理实验记录,分析实验结果,按照规定格式书写实验报告,按时交负责教师评阅。 二、实验报告书写要求 因实验内容不同,可以填表、叙述等形式写出报告。书写要整洁,文字应简练、通顺。首先注明班级、组别、姓名、实验日期,写出实验题目、实验目标等项目,然后着重书写实验结果以及分析和讨论。并要求: 1.实验结果必须凭自己观察,随时记录,如实填写。有曲线记录的,经必要注明后,剪贴在实验报告上。 2.分析和结论实验结果的分析,是根据学过的理论知识对结果进行解释。如果出现非预期的结果时,应分析其可能的原因。实验结论,是从实验结果中归纳出概括性的判断,即本次实验所验证的理论概要。

三、生理实验室规则 1.须携带实验指导、记录本等文具准时进实验室,并穿戴实验衣帽。 2.遵守学习纪律,保持实验室安静;严肃、认真、安全地进行实验,不做与本实验无关的事情。 3.实验室的一切物品,未经教师许可,不得擅自取用或带出。 4.各组应用的实验器材、物品,在使用前应查点清楚,不得随意与别组调换;如遇机件不灵或损坏时,应报告教师,以便及时修理或更换。 5.节约水电及一切消耗性物品,爱护仪器和用具。损坏物品应赔偿。 6.保持实验室整洁。公共器材和药品用毕后立即归还原处,动物尸体和废弃物应放到指定地点。 7.实验完毕,应将实验器材、用品和实验台收拾干净,查点清楚,放还原处。各小组轮流搞好实验室的清洁卫生,关好窗户、水电,经教师检查无误后,方可离开。

生理实验报告

人体解剖及动物生理学实验报告 实验名称神经干复合动作电位 姓名 学号 系别 组别 同组姓名 实验室温度 实验日期2015年4月23日

一、实验题目 蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP) A蟾蜍坐骨神经干CAP阈值和最大幅度的确定 B蟾蜍坐骨神经干CAP传导速度的确定 C蟾蜍坐骨神经干CAP不应期的确定 二、实验目的 确定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)的 (1)临界值和最大值 (2)传导速度 (3)不应期(相对不应期、绝对不应期) 三、实验方法 蟾蜍坐骨神经标本的制作 1.双毁髓处死蟾蜍后,剥去皮肤,暴露腰骶丛神经,游离大腿肌肉之间的坐骨神经 干及其下行到小腿的两个分支:胫神经和腓神经,三段结扎,剪去无关分支后离体。注意保持神经湿润。 2.将神经搭于标本盒内,保证神经与电极充分接触,中枢端接触刺激电极S1和S2, 外周端接触记录电极R1-R2,之间接触接地电极。 3.刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极S1和S2,插头接生物信号采集系 统RM6240的刺激输出插口;信号输入倒显得红色和绿色夹子分别连接记录电极(绿色夹子在前,引导出正向波形,即出现的第一个波峰向上),黑色夹子连接接地电极,插头接通道1. A.蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(CAP)临界和最大幅度的确定 (1)打开信号采集软件,从“实验”菜单中选取“神经干动作电位”,出现自动设置的界面,各项参数已设置好,界面中只有一个采集通道,对应仪器面板上 的通道1(因此信号输入线应连接在通道1)。 (2)确定装置是否正常工作,以及神经是否具有活性。采用较大的刺激强度,1V,刺激时程0.2ms,延时5ms,刺激模式为但刺激。选择“同步触发”,按下“开 始刺激”后,正常情况下屏幕上会出现一个双相电位即CAP。

动物生理学实验指导书

生理学实验指导

目录 实验一神经生理实验 1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备 1.2 神经干动作电位引导 1.3 神经传导速度的测定实验二血液生理实验 2.1 红细胞计数 2.2 红细胞渗透脆性试验实验三循环生理实验之蛙心起搏点及心肌特性 3.1 蛙心起搏点 3.2 心肌特性 实验四循环生理实验之蛙心灌流 4.1 蛙心灌流 实验五循环生理实验之动脉血压的直接测定及其影响因素 5.1 动脉血压的直接测定及其影响因素 实验六消化生理实验 7.1 胃肠运动的直接观察 7.2 小肠吸收和渗透压的关系 7.3 离体肠段运动描记 实验七泌尿生理实验 8.1 尿的分泌及其影响与调节 实验八泌尿、循环、呼吸生理综合实验(综合计划 07级)实验九肌肉生理实验 9.1 阈刺激、阈上刺激与最大刺激 9.2 肌肉的单收缩 9.3 肌肉的强直收缩和收缩总和

实验一神经生理实验 年月日星期 1.1 蛙坐骨神经腓肠肌标本制备 目的和原理:蛙类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似,它的离体组织所需要的生活条件又比较简单,易于控制和掌握,因此在实验中常用蟾蜍或蛙坐骨神经腓肠肌标本来研究神经肌肉的一般生理,如:神经干动作电位引导、神经传导速度测定、肌肉收缩的机能等。 实验对象:蟾蜍或蛙 实验器材和药品:中式剪子,眼科剪,眼科镊,蛙板,玻璃分针(玻璃勾),探针,锌铜弓,培养皿,大头针,棉花,线,任氏液,纱布等。 实验方法: 1、破坏脑脊髓取一只蟾蜍或蛙,用自来水冲洗干净。保定好,用探针从枕骨大孔垂直刺入,然后向前刺入颅腔,左右搅动捣毁脑组织,再向后刺入脊椎管捣毁脊髓。此时蟾蜍四肢松软,呼吸消失,表示脑脊髓破坏完全。 2、剪除躯干上部及内脏,提起蟾蜍的背部,在骶髂关节水平以上0.5-1.0厘米处剪断脊柱(见图),用左手捏住蟾蜍骶髂关节以下的脊柱,使蟾蜍头与内脏自然下垂,右手持中式剪刀,沿脊柱两侧剪除皮肤肌肉和一切内脏(注意勿损伤坐骨神经),仅留骶尾联合以下的后肢、骶骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。

动物生理学实验讲义

动物生理学实验讲义 陈海燕 樊晓丽编 10-407 丽水学院生态学院 二○一七年二月

目录 第一部分 解剖生理学实验常用器械及溶液配制 1 1 手术器械及活体解剖技术 1 2 生理学常用实验仪器及用品 15 3 常用生理溶液的配制 22 第二部分 必做实验内容 第一章 人体的运动系统 实验1 人体全身骨骼和骨骼肌系统(基础性) 23 第二章 细胞的兴奋性与生物电现象 实验2 牛蛙坐骨神经腓肠肌标本制备(基础性) 25 第三章 神经系统与肌肉系统 实验3 不同刺激强度和频率对骨骼肌收缩的影响(基础性) 28 第四章 感觉器官 实验4 瞳孔反射和视野盲点测定 31 第五章血液与循环系统 实验5血型鉴定;血涂片的制作(基础性)34 实验6 蛙心搏动观察、心室期前收缩和代偿间歇实验(基础性) 36 第五章 呼吸系统 实验7 家兔呼吸运动的调节(综合性)39 第六章 循环系统 实验8 家兔动脉血压的神经-体液调节(综合性)42 附录 主要参考文献 46

第一部分 解剖生理学实验常用器械及溶液配制 第一节 手术器械及活体解剖技术 生理学实验是以活的动物或人体作为观察对象和实验材料的。在动物实验中,活体解剖技术对生理学实验的成败起着至关重要的作用。在实验过程中,学生应着重于学习、掌握些操作技术,以提高自己的动手能力。 生理学实验方法虽然多种多样,但一般可分为离体实验法和在体实验法两类。离体实验法是将要研究的器官或组织从活的或刚处死的动物体上取出,置于接近正常生理条件的人工环境中,以观察、研究其生理机能。如离体心脏的灌流、离体肠段的活动以及用坐骨神经-腓肠肌标本等实验。在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。急性在体实验法是动物在麻醉或毁坏脑或脊髓的状态下,用手术的方法暴露某一器官,观察、研究其机能及变化规律。如在体心脏活动的观察、肾脏泌尿机能的研究等。只能在一定时间内进行观察研究,而且实验后动物不能存活。慢性实验法是在特定条件下,以完整而清醒的动物为对象的实验方法,可以在较长的时间内,连续地反复观察动物的某一生理机能。此法常需要先在动物体上施行某种无菌外科手术,如胃肠道瘘管术,或在机体的一定部位埋藏电极、或切除某一器官等,须待动物恢复健康后方可进行实验。这种实验花费时间较长,动物需要特殊的护理,在基础生理学实验中较少安排。 一、手术器械及其用途 (一)常用手术器械 根据生理学实验的需要,常用手术器械包括手术刀、手术剪、金冠剪、手术镊、眼科剪、蛙类毁髓针、玻璃分针等。 1.手术刀 主要用于切开皮肤或脏器。常用手术刀为刀柄和刀片组合式,也有刀柄和刀片相连的。根据手术的部位与性质,可以选用大小、形状不同的手术刀片。常用的执刀方法有 4 种(1)执弓式这是一种常用的执刀方法,动作范围广而灵活,用于腹部、颈部或股部的皮肤切口。 (2)执笔式此法用力轻柔而操作精巧,用于切割短小而精确的切口,如解剖神经、血管,作腹膜小切口等。 (3)握持式常用于切割范围较广、用力较大的切口,如切开较长的皮肤、截肢等。 (4)反挑式此法多使用刀口向弯曲面的手术刀片,常用于向上挑开组织,以免损伤

动物生理学实验思考题

实验二:坐骨神经标本的制作 1、毁坏脑颅 ----单毁随。保持静止,麻醉蟾蜍,减少痛苦。 2、脑颅+脊髓----双毁随。排除中枢神经对腓肠肌的m 影响。 3、完整的标本:坐骨神经脊柱骨+坐骨神经+腓肠肌+股骨头或胫腓骨头 4、任氏液的作用:它包括钾离子,钙离子、钠离子,氯离子,碳酸氢根和磷酸二氢根等等。 维持其正常生理机能,维持细胞渗透压稳定,保持内环境稳态,相当于机体中的组织液。 5、注意事项:@用锌铜弓刺激时神经干要悬空,切勿接触其他物体。@如果神经干结扎不好, 通电断电时会引起腓肠肌收缩,需要重新结扎。@剥过皮的保本不可和皮肤,赃物接触 6、如何保持机能正常:1、金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌2、保持湿润,常加任氏 液,最好先泡一会. 实验三四:骨骼肌单收缩和收缩特性 1定义: 阈强度或阈刺激,即产生动作电位所需的最小刺激强度,作为衡量组织兴奋性高低的指标。 强度小于阈值的刺激,称为阈下刺激;阈下刺激不能引起兴奋或动作电位,但并非对组织细 胞不产生任何影响。 最适刺激强度 有了阈刺激也就是刺激导致的电位变化已经达到了阈电位,这样就会有动作电位的产生,从 而形成局部电位 因为骨骼肌收缩是许多神经纤维共同作用的结果,当刺激在一定范围内增大时,兴奋的神经 纤维增多,多支配的骨骼肌肌纤维也会随之增多,收缩增强 活的神经肌肉组织具有兴奋性,能接受刺激发生兴奋反应。标志单一细胞兴奋性大小的 刺激指标一般常用阈值即强度阈值表示,阈值是指在刺激作用时间和强度-时间变化率固定 不变的条件下,能引起组织细胞兴奋所需的最小刺激强度,达到这种强度的刺激称为阈刺激。 单一细胞的兴奋性是恒定的,但是不同细胞的兴奋性并不相同。因此,对于多细胞的组织来 说,在一定范围内,刺激与反应之间表现并非“全或无”的关系。坐骨神经和腓肠肌是多细 胞组织,当单个方波电刺激作用于坐骨神经或腓肠肌时,如果刺激强度太小,则不能引起肌 肉收缩,只有当刺激强度达到阈值时,才能引起肌肉发生最微弱的收缩,这时引起的肌肉收 缩称阈收缩(只有兴奋性高的肌纤维收缩)。以后随着刺激强度的增加,肌肉收缩幅度也相 应增大,这种刺激强度超过阈值的刺激称为阈上刺激。当刺激强度增大到某一数值时,肌肉 出现最大收缩反应。如再继续增大刺激强度,肌肉的收缩幅度不再增大。这种能使肌肉发生 最大收缩反应的最小刺激强度称为最适强度,具有最适强度的刺激称为最大刺激。最大刺激 引起的肌肉收缩称最大收缩(所有的肌纤维都收缩)。由此可见,在一定范围内,骨骼肌收 缩的大小取决于刺激的强度,这是刺激与组织反应之间的一个普遍规律。 2单收缩 潜伏期、动作电位产生及传导至神经肌肉接头,再到肌纤维 收缩期、 舒张期 3两个刺激:刺激间隔小于单收缩的时程而大于不应期,则出现两个收缩反应的重叠,称为 收缩的总和。 4串刺激:当后一收缩发生在前一收缩的收缩期,各自的收缩则完全融合肌肉出现持续的收 缩状态,称为完全强直收缩。

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