高中生物 第1部分 微生物的利用阶段整合提升 浙科版选修1

阶段整合提升

网络构建

一、微生物培养基的配方

1．基本成分

虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源、无机盐，原因是：微生物的化学组成与其他生物大体相同，也是主要由C、H、O、N、P、S 等元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物，归纳为碳源、氮源、无机盐、水四大类营养。

2．培养基配方中四种营养成分比较

营养物质定义作用主要来源

碳源凡能提供所需碳元

素的物质

合成微生物的细胞

物质和一些代谢产

物，有些是异养微

生物的主要能源物

质

无机化合物：CO2、NaHCO3；有

机化合物：糖类、脂肪酸、花生

粉饼、石油等

氮源凡能提供所需氮元

素的物质

合成蛋白质、核酸

以及含氮的代谢产

物

无机化合物：N2、NH3、铵盐、

硝酸盐；有机化合物：尿素、牛

肉膏、蛋白胨等

水在生物体内含量很不仅是优良的溶剂——

高，在低等生物体

内含量更高

而且可维持生物大

分子结构的稳定

无机盐

为微生物提供除

碳、氮以外的各种

重要元素，包括大

量元素

细胞内的组成成

分，生理调节物质，

某些化能自养菌的

能源，酶的激活剂

——

同类型的微生物，培养基的组成不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种基本物质。

二、实验注意事项

在大肠杆菌的培养和分离的实验中，要特别强调无菌操作，这是进行微生物实验中必备的操作要求，也是本模块多数实验的基本要求，应该形成无菌操作的行为习惯。无菌操作，既包括各种器皿必须是无菌的，也包括各种培养基也必须是无菌的，同时还要求在接种时，不能带有其他杂菌，所以在实验过程中，应时刻保持这种无菌意识。辨认菌落和菌种种类时，要能大致区分细菌、放线菌与酵母菌菌落，有些用肉眼不能判断的菌落也可借助显微镜进行观察判断。

三、平板划线(划线分离)法和稀释涂布平板(涂布分离)法比较

比较平板划线法稀释涂布平板法

特点操作简单，但是单菌落不易分离操作复杂，但是单菌落易分离

原理

连续划线。由于划线后，线条末端细菌

的数目比线条起始处要少，每次从上一

次划线的末端开始，能使细菌的数目随

着划线次数的增加而逐步减少，最终能

得到由单个细菌繁殖而来的菌落

将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将

不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体

培养基的表面，进行培养。在稀释度足

够高的菌液里，聚集在一起的微生物将

被分散成单个细胞，从而能在培养皿表

面形成单个菌落

操作

注意

事项

第一步以及每次划线之前都要灼烧接种

环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧

接种环。在灼烧接种环之后，要等其冷

却后再进行划线，以免接种环温度太高，

杀死菌种

涂布平板的所有操作都应在火焰附近进

行。应从操作的各个细节上保证“无

菌”。例如，对涂布器等接种器具进行

消毒和灭菌、酒精灯与培养皿的距离要

合适、吸管头不要接触任何其他物体、

吸管要在酒精灯火焰周围等等

1．某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。

土样中的菌种筛选→

菌株

鉴定

→

优良菌株

扩大培养

→

植酸酶

提纯

→

植酸酶

固定化

→

植酸酶

特性分析

请回答：

(1)土壤悬液首先经80 ℃处理15分钟，其目的是筛选出________。

(2)在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行________，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到________，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与________强弱相关。

(3)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是________。液体培养基与固体培养基相比，不含有的成分是________。

【解析】(1)对土壤悬液进行高温处理，大部分菌种被高温杀死，可筛选出耐高温的菌株。

(2)涂布分离法是分离培养细菌的常用方法，需要先将培养的菌液稀释，再涂布到固体培养基平面上，以得到相互分开的单菌落。在含植酸钠的培养基上，目标菌株可分解植酸钠，在其菌落周围形成透明水解圈，植酸酶的活性越强，单位时间内分解的植酸钠越多，形成的透明圈越大。

(3)筛选获得的菌株经鉴定后需转至液体培养基中扩大培养，培养时需要振荡，振荡的目的是增加液体培养基中的氧气浓度。制备固体培养基的过程中需要加入溶化的琼脂，琼脂冷却后呈固态。

【答案】(1)耐高温菌株(2)稀释单菌落植酸酶的活性(3)供氧琼脂

2．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题：

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。

(2)步骤③中，实验组的操作是________。

(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将30(即36—6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法________(填“正确”或“不正确”)。

【解析】(1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮来源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步骤②，需要进行倒平板操作，用到的是固体培养基，所以培养基中要有

琼脂。(2)该实验的空白对照组为不进行处理的无菌平板，实验组的操作为将各无菌平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露相同时间。(3)若空白对照组的平板上出现了菌落，说明实验过程中出现了污染现象。空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，导致实验变量不唯一，不能确定实验组平板上的菌落是否仅由教室内不同高度空气中的微生物形成，因此不能求出实验组的菌落平均数。

【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间(3)污染不正确

3．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：

(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_________________________________________________

______________________________________________________________

____________________________________________________________。

(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有________和________。分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。

(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。

【解析】(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，这样既可避免杂菌污染，又可将乳酸菌分散成单个细胞，以便在培养基表面形成单个菌落。(2)乳酸的积累影响乳酸菌的增殖，加入碳酸钙可以中和乳酸菌代谢(无氧呼吸)过程中产生的乳酸，另外，乳酸和碳酸钙反应，进而导致碳酸钙分解形成透明圈，有利于乳酸菌的鉴别和分离。(3)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，装入1 mL甘油后灭菌。将1 mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20 ℃的冷冻箱中保存。

【答案】(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸) 具有透明圈(3)甘油

(完整版)高中生物选修一知识点大全书本知识浙科版,推荐文档

选修1《生物技术实践》知识点归纳 实验1 大肠杆菌的培养和分离? 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生 物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。细菌是单细胞的原核生物， 有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核,只有一环状DMA 分子 (拟核)。以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。用革兰氏染色法将细菌分 为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和 革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞 壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。 2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。是消除污染杂菌的通 用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离就是用接种环 蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细 菌也逐渐减少,。划线最后,可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培养基培 养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。 在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。用于基因工程的 大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。由于工程菌 的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨 苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗 性基因的工程菌能生存下来。 涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取 0.1mL 不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在 培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落，每个培养 基里有20个以内的单菌落为最合适。 优点：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂 。 在培养微生物时,必须进行无菌操作。其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各 种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂 布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。进行恒温培养时,要将培养 皿倒置,是因为培养基中的水分会以水蒸气的形式蒸发,倒放培养皿会使水蒸气 凝结成水滴后,落入培养基的表面并且扩散,菌落中的细菌也会随水扩散,菌落相 互影响,很难再分成单菌落,达不到分离的目的。 4.细菌扩大培养要用LB 液体培养基(通用培养基、常用于做生理学研究和 发酵工业),划线分离要用LB 固体培养基(常用于微生物分离、鉴定、计数和菌 种保存)。我们在利用微生物时,常常要求所利用的微生物不被其他微生物污染。 因此,在培养微生物时必须进行无菌操作 无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的,如各种大小的培养皿、试管、 三角瓶、取样器的头(或称“枪头”、“tip”)、移液管、三角刮刀、接种环、 镊子等等。这些用具通常用高压蒸汽灭菌法前各种用品均需用牛皮纸或报纸包 好。培养皿可几个包在一起;试管加棉花塞或塑料盖后也是几个包在一起;三角 瓶可用封口膜(市售产品,既通气又不使菌进入)或6层纱布封口,再用牛皮纸或 报纸封口;移液管上端用镊子放入少量棉花,再用牛皮纸包上(现在多不用移液管 而用取样器);取样器的“枪头”放在可灭菌的专用塑料盒中,也可放在上口用牛 皮纸包好的烧杯中……在121℃(1kg/cm 2压力)下灭菌15min 。值得注意的是,实 验中所需的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染。灭菌后,建议收藏下载本文，以便随时学习！我去人也就有人！为UR扼腕入站内信不存在向你偶同意调剖沙

完整版浙科版高中生物必修一整理归纳

第一章：细胞的分子组成 1. 生物以细胞为基本结构单位和功能单位， 如果要进行生命活动， 前提条件是保证细 胞的完整性。病毒无细胞结构，但也要在细胞内才能表现出生命活性。 2. C 、H 、O N 在生物体内含量达 96.3%，其中C 是生物体核心元素， 0是活细胞中含 量最多的元素。 3. 水是活细胞中含量最多的化合物，蛋白质是干细胞中含量最多的化合物。 4. 无机盐对维持血浆正常浓度、 酸碱平衡和神经肌肉兴奋性非常重要。 哺乳动物血液 中CaT 含量过低会导致抽搐。Mg + 是叶绿素的必需成分。卩￡+ 是血红蛋白的主要成分 a.主要能源物质：葡萄糖 b.动物细胞储能物质是糖元；植物细胞则是淀粉 c.直接能源物质：ATP e.最终能源物质：光能 7. 植物细胞特有糖类：果糖、纤维素、麦芽糖、淀粉 动物细胞特有糖类：乳糖、糖元 动物细胞和植物细胞都有的糖类：核糖、脱氧核糖、葡萄糖 8. 磷脂是细胞内各种膜结构的重要成分。 9. 蛋白质的基本单位是氨基酸。每种 氨基酸分子至少含有一个氨基 和一个羧基，并且一个氨基和一个羧基连接在同一碳原子上 。R 基的不同决定了氨基酸的种类不同。 10. 两个氨基酸发生脱水缩合形成二肽，形成肽键，见下图： H I H^—（f —COOH

11. 氨基：-NH2；羧基：-COOH 肽键：-CO-NH- 12. 不同的蛋白质差别在于组成它们的氨基酸的种类、数量和排列顺序、多肽链的空间结构不同。 13. 假设有m个氨基酸脱水缩合形成n条链，则： ①肽键数=失去的水分子数=氨基酸总数-肽链条数=m-n ； ②至少有n个氨基，n个羧基游离； ③蛋白质分子量=氨基酸平均分子量x总数-18 x（m-n） 14.核酸分两种，核糖核酸（RNA和脱氧核糖核酸（DNA。单体为核苷酸，脱氧核糖核苷酸（DNA的单 体）以及核糖核苷酸（RNA勺单体）。 第二章：细胞概述 1. 胡克第一次看到了细胞，但他看到的只是死细胞的细胞壁，主要化学成分是纤维素。 2. 生物体的增大，不是由于细胞体积的增大，而是由于细胞细胞数目的增多。细胞为 什么那么小的原因在于：a.细胞核能够控制的范围有限； b.细胞体积越小，则表 面积与体积之比就相对较大，有利于细胞与外界发生物质交换。 3. 根据细胞核有无核膜包被，可分为真核细胞和原核细胞。原核细胞主要是细菌，如 蓝细菌（蓝藻）、放线菌、乳酸菌、大肠杆菌等。真核细胞包括植物、动物和真菌（霉菌、食用 菌、酵母菌）等。 4. 质膜在结构上具有流动性，在功能上具有选择透性。 5. 质膜最基本的结构是脂双层，也称为单位膜，主要是磷脂分子。质膜中还有膜蛋白, 也具有流动性。细胞识别、免疫等功能主要由糖蛋白完成。 6. 细胞壁主要化学成分是纤维素，细胞壁是全透性的，物质可以随意进出细胞壁。 7. 叶绿体：双层膜，含少量DNA。光合作用的细胞器，只存在于能进行光合作用的 细胞中，如洋葱根细胞中一般没有叶绿体。 &线粒体：需氧呼吸主要场所；含少量DNA。双层膜，内膜向内折叠形成嵴。 9. 核糖体：合成蛋白质的细胞器，无膜，由RNA和蛋白质组成，来源于核仁。 10. 中心体：无膜，与动物细胞有丝分裂有关。 11. 液泡：单层膜。含有色素，使植物的花和果实有颜色。液泡中的细胞液含有无机盐类、糖类、氨基酸

课后知能检测-浙科版高中生物选修3

课后知能检测10 一、选择题 1．生态农业比一般农业( ) A．投入多，产出多，污染少，可持续发展能力强 B．投入少，产出多，污染少，可持续发展能力强 C．投入一样，产出相当，污染少，可持续发展能力强 D．投入和产出都较少，污染相同，可持续发展能力强 【解析】在生态农业中，实现了废弃物资源化，利用物质循环再生原理，因此投入少，污染少，同时产出多，可持续发展能力强。 【答案】B 2．某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统(如图所示) 。关于该农 业生态系统的叙述，错误的是( ) A．该生态系统的维持，人的作用非常关键B．该生态系统利用了物质循环再生原理，实现了农业生产的可持续发展C．该生态系统采用分布式结构，提高了能量传递效率 D．该生态系统充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用 【解析】该生态系统采用分布式结构，提高了能量的利用率，但不能提高能量的传递效率。 【答案】C 3．世博会伦敦馆又名“零碳馆”。它除了利用太阳能、风能之外，还将剩饭菜中的生物质能用于发电。另外，水源也是位于房顶的花盆接收并过滤的雨水，供生活用水。“零碳馆”的设计与哪种生态工程更相似( ) A．物质循环利用的生态工程B．节水和废水处理与应用的生态工程 C．小流域综合治理的生态工程D．清洁和可再生能源系统组合利用的生态工程 解析】“零碳馆”强调零排放，因此应属于能源方面的生态工程。 答案】D 4．设计生态工程的常用方法之一是给食物链( 网) “加环”，下图就是一种“加环”示 意图。据图判断下列说法不正确的是( )

A．用玉米的副产品玉米芯生产木糖醇，可增加经济效益 B．用残渣来培育食用菌和蛆蛹，实现了物质的多级利用 C．用蛆蛹粪便作为有机肥还田，运用了能量循环再生的原理 D．该生态工程的运转离不开人的管理 【解析】A 项提高了副产品的经济价值，减少了环境污染；B项使残渣中的能量流向 生物，提高了能量利用率，减少了环境污染；C 项用蛆蛹粪便作为有机肥还田，其中的能量不能直接被植物利用，且能量也不能循环再生，有机肥中的有机物在田里会被微生物分解为无机物而被植物利用，这体现了物质循环再生；D项这种农田生态系统，离不开人的管理， 人的作用占主导。 【答案】C 5．某生物小组考查一农田生态系统中水稻从播种到稻秆还田的全过程。在稻田分蘖期间，农民拔草、治虫；然后排水进行搁田(亦称“烤田” ) ；稻谷收获之后，有不少农民在田 里焚烧稻秆。下列叙述中不正确的是( ) A．农民拔草、治虫目的是使能量较多地流向水稻 B．搁田时排出的水可能对水体造成污染 C．搁田有利于水稻根系生长，提高水稻抗倒伏能力 D．焚烧稻秆可促进物质循环，实现能量高效利用 【解析】焚烧稻秆虽然可以促进物质循环，但是浪费了大量能量，从而使能量的利用效率大大降低。拔草、治虫使能量较多地流向水稻；搁田时排出的水中含有大量氮、磷等无机盐，可能对水体造成污染，但土壤暴露在空气中，有利于水稻根系的呼吸，促进水稻的生长发育。 【答案】D 6．下列叙述违背生态工程中生态学原理的是( ) A．充分考虑环境因子对生物的影响 B．尽可能减少种间竞争所产生的损耗 C．实现生态系统的良性循环 D．以单一种群获得经济效益的最大化 【解析】设计生态工程的目的是在促进自然界良性循环的前提下，充分发挥资源的生产能力，防治

2017-2018学年浙科版生物选修一习题：学业达标测评6Word版含答案.doc

学业达标测评( 六 )泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 1. 制作泡菜所利用的乳酸菌最初来自于() A．人工加入到泡菜水中的 B．所选蔬菜自身原有的 C．腌制过程中自生的 D．水中的乳酸菌 【解析】制作泡菜时所利用的乳酸菌最初来自于所选蔬菜自身原有的。 【答案】 B 2．制泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是() A．先减少后增加B．先增加后减少 C．逐渐增加D．逐渐减少 【解析】泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随 腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，产生的亚硝酸盐被分解，使亚硝酸 盐含量逐渐下降。b5E2RGbCAP 【答案】 B 3．亚硝酸盐溶液与对氨基苯磺酸反应后与N-1- 萘基乙二胺偶联出现的颜色是() A．橙黄色B．紫红色 C．黄绿色D．橘红色 【解析】亚硝酸盐溶液与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1- 萘基乙二胺偶联会形成紫红色产物。 【答案】 B 4．在泡菜的腌制过程中容易造成亚硝酸盐含量增加的因素主要是() A．食盐用量过多B．细菌大量繁殖 C．腌制时间过长D．加水过少 【解析】泡菜坛中硝酸盐还原菌大量繁殖可导致坛内亚硝酸盐含量增多。 【答案】 B 5．下列与泡菜制作及亚硝酸盐含量测定相关叙述不正确的是() A．泡菜和酸菜都是利用天然微生物进行发酵制成的 B．泡菜腌制过程中发挥作用的主要是假丝酵母和乳酸菌 C．泡菜发酵过程中的无氧环境主要依赖于容器凹槽加水再加盖密封 D．亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸偶联，形成紫红色产物，之后可用光电比色法定量

色产物，然后可用光电比色法定量。p1EanqFDPw 【答案】 D 6．有关膳食中的亚硝酸盐对人体健康的影响，下列说法不正确的是() A．膳食中的亚硝酸盐在人体内会随尿液全部排出 B．亚硝酸盐可作为食品添加剂 C．亚硝酸盐在特定条件下可转变成致癌物质 D．蔬菜放置过久，亚硝酸盐含量将上升 【解析】研究表明膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，可作为食品添加剂，但当人体一次摄 入的亚硝酸盐总量达到某一数值时将会致病。亚硝酸盐本身无致癌作用，在特定条件下转变成的亚硝胺有 致癌作用。蔬菜放置过久，其亚硝酸盐含量会上升。少量的亚硝酸盐可随尿排出，过量时将危害健康。 DXDiTa9E3d 【答案】 A 7．关于亚硝酸盐定量计算公式的叙述正确的是() A．式中X1为样品中亚硝酸盐含量，单位为g/kg B．式中m1为样品质量，m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，m1、 m2单位应相同 C．式中V1为测定用样品液体积，V2为样品处理液总体积 D．式中m1为样品质量，单位为g，m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位为μg 【解析】亚硝酸盐定量计算公式中，X1为样品中亚硝酸盐含量，单位mg/kg；m1为样品质量，单位g；m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位μg；V1为样品处理液总体积；V2为测定用样品液体积。RTCrpUDGiT 【答案】 D 8．如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答： (1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是 ____________________________________________________________ 。5PCzVD7HxA (2) 盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是_________________________ ______________________________________________________________ ；jLBHrnAILg 试说明盐在泡菜制作中的作用：__________________________________ ____________________________________________________________ 。xHAQX74J0X (3)泡菜风味形成的关键在于 ________的加入。 (4)泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因： _________________________________________________________ LDAYtRyKfE

高中生物选修3(浙科版)知识点总结

第一章基因工程 一、工具酶的发现和基因工程的诞生 1、基因工程的概念： （1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。（2）基因工程： 就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。基因工程的核心是构建重组DNA分子。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。 （3）基因工程诞生的理论基础： DNA是遗传物质的发现过程、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。 2、基因工程的基本工具 （1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） ①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。 例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,能在G和A之间切割DNA，如下图所示。 黏性末端 黏性末端 ③结果：能将DNA分子切割成许多不同的片段。 备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。 （2）“分子缝合针”——DNA连接酶 ①作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的D NA分子称为重组DNA分子。 因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。 （3）“分子运输车”——载体——质粒

精选2019-2020年浙科版高中生物选修3 现代生物科技专题课后辅导练习三十六

精选2019-2020年浙科版高中生物选修3 现代生物科技专题课后辅导练习三 十六 第1题【单选题】 下列关于生物技术的安全性和伦理问题的叙述正确的是 A、由于至今未发现一例因食用转基因食物而影响人体健康的实例，因而，不需要考虑转基因食物的 安全性问题 B、由于转基因生物可能成为“入侵的外来物种”，因而转基因生物势必会威胁生物的多样性 C、基因检测疾病带来的负面影响主要是基因歧视，但可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育 和立法得以解决 D、由于设计试管婴儿、克隆技术目前已经成熟，在不违背伦理道德的前提下，可用来解决不孕夫妇 的生育问题 【答案】： 【解析】： 第2题【单选题】 下列有关克隆人的说法错误的是( ) A、克隆人是一种无性生殖方式 B、克隆人证明了人体细胞细胞核具有全能性 C、在现有克隆技术条件下，成功率为100% D、中国政府禁止生殖性克隆人 【答案】： 【解析】：

第3题【单选题】 引发伦理问题的生物技术主要是( ) ①克隆人；②设计试管婴儿；③制作基因身份证；④转基因生物 A、①②④ B、①②③ C、①②③④ D、①④ 【答案】： 【解析】： 第4题【单选题】 不同物种之间很难通过杂交培育新品种，可打破物种界限进行育种的方式是 A、诱变育种 B、杂交育种 C、单倍体育种

D、转基因育种 【答案】： 【解析】： 第5题【单选题】 生物界普遍存在着变异，人们研究并利用变异可以培育出高产、优质的作物新品种。下列能产生新基因的育种方式是( ) A、“杂交水稻之父”袁隆平通过杂交技术培育出高产的超级稻 B、用X射线进行大豆人工诱变育种，从诱变后代中选出抗病性强的优良品种 C、通过杂交和人工染色体加倍技术，成功培育出抗逆能力强的八倍体小黑麦 D、把合成β胡萝卜素的有关基因转进水稻，培育出可防止人类VA缺乏症的转基因水稻 【答案】： 【解析】： 第6题【单选题】 引发伦理问题的生物技术要包括( ) ①克隆人②设计试管婴儿③基因身份证④转基因生物． A、①② B、①②③ C、①②③④ D、④ 【答案】： 【解析】：

浙科版生物选修一知识点填空,推荐文档(20201121164110)

选修一知识点填空 实验 1 大肠杆菌的培养和分离 1、微生物指的是 ______________________ 的单细胞、多细胞或______________ 的低等生物。如： 等。绝大多数微生物与传染病（有关/ 无关），90%以上的微生物是对人类（有利/ 有害）。 2、大肠杆菌是革兰氏 ______ 性菌，新陈代谢类型是_________________ 。从细胞结构上看，它属于 _________ 生物。在肠道 中一般对人体无害，也有少数菌株对人体_________ ，可以侵袭_______ 并产生_____ 。但是，任何大肠杆菌如果进入人的，都会对人体产生危害。大肠杆菌是工程中被广泛采用的工具。如重组的人粒细胞- 巨噬细胞（rhGM-CSF就是用大肠杆菌工程菌生产的。这种刺激因子是一种，只要用级的量即可提高人的白细胞的数量，目前是放疗和化疗过程中的必用辅助药物。大肠杆菌细胞壁的主要成分是，细 胞质中含有的细胞器是 __________ ，控制细菌遗传性状的DNA主要分布在__________ ，此外，细胞质中也有小型的 环状DNA称为_____________ 。 3、革兰氏染色法是一种用于 ____________的染色法。此法将细菌分为两大类，即革兰氏阳性菌和____________________ 。 4、各类生物细胞壁的成分：植物 ___________________ 细菌 ___________________ 真菌___________________ 5、细菌通常以 ________ 方式繁殖， _________________ 在固体培养基上大量繁殖形成的____________________ 的细胞群统 称为单菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。单菌落的分离是________________________________ 的通用方法，也是用于 6、细菌培养的通用培养基是 _________ ,其液体培养基的配方（以1升为例）：_______________________________________ ， 若要配制固体培养基则需加入 ________________ ；培养基的分类：按物理性状_________________________________________ ， 按化学成分 _______________________________________ ；按用途 _________________________________________ 7、细菌喜 _________ ，霉菌喜_________；细菌通常要求在__________________________ 的环境中生长，霉菌要求在 _____________________ 的环境中生长。 8、常用的细菌分离方法：划线分离法和 _____________________ ，前者的具体操作是：用已经在 _________________ 烧红后冷 却的 ____________ 蘸取带菌的培养物，在_______________ （固体/ 液体）培养基的平板上划线。其中烧红的目的 _______________________ ，冷却的目的_______________________ 。接种环部分深入到菌液中，然后，在固体培养基的平板上 _______________________ 划线。注意：接种环只在菌液中蘸菌液次。每次划完线，接种环都要 ______________________ （原因是_________________________ 并冷却（原因是__________________________ 后从___________________________ 开 始再重新划线（原因是 ________________________________ ，最后，在划线的末端出现______________________________ ， 表明菌已被分离。如果再将单个菌落接种至固体培养基的试管斜面上，即在斜面上划线，则斜面上的菌群就是单个细胞产生的后代。制成斜面培养基是为了 ___________________________________________ ，且斜面密闭效果比平面的好很多, 不容易进入杂 菌, 同时能用来做纯细菌的 _____________________ 。但斜面过长就会使棉塞沾上培养基而造成污染，所以使培养基形成 的斜面的长度不超过试管总长的___________________ 。后者的具体操作是：将培养的菌液稀释成10-5 —10-7 倍。（举例 说明如何稀释10 倍？___________________________________________________ 取 _________ 稀释倍数不同的菌液，加在 培养皿的固体培养基上，用 ____________ （该器具的灭菌方法_____________________________________________________ 涂布在培养基的平面上，然后进行培养。在某个稀释度下，可培养得到不连续的菌落，通常以每个培养皿中有 ___________ 个以内的单菌落最为合适。这两种细菌的分离方法的优缺点是？____________________________________________ 9、写出消毒和灭菌的区别__________________________________________________________________________ 10、灭菌或消毒的常用方法有: ___________________________________________________________________________ ， 不同的器具应选择合适的方法灭菌。接种环等金属应选用的灭菌方法是： _________________________ ，操作者的手应选用的消毒方法是：__________________ ，培养基应选用的灭菌方法是： ________________________ ，若培养基中有葡萄糖，则

高中生物 2.3动物的克隆(二)课时作业(含解析)浙科版选修3

第9课时动物的克隆(二) 目标导航 1.简述单克隆抗体的制备过程。2.概述动物细胞的全能性。3.理解动物的克隆繁殖。 一、杂交瘤技术和单克隆抗体的制备 1．杂交瘤技术制备单克隆抗体的方法 (1)用外界抗原刺激动物(如小鼠)，使其发生免疫反应，使____________产生抗体。 (2)利用____________或____________等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的____________融合。 (3)经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的既能________________、又能____________的杂交瘤细胞克隆。 2．杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从________________________的抗原混合物中获得单抗。 二、动物细胞全能性的表现程度 1．高等动物细胞 (1)受精卵：由两性配子结合而成的受精卵具有____________________________的潜在能力，完整的个体就是以其为基础发育而成的。因此受精卵具有全能性，且最高。 (2)多能细胞：______________________________________________________________，这样的细胞称为多能细胞。 (3)单能细胞：有的细胞____________________，这样的细胞称为单能细胞。 2．低等动物细胞 低等动物细胞的全能性一般________________。 三、动物难以克隆的根本原因 动物细胞____________，基因组中的基因活动________，差异性表达程度太高。 四、细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 1．概念：核移植就是 __________________________________________________________________________。 2．种类：(1)____________________(易)；(2)____________________(难)。 3．过程(以克隆羊“多莉”为例) (1)将苏格兰黑面母羊(A)的卵细胞的核吸出，取出芬兰白面母羊(B)的乳腺上皮细胞的核与A羊的去核卵细胞融合，形成重组细胞；(2)促使重组细胞分裂，发育成早期胚胎；(3)当胚胎发育到一定程度时，将其植入另一只苏格兰黑面母羊(C)的子宫中，由C羊孕育并产下克隆羊“多莉”。

高中生物浙科版选修3知识条理整理

选修3《现代生物科技专题》知识条理 第一章基因工程 第一节工具酶的发现和基因工程的诞生 一、基因工程的概念——操作环境、对象、水平、过程、结果、实质 二、基因工程的理论基础——DNA是遗传物质、DNA双螺旋结构、中心法则 三、基因工程的技术保障 1、限制性核酸内切酶——作用、特点、部位、结果。 （知道教材中的2种限制性核酸内切酶的碱基识别序列和切割位点） 2、DNA连接酶——作用、部位 3、载体——作用、原理、种类、质粒的概念 [“小资料：基因工程的载体”不要求。] 第二节基因工程的原理和技术 一、基本原理：目的基因在宿主细胞内稳定高效的表达 二、操作步骤★★★★★ 1、获得目的基因（序列已知、序列未知） 2、形成重组DNA分子（通常用同一种限制酶处理后，再DNA连接酶作用） 3、导入手提细胞（常用Cacl2、显微注射、脓杆菌转化法） 4、筛选含有目的基因的受体细胞（标记基因、发光蛋白、DNA分子杂交等） 注意：根据受体细胞不同，选择使用载体不同；根据表达产物不同，选择受体细胞不同。 5、目的基因的表达（转录、翻译合成蛋白质） [“课外读：聚合酶链式反应（PCR）”、“小资料：基因工程的受体细胞”不要求。] 第三节基因工程的应用 一、基因工程与遗传育种 1、转基因植物：举例 2、转基因动物：举例 二、基因工程与疾病治疗 1、基因工程药物：举例（乙肝疫苗主要成分是乙肝病毒的表面抗原） 2、基因治疗：基本原理 三、基因工程与生态环境 第四节基因工程的发展前景（不要求） 第二章克隆技术 第一节什么是克隆 一、有性繁殖和无性繁殖 二、克隆的定义：三个水平 三、克隆的发展历史 四、克隆的条件：理论条件与实际条件 第二节植物的克隆 一、植物细胞的全能性：定义、原理、体现、关键 二、植物组织培养 1、培养基及其他条件 2、程序 3、应用 （1）植物细胞培养和器官培养的方法（调控激素配比）和意义 （2）原生质体培养的方法（酶解法）和意义（容易摄取外来遗传物质或进行细胞融合）

(浙江专版)高中生物第四章实验七植物的组织培养教学案浙科版选修1

（浙江专版）高中生物第四章实验七植物的组织培养教学案浙科版 选修 1 一、植物组织培养 1．概念：取一部分植物组织，在无菌的条件下接种在培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽，培养为成熟植株的技术。 2．理论基础：植物细胞的全能性。 3．培养基 (1)发芽培养基：细胞分裂素浓度大于生长素浓度的培养基。 (2)生根培养基：生长素浓度大于细胞分裂素浓度的培养基。 4．培养过程 外植体――→脱分化愈伤组织――生芽丛状苗―→生根幼苗――→ 植株 二、菊花的组织培养 1．材料 MS 培养基、发芽培养基、生根培养基、萘乙酸(NAA)、苄基腺嘌呤(BA)、菊花幼苗。 2．操作流程 1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性。 2.影响植物组织培养的因素有：植物材料、营养物质、植物激素 及pH 、温度、光照等。 3.植物组织培养的一般过程为： 离体的植物器官、组织、细胞――→脱分化愈伤组织――→发芽培养基丛状苗――→生根培养基 生根――→ 植株 4.发芽培养基中细胞分裂素相对较多而生长素相对较少；生根培 养基中生长素较多而细胞分裂素较少。

1．不同植物、不同组织的生根和生芽是否都要使用相同的生长素和细胞分裂素浓度？ 提示：不相同。 2．本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？ 提示：天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用时间短，而人工合成的，没有分解酶，作用时间长，效果显著。 3．植物组织培养过程中，产生污染的途径有哪些？ 提示：①外植体带菌；②培养基及接种器具灭菌不彻底；③接种操作时带入；④环境不清洁。 核心要点一| 有关植物组织培养的几个问题及分析1．细胞的全能性 (1)概念：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。 (2)原因：生物体的每一个体细胞都是由受精卵经有丝分裂而来的，含有本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全套基因。 (3)植物细胞表达全能性的条件：①离体状态；②一定的营养物质；③植物激素；④其他适宜的外界条件(温度、pH、氧气、光照、无菌等)。 2．激素用量比例产生的影响 生长素与细胞分裂素比值结果

浙科版生物选修3模块同步测试题二

《现代生物科技专题》模块测试 班级 _____________ 姓名______________ 一、选择题 1.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基 因完成了在受体细胞中表达的是（） A.棉花细胞中检测到细菌的抗虫基因 B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及英mRNA C.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素D7A序列 D.酵母菌细胞中提取到人F扰素蛋白 2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需 要的（） A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 3.小流域综合治理生态工程运用的原理包括 ①物质循环再生原理②协调与平衡原理③整体性原理④工程学原理⑤物种多样性原理 扎①②??⑤ B.②③?@ C. ③④ D.②?④ 4.下列有关生物技术安全性的叙述，错误的是（） A.生物技术既可造福人类，又能威胁社会 B.在严格控制和检验下培育的转基因生物绝对不会危害英他生物体的生存和环境 C.转基因生物带来的安全性问题主要包括食物安全、环境安全、生物安全 D.人们对转基因食品的担心，从某些实例来看并非是多余的 5.下列不属于克隆的是（） A、植物体通过体细胞进行的无性繁殖 B、将某种瘤细胞在体外大呈:培养繁殖 C、扑插和嫁接 D、将鸡的某个D\A片段导入小鼠的细胞中，并得以表达 6.动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一左浓度的某些物 质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提 供的信息可以获得的正确结论有 ①有无血消对正常细胞培养的影响不同 ②正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 ③培养基中补充血淸有助于正常细胞的培养 ④培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大 A.?@? B.①③④ C. ?@? D.①?? 7.农业的发展已山传统农业向现代农业转变，现代农业虽然产量大大提高，但乂造成了严重的环境污染，因此我国现在农村大力推广生态农业，下列关于生态农业的叙述不正确的是（） A.生态农业中食物链和营养级越多越好 B.生态农业的抵抗力稳泄性比现代农业高 C.生态农业设计的指导原则是能量的多级利用和物质的循环再生 D.生态农业属于人工生态系统，人的作用非常突出 &碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中： ①受精作用②病毒的增殖过程③细菌的二分裂过程④目的基因与运载体的结合 ⑤DNA探针的使用⑥细胞的融合 A.④⑤ B.①??⑤ C.②④⑤ D. @?@? 9.现有一长度为1000碱基对（by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的

章末综合测评-浙科版高中生物选修3

章末综合测评(一) (时间：45分钟满分：100分) 一、选择题(每小题5分，共60分) 1．将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是( ) A．在大肠杆菌的质粒连接人生长激素的基因时，需用同一种限制性核酸内切酶 B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异不可以遗传 C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等 D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶 【解析】在大肠杆菌的质粒连接人生长激素的基因时，应用同一种限制性核酸内切酶切割，这样才能产生相同的粘性末端，A项正确；通过转基因技术让大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异，其原理是基因重组，是可遗传的变异，B项错误；质粒是小型的环状DNA 分子，其结构中没有尿嘧啶，C项错误；基因在转录时需要的酶是解旋酶和RNA聚合酶，D 项错误。 【答案】 A 2．下列实践活动包含基因工程技术的是( ) A．水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种 B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C．将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株 D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆 【解析】A项属于单倍体育种，原理是染色体变异；B项属于杂交育种，原理是基因重组；C项属于基因工程，原理是基因重组；D项属于诱变育种，原理是基因突变。选C。 【答案】 C 3．下列有关基因工程操作工具——载体的叙述错误的是( ) A．质粒为常见的载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有 B．作为基因工程的载体，标记基因不可或缺 C．目的基因插入载体时，有特定的插入位点 D．构建重组DNA分子时需DNA连接酶和限制性核酸内切酶等 【解析】病毒无细胞结构，没有质粒。 【答案】 A 4．利用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育的抗虫棉是否成功，最好检测( ) A．是否有抗生素产生 B．是否有目的基因表达 C．是否有抗虫的性状出现

2017-2018学年高中生物课后知能检测3(含解析)浙科版选修3

课后知能检测3 一、选择题 1．下列有关转基因动物的说法，正确的是( ) A. 转基因过程中用到的动物是转基因动物 B. 可以生产植物的蛋白质的动物不是转基因动物 C. 转入了外源基因的动物就是转基因动物 D. 转入了对生长不利的外源基因的动物不是转基因动物 【解析】转基因动物是指转入了外源基因的动物，动物能生产植物的蛋白质说明含有植物的基因，所以是转基因动物。 【答案】C 2．利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是( ) A用适当的酶对运载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合 B. 用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C. 通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌 D. 重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素 【解析】检测重组DNA是否已导入受体细菌是通过运载体上的标记基因来检测的，利用它们的各种抗性或产生特殊的颜色等。 【答案】C 3．某生命科学院将牛的肌球蛋白基因提取出来，并成功导入到玉米的体细胞中。这项研究的重要意义是( ) A. 能够改良作物的品质 B. 提高了玉米的抗旱性 C. 可以证明动植物之间是可以杂交的 D. 证明了基因工程可以获得任何我们想要的东西 【解析】将牛的基因导入玉米并使其表达，这是对玉米品质的改良，使其蛋白质的氨基酸组成更接近人体蛋白质。 【答案】A 4．运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt 基因转移到优质油菜中，培育出转 基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药作用，保护农业生态环境。根据以上信息，下列叙述正确的是( ) A. Bt基因的化学成分是蛋白质

浙科版高中生物选修3《植物的克隆》教案

《植物的克隆》第一课时教学设计 一、学习任务分析 “植物的克隆”选自高中生物选修三第二章“克隆技术”。主要内容包括克隆的定义及条件，植物细胞全能性及其表达、植物组织培养程序及应用、原生质体的制备、植物细胞工程以及多途径的植物克隆实践。“植物细胞全能性及其表达、植物组织培养”中部分内容与必修一中“细胞的全能性”部分内容重叠。该节内容可分为两课时进行学习，第一课时可学习克隆的定义及条件，植物组织培养程序及应用，同时在学习过程中对植物细胞的全能性及其表达进行回顾和补充。第二课时可对植物的体细胞杂交技术，多途径的植物克隆实践进行介绍并通过练习巩固第一课时的学习内容。 二、学习者分析 本节课的教学对象是高三（7）班的学生，该班的学生基础知识扎实，知识应用能力较强，大多数学生上课注意力集中。学生在此之前已经学习过细胞的全能性，同时也对植物组织培养技术有一定的认识。对于克隆的认识比较表面。因此，教师会在上课初始对克隆进行简单介绍，随后将对实现植物克隆的理论基础和技术基础进行重点介绍。在这个过程中，教师需要注意对学生已学习过的内容进行简单回顾和合理补充。 三、教学目标 （一）知识与技能目标 1.说明克隆的定义及本质。 2.简述植物细胞全能性的含义。 3.概述植物组织培养的程序。 4.简述植物体细胞杂交技术。 （二）过程与方法目标 尝试将细胞培养方式与植物体自然状态下的合子发育过程相联系。 （三）情感态度与价值观目标 认同基础理论研究对应用实践的重要影响。 四、教学重点与难点 教学重点：植物组织培养的程序。 教学难点：植物组织培养的程序。 五、教学方法 以教师介绍为主。 六、教学过程 （一）克隆的定义及条件（5min） 教师行为：教师带领学生回顾图1。教师提问，新生成的子代胡萝卜植株与亲代的胡萝卜植株的遗传物质是否相同？胡萝卜根细胞发育形成完整的植株的过程经历了什么细胞分裂方式？以此来推出，胡萝卜植株并没有经过两性细胞的结合，仅仅通过单个细胞发育而来，这样的过程即为无性繁殖，即为克隆。 学生行为：回答教师的问题。 教师行为：教师展示克隆的定义及本质。克隆的定义是：只要不通过两个分子、两个细胞或两个个体的结合，只由一个模板分子、模板细胞或母体直接形成新一代分子、细胞或个体，就是无性繁殖，即克隆。其本质为亲子代的遗传物质保持不变，形状也同样保持不变。接着教师指出，克隆可分为三种水平上的克隆。通过分别对三种水平上的克隆的简单举例，加深学生对克隆的本质的理解。

浙科版生物选修一《生物技术实践 》《乳酸脱氢酶同工酶的分离》教案-新版

实验12 乳酸脱氢酶同工酶的分离 【学习目标】 1.了解同工酶的概念，进行乳酸脱氢酶同工酶的分离。 2.认识电泳法分离生物大分子的基本原理，尝试蛋白质的电泳分离。 【教学重点】 乳酸脱氢酶同工酶分离实验的原理和方法 【教学难点】 样品的预处理，电泳凝胶板的制备和实验分离过程。 【教学方法】 运用“指导——创新”实验教学模式。这种教学模式的基本含义是：以实验活动为基础，以改进、完善、设计实验为切入点，发展学生的创新能力、培养学生积极的个性特征和科学态度 【教学过程】 （一）引入新课 蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化合物。对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。怎样提取蛋白质呢？ （二）进行新课 1.基础知识 蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。 1.1缓冲溶液 （1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。 （2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。 1.2凝胶电泳法： （1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

［思考］填写下表： （2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。 2.实验步骤： 2.1制备电泳凝胶板。依照课本P64图16组装电泳槽后，制备5ml分离胶倒入槽中。在胶的上端轻轻加入少量水，以防止生成胶的弯月面。待胶凝固后，小心倒出蒸馏水，再用滤纸吸净残留的水。将2ml浓缩胶倒入，插入数字，再加入少量水，待胶凝固后，小心倒出蒸馏水，再用滤纸吸净残留的水，拔出梳子。凝胶一定要在倒入前配制，由于电泳槽的大小不同，制作和倒入凝胶的量由教师告知。 2.2加样。取10μl血清，加入等体积40％蔗糖溶液，在离心管中混匀后，用移液器吸取15μl样品，小心加入到凹槽中，每组一槽，组间进行比较。也可取胎牛、小牛、老牛的血清比较同工酶相对百分含量的差别。 2.3电泳。装配好电泳装置，打开电源将电流调至10mA，待样品进入分离胶时，改为20-25mA，当溴酚蓝前沿距下框1-2cm时，将电流调至0，关闭电源。 2.4染色。配置LDH活性染液。电泳后，取出凝胶板，放在盛有染色液的培养皿中，在37℃水浴上保温20-30min，可看出LDH同工酶呈现蓝紫色区带。 【核心解读】 1.除了LDH还有哪些酶具有同工酶？ (1)哺乳动物的肝脏中，己糖激酶有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4种同工酶； (2)碱性磷酸酯酶(AKP)有4种同工酶；