消除胆红素对肌酐测定的负干扰

消除胆红素对肌酐测定的负干扰

摘要胆红素对碱性苦味酸速率法检测肌酐的负干扰。一直是临床化学技术中学的一个棘手的问题，对临床高胆红素血症病人的肾功能观察带来很大影响。多年来，国内外不少作者报道了排除这一干扰的方法，但多是从样品预处理或试剂中加入抗干扰成分（如高铁氰化钾、胆红素氧化酶、过氧化氢——过氧化物酶）入手，最近国内外有人报道利用酶法和某些全自动生化分析仪的特殊功能Rate-Blank或Rate-B法能够从方法学角度排除干扰，并取得了良好的效果。本文就这一问题进行回顾和评价，并对各方法进行比较。

测定血清肌酐（简称CRT）的Jaffe氏法已经沿用了100多年，至今仍然被广泛地应用，然而对肌酐的显色并不特异。血清中能与碱性苦味酸反应的物质还有蛋白质、葡萄糖、抗坏血酸、丙酮、α-酮酸等。这些“假肌酐”物质通常对肌酐测定产生正干扰。由于它们的反应速度比肌酐慢，因此利用速率法在20～100s间进行测定[1]可以使肌酐的反应占绝对优势，提高反应的特异性。尽管如此，仍旧不能克服胆红素对测定的负干扰。如何消除这一干扰，近年来，已经有许多报告。本文就这一问题进行回顾和评价。

1 胆红素对肌酐测定产生负干扰的原理

碱性苦味酸速率法测定的原理是肌酐同碱性苦味酸反应形成了一种红色复合物，通常在510nm外根据测定时间（20～80s）内血清和标准液吸光度的增加量计算肌酐的含量。而胆红素在510nm处也有较强光吸收，并且在氢氧化钠的作用下，逐渐转化为620nm处有强光吸收的胆绿素，而胆绿素在520nm处只有很弱的光吸收，这样就掩盖了肌酐本身的显色反应的表现，从而使测定结果偏低，甚至出现负值。有实验证明[1]，氢氧化钠对胆红素的作用与肌酐存在与否无关；肌酐含量越低，本身的显色反应弱，相对干扰就严重。血清中的游离、结合胆红素对肌酐的动力学测定都有干扰作用。

2 预处理法

预处理法主要是利用各种氧化物，使胆红素被氧化成胆绿素后再测定血清肌酐含量。加入的氧化物主要有以下几种：

2.1 高铁氰化钾OLeary和pembroke等人[2]设置试剂1（R1）：高铁氰化钾2mmol/ L，试剂2（R2）：氢氧化钠200mmol/L，若味酸25mmol/L，临用前按5：1配制。标本：

R1：R2=20μL：20μL：400μL。主波长505nm，副波长570nm。样品与R1混合后5min 再加入R2，延滞时间60s，读数时间60s。试验证明600μmol/L以内的胆红素对肌酐测定无影响。汪俊军等人[3]推荐含有十二烷基硫酸钠、硼酸、氢氧化钠、苦味酸、高铁氰化钾浓度分别为24、10、200、15.5、0.20mmol/L的试剂配方为临床实验室自动化分析测定肌酐的试剂配方，样本与试剂体积比为3：29，其它参数：波长520nm，温度37℃，测定时间30s，延迟时间20s。汪氏认为当高铁氰化钾浓度达到0.20mmol/L时，转变1000μmol/ L的胆红素可以在前20s内基本完成。可以看出用高铁氰化钾可以较好地消除胆红素对肌酐测定的干扰，但范仲元等人[4]提出加入的高铁氰化钾的量对测定结果有一定影响。试剂中加入高铁氰化钾后，标准液的反应速率有下降趋势。血清标本反应速率在加入高铁氰化钾浓度较低时有下降，但下降比率远较标准液为小，而加入浓度较高时反应速率有明显升高，总的效果是加入高铁氰化钾后使肌酐测定结果升高，且随高铁氰化钾浓度的升高而升高。

2.2 过氧化氢——过氧化物酶叶耀征等人[5]取黄疸病人血清200μL，加入1.76mol/L 过氧化氢5μL混合，再加800KU/L过氧化物酶5μl，充分混合后置37℃水浴15min。3000 rpm离心3min后再与碱性苦味酸试剂反应测定血清肌酐。试验证明200μmol/L以内的胆红素对肌酐测定无影响。可以看出，由于在消除胆红素过程中需要一定的水浴时间和温度，此法比较繁琐，不利于全自动生化分析仪操作。为了克服以上缺点，Rajs等人[6]将该法进行改良，认为由于间接胆红素与白蛋白为非共价结合，所以过氧化氢对直接胆红素的氧化过程快于对间接胆红素的氧化，为了提高氧化效率，缩短氧化时间，将咖啡因——苯甲酸盐加入过氧化氢——过氧化物酶中，使间接胆红素从蛋白质中置换出来，37℃反应7min（多数情况下，3～5min已经足够）后，再加入碱性苦味酸试剂测定血清肌酐。用该法在Cobas mi ra全自动生化分析仪上证明435μmol/L以内的胆红素对测定无影响。尽管如此，由于过氧化氢与过氧化物酶、氢氧化钠与苦味酸需临用前配制且不宜久置，所以操作上仍比较繁琐。

2.3 胆红素氧化酶Lorene等人[7]利用胆红素氧化酶在肌酐测定前预处理血清样品取得了良好效果。其中胆红素氧化酶1000U/L。室温孵育15min。国内陈伟英等人[8]利用胆红素氧化酶在Cobas fARA-Ⅱ型全自动生化分析仪上也取得了类似的效果，将样品8μL与胆红素氧化酶（200U/ml）8μL混合，以胆红素氧化酶氧化样品中的胆红素，再加入若味酸试剂80μL作为起动试剂，进行肌酐测定，其中保温时间90s，反应时间100s。但由于胆红素氧化酶不易获得且成本较昂贵，因此该法在国内未得到普及。

3 采用酶法测定肌酐

piero fossati等[9]和张厚亮等[10]利用该法测定血清肌酐，其中试剂1：N-哌嗪-N′-2-乙烷磺酸（HEPES）-NaOH缓冲液、肌酸脒基水解酶（CRTase）、尿素酶、谷氨酸脱氢酶（GLD）、异柠檬酸脱氢酶（ICD）、α-酮戊二酸。试剂2：HEPES-NaOH缓冲液、CR Nase、反式N，N，N’，N’-四乙酸-1，2-二氨基环乙烷（CYDTA）。其反应原理略。

酶法测定肌酐具有操作简便、特异性好、灵敏度高、不受胆红素及多种药物影响、适用于全自动或半自动生化分析仪，不仅能测定血清，而且也可以测定尿液，是目前认为测定肌酐最好的方法，但是其价格相当昂贵，一般至少是碱性苦味酸法的10倍以上，就国内医疗水平，难以普及。

4 采用Rate-Blank或Rate-B法测定肌酐

rate-Blank法是利用全自动或半自动生化分析仪中的特殊功能（样品速率空白）来达到克服胆红素干扰的目的。所谓样品速率空白是指将样品与试剂1（氢氧化钠）混合后作为样品空白测得的反应速率，也就是样品中胆红素被氢氧化钠氧化吸光度下降的反应速率，仪器经过自动扣除这种反应速率，将胆红素的负干扰值自动补偿入肌酐与碱性苦味酸的反应中，从而达到了消除干扰的目的。Hoffman rJ、Gerhard g及Alecey v Moshkin等人[11~13]利用Rate-Blank法在Hitachi737、736、Cobas mIRA上取得了良好效果。N.O’Leary等人[1]将高铁氰化钾法与Rate-Blank法相比较发现两法有很好的一致性。

rate-B法（twin test）是利用同一反应杯在一个反应周期内进行两个试验测定的功能。如果这两个试验均为速率法时，第一个反应的速率可以自动补偿入第二个反应的速率中去。我们把血清肌酐测定过程分解为两个试验，第一个试验测定胆红素在碱性环境下被氧化引起吸光度减少的速率，第二个试验测定加苦味酸后，肌酐与苦味酸反应所引起吸光度增高以及胆红素被氧化所引起的吸光度减少的总的速率。即前者测定胆红素的干扰，通过仪器微机自动处理，后者在结果计算中自动清除这种干扰，从而利用RATE-B法达到清除胆红素对肌酐测定干扰的目的。Osselaer、Lievens及石凌波、林龙顺等人[14，15]利用该法在Hitach i717、704、747、7150分析仪上取得良好效果。

rate-Blank或Rate-B法从方法学角度克服了黄疸对肌酐测定的干扰，试剂中不加任何附属成分，操作简便，与酶法结果一致，但此法在应用过程中受到了仪器的局限性。

5 小结

近年来，国内外关于胆红素对肌酐测定的负干扰已有许多报道，总的来说，以上的方法各有千秋。预处理法由于添加了其它成分，操作不可避免地显得冗长、繁琐，另一方面因为附加成分的介入，破坏了原有反应体系，可能又会引起新的干扰。但是对于缺乏Tate-Blan k或Rate-B法的生化分析仪，预处理法不失是一种很好的消除干扰的方法。而酶法测定肌酐由于价格的关系，目前只被国内少数医院接受，难以普及。我们认为各单位可以根据自己的实际情况来选择测定肌酐的方法。

作者简介：①石凌波，男，30岁，1990年毕业于第三军医大学医学检验系，现任广州军区广州总医院检验科主管技师。在Internet网上设有个人主页————临床检验园地（ht tp:/https://www.wendangku.net/doc/6a8109709.html,.），E-mail:rockshi@https://www.wendangku.net/doc/6a8109709.html,.cm

②林龙顺，男，59岁，现任广州军区广州总医院检验科主任技师，本刊编委。

参考文献

1 汪俊军，庄一义，刘海萍.临床检验杂志，1990；131-132

2 N.O’Leary, A. Pembroke, and P. E. Duggan, Clin Chem,1992;38(9):1749:1751

3 汪俊军，庄一义，刘海萍.中华医学检验杂志，1991;14(5):317

4 范仲元，徐蓉生，余明超.华西医学，1995;10(2):147-148

5 叶耀征，杨荣伟，汤权.上海医学检验杂志，1992;7(1):1-4

6 Goran Rajs, Michael Mayer, Clin Chem, 1992;38(12):2411-2413

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8 陈伟英，毛远丽，陈小倩，等.中华医学检验杂志，1995;18:143-145

9 Piero Fossati, Maurizio Ponti, Gianfranco Passoni, etal, Clin Chem,1994;40(1): 130-137

10 张厚亮，张济，愈帅真.临床检验杂志,1996;14(5):245-246

11 Hoffman RJ, Feld RD. Clin Chem, 1988;34(6):1313

12 Gerhardt G, Davitt C, Boblitz D. Clin Chem, 1990;36(6):1115

13 Moshkin AV. Clin Chem, 1994;40(8):1600-1601

14 Osselaer JC, Lievens MM. Clin Chem, 1991;37(8):1460-1461

15 石凌波,林龙顺,刘书霞,等.临床检验杂志,1997;15(3):145-147

总结总、直接胆红素的检测方法

血清总胆红素和直接（结合）胆红素测定 目前测定血清胆红素的方法主要有重氮试剂法（包括改良J-G法、二甲亚砜法、二氯苯重氮盐法和2，5二氯苯重氮四氟硼酸盐法等）、胆红素氧化酶法、钒酸盐氧化法、高效液相色谱法、导数分光光度法、经皮胆红素测定法以及直接分光光度法等。 改良咖啡因（J-G）法： 一、实验原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫色的偶氮胆红素；在同样条件下，未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂，醋酸钠缓冲液可维持反应的PH值同时兼有加速作用。叠氮钠破坏剩余重氮试剂，终止结合胆红素测定管的偶氮反应。最后加入碱性酒石酸钠，在碱性条件下，紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素，使最大吸光度由530nm转移到598nm，此时，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计，使测定的灵敏度和特异性增加。最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 二、实验方法 （一）器材 试管，刻度吸管，分光光度计，37℃水浴箱。 （二）试剂 1．咖啡因-苯甲酸钠试剂无水醋酸钠41g，苯甲酸钠37.5g，EDTANa2 0.5g，溶于约500mL 的蒸馏水中，再加入咖啡因25g，搅拌至完全溶解(不可加热)，然后加蒸馏水稀释至1000mL，混匀，过滤后放置棕色试剂瓶中，室温保存可稳定6个月。 2. 5g/L 亚硝酸钠溶液：亚硝酸钠5.0g，加蒸馏水溶解并稀释至100mL，若发现溶液呈淡黄色时，应丢弃重配。 3. 5g/L 对氨基苯磺酸溶液：对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H20）5.0g，加于约800mL 蒸馏水中，加浓盐酸15mL，待完全溶解后，加蒸馏水至1000mL。 4. 重氮试剂临用前，取5g/L 亚硝酸钠溶液（试剂2）0.5mL 与5g/L 对氨基苯磺酸溶液（试剂3）20mL 混合。 5. 5g/L 叠氮钠溶液：叠氮钠0.5g，用蒸馏水溶解并稀释至100mL。 6. 碱性酒石酸钠溶液：氢氧化钠75g，酒石酸钠(Na2C4H4O6·2H2O)263g，加蒸馏水溶解并稀释至1000mL，混匀，置塑料瓶中，室温保存可稳定6个月。 7.胆红素标准液可购买，也可按以下方法配制： （1）稀释血清：收集不溶血、无黄疽、清晰的血清过滤作为混合血清稀释剂。取过滤血清1.0ml，加生理盐水24ml，混匀。在分光光度计中，以比色杯光径1cm，波长414nm，用生理盐水调零，读取的吸光度应小于0.100，波长460nm 处读取的吸光度应小于0.040。（2）171umol/L胆红素标准液：称取符合标准的胆红素（MW:584.68）10mg，加入二甲基亚砜1ml，玻棒搅匀，加入0.05mol/LNa2CO3溶液2ml，使胆红素完全溶解。移入100ml 容量瓶，用稀释血清洗涤数次并移入容量瓶中，缓慢加入0.1mol/LHCl溶液2ml（边加边缓慢摇动，切勿产生气泡），最后用稀释血清稀释至100ml。避光，4℃保存，三天内有效，最好当天绘制标准曲线。 （三）步骤 1. 取试管3支，标明总胆红素管、结合胆红素管和空白管，然后按下表操作： 试剂(ml) 总胆红素管结合胆红素管空白管 血清0.2 0.2 0.2

内生肌酐清除率公式

内生肌酐清除率公式 成人体内含肌酐约100g，其中98%存在于肌肉，每天约更新2%，人体血液中肌酐的生成可有内、外源性两种，如在严格控制饮食条件和肌肉活动相对稳定的情况下，血浆肌酐的生成量和尿的排出量较恒定，其含量的变化主要受内源性肌酐的影响，而且肌酐大部分是从肾小球滤过，不被肾小管重吸收，排泌量很少，故肾单位时间内，把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清除出去，称为内生肌酐清除率（Ccr）。 内生肌酐清除率试验，可反映肾小球滤过功能和粗略估计有效肾单位的数量，故为测定肾损害的定量试验。因其操作方法简便，干扰因素较少，敏感性较高，为目前临床常用的较好的肾功能试验之一。 内生肌酐清除率试验（简称肌酐清除率）：内生性肌酐在体内产生速度较恒定（每20g肌肉每日约生成1mg），因而血中浓度和24小时尿中排出量也基本稳定。肌酐的测定方法也较菊粉简便，易于在临床推广应用。肌酐主要从肾小球排出外，还有小部分从肾小管分泌，小管分泌肌酐不仅个体差异较大，而且在GFR下降时由小管分泌所占比例也将代偿性加大。因此严格来说肌酐清除率与菊粉清除率所代表的GFR值之间有一定出入，在健康人，Ccr比Cin的数值约高出15%，且这一差异随GFR下降程度的增加而扩大，这是肌酐清除率固有的一个缺点。 内生肌酐清除率的测定： 标本采集与计算： 为排除来自动物骨骼肌和大量蛋白质食物中外源性肌酐的干扰，试验前应给受试者无肌酐饮食3天，并限蛋白入量，避免剧烈运动，使血中内生肌酐浓度达到稳定。 试验前24小时禁服利尿剂，留取24小时尿，其间保持适当的水分入量，禁服咖啡、茶等利尿性物质，准确计量全部尿量V（ml）；测尿肌酐（U）和血肌酐（P）。 Ccr= U×V/P（ml/min） V：每分钟尿量（ml/min）=全部尿量（ml）÷（24×60）min U：尿肌酐，umol/L P：血肌酐，umol/L

实验十八 血清胆红素测定

实验十六血清胆红素测定 （改良J-G法） 【目的】 1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法； ２.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。 【原理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素；未结合胆红素需要在加速剂（咖啡因-苯甲酸钠）作用下，分子内氢键破坏后，才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完成后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。 【器材】 试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。 【试剂】 1．咖啡因试剂 称取无水水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）0.5g，溶于约500ml去离子水中，再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解（加入咖啡因后不能加热溶解），用去离子水补足至1L，混匀。过滤后置棕色瓶，室温保存。 2．碱性酒石酸钠溶液 称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠（Na2C4H4O6·2H2O）263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。置塑料瓶中，室温保存。 3．5g/L亚硝酸钠溶液 称取亚硝酸钠0.5g，用去离子水溶解并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于2周。若发现溶液呈淡黄色，应废弃重配。 4．5g/L 对氨基苯磺酸溶液 称取对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H2O）5.0g，溶于800ml去离子水中，加入浓盐酸15ml，用去离子水补足至1L。 5．重氮试剂 临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶液20ml，混匀即成。 6．5.g/L叠氮钠溶液 7．胆红素标准液

肌酐酶法测定的两点法分析

肌酐酶法测定的两点法分析 摘要：目的：肌酐酶酶测定的两点分析。方法：通过两种试剂进行比较。反应温度为37℃，波长为500～520 纳米(主)/650 纳米(次)；标准为15毫升；样品也为15 毫升；试剂Ⅰ：200 毫升，孵育时间为300秒；试剂Ⅱ：50 毫升，第一点读数时间为120秒，第二点读数时间为300秒。结果：酶法具有去除肌酸的干扰能力，有线性范围宽，精度高等特点。结论：两点法对肌酐酶法测点有良好的作用。 关键字：肌酐酶法两点法 对于酶法测定肌酐，目前已报告的有四种方式，其中三种均为紫外测定，一种为比色测定。然而，在相比之下比色测定在除去肌酸的干扰能力、线性范围、精度等具有更高的优越性；市场上出售的商品试剂盒大多采用此法。但fossati 原法的反应时间比较长，且要做一血清空白以除去血清中肌酸的干扰，这样不适合进行自动分析。自动分析的一般反应时间为十分钟，为了除去肌酸的干扰必须采用两步法，反应时间要求在五分钟内达到。根据实验。必须将几种工具酶的用量增加到fossati原法的五到十倍。然而，在实验过程中发现几种工具酶的水解速率均比较缓慢，反应的线性时间比较长；所以，将其改成两点法或是速率法测定，会取得很好的实验结果。这也体现出两点法的优势。 1原理 第一步反应：排除肌酸干扰 第二步反应：测定肌酐 2材料与方法 2.1仪器：自动分析仪HITACHI7170，Beckman Synchron △CX5和Ciba Coring Express Plus。分光光度计Beckman DU-640。 2.2原料试剂：原料试剂采用的工具酶比较多，如：肌酐酰氨基水解酶，肌酸脒基水解酶，肌氨酸氧化酶，棘根过氧化物酶，抗坏血酸氧化酶，这些工具酶均为Boehringer Mannheim公司产品。3，5-二氯-2-羟-苯磺酸(DHBA)，4-氨基安替比林(4-AAP)和肌酐，均选用适量的剂量。 2.3应用试剂：试剂Ⅰ：每升磷酸盐缓冲液(150 Mmol/L,pH为7.5)中含CRTase 20 kU,SO 6 kU，POD 1 kU,ASO 1 kU,DHBA 3 Mmol,K4Fe(CN)6 20 Mmol,和4-AAP 4 Mmol。试剂Ⅱ：每升含CRNase 50 kU。参考物(177 Mmol/L):精确称取肌酐20 毫克溶于1升经透析的混合血清中。 2.4测定方法：自动分析通用参数、反应类型、两点法，反应温度为37摄氏度，波长为500～520 nm(主)/650 nm(次)；标准为15毫升，样品为15 毫升，试剂Ⅰ：200毫升，孵育时间300秒；试剂Ⅱ：50毫升，第一点读数时间：120秒，

总胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求艾威德

总胆红素测定试剂盒（重氮盐法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中总胆红素的含量。 1.1 包装规格 a) 试剂1：1×20mL 试剂2：1×5mL b) 试剂1：2×40mL 试剂2：1×20mL c) 试剂1：4×60mL 试剂2：2×30mL d) 试剂1：2×80mL 试剂2：2×20mL 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 氨基磺酸30 mmol/L 二甲基亚砜10 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 1.2.2试剂2主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液100 mmol/L 亚硝酸钠60 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 2.1 外观 试剂1应为无色透明液体，试剂2应为无色或淡黄色透明液体。 2.2 试剂装量 应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白吸光度 在546nm处测定试剂空白吸光度，应≤0.5。 2.4 分析灵敏度 测定TBIL含量为100 μmol/L样本时，其△A应≥0.01。 2.5 线性范围 2.5.1在（0，500）μmol/L范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990； 2.5.2测试浓度在（0，50] μmol/L范围内，线性绝对偏差应不超过±5 μmol/L； 测试浓度在（50，500）μmol/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性：用两个水平质控血清重复测试其变异系数（CV）应不超过5％。 2.6.2批间差：抽取3个不同批号试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。 2.7 准确度 在样本中加入一定量的纯品，计算回收率，应在85%～115% 范围内。 2.8 稳定性 取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

肌酐清除率计算公式 最新版本

内生肌酐清楚率公式为Ccr=(140-年龄)×体重(kg)/72×Scr(mg/dl) 或Ccr=[(140-年龄)×体重(kg)]/[0.818×Scr(umol/L)] 内生肌酐清楚率计算过程中应注意肌酐的单位女性按计算结果×0.85。【Ccr（内生肌酐清除率）Scr（血肌酐）】 内生肌酐清除率公式应用举例： 患者男性血肌酐132umol/L 体重65kg 年龄25岁计算内生肌酐清除率Ccr=[(140-年龄)×体重(k g)]/[0.818×Scr(umol/L)]=[（140-25）*65]/[0.818*132]=69 mL/min?1.73m2 内生肌酐清除率的计算问问专家 如不想计算体表面积，也可代入公式Ccr=Ucr/Scr*V，计算出内生肌酐清除率。（Ucr：尿肌酐Scr：血肌酐V：每分钟尿量，ml/min）），当然此时需要留取24小时尿液。因容易留尿不准，且高温时需冷藏，所以存在一定不便。因此，患者可根据自身及当地医院条件选择简易的内生肌酐清除率公式进行计算。 内生肌酐清除率计算公式的局限性 通过测定血清肌酐水平，利用简便的计算方法计算内生肌酐清除率（Ccr），一般采用Cockcroft公式。 Ccr＝(140-年龄)×体重(kg)/72×Scr(mg/dl)。 女性按计算结果×0.85。 这个公式适用于肾功能损害比较轻的患者，对实际内生肌酐清除率较低的慢性肾病3—5期者其计算值往往偏高而并不适用。一般将肌酐清除率<60ml/min作为肾脏亚临床损害的参考指标。 男：Ccr(mg/l)＝（140－年龄）×体重（KG）/（7.2×Scr） 女：Ccr(mg/l)＝（140－年龄）×体重（KG）/（8.5×Scr） 男（umol/L）：Ccr＝（140－年龄）×体重（KG）/（0.814×Scr） 女（umol/L）：Ccr＝（140－年龄）×体重（KG）/（0.96×Scr）

胆红素

[3] 沈学耕. 胆红素待测标本受实验室光线照射影响测定结果的探讨[J]检验医学与临床, 2012, (03) .

结果受日光灯光照射组的总胆红素值明显下降,两组测定结果对比差异有统计学意义(P<0.01)。结论待测标本较多时,为减少胆红素的自发性氧化和光氧化而使胆红素测定结果偏低,标本采集后应立即测定胆红素,待测标本在上机测定前应置2～8℃冰箱中避光保存,防止标本中胆红素的氧化而影响测定结果。 【英文摘要】Objective Due to t he spontaneous o xidation and photo -oxidation effect of bilirubin,placing th e samples in the l ab too long,to inve stigate the influenc e of sun and light exposure on the detection results of total bilirubin.Meth ods A group of sp ecimens were exp osed to sunlight a nd lamplight in the laboratory and an other group of spe cimens were store d avoiding light.2 h later,the two gro ups of samples w ere detected plas ma total bilirubin.T he average deviati on of the detectio n results in the tw

总胆红素测定试剂盒(重氮法)

总胆红素测定试剂盒（重氮法） 一、胆红素的代谢 正常人血中胆红素来源有以下几种 （1）大部分来自于衰老RBC破坏后的Hb衍化而成 （2）小部分来自于非Hb的血红素蛋白质的血红素辅基分解，即分路胆红素 （3）极少部分来自于骨髓无效造血所产生的胆红素 胆红素与ALB结合后为肝细胞摄取并转变为水溶性的结合 胆红素，排至胆汁中，结合胆红素在肠道中被细菌作用还原成尿胆原，在肠道被吸收入门静脉，大部分肠肝循环，另一部分入体循环，经肾排泄入尿。 因此，在胆红素代谢的上述途径中有任一环节受阻，均可导致结合或非结合胆红素升高而产生黄疸。 二、胆红素测定的意义 测定胆红素有助于鉴别溶血性黄疸，肝细胞性黄疸及梗阻性黄疸 联合其它检测项目还可鉴别肝内淤胆和肝外梗阻性黄疸 溶血性黄疸肝细胞性黄疸梗阻性黄疸 血浆总胆红素（mg/dl）＜5 1-70 不完全梗阻10~15，完全梗阻20~30

未结合胆红素高度增加增加增加 结合胆红素正常增加高度增加 尿胆素定性阴性阳性强阳性 尿中胆素原增多不定或升高减少或消失 粪中胆素原增多减少减少或消失 三、测定原理 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶氮胆红素，所以称为直胆，又称1min胆红素测定，非结合胆红素测定时要以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试剂反应，抗坏血酸破坏剩余重氮试剂，加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计，使灵敏度和特异性升高，最后形成的绿色是由兰色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。 试剂：（1）咖啡因（2）碱性酒石酸钠液（3）亚硝酸钠液 （4）对氨基苯磺酸溶液（5）重氮试剂（将3、4混合） （6）5g/L NaN3 （7）胆红素标准液 操作： 总胆管结合管对照管

肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒-新

肌酐测定标准操作程序 1. 摘要 肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。 2. 适用范围 程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。 3. 职责 使用AU5811自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。 4. 检测方法 上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。 5. 原理 上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下： O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222 222224---42+???→?-+-+++????→?+++????→?+????→?+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素 肌氨酸肌酸肌酸 肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺. 由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比. 6. 仪器 AU5811自动生化分析仪 7. 试剂 7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、 ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林

肌酐清除率计算公式

肌酐清除率计算公式文件编码（008-TTIG-UTITD-GKBTT-PUUTI-WYTUI-8256）

内生肌酐清楚率公式为Ccr=(140-年龄)×体重(kg)/72×Scr(mg/dl) 或Ccr=[(140-年龄)×体重(kg)]/[×Scr(umol/L)] 内生肌酐清楚率计算过程中应注意肌酐的单位女性按计算结果×。【Ccr（内生肌酐清除率） Scr（血肌酐）】内生肌酐清除率公式应用举例：患者男性血肌酐132umol/L 体重65kg 年龄25岁计算内生肌酐清除率Ccr=[(140-年龄)×体重(k g)]/[×Scr(umol/L)]=[（140-25）*65]/[*132]=69 mL/min1.73m2 如不想计算体表面积，也可代入公式Ccr=Ucr/Scr*V，计算出内生肌酐清除率。（Ucr：尿肌酐 Scr：血肌酐V：每分钟尿量，ml/min）），当然此时需要留取24小时尿液。因容易留尿不准，且高温时需冷藏，所以存在一定不便。因此，患者可根据自身及当地医院条件选择简易的内生肌酐清除率公式进行计算。内生肌酐清除率计算公式的局限性 通过测定血清肌酐水平，利用简便的计算方法计算内生肌酐清除率 （Ccr），一般采用Cockcroft公式。 Ccr＝(140-年龄)×体重(kg)/72×Scr(mg/dl)。 女性按计算结果×。

这个公式适用于肾功能损害比较轻的患者，对实际内生肌酐清除率较低的慢性肾病3—5期者其计算值往往偏高而并不适用。一般将肌酐清除率<60ml/min作为肾脏亚临床损害的参考指标。 男：Ccr(mg/l)＝（140－年龄）×体重（KG）/（×Scr） 女：Ccr(mg/l)＝（140－年龄）×体重（KG）/（×Scr） 男（umol/L）：Ccr＝（140－年龄）×体重（KG）/（×Scr） 女（umol/L）：Ccr＝（140－年龄）×体重（KG）/（×Scr） 请教各位前辈这两个公式对吗 内生肌酐清除率测定常用的计算公式有： ①标准24小时留尿计算法： 尿肌酐浓度(μmol/L)×每分钟尿量(ml/min) 血浆肌酐浓度(μmol/L) ② 4小时留尿改良法：在严格控制条件下，24小时内血浆和尿液肌酐含量较恒定，为临床应用方便，用4小时尿及空腹一次性取血进行肌酐测定，先计算每分钟尿量(ml/min)，再按上述公式计算清除率。

肌酐检测试剂盒(酶法)产品技术要求

医疗器械产品技术要求编号： 肌酐检测试剂盒（酶法） 1.产品型号/规格及其划分说明 序号规格 1R1:2×60ml、R2:2×20ml 2R1:3×60ml、R2:1×60ml 3R1:3×50ml、R2:1×50ml 4R1:2×90ml、R2:1×60ml 5R1:3×50ml、R2:2×25ml 6R1:2×30ml、R2:2×10ml 7校准品（选配）：1×1ml 2.性能指标 2.1外观 试剂盒R1溶液应呈淡黄色、无颗粒、无杂质，试剂盒R2溶液应无色、无颗粒、无杂质，无沉淀和悬浮物；校准品应为无色透明液体。 2.2净含量 试剂盒各试剂装量应不小于标示值。 2.3试剂空白吸光度 用蒸馏水作为样品加入试剂测试,试剂空白吸光度A ≤0.10。 546nm 2.4分析灵敏度 测试387μmol/L被测物时，吸光度差值（△A）范围为0.04～0.24。 2.5线性范围 在（2.4～5000）μmol/L范围内，其线性相关系数r≥0.990；浓度≥750μmol/L 时，相对偏差≤20%；浓度＜750μmol/L时，绝对偏差≤22μmol/L。 2.6测量精密度 2.6.1重复性 用控制血清重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应≤6.0%。

2.6.2批间差 批间差应≤10.0%。 2.7准确度 用参考物质进行测试，其相对偏差应≤10.0%。 3.检验方法 仪器基本要求 a）波长：546nm；温度：37℃±1℃。 b）全自动生化分析仪。 测试方法按说明书规定，因不同机型使用试剂最终浓度相同。在此推荐以本公司BECKMAN或HITACHI全自动生化分析仪进行测试。 3.1外观和性状 目测检查，应符合2.1的要求。 3.2净含量 用通用量具进行测量，应符合2.2的要求。 3.3试剂空白吸光度 用蒸馏水作为样品测试试剂（盒），在测试波长546nm下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5min(t)后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值，应符合2.3的要求。 3.4分析灵敏度 用387μmol/L的样品测试试剂（盒），记录试剂（盒）在546nm下产生的吸光度改变，换算为吸光度差值（△A），结果应符合2.4的要求。 3.5线性范围 用接近线性范围上限高浓度（活性）的样品和接近线性范围下限低浓度（活性）的样品，混合成5个稀释浓度（xi）。分别测试试剂（盒），每个稀释浓度测试3次，分别求出检测结果的均值（yi）。以稀释浓度（xi）为自变量，以测定结果均值（yi）为因变量求出线性回归方程。计算线性回归的相关系数（r）。稀释浓度（xi）代入线性回归方程，计算yi的估计值及yi与估计值的相对偏差或绝对偏差，应符合2.5的要求。 3.6测量精密度 3.6.1重复性

肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法)产品技术要求meigaoyi

肌酐测定试剂盒(肌氨酸氧化酶法) 适用范围：用于体外定量检测人血清中肌酐的浓度。 1.1包装规格 a) 试剂1：2×45ml，试剂2:2×15ml； b）试剂1：7×65ml，试剂2:3×50ml； c）试剂1：3×60ml，试剂2: 3×20ml； d) 试剂1：2×300ml，试剂2:2×100ml； e) 试剂1：12×16.8ml，试剂2:12×5.6ml； f) 试剂1：2×54ml，试剂2:2×18ml； g）试剂1：1×30ml，试剂2:1×10ml。 1.2主要组成成分 试剂1主要组成成分 试剂2主要组成成分 2.1外观和性状

2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.1.2试剂1应为淡黄色透明溶液;试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。 2.2净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.3试剂空白 测定试剂空白吸光度，应＜0.2； 2.4分析灵敏度 测试100umol/L的被测物时，吸光度变化（△A）应不低于0.010。 2.5准确度 测定值与靶值相对偏差不超过±10%。 2.6精密度 2.6.1重复性 重复测定高值浓度的样品，变异系数（CV）应不超过5％。 2.6.2批间差 抽取3个不同批号试剂，对同一浓度样品进行重复检测，试剂盒批间相对极差应不大于10%。 2.7线性 试剂线性在（30，9000）umol/L区间内： 2.7.1线性回归的相关系数（r）应不低于0.990； 2.7.2（70，9000）umol/L区间内，相对偏差不超过±10%。 2.7.3（30，70]umol/L区间内，绝对偏差不超过±7umol/L。

肌酐清除率及计算公式

肌酐清除率及计算公式 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

肌酐清除率及计算公式 概念 是肌酸的代谢产物，在成人体内含肌酐约100g，其中98%存在于肌肉，每天约更新2%，人体血液中肌酐的生成可有内、外源性两种，如在严格控制饮食条件和肌肉活动相对稳定的情况下，血浆肌酐的生成量和尿的排出量较恒定，其含量的变化主要受内源性肌酐的影响，而且肌酐大部分是从肾小球滤过，不被肾小管重吸收，排泌量很少，故肾单位时间内，把若干毫升血浆中的内生肌酐全部清除出去，称为内生肌酐清除率（Ccr）。内生肌酐清除率试验，可反映肾小球滤过功能和粗略估计有效肾单位的数量，故为测定肾损害的定量试验。因其操作方法简便，干扰因素较少，敏感性较高，为目前临床常用的较好的肾功能试验之一。 正常值 成人 80～120ml／min；新生儿 40～65ml／min。 内生肌酐清除率公式为: Ccr=(140-年龄)×体重(kg)/72×Scr(mg/dl) 或 Ccr=[(140-年龄)×体重(kg)]/[×Scr(umol/L)] 内生肌酐清楚率计算过程中应注意肌酐的单位 女性按计算结果×。 注：Ccr（内生肌酐清除率） Scr（血肌酐） 临床意义

⑴内生肌酐清除率低于参考值的80％以下者，则表示肾小球滤过功能减退。 ⑵内生肌酐清除率低至50～70 ml/min，为肾功能轻微损害。 ⑶内生肌酐清除率31～50 ml/min, 为肾功能中度损害。 ⑷内生肌酐清除率30ml/min以下，为肾功能重度损害。 ⑸内生肌酐清除率低至11～20ml/min，为早期肾功能不全。 ⑹内生肌酐清除率低至6～10ml/min，为晚期肾功能不全。 ⑺内生肌酐清除率低于5ml/min，为肾功能不全终末期。 ? 计算公式： （1）Cockcroft_Gault公式： (140-年龄)×体重(k g) Ccr = ---------------------------------------- (女性×0. 85) 72×Scr(mg/dl) (140-年龄)×体重(k g) 或Ccr = ------------------------------------------(女性×0. 85) ×Scr(umol/L) 0. 84 ×Ccr ×1. 73 GFR(ml/min /1. 73 m2 ) =-------------------------------- BSA（体表面积m2） ? Cockcroft-Gault方程计算的cCcr值BSA标准化并矫正为GFR(ml/min /1. 73 m2 ) 。

肌酐-(肌氨酸氧化酶法)试剂盒-新

肌酐测定标准操作程序 1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。 2. 适用范围 程序适用于AU5811 自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。 3. 职责 使用AU5811 自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。 4. 检测方法 上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。 5. 原理 上海科华生物工程股份有限公司的肌酐（肌氨酸氧化酶法）试剂盒的测定原理如下： 肌酐H 2O肌酐氨基水解酶肌酸 肌酸H 2O肌酸脒基水解酶肌氨酸尿素 肌氨酸H2O O2肌氨酸氧化酶甘氨酸HCHO H 2O2 2出02 4氨基安替比林N-乙基-N 磺丙基-间甲苯胺过氧化物酶醌亚胺4出0 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺. 由于醌亚胺在波长546nm处有最大吸收峰，所以在一定底物浓度范围内,546nm处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比. 6. 仪器 AU5811 自动生化分析仪 7. 试剂 7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、 ESPMT、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林 7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8 C，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为 12 个月。试剂不可冰冻。 7.4 试剂准备：试剂为即用式。

高胆红素血症

高胆红素血症 胆红素是临床上判定黄疸的重要依据，亦是肝功能的重要指标。正常血清总胆红素浓度为1.7～17.1μmol/L,其中一分钟胆红素低于3.4μmol/L。当总胆红素在34μmol/L时，临床上即可发现黄疸；如血清总胆红素超过正常范围而肉眼看不出黄疸，则称为隐性黄疸，黄疸最常见于肝胆疾病，但其他系统疾病也可出现。 目录简介高胆红素血症(黄疸)的分类各种黄疸发生机理及临床特征先天性非溶血性黄疸高胆红素血症(黄疸)的鉴别诊断婴儿高胆红素血症分流性高胆红素血症综合征展开 简介正常胆红素代谢过程,如下： 一、胆红素来源正常红细胞的平均寿命为120天，衰老红细胞所释放的血红蛋白为胆红素的主要来源，占80%～85%，约10%～15%胆红素来自骨髓中未成熟红细胞的血红蛋白，另1%～5%来自肝的游离血红素及含血红素的蛋白质。血红素经微粒体血红素加氧酶催化变为胆绿素，胆绿素由胆绿素还原酶还原为胆红素。 二、胆红素的运输上述胆红素是游离胆红素，因未经肝细胞摄取，未与葡萄糖醛酸结合，故称为非结合胆红素。游离胆红素于血循环中附着于白蛋白上，形成胆红素－白蛋白复合物，运载到肝。 三、胆红素的摄取在肝窦内，胆红素被肝细胞微突所摄取，并将白蛋白与胆红素分离。胆红素进入肝细胞后，由胞浆载体蛋白Y和Z所携带，并转运到光面内质网内的微粒体部分。 四、胆红素的结合游离胆红素在微粒体内经葡萄糖醛酸转移

酶催化，与葡萄糖醛酸基相结合，形成结合胆红素。主要为胆红素葡萄糖醛酸酯，约占结合胆红素总量的75%，其余部分与葡萄糖、木糖、双糖和甘氨酸结合。 五、胆红素的排泄结合胆红素形成后从肝细胞排出的机制，至今仍不甚清楚，可能经高尔基器运输到毛细胆管微突、细胆管、胆管而排入肠道，但无疑是主动转运、限速和耗能过程，其间并有胆汁酸盐、钠离子的参与。结合胆红素进入肠腔后，由肠道细菌脱氢的作用还原为尿胆原，大部分(每日总量约68～473μmol)随粪便排出，称为粪胆原；小部分(10%～20%)经回肠下段或结肠重吸收，通过门静脉血回到肝，转变为胆红素，或未经转变再随胆汁排入肠内，这一过程称为胆红素的“肠肝循环”，从肠道重吸收的尿胆原，有很少部分(每日不超过6.8μmol)进入体循环，经肾排出。 高胆红素血症(黄疸)的分类 一、病因发病学分类 (1)溶血性黄疸；(2)肝细胞性黄疸；(3)胆汁郁积性黄疸；(4)先天性非溶血性黄疸。 二、按胆红素的性质分类 (一)以非结合胆红素增高为主的黄疸 1. 胆红素生成过多 2. 胆红素摄取障碍3. 胆红素结合障碍 (二)以结合胆红素增高为主的黄疸可由于胆红素在肝细胞内转运、排泄障碍或同时有胆红素摄取、结合和排泄障碍引起。 无论哪种分类方法，黄疸的发生归根到底都源于胆红素的某一个或几个代谢环节障碍。

肌酐清除率与肾功能

当肾功能出现异常时，拿着长长的检验报告单时，是不是看不懂上面所所标明的意义是如何的?内生肌酐清除率(CCr)和血肌酐(SCr)常常是检测肾功能不全的必查项目，通过它们的数值，可以诊断出肾功能不全病情程度如何，但是患者对于数值的不了解，常常让自己或家人无法知悉自己病情发展程度肾功能不全患者怎么看内生肌酐清除率和血肌酐?北京最好的肾病医院——北京京北医院肾病诊疗中心专家给大家做出回答。 怎么看内生肌酐清除率和血肌酐数值 专家表示，肾功能不全临床按病情程度分为四期，而这四期内生肌酐清除率(CCr)和血肌酐(SCr)的数值范围均是不一样的，为了更便于大家知晓这一问题，专家给出以下肾功能不全病情分级标准及正常值范围。 正常值范围 1、内生肌酐清除率(CCr)正常值范围 新生儿(以体表面积校正)：40～65ml/min 成人(以体表面积校正)：80～120ml/min。 2、血肌酐(SCr)正常值范围：一般来说血肌酐正常值标准为：44-133umol/L，其中男女数值可能存在如下差异 女 44～97umol/L 男 53～106umol/L 肾病专家余惠民主任医师提醒：当内生肌酐清除率数值下降幅度越大，或是血肌酐数值上升幅度越高的时候，则表明肾功能不全的病情程度就越为严重，临床上肾功能不全按病情程度可分为四期。 肾功能不全临床分期不同，数值也不一样 一期：肾功能储备代偿期（简称，代偿期） CCr ：50～80ml/min，SCr：133～177μmol/l； 二期：肾功能不全期（简称，失代偿期） CCr： 20～50ml/min，SCr：178～442μmol/l； 三期：肾功能衰竭期（简称，肾衰期）

血清直接胆红素测定实验设计

血清直接胆红素的测定 病人准备：要求病人处于安静状态，生活状态处于日常状态，避免过度空腹、饮食、饮酒吸烟 标本采集，处理，保存和要求：收集无溶血，无黄疸，无脂浊的新鲜血清或肝素血清，避光保存。混合，必要时可用过滤器过滤。 实验原理：血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素。醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完全后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的黄色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线找直接胆红素含量。 实验仪器设备及试剂：咖啡因试剂碱性酒石酸钠溶液5g/L亚硝酸钠溶液5g/L 对氨基苯磺酸溶液5g/L叠氮钠溶液胆红素标准溶液加样枪分光光度计（或半自动生化仪） 实验操作： 一。取两支试管，按表1操作 表1 改良J—G发测定血清直接胆红素操作表 加入物 (ml) 直接胆红素空白管 血清0.2 0.2 咖啡因苯甲酸钠试剂— 1.6 对甲基苯磺酸—0.4 重氮试剂0.4 — 混匀，准确1分钟 重氮钠0.05 — 咖啡因甲苯酸钠试剂 1.55 — 室温10分钟 碱性酒石酸钠 1.2 1.2 混匀，600nm波长比色，以空白管调0，读取各管吸光度。从标准曲线上查出直接胆红素浓度。 二．标准曲线的制作 表2 胆红素标准曲线的制作表 加入物 (ml) 对照管 1 2 3 4 5 胆红素标准贮存液— 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 稀释血清 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 — 相当于胆红素浓度 0 34.2 68.4 103 137 171 （u mol/L) 混匀（不可产生气泡),按直接胆红素的测定方法操作。每一浓度做2个平行管，用对照管调零，读取各管吸光度，以各管吸光度的均值为纵坐标，以相应胆红素浓度为横坐标，绘制标准曲线。

肌酐测定sop

肌酐测定SOP 1、检测方法原理 1.1酶法 1.2肌酐酶将肌酐水解为肌酸;肌酸酶水解肌酸形成肌氨酸;肌氨酸氧化酶氧化肌氨酸，产生过氧化氢。在过氧化物酶的存在下，过氧化氢与4-氨基安替比林和HTIB 反应，产生红色醌亚胺。显色强直接和肌酐浓度呈比例. 2、样品准备 用标准样品管收集血清。 肝素或者EDTA 抗凝血浆。在1 小时内分离血清或血浆并立即检测,储存于：4℃- 8℃稳定7 天-20 ℃稳定3 个月 ,-70℃长期稳定. 3、试剂 产品目录号: 11491458 R1试剂，6×216ml R1试剂，6×116ml R1 即用液体试剂。开瓶后上机冰箱稳定28 天。 R2 即用液体试剂。开瓶后上机冰箱稳定28 天。 4、校准 4.1标准化：以CRM 470 参考品对肌酐检测方法进行标准化。 校准品（C.f.a.s ，产品目录号（Cat. No.759350）。 S1 0.9%NaCl 4.2校准周期和要求：每过28天。推荐进行两点校准 4.2.1试剂批号更换时 4.2.2质量控制有问题时 5、质量控制 正常质控液名称: PreciControl ClinChen Multi 1 病理质控液名称: PreciControl ClinChen Multi 2 上述的各质控品在产品规定的条件下，可以储存至产品失效期。 复溶后25 ℃稳定12 小时;4 ℃稳定5 天;-20 ℃稳定1 个月（冻融一次）

控制区间和限值应适应各实验室的要求。 检测的控制值应在确定的限值内。 若控制值失控，实验室应建立纠正措施。 6、分析性能的确认 6.1 可报告范围：2.7–2652 μmol/L 6.2 灵敏度：2.7 μmol/L 最低灵敏度为非空白的最低可检测白蛋白浓度。对最低总蛋白标准进行21 次重复测定，以3 倍标准差确定检测低限。 6.3 抗干扰能力 判断指标：脂血1250 时的回收率在初始值的±1 0%，干扰属可接受。 黄疸：I 指数低于24 结合胆红素和游离胆红素浓度约为60mg/dl 没有明显干扰。溶血：H 指数低于700 血红蛋白浓度约为1 000mg/dl 没有明显干扰。 6.4 参考值< 6.2 mmol/L

总胆红素偏高的防治汇萃

总胆红素偏高的防治 总胆红素 总胆红素total bilirubin，英文缩写TBIL或STB。参考值：3.42～20μmol/L。总胆红素是直接胆红素和间接胆红素二者的总和。总胆红素升高就是人们常说的黄疸。 总胆红素主要用来诊断是否有肝脏疾病或胆道是否发生异常，总胆红素正常值在1.7-20.5μmol/L之间，17.1-34.2μmol/L可视为隐性黄疸;34.2-170μmol/L之间为轻度黄疸;170-340μmol/L为中度黄疸;大于340μmol/L则为重度黄疸。 检查要求 空腹[1]12小时取静脉血。 详细解释 胆红素 胆红素 血清中的[2-4]胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素，二者的和就是总胆红素。 临床意义：临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻，当血清总胆红素有很大增高时，人的皮肤、眼睛巩膜、尿液和血清呈现黄色，故称黄疸。当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可以引起黄疸，胆道疾病及溶血性疾病也可以引起黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。以间接胆红素升高为主常见于溶血性疾病、新生儿黄疸或者输血错误等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素与间接胆红素都可以升高。总胆红素增高，见于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色肝萎缩。先天性胆红素代谢异常（Crigler-Najjar综合征、Gilbert综合征、Dubin-Johnson综合征）、果糖不耐受等，以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。 临床意义 胆红素增高见于： （1）肝脏疾患：急性黄疸型肝炎、急性黄色肝坏死、慢性活动性肝炎、肝硬化等。 总胆红素测定试剂盒 （2）肝外的疾病：溶血型黄疸、血型不合的输血反应、新生儿黄疸、胆石症、肝癌、胰头癌等。 总胆红素偏低的原因：

肌酐-(肌氨酸氧化酶法)试剂盒-新

肌酐测定标准操作程序 1. 摘要 肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。 2. 适用范围 程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。 3. 职责 使用AU5811自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。 4. 检测方法 上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。 5. 原理 上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下： O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222 222224---42+???→?-+-+++????→?+++????→?+????→?+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素 肌氨酸肌酸肌酸 肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺. 由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比. 6. 仪器 AU5811自动生化分析仪 7. 试剂 7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、 ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林 7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为 12个月。试剂不可冰冻。 7.4 试剂准备：试剂为即用式。