甲型流感病毒抗原检测试剂使用说明(胶体金)-Alere BinaxNOW

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用说明书

【产品名称】

通用名称：甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）

英文名称：Alere BinaxNOW? Influenza A＆B Card

【包装规格】

22人份/盒。

【预期用途】

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）是一种体外免疫层析试验，用于定性检测鼻咽拭子样本中的甲、乙型流感病毒核蛋白抗原，可快速地对甲、乙型流感病毒感染做出辅助鉴别诊断。

试验简介

流感是发生在呼吸道的具有高度传染性的急性病毒感染，它属于传染病范畴，可通过咳嗽或打喷嚏时排出的带有活病毒的气溶胶而在人与人之间传播。每年的秋季和冬季都可爆发流感1.甲型流感病毒的流行性比乙型流感病毒流行性要强，造成的病情也更严重，并且大多数严重的流感也都是由它引起的，而乙型流感则相对比较缓和。

针对甲、乙型流感的快速诊断试验对获取有效的抗病毒治疗是很有意义的。对流感做出快速诊断不但可减少病人住院的天数，减少抗菌素的使用，而且可减少病人的住院费用1。

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）提供了一种用鼻咽拭子标本对甲型和乙型流感进行简便快速诊断的方法，使用方便，结果快速，在急诊检验中提供的信息可帮助医生选择治疗方案并做出是否需要收住院的决定。

甲型流感病毒有许多亚型，有些亚型可在鸟类中发现3。1997年首次报道人类甲型禽流感（H5N1，主要发生于鸟类的一种流感病毒亚型），此后，在人群中出现了H5N1病例，使人们对H5N1关注起来，H5N1的变异使得它更易在人群间传播4，由于备案的禽流感感染病人比例很低，快速试验在该类病人治疗中利用度尚不得知。

【检验原理】

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用的是薄膜免疫层析技术，它利用具有高度敏感性的单克隆抗体来检测鼻咽拭子标本中的甲型和乙型流感病毒的核蛋白抗原这些单克隆抗体连同一种对照抗体分别被固定到膜支持物上，形成三条独特的线。膜支持物跟其他试剂/垫结合在一起构成检测条。检测条位于一个称作检测卡的书型铰链状的纸板中。

拭子标本需要进行预处理：用洗脱液、盐水或转移介质等将标本从拭子中洗脱出来，将标本加到检测条顶端，闭合检测卡，15分钟时根据是否出现紫红色样品线来报告结果。在有效试验中，蓝色对照线变为粉红色。

【主要组成成分】

提供的材料

1.检测卡：22人份。包含对甲型流感病毒核蛋白抗原具有高度特异性的单克隆抗体、结合

有胶体金颗粒的对甲型流感病毒核蛋白抗原具有高度特异性的单克隆抗体、对乙型流感病毒核蛋白抗原具有高度特异性的单克隆抗体、结合有胶体金颗粒的对乙型流感病毒核蛋白抗原具有高度特异性的单克隆抗体、兔抗羊IgG、结合有胶体金颗粒的羊IgG。2.吸管：22份，吸管的体积是固定的（100ul），用于向检测卡中加标本用。只能使用随试

剂盒提供的吸管或经过校准能转移100ul标本体积的吸管。

3.阳性对照拭子：1份，将灭活的甲型流感病毒和灭活的乙型流感/哈尔滨（即乙型流感病

毒）干燥结合到拭子上。

4.阴性对照拭子：1份，灭活的A群链球菌干燥结合到拭子上

5.对照拭子用洗脱液小瓶:2瓶，小瓶中含约0.5ml洗脱液，用于处理测试的对照拭子。

不包含但试验必需的组分（可单独购买）

鼻咽拭子附件包：

鼻咽拭子：甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）使用的是无菌拭子，可用其他带弹性柄的无菌鼻咽拭子代替，详见标本采集和处理部分。

拭子标本用洗脱液小瓶：1瓶，小瓶中盛有约0.5ml洗脱液，用于预处理测试用的拭子标本，转移介质或盐水可代替洗脱液使用，详见标本采集和处理—介质转移章节。

建议使用但未提供的材料

时钟、秒表或跑表：鼻洗液/冲洗液采集器。

【储存条件及有效期】

2-30℃环境中储存，有效期为24个月。试剂盒的失效期标注在外包装盒上。试剂成分在失效期前较稳定，不要使用过期试剂，包装打开后，未用的检测卡应立即放回盛干燥剂的包装袋中密封保存。

【样本要求】

使用新鲜收集的标本做试验，收集的标本量不足或标本的处理和转运不合适，可能会产生假阴性结果。

鼻咽拭子

使用弹性柄的无菌棉花、人造纤维、泡沫、聚酯鼻咽拭子采集鼻咽标本，本试验建议不要使用澡酸钙拭子。

标本采集后1小时内洗脱拭子标本，尽快测试。在用本试剂盒进行检测前洗脱下来的拭子标本可在2-8℃保存24小时。如有需要，可在2-8℃用防漏容器运送标本。

在用本试剂盒进行检测前要将所有标本平衡至室温，轻轻旋转混匀。

转运介质：

下列介质经过测试，可用于本试剂盒的检测。

Amies培养基

心脑浸液

Dulbecco培养基

Hank,s平衡盐液

M4培养基

M4-RT培养基

M5培养基

M6培养基

磷酸盐缓冲液

盐水

Stuart,s培养基

胰蛋白磷酸盐肉汤

UTM-RT培养基

小牛浸液

蔗糖磷酸盐缓冲液已确定不适用于本试验。

【检验方法】

标本预处理

用转运介质洗脱鼻咽拭子：

在0.5到3.0ml的盐水或转移介质中用力搅动拭子以洗脱拭子。对可选用的转移介质参见标本采集和处理部分。进入检测程序。

用试剂盒中的洗脱液洗脱拭子（对照拭子和样本拭子）

1.将预灌注的洗脱液试验瓶的盖子扭下来。

2.将待测拭子插入试验瓶，将拭子在液体中用力转动3圈。

3.在将拭子从瓶中取出前，将拭子在瓶壁上挤压转动，使标本从拭子中移出。

4.丢弃拭子。

5.尽可能早地用本试剂盒对测试瓶中的液体标本进行检测。进入检测程序。

检测程序

1.测试前将检测卡从包装袋中取出，平放在工作台上。

2.挤压移液管上的吸球并把移液头插入标本中，当吸头在标本中时松开吸球，将液体吸到

管中。确保管的下部没有空气。

3.根据检测卡上的箭头找到检测条上部的白色样品垫，将移液管中的全部液体（100ul）慢

速（逐滴）加到垫的中部，使所有标本都吸附到垫中。不要将标本加到紫红色垫上。4.立即揭去检测卡上的粘附衬，将检测卡封闭，15分钟时读取窗口中的结果。早于15分

钟或晚于15分钟的结果可能不准确。

注意：读结果时，如有必要可将检测板倾斜以减少结果窗口中的亮光。

【参考值（参考范围）、检验结果的解释】

对阴性结果，窗口底部的蓝色对照线变为紫红色，而无其他线出现。

对甲型流感阳性标本，蓝色对照线变为紫红色，且它上边的中间那条标本线也变为紫红色，只要有标本线出现，即使颜色很浅，结果也是阳性的。

对乙型流感阳性标本，蓝色对照线变为紫红色，且它上部最上边的那条标本线也变为紫红色，只要有标本线出现，即使颜色很浅，结果也是阳性的。

如果对照线仍为蓝色或根本就没出现，不管标本线出现与否，结果都为无效。用新的检测卡重新检测，如果问题仍无法解决，请致电客户服务电话。

结果报告

甲型流感阳性：甲型流感病毒蛋白抗原阳性。该结果不排除存在其他共感染的致病原，也不能对甲型流感病毒亚型做出特异性鉴别诊断。

乙型流感阳性：乙型流感病毒蛋白抗原阳性。该结果不排除存在其他共感染的致病原，也不能对甲型流感病毒亚型做出特异性鉴别诊断。

阴性：甲型和乙型流感病毒蛋白抗原阴性。不能排除甲型和乙型流感引起的感染，标本中的甲型和/或乙型流感抗原可能在检出限以下，Alere建议对阴性结果做培养证实。

【检验方法的局限性】

阴性结果不能排除存在甲和/或乙型流感感染的可能性，因此，对甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）获得的结果要与临床检查相结合，以便做出准确的诊断。如若需要其他能区分甲型和乙型流感病毒特异亚型或株试验，请向国家或地方卫生部门垂询。

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）能检测甲型和乙型流感的死病毒和活病毒，试验性能取决于标本中的抗原载量，可能与同一份标本的细胞培养结果无相关性。

甲型和乙型流感病毒在靶表位区氨基酸的微小改变都可能造成单克隆抗体不能检测或检测敏感性下降。

甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）监测抗病毒治疗的性能尚未确立。

体外诊断试验的阴性和阳性预测值对疾病的流行性依赖非常大，假阴性结果更可能出现在疾病流行性很强的峰活动期。假阳性结果更可能出现在轻中度流行性的低病毒活动期。

不建议使用肉眼可见的含血液的标本进行本试剂盒的检测。

用鼻吸入法接种甲型流感疫苗的个体，接种后三天内用流感快检试剂检测，可出现阳性结果。儿童排出病毒的数量和排毒持续时间都超过成年人，因此，成年人对流感体外诊断的敏感性要低于儿童。

【注意事项】

1.体外诊断用。

2.使用前将检测卡密封在包装袋中。

3.不要使用过期的试剂盒。

4.不要将不同试剂盒中的成分混和使用。

5.检测条上部的白色样品垫含有从病毒中萃取靶抗原的试剂，为使操作最佳化，将标本慢

慢（逐滴）地加到此垫的中部，以使所有标本都吸到垫中。

6.用于制造对照拭子的溶液都用标准方法灭活过，可是，病人标本、对照品，检测卡等仍

应作为能传播疾病的物质处理。

7.如果根据卫生机构推荐的当代临床和流行病学检测标准，有新的疑似甲型流感感染时，

应当用适宜的感染控制措施收集毒力强的新型流感病毒标本，送国家或地方卫生部门检测。除非有可接收这种标本并对之进行培养的BSL3+（3级生物安全实验室）设备，不要对这些病例试图做病毒培养5。

8.当加到检测卡中的标本量不足时可产生无效结果。为保证加样准确。在将移液管中的液

体加到检测卡的样品垫上的时候，要确保移液管下部的充盈的，不含气体。如果含有气体，将标本排回到容器中，通过挤压上部的吸球将标本重新吸回到管中，必要时换一支新的移液管。

9.所有移液管和洗脱液小瓶都是一次性使用物品，不要用于多份标本。

10.甲型流感病毒的操作特性是在A/H3和A/H1是主要甲型流感传播病毒是时候建立起来

的，气体甲型流感病毒出现后，操作特性可能会不同。

11.该试验对禽流感的检测能力是用培养的禽流感病毒确定的，该试验对从感染H5N1或其

他禽流感的人中收集的标本的操作特性尚不得知。

妊娠相关蛋白A测定试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求普迈德

妊娠相关蛋白A测定试剂盒（胶体金免疫层析法） 适用范围：本测定试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆或全血样本中妊娠相关蛋白A的含量。 1.1 包装规格 10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。 1.2 主要组成组分 每盒含10/20/50人份试纸条、样品缓冲液（0.1mol/L的Tris-HCl缓冲液，pH 值7.0）和标曲信息卡（二维码）。每人份试纸条配套1份检测卡、1套取样滴管（选配）和1包干燥剂。检测卡由样品垫、硝酸纤维素膜（T线包被鼠抗人妊娠相关蛋白A单克隆抗体；C线包被羊抗鼠多克隆抗体）、金标垫（包被胶体金标记的鼠抗人妊娠相关蛋白A单克隆抗体）、吸水纸、塑料载板组成。 2.1 物理性状 2.1.1 外观 测定试剂应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固；标签字迹清晰，无破损。 2.1.2 膜条宽度 测定试剂的膜条宽度≥2.5mm。 2.1.3 液体移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.2 空白限 空白限应不高于25mIU/L。 2.3 精密度

2.3.1 批内精密度 批内精密度CV(%）应不高于12.0%。 2.3.2 批间精密度 批间精密度R(%）应不高于15.0%。 2.4 线性 在[25，5000]mIU/L的范围内，线性相关系数应不低于0.990。 2.5 准确度 回收率应在85%～115%之间。 2.6 分析特异性 含浓度不低于500mIU/mL HCG的零浓度妊娠相关蛋白A样本，检测结果不高于25mIU/L。 2.7 稳定性 将测定试剂在4℃～30℃的环境中放置18个月后，取样分别检测2.1、2.2、2.3.1、2.4、2.5、2.6项，结果应符合各项目的要求。 2.8 校准品溯源性 按照GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定建立溯源性，提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，溯源至公司内部工作校准品，并与已上市产品比对赋值。

胶体金快速检测技术试验(传染病实验课)

实验四 胶体金快速检测技术试验 一、胶体金试纸条诊断技术的原理： 以硝酸纤维素膜为载体，利用了微孔膜的毛细管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，通过抗原抗体结合，并利用胶体金呈现颜色（红色）反应，检测抗原/抗体。 二、层析法免疫胶体金检测方法的优点： ? 1.方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。 ? 2.短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。? 3.不同环境下的稳定性好，不需冷藏。 ? 4.相比而言，其生产成本和检测成本均较低。 ? 5.检测标本种类多：可用于查血、尿液或粪便。 ?三、应用 ?猪伪狂犬病抗体快速金标检测卡 ?原理：猪伪狂犬抗体检测试剂盒（胶体金法），系采用国际最先进的胶体金免疫层析技术检测样本（全血、血清、血浆）中抗猪伪狂犬抗体的方法。整个试验只需20分钟，操作简便、快速、准确，灵敏度高、结果直观、容易判定。 ? 1.操作方法： ?①在检测卡的加样孔内加入100μl待检血清或血液样品。

?②将检测卡平放于桌面上，在室温下静置5-20分钟内判定结果。 超过20分钟的结果只能作为参考。 ? 2.结果判定： ??阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线。猪伪狂犬抗体滴度越高，检测线（T）颜色越深。??弱阳性：在观察孔内，检测线区（T）及对照线区（C）同时出现紫红色线，但检测线区（T）出现的颜色很浅。 ??阴性：在观察孔内，只有对照线区（C）出现一条紫红色线。??失效：在观察孔内，对照线区（C）和检测线区（T）都不出现色线；或仅检测线区（T）出现色线。 ?猪瘟病毒抗体、猪蓝耳病抗体快速金标检测卡原理、操作方法、结果判定与猪伪狂犬病抗体快速金标检测卡的基本相同 ? ? ? ?

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(胶体金法)

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法） 【检验目的】 定性测定人血清（浆）中的HCV抗体，用于临床术前的初筛查检测。 【实验原理】 丙型肝炎病毒抗体诊断试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗人IgG抗体（anti-IgG Ab），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被丙肝混合抗原（Core、NS3、NS4、NS5）和人IgG抗体。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人IgG抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Atenti-IgG Ab-HCV Ab-HCV Ag”夹心物而凝聚显色游离金标鼠抗人IgG 抗体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，15分钟内观察结果即可。 【样本要求】 1、采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。 2、如果血清和血浆样品收集后 7天内检测，样品须放在0-4C保存；大于7天必须-20C—下冷冻保存。 3、常规抗凝剂不影响实验结果。 4、溶血、粘稠及高指标本不适于本试剂。含特殊物质的标本可能会导致检测结果不稳定， 在检测前须清除。 5、在标本中加0.1%NaN3不影响实验结果。 【试验方法】 测试条： 1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 2、将胶体金试纸条从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。 3、用塑料滴管加1滴（10卩）样本血清或血浆，加到试纸条指示箭头下端的加样处。 4、随即滴加2滴样本稀释液（约100^）1。 5、加样后，阳性标本可在1~15分钟内检出，建议15分钟后在最终观察并记录实验结果。 测试卡： 1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。 2、将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。 3、用塑料滴管加1滴样本血清或血浆，加到测试卡上的 S孔。 4、随即滴加2滴（约100 ^）1样本稀释液到测试卡上的 D孔。 5、加样后，阳性标本可在1~15分钟内检出，建议15分钟后在最终观察并记录实验结果。 【结果判断】 阳性：试纸条/试卡在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。 阴性：试纸条/试卡只在对照线位置出现一条紫红色条带。 失效：对照区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质 损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试纸条/试卡重新测试。

胶体金检测试剂盒产品风险管理报告模板

XXX产品风险管理评估报告 文件编号:__________________ 文件版本：__________________ 编制人员：__________________ 编制时间：__________________ 审核人员：__________________ 审核时间：__________________ 批准人员：__________________ 批准时间：__________________

第一章概述 1.1产品简介 血清淀粉样蛋白A（胶体金法），采用了胶体金免疫层析技术双抗法。在本产品试剂盒的硝酸纤维素膜上有一条检测线（T线），一条质控线（C线），试纸条一端，即硝酸纤维素膜的底端的结合垫包被有单克隆抗体-胶体金复合物。检测时，如果受检血液中含有血清淀粉样蛋白A，则血清淀粉样蛋白A与结合垫中的单克隆抗体-胶体金复合物结合，形成“SAA -抗SAA单克隆抗体-胶体金复合物”，向上层析到T线时，会与预先包被在T线的抗原结合，在T线处形成一条紫红色线条。 1.2 产品组成 由PVC胶板、吸水垫、硝酸纤维素膜、样品垫和结合垫组成。 1.3风险管理计划及实施情况简述 血清淀粉样蛋白A（胶体金法）于2019年2月开始策划立项。立项同时，公司就针对产品进行了风险管理活动的策划，成立了风险管理小组，确定了该项目的风险管理负责人。 风险管理小组制定了医疗器械风险管理计划，确定了试剂盒的风险可接受的准则，对产品设计开发阶段的风险管理活动以及生产和生产后信息的获得方法进行了安排。 风险管理小组严格按照医疗器械风险管理计划的要求对试剂盒设计开发阶段进行了风险管理，并建立和保持了相关的风险管理文档。 1.4风险管理评审目的 风险管理评审的目的是通过对血清淀粉样蛋白A（胶体金法）在上市前各个阶段风险管理活动进行的总体评价，确保风险管理计划已经完满地完成。并通过对该产品的风险分析、风险评价和风险控制，以及综合剩余风险的可接受性评价，证实对产品的风险已进行了管理，并且控制在可接受性范围内。 1.5风险管理评审小组成员及其职责

肺吸虫抗体快速检测试剂盒(胶体金法)

肺吸虫抗体快速检测试剂盒（胶体金法） 肺吸虫病概述： 卫氏并殖吸虫，简称肺吸虫。此虫主要寄生于肺，造成肺部受损的人畜共患寄生虫病。人多因为生食或半生不熟含有肺吸虫囊蚴的石蟹、蜊蛄和生水而导致感染肺吸虫病，其临床症状多以咳嗽、咳棕红色痰为主要表现。当人体感染肺吸虫病后，机体会产生特异性抗体，通过肺吸虫血清抗体快速检测对该病的辅助诊断和流行病学的监测有着重要的意义！ 产品简介： 肺吸虫快速检测试剂盒采有金标渗滤式间接法定性检测试验血清中的肺吸虫抗体IgM/IgG，适用于疑似肺吸虫病的大量人群进行快速筛查。 检测原理： 本试剂盒利用斑点免疫金渗滤技术，将肺吸虫纯化抗原预先包被在固相载体硝酸纤维素薄膜上，待检测时，将预先处理好的样本血清滴加在加样孔中，通过渗滤使抗体和抗原在膜上发生特异性免疫结合反应，形成抗原抗体复合物。然后滴加红色胶体金标记的第二抗体（显色液），与复合物中对应的的抗体结合，则形成肉眼可读取的检测结果。 试剂盒组成： 1、肺吸虫快速检测板（含预先包被的肺吸虫纯化抗原） 2、试剂A（洗涤液1瓶，0.02moI/L PH7.4PBS） 3、试剂B（显色液1瓶，含胶体金标记物） 4、原版说明书1份 包装规格：24T/盒，单人份独立包装 检测样本：只限血清 储存条件：原试剂盒包装于2-8℃密封避光保存 有效日期：18个月 生产企业：广州市标健生物科技有限公司 样本要示： 样本只限血清，建议最好采用新鲜血清标本，若是陈旧血清或高血脂血清恐影响检测效果。 检验方法： 1、将试剂盒取出，和样本一起恢复室温25℃左右。 2、拆开试剂包装，将检测板水平放于工作台。 3、在反应孔中间垂直加入2滴（试剂A），待液体完全渗透。 4、在反应孔正中央垂直加入50ul待检血清，待血清完全渗透。 5、加入4滴显色液（试剂B），待液体完全渗透。 6、加入2滴（试剂A），待液体完全渗透，观察结果。 检测结果的解释： 阳性结果：检测板的C端出现红色线条，T端也出现红色线条，表明肺吸虫IgM抗体阳性。阴性结果：检测板的C端出现红色线条，T端不出现红色线条，表明肺吸虫IgM抗体阴性。

罗丹明B快速检测胶体金

附件3 食品中罗丹明B的快速检测 胶体金免疫层析法（KJ201703） 1范围 本方法规定了食品中罗丹明B的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于辣椒粉和辣椒酱中罗丹明B的快速测定。 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中罗丹明B经有机试剂提取，固相萃取小柱净化，浓缩复溶后，罗丹明B与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中罗丹明B进行定性判定。 3试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。 3.1试剂 ，用水溶解并稀释至刻度，制成0.2mol/L溶液A；称取31.21g磷酸二氢钠(，用水溶解并稀释至刻度，制成0.2mol/L溶液B。将溶液A与溶液B按照体积比67:33混匀，制成pH7.1磷酸盐缓冲液。 3.2参考物质 罗丹明B参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度≥98.6% 表1 罗丹明B参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量 注：或等同可溯源物质。 3.3标准溶液配制 ，置于10mL容量瓶中，用甲醇（，摇匀，制成浓度为1mg/mL的罗丹明B标准储备液。冷藏，有效期6个月。 ，置于100mL容量瓶中，用甲醇（，摇匀，制成1μg/mL的罗丹明B标准中间液A。临用新制。，置于10mL容量瓶中，用甲醇（，摇匀，制成100ng/mL的罗丹明B标准中间液B。临用新制。 3.4材料 ，1000mg/6ml。 ，在产品有效期内使用）。 4仪器和设备

4.1移液器：200μL、1mL和10mL。 4.2涡旋混合器。 4.3离心机：转速≥4000r/min。 4.4电子天平：感量为0.01g。 4.5振荡器。 4.6样品浓缩仪：如有需要。 4.7环境条件：温度：15℃—25℃，相对湿度≤60%。 5分析步骤 5.1试样制备 取具有代表性样品约500g，充分粉碎混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样和留样，密封，标记，于常温保存。 5.2试样提取和净化 准确称取试样2g（精确至0.01g）置于50mL具塞离心管中，依次加入20mL提取剂（，振荡提取3min，以5000r/min离心5min。上清液待净化。 吸取5mL提取剂（，流出液弃去。将上清液全部转移至固相萃取小柱中，流出液弃去。再加入20mL提取剂（，流出液弃去。用5mL甲醇洗脱小柱，收集洗脱液吹干。精密加入500μL复溶液（，涡旋混合1min，作为待测液。 5.3测定步骤 吸取200μL样品待测液于金标微孔（，抽吸5—10次使混合均匀，室温温育5min；温育结束后，将试纸条（，室温温育5—8min，从微孔中取出试纸条，去掉试纸条下端的吸水海绵，进行结果判定。 吸取全部样品待测液于金标微孔（，抽吸5—10次使混合均匀，室温温育5min；温育结束后，将金标微孔中溶液滴加到检测卡（，室温温育5—8min，进行结果判定。 5.4质控试验 每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。 称取空白试样，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。 准确称取空白样品2g或适量（精确至0.01g）置于50mL具塞离心管中，加入100μL或适量罗丹明B标准中间液B（100ng/mL）（，使罗丹明B浓度为5μg/kg，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。 6结果判定要求 通过对比控制线和检测线的颜色深浅进行结果判定。由于长时间放置会引起检测线颜色的变化，需在规定时间内进行结果判定。目视结果判读依据如图1所示。 6.1无效 控制线（C线）不显色，表明不正确操作或试纸条/检测卡无效。

食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究

食品中四环素类抗生素金标快速检测试剂条的研究 张银志1,肖利文2,杨燕2,孙秀兰1,23 　(1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214036;2.江南大学食品学院,江苏无锡214036) 摘要　[目的]建立一种检测四环素类抗生素的新方法。[方法]四环素通过两步衍生化后,与氨基化的BS A 上的表位氨基反应,合成T C 2BS A 偶联物。以四环素多克隆抗体-胶体金复合物作为分析探针,四环素完全抗原作为竞争抗原,构建分析体系。[结果]紫外吸收光谱、凝胶色谱图和红外光谱均表明人工完全抗原偶联成功。选择柠檬酸三钠加入量1.5m l 生成的胶体金作为该试验继续合成胶体金检测探针的金溶胶。当抗体稀释倍数为1∶100、pH 值为8.70时,金标灵敏度好。金标试纸条检测样品中四环素的检测限量是200μg/L ,检测时间不超过15.0m in 。与E LIS A 法检测样品作对比,采用新法的准确率达100%。探针溶液中加入10%(V/V )保护剂后,试剂条稳定性明显提高。[结论]该研究为四环素的快速检测提供了依据。关键词　四环素;纳米金;检测方法中图分类号　T S207.3 文献标识码　A 文章编号　0517-6611(2008)27-11637-03Study of R apid Detection on T etracycline A ntibiotics in Food by U sing G old 2labeled R eagent Strip ZH ANG Yin 2zhi et al (National K ey Lab of F ood Science and T echn ology ,S outhern Y angtze University ,W uxi ,Jiangsu 214036)Abstract [Objective]T he study was to establish a new m eth od for the rapid detection on tetracycline antibiotics.[M eth od]T hrough tw o step derivatiza 2tion ,the tetracycline reacted w ith epitope am in o in am ination BS A to synthesize into T C 2BS A conjugate.W ith the com pound of tetracycline polyclonal anti 2b ody 2colloidal g old as the analysis probe and the com plete antigen of tetracycline as the com petitive antigen ,the analysis system was constructed.[Result ]Ultraviolet abs orption spectrum ,gel chrom atogram and in frared spectrum all sh owed that the artificial com plete antigen was success fully coupled.T he col 2loidal g old generated by adding 1.5m l tris odium citrate was selected as the colloidal g old s olution in the ex perim ent of continu ously synthesizing the col 2loidal g old detection probe of g old s olution.W hen the dilution multiple of antib ody was 1∶100and pH was 8.70,the sensitivity of g old labeled strip was g ood T he detection lim it of g old 2labeled reagent strip on tetracycline in detected sam ple was 200μ g/L and the detection tim e was less than 15.0m in.C om 2pared w ith result of detecting sam ples by E LIS A the accurate rate by using new m eth od was 100%.A fter 10%(V/V )protective agent was added into probe s olution ,the stability of reagent strip was im proved obviously.[C onclusion]T he study provided a base for the rapid detection on tetracycline.K ey w ords T etracycline ;Nan o 2g old ;Detection m eth od 基金项目　国家质监总局立项资助项目(2007IK 136);江南大学211 师资基金资助项目。 作者简介　张银志(1975-),男,陕西汉中人,工程师,从事食品安全 检测方面的研究。3通讯作者。 收稿日期　2008206230 四环素类药物是一种广谱抗菌药物[1],可直接作为一种饲料添加剂投放到饲料中,曾以价格低、抗菌谱广等优点而在养殖业、畜禽业、水生生物等领域中广泛应用[2-5]。在欧盟,四环素类抗生素的使用量占了整个禽畜业中抗生素使用量的65% [6] 。1990年,欧盟因我国畜禽产品中抗生素残留超 标而停止进口我国畜禽产品[7]。目前关于四环素类抗生素的检测方法有酶联免疫法、薄层色谱法、毛细管电泳法、质谱连用法和高效液相色谱法等[8],但这些方法都需要大型的仪器,价格昂贵,还需要专人管理。近年来也有进口的用于四环素检测的E LIS A 试剂盒面世,但是保存期限短,价格高,远不能满足检测需要。笔者在前人的研究基础上[9-10] ,建立了 用金标免疫层析检测法检测四环素类抗生素的方法,为四环 素的快速检测提供了可能。 1　材料与方法 1.1　材料与仪器　供试材料:A BA 2BAS 抗血清、C DI 2BS A 抗 血清(江苏省苏微微生物研究所提供);氯金酸(上海化学试剂厂),950m l/L 盐酸四环素标准品(T C.HC l )(购于中国药品生物制品检定所);丁二酸酐、N2氯丁二酰亚胺(NCS )、水合肼、碳二亚胺盐酸盐E DC (S igma 公司);0.01m ol/L 羊抗鼠二抗P BS 缓冲液,pH 7.4,所用水均为无锡华晶公司超纯水;牛血清白蛋白BS A 、卵清蛋白OV A (华美公司);四环素多克隆抗体(实验室自制),纤维膜,金标垫,样品吸收垫,吸水纸。 供试仪器:UV22100紫外扫描仪(北京瑞利公司产品),磁力搅拌器(IK A 公司),冷冻离心机5840R (eppend orf 德国);微 量移液器PIPET M AN (G I LS ON 法国),DE LT A 2320pH 计(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司),H 21微型混合器(上海沪西仪器厂)。 1.2　方法 1.2.1　四环素完全抗原的合成[2-5]。 (1)称取20mg A BA ,溶解于2.2m l 浓度0.2m ol/L HC l 溶 液中。避光条件下缓慢滴加3.5m l 0.49m ol/L 亚硝酸钠水溶液,4℃下恒速搅拌1h 。 (2)称取27mg 四环素,溶解于10m l 0.05m ol/L 的硼酸 钠溶液(pH 值8.5,溶有0.15m ol/L 的氯化钠)中。向其中缓慢滴加1.5m l 制备好的重氮化A BA 溶液。4℃下避光反应2 h ,用H 3BO 3溶液将pH 值调至7.4。 (3)称取120mg E DC 、36mg NHS 和100mg OV A ,加入上 述反应液中,室温下恒速搅拌3h 。 (4)将上述反应液转移到透析袋中,以0.01m ol/L 磷酸 缓冲液透析3d ,每天换透析液3次,冷冻干燥,所得粉末保存于-20℃冰箱中备用[9]。 1.2.2　胶体金溶胶的合成[6]。取50.0m l 氯金酸溶液(1.0×10-4g/m l )置于250m l 的锥形瓶中,在磁力搅拌的同时加热至 沸腾,沸腾后迅速加入柠檬酸钠水溶液(浓度为0.01g/m l ) 1.50m l ,继续保持沸腾至溶液为清亮橘红色时停止加热,继 续搅拌1m in 停止。用紫外-可见光分光光度仪对金溶胶在紫外-可见光范围内(200～700nm )进行扫描,获得金溶胶紫外-可见光吸收光谱,测定最大吸收波长、吸光值和峰宽。 1.2.3　胶体金溶胶标记四环素抗体探针的制备[7]。用Na 2C O 3溶液将金溶胶液体pH 调至9.00,取20.0m l 2.4×10-5m ol/L 的金溶胶溶液,磁力搅拌的同时,缓慢滴加10 μg/m l 多克隆抗体溶液2.0m l ,静置1h 后,在4℃7500r/m in 安徽农业科学,Journal of Anhui Agri.Sci.2008,36(27):11637-11639 责任编辑　李占东　责任校对　傅真治

鼠疫快速检测试剂盒(胶体金法)

鼠疫快速检测试剂盒（胶体金法） 鼠疫概述： 鼠疫是由鼠疫杆菌（Yersinia pestis）引起一种自然疫源性的烈性传染病。因其传播速度快、传染性强、病死率高、社会危害性大,被我国法定为甲类传染病。鼠疫主要通过鼠蚤类传播，曾在历史上有过三次大暴发流行。其临床症状主要表现为发热、严重毒血症症状、淋巴结肿大、肺炎、出血倾向等；随着现代社会交通的发展，对鼠疫快速诊断，尽早发现控制其传播的速度有着重要的意义！ 产品简介： 鼠疫抗原快速检测试剂盒采用胶体金标记技术，应用膜层析双抗体夹心法原理检测组织样本中的鼠疫菌抗原。用于疑似鼠疫病例的辅助诊断及现场筛查。 性能特点： 1、特异性：本品与假结核杆菌、布氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、土拉菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、变形杆菌的108/ml悬液及正常人血清、褐家鼠血清样品，无交叉反应。 2、最低检出量：用生理盐水配制鼠疫菌F1抗原，最低检出量为1ng/ml。 检测原理： 本试剂盒以鼠疫菌特异性抗体致敏硝酸纤维素膜和制备免疫胶体金探针，应用层析式双抗体夹心法原理，用于临床标本、污染物和环境中鼠疫菌抗原的检出，也可用于纯培养鼠疫菌的鉴定。临床标本中，淋巴液的检出率高于血清和尿液。 试剂盒组成： 1、鼠疫抗原快速检测板 2、样本稀释液 3、说明书 4、干燥剂 包装规格：10人份/盒，单人份独立包装。 储存条件：4-25℃避光保存，不得冻存。 有效日期：2年 生产企业：广州市标健生物科技有限公司 样本要求： 制备样品检测液 1、纯培养细菌：挑取疑似鼠疫菌单个菌落，于小试管中制成0.3ml生理盐水菌悬液作为样品检测液。 2、临床标本：取疑似鼠疫患者或病畜腹股沟淋巴结针刺吸出物、脑脊液、血、痰和尿液标本，或死亡动物肝脾研磨标本，加少量生理盐水(约0.3ml)充分振荡混均，自然沉降后取上清作为样品检测液。 3、环境中污染物：取疑似鼠疫菌污染的土壤、灰尘，或物体表面、动物皮毛的擦拭子，浸

黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)说明书

黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)说明书 【产品名称】 产品名称：黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法) 英文名称：Aflatoxin B1 Rapid Test Card (Colloidal Gold) 【产品简介】 黄曲霉毒素是一类丝状真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）产生的有毒代谢产物，黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，其毒性作用主要是对肝脏的损害。黄曲霉毒素B1污染的食物主要是玉米、稻谷、小麦、花生、花生油等粮油食品，且以南方高温、高湿地区污染最为严重。 本产品用于快速检测玉米油、花生油、葵花籽油等食用油中黄曲霉毒素B1残留，检测过程只需要20分钟，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。 【包装规格】5次/盒。 【产品组成】黄曲霉毒素B1快速检测卡（5条）；1mL刻度吸管（10支）；提取瓶（内含黄曲霉毒素B1提取液2mL，5瓶）。 【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。 【检出限】本产品检测方法对玉米油、花生油黄曲霉毒素B1检出限量为20μg/kg，对其他食用油黄曲霉毒素B1检出限量为10μg/kg。 根据《食品真菌毒素限量GB2761-2011》规定，玉米油、花生油黄曲霉毒素B1检出限量为20μg/kg，其他食用油黄曲霉毒素B1检出限量为10μg/kg。 【使用方法】 1、玉米油或花生油检测：用1mL刻度吸管向提取瓶中加入油样2mL（用吸管移加2次）； 其他食用油检测：用1mL刻度吸管向提取瓶中加入油样4mL（用吸管移加4次）。 2、盖紧提取瓶盖，用手上下振荡30-60秒，静置10分钟，待样品分成上下两层。 3、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用另一只新吸管从提取瓶中吸取少量下层液体， 垂直滴加3滴（约100μL）于检测卡加样孔（S孔）中。 4、室温环境计时约10分钟，根据示意图判定结果。 【结果判定】 阴性（-）：T线显色比C线深或一样深，均表示样品中黄曲霉毒素B1浓度低于检出限。 阳性（+）：T线显色比C线明显变浅或T线不显色，表示样品中黄曲霉毒素B1浓度等于或高于检出限。 无效：未出现C线，表明操作过程不正确或试纸卡已失效。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试纸卡重新测试。 【注意事项】 1、请按照使用方法进行测试，检测卡打开包装后1小时内使用，检测前将检测卡和待检样品恢复至室温。 2、尽量不要触摸试纸卡中央的白色膜面，检测时避免阳光直射。 3、本检测卡为一次性产品，请勿重复使用。 4、提取瓶内液体不可食用，避免儿童接触，检测完后液体可倒入下水道，包装可随生活垃圾处理。 5、本产品检测结果仅供参考，如需确证，请参照国家相关标准方法。 【储存及有效期】 原包装应储存于2～8℃，阴凉避光干燥处，切勿冷冻；有效期12个月。

食品中呕吐毒素的快速检测胶体金免疫层析法

附件2 食品中呕吐毒素的快速检测胶体金免疫层析法 1 范围 本方法规定了胶体金免疫层析法测定食品中呕吐毒素的快速检测方法。 本方法的适用范围为谷物加工品及谷物碾磨加工品中呕吐毒素的快速检测。 2 原理 试样中呕吐毒素与胶体金标记的特异性抗体发生结合后，抑制了层析过程中抗体与硝酸纤维素膜检测线上呕吐毒素-BSA偶联物的免疫反应，使检测线颜色发生变化，根据检测线颜色变化进行结果判定。 3试剂及耗材 除非另有规定，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T 6682中三级水。 3.1 试剂 3.1.1 提取液：水或胶体金免疫层析检测装置专用提取液。 3.1.2 甲醇：分析纯 3.2 参考物质 呕吐毒素参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度≥99%。 表1 呕吐毒素参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量 注：或等同可溯源物质。 3.3 标准溶液配制 准确称取适量的呕吐毒素参考物质（精确至0.0001g），用甲醇溶解，配成0.1mg/mL 的标准储备液，-20 ℃保存，有效期3个月。 3.4 材料 3.4.1 呕吐毒素胶体金免疫层析检测装置。 3.4.2 中速定性滤纸。 3.4.3 离心管。

3.4.4 滤膜：0.45 μm 水相滤膜。 4 仪器及设备 4.1 天平：感量0.01～0.0001 g。 4.2 粉碎机。 4.3 样品筛：0.9 mm。 4.4 漩涡混合器：1500 rpm/min。 4.5 移液器：100 μL，200 μL，1.0 mL。 4.6 恒温装置：（37.0±2.0）℃。 4.7 设备或方法使用环境条件：温度15 ℃～30 ℃，湿度≤80%。 5 分析步骤 5.1 扦样和分样，按GB 5491 执行。 5.2 试样制备 5.2.1 样品粉碎：将被测样品（5.1）粉碎，过0.9 mm样品筛，充分混合均匀，备用。 5.2.2 质控样品制备：选取经标准方法确认不含呕吐毒素的样品，称取2份平行样，其中一份作为阴性质控样品，另一份添加标准溶液使其样品中呕吐毒素含量为1.0 mg/kg，作为阳性质控样品。 5.2.3 样品溶液制备 准确称取粉碎混匀样品 5.0 g于离心管中，加入25.0 mL 水或专用提取液（3.1.1），漩涡混合器（4.4）提取5 min，静置1 min，中速定性滤纸（3.4.2）过滤，滤液用0.45 μm水相滤膜（3.4.4）过滤，备用； 5.3 测定 5.3.1 将滤液（5.2.3）稀释至呕吐毒素胶体金免疫层析检测装置（3.4.1）检测范围内，漩涡混合器（4.4）混匀，备用。 5.3.2 取150 μL待测溶液加入呕吐毒素胶体金免疫层析检测装置内，恒温装置内反应6 min，结果判定。 6 结果判定 根据检测线（T 线）和控制线（C 线）颜色变化进行结果判定，采用目测法对结果进行判定，比色法和消线法判定原则如下： 6.1 比色法 6.1.1 无效 控制线（C 线）不显色，无论检测卡（T 线）是否显色，表示操作不正确或检测装置已失效。 6.1.2 阳性结果 控制线（C 线）显色，检测线（T 线）显色明显浅于控制线（C 线），判为阳性。 —2—

快速诊断试剂盒化学反应原理

快速检测试剂盒化学反应原理 1.硫氰酸钠：白色斜方晶系结晶或粉末，易溶于水、乙醇、丙酮等溶剂，水溶液呈中性， 遇铁盐生成血红色的硫氰化铁，遇亚铁盐不反应，与硫酸生成黄色的硫酸氰钠，与钴盐作用生成深蓝色的硫氰化钴，与银盐或铜盐作用生成白色的硫氰化银或黑色的硫氰化铜沉淀，在空气中易潮解。 2.液体石蜡：即矿物油，珍珠大米的检测方法：取大米于样品杯中一半体积，加入70℃以 上的热水至样品杯近满处，用洁净牙签轻轻搅动30秒以上，静置片刻使溶液温度降低到50℃以下(固体石蜡的熔点为50～65℃)，如果样品中掺有石蜡，液面上会出现细微的油珠，随着温度的降低和时间的延长液体石蜡的油珠会聚集加大，固体石蜡的油珠会结成白色片状物浮于液面上。 3.工业碱：一般指（碳酸钠）、工业烧碱（氢氧化钠）、工业重碱（碳酸氢钠）。碳酸钠也 被称为纯碱。碱性溶液遇到酚蓝试剂变成紫红色，碳酸钠与钙的可溶性盐生成沉淀，而氢氧化钠或者碳酸氢钠遇到钙的可溶性盐则不会发生沉淀。 4.甲醇：工业酒精，甲醇经氧化试剂氧化后形成甲醛，甲醛可与品红-亚硫酸作用生成蓝紫 色化合物。（氧化剂配制：高锰酸钾-磷酸溶液，混合后不容易保存，所以分开配制逐一添加。品红-亚硫酸溶液：混合后不易保存，同样是分开配制逐一添加。亚硫酸为亚硫酸钠与盐酸配制所得，可百度。） 5.甲醛：乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶 后，412nm下进行分光光度测定。此法最大的优点是操作简便，性能稳定，误差小，不受乙醛的干扰，有色溶液可稳定存在12hr；缺点是灵敏度较低，最低检出浓度为 0.25mg/L，仅适用于较高浓度甲醛的测定；方法缺点是反应较慢，需要约60min；SO2 对测定存在干扰(使用NaHSO3作为保护剂则可以消除)。变色酸法也称铬变酸法,甲醛在浓硫酸溶液中可与变色酸(1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸)作用形成紫色化合物。该法的优点是操作简便、快速灵敏；缺点是在浓硫酸介质中进行，不易控制，且醛类、烯类化合物及NO2等对测定有干扰。酚试剂法原理是甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含量成。正比副品红法原理是在甲醛存在下，亚硫酸根离子与副品红生成紫色络合物，其最大吸收峰在570nm处，检测限为50μg/L。本法的优点是简便灵敏，其它醛和酚不干扰测定；缺点是褪色快，灵敏度不高，易受温度影响，使用了有毒的汞试剂。AHMT法原理是甲醛与4-氨基-3-联氨-5-巯基-1，2，3－三氮杂茂（AHMT）在碱性条件下缩合,然后经高碘酸钾氧化成6- 基-5-三氮杂茂[4,3-b]-S-四氮杂苯紫红色化合物,比色定量。该方法优点是抗干扰能力强，对乙酰丙酮法、MBTH法及副品红法干扰严重的六胺对此测定方法无干扰，因此，该法是测定树脂交联过程释放甲醛的有效方法；灵敏度较高，最低检出限为0.01mg/m3，较适宜与一般情况下室内空气的检测；缺点是颜色随时间逐渐加深，要求标准溶液的显色反应和样品溶液的显色反应时间必须严格统一，在显色体系最大吸收波长550nm测定，Co2+、Cu2+干扰测定。溴酸钾－次甲基蓝法原理是在酸性介质中，甲醛可促进溴酸钾氧化次甲基蓝反应，降低体系吸光度的特点来快速测定甲醛含量。次甲基蓝在665nm处有最大吸收峰，在H2SO4介质中加入KBrO3能使其吸收峰微降，而再加入甲醛后，其吸光度会显著下降，△A降低与甲醛浓度成正比。银－Ferrozine法原理为水合氧化银能氧化甲醛并被还原为Ag，产生的Ag与Fe3+定量反应生成Fe2+，Fe2+与菲洛嗪（Ferrozine）形成有色配合物 6.溴酸钾：见附页。 7.硫酸镁：络合滴定法取供试品适量，加水溶解，以铬黑T为指示剂，用乙二胺四醋酸钠 滴定液（0.05mol/L)滴定至溶液自紫红色转变为纯蓝色。每1mL乙二胺四醋酸钠滴定液

心脏型脂肪酸结合蛋白h-FABP胶体金快速检测试剂盒使用说明书

心脏型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)胶体金快速检测试剂盒 使用说明书 (仅供专业人员体外诊断使用) 用途 心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）检测试剂盒是应用免疫胶体金层析技术建立的快速、特异、操作简便的一步法定性检测方法，用于定性检测人血清或血浆中的心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）。可用于急性心肌梗塞（AMI）的辅助诊断。 简介 用于早期诊断急性心肌梗塞（AMI, Acute Myocardial infarction）的指标主要有肌酸激酶异构酶(CK-MB)、肌钙蛋白I（Troponin I）、肌钙蛋白T（Troponin T）和肌红蛋白（Myoglobin）等，但它们对于早期诊断AMI却很不理想，主要原因是：CK-MB、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T缺乏敏感性，它们在胸痛后6-8小时才浓度上升；而肌红蛋白则缺乏特异性，它虽然在胸痛后2-3小时浓度上升，但不能区分骨骼肌和心肌损伤。 而心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）则克服了以上两缺点，对于早期诊断AMI具有特异性和敏感性，它是15KD的小分子，动力学特征类似于肌红蛋白，即在胸痛后2-3小时后浓度开始上升，在12-24小时内恢复到正常水平，在4-8小时内达到最高值；而且h-FABP的免疫性不同于其它类型的FABP（如小肠型FABP 和肝脏型FABP），具有特异性，不会发生交叉反应。基于h-FABP以上特点使得其成为理想的AMI早期诊断生化指标。

检测原理 心脏型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）检测试剂盒是采用固相免疫胶体金层析技术，利用双抗体夹心法定性检测人血清或血浆中的h-FABP。 人血清或血浆扩散通过附着红色颗粒包被的抗体的滤膜，与滤膜中的包被抗体结合，在检测线（T）区域内，h-FABP－抗体复合物开始与包被在检测线区内的抗体接触，如果血清h-FABP浓度大于10ng/ml，在检测线区h-FABP－抗体复合物被抗-h-FABP的抗体捕获，并出现一条可见的红色条带。h-FABP浓度越高，检测线区出现色带的速度越快，色带越深。彩色颗粒包被的抗体扩散到质控线（C）区域被第二抗体捕获形成质控区红色带。 保存条件和有效期 铝箔袋包装, 4－25℃储存，切勿冷冻, 有效期1年。 试剂盒组成 每盒包装中含：单人份检测卡25包，使用说明书1份。 注意事项

(胶体金法)生产工艺处理制度标准规定模板

乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）生产工艺规程 1. 适用范围 适用于乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒（胶体金法）的生产和质量控制。 2. 职责 研发部：制定本规程。 生产管理部：执行本规程 质量管理部：按本规程执行，监督本规程的执行情况。 3. 内容 3.1.依据 《乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）》产品标准 3.2.产品名称、剂型、规格 3.2.1名称： (1) 商品名：乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法） （2）英文名：Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis B Surface Antigen(Colloidal Gold Immunochromatagraphic Assay) （3）汉语拼音名：Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangti Jiance Shiji（jiaotijin Fa）3.2.2.类型：三类6840体外诊断试剂。 3.2.3.规格：100T/盒(25T/筒*4筒)（无卡）；25袋/盒（1支/袋）、50袋/盒（1支/袋）3.3.产品概述 乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检测线（T）和质控线（C）分别包被重组的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。当检测样本为阳性时，样本中的乙肝病毒表面抗体与胶体金标记的重组乙肝病毒表面抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线（T）时与预包被的重组乙肝表面抗原反应，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记的兔IgG则在质控线（C）与羊抗兔IgG结合显现红色条带。阴性样本则仅在质控线（C）显色。 3.4.试剂盒组成、储存、有效期

农药残留胶体金快速检测试纸

农药残留胶体金快速检测试纸介绍 国家十五重大科技专项“食品安全关键技术”农药残留胶体金免疫快速检测试纸课题成果国家十一五 、“食品安全综合示范一一蔬菜安全生产质量控制技术研究课题”科技成果 原理及产品介绍： 农药残留胶体金检测试纸是属于国际医学界普遍公认的POCT方法，美国国家临床生 化科学院（NACB ）在其制定的“ POCT循证文件”的草案中，将POCT定义为“在接近患者治疗处，由未接受临床试验室科学训练的临床人员或患者（自我监测、检测）进行的临床实验室检验。是一种操作简单快速的方法，监测结果与理化仪器一一色谱仪检测结果相一致或相近似。胶体金免疫快速诊断试纸其原理是利用单克隆抗体建立诊断系统，多克隆抗体建立对照系统。用胶体金标记单克隆抗体，多克隆抗体或免疫原建立一套装置系统。它是应用胶体化学、有机合成化学、免疫学、物理学和材料学的精华综合学科集一体的高科技，实现了复杂的原理与简单操作的统一。产品按国家GB2763-2005《食品中农药最大 残留限量》标准或国际农药残留限量标准设定Cutoff值，能半定量检测出最大限量标准值。 Cutoff值以上表现一条红线，为阳性，代表农药残留超标；Cutoff值以下表现两条红线， 代表农药不超标。适合于蔬菜种植者采摘上市前自行检测，作为农药不超标的把关手段。也适合有目的性的单一品种的抽检。 万华公司现有农药残留胶体金快速检测试纸19种（明细见下表），其中包含了杀虫剂、 杀菌剂和除草剂三大类。

自检。 【样品的前处理方法】 参照农药残留分析样品的采样方法（NY/T 789-2004 ）进行样品的采集、处理、贮存。 整体测定法：选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片（叶 类剪成宽度为1cm左右的样品，果菜类、块茎类取1-2mm厚度左右的表皮样品），取5? 50g放入带盖瓶中，加入等量的水，振摇50次，静置6min以上。 【检验方法】 条型： 撕开铝箔袋，取出检测试纸条。将试纸条MAX端浸入样品液中（液面不得超过MAX 线）,此时样本液在毛细管作用下向试纸条的另一端缓缓移行，将固相的金标抗体溶解并带动它向前移行。 1?5分钟观察结果，最长不超过5分钟。 板型： 撕开铝箔袋，取出检测板和塑料滴管，平放在桌面上。用吸管吸取样品液并滴2?3滴 于检测板的圆孔（S）中，此时样本液在毛细管作用下向试纸条的另一端缓缓移行，将固相的金标抗体溶解并带动它向前移行。

胶体金法各种方法法原理

双抗体夹心法原理 以FABP 为例（检测抗原） 阳性反应 Y1=F14A （标记了胶体金） Y2=F104B （固定在NC 膜上即T 线） Y3=羊抗鼠IgG （固定在NC 膜上即C 线） 此方法较常用，主要用于较大分子量的蛋白（抗原）的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以。也有个别的检测项目是双抗原夹心检测抗体的，原理类似。 样品（血清）含FABP 蛋白 金标记F14A 抗体 金-F14A-FABP 金-F14A-FABP-F14A 金-F14A-羊抗鼠IgG 金-F14A-FABP 羊抗鼠IgG 显示红色 显示红色 金标记F14A 抗体 不显色 显示红色 金-F14A-羊抗鼠IgG 阴性反应 阳性反应

竞争法原理 以吗啡为例（检测抗原） 阳性反应 Y1=胶体金标记的吗啡单抗 Y2=吗啡-BSA 偶联物 Y3=羊抗鼠 此方法主要用于小分子抗原（毒品、农药、肽链等）的检测。由于抗原分子量小不能直接固定于NC 膜上，常常用化学方法把小分子偶联到BSA 等大分子物质上再固定于NC 膜上。此结果与双抗原夹心法相反，阴性CT 两条都是红线，阳性只有C 线一条红线。 金-吗啡抗体-吗啡 吗啡-BSA 金标记吗啡抗体 显示红色 不显色 金-吗啡抗体-吗啡 羊抗鼠 样品（尿液）含吗啡 显示红色 显示红色 金标记吗啡抗体 金-吗啡抗体-羊抗鼠 阴性尿液抗体-吗 阴性反应 阳性反应

间接法原理 以HIV 为例（检测抗体） 显示红色显示红色 显示红色 不显色 此方法主要用于血清中抗体检测，纯化或者重组的抗原固定于NC膜上，标记多为蛋 白A(ProteinA或叫SPA，抗体Fc端结合而与其它蛋白质不结合)。此方法要求胶体金 过量，一般来说样品再加入前需要稀释或者加极少量后再加缓冲液。 斑点免疫渗滤法使用就是间接法。