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直接PCR扩增体系的建立与应用性研究

直接PCR扩增体系的建立与应用性研究
直接PCR扩增体系的建立与应用性研究

建立质量体系的重要作用

建立质量体系的重要性 摘要:本文简要介绍了贯彻实施ISO9001标准,建立质量体系的重要作用;对企业贯标认证后保持质量体系有效运行,提高企业管理水平和工程质量,企业应重点抓好的六个方面工作进行了阐述。 关键词:ISO9001标准贯标认证质量体系工程质量培训内审引言 ISO9001标准是质量管理体系通用的要求。ISO9000标准出现,使质量管理的发展由全面质量管理进入了一个新的科学管理阶段——贯标认证。建筑安装施工企业通过贯标,提高了企业管理水平和质量保证能力,同时也提高了企业的经济效益和社会效益。 1 贯彻实施ISO9001标准,建立质量管理体系的重要作用 实施ISO9001标准,要求企业按照标准要求,结合企业实际建立质量管理体系,并按标准设计要素以文件化的形式,将企业管理以程序制度化,建立一套完善的质量管理体系文件和记录,实现“凡事有人负责、凡事有章可循、凡事有据可查、凡事有人监督”的科学管理模式。通过ISO9001标准种种制度化的程序,使体系内各环节环环相扣,互相督导,互相促进,管理工作中排除人为因素的干扰,减少了工作的盲目性,减少了内部推委、扯皮现象,减少了出质量事故和安全事故的机率,提高了企业管理水平和质量保证能力。 实施ISO9001标准,企业全方位、全过程对影响工程质量的因素进行控制管理。通过规范管理、规范工序、规范操作,保证了按标准规范施工,杜绝了不合格原材料、半成品的使用,杜绝了不规范质量行为的发生,整个生产过程的各道工序处于受控状态,消除了异常波动,保证了质量水平的稳定和提高。 2 有效的质量管理体系,提高企业管理水平和工程质量 四川电力建设三公司是一个火电施工企业。自1998年取得质量体系认证证书以来,一直保持认证注册资格。公司在各承建工程施工现场狠抓贯彻实施ISO9001标准工作,项目部严格按ISO9001标准,建立科学的质量管理体系,并保持质量体系的有效运行。公司承建工程的质量是一个工程比一个工程好,连

ISO9000质量体系认证对企业的重要作用

ISO9000质量体系认证对企业的重要作用 ISO9000质量体系认证分为初次认证、年度监督审核(年审)和复评认证,今天ISO9000质量体系认证机构小编主要来为大家讲解一下初次ISO9000质量体系认证的流程。 1、企业提出申请,提交申请表和相应资料。 2、群拓资质认证部审查材料,通过申请则与企业签订认证合同。 3、评审部审查企业的服务体系文件。 4、派遣认证机构评审员到企业现场评审和评分。审核组长在现场审核前将审核组组成和审核计划正式发给企业确认。现场审核分一二阶段进行,除非非常简单的产品和过程,如纯销售公司等,一阶段可以非现场审核,一般都要进行两个阶段的现场审核。 5、现场审核组依据标准、组织适用的法律法规和其它要求、组织的手册、程序等体系文件,对受审核组织贯彻执行标准的情况审核取证。

6、审核组根据企业申请材料、现场审核所收集到的审核证据,对照审核依据,得出审核发现,并对所有审核发现对照分析得出审核结论,撰写审核报告。 7、对于现场审核中发现的不符合,企业应在规定的时间内进行原因分析,并采取纠正措施。对于纠正措施经审核组验证合格后,连同现场审核记录,审核报告等资料一并提交提交认证机构技术委员会审查。 8、认证机构收到技术委员会审查意见后,汇总审查意见,审核通过批准给企业发证。 9、ISO9000质量体系认证机构向认证合格企业颁体系认证书,在相关网站进行公告,并同时上报国家认监委网站。 ISO9000质量体系认证机构为实施全面的科学管理奠定基础通过贯标与认证,员工的管理素质得到提

高,企业规范管理的意识得到增强,并建起自我发现问题,自我改进/自我完善的机制。为企业实施全面的科学管理(例如财务、行政、营销管理等)奠定基础。 ISO9000系列标准是由国际标准化组织(ISO)发布的国际标准,是百年工业化进程中的质量管理经验的科学总结,已被世界各国广泛采用和认同。由第三方独立且公正的认证机构对企业实施质量管理体系认证,可以有效避免不同顾客对企业质量保证能力的重复评定,减轻了企业的负担,提高了经济贸易的效率,同时国内的企业贯彻ISO9000标准,按照国际通行的原则和方式来经营与管理企业,有助于树立国内企业“按规则办事,尤其是按国际规则办事”的形象,适应国际贸易的需要。 ISO9000质量体系认证机构浅谈ISO9001质量管理体系内讲的四大模块: 1、产品实现过程(策划、销售、市场、设计和开发、采购、生产、检验与监测职能的实现) 2、管理职责过程(方针目标的确定,组织结构,内部沟通,职责权限、内部评审); 3、(人,财、物、信息等)资源管理过程;

标准的PCR反应体系

标准的PCR反应体系 PCR反应体系与反应条件 -------------------------------------------------------------------------------- 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液10ul 4种dNTP混合物各200umolL 引物各10~100mol 模板DNA 01~2ug TqDNA聚合酶25u g2+ 15mmolL 加双或三蒸水至100ul PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和g2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度:15-30b,常用为20b左右。 ②引物扩增跨度:以200-500b为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。引物量:每条引物的浓度01~1umol或10~100mol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度目前有两种TqDNA聚合酶供应,一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2。5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1NH或1Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到70~75,小量分装,-20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umolL,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等(等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与g2+结合,使游离的g2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。SDS的主要功能是:溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS还能与蛋白质 结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法, 要防止RNse降解RNA。 g2+浓度g2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umolL时,g2+浓度为15~20mmolL为宜。g2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低TqDNA聚合酶的活性,使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置:基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在TqDNA聚合酶的作用下,使引物链沿模板延 伸。对于较短靶基因(长度为100~300b时)可采用二温度点法,除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度TqDNA酶仍有较高的催化活性)。

企业管理体系现代建立方案

企业管理体系建立方案 一、建立体系管理所要解决的问题 1、管理大杂烩现象 管理一个企业,就像管理一支军队,必须成系统、成建制,必须有清晰的战略目标,有严密的组织结构,有明确的奖惩机制,一个接一个战役地打,一个接一个山头地攻,来不得半点虚假和花俏,这样企业才能够令行禁止、攻无不克、战无不胜。 随着市场经济的发展,很多企业领导越来越重视企业管理,为了加强企业管理,不惜投资大量的费用进行CI形象策划、广告宣传、产品促销、IS9000认证、5S、绩效考核、甚至建立ERP系统,东一榔头,西一棒子,投入越来越多,花费越来越高,拼凑了一盘“管理大杂烩”,结果企业的管理仍然是危机重重,这里的关键问题是,企业管理缺乏“目标”,企业管理不成“体系”,虽然搞了那么多的办法、制度,但由于没有考虑整个企业各条块之间管理上的互相支持、互相依赖和互相关联!其“事与愿违、成效甚微”,自然也就是情理之中,毫不奇怪了。缺乏系统的管理体系,企业依然缺乏发展后劲。 2、老总文化就是企业文化? 据管理学家统计,中国企业平均寿命只有4.5年,民营企业则更短,只有2.5年。创业者辛苦成立一个企业,历经千难万险,企业却突然之间轰然倒塌,在给公司造成巨大经济损失的同时,对社会也产生极大的负面影响。所以中国企业普遍面临的严峻问题就是如何做强、做大、做长? 企业只靠一两个人的聪明或勤奋是远远不够的,没有一个不断完善的管理体系,企业依然不能持续发展。因此,建立健全管理体系,对企业来说是至关重要的。 3、制度难以执行问题 好的制度总是无法实施。原因在什么地方呢?就在于我们许多公司总是在“人治人”、“人斗人”

的怪圈里运转,靠个人的行为去维系企业的生存,并没有真正建立一套法制的系统来管理我们的企业。 讲到规范化管理,人们会想到:管理规范化就是制度管理,于是就开始定规章制度,公司的制度越定越多,就能说明公司的管理越规范。许多企业导入一个IS9000就认为自己公司的管理已经规范了,但实际情况绝不仅仅只是制定规章制度这么简单。规范化管理就是给企业的管理打好地基。企业规范化管理系统应该包含七个子系统,这是企业管理的六根地基桩:(1)企业发展战略规划系统;(2)企业流程设计系统;(3)组织结构系统;(4)部门及岗位描述系统;(5)规章制度设计系统;(6)企业管理控制系统;(7)企业文化系统;(8)考核系统。要把八根桩深深打入企业地基,在八根桩的基础上经营管理企业,企业大厦就稳了。企业要想做大做强,战略与执行力缺一不可。企业虽有好的战略,会因缺乏执行力而最终失败,因此,很多企业已经认识到执行的重要性。而规范、健全的管理体系正是企业高效执行的关键。相反,管理基础薄弱、管理系统不规范只能造成执行力缺失,使企业腾飞的“翅膀”脆弱不堪。 这就要求企业在重视制度规范的同时,通过建立、健全企业管理体系,不断提升管理系统的水平来完善、发展自己,惟有这样,企业才有能力持续发展、长久生存。 4、没有明确的目标,“摸着石头过河” 无明确工作目标,无明确工作计划,无明确工作程序,无明确工作标准。许多企业的每一个层级的管理人员和基层员工并不明白,也不会制定自己的工作计划,因为总是习惯于等待由上级来下达任务,制定计划。更为严重的是,一些企业的中层管理人员工作几年甚至十几年,却从来不会写自己的工作计划和工作总结。 企业的管理必须要明确的目标,必须配合公司整体战略目标去逐步实施。如果没有互相的支持与联系,企业的管理系统最终还是会瘫痪的。无论是管理人员,还是操作人员,必须在事

质量管理体系认证的作用

ZJQC-OD01:质量管理体系认证实施程序 质量管理体系认证的作用 公司实施质量管理体系:首先将公司原有的体系(包含工艺、流程、制度、管理模式等)进行清理,对符合质量管理体系认证的进行保留,不符合的经组织讨论进行删除,部分根据体系要求增加的经组织讨论进行增加,最终我们现有的体系融入整个质量管理体系中去,成为一个符合我公司基本情况的管理体系,从而更大发挥质量管理体系对企业的巨大作用。 实施质量管理体系认证可提高企业质量管理水平;提高企业信誉度和产品知名度;有利于产品顺利进入市场;降低成本,提高效益;享受国家的优惠政策及对获证单位的重点扶持. 具体如下: 一、适应国际化大趋势 1. 关税壁垒打破后,我国的产品直接面临国际市场的竞争; 2. 推行ISO 9000系列标准是在质量管理体系方面实现与国际接轨的有效途径; 3. 可消除国际贸易中由于质量管理体系方面要求不统一所造成的障碍; 4. 适合全球经济一体化的需要; 5. 适应国际范围内流行的管理趋同化趋势。 二、提高企业的管理水平 1. 建立深入细致的质量管理体系文件系统; 2. 确定对各项质量活动的控制原则和控制方法; 3. 认真执行文件,使质量管理体系有效运行; 4. 通过开展内部审核、管理评审、模拟审核,纠正和预防措施,持续改进、建立自我完善机制; 5. 第三方认证审核监督审核促进企业维持和改进质量管理体系。 三、产品质量的稳定与提高 1. 对所有影响质量的活动实施控制; 2. 对事先充分考虑到的各种风险,采取有效的预防措施; 3. 保证使用合适的设备和材料; 4. 及时针对不合格和不良趋势采取有效的纠正措施和预防措施; 5. 形成良性循环机制。 四、提高企业市场竞争力 1. 实施ISO 9000系列标准可提供优质产品、优质服务; 2. 满足用户规定的和潜在的需要; 3. 产品生产过程质量受控,得到不断改进; 4. 提高企业经济运行质量,增强综合实力; 5. 努力打造业内、国内、全球知名品牌。 因此,质量体系认证必须尽快实施,而且公司并不在于证书,而更重要的是通过质量体系认证而取得的一个综合效果。 页脚内容1

浅谈建立职业健康安全管理体系意义

浅谈建立职业健康安全管理体系意义 集团企业公司编码:(LL3698-KKI1269-TM2483-LUI12689-ITT289-

浅谈建立职业健康安全管理体系意义 一、《职业健康安全管理体系》简介 在过去的20年中,职业健康、安全和环境问题已经引起世界各国越来越强烈的关注。我国在上述方面需要预见性地分析可能出现的新问题、新情况,在此基础上提出安全生产管理模式和管理方法,逐渐完成从经验管理向科学化管理的过渡。中国企业建立完善的安全生产体系非常重要,该体系应包括法制建设、技术保障、信息保障、教育培训、应急救援、企业管理等等。职业安全健康管理体系(简称OSHMS)是其中重要的组成部分。管理体系的有效性已在全世界范围内得到承认,尤其是在ISO9000和ISO14000获得成功之后。另外,随着WTO的加入,我国也应与国际职业安全健康管理的趋势接轨。我国自实施OSHMS以来,OSHMS 的认证活动发展迅速,使得各单位的职业安全健康管理水平有了较大提高。 20世纪90年代后期,一些发达国家借鉴ISO9000认证的成功经验开展了实施职业健康安全管理体系活动。1999年英国标准协会等13个组织提出职业健康安全评价系列(OHSMS)标准,即OHSMS18001《职业健康安全管理体系--规范》、OHSMS18002《职业健康安全管理体系-- OHSMS18001实施指南》。2001年7月我国认证认可监督管理委员会和国家标准化管理委员会组织专家,参照OHSMS18001和OHSMS18002,制定了

国家标准GB/T28001《职业健康安全管理体系规范》和GB/T28002《职业健康安全管理体系指南》。该系列标准根据OHSMS18001和OHSMS18002的成功经验和管理思想,又兼顾了我国的国情。目前,我国推行的《职业健康安全管理体系》为GB/T28001《职业健康安全管理体系规范》和GB/T28002《职业健康安全管理体系指南》。 职业健康安全管理体系是指为建立职业健康安全方针和目标以及实现这些目标所制定的一系列相互联系或相互作用的要素。它是职业健康安全管理活动的一种方式,包括影响职业健康安全绩效的重点活动与职责以及绩效测量的方法。 职业健康安全管理体系的运行模式可以追溯到一系列的系统思想,其中最主要的是Edward Deming的PDCA(即策划、实施、评价、改进)概念。在此概念的基础上并结合职业健康安全管理活动的特点,提出了职业健康安全管理体系运行模式,其核心都是为生产经营单位建立一个动态循环的管理过程,以持续改进的思想指导生产经营单位系统地实现其既定的目标。《职业健康安全管理体系》的运行模式为职业健康安全方针、策划、实施与运行、检查与纠正措施、管理评审。 二、建立《职业健康安全管理体系》的意义

企业建立职业健康安全管理体系的重要性

企业建立职业健康安全管理体系的重要性 作者:高继新 企业职业健康安全管理体系是指企业全部管理体系中专门管理职业健康安全工作的部分,包括为制定、实施、实现、评审和保持职业健康安全方针、目标所需的组织机构、规划活动、职责、惯例、程序、过程和资源.企业职业健康安全管理体系的核心是职业健康安全方针,建立职业健康安全管理体系的目的是为了便于管理职业健康安全风险,由企业自身对影响职工的安全和健康的危险因素进行分析、评价,确定企业职业健康安全的目标和管理方案,消除或控制危险因素,确保职工健康安全。这种管理思想和管理方法,不同于传统的企业上级以及行业主管部门的安全检查和事故的事后处理,而是一个事前的、动态循环的、控制人的不安全行为和物的不安全状态的系统化的管理过程;是以持续改进的思想指导企业系统地实现其既定的管理目标,它和企业的质量管理体系、环境管理体系等一起,构成企业的全面管理体系。 职业健康安全管理体系,体现了现代安全科学理论中的系统安全思想。它通过系统化的预防管理机制,彻底消除各种事故和疾病隐患,严格控制各种职业健康安全风险,以便最大限度地减少生产事故和劳动疾病的发生。我国是发展中国家,大力发展社会主义市场经济,有效保持经济快速增长是当前的重要任务。职业健康安全管理工作关系到国家和人民生命财产的安全,关系到广大职工的切身利益,关系到经济的健康发展和社会的安全稳定,关系到国家可持续发展的总体战

略,同时也关系到我国的国际形象。在我国企业建立职业健康安全管理体系已显得日益迫切和重要。 第一,这是由我国企业职业健康安全的现状所决定的。近些年来,我国国民经济一直保持着世人瞩目的高速增长,但作为社会文明进步重要内容之一的职业健康安全工作,却远远滞后于经济建设的步伐。目前,我国企业职业健康安全的形势非常严峻,主要表现在全国各类工伤事故总量大,重大、特大恶性事故频繁发生,职业病人数居高不下;现在仍有大量地事故隐患没有得到发现和整改;企业的经营管理者生产经营的意识强,单纯追求经济效益,而职业健康安全意识比较淡薄;职工的安全健康意识、自我保护意识也比较差,个体私营企业经营者、农民工更甚。我国的职业健康安全状况对我们的工作提出了紧迫的要求。为改善我国的职业健康安全状况,推行职业健康安全管理体系已经成为必然,建立和实施企业职业健康安全管理体系,既有重大的社会意义,又有明显的现实意义。 第二,我国企业职业健康安全管理工作有许多不足之处。(1)随着生产的发展,由于市场竞争日益加剧,企业往往专注于发展生产,而有意或无意间忽视了劳动者的劳动条件和安全环境状况的改善,至少可以说,劳动者的劳动条件和环境状况的改善进展与生产的发展速度极不相称,由此而造成了不文明生产的现象。(2)重治标轻治本。我国对企业职业健康安全管理工作的认识长期停留在“经验型”和“事后型”的基础上,在管理思想和职业健康安全技术方面缺少创新。这种管理模式,势必造成对待职业健康安全工作松松紧紧,抓抓停停的

浅析企业标准化管理体系的意义

浅析企业标准化管理体系对我市中小企业 发展的意义 一、企业标准化管理体系的含义 企业标准化管理系统是以企业的目标、方针为中心,以国家的法律、法规及国家标准、行业标准为依托,以技术标准为主体,以管理标准为支持,以工作标准为保障的系统组成,其中技术标准是核心,管理标准和工作标准是实现技术标准的保证,必须围绕技术标准进行并按照标准化的要求,运用标准化的原理,使用科学合理的方法建立的标准化管理体系。 二、实施企业标准化管理体系的意义 实施企业标准体系,对于促进企业技术全面进步,提升企业管理水平,提高产品质量和档次,增强企业市场竞争力和产品市场占有率等方面具有极其重要的作用。推行企业标准化管理体系有利于规范企业内部的管理行为,降低生产成本,提高产品质量,提升生产效益。产品质量是企业基础工作的综合反映,在产品生产过程中,影响产品质量的因素很多,企业通过一系列的标准来规范操作行为和作业流程,从而控制各种影响质量的因素,以减少或消除质量缺陷的产生;一旦发现质量缺陷,也能及时发现并采取纠正措施。只要真正实施企业标准化管理体系,就能

更好地为顾客提供质量可靠、满意的产品,进而提升品牌的美誉度和知名度,无形中为企业创造出巨大的财富。三、我市中小企业在管理中存在的问题 一是技术水平不高。主要是企业产品总体水平不高、产品结构不合理、装备水平低、超前意识差、科技开发投入少、技术管理落后,企业发展无后劲。归根到底是未建立详细完善的技术标准和产品标准,再加上未严格按照标准化操作,致使产品的质量存在缺陷,质量水平难以上去。 二是管理水平低下。 首先管理方式粗放。管理粗放表现在以下几个方面:(1)管理成本居高不下。(2)管理费用和财务费用过高。特别是一些企业,在销售收入下降的情况下,管理费用及利息支出都呈现出成倍增长的趋势;(3)生产能力没有得到充分发挥。生产的部分产品,技术含量低,质量差,无市场竞争力;(4)质量损失惊人。(5)管理上“散”、“乱”。不少企业办事、请客、出差、开会等项开支无标准,财务管理混乱。此外,许多企业的内部考核虽然制订得很细,也很严格,但考核走过场。 其次管理组织落后。管理组织落后主要表现在以下几个方面:(1)管理组织模式单一化。采用改革开放前“直线职能制”的组织形式,中层管理作为管理核心不明显;(2)企业领导的管理普遍幅度过宽。主企业负责人应酬太多,学习

PCR反应条件体系总结

PCR反应体系与反应条件 -------------------------------------------------------------------------------- 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液10ul 4种dNTP混合物各200umol/L 引物各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至100ul PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板D NA在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最 好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生 非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PC R失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克 隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。引物量:每条引物的浓度0.1~1u mol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增, 且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度目前有两种Taq DNA聚合酶供应,一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2。5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高 可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装,-20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不

建立企业质量管理体系的必要性

浅谈企业质量管理体系的建立及保持 内容摘要: 随着科学技术的不断发展,信息时代已经来临,中国加入了WTO,全球经济一体化的格局即将形成。目前,国际上比较先进、适用的管理体系有很多,但比较普遍推广的还是ISO9000族系列标准,因其以顾客为中心,自我完善与持续改进的思想得到了各类企业欢迎,国内企业对建立质量管理体系的重要性认识越来越深刻,重视程度也越来越高。就现阶段各种企业推行质量管理体系的情况来看,由于中国的特殊情况,造成了大多数企业只是为了“获取认证”而认证,“焦点访谈”也针对少数企业和认证公司联合做假认证的事情也进行可曝光。因此愿利用所学知识及自己工作单位建立质量管理体系的经验与大家展开讨论,就如何开展工业企业质量管理体系的建立和保持成果与大家分享。

关键词:质量管理体系建立运行保持 一、当前我国企业在质量管理体系方面存在的问题 1. 有些企业请外单位专家代笔或袭用同行业企业的质量文件冠以本厂名号,既未与本厂实际结合,又未很好吸收。有不少单位主要领导,未真正理解实施ISO9000系列标准的必要性和适用性,只是因为大势所趋,上级主管要求贯彻,为贯标而贯标,因而缺乏主动性、积极性。贯标过程中,往往流于形式,收不到成效。 2. 决策领导层标准化意识不强,对标准化与质量管理的联系缺乏认识,有些质量管理部门本位主义作祟,唯恐标准化部门的参与会影响本部门的权威。 3. 领导层抓而不紧。有畏难情绪,怕“花钱”,怕影响“生产任务”,考虑近期行为多于长远发展。 4.有的企业体系运行中存在“两张皮”现象,实际管理方式与体系文件运行不相符合。 二、建立质量管理体系的必要性 一个组织,不论是工业、商业或政府的,完善质量管理的目的是:能对组织的产品或服务质量实施有效的控制,能对产品或服务质量进行持续的改善,以适应顾客的需求和取得顾客的信任,从而扩大市场占有率,促进组织效益增长和发展。ISO9000族标准,正是完善质量管理的一种最佳工具。 建立质量管理体系的必要性: 第一、强化质量管理,提高企业效益。

建立全面质量管理体系的作用及意义

建立全面质量管理体系的作用及意义 质量管理是施工企业的“命脉”,是企业生产和管理的基点,经济效益的源泉。以工程项目质量管理为中心,提高项目的运作质量,是施工企业生存和发展永恒的主题。当前施工企业质量管理体系仍然存在诸多问题,不能适应形势发展的需要。本文结合近些年来施工企业建立质量管理体系的实践,就建立施工企业质量管理体系问题,谈谈自己的一些认识,共同探讨。 当今世界,由于地区化、集团化经济的发展,贸易竞争日益激烈,是各国政府和企业都深刻地感受到提高产品质量的紧迫感和不提高质量就没有出路,不能生存,将会被淘汰的危机感,产品质量的竞争已成为贸易竞争的重要因素。而建筑施工企业的基本任务是向社会提供符合需求的工程产品和服务,满足人们日常生活和生产活动中对建筑安装工程的各种需求,增加社会效益和提高企业的经济效益。建立全面质量管理体系的目的就是为了实现企业的基本任务,为了企业的生存和发展,从而提高企业的信誉,增强企业的活力,提高企业的竞争力。无论合同环境还是非合同环境,从企业生存和发展的角度出发,为了提高竞争能力和市场占有率,建筑企业都应建立全面在管理体系。 随着社会经济和生产力的发展,企业为了获得更高的利润,寻求完善的管理和控制手段,以最佳的质量成本满足用户对质量的要求。全面质量管理是以质量为中心的现代企业管理的一种方式,是指企业为了保证提高产品质量,综合运用一整套质量管理思想、体系、手段和方法进行的系统管理活动。所谓“全面质量管理”是通过改善和提高工作质量来不断改进产品质量,预防和鉴别不合格品,同时要求达到降低成本、按期交货、服务周到,以全面质量满足顾客要求。全面质量管理要求对产品产生、形成和实施的全过程进行管理,加强预防和工序控制,把质量管理工作扩大到产品流通、消费领域,服务到顾客。全企业所有部门和所有人员都必须参加。产品质量形成于产品生产的全过程,而质量体系贯穿于产品质量形成的全部过程。完善的质量管理体是在考虑风险、成本和利益的基础上使质量最佳化并对质量加以控制的重要管理手段。 而建立质量体系必须结合建筑施工企业、工程对象、施工工艺特点等情况,选择适当的体系要素,决定工程质量保证的程度和范围,使质量体系有可操作性,保持适用性,确保有效性。企业建立全面质量管理体系必须围绕和遵循:确定质量环;明确和完善体系结构;质量体系要文件化;定期进行质量体系审核与质量体系复查等几项原则性的工作来展开。 质量环使从产品立项到产品使用全过程各个阶段中影响质量的相互作用的活动的概念模式,每个阶段中包含若干直接质量职能与间接质量职能活动。满足要求的产品质量使质量环各个阶段质量职能活动的综合效果。之间施工企业的特定产品对象是工程,无论其工程复杂程度、结构形式怎样变化,无论是高楼大厦还是一般建筑物,其建造和使用的过程、顺序和环节基本是一致的。因此,建筑施工企业质量环应由:工程调研和任务承接;施工准备;材料采购;施工生产;试验与检验;建筑物功能试验;竣工交验;回访与保修等八个阶段组成。 企业决策层领导及有关管理人员要负责质量体系的建立、完善、实施和保持各项工作的开展,使企业质量体系达到预期目标。质量体系的有效运行要依靠相应的组织机构网络。这个机构要严密完整,充分体现各项质量职能的有效控制。对我们建筑施工企业来讲,一般有集团(总公司)、公司、分公司、工程项目经理部等各级管理组织,但由于其管理职责不同所

企业能源管理体系建设的意义

企业能源管理体系建设的意义(一) ——我国能源利用现状及青海省相关政策要求一、我国能源利用现状 随着我国经济的快速增长,能源消费亦快速增长,能源消耗强度越来越高。2006年我国消费24.6亿吨标煤,2008年我国已经完全转变为煤炭净进口国,进口依存度已超过50%。但是我国的能源效率却只有33%,比发达国家低10%。同时,高强度的能源消耗带来的一些列的环境污染问题,进而引起气候和生态环境的变化。能源利用与能源短缺及环境保护的矛盾日趋尖锐。国家已把节约能源作为一项基本国策。节能法明确提出“要坚持资源开发与节约并举、把节约放在首位”的节能方针。节约能源已成为一项紧迫而长期的战略任务,是实现经济社会持续、快速、协调、健康发展的必然选择。 二、能源管理体系的定义 能源管理体系就是从体系的全过程出发,遵循系统管理原理,通过实施一套完整的标准、规范,在组织内建立起一个完整有效的、形成文件的能源管理体系,注重建立和实施过程的控制,使组织的活动、过程及其要素不断优化,通过例行节能监测、能源审计、能效对标、内部审核、组织能耗计量与测试、组织能量平衡统计、管理评审、自我评价、节能技改、节能考核等措施,不断提高能源管理体系持续改进的有效性,实现能源管理方针和承诺并达到预期的能源消耗或使用目标。

三、能源管理体系建设的意义 管理节能是促进企业提高能源利用水平的有效手段,能源管理体系建设,是运用现代管理思想,借鉴成熟管理模式,将过程分析方法、系统工程原理和策划、实施、检查、改进(PDCA)循环管理理念引入企业能源管理,建立覆盖企业能源利用全过程的管理体系,对强化结构节能与技术节能,促进企业构建长效节能机制具有重要意义。避免企业在能源管理工作方面出现重视不够,管理不规范,方法不科学,法规政策落实不到位,节能潜力没有得到充分挖掘等问题。 “十一五”以来,国家有关部门和部分地区积极引入能源管理系统方法,开展企业能源管理体系建设和认证试点工作,国家颁布了《能源管理体系要求》(GB/T 23331)标准(2012年根据国际标准ISO 50001进行了修订),推动企业建立能源管理体系,取得了积极成效。试点企业通过建立实施能源管理体系,节能工作机制不断完善,能源管理水平大幅提高。实践证明,能源管理体系建设能够有效促进企业提高能源利用效率。 四、青海省推进能源管理体系认证工作的基本原则 (一)坚持企业实施与政府引导相结合 企业按照《能源管理体系》(GB/T23331),建立健全能源管理体系,成立企业主要负责人挂帅的能源管理体系建设领导小组,落实企业专门工作机构及经费等工作。主动采用先进节能管理方法及技术,

建立职业健康安全管理体系的重要性和可行性(新版)

( 管理体系 ) 单位:_________________________ 姓名:_________________________ 日期:_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 建立职业健康安全管理体系的重要性和可行性(新版) Safety management system is the general term for safety management methods that keep pace with the times. In different periods, the same enterprise must have different management systems.

建立职业健康安全管理体系的重要性和可 行性(新版) 一、当前安全生产形势及职业安全健康状况 党中央、国务院一贯高度重视安全生产问题,近年来采取一系列重大措施,不断加强安全生产工作。新的中央领导集体和新一届政府把安全生产工作摆在十分重要的位置。在国务院的统一领导下,全国加强了安全生产工作的监督和管理,一些地区和行业特大事故也得到了有效控制,全国及我省安全生产形势总体上呈稳定好转的态势。但由于长年来社会及多数企业对生产安全投入不足,加上经济体制转变过程中的管理缺位,因此目前全国及我省生产安全事故总量和各类安全事故死亡人数仍然居高不下,安全生产形势依然严峻。据统计,2003年全国共发生各类事故963976起,死亡136340人;一次死亡10人以上事故129起,死亡2566人。其中我省共发

生各类事故42041起,死亡4518人;一次死亡10人以上事故3起,死亡36人。2004年上半年全国共发生各类事故426283起,死亡63735人,同比分别下降12.8%和0.2%;但一次死亡10人以上事故77起,死亡1217人,同比略有上升。这些数字说明,全国及我省安全生产形势的根本好转还有相当长的一段路要走。 此外,我国职业危害状况也十分严峻。近年来,虽然我国国民经济一直保持着稳定高速增长,但职业健康安全管理工作却远滞后于经济建设发展的步伐,重大恶性工伤事故屡屡发生,职业病人数居高不下。据不完全统计,目前全国有50多万个厂矿存在不同程度的职业危害,实际接触粉尘、毒物和噪声等职业危害的职工有2500万人以上,每年约70万人患各种职业病。尘肺病患者每年大约增加1.2万例,2003年底累计达589700例。近年来,国外一些严重危害从业者身体健康和污染环境的产业向我国转移,出现了一些过去罕见的化学和放射性伤害病例。各类职业中毒越来越严重,中毒患者死亡率由以往的15%攀升到20%以上。职业安全卫生形势非常严峻。我国职业健康安全的状况已经引起国际社会的关注。在每年的国际

管理体系认证给企业带来的好处有哪些

管理体系认证可提升市场竞争力促进企业发展在企业的日常经营活动中,管理体系认证证书往往被客户作为签订合同或招标入围的条件之一,随着市场竞争的日益激烈,这已成为一个必然的发展趋势。作为企业求生存、求发展,积极采信并认真做好管理体系认证,是提高自身产品在国际、国内市场上竞争力的明智之举。 ISO9000标准(即:质量管理体系)是国际标准化组织颁布的第一套具有管理性质的国际标准,目前已被180多个国家所广泛采用。是否拥有ISO 证书已成为衡量一个企业能否持续生产满足顾客要求的产品,是否具有与国际先进管理行为接轨能力的最主要标志。该标准以顾客满意为关注点,以提供优质产品和服务为目的,通过质量管理体系认证可获取诸多的效益。主要体现在: 1、强化质量管理,提高企业的经济效益; 2、增强客户信心,扩大市场份额; 3、获得政府采购、招标项目的入场卷; 4、在产品质量竞争中永远立于不败之地; 5、有效避免产品责任; 6、建立企业内部良好的管理机制。 ISO14001(即:环境管理体系)企业通过认证,获得第三方认证机构颁发的证书,这意味着取得了客观证明,它向社会表明企业兑现了对环境的承诺,具有对环境的管理控制能力,表明了企业积极履行其社会责任,遵守与环境有关的法规要求,节能减排、低碳、降耗,从而在社会上树立起善待环

境、敢于负责任的企业形象。 OHSMS18000(即:职业健康安全管理体系),其目的是预防、控制事故的发生,保障企业劳动者和相关参与者的安全与健康。 企业通过实施该标准,可以减少和避免可能出现的伤亡及事故,其实际作用及潜在的效益是巨大的。 总之,获证企业通过三体系的认证,使企业管理模式符合国际通行惯例,促进国际贸易及提高企业的综合形象,提升企业形象和市场竞争力。从另一个层面,也反映出企业领导者管理企业的运筹能力,关心、关爱员工安全健康的责任意识,通过认证不仅证明了企业具有一定的经济实力,更能在激烈的市场竞争中站稳脚跟,求得更快、更好的发展。

PCR反应体系

PCR反应体系 2007-07-20 11:04:33 PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物各200umol/L 引物各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3’端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度目前有两种Taq DNA聚合酶供应,一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP 粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降

2020企业建立职业健康安全管理体系的重要性(四篇)

工作总结参考范本 企业建立职业健康安全管理体系的重要性(四篇)目录: 企业建立职业健康安全管理体系的重要性一 对企业建立职业安全卫生管理体系的看法二 建立职业健康安全管理体系的步骤三 烟草职业健康安全管理体系运行四 - 1 -

企业建立职业健康安全管理体系的重要 性一 企业职业健康安全管理体系是指企业全部管理体系中专门管理职业健康安全工作的部分,包括为制定、实施、实现、评审和保持职业健康安全方针、目标所需的组织机构、规划活动、职责、惯例、程序、过程和资源.企业职业健康安全管理体系的核心是职业健康安全方针,建立职业健康安全管理体系的目的是为了便于管理职业健康安全风险,由企业自身对影响职工的安全和健康的危险因素进行分析、评价,确定企业职业健康安全的目标和管理方案,消除或控制危险因素,确保职工健康安全。这种管理思想和管理方法,不同于传统的企业上级以及行业主管部门的安全检查和事故的事后处理,而是一个事前的、动态循环的、控制人的不安全行为和物的不安全状态的系统化的管理过程;是以持续改进的思想指导企业系统地实现其既定的管理目标,它和企业的质量管理体系、环境管理体系等一起,构成企业的全面管理体系。 职业健康安全管理体系,体现了现代安全科学理论中的系统安全思想。它通过系统化的预防管理机制,彻底消除各种事故和疾病隐患,严格控制各种职业健康安全风险,以便最大限度地减少生产事故和劳动疾病的发生。我国是发展中国家,大力发展社会主义市场经济,有效保持经济快速增长是当前的重要任务。职业健康安全管理工作关系到国家和人民生命财产的安全,关系到广大职工的切身利益,关系到经济的健康发展和社会的安全稳定,关系到国家可持续发展的总体战略,同时也关系到我国的国际形象。在我国企业建立职业健康安全管 2 / 19

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