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植物组织含水量的测定

植物组织含水量的测定
植物组织含水量的测定

实验 2 植物组织含水量的测定

一、原理

植物组织的含水量是反映植物组织水分生理状况的重要指标,如水果、蔬菜含水量的多少对其

品质有影响,种子含水状况对安全贮藏更有重要意义。利用水遇热蒸发为水蒸汽的原理,可用

加热烘干法来测定植物组织中的含水量。植物组织含水量的表示方法,常以鲜重或干重 % 表

示,有时也以相对含水量 % (或称饱和含水量 % )表示。后者更能表明它的生理意义。

二、实验材料与仪器设备

(一)实验材料

植物鲜组织。

(二)仪器设备

分析天平,剪刀,烘箱,铝盒,干燥器,吸水纸,坩埚钳。

三、实验步骤

l. 自然含水量的测定

( 1 )铝盒的恒重将洗净的两个铝盒编号,放在 105 ℃恒温烘箱中,烘 2 小时左右,用坩

锅钳取出放入干燥器中冷却至室温后,在分析天平上称重,再于烘箱中烘 2 小时,同样于干

燥器中冷却称重,如此重复 2 次( 2 次称重的误差不得超过 0.002g ),求得平均值 W 1 ,

将铝盒放入干燥器中待用。

( 2 )将待测植物材料(如叶子等)从植株上取下后迅速剪成小块,装入已知重量的铝盒中

盖好,在分析天平上准确称取重量,得铝盒与鲜样品总量为 W 2 ,然后于 105 ℃烘箱中干燥

4 ~ 6 小时(注意要打开铝盒盖子)。取出铝盒,待其温度降至 60 ~ 70 ℃后用坩锅钳将

铝盒盖子盖上,放在干燥器中冷却至室温,再用分析天平称重,然后再放到烘箱中烘 2 小时,

在干燥器中冷却至室温,再称重,这样重复几次,直至恒重为止。称得重量是铝盒与干样品总

重量 W 3 。烘时注意防止植物材料焦化。如系幼嫩组织可先用 100 ~ 105 ℃杀死组织后,

再在 80 ℃下烘至恒重。

( 3 )记录及计算

表 1-1 植物组织含水量记录表

编号铝盒重( W 1 )铝盒 + 样品鲜重( W 2 )铝盒 + 样品干重( W 3 )

样品鲜重W f = W 2 – W 1

样品干重W d = W 3 – W 1

2. 相对含水量的测定方法(或称饱和含水量法)

此法是以植物组织的饱和含水量为基础来表示组织的含水状况,因为作为计算基础的组织饱和

含水量有较好的重复性,而组织的鲜重、干重不太稳定(鲜重常随时间及处理条件而有变化,

生长旺盛的幼嫩叶子,常随时间而会显著增加,所以要进行不同时期含水量的对比就不恰当)。一般认为采用相对含水量表示组织的水分状况,比用自然含水量表示为好。

( 1 )同 1 ,先求得组织鲜重W f ,然后将样品浸入蒸馏水中数小时,使组织吸水达饱和状态(浸水时间因材料而定)。取出用吸水纸吸去表面的水分,立即放于已知重量的铝盒中称重,再浸入蒸馏水中一段时间后取出吸干外面水分,再称重,直至与上次重量相等为止。此即为植物组织在吸水饱和时的重量,称饱和鲜重W t 。再如 1 法将样品烘干,求得组织干重W d 。

W t –W d 即为饱和含水量。

( 2 )计算

[ 思考题 ]

测定饱和含水量时,植物材料在水中浸泡时间过短或过长会出现什么问题?

实验植物组织渗透势的测定质壁分离法

实验1 植物组织渗透势的测定(质壁分离法) 一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。代入公式即可计算出渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜;载玻片及盖玻片;镊子;刀片 配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml,其浓度为1m0le/L(母液)。再配制成下列各种浓度: 0.50mol/L:吸母液25ml+水25ml 0.45mol/L:吸母液22.5ml+水27.5ml 0.40mol/L:吸母液20.0ml+水30.0ml 0.35mol/L:吸母液17.5ml+水32.5ml 0.30mol/L:吸母液15.0ml+水35.0ml 0.25mol/L:吸母液12.5ml+水37.5ml 0.20mol/L:吸母液10.0ml+水40.0ml 0.15mol/L:吸母液7.5ml+水42.5ml 0.10mol/L:吸母液5.0ml+水45.0ml 四、实验方法 将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物,也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,5—10分钟后,从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。实验中必须

植生实验 植物组织渗透势的测定

实验一、植物组织渗透势的测定 (质壁分离法) 一、实验原理: 将植物组织分别投入一系列浓度梯度的溶液中,使细胞将要产生初始质壁分离的浓度,就等于细胞液的浓度,根据浓度可计算出渗透势。 【注::典型植物细胞水势(Ψw)组成为:ψw=ψs+ψp+ψm (ψs 为渗透势,ψp为压力势,ψm为衬质势)。 渗透势(osmotic potential,ψs):由于溶质的存在而使水势降低的值称为渗透势或溶质势(solute potential,ψs),以负值表示。 渗透势值按公式ψs=-iCRT来计算(C为溶液的摩尔浓度;T为绝对温度,即实验温度+273;R为气体常数,R=0.0083;i为渗透系数,表示电解质溶液的渗透压非电解质溶液渗透压的倍数,如蔗糖i=1,NaCl i=1.8)。 压力势(pressure potential,ψp):由于细胞吸水膨胀时原生质向外对细胞壁产生膨压(turgor),而细胞壁向内产生的反作用力——壁压使细胞内的水分向外移动,即等于提高了细胞的水势。由于细胞壁压力的存在而引起的细胞水势增加的值叫压力势,一般为正值。当细胞失水时,细胞膨压降低,原生质体收缩,压力势则为负值。当刚发生质壁分离时压力势为零。 衬质势(matrix potential, ψm):衬质势是细胞胶体物质亲水性和毛细管对自由水的束缚而引起的水势降低值,如处于分生区的细

胞、风干种子细胞中央液泡未形成。对已形成中心大液泡的细胞含水量很高,ψm只占整个水势的微小部分,通常一般忽略不计。因此一个具有液泡的成熟细胞的水势主要由渗透势和压力势组成,即ψw=ψs+ψp 】。 将细胞置于纯水或稀溶液中,外液水势高于细胞水势,外侧水分向细胞内渗透,细胞吸水,体积变大;外液水势等于细胞水势,水分进出平衡,细胞体积不变;将植物置于浓溶液中,外液水势低于细胞水势,水从细胞内向外渗透,细胞失水,体积变小。 将植物材料(带色洋葱表皮组织)置于浓溶液中,由于细胞壁的伸缩性有限,而原生质层的伸缩性较大,当细胞继续失水时,原生质层便和细胞壁慢慢分离开来,这种现象被称为质壁分离。把发生了质壁分离的细胞浸在水势较高的稀溶液或清水中,外液中的水分又会进入细胞,液泡变大,原生质层很快会恢复原来的状态,重新与细胞壁相贴,这种现象称为质壁分离复原。 质壁分离质壁分离复原当外界溶液的渗透势略低于细胞液的渗透势时,原生质刚刚从细胞角隅上脱离细胞壁,即为初始质壁分离。刚发生质壁分离时,

植物组织含水量的测定

% 100Wf d -f ?鲜重干重鲜重W W % 100d d -f ?W W W 干重干重鲜重植物组织含水量的测定 【实验目的】 1.了解含水量的表示方法; 2.了解绝对含水量和相对含水量的区别 3.掌握植物组织鲜重干重的测量方法 【实验原理】 植物组织的含水量是反映植物组织水分生理状况的重要指标,其直接影响植物的生长、气孔状况,光合功能及作物产量。在环境胁迫情况下,植物组织的含水量也是反映植物受胁迫程度的重要指标之一。水分含量测定也是农作物产品的品质检定和判断其是否适于贮藏的重要标准。所以,植物组织含水量的测定在植物生理学研究及农业生产中具有重要的理论和实践意义。 植物组织含水量的表示方法常以鲜重、干重、相对含水量(或称饱和含水量)来表示。 其中相对含水量可作为比较植物保水能力及推算需水程度的指标。 分别测量植物组织的鲜重Wf ,干重Wd ,饱和鲜重Wt ,依据以下公式可以分别算出植物组织的鲜重含水量,干重含水量,以及相对含水量。 鲜重含水量= 干重含水量= 相对含水量=% 100Wf -Wt d -f ?鲜重饱和鲜重干重鲜重W W 【实验材料】 蜀葵花瓣 【实验步骤】 1.将新采的蜀葵花瓣,称取6 份 0.5 g (Wf ) ,迅速剪成小块。 2.3份分别于120℃烘箱中烘考1~1.5 h ,然后称此时的干重(Wd )。 3.3份分别放入蒸馏水中浸泡70 min ,当达到恒重时称此时的重量(Wt ) 利用所得到的数据:Wf ,Wd ,Wt 分别计算出鲜重含水量,干重含水量,相对含水量 注意事项: 1.测量干重时,先测出称量瓶的重量W ,在测出称量瓶与花瓣重量的总和Wf 与Wd 。放入瓶中以后,花瓣不再取出。烘烤一个小时后取出冷却至室温,称量,再放入烘箱中烘烤10分钟,取出冷却至室温,再次称量。重复以上步骤,直至总重量恒重。 2.放入蒸馏水浸泡的花瓣,可以用吸水纸将其覆盖在水中。另取两片花瓣同样的方式浸泡在水中。70min 后称量两片对照物花瓣,其恒重可作为实验材料也恒重的标志。 【实验结果】 蜀葵花瓣的含水量测定数据记录如下:

土壤水份和植物组织含水量的测定

土壤水份和植物组织含水量的测定 实验的目的与要求: 通过对植物和土壤水分的测定来学习和使用烘干法水分测定仪,掌握实验和实习的技巧,了解一定的实习的规则! 通过对实习数据的比较,以及结合自身的知识来分析土壤和植物组织含水量的关系,了解水分对植物生长的影响,了解土壤中水分对植物生长的影响。 结合生态学的知识来分析土壤和植物含水量受整个生态系统的影响。 实验的主要内容: 记录实验地的周围环境的各种生态环境因素,如温度,风向,湿度。 测量土壤和植物组织含水量值,在不同的环境下测量对比,同一环境下不同物种的值。 记录实验测量的数据值,分析得出结论。 实习的主要工具: 1.烘干法水分测定仪(LSH-100A型): 最大秤量:100g 实际标尺分度值:1mg 准确度级别:2级 水分测量允许误差:±0.2%(样品≥2克) 水分含量测定可读性:0.01% 测量水分范围:0~100% 加热源:卤素灯(环型400W) 温控精度:±1℃ 加热温度设定:室温~160℃(以1℃调整) 时间设定:0~180min(以1min调整) 测量方法:手动、自动 操作温度范围:10~30℃ 电源及功耗:AC220V±22V 50Hz 420W 秤盘尺寸:¢100mm 外壳尺寸:360mm×250mm×270mm 净重:7kg 实验用剪刀、小袋子 实验原理: 首先对同一环境下的不同生长情况的高山榕进行水分的测定,记录数据并比较,然后对不同环境下的不同株池杉进行水分的测定,在数据中得出结论。用烘干法测定仪进行含水量的测定,使用小塑料袋来装实验品以防止植物叶子和土壤水分的蒸发。 实验的步骤: 首先进行样本的采样,在学校的马路边分别进行不同生长情况高山榕叶子的取样,然后再树下进行土壤的取样。在昭阳湖旁不同地方生长情况相同的池杉的叶子和土壤的进行取样。将取来的样品装入袋中,并做好标签。 预热烘干法测定仪后,将取来的样品放入烘干仪中保持5-8分钟,待屏幕中的数值稳定后进行数据的记录。 对数据进行整理分析和讨论,得出结论。 实验的结果:

实验二 植物组织水势和细胞渗透势的测定

实验二植物组织水势和细胞渗透势的测定 项目一植物组织水势的测定 一、原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时,则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的,可以根据公式算出其渗透压,取其负值,为溶液的渗透势(ψπ),即代表植物的水势(ψw)(water potential)。 ψw=ψπ=-P=-CRT(大气压) 二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料:小白菜、菠菜或其它作物叶片 (二)仪器设备:1.带塞青霉素小瓶12个;2.带有橡皮管的注射针头;3.镊子;4.打孔器5.培养皿。(三)试剂:1. 0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mol/L蔗糖溶液;2. 甲烯蓝粉末。 三、实验步骤 (一)取干燥洁净的青霉素瓶6个为甲组,各瓶中分别加入0.05~0.30mol/L蔗糖溶液约4 mL(约为青霉素瓶的2/3处),另取6个干燥洁净的青霉素瓶为乙组,各瓶中分别加入0.05~0.30 mol/L蔗糖溶液1mL 和微量甲烯蓝粉末着色,上述各瓶加标签注明浓度。 (二)取待测样品的功能叶数片,用打孔器打取小圆片约50片。用镊子分别夹入5~8个小圆片到盛有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的青霉素瓶中(乙组)。盖上瓶塞,并使叶圆片全部浸没于溶液中。放置约30~60min,为加速水分平衡,应经常摇动小瓶。 (三)经一定时间后,用注射针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许,将针头插入对应浓度甲组青霉素瓶溶液中部,小心地放出少量液流,观察蓝色液流的升降动向。(每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头)。如此方法检查各瓶中液流的升降动向。 若液流上升,说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小(即植物组织失水);表明叶片组织的水势高于该浓度糖溶液的渗透势;如果蓝色液流下降则说明叶片组织的水势低于该糖溶液的渗透势,若蓝色液流静止不动,则说明叶片组织的水势等于该糖溶液的渗透势,此糖溶液的浓度即为叶片组织的等渗浓度。 四、结果计算 将求得的等渗浓度值代入如下公式:ψw=ψπ=-CRTi×1.013×0.1。 式中:ψw=植物组织的水势(单位:Mpa),ψπ=溶液的渗透势,C=等渗浓度(mol/L),R=气体常数(0.008314MPa.mol/L-1.K-1),T=绝对温度,i=解离系数(蔗糖=1,CaCl2=2.60),1大气压=1.013 bar =0.1MPa。 五、思考题 小液流法测定植物组织水势的原理如何?

实验3植物细胞渗透势的测定质壁分离法

实验 3 植物细胞渗透势的测定(质壁分离法) 植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度,因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗逆性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势,增加吸水能力,而在一定程度上维持细胞膨压,保障细胞的生长和气孔的开放,这种现象叫做渗透调节作用。渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示,在水分生理与抗逆性生理研究中经常需要测定。 一、原理 将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中,经过一段时间,植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态,则细胞的压力势(Ψ p )将下降为零。此时细胞液的渗透势(Ψs )等于外液的渗透势Ψs 0 。此溶液称为该组织的等渗溶液,其浓度称为该组织的等渗浓度,即可计算出细胞液的渗透势(Ψs )。实际测定时,因为临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到,所以一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。处于初始质壁分离状态的细胞体积,比吸水饱和时略小,故细胞液浓缩而渗透势略低于吸水饱和状态时的渗透势称基态渗透势。 二、实验材料、试剂与仪器设备 (一)实验材料 洋葱鳞茎、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等。 (二)试剂 1 . 1 mol/kg 蔗糖水溶液:称取预先在 60 ~ 80 ℃下烘干的蔗糖 34. 2 g 溶于 100 g 蒸馏水中,即为 1 质量摩尔浓度的蔗糖溶液。 2 . 0.0 3 %中性红溶液。 3 .蔗糖系列标准液:取干燥洁净的小试剂瓶 9 支编号,用 1 mol/kg 蔗糖水溶液依据 C 1 V 1 =C 2 V 2 公式配制 0.30 mol/kg 、 0.35 mol/kg 、 0.40 mol/kg 、 0.45 mol/kg 、 0.50 mol/kg 、 0.55 mol/kg 、 0.60 mol/kg 、 0.65 mol/kg 、 0.70 mol/kg 等一系列不同浓度的蔗糖水溶液(具体范围可根据材料不同而加以调整),贮于试剂瓶中,瓶口加塞以防蒸发浓缩。 (三)仪器设备 显微镜,载玻片,盖玻片,温度计,尖头镊子,刀片,小培养皿(直径为 6 cm ),试剂瓶,烧杯,容量瓶,量筒,吸管,吸水纸等。 三、实验步骤 1 .取干燥、洁净的培养皿 9 套编号,将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿,使之成一薄层,盖好皿盖备用。 2 .用镊子撕取(或用刀片刮取)供试材料的表皮,大小以 0.5 cm 2 为宜,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,每一浓度 4 ~ 5 片。同时记录室温。为了便于观察,可先将切片于 0.03% 中性红内染色 5 min 左右,吸去水分,再浸入蔗糖溶液中,但如不染色即能区别质壁分离时,仍以不染色为宜。 3 . 5 ~ 10 min 后,取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。如果在两个相邻浓度的切片中,一个切片没有发生质壁分离,另一个切片发生质壁分离的细胞数超过 50 %,则这两个浓度的平均值为其等渗浓度。每一制片观察的细胞不应少于 100 个。检查时可先从中间浓度开始。

植物水分等测定

植物水分、干物质和粗灰分的测定 植物水分、干物质和粗灰分的测定 植物水分和干物质的测定 植物体由水和干物质两部分组成。含水量多少是反映植物生理状态和成熟度的一个指标,含水量过高,植株易徒长倒伏;而过低又易调萎。植物需要有适宜的含水量才能生长健壮。在研究土壤、施肥、栽培和气候等因子对植物生长发育影响和光合利用率等问题时,一般要测定植株的水分和干物质积累状况。新鲜植物体一般含水量为70~95%,叶片含水量较高,又以幼叶为最高;茎秆含水量较少,种子含水量更少,一般为5~15%。新鲜植物体除去水分的剩余部分即为于物质,它包括有机质和矿物质两部分。其中有机质占植物干物质的90~95%,矿物质为5~10%。 水分含量测定也是农作物产品的品质检定和判断其是否适于贮藏的 重要标准。在植物成分分析中,都是以全干样品为基础来计算各成分的质量百分含量。因为新鲜样品的含水量变化很大,风干样品的含水量也会受环境湿度和温度的影响而变动,只有用全干样作计算(干基),各成分含量的数值才比较稳定。 水分的测定方法 测定植物水分的方法很多,应根据植物样品成分的性质、对分析精度的要求和实验室设备条件等情况适当选择。常用的方法有常压恒温干燥法、减压干燥法和蒸馏法,其中用得最多的常压恒温干燥法准确度较高,适用于不含易热解和易挥发成分的样品,被认为是测定水分的

标准方法;但对于幼嫩植物组织和含糖、干性油或挥发性油的样品则不适用。减压干燥法,运用于含易热解成分的样品;但含有挥发性油的样品也不适用,蒸馏法,适用于含有挥发油和干性油的样品,更适用于含水较多的样品,如水果和蔬菜等。其他如红外干燥法、冷冻干燥法、微波衰减法、中子法、卡尔·费休法等都要有特定仪器设备,不易推广使用。 常压恒温干燥法 方法原理将植物样品置于100~105°C烘箱中烘干,由样品的烘干失重(即为水分重)计算水分的含量。此法适用于不含有易热解和易挥发成分的植物样品。 植物样品在高温烘干过程中,可能有部分易焦化、分解和挥发的成分损失而使水分测定产生正误差;也有可能因水分未完全驱除(或在冷却、称量时吸湿)或有部分油脂等被氧化增重而产生负误差。但在严格控制操作条件下,该法仍是测定植物水分的标准方法。 操作步骤: 1.风干植物样品水分的测定取洁净铝盒,打开盒盖,放人100~105°C烘箱中烘30min,取出,盖好,移人盛有硅胶的干燥器中冷至室温(约需30min),立即迅速称重。再烘30min,称重,两次称重之差小于1mg可算作达恒重(m0)。 将粉碎(1mm)、混匀的风干植物样品约3g,平铺在已达恒重的铝盒中,准确称量后(m1),将盖子放在盒底下,移人已预热至约115°C 的烘箱中,关好箱门,调整温度在100~105°C,烘4~5h。取出,

土壤水份和植物组织含水量的测定

土壤水份和植物组织含水量的测定 一.实验的目的与要求: 通过对植物和土壤水分的测定来学习和使用烘干法水分测定仪,掌握实验和实习的技巧,了解一定的实习的规则! 通过对实习数据的比较,以及结合自身的知识来分析土壤和植物组织含水量的关系,了解水分对植物生长的影响,了解 土壤中水分对植物生长的影响。 结合生态学的知识来分析土壤和植物含水量受整个生态系统的影响。 二.实验的主要内容: 1.记录实验地的周围环境的各种生态环境因素,如温度,风向,湿度。 2.测量土壤和植物组织含水量值,在不同的环境下测量对比,同一环境下不同物种的值。 3.记录实验测量的数据值,分析得出结论。 三.实习的主要工具: 1.烘干法水分测定仪(LSH-100A型): 最大秤量:100g 实际标尺分度值:1mg 准确度级别:2级 水分测量允许误差:±0.2%(样品≥2克) 水分含量测定可读性:0.01%

测量水分范围:0~100% 加热源:卤素灯(环型400W) 温控精度:±1℃ 加热温度设定:室温~160℃(以1℃调整) 时间设定:0~180min(以1min调整) 测量方法:手动、自动 操作温度范围:10~30℃ 电源及功耗:AC220V±22V 50Hz 420W 秤盘尺寸:¢100mm 外壳尺寸:360mm×250mm×270mm 净重:7kg 实验用剪刀、小袋子 四.实验原理: 首先对同一环境下的不同生长情况的高山榕进行水分的测定,记录数据并比较,然后对不同环境下的不同株池杉进行水分的测定,在数据中得出结论。用烘干法测定仪进行含水量的测定,使用小塑料袋来装实验品以防止植物叶子和土壤水分的蒸发。 五.实验的步骤: 1.首先进行样本的采样,在学校的马路边分别进行不同生 长情况高山榕叶子的取样,然后再树下进行土壤的取样。 在昭阳湖旁不同地方生长情况相同的池杉的叶子和土壤 的进行取样。

植物组织渗透势的测定质壁分离法

植物组织渗透势的测定 质壁分离法 Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】

一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜;载玻片及盖玻片;镊子;刀片 配成—L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称蔗糖用蒸馏水配成100ml,其浓度为1m0le/L(母液)。再配制成下列各种浓度: L:吸母液25ml+水25ml L:吸母液+水 L:吸母液+水 L:吸母液+水 L:吸母液+水 L:吸母液+水 L:吸母液+水 L:吸母液+水 L:吸母液+水 四、实验方法 将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物,也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,5—10分钟后,从L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。

09 质壁分离植物组织渗透势的测定

植物组织渗透势的测定 一、实验目的 1. 观察植物组织的细胞质壁分离过程及其原理和方法的掌握。 2. 学会用质壁分离法测定植物细胞渗透势的方法。 二、实验原理 渗透势是指因溶质溶解而使水的自由能降低(与纯水相比)的数值,降低的值与溶质的浓度成正比,纯水的水势最大(值定为零),当水中具有溶质,水势便降低,此时的水势称为渗透势,故是负值(渗透势的绝对值等于溶质的渗透压,渗透压为正值)。渗透势的单位以巴表示,1巴 = 0.985大气压(或1大气压 = 1.013巴)。植物成熟的细胞都具有液泡,液泡中具有各种溶质,故具有一定的渗透势,液泡外面包裹着活的原生质,原生质外面有细胞壁包围,细胞壁可看作是层透膜,活的原生质具有选择性,所以整个细胞类似一个渗透系统。可用质壁分离法测量细胞渗透势。 质壁分离法当细胞放在一种渗透势比其细胞液渗透势低的溶液中时,细胞液中的水向外渗,液泡体积缩小,原生质的胞壁也跟着向内收缩,如水分继续外渗,液泡体积缩小,而胞壁弹性有限,不能继续收缩,原生质就和细胞壁脱离,这就是质壁分离现象。 当细胞放在某一溶液中,细胞内外水分交换达到平衡,即处于渗透平衡状态,此时细胞内的压力势为零,那么细胞液的渗透势就等于该溶液的渗透势,该溶液浓度称为等渗浓度。利用一系列梯度浓度的溶液,观察质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离现象时(即细胞只是角偶上与胞壁分离)的浓度和与其相邻的尚不能引起质壁分离浓度梯度之间的溶液浓度。代人公式Ψ= - RTiC即可算出其渗透势。 s 三、实验用品 (一)材料洋葱鳞茎或紫鸭跖草叶片。 (二)器材显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片。 (三)试剂 1 mol/L蔗糖溶液。 四、实验操作 1.以1 mol/L的蔗糖溶液作母液,用蒸馏水配成0.10,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,0.45,0.50,0.60 mol/L的一系列浓度的蔗糖溶液各10 ml。各溶液分别装入具塞子试管中,按浓度梯度递减的次序排成一行,并在试管壁上贴上

植物细胞死活的鉴定和植物组织渗透势的测定

植物细胞死活的鉴定和植物组织渗透式的测定 中文摘要:植物活细胞是一个渗透系统,通过渗透的性质及现象可以鉴定一个植物细胞的死活。当植物细胞或组织放在外界等渗溶液中时,组织与外界溶液的水分交换达到动态平衡,植物细胞处于初始质壁分离状态,细胞压力势为零,此时溶液的渗透势就等于所测植物的渗透势。 英文摘要:Plants living cells is a osmosis system, we through permeating the nat ure and phenomena can be id entified a plant cell anyway. When the plant cell or tissue on external etc, organization and infilt ration solution when the moisture exchange reach outsid e solution dynamic balance, plant cells in its initial qualitative wall separated, the cellular pressure potential zero, then solution penetration of potential is measured the pl ant penetration of potential. Part I 植物细胞死活的鉴定 实验原理:植物细胞是一个渗透系统。当细胞处于比其水势低的高渗透溶液中时,细胞由于失水而使原生质体体积缩小,从而引起质壁分离。当提高细胞外溶液的水势,使其大于细胞内的水势时,细胞重新吸水,原生质体体积膨胀,可见质壁分离复原。 活细胞与死细胞的膜在性质上有许多差别,特别是透性的变化最为明显;因此活细胞在高渗溶液中能产生质壁分离,而死细胞不能产生质壁分离现象,即可以此鉴定。 实验目的:利用质壁分离现象验证植物细胞的死活. 实验器材和试剂 植物材料:洋葱鳞茎 实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿 实验试剂:1mol/L蔗糖溶液 实验步骤 1取洋葱鳞片内表皮一小块,放在有1-2滴蒸馏水的载玻片上,盖上盖玻片并在显微镜下观察其自然状态,并绘图示细胞状态。 2在盖玻片的一边加上2-3滴1mol/L的蔗糖溶液,同时在对边用滤纸片吸去水分,使植物材料换入蔗糖溶液中。在显微镜下连续观察细胞有何变化,并绘图示细胞状态。 3观察后,即可从载玻片的一边小心加蒸馏水数滴,同时用滤纸缓慢的从另一边吸蔗糖溶液,反复进行数次以洗去蔗糖溶液,将材料又换入蒸馏水中。在显微镜下观察细胞又有何变化?并解释其原因。 4另取洋葱鳞片内表皮一小块,放在已加有数滴蒸馏水的载玻片上。先在酒精灯火焰上小心加热2-3分钟把植物细胞杀死。待冷却后于载玻片上加2-3滴1mol/L蔗糖溶液,盖上盖玻片进行镜检,看是否发生质壁分离。 Part II 植物组织渗透势的测定 实验原理:在一系列预先准备好的试液中寻找能引起生活组织里约一半的细胞发生质壁分离的溶液。即把一组同一目的的样品放置在一系列按照渗透势逐渐减低排列的蔗糖溶液里,并浸泡30分钟,然后转移到放有1-2滴同一浓度溶液的载玻片上,观察质壁分离发生的情况。镜检约50个细胞。若发生质壁分离,计算初始质壁分离细胞占镜检细胞数的百分比;若达50%,则细胞液的渗透势等于该浓度溶液的渗透势。或确定刚刚引起初始质壁分离和其相邻的尚不能引起质壁分离时溶液浓度的平均值,作为等渗浓度,代入公式ψs=-iCRT中计算出植物组织渗透势。 实验目的:利用质壁分离现象测定植物组织的渗透势。

实验一 植物组织自由水和束缚水含量的测定

中国海洋大学实验报告 2016年10月24日 姓名专业年级学号同组者 题目植物组织自由水和束缚水含量的测定授课老师 一、 实验目的 学会植物组织含水量、自由水和束缚水含量的测定方法,学会电子天平和阿贝氏折射以等仪器的使用方法。 二、 实验原理 植物组织中水分有自由水和束缚水两种存在状态,自由水易于流动和蒸发,可以做溶剂,而束缚水与此相反难以蒸发,也不可以做溶剂。根据这两种水的性质不同讲他们分离,然后再测定其含量。分离的方法是将待测的植物组织放入浓度很高的蔗糖溶液中脱水,如果蔗糖溶液的浓度足够高,体积足够大,那么在达到平衡是组织绝大部分的自由水将进入蔗糖溶液,根据蔗糖溶液浓度的变化,重量以及植物组织的鲜重可以求出植物组织中自由水含量,同时用烘干的方法测定出植物组织的含水量,束缚水含量等于植物组织含水量与自由水含量的差。 设:A 为植物组织中自由水的质量(g ),W 为蔗糖溶液的质量(g );C1为处理前蔗糖溶液浓度(%);C2为处理后蔗糖溶液浓度(%);W y 为植物组织鲜重(g )。 则 A=(W+A)(1-c 2)-W(1-c 2) 即 A= y W C C W ) (21- 自由水含量(%)= %100)(%100221?-=?y y W C C C W W A

三、 仪器试剂 1.仪器及器皿 阿贝氏折射仪,超级恒温水浴,1/1000电子天平,吸管,烘箱,扁型称量瓶,剪刀,5ml 移液管,滤纸,吸水纸。 2.试剂 65%一70%蔗糖溶液(W/V)。 四、 实验材料 新鲜白菜叶 五、 实验步骤 (1) 取称量瓶4个,编号、洗净、烘干,用电子天平称量、记录。 (2) 取待测的植物样品4份,每份在1g 左右(0. 900一1. 100 g ),用剪刀剪成1~2mm 长的小段,放人称量瓶中,盖上盖子,称量、记录。 (3) 其中两瓶用来测含水量。将盖子打开,放入100℃~105℃的烘箱中烘至恒重,称量,记录,代人公式计算植物组织含水量。 (4) 另外两瓶分别加人蔗糖溶液5 mL ,盖上瓶盖,称量、记录,放在实脸台上进行水分交换2~3小时,其间不时摇动。用阿贝氏折射仪分别测定处理前、后的重量百分比浓度。 (5) 将阿贝氏折射仪的进样旋钮打开,用吸管吸取待测蔗糖溶液1~2滴加人折射仪进样棱镜的磨砂表面上,将棱镜关闭,调节色散旋钮至色散消失调节读数旋钮,将黑白分界线调到望远镜筒的十字交叉点上,然后在读数镜筒中读出蔗糖的质量百分浓度。 六、 计算 样品含水量(%)= %100-?鲜重 干重 鲜重 样品自由水含量(%)= %100)(%100221?-=?y y W C C C W W A

第2章 植物水分干物质测定.ppt.Convertor

第二章:植物水分和粗灰分测定 第一节植物水分概述 一般将样品在101.325 kPa下,100℃左右加热至恒重所失去的质量定义为“水分”,这种定义是狭义的。因植物组织或农产品中的水分有游离水和结合水之别,其中游离水容易分离,而结合水则不容易分离。但如果不加限制的长时间烘烤,必然使其它成分发生变化,影响分析结果。 供测定的样品多种多样,其含水量可由百分之几到98%,因此人们一直在多方面研究适合于各种试样性状的精确测定水分子“H2O”含量的方法。同时,研究能满足不同要求的准确、快速测定方法。 目前常用的水分测定方法可分成以下几类: (1)加热干燥法 (2)蒸馏法。该法特别适用于脂肪类产品和除水分外含有大量挥发性物质的试样。样品在蒸馏过程中始终受到载体的惰性气雾保护,因而不致发生化学成分的改变。 上述两种方法用于检测水分含量较高(65% ~ 95%)的新鲜样品时效果更好。 (3)化学反应法。包括卡尔-费歇尔(Karl-Fischer,即K-F法)方法、水与电石(碳化钙)产生乙炔或水与浓酸混合时产生热等为基础的方法。其中很多分析参考书中将K-F法测定水分定为农畜产品、食品、化工、肥料准确定量水分的一般标准方法。但该法的缺点是必须防止水分进入滴定容器及试剂吸水,且其校准的程序颇为严格、费时。 农产品的成分中,水分是最容易变化的组分,其含量会因散湿而减少或吸湿而增加。因此,要精确定量水分并非易事。一般应根据待测样品特性、分析精密度的要求以及实验室设备条件等选择适当的方法。本章主要介绍常压直接烘干法、常压二步烘干法、减压加热干燥法和共沸蒸馏法等。 第二节干燥法 一、直接干燥法:(GB/T 5009.3—2003,GB 5497—85,GB/T 14489.1—93 ) 方法原理 样品在100~105℃下烘干一定时间至“恒重”,损失的质量被认为是水分的质量。水分含量是用差减法计算而来,所以这是一种间接测定水分含量的方法。 但在严格控制条件的情况下,对多数试样而言,烘干法仍然是测定水分较准确的标准方法。此法适用于不含有易分解和易挥发成分农产品水分的测定。 (二)仪器 1. 电热恒温干燥箱。 2. 铝盒。 3. 干燥器。宜使用经135℃干燥2~3 h的变色硅胶作干燥剂,对油脂类样品宜用吸湿力强的五氧化二磷等作干燥剂。 4. 分析天平(精确到1 mg)。 精密烘箱 高温电炉 (三)操作步骤 取洁净铝盒,打开盒盖,放入100~105℃烘箱中烘30 min,取出,移至干燥器中冷至室温后(约20 min)称重,继续烘干至“恒重”(m0)。 将粉碎、混匀的风干样品3.000~5.000g平铺在已达衡重的铝盒中,盖好盖子,尽快称量铝盒和内容物质量(m1)。 将盖横放在盒旁,置于已预热至约115℃的烘箱中,关好箱门,调整至温度在100~105℃之间,烘干3~4 h(注2),取出,盖上铝盒盖,移入干燥器中冷却后称重,如此重复,直至“恒

植物组织水势的测定实验报告

植物组织水势的测定实验报告 一、实验目的和要求 了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的方法和它们的优缺点。 二、实验原理 小液流法测定新鲜白萝卜的组织水势。植物细胞是一个渗透系统。当组织水势低于溶液渗透势,组织吸水,溶液变浓,比重增加,小液流下沉。当组织水势高于溶液渗透势,组织失水,溶液变稀,比重下降,小液流上浮。当组织水势等于溶液渗透势,组织与溶液达到水分进出动态平衡,溶液浓度和比重不变,小液流不动。 压力室法测定海桐叶片组织水势,植物叶片通过蒸腾作用产生蒸腾拉力。导管中的水分由于内聚力的作用而形成连续的水柱。因此,对于蒸腾着的植物,其导管中的水柱由于蒸腾拉力的作用,使水分连贯地向上运输。当叶片或枝条被切断时,木质部中的液流由于张力解除迅速缩回木质部。将叶片装入压力室钢筒,切口朝外,逐渐加压,直到导管中的液流恰好在切口处显露时,所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。 三、主要仪器设备 小液流法:白萝卜、打孔器、10ml离心管、小刀、镊子、注射器、1mol/L蔗糖溶液、甲基橙压力室法:压力室 四、操作方法和实验步骤 小液流法:

1、用1mol/l的蔗糖溶液配制0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50M 一系列不同浓度的蔗糖溶液(10mL),用力混匀。 2、分别取4ml不同浓度的溶液到另一组相应的试管中。每管加入厚度约为1mm的萝卜圆片,加塞放置30min。期间晃动(3-4次)。 3、用针蘸取少量甲基橙放入每支试管,混匀。 4、用注射器取少许黄色溶液,伸入对应浓度的蔗糖溶液中部,缓慢挤出一滴小液滴,观察小液滴移动方向并记录。 Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+toC) ×浓度 压力室法: 根据植物材料选取枝条(或叶片)型的压力室盖→将试样装入压力室盖的孔(或槽)中夹紧,压入压力室并顺时针旋转紧固。打开钢瓶阀门,使控制阀朝向加压,缓慢打开测定阀,使加压速率达0.1bar,仔细观察伸出压力室盖的植物样品,一发现木质部转湿润液体溢出,立即关闭测定阀,记录压力表读数。 组织Ψw(Mpa) = -0.1×压力室压力表读数 五、实验数据记录和处理 小液流法测定结果: 其他两个小组的实验结果: 根据公式计算得到萝卜组织液浓度 Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+t℃) ×浓度= -0.0083×(273+16 ) ×0.1=-0.240Mpa 萝卜组织液浓度约为0.1mol/L,水势约为-0.240Mpa

第三章 水分的测定

第三章水分和水分活度的测定 本章的主要学习内容包括: 第一节水分的概述,复习食品化学中学到的水分存在形态和水分测定的意义。 第二节水分的测定,讲述三种测定方法,干燥法和K-F法需要掌握,蒸馏法了解第三节水分活度的测定,讲述三种方法,掌握康威氏皿扩散法。 第一节水分的概述 水是生物体的溶剂、载体、反应介质、构象稳定剂。一切生理生化反应、酶反应、微生物活动,都需要水的参与。水分在食品分析中,几乎是所有产品的必检项,因为它是: 1.重要的质量指标:影响感官(干瘪、结块等)、物性(持水性、弹性等)、 保藏性(主要指水分活度的影响,对微生物、酶、化学反应有直接影响)。 2.重要的经济指标:成本(每增加一个百分点,成本相差很多,特别是高附 加值产品),它还是其它成分的测定基础。 食品中固形物:指食品内水分排除后的全部残留物,包括蛋白质、脂肪、组纤维、灰分等。它们的含量可以用干基含量/湿基含量来表示。 一、水分存在的形态:分结合水和自由水。 结合水:食品中与其它成分结合在一起水。此部分的水在沸点和冰点不发生相变;压榨不与组织细胞分离;不具有溶剂特性。 如:1)与蛋白质的活性基团(-OH,=NH,-NH3,-COOH,-CONH2)和碳水化合物的活性基团(-OH)以氢键相结合而不能自由运动的水; 2)与蛋白质、淀粉水合作用和膨润吸收作用水分、以及某些盐类结晶水等。自由水:包括动植物食品组织中通过毛细管作用力所吸存的不可移动的凝胶态水;存在于细胞外各种毛细管和腔体中的水;吸附于食品表面的吸附水。此部分水具有水的基本特性,有相变,有溶剂特性,可以热力去除。 二、水分活度 水分活度是指食品中水分存在的状态,表征水分与食品结合程度(游离程度)。 (1)水分活度值越高,结合程度越低;水分活度值越低,结合程度越高; (2)水分活度数值:用Aw表示,水分活度值等于用百分率表示的相对湿度; (3)水分活度的测试意义:Aw值对食品保藏具有重要的意义。因为A W反映了食品与水的亲和能力程度,它表示了食品中所含水分作为化学反应和微生物生长的可用价值。食品的水分活度的高低是不能按其水分含量来考虑的。例如,金黄色葡萄球菌生长要求的最低水分活度为0.86,而相当于这个水分活度的水分含量则随不同的食品而异,如干肉为23%,乳粉为16%,干燥肉汁为63%,所以按水分含量多少难以判断食品的保存性,只有测定和控制水分活度才对于食品保藏性具有重要意义。 第二节水分的测定 水分测定有两种方式: ①直接法——利用水分本身的物理性质,采用烘干、化学干燥、蒸馏等方法 去除样品中水分,再通过称量等手段得到水分含量。如重量法、蒸馏法、卡尔·费休法等。 ②间接法——不去除水分,利用食品的物理常数通过函数关系确定水分含量。 如:测相对密度、折射率、电导、旋光率等。 其中直接法比间接法准确度高。 一、干燥法

植物组织含水量的测定

实验 2 植物组织含水量的测定 一、原理 植物组织的含水量是反映植物组织水分生理状况的重要指标,如水果、蔬菜含水量的多少对其 品质有影响,种子含水状况对安全贮藏更有重要意义。利用水遇热蒸发为水蒸汽的原理,可用 加热烘干法来测定植物组织中的含水量。植物组织含水量的表示方法,常以鲜重或干重 % 表 示,有时也以相对含水量 % (或称饱和含水量 % )表示。后者更能表明它的生理意义。 二、实验材料与仪器设备 (一)实验材料 植物鲜组织。 (二)仪器设备 分析天平,剪刀,烘箱,铝盒,干燥器,吸水纸,坩埚钳。 三、实验步骤 l. 自然含水量的测定 ( 1 )铝盒的恒重将洗净的两个铝盒编号,放在 105 ℃恒温烘箱中,烘 2 小时左右,用坩 锅钳取出放入干燥器中冷却至室温后,在分析天平上称重,再于烘箱中烘 2 小时,同样于干 燥器中冷却称重,如此重复 2 次( 2 次称重的误差不得超过 0.002g ),求得平均值 W 1 , 将铝盒放入干燥器中待用。 ( 2 )将待测植物材料(如叶子等)从植株上取下后迅速剪成小块,装入已知重量的铝盒中 盖好,在分析天平上准确称取重量,得铝盒与鲜样品总量为 W 2 ,然后于 105 ℃烘箱中干燥 4 ~ 6 小时(注意要打开铝盒盖子)。取出铝盒,待其温度降至 60 ~ 70 ℃后用坩锅钳将 铝盒盖子盖上,放在干燥器中冷却至室温,再用分析天平称重,然后再放到烘箱中烘 2 小时, 在干燥器中冷却至室温,再称重,这样重复几次,直至恒重为止。称得重量是铝盒与干样品总 重量 W 3 。烘时注意防止植物材料焦化。如系幼嫩组织可先用 100 ~ 105 ℃杀死组织后, 再在 80 ℃下烘至恒重。 ( 3 )记录及计算 表 1-1 植物组织含水量记录表 编号铝盒重( W 1 )铝盒 + 样品鲜重( W 2 )铝盒 + 样品干重( W 3 ) 样品鲜重W f = W 2 – W 1 样品干重W d = W 3 – W 1 2. 相对含水量的测定方法(或称饱和含水量法) 此法是以植物组织的饱和含水量为基础来表示组织的含水状况,因为作为计算基础的组织饱和 含水量有较好的重复性,而组织的鲜重、干重不太稳定(鲜重常随时间及处理条件而有变化,

植物样品制备及含水量测定

实验报告 课程名称: 农产品检测与农化分析 指导老师: 倪吾钟 成绩:__________________ 实验名称: 植物样品采集制备及含水量测定 实验类型: 定量实验 同组学生姓名: 陈潇婷 一、实验目的和要求(必填) 二、实验内容和原理(必填) 三、实验材料与试剂(必填) 四、实验器材与仪器(必填) 五、操作方法和实验步骤(必填) 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析(必填) 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、掌握野外植物样品采集的方法及注意事项; 2、掌握植物含水量的表示及测定方法; 二、实验内容和原理 1、植物样品的采集 植物分析按目的可以分为两类,一类是营养诊断分析或作物组织分析;另一类是品质鉴定分析或产品分析。而植物样品的采集是分析质量控制中的第一道也是最重要、影响最大的一个环节,对分析结果的可靠性起着决定性作用。 ①样品采集 植物样品的采集除了需要遵循田间试验抽样技术一般原则外,还因各种样品植物的特点而有具体的要求。采样时要制定采样计划,包括采样的目的、时间、地点、样点数、植物的名称、植物器官的组织名称、采样部位、采样方法和步骤以及后处理及分析项目等;本次实验采集的植物为三叶草,在一块区域进行随机点采样。 ②样品制备 制备植物样品一般需经过清洗、烘干、磨细、过筛、装瓶等过程; 若采集的植株需要分不同器官进行测定,则需要立即将其剪开,避免养分运转;剪碎的样品太多时,可在混匀后用四分法缩分至所需要量;用于营养诊断分析的样品还应可能立即称量鲜重; 植物样品应在刚采集的新鲜状态冲洗,否则一些易溶性养分(如可溶性糖、钾、硝酸根离子等)很容易从已死亡的组织中洗出,一般可用湿棉布擦净表面污染物然后用蒸馏水或去离子水淋洗1~2次。一般测定时用干燥样品,为保护成分不发生转变和损耗,应将样

植物组织渗透势的测定质壁分离法

实验1植物组织渗透势的测定(质壁分离法) 一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜;载玻片及盖玻片;镊子;刀片 配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml,其浓度为1m0le/L(母液)。再配制成下列各种浓度: 0.50mol/L:吸母液25ml+水25ml 0.45mol/L:吸母液22.5ml+水27.5ml 0.40mol/L:吸母液20.0ml+水30.0ml 0.35mol/L:吸母液17.5ml+水32.5ml 0.30mol/L:吸母液15.0ml+水35.0ml 0.25mol/L:吸母液12.5ml+水37.5ml 0.20mol/L:吸母液10.0ml+水40.0ml 0.15mol/L:吸母液7.5ml+水42.5ml 0.10mol/L:吸母液5.0ml+水45.0ml 四、实验方法 将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物,也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,5—10分钟后,从0.5mol/L 开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察,如果所有细胞都产生质壁分离的现象,则取低浓度溶液中的制片作同样观察,并记录质壁分离的相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。 在找到上述浓度极限时,用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次,直至有把握确定为止。在此条件下,细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。

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