药学分子生物学

第一章基因与基因组

基因 (gene) ：是指合成有功能的蛋白质、多肽或RNA所需的全部DNA序列（除部分病毒RNA），是基因组的一个功能单位。

基因组（genome）：是指生物体一套完整的单倍体遗传信息的总和，包括所有基因和基因间的区域。

基因组的主要功能是贮存和表达遗传信息，是物种及其个体之间区别和联系的最本质生物学特征。

基因组学（genomics）：是研究生物基因组的结构、功能及表达调控的一门科学。

调控序列（顺式作用元件）：一个基因的调控区和其结构基因位于同一个DNA分子的相邻部位，这种调节方式称为顺式调节，相应的DNA序列成为顺式作用元件。

（1）启动子：RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。（2）增强子：能强化转录起始的一段DNA序列。（3）沉默子（4）终止子。

反式作用因子：通过识别或结合顺式作用元件上的核心序列从而参与调控基因转录的蛋白质。也称转录因子。

原核生物基因组结构特点:

1. 具有类核结构

2. 以操纵子为功能单位/多顺反子mRNA

3. 结构基因大多为单拷贝，编码序列一般不重叠

4. 结构基因大多没有内含子

5. 非编码序列比例约为一半

6. 含可移动 DNA 序列

操纵子（operon）

?操纵子是原核生物的一段DNA序列，由几个串联排列的功能相关的结构基因，加上

调节序列组成的一个完整的连续的功能单位。

?操纵子结构通常与启动子区域有部分重叠，可通过代谢物与调节蛋白相互作用而激

活或抑制基因转录，这是原核生物最常见的转录调节方式。

真核生物基因组结构特点

1. 基因组庞大，为线状双链DNA

2. 断裂基因

3. 非编码区与单顺反子

4. 大量重复序列

5. 基因家族与假基因

断裂基因（split gene）:真核生物结构基因由外显子与内含子间隔排列，内含子在转录后被剪切掉。

基因家族（multi gene family）：是来源相同，结构相似，功能相关的一组基因，由某一共同祖先基因经重复和突变产生。

假基因（pseudogene）：与具正常功能基因序列相似，但无转录功能或其转录产物无功能的基因。

人类基因组计划（HGP）

HGP的主要目标:

?遗传图谱：基因或DNA标记在染色体的相对位置与遗传距离。

?物理图谱：一级结构上两个DNA片段之间的实际距离。

?序列图谱：基因组DNA的全部核苷酸序列。

?转录图谱：正常或受控条件全基因表达的时空图。

HGP的意义:

?鉴定人类全部基因，推动生物技术发展。

?理解疾病与基因的关系。

?推动模式生物研究。

?促进多学科发展与交叉融合。

不同生物基因组结构特点：

蛋白质组学（proteomics）：阐明生物体各种生物基因组在细胞中表达的全部蛋白质的表达模式及功能模式的学科。

第二章 PCR、核酸杂交、基因芯片

PCR基本原理：以待扩增的DNA为模板，以一对分别与模板互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶作用下，以dNTP为底物，按照半保留复制的原理，通过变性、退火、延伸三个步骤完成新的DNA合成，并反复重复这一过程。

PCR反应步骤：

高温变性：94℃获单链模板

低温退火：55℃引物结合单链模板

适温延伸：72℃ DNA新链合成

PCR反应体系：DNA 模板、引物（决定PCR反应特异性）、耐热DNA聚合酶、dNTP、缓冲体系一、二价阳离子

PCR与DNA复制的比较：

相同点：

?DNA合成反应

?DNA聚合酶参与

?需要引物

?4种dNTP为原料

不同点：

?体外反应

?仅合成特定DNA片段（由1对引物限定）

?变温条件下进行

?仅一种耐热的DNA聚合酶参与

?DNA引物

?循环多次

PCR反应体系的优化：特异性、有效性、忠实性

1、DNA聚合酶：耐高温、保真性、激活剂

2、模板DNA：种类、用量、质量

3、dNTP: 浓度一致、稳定

4、DNA引物：决定PCR扩增产物的特异性和长度。

引物设计一般遵循的原则：长度；碱基随机分布；避免引物间、引物自身互补；引物的3’端不能修饰、不应错配；两条引物之间退火温度不大于5 oC。

PCR技术的应用

1) 基因克隆

2) 基因检测

(1) PCR产物的限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP)

基因突变会导致基因序列中产生新的限制性核酸内切酶位点或使原有限制性核酸内切酶位点消失。

因此，突变基因经相应的限制性核酸内切酶水解后，其电泳条带的数量和大小就会发生改变，根据这些改变可以判断突变是否存在，即限制性片段长度多态性技术。

(2) PCR产物的单链构象多态性分析 (PCR-SSCP)

?基于单链DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链DNA由于碱基组成或排列顺序不同，形成不同的构象。

?利用PCR扩增目的基因片段，通过变性成为单链，然后进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，单个核苷酸的改变会造成单链DNA片段构象的改变，其迁移率随之改变，从而检测基因的突变。

(3) PCR产物的等位基因特异性寡核苷酸探针杂交 (PCR-ASO)

采用PCR扩增受检者基因的目标片段，并与相应的ASO探针杂交。

针对已知突变位点的基因，设计一对寡核苷酸探针，其中一条为野生型探针（N），与正常序列互补，另一个为突变型探针（M），突变碱基应位于探针的中央，与突变序列互补。PCR衍生技术

（一）巢式PCR

（二）逆转录PCR (RT-PCR)

先将RNA用反转录酶反转录成cDNA，然后再加入特异引物对目标片段进行扩增，扩增产物的分析与普通PCR类似。

反转录酶：AMV和MoMLV反转录酶

反转录引物：随机引物、Oligo (dT)、特异性引物

用途：检测基因表达水平；检测RNA病毒

（三）多重PCR

在同一反应中采用多对引物同时扩增几个不同的DNA片段的方法。

优点：多个致病基因同时检测。

（四）定量PCR

实时荧光定量PCR

在PCR反应体系中加入反应PCR扩增进程的荧光染料或荧光标记探针，实时监测PCR过程中荧光信号的变化，通过参照基因或标准曲线对起始模板DNA的浓度进行精确定量分析。

实时荧光定量PCR原理

?如何对起始模板定量？

通过Ct值和标准曲线对起始模板进行定量分析

?三个基本概念：

扩增曲线、荧光阈值、Ct值

扩增曲线图：

横坐标：扩增循环数（Cycle）；

纵坐标：荧光强度

?荧光染料：SYBR Green I

核酸分子杂交

原理：核酸变性与复性

核酸分子杂交技术

用标记的已知序列的核酸片段（探针）来检测样品中未知核酸序列（形成异源杂交体），再经显影或显色的方法，将结合的核酸的位置或大小显示出来。

核酸探针（probe）

能与待测的靶核酸序列特异性互补杂交，杂交后又能被特殊方法检测的已知被标记的核酸片段。

核酸探针类型

?DNA探针：基因组DNA探针；cDNA探针；寡核苷酸探针

?RNA探针

核酸探针标记物

?放射性标记物：32P, 3H ,35S

灵敏度高; 但存在环境污染和半衰期短等缺点。

?非放射性标记物: 生物素、光敏生物素、地高辛、酶、荧光素等，但灵敏度和特异性较放射性标记物差。

核酸分子杂交技术应用

?固相杂交

印迹杂交 (blotting hybridization)：Southern blot、Northern blot

斑点杂交 (dot hybridization)

原位杂交 (in situ hybridization)

?液相杂交

印迹杂交的一般步骤：

1. 样品制备和电泳分离

2. 样品变性处理、转印

3. 探针制备和标记

4. 预杂交与杂交

5. 洗去未杂交的游离探针

6. 检测杂交信号

7. 结果判断与分析

印迹技术（blotting）

将核酸或蛋白质等生物大分子通过一定方式转移并固定到固相支持物上以便进一步分析的方法。

1. Southern blot (DNA检测)

通过核酸内切酶降解样品中DNA，再经凝胶电泳分离，将分离后的DNA片段从凝胶转移到吸附薄膜上并固定，随后用标记的探针进行杂交，以检测目的DNA。

步骤：1.DNA片段分离变性 2.DNA片段转移与固定 3.杂交反应 4.杂交信号检测

2. Northern blot（RNA检测）

RNA经变性凝胶电泳分离后，转移固定到固相支持物上，与标记的探针杂交并检测。（分析基因的转录和mRNA分子的大小）。

3. Western blot（蛋白检测）

基本原理：通过电泳区分不同的蛋白组分，并转移至固相支持物，通过特异性抗体作为探针，对靶蛋白（抗原）进行检测。也称为免疫印迹（immunoblotting）。

主要用途：1. 鉴定蛋白质表达情况 2. 比较不同样本中特定蛋白质相对表达量 3. 分析蛋白-蛋白间相互作用(蛋白质组学研究)

三种印迹技术的共同点

基本步骤相同（电泳、转印、杂交反应、杂交信号检测）

荧光原位杂交

采用荧光标记的探针与待测样本中的核酸进行原位杂交，从而检测核酸序列在组织或细胞中的定性、定位及相对定量。

遗传性疾病的产前诊断

荧光原位杂交筛选21三体（间期）

FISH检测白血病细胞BCR-ABL融合基因

荧光原位杂交检测上皮细胞中人乳头瘤病毒的感染

基因芯片(gene chip)

?将大量探针有序排列于固相支持物表面或直接在固相支持物上原位合成探针，然后与标记的待测核酸样品进行杂交，通过对探针分子杂交信号强度的分析来获知样品中相应分子的数量和序列信息。

?由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为基因芯片。

蛋白质芯片

?高通量的蛋白质功能分析技术，用于分析蛋白质表达谱，研究蛋白质间或蛋白质与其他分子间相互作用，筛选药物作用蛋白靶点。

?基本原理：将各种蛋白质有序地固定于载体上成为检测用的芯片，然后用标记的蛋白质或其他成分与芯片作用，洗去未结合的成分，再利用扫描技术测定芯片上各点的荧光强度，来分析蛋白质间或蛋白质与其他分子之间的相互作用关系。

三、基因克隆、表达和调控

基因克隆五个基本部分：

一、目的DNA的分离获取（分）；

二、载体的选择与限制酶切（切）；

三、目的DNA与载体连接（连）；

四、重组DNA转入受体细胞（转）；

五、重组体的筛选与鉴定（筛）。

（一）目的基因的获得

①化学合成

②基因组文库与cDNA文库：包含全面的基因和mRNA信息

基因组文库（genomic library，G-文库）

是指含有某种生物全部基因随机片段的重组DNA克隆群。

cDNA文库（cDNA library，C-文库）

以细胞全部mRNA经逆转录，制备出全套的cDNA克隆集合。

③利用PCR及RT-PCR扩增技术合成序列已知的基因

④其它技术

（二）目的基因与表达载体的重组

载体（vector）：携带外源DNA进入宿主细胞进行扩增或表达的工具。

按功能分：克隆载体；表达载体

多克隆位点（MCS）：一段人工合成的DNA序列，含有密集排列的多种限制性内切酶识别序列，以便不同来源的外源DNA片段插入载体。

1.限制性核酸内切酶

识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的一类核酸内切酶，为原核生物所特有。

分类：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类

基因工程技术中常用的是Ⅱ类（分子剪刀），

识别位点与切割位点序列特异，且在识别序列内切割

2. DNA连接酶（基因工程的“缝纫针”）

一种封闭DNA链上缺口的酶，催化DNA链相邻的3’羟基与5’磷酸基团生成磷酸二酯键。

3、目的基因与载体重组及其策略

(一) 粘性末端连接

缺点：载体自身环化；双向插入；

碱性磷酸酶（ALP）催化去除DNA、RNA或dNTP上的 5 -磷酸基团。

主要用途有：防止载体DNA自身环化，提高重组效率。

（二）定向克隆：使目的基因按正确方向插入载体中的方法。

定向克隆的两种连接方式：粘－粘连接：粘－平连接

（三）人工接头(linker)

化学合成的含一种或多种限制酶切位点的平端双链寡核苷酸片段。

本法适用于在载体和目的基因上没有相同的限制酶切位点

（四）同聚物加尾连接

本法适用于在载体和目的基因上没有相同的限制酶切位点

（五） PCR引入粘性末端后连接

可在PCR扩增目的基因时将限制性酶切作用位点人为添加到引物的5’末端。

以目的基因为模板，经PCR扩增获得带有引物序列的目的基因，用相应的限制性核酸内切酶切割后，产生粘性末端，随后与载体（也经相应的限制性核酸内切酶切割）进行粘性末端连接。

基因克隆中常用的工具酶

1、限制性核酸内切酶——用于切割DNA片段

2、DNA连接酶——用于催化DNA片段连接

3、碱性磷酸酶——去除核酸分子末端的磷酸基团

4、末端转移酶——介导DNA末端加尾，产生限制酶切作用位点

5、DNA聚合酶——常用于PCR扩增DNA

6、逆转录酶——以RNA为模板合成cDNA

转化：将重组质粒导入受体细胞

转染或称为转导：将噬菌体重组子或病毒重组子导入受体细胞

质粒：是在细菌内除染色体之外的能自主复制到的共价闭合环状双链DNA，随着细菌分裂能够稳定地把自己的遗传特性传递给子细胞。

重组体的筛选和鉴定

阳性克隆：含有目的基因的宿主细胞克隆。

筛选出含有重组DNA(目的基因+载体)的克隆

阳性克隆的筛选方法

（一）针对载体携带的筛选标记

根据遗传表型进行筛选

?抗生素抗性筛选

?遗传标记补救筛选

?噬菌斑筛选

（二）针对重组体结构和表达产物筛选

基因工程技术的应用：

1. 制备基因组文库、cDNA文库、核酸探针、基因工程药物、疫苗及抗体

2. 制造转基因动植物（改良生物性状）

3. 基因诊断、基因治疗

基因工程生产胰岛素药物流程：

1，目的基因的获取：通过各种手段（基因组文库，化学合成，PCR技术等）获取胰岛素基因。

2，基因表达载体的构建：用限制酶切割质粒和目的基因（胰岛素基因）使产生不同的粘性末端，再用DNA连接酶使质粒和胰岛素基因连接形成重组质粒。

3，将重组质粒导入受体细胞（如大肠杆菌，用感受态细胞法即CaCl2转化法），筛选阳性重组体。

4，将含有胰岛素基因的阳性重组体在宿主细胞内进行诱导表达、检测、并纯化表达产物。RNA干扰：在生物体细胞内，双链RNA分子诱导同源 mRNA特异性降解，导致基因表达抑制，又称转录后基因沉默。

RNA干扰作用机制

（1）siRNA形成：dsRNA被Dicer酶剪切成siRNA

（2）RISC (RNA-induced silencing plex)形成

（3）RISC 活化：siRNA解旋成为单链，无活性的RISC转变成活性形式 (包含siRNA反义链)

（4）诱导靶mRNA降解：在siRNA反义链引导下，RISC识别并切割与siRNA反义链互补的靶mRNA

（5）dsRNA的再生成

细胞中存在两种RNA干扰现象：

siRNA (小干扰RNA)：21-23nt，由长dsRNA裂解而成的小片段，可诱导mRNA降解。siRNA 主要参与抵御外源性病毒核酸的侵染。

miRNA (微小RNA)：约22nt，由miRNA前体剪切而成，可抑制mRNA翻译。 miRNA主要

?基因治疗（基因失活性治疗）

（1）病毒感染性疾病：通过RNAi抑制 RNA病毒的复制

（2）基因过表达引起的疾病（如肿瘤）：siRNA药物

?基因功能研究（功能失活策略）

基因失活性治疗：

将特定的反义核酸（反义RNA、反义DNA）、核酶、siRNA、miRNA等导入细胞，在转录和翻译水平阻断某些基因的异常表达。

基因失活性治疗面临的问题：

1. 药物的稳定性

2. 药物的安全性

3. 药物的转运载体

基因靶向：利用同源重组原理对生物细胞特定的内源基因进行改造的技术。

基因敲入：外源功能基因与宿主基因组中的同源序列进行同源重组，插入到基因组中，从而在细胞内获得表达。

基因敲除：宿主基因组中特定功能靶基因的部分片段被同源的外源DNA片段替代，从而使靶基因失活

第七章药物基因组学

药物基因组学：是研究遗传变异与药物反应相互关系的一门学科，以提高药物的疗效及安全性为目标。

单核苷酸多态性 (SNP)：在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。SNP:是RFLP、STR之后的第三代遗传标记。

SNP特点：1. 最常见可遗传变异；2. 数量多分布广；3. 具有遗传稳定性；4. 具有二态性，易于自动化规模化分析；5. 可直接影响基因功能

SNP检测技术：1. PCR技术；2. 核酸杂交技术；3. 生物芯片技术；4. DNA测序技术。

单体型：位于一条染色体特定区域的一组相互关联，并倾向于以整体遗传给后代的单核苷酸多态组合。

遗传变异与药物应答

（一）基因多态性与药物代谢

（二）基因多态性与药物转运

（三）基因多态性与药物效应靶分子

基因分型指导临床用药

随着药物基因组学研究对多种基因多态性与药物应答关系的逐渐阐明，随着各种基因检测和基因分型技术的快速发展，特别在肿瘤、心血管疾病等的治疗方面，多种基因分型已经或正在走向临床，为临床个体化合理用药提供有益的参考信息。

肿瘤化疗药物 5-氟尿嘧啶（5-FU）通过干扰DNA合成发挥抗肿瘤作用。在二氢嘧啶脱氢酶（DPD）的作用下，被还原为5-氟尿二氢啶而失活。

高水平DPD活性：降低治疗效果，缩短生存期。缺乏DPD：5-FU治疗产生严重的毒副作用。5-FU用药之前进行DPD基因分析，指导给药方案

药物基因组学与药物研发

一、指导有效药物靶分子的发现和药物设计

（一）靶分子筛选和功能研究

（二）靶向药物的设计和开发

（三）靶分子诊断试剂研发

二、开创临床试验新模式

（一）指导临床试验设计和有效病例筛选

（二）加速新药研发进程；

（三）提高药物研发成功率。

三、药物审批与合理用药

（一）药物基因组学资料呈递

（二）药物标签与合理用药指导。

药物转录组学

反义药物：反义寡核苷酸药物，人工合成长度为10-30个碱基的DNA分子及其类似物，其可与靶mRNA 或靶DNA互补杂交，抑制或封闭致病靶基因的表达（包括诱导靶mRNA降解）。反义药物与传统药物的性质和作用对象明显不同:

1.新的化学物质：核酸（传统药物的化学本质？）

2. 新的药物受体：mRNA或DNA

3. 新的受体结合方式：碱基配对

4. 新的药物受体结合后反应：如RNA酶降解靶RNA

反义药物特异性更强！

药物蛋白质组学

蛋白质组学主要研究技术

1、蛋白质的分离：双向凝胶电泳技术

2、蛋白质的鉴定：生物质谱

3、蛋白质-蛋白质的相互作用：蛋白质芯片、酵母双杂交

药物蛋白质组学及应用

药物蛋白质组学：通过对比正常状态和病理状态的细胞或组织的蛋白质组表达差异，用于药物作用机制、药物不良反应的研究或药物治疗前后蛋白质表达状况的分析，以探讨药物类似物的结构与功能关系，发掘新的药物靶点。

应用：1.构建分子药理筛选模型：分子细胞、组织器官、整体动物水平

2.药物靶点的发现、验证和优化

3.药物作用机制研究

4.药物毒理机制研究

5.耐药机制研究

药学分子生物学题库

前四章 1.tRNA分子结构特征为(C) A.有密码环 B.3’端有多聚A C.有反密码环 D.3’端有C-C-U E.以上都不正确 2.关于2.原核生物启动子结构中,描述正确的是(C) A. –25bp处有Hogness盒 B.–10bp处有GC盒 C. –10bp处有Pribnow盒 D. –35bp处有CAA T盒 E.以上都不正确 3.关于蛋白质生物合成时肽链延伸,叙述不正确是(D ) A.核蛋白体沿着mRNA每移动一个密码子距离,合成一个肽键’ B.受大亚基上转肽酶的催化 C.活化的氨基酸进入大亚基A位

D .肽链延伸方向为C端→N端 E.以上都不正确 4.摆动配对是指( A ) A .反密码的第1位碱基 B.反密码的第2位碱 C.反密码的第3位碱基 D.密码的第1位碱基 E.以上都不正确 5.人类基因组大小(bp)为( B ) A. 3.5×108 B. 3.0×109 C. 2.0 ×109 D. 2.5×109 E.以上都不正确 6.以下有关转录叙述,错误的是(C ) A .DNA双链中指导RNA合成的链是模板链 B .DNA双链中不指导RNA合成的链是编码链 C.能转录RNA的DNA序列称为结构基因 D.染色体DNA双链仅一条链可转录 E.以上都不正确 7.与CAP位点结合的物质是(C )

A.RNA聚合酶 B.操纵子 C.分解(代谢)物基因激活蛋白 D.阻遏蛋白 E.以上都不正确 8.目前认为基因表达调控的主要环节是(C) A.基因活化 B.转录起始 C.转录后加工 D.翻译起始 E.以上都不正确 9.顺式作用元件是指(A ) A.基因的5’侧翼序列 B.基因的3’侧翼序列 C.基因的5’、3’侧翼序列D基因的5’、3’侧翼序列以外的序列 E.以上都不正确 10.反式作用因子是指(b)

药学分子生物学重点

药学分子生物学 绪论 基因诊断：应用分子生物学技术，检测人体某些基因结构或表达的变化，或检测病原体基因组在人体内的存在，从而达到诊断或监控疗效的目的 基因治疗：通过特定的分子生物学技术，关闭或降低异常表达的基因；或将正常的外源基因导入体内特定的靶细胞以弥补缺陷基因；或将某种特定基因导入体细胞表达一产生特定的蛋白质因子，实现对疾病的治疗作用 药物基因组学：研究遗传变异对药物效能和毒性的影响，开辟药物研发的领域、促进合理用药的发展、加强临床前及临床药理的研究并对药物经济学产生重要影响。 第一章核酸的分子结构、性质和功能 DNA双螺旋结构 DNA分子是由两条互补的多核苷酸链组成的。两条链以一定的空间距离，在同一轴上相互盘旋起来构成双螺旋结构。 DNA双链呈反向平行。一条链的走向从5’到3’，另一条链的走向从3’到5’。 A＝T，G≡C 各对碱基上下之间的距离为3.4?，每个螺距的距离34 ?，包括10对碱基。 ★中心法则 DNA是自身复制的模板 DNA通过转录将遗传信息传递给中间物质RNA RNA通过翻译将遗传信息表达为蛋白质 在某些病毒中，RNA可以自我复制，并且在某些病毒蛋白质合成中，RNA可以在逆转录酶的作用下合成DNA DNA的结构与功能 一级结构：DNA分子中脱氧核苷酸连接及其排列顺序，是物种间差异的根本原因 1为RNA和蛋白质一级结构编码的信息 2基因选择性表达的调控信息 二级结构：是指通过分子间相互作用形成的双链DNA或称为双螺旋DNA 三级结构：双螺旋DNA进一步扭曲盘绕则形成其三级结构，超螺旋是DNA三级结构的主要形式 三链DNA: DNA分子中的单链与双链相互作用形成的三链结构 1基因表达抑制物：选择性阻断靶基因，抑制其转录 2阻断序列专一性蛋白质的结合，影响DNA与蛋白质结合及DNA复制、转录 RNA的结构与功能 mRNA是蛋白质合成的直接模板，将细胞核内DNA的碱基顺序按互补配对原则，抄录并转送到胞质的核糖体，用以决定蛋白质合成的氨基酸序列 ★核内不均一RNA(hnRNA)：真核生物mRNA的原始转录物是分子量极大的前体，在核内加工过程中形成分子大小不等的中间产物，被称为hnRNA ★开放阅读框（ORF）：mRNA分子上从起始密码（AUG）开始到终止密码子结束这一段连续的核苷酸序列，即mRNA分子上的编码区。是一个特定蛋白质多肽链的编码序列

兽医动物药理学重点总结 完整版

药理学实验及作业第一部分：绪论及总论 1、药物：用于疾病治疗、预防或诊断的安全、有效和质量可控的化学物质。 2、毒物：对动物机体产生能损害作用的物质。 3、兽药：指用于预防、治疗、诊断动物疾病，以及有目的地调节动物生理机能的物质 4、药物利用度：指药物制剂被机体吸收的速率和吸收程度的一种度量。 5、药物的来源：药物可分为天然药物、合成药物和生物技术药物，天然药物包括植物、动物、矿物及微生物发酵产生的抗生素，合成药物包括各种人工合成的化学药物、抗菌药物等，生物技术制药即通过基因工程、细胞工程等分子生物学技术生产的药物。 6、剂型：这些药物的原料一般不能直接用于动物疾病的治疗或预防，必须进行加工，制成安全、稳定和便于应用的形式，称为药物剂型。 7、兽医药理学：是研究药物与动物机体之间相互作用规律的一门学科，是为临床合理用药、防治疾病提供基本理论的兽医基础学科。 8、药效学：研究药物对机体的作用规律，阐明药物防治疾病的原理，称为药效学。 9、药动学：研究机体对药物的处置过程，即药物在体内的吸收、分布、生物转化和排泄过程中药物浓度随时间变化的规律。 10、兴奋：机体在药物作用下，使机体器官、组织的生理、生化功能增强的效应。 11、抑制：机体在药物作用下，使机体器官、组织的生理、生化功能减弱的效应。 12、局部作用：药物在吸收进入血液以前在用药局部产生的作用。 13、吸收作用：药物经吸收进入全身循环后分布到作用部位而产生的作用，又称全身作用。 14、直接作用：药物对直接接触到的器官、组织、细胞的作用。 15、间接作用：由于机体的整体性，会对药物的直接作用产生反射性或生理性调节，即为药物的间接作用。 16、药物作用的选择性：指药物在一定剂量范围内只作用于某些组织和器官，对其他组织和器官没有作用。 17、对因治疗：用药目的在于消除原发致病因子，彻底治愈疾病。 18、对症治疗：用药目的在于改善症状，称对症治疗，或称治标。 19、药物的不良反应：与用药目的无关的或对动物产生损害的作用。包括副作用、毒性作用、、变态反应、继发性反应、后遗效应、停药反应。 20、副作用：药物在常用治疗剂量时产生的与治疗无关的作用或危害不大的不良反应。 21、毒性作用：是有用药剂量过大或用药时间过长对机体产生的有害作用。 22、变态反应：又称过敏反应，药物和血浆蛋白或组织蛋白结合后作为抗原而引起的机体体液性或细胞性的免疫反应，并对机体造成一定程度上的损害。 23、药物的构效关系：药物的药理作用与其化学结构之间的关系。 24、药物的量效关系：定量分析与阐明药物的剂量与效应之间的变化规律 25、LD50：引起半数动物死亡的量称半数致死量。 26、ED50：对50%个体有效的药物剂量称半数有效量。 27、治疗指数：药物LD50与ED50的比值称为治疗指数。 28、安全范围ED95～LD5之间的距离或95%有效量～5%致死量 29、受体：对特定的生物活性物质具有识别能力并可选择性结合的生物大分子。 30、受体的功能：与配体结合、传递信息。 31、受体的特性：饱和性、可逆性、特异性、灵敏性、多样性。 32、受体的调节：增敏调节和脱敏调节 33、占领学说：药物与受体间的相互作用是可逆的；药效与被占领受体的数量成正比，当全部受体被占领时，就会产生最大药理效应；药物浓度与效应关系服从定量作用定律；药

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前四章 1.tRNA 分子结构特征为（C） A.有密码环 B.3 ’端有多聚 A C.有反密码环 D.3 ’端有 C-C-U E.以上都不正确 2.关于 2.原核生物启动子结构中，描述正确的是（ C ） A. –25bp 处有 Hogness盒 B.–10bp 处有 GC 盒 C. –10bp 处有 Pribnow 盒 D. –35bp 处有 CAA T 盒 E.以上都不正确 3.关于蛋白质生物合成时肽链延伸，叙述不正确是（ D ） A.核蛋白体沿着mRNA 每移动一个密码子距离，合成一个肽键’ B.受大亚基上转肽酶的催化 C.活化的氨基酸进入大亚基 A 位 D . 肽链延伸方向为 C 端→N端 E.以上都不正确 4.摆动配对是指（A） A .反密码的第 1 位碱基 B.反密码的第 2 位碱 C.反密码的第 3 位碱基 D.密码的第 1 位碱基 E.以上都不正确 5.人类基因组大小（ bp）为（B） A. 3.5 10×8 10× 99 D. 2.510× 9 E.以上都不正确B. 3.0 C. 2.010× 6.以下有关转录叙述，错误的是（C） A .DNA 双链中指导 RNA 合成的链是模板链 B .DNA 双链中不指导 RNA 合成的链是编码链 C.能转录 RNA 的 DNA 序列称为结构基因 D.染色体 DNA 双链仅一条链可转录 E.以上都不正确 7.与 CAP 位点结合的物质是（ C） A.RNA 聚合酶 B.操纵子 C.分解（代谢）物基因激活蛋白 D.阻遏蛋白 E.以上都不正确 8.目前认为基因表达调控的主要环节是（C） A.基因活化 B.转录起始 C.转录后加工 D.翻译起始 E.以上都不正确 9.顺式作用元件是指（A） A.基因的 5’侧翼序列 B.基因的 3’侧翼序列 C.基因的 5’、3’侧翼序列 D 基因的 5’、3’侧翼序列以外的序列 E.以上都不正确 10.反式作用因子是指（b） A.具有激活功能的调节蛋白 B. 具有抑制功能的调节蛋白 C.对自身基因具有激活功能的调节蛋白 D.对另一基因具有功能的调节蛋白 E.以上都不正确 11.cAMP 与 CAP 结合， CAP 介导正性调节发生在（ C ） A.有葡萄糖及cAMP 较高时 B.有葡萄糖及cAMP 较低时 C.没有葡萄糖及cAMP 较高时 D. 没有葡萄糖及cAMP 较低时 E.以上都不正确 12.乳糖操纵子上Z、 Y 、 A 基因产物是（ B ）

药学分子生物学

绪论 一、分子生物学的发展简史 （一）孕育阶段（1820~1950年代）； 1、达尔文进化论 2、遗传学规律的诞生 3、遗传因子在哪里？ 4、生命的遗传物质是DNA 5、RNA也是重要的遗传物质 （二）创立阶段（1950~1970年代）； 1、DNA双螺旋结构的确立 2、遗传信息如何传递—中心法则 3、DNA如何复制—半保留复制 4、基因表达如何调控—操纵子学说 5、DNA如何编码蛋白质—密码子（三）发展阶段（1970年代以后）； 1、逆转录酶的发现 2、DNA测序技术的诞生 3、PCR技术的诞生 4、基因工程的诞生 5、人类基因组计划 6、克隆技术的旋风 7、诱导性多能干细胞（iPS） 8、microRNA 9、芯片技术 10、组学：基因组学，转录组学，蛋白质组学，代谢组学 11、CRISPR/Cas系统 二、分子生物学在医药科学中的应用（一）发病机制 1、遗传性疾病：寻找突变基因 2、病原微生物：从分子水平确定其致病机理 3、肿瘤、肥胖等疾病 （二）疾病诊断 PCR技术、核酸杂交、基因芯片等（三）疾病治疗 基因治疗、试管婴儿、三亲婴儿（四）法医学 身份鉴定、亲子鉴定等 （五）医药工业 1、DNA重组技术与新药研究 （1）小分子代谢产物（维生素、氨基酸、抗生素、染料、生物多聚体的前体等） （2）亚单位疫苗、合成肽疫苗（3）细胞因子、血液因子、激素（4）糖（糖肽＋有机小分子化合物）、核酸（反义核酸、肽核酸）、脂类等 （5）新型反应器（动物、植物等）2、药物基因组学、药物蛋白质组学与现代药物研究 （1）药物疗效与基因多态性相关，个体差异大（如非典型抗精神病药氯氮平） （2）发现新的靶基因 （3）在蛋白质组水平上研究发病机理 3、中医药 （1）对中医理论的解释 （2）中药：种质鉴定、育种、新的活性成分提取技术 三、“药学分子生物学”教学大纲绪论、细胞 核酸的分子结构、性质和功能 染色质、染色体、基因和基因组 可移动的遗传因子和染色体外遗传因子 DNA的复制、突变、损伤和修复 转录、转录后加工 蛋白质的生物合成－翻译及翻译后过程 基因表达的调控 基因编辑 外源基因表达与基因工程药物 药物生物信息学基础

药学分子生物学题库

前四章 1.tRNA分子结构特征为（C） A.有密码环 B.3’端有多聚A C.有反密码环 D.3’端有C-C-U E.以上都不正确 2.关于2.原核生物启动子结构中，描述正确的是（C） A. –25bp处有Hogness盒 B.–10bp处有GC盒 C. –10bp处有Pribnow盒 D. –35bp处有CAAT盒 E.以上都不正确 3.关于蛋白质生物合成时肽链延伸，叙述不正确是（D ） A.核蛋白体沿着mRNA每移动一个密码子距离，合成一个肽键’ B.受大亚基上转肽酶的催化 C.活化的氨基酸进入大亚基A位 D .肽链延伸方向为C端→N端 E.以上都不正确 4.摆动配对是指（ A ） A .反密码的第1位碱基 B.反密码的第2位碱 C.反密码的第3位碱基 D.密码的第1位碱基 E.以上都不正确 5.人类基因组大小（bp）为（B ） A. 3.5×108 B. 3.0×109 C. 2.0 ×109 D. 2.5×109 E.以上都不正确 6.以下有关转录叙述，错误的是（C ） A .DNA双链中指导RNA合成的链是模板链 B .DNA双链中不指导RNA合成的链是编码链 C.能转录RNA的DNA序列称为结构基因 D.染色体DNA双链仅一条链可转录 E.以上都不正确 7.与CAP位点结合的物质是（C ）

A.RNA聚合酶 B.操纵子 C.分解（代谢）物基因激活蛋白 D.阻遏蛋白 E.以上都不正确 8.目前认为基因表达调控的主要环节是（C） A.基因活化 B.转录起始 C.转录后加工 D.翻译起始 E.以上都不正确 9.顺式作用元件是指（A ） A.基因的5’侧翼序列 B.基因的3’侧翼序列 C.基因的5’、3’侧翼序列D基因的5’、3’侧翼序列以外的序列 E.以上都不正确 10.反式作用因子是指（b） A.具有激活功能的调节蛋白 B.具有抑制功能的调节蛋白 C.对自身基因具有激活功能的调节蛋白 D.对另一基因具有功能的调节蛋白 E.以上都不正确 11.cAMP与CAP结合，CAP介导正性调节发生在（C ） A.有葡萄糖及cAMP较高时 B.有葡萄糖及cAMP较低时 C.没有葡萄糖及cAMP较高时 D.没有葡萄糖及cAMP较低时 E.以上都不正确

生药学重点 最全

第一章：生药的分类和记载 药物：凡用于预防、治疗、诊断人类的疾病，并规定有适应症、用法和用量的物质称为药物。 生药：来源于天然的、未经加工或只经简单加工的植物、动物和矿物类药材。 生药拉丁名组成：来自动植物学名的词/词组+药用部位 生药学：是研究生药的基源、鉴定、有效成分、生产、采制、品质评价及资源可持续开发利用的科学。 中药：指中医用以治疗的药物，是根据中医学理论和临床经验应用于医疗保健的药材。 有效成分：有显著生理活性和药理作用，在临床上有一定应用价值的成分。包括生物碱、苷类、挥发油等。包括中药材、中药汤剂、中成药。 道地药材：指来源于特定产区的货真质优的生药，是中药材质量控制的一项独具特色的综合判别标准的体现。 生药学：是应用本草学、植物学、动物学、化学（包括植物化学、药物分析化学、生物化学等）、药理学、中医学、临床医学和分子生物学等学科的理论知识和现代科学技术来研究生药的基源、鉴定、有效成分、生产、采制、品质评价及资源可持续性开发利用等的一门学科。 本草纲目——作者：李时珍（1518—1593）；成书年代—明万历二十四年（1596）；分52卷，列为16部，共载药1892种，方11096条。 第二章：生药的化学成分及其生物合成 糖类的鉴别方法： (1)Fehling 试验：试剂：Fehling试液（碱性酒石酸酮试液甲、乙，临用时等量混合）结果：产生砖红色沉淀C6H12O6+Cu(OH)2→C6H12O7+Cu2O↓检测化合物类型：还原性糖类，非还原性多糖需水解后呈阳性反应； （2）糠醛(酚醛缩合)反应，Molish反应是糖的检识反应，也是苷类的检识反应。特征：糖或苷类遇浓硫酸/α-萘酚试剂将呈紫色环于界面上。反应机理：在浓硫酸作用下，苷分子中糖内部脱水成糠醛衍生物，与酚类试剂缩合形成有色物。 皂苷类的鉴别方法： 1、泡沫试验取生药粉末1g，加水10ml，煮沸10min后过滤，滤液在试管中强烈振摇，如产生持久性泡沫（15min以上）为阳性反应。（中性皂苷的水溶液在碱性溶液中可形成较稳定的泡沫，借此可与酸性皂苷区别。） 2、浓硫酸-醋酐反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-醋酐（1：20）数滴。三萜皂苷：红或紫红。甾体皂苷：蓝绿色。 3、三氯醋酸反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯醋酸乙醇溶液。三萜皂苷：加热至100 ℃，生成红色渐变为紫色。甾体皂苷：加热至60 ℃，发生变化。 生物碱：是一类存在于天然生物界中含氮原子的碱性有机化合物。 生物碱的鉴别方法：1）显色反应2）沉淀反应碘化铋钾-橘红色碘-碘化钾-棕红色碘化汞钾-白色或黄白色硅钨酸-灰白色磷钼酸-鲜黄或棕黄苦味酸-淡黄

药学分子生物学名词解释

名词解释 1.灭菌采用强烈的理 化因素使任何物体内 外部的一切微生物永 远丧失其生长繁殖能 力的措施，称为灭菌。 2.抗原漂移:指由基因 组发生突变导致抗原 的小幅度变异，不产 生新的亚型，属于量 变，没有质的变化。 多引起流感的中小型 流行。 3.补体系统是一组存 在于人和动物体液中 及细胞表面，经活化 后具有生物活性，可 介导免疫和炎症反应 的蛋白，也称为补体 系统。 4.主要组织相容性复合 体是所有生物相容 复合体抗原的一种统 称，表示由MHC 基因 家族编码而成的分子， 位于细胞表面，主要 功能是绑定由病原体 衍生的肽链，在细胞 表面显示出病原体， 以便于T-细胞的识别 并执行一系列免疫功 能(例如杀死已被病 菌感染的细胞，激活 巨噬细胞杀死体细胞 内细菌，激活B细胞 产生抗体等)。 简答题 1.简述病毒的复制周期 分为哪几个阶段：1. 吸附. 2.侵入. 3.脱 壳.4.病毒大分子的 合成.5. 装配和释放。 2.简述金黄色葡萄球菌 致病物质：a.溶血毒 素b.杀白细胞素c.血 浆凝固酶d.脱氧核糖 核酸酶e.肠毒素 3.简述细菌合成代谢产 物：1热原质 2毒素 和侵袭性酶3色素4 抗生素5细菌素6维 生素 4.简述干扰素的分类及 生物学作用：干扰素 分为α、β、γ干扰 素三种类型，作用是 抑制细胞的增殖，提 高机体免疫功能，，包 括增强巨噬细胞的吞 噬功能，增强细胞毒 性淋巴细胞对靶细胞 和自然杀伤细胞的功 能。 5.简述Ig的基本结构： Y型的四肽链结构，即 两条完全相同的重链 和两条完全相同的轻 链以二硫键连接而成。 6.影响抗原免疫原性的 因素有哪些： 1.异物性（主要） 2.机体因素 3.免疫方式 4.理化性质 分子大小 化学组成 抗原表位的易接 近性 物理因素 7.试述MHC的主要生物学 功能：MHC分子的生物学 功能 MHC抗原最初是作为移 植抗原而被发现的，是引起 移植排斥的主要抗原系统。 这种抗原不合，即可引起受 体的免疫应答，排斥移植的 供体组织。MHC分子也参予 免疫调节作用。 MHC分子在T细胞自身 耐受的形成和T细胞库的 产生中都起着重要作用。 8.试比较人工自动免疫和 人工被动免疫的特点：人工 自动免疫是将疫苗、菌苗或 类毒素接种于人体，使机体 产生特异免疫力，主要用于 预防接种。这种免疫力出现 较慢，一般接种后2-4周才 产生，但能维持半年到数年， 接种次数一般1-3次。常用 的接种有卡介苗、麻疹疫苗、 小儿麻痹糖丸等。人工被 动免疫是当机体感染以后， 注射含有特异性抗体的免 疫血清等免疫制剂，使机体 立即获得特异性免疫，由于 这些免疫物质不是病人自 身产生的，所有免疫作用虽 快，但维持时间只有2-3周， 因此，人工被动免疫常用于 紧急预防和治疗。常有的： 破伤风抗毒素、胎盘球蛋白、 丙种球蛋白、干扰素、胸腺 素等。 论述题 以TD抗原为例，CD8﹢Tc 细胞介导的免疫应答基本 过程 CD8+Tc细胞对TD抗原产生 免疫应答基本过程：（1） TD抗原的提呈：诱导 CD8+Tc细胞发生免疫应答 的TD抗原主要是病毒感染 的细胞或肿瘤细胞（二者为 广义的APC，也是靶细胞） 内产生，这些病毒TD抗原 或肿瘤TD抗原产生后被细 胞内蛋白酶体LMP降解成 为小分子抗原肽，经TAP转 运至内质网，并与MHCI类 分子结合形成抗原肽/MHCI 类分子复合物表达在APC 的表面，供CD8+Tc的TCR 识别。（2）CD8+Tc细胞 的活化主要有两种方式： 一种为Th细胞非依赖性， 如病毒感染的DC，由于其 高表达共刺激分子，可直接 刺激CD8+T细胞合成IL-2， 促使CD8+T细胞自身增殖 并分化为细胞毒T细胞（Tc 细胞），无需Th细胞辅助； 另一种方式为Th细胞依赖 性，如病毒抗原、肿瘤抗原、 同种异体MHC抗原从宿主 细胞表面脱落，以可溶性抗 原形式被APC摄取，并在胞 内分别与MHC-I类或 MHC-II类分子复合物，表 达于APC表面。CD4+T和 CD8+T细胞识别同一APC所 提呈的特异性抗原，此时， CD4+T被激活后可产生并分 泌IL-2，辅助CD8+T活化、 增殖和分化，或者，活化的 CD4+T细胞表达CD40L，可 促进APC细胞表达B7等共 刺激分子，促进CD8+T完全 活化，使之产生IL-2，引 起自身增殖分化。（3） CD8+Tc细胞介导的免疫效 应是细胞毒作用。其基本过 程：首先是效-靶细胞结合， 效应细胞（CD8+Tc）在与靶 细胞接触面形成免疫突触， 进而导致效应细胞内细胞 骨架系统、高尔基复合体及 胞浆颗粒等极化，均向效- 靶接触面重新排列和分布， 然后，进行致死性攻击。 CD8+Tc杀伤靶细胞的机制 是一方面活化的CTL脱颗 粒，释放穿孔素和颗粒酶， 靶细胞坏死或凋亡另一方 面活化的CTL细胞高表达 FasL,通过Fas-Fasl途径 引起靶细胞凋亡。

药用分子生物学考试要点

分子生物学 基因治疗：指把目的基因导入人体，通过在特地靶细胞中表达该细胞本来不表达或低表达、或已异常突变而不表达的基因，或采用特定方式关闭、抑制异常表达基因，达到治疗疾病目的的治疗方法。 原癌基因：与癌基因同源、正常细胞内调控生长和分化的基因，变异后成为癌基因。 抑癌基因：一类存在于正常细胞内、调控细胞生长，具有潜在抑癌作用的基因。 癌基因：能使靶细胞发生恶性转化的基因。 细胞周期：指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。细胞凋亡：指细胞在一定的生理或病理条件下，受内在遗传机制的控制自动结束生命的过程。RNA干扰（RNAi）：一种由双链RNA诱发的基因沉默现象，在此过程中，与双链RNA有同源序列的mRNA被降解，从而抑制该基因的表达。 聚合酶链式反应（PCR）：在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸（dNTP）存在的条件下，由耐热DNA聚合酶在体外反复酶促合成双链DNA的反应。 分子杂交：异源互补的核苷酸序列通过碱基配对形成稳定的杂合双链DNA分子的过程。 基因：指携带有遗传信息的DNA或RNA序列，也称遗传因子，控制性状的基本遗传单位基因组：一个染色体组中所含的全部DNA为一个基因组。 蛋白质组：指在一种细胞内存在的全部蛋白质，包括基因组表达的蛋白质和修饰后的各种形式的蛋白质，是细胞内所有蛋白质的集合体。 基因芯片：将寡核苷酸、基因组DNA或互补DNA等有序地固定在固相载体的表面形成微阵列的生物芯片。 引物：是一小段单链DNA或RNA，作为DNA复制的起始点，在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链。 信号转导：细胞应答环境信号的过程表现为细胞内代谢过程发生相应改变，包括代谢物浓度、代谢速度、细胞生长、分化甚至衰老死亡速度等的改变，这种针对环境信号所发生的细胞应答过程称为信号传导。 探针：已知序列的标记单链DNA片段，用于检测与其互补的核酸序列。 基因敲除：将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的方法。常用同源重组的方法敲除目的基因，观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。 限制性片段多态：不少DNA多态性发生在限制性酶切酶识别切割位点上，酶解该DNA片段就会产生长度不同的片段，成为限制性片段长度多态性分析（RLFP）。 限制性内切酶：由细菌产生的一种能识别双链DNA中的特定序列，并以内切方式水解核酸链中磷酸二酯键的核酸内切酶，又叫切割酶或限制酶。（识别并切割特异双链DNA的核酸内切酶） 简答题： 1.从细胞周期调控的角度论述肿瘤的发生 细胞水平——细胞增殖、分化、凋亡发生异常，细胞总数失控，恶性生长造成。 增殖↑分化、凋亡↓生得过度，死亡失缺 基因水平------细胞周期（增殖、分化、凋亡）由两大类基因调控：原癌基因和抑癌基因。原癌基因↑抑癌基因↓ ?一些原癌基因产物就是Cyclin ?一些原癌基因产物诱导Cyclin表达 ?一些原癌基因产物调节CDK活性 ?一些原癌基因产物是Cyclin，CDK底物 ?作为CDKI：p15、p16、p21和p27

药学分子生物学

第一章基因与基因组 基因 (gene) ：是指合成有功能的蛋白质、多肽或RNA所需的全部DNA序列（除部分病毒RNA），是基因组的一个功能单位。 基因组（genome）：是指生物体一套完整的单倍体遗传信息的总和，包括所有基因和基因间的区域。 基因组的主要功能是贮存和表达遗传信息，是物种及其个体之间区别和联系的最本质生物学特征。 基因组学（genomics）：是研究生物基因组的结构、功能及表达调控的一门科学。 调控序列（顺式作用元件）：一个基因的调控区和其结构基因位于同一个DNA分子的相邻部位，这种调节方式称为顺式调节，相应的DNA序列成为顺式作用元件。 （1）启动子：RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。（2）增强子：能强化转录起始的一段DNA序列。（3）沉默子（4）终止子。 反式作用因子：通过识别或结合顺式作用元件上的核心序列从而参与调控基因转录的蛋白质。也称转录因子。 原核生物基因组结构特点: 1. 具有类核结构 2. 以操纵子为功能单位/多顺反子mRNA 3. 结构基因大多为单拷贝，编码序列一般不重叠 4. 结构基因大多没有内含子 5. 非编码序列比例约为一半 6. 含可移动 DNA 序列 操纵子（operon） ?操纵子是原核生物的一段DNA序列，由几个串联排列的功能相关的结构基因，加上 调节序列组成的一个完整的连续的功能单位。 ?操纵子结构通常与启动子区域有部分重叠，可通过代谢物与调节蛋白相互作用而激 活或抑制基因转录，这是原核生物最常见的转录调节方式。 真核生物基因组结构特点 1. 基因组庞大，为线状双链DNA 2. 断裂基因 3. 非编码区与单顺反子 4. 大量重复序列 5. 基因家族与假基因 断裂基因（split gene）:真核生物结构基因由外显子与内含子间隔排列，内含子在转录后被剪切掉。 基因家族（multi gene family）：是来源相同，结构相似，功能相关的一组基因，由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 假基因（pseudogene）：与具正常功能基因序列相似，但无转录功能或其转录产物无功能的基因。 人类基因组计划（HGP） HGP的主要目标: ?遗传图谱：基因或DNA标记在染色体的相对位置与遗传距离。 ?物理图谱：一级结构上两个DNA片段之间的实际距离。 ?序列图谱：基因组DNA的全部核苷酸序列。 ?转录图谱：正常或受控条件全基因表达的时空图。 HGP的意义: ?鉴定人类全部基因，推动生物技术发展。 ?理解疾病与基因的关系。 ?推动模式生物研究。 ?促进多学科发展与交叉融合。 不同生物基因组结构特点：

兽医动物药理学重点总结-完整版

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药理学实验及作业第一部分：绪论及总论 1、药物：用于疾病治疗、预防或诊断的安全、有效和质量可控的化学物质。 2、毒物：对动物机体产生能损害作用的物质。 3、兽药：指用于预防、治疗、诊断动物疾病，以及有目的地调节动物生理机能的物质 4、药物利用度：指药物制剂被机体吸收的速率和吸收程度的一种度量。 5、药物的来源：药物可分为天然药物、合成药物和生物技术药物，天然药物包括植物、动物、矿物及微生物发酵产生的抗生素，合成药物包括各种人工合成的化学药物、抗菌药物等，生物技术制药即通过基因工程、细胞工程等分子生物学技术生产的药物。 6、剂型：这些药物的原料一般不能直接用于动物疾病的治疗或预防，必须进行加工，制成安全、稳定和便于应用的形式，称为药物剂型。 7、兽医药理学：是研究药物与动物机体之间相互作用规律的一门学科，是为临床合理用药、防治疾病提供基本理论的兽医基础学科。 8、药效学：研究药物对机体的作用规律，阐明

药物防治疾病的原理，称为药效学。 9、药动学：研究机体对药物的处置过程，即药物在体内的吸收、分布、生物转化和排泄过程中药物浓度随时间变化的规律。 10、兴奋：机体在药物作用下，使机体器官、组织的生理、生化功能增强的效应。 11、抑制：机体在药物作用下，使机体器官、组织的生理、生化功能减弱的效应。 12、局部作用：药物在吸收进入血液以前在用药局部产生的作用。 13、吸收作用：药物经吸收进入全身循环后分布到作用部位而产生的作用，又称全身作用。14、直接作用：药物对直接接触到的器官、组织、细胞的作用。 15、间接作用：由于机体的整体性，会对药物的直接作用产生反射性或生理性调节，即为药物的间接作用。 16、药物作用的选择性：指药物在一定剂量范围内只作用于某些组织和器官，对其他组织和器官没有作用。 17、对因治疗：用药目的在于消除原发致病因子，彻底治愈疾病。

药学分子生物学重点

绪论 分子生物学( ）:是在分子水平研究生命现象的科学，是现代生命 科学的共同语言。 生命分子基础，从而探讨生命的奥秘。 药学分子生物学( )：由于分子生物学的新理论、新技术渗入到药学研究领域，从而使药物学研究以化学、药学的培养模式转化为以生命科学、药学和化学相结合的新药模式。 分子生物学的主要研究对象：核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及相互作用 分子生物学在医药工业中的应用： 1、重组技术与新药研究 2、药物基因组学、药物蛋白质组学与现代药物研究 3、药物蛋白质组学是基因、蛋白质、疾病三者相连的桥 梁科学 第一章核酸的分子结构、性质和功能 核酸的基本结构（重点掌握）：磷酸 核苷碱基 戊糖 引起构象改变的因素： 核苷酸顺序、碱基组成、盐的种类、相对湿度。 双螺旋结构有利氢键不利疏水力

稳定性的影响：碱基堆积力静电斥力 :遗传信息 真核生物的结构: 5'帽子—5’非编码区—编码区— 3’非编码区—3’ 原核生物的结构： 5'非编码区—调控序列—编码区—终止子—起始调控序列—编码区—终止区—3’非编码区 的二级结构：三叶草形 三级结构：倒L形 功能：接受氨基酸、携带氨基酸，把氨基酸转运到核糖体上，然后按照上的密码顺序装配成多肽或蛋白质。 ：组成核蛋白体 核酸分子杂交的原理：复性（变性的重新恢复成双链的过程称为复性也叫做退火。） 反义的作用机制（掌握）：

Ⅰ类反义:直接作用于靶的S D序列和(或)部分编 码区，直接抑制翻译，或与靶结合形成双 链，从而易被酶Ⅲ降解； Ⅱ类反义：与的非编码区结合，引起构象变 化，抑制翻译； Ⅲ类反义：则直接抑制靶的转录。 双链诱导诱导的过程主要分为两个阶段（重点掌握）： Ⅰ启动阶段Ⅱ执行阶段 启动阶段：当细胞中由于感染等原因出现双链分子时， 细胞中一种称为的核酸酶就会识别这些双 链，并将其降解成21-23长的小干扰 （），单链与一些蛋白形成复合体， 构成“诱导的沉默小体”（） 执行阶段：当目标与中的完全配对时， 就会切割目标，并由细胞中的核酸酶将 其进一步降解，从而抑制目标基因的表达病毒核酸的特点（了解）： （1）病毒只含一种核酸，构成病毒体的心髓。 （2）核酸类型多态化 （3）分子量小，基因组结构简单，所含基因组数目少 （4）病毒基因组核酸复制多样化 （5）病毒核酸更易受宿主细胞的影响而发生基因突变和重组 （6）有些病毒去除囊膜和衣壳，裸露的或也能感染细胞，这样的核酸成为传染性核酸

18-药学分子生物学实验-路新枝

中国海洋大学本科生课程大纲 课程属性：公共基础/通识教育/学科基础/专业知识/工作技能，课程性质：必修、选修 一、课程介绍 1.课程描述： 药学分子生物学实验是一门理论和实践性极强的学科，在药学和生命科学研究中发挥着极其重要的作用。该课程是从分子水平来研究药物与生命现象的学科，其核心内容是通过对生物的物质基础——核酸、蛋白质等生物大分子的实验操作实现药物的制备、研究药物对机体的作用。本课程包括核酸的分离、制备、剪切与检测，重组蛋白药物的表达与检测。通过该课程学习要求学生熟练掌握基础的分子生物技术的原理和方法，提高学生独立思考、观察、分析问题和解决问题的能力，同时培养学生的创新意识、科学素养和科研能力，通过实验，巩固和加深理论知识，并能够利用这些技术，进行药物的生产、研究药物的作用。 2.设计思路： 本课程侧重于从核酸水平进行的实验操作，使同学们巩固药学分子生物学的的基础理论，掌握相关的实验技术、应用领域、发展动态并及时运用到药学和基因工程药物实际应用中。课程包括以下三个模块 (1)核酸的分离提取：包括质粒的分离提取、基因组DNA的分离提取、RNA的分离提取核酸的体外操作：包括核酸的限制性酶切实验、核酸的重组实验、核酸的体外扩增实 - 1 -

验、核酸的凝胶回收实验 重组药物蛋白的表达：重组DNA的转化和重组蛋白的检测 3. 课程与其他课程的关系： 先修课程生物化学实验，本课程与生物化学课程密切相关，构成了生命科学系列课程群，其中生物化学实验侧重于糖和蛋白质的检测，而分子生物学实验侧重于核酸检测。 二、课程目标 本课程的目标是培养学生的分子生物实验操作技能，通过本课程的学习，可以使学生系统而深入地掌握分子生物学实验技术的基本理论和实验操作方法，熟悉基本的分子生物学技术及其在医药领域的应用，了解本领域的最新实验技术和发展状态，为将来从事医药相关的研究工作打下基础，以利今后的发展。 三、学习要求 药学分子生物学实验是一门应用非常广泛、发展非常迅速的课程，要完成学习任务，学生必须做到 （1）课前预习，熟知本次实验课程的相关基础理论，了解基本的实验原理、应用范围以及发展动态。 （2）按时上课，认真完成每一项实验操作，仔细观察实验中出现的现象，做好实验记录。 （3）完成实验结果的分析，总结实验经验，完成课后思考题。 四、教学进度 - 1 -

药学分子生物学重点

绪论分子生物学(molecular biology）:是在分子水平研究生命现象的科学，是现代生命科学的共同语言。核心内容是通过生物的物质基础— 规律的研究来阐明生命分子基础，从而探讨生命的奥秘。 药学分子生物学(pharmaceutical molecular biology)：由于分子生物学的新理论、新技术渗入到药学研究领域，从而使药物学研究以化学、药学的培养模式转化为以生命科学、药学和化学相结合的新药模式。 分子生物学的主要研究对象：核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及相互作用 分子生物学在医药工业中的应用： 1、DNA重组技术与新药研究 2、药物基因组学、药物蛋白质组学与现代药物研究 3、药物蛋白质组学是基因、蛋白质、疾病三者相连的桥 梁科学 第一章核酸的分子结构、性质和功能 核酸的基本结构（重点掌握）：磷酸 核苷碱基 戊糖 引起DNA构象改变的因素： 核苷酸顺序、碱基组成、盐的种类、相对湿度。

DNA双螺旋结构有利氢键不利疏水力 稳定性的影响：碱基堆积力静电斥力mRNA:遗传信息 真核生物的mRNA结构: 原核生物的mRNA结构： tRNA的二级结构：三叶草形 三级结构：倒L形 功能：接受氨基酸、携带氨基酸，把氨基酸转运到核糖体上，然后按照mRNA上的密码顺序装配成多肽或蛋白质。 rRNA：组成核蛋白体 核酸分子杂交的原理：复性（变性的DNA重新恢复成双链的过程称为复性也叫做退火。） 反义RNA的作用机制（掌握）： Ⅰ类反义RNA:直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分编 码区，直接抑制翻译，或与靶mRNA结合形成双 链RNA，从而易被RNA酶Ⅲ降解； Ⅱ类反义RNA：与mRNA的非编码区结合，引起mRNA构象变 化，抑制翻译； Ⅲ类反义RNA：则直接抑制靶mRNA的转录。

药学分子生物学

绪论 一、分子生物学的定义 分子生物学是在分子水平研究生命现象的科学，是现代生命科学的“共同语言”。它的核心内容是通过对生物的物质基础----核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用等的研究来阐明生命分子的基础，从而探索生命的奥秘。 二、DNA是遗传物质的实验证据（1944年Avery） 他们从SⅢ型活菌体内提取DNA、RNA、蛋白质和荚膜多糖，将它们分别和R Ⅱ型活菌混合均匀后注射人小白鼠体内，结果只有注射SⅢ型菌DNA和RⅡ型活菌的混合液的小白鼠才死亡，这是一部分RⅡ型菌转化产生有毒的、有荚膜的S Ⅲ型菌所致，并且它们的后代都是有毒、有荚膜的。 三、DNA双螺旋结构模型的提出（年代提出人） 1953年，Waston和Crick阐明DNA双螺旋结构 四、中心法则 第一章 一、核酸的种类 核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA） 二、DNA的结构与功能 （1）一级结构的定义 定义：指4种脱氧核糖核苷酸的连接及其排列顺序脱氧核糖核苷酸：脱氧戊糖、磷酸和碱基-----→A、T、C、G------→dA TP、dTTP、dCTP、dGTP （2）二级结构的定义、分类、 定义：指两条脱氧核苷酸链以反向平行的形式，围绕同一个中心轴盘绕所形成的双螺旋结构。分类： 右手螺旋：A-DNA，B-DNA，C-DNA，D-DNA 左手螺旋：Z-DNA （3）DNA的三级结构定义、主要形式、拓扑异构酶 定义：指在DNA双螺旋结构基础上，进一步扭曲所形成的特定空间结构。 主要结构模式：超螺旋结构 DNA 拓扑异构酶 定义：细胞内存在的一类能催化DNA拓扑异构体相互转化的酶。 种类：拓扑异构酶?和拓扑异构酶Π 三、RNA的结构与功能： （1）原核生物与真核生物mRNA结构差异 原核生物mRNA的结构特点：①3 `-末端有polyA尾巴②5 `-末端有帽子结构③是单顺反子 真核生物mRNA的结构特点：①半衰期短②以多顺反子形式存在③ 5 `-末端有SD序列

药学信息检索复习要点

信息检索复习要点 题型：填空、名解、选择、判断、简答、结合 第一、二章（出小题） 1、信息按处理加工程度划分：一次信息（期刊论文）、二次信息（目录、索引、文摘）、三 次信息（辞典、年鉴、字典、百科全书）。P3 按信息传播范围划分：公开信息（白色信息）、内部信息（灰色信息）、秘密信息（黑色信息）。P4 药学经济信息的内容：生产技术信息、经营管理信息、市场信息、产品信息、公司厂商信息、经济政策法令信息、环境信息。P9 2、ISBN (International Standard Book Number) 国际标准（图）书（编）号， ISSN(International Standard Serial Number) 国际连续出版物编号。 3、信息检索类型按内容分类分为文献检索、事实检索、数据检索。P25 4、检索方法：常用法（顺查法，从时间上由远而近的检索信息的一种方法；倒查法，用于 对新课题的研究；抽查法，一定时期、一定内容的信息资料的一种方法）、追溯法、循环法。P26 5、信息检索途径，外表特征：书名、刊名、篇名、责任者、序号等；内容特征：分类、主 题、分子式等。P27、P29 6、《中国图书馆分类法》简称《中图法》，分为22类，采用拉丁字母和阿拉伯数字的混合制 号码。F经济，R医药、卫生。P31 语义关系：属分关系、同义关系、相关关系P32、P34 第三章 1、检索工具的结构：前言、凡例、目录、正文、索引、附录。 2、检索工具的编排方式：字顺排检法、分类排检法、主题排检法、时序和地序排检法（自 然顺序排检法）。P39 第四章 1、检查一个文章被引用情况：使用SCI。 2、《中国药学文摘》各辑内容包括该类药物的研究、生产技术、分析、药理、临床应用、质 量管理、制药设备、新药介绍等。P49 3、《中国药学文摘》的检索方法主要通过分类途径、主题途径和外文药名途径检索。P53。著 录格式P52 4、《全国报刊索引》按《中图法》标引，检索方法主要通过分类途径、著者途径检索。P53 P54 5、《国内医药信息总览》分类目次：法规与管理、研究开发、技经贸市场、企事业动态、其 他。P54 著录格式P55 6、《国内医药信息总览》检索方法主要通过分类途径和关键词检索。P56 7、CA收录了与化学直接或间接相关的化学、化工文献，还涉及与化学有关的生物、医学、 药学、卫生学、生物遗传工程、分子生物学等方面的文献，包括期刊文献、专利文献、综述、专著、会议录、科技报告、学位论文等。检索途径期索引、卷索引、累计索引。 P61 8、文献类型：P为专利；R为review，评述；B为book，图书。P66 9、专利族，同族专利，一般是指同一发明思想，用不同文种向多国多次申请、公开或批准， 内容相同或所有修改的一族专利，其中，最先得到批准的专利称为基本专利。同族专利分为：基本专利、等同专利、相关专利。P67

药学分子生物学重点

绪论 分子生物学(molecularbiology）:是在分子水平研究生命现象的科学， 生命分子基础，从而探讨生命的奥秘。 药学分子生物学(pharmaceuticalmolecularbiology)：由于分子生物学的新理论、新技术渗入到药学研究领域，从而使药物学研究以化学、药学的培养模式转化为以生命科学、药学和化学相结合的新药模式。 分子生物学的主要研究对象：核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及相互作用 分子生物学在医药工业中的应用： 1、DNA重组技术与新药研究 2、药物基因组学、药物蛋白质组学与现代药物研究 3、药物蛋白质组学是基因、蛋白质、疾病三者相连的桥 梁科学 第一章核酸的分子结构、性质和功能 核酸的基本结构（重点掌握）：磷酸 核苷碱基 戊糖 引起DNA构象改变的因素： 核苷酸顺序、碱基组成、盐的种类、相对湿度。 DNA双螺旋结构有利氢键不利疏水力

稳定性的影响：碱基堆积力静电斥力 mRNA:遗传信息 真核生物的mRNA结构: 原核生物的mRNA结构： tRNA的二级结构：三叶草形 三级结构：倒L形 功能：接受氨基酸、携带氨基酸，把氨基酸转运到核糖体上，然后按照mRNA 上的密码顺序装配成多肽或蛋白质。 rRNA：组成核蛋白体 核酸分子杂交的原理：复性（变性的DNA重新恢复成双链的过程称为复性也叫做退火。） 反义RNA的作用机制（掌握）： Ⅰ类反义RNA:直接作用于靶mRNA的SD序列和(或)部分编 码区，直接抑制翻译，或与靶mRNA结合形成双 链RNA，从而易被RNA酶Ⅲ降解； Ⅱ类反义RNA：与mRNA的非编码区结合，引起mRNA构象变 化，抑制翻译； Ⅲ类反义RNA：则直接抑制靶mRNA的转录。 双链RNA诱导诱导RNAi的过程主要分为两个阶段（重点掌握）： Ⅰ启动阶段Ⅱ执行阶段