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细胞生物学实验考考试样题及实验思考题答案

细胞生物学实验考试样题

一、填空题（2分/每空，共30分）

1、洗液由重铬酸钾、浓硫酸和蒸馏水组成。

2、1640培养基包括RPMI1640培养液、谷氨酰胺、双抗、小牛血清。

3、鉴别活细胞的染液是0.4%台盼蓝溶液;鉴别细胞核的染液是甲基绿-派洛宁染液；

鉴别线

粒体的染液中性红-詹纳斯绿染液。

4、细胞核分离的基本步骤是组织匀浆、离心、纯化、鉴定。

5、细胞骨架中使蛋白质被保存的染料是1%Triton-100。

二、简答题（5+5+10共20分）

1.线粒体在分离提取过程中，为什么要在0~4℃中进行？

答：①为了保持组分的生理活性;

②防止线粒体中的酶被破坏，避免酶失活

2.什么我们在检测细胞渗透性时要用一定浓度的试剂？

答：①确保实验是在等渗条件下进行；

②防止物质的进出；

③同时避免由于渗透压不同而影响实验结果。

3.细胞的计数步骤和方法。

答：加等体积的染液与细胞悬液混合～把悬液滴在计数板上～底倍镜下观察，活细胞

无色，死

细胞为蓝色，找计数方格计四个方格的细胞总数。（压到大格线者“计左不计右，计上不计下”）计算。

Ⅰ：每毫升原液细胞数=4个大格细胞总数/4*100*稀释倍数

Ⅱ：细胞存活率(%)=(细胞总数-死细胞数)/细胞总数。

细胞生物学实验思考题答案

实验一利用各种显微镜观察细胞形态、结构

1、简述显微镜的主要结构和操作要领。

普通生物显微镜由3部分构成：

①照明系统：包括光源和聚光器。

②光学放大系统：由物镜和目镜组成，是显微镜的主体。

③机械装置：用于固定材料和观察方便，包括镜台(载物台) 、调节器和物镜转换器(旋转器等使用（一）、观察前准备

检查：底座右侧的光源亮度旋钮是否在“1”位置，即顺时针选到最底位。

开机：①.打开后座主电源开关——绿色按钮

②打开后座CCD电源开关——红色按钮

白平衡调整：不放切片，在10倍物镜下将电源调整到最亮，然后按底座右方的白平衡按钮（红色）3－5秒之后将光源亮度调回到适中状态。

（二）、观察操作

放上切片，将光源调到自己习惯的亮度。

视度补偿：调节目镜双筒找到自己的瞳距，此时两眼镜下的图象重合在一起，横拉板上的数字（例如：64）就是自己的瞳距，然后将两只目镜外侧的刻度线调到瞳距的数字的位置。

调焦：将绿色光标移至视野中央，开始观察，如需提问，按呼叫按钮（三）、下课时的操作

①.将光源亮度调到最低“1”刻度。

②.关掉红色CCD电源开关，再关绿色主电源开关。

③.套上显微镜套。

④.耳机及凳放整齐。

2、分析在使用低倍镜、高倍镜和油镜时，对光亮度的要求。

由于从低倍镜到高倍镜的时候视野变暗，物像变大，细胞数目变少，所以光亮度应该调高，但最主要的还是应以自己的视觉舒适为主。

3、分析聚光镜在成像质量中的作用。

聚光镜是在照明光路中的重要组件，用于集中从光源来的光线，是被观察的标本得要明亮和均

匀的照明，正确使用聚光镜系统对于发挥显微镜的分辨率和增强像的反差有很大的作用。

实验二显微摄影

1.、要想得到一张完美的显微摄影照片，应注意哪些方面的问题，主要关键是什么？

要获得一张好的显微摄影照片，必须注意满足以下几个条件：1制作清晰的标本片，其中组织切片应厚薄适度，染色片不应有多余的染料等。2选择性能优良干净的载玻片和盖玻片。3使用高性能的物镜（最好用复消色差的平场物镜）和聚光器。4采用Kohler照明法。5选择好合适的拍摄胶片。⑥拍摄时应准确地聚焦和选择合理的曝光时间。⑦正确的冲印方法。关键点：为求得高分辨率的显微影像，须选用复消色差物镜与摄影专用目镜或平周目镜配合。显微摄影的照明方法，分为透射照明、落射照明（垂直照明）和明视野与暗视野照明。同时还应注意各种滤色片的选用。

2、结合数码互动显微镜摄影操作，写出操作工程、拍摄关键点以及注意事项。

过程：用数码显微镜仔细观察样品；利用实验台前面的操作面板上的呼叫按钮请求拍照；得到教师允许后，按操作面板上的拍照按钮进行摄影；将所拍摄到的照片挑选后打印出来。拍摄关键点：；注意事项：每次更换装片时要进行白平衡的调整；要注意对光线的调整；要注意屈光度的调整；摄像时要以从目镜观察到的图像为准。

实验三细胞的亚显微结构观察

1. 比较光镜与电镜工作原理的区别。

电子显微镜的高分辨率主要是因为使用了波长比可见光短得多的电子束作为光源，波长一般小于0.1nm,由于光源的不同，又决定了电镜和光镜的一系列不同点：电镜使用电磁透镜聚焦，光镜使用玻璃透镜聚焦，电镜筒中要求真空而光镜筒中不要求真空，图像需要用荧光屏来显示或用感光胶皮做记录，光镜成像时利用样本对光的吸收形成明暗反差和颜色变化而电镜利用电子的散

射和透射形成明暗反差，光镜的分辨率为200nm,而电镜的分辨率为0.2nm.

2、分析扫描电镜与透射电镜的主要异同点。

结构差异：主要体现在样品在电子束光路中的位置不同。透射电镜的样品在电子束中间，电子源在样品上方发射电子，经过聚光镜，然后穿透样品后，有后续的电磁透镜继续放大电子光束，最后投影在荧光屏幕上；扫描电镜的样品在电子束末端，电子源在样品上方发射的电子束，经过几级电磁透镜缩小，到达样品。TEM:电子的穿透能力很弱，透射电镜往往使用几百千伏的高能量电子束，但依然需要把样品磨制或者离子减薄或者超薄切片到微纳米量级厚度SEM: 几乎不用制样，直接观察；透镜成像的时候是利用电子在样品表面穿透后剩余电子在荧光屏上成像而扫描电镜需要激发出二次电子收集的是二次电子；扫描电镜为了使样品能够激发出二次电子标本在固定脱水后需要喷上一层重金属膜，重金属在电子的轰击之下发出次级电子信号。相同之处：固体，尽量干燥，尽量没有油污染，都是电真空设备，使用绝大部分部件原理相同。

实验四细胞膜的渗透性

1. 讨论溶血实验在研究中应用的可能性。

比如溶血空斑实验，溶血空斑实验是体外检测B淋巴细胞的一种方法，即将经绵羊红细胞（SRBC）免疫过的家兔淋巴结或小鼠脾脏制成细胞悬液，与一定量的SRBC结合，于37℃作用下，免疫活性淋巴细胞能释放出溶血素，在补体的参与下，使抗体形成细胞周围的SRBC溶解，从而在每一个抗体形成细胞周围，形成肉眼可见的溶血空斑。每个空斑表示一个抗体形成细胞，空斑大小表示抗体生成细胞产生抗体的多少。由于溶血空斑实验具有特异性高，筛选力强，可直接观察等优点，故可用做判定免疫功能的指标，观察免疫应答的动力学变化，并可进行抗体种类及亚类的研究。有时在提红细胞膜蛋白时要用到，先用低渗溶液让红细胞胀破，高速离心收集、纯化膜蛋白。

实验五动物细胞培养及其生长特性的观察分析

1、哪些物品适合于高压灭菌，并说明理由。

主要应用范围是布类、橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液(如Hanks液、PBS、20×SSC等)，牛血清、大部分培养基、胰酶和一些生物制剂是有机溶液，均不能高压。

理由：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

2、紫外线消毒的适用范围和目的是什么？

用于消毒空气、操作台面和一些不能用干热、湿热灭菌的培养器皿，如塑料培养皿、培养板等。通过紫外线的照射,改变及破坏微生物DNA结构,使细菌当即死亡或不能繁殖后代,达到杀菌的目的

3、血清在细胞培养中有何作用？

血清含有一定的营养成分，更重要的是它含有细胞生长所必需的生长因子；酶、微量元素和激素；保护作用；提供伸展和贴附因子等，是合成培养基所无法替代的。此外它还能中和有毒物质（重金属、抗菌素）的毒性。

4、为什么配制培养基之前要反复处理配制用水并要事先高压处理？

防止有其他细菌在培养基中生长污染培养基是要培养的对象没能培育出来，而影响实验目的。是实验产生误差。

细胞生物学实验

细胞生物学实验：《细胞生物学实验》是高等教育出版社出版的一本书籍，作者是王崇英、高清祥。内容简介：《细胞生物学实验(第3版)》在保留第2版简明、可操作性强等特点的基础上，删除了相对陈旧和不适用的实验，增加了反映目前细胞生物学研究现状和发展趋势的实验，并对每个实验的结构体系进行了调整，强化了要点提示及注意事项，增加了预期实验结果。全书共3篇7章42个实验和11个附录。第一篇7个实验介绍了“普通光学显微镜”、“特殊光学显微镜”、“激光扫描共聚焦荧光显微镜”、“双光子激光扫描荧光显微镜”和“电子显微镜”的原理及使用方法；第二和第三篇从基础性、综合性和设计性实验层面安排了35个实验，涵盖了“细胞形态结构和生理活动”、“细胞分裂与染色体标本制备”、“细胞培养、遗传转化及基因表达”、“染色体分析技术”以及“细胞周期与细胞凋亡”等内容，旨在培养学生的基本实验技能和综合创新能力；附录部分提供了“实验室注意事项”、“实验报告的书写要求”、“离心机转数与离心力换算表及公式”、“常用缓冲液的配制”和“常用细胞生物学词汇”等资料。书后附有部分实验的彩色图片和照片。《细胞生物学实验(第3版)》配有数字课程（基础版）网站。网站内容包括部分实验内容的录像片段、彩色图片和照片，供学有余力的学生学习和教师教学参考。《细胞生物学实验(第3版)》适合作为综合性大学、师范、农林、医学等院校相关专业本科生的细

胞生物学实验教材使用，也可供研究生、相关科研及实验技术人员参考。目录：第一篇显微镜技术光学显微镜及其使用普通光学显微镜及其使用特殊光学显微镜及其使用暗视野显微镜相差显微镜偏振光显微镜微分干涉相差显微镜荧光显微镜激光扫描共聚焦荧光显微镜和双光子激光扫描荧光显微镜激光扫描共聚焦荧光显微镜双光子激光扫描荧光显微镜电子显微镜及其使用透射电子显微镜技术透射电子显微镜的原理、用途与使用方法透射电子显微镜样品制备(超薄切片) 扫描电子显微镜技术扫描电子显微镜的原理、用途与使用方法扫描电子显微镜样品制备

(生物科技行业类)细胞生物学习题与实验

《细胞生物学》综合测试题（一）一、名词解释（每词3分，共30分） 1、细胞 2、分子杂交 3、核体 4、初级溶酶体 5、自由扩散 6、桥粒 7、膜骨架 8、奢侈基因 9、常染色质 10、基本颗粒（F1因子）二、填空（每空0.5分，共15分） 1、原生质体是指（）。 2、细胞的三要素是指（）、（）和（）。 3、被动运输可分为两类，即（）和（）。 4、流动镶嵌模型的三大特点是（），（）和（）。 5、目前发现最小最简单的细胞是（），直径只有（）。 6、根据是否与消化物作用溶酶体可区分为（）、（）两种形式。 7、原核细胞和真核细胞的核糖体的沉降系数分别是（）和（）。 8、细胞内的能量转化细胞器是指（）和（）。 9、细胞学说的内容包括（）、（）和（）。 10、荧光显微镜以（）为光源，电子显微镜则以（）为光源。 11、细胞有两种膜结构具有分拣作用，一个是（）另一个是（）。 12、弹性蛋白的肽链之间通过（）相互交连形成网络。 13、用（）技术可以在电镜下观察膜蛋白的不对称分布。 14、在转移酶I和T因子的作用下，催化P位上肽酰tRNA的（）与处在A位上氨酰基tRNA的（）之间形成肽键。 15、染色质根据功能状态不同可分为（）和（）两种。三、简答（每小题5分，共25分） 1、糙面内质网功能。 2、真核细胞的主要特点是什么？ 3、染色体DNA的三个功能元件是什么？ 4、细胞核的组成部分及功能。 5、为什么说线粒体、叶绿体是半自主性细胞器？四、论述（每小题10分，共30分） 1、试述动物细胞的连接方式 2、试述蛋白质糖基化的生理作用。 3、试述细胞生物学的主要研究内容。《细胞生物学》综合测试题（二）

细胞生物学实验

1. 什么是细胞培养？细胞生物学实验指从动物活体体内取出组织，并将其分散为单个细胞（机械或酶消化），在体外模拟体内的生理环境，使其在人工培养条件下保持生长、分裂繁殖、细胞的接触性抑制以及细胞衰老过程等生命现象。最常见的细胞一般有两种，一种是原代细胞，另一种是传代细胞。原代细胞是指动物组织经过胰酶或胶原酶等酶类的消化，使其分散，从而获得单个细胞，再使这些单个细胞生长于培养容器中的过程。大多数组织可以制备原代细胞，但制备的方法略有不同，制备的细胞生长快慢及难易程度也不相同。不同的原代细胞，其形态也不尽相同。一般将10代以内的细胞称之为原代细胞。传代细胞一般指无限繁殖的细胞系，理论上这类细胞可以无限次的传代。做实验的时候也会经常使用这类细胞，如Hela、293、Vero 等细胞。 2. 细胞的生长周期游离期：细胞刚接种到新的培养容器中到贴壁前的一段时期，这个时期的长短由细胞类型决定，从几分钟到几个小时不等。贴壁期：细胞从游离状态变为贴附到培养器皿表面并展现出一定细胞形态的时期。潜伏期：细胞在完成贴壁后，并不会马上进行增殖，会进行增殖所必须的物质和能量的储备，这个时候称之为潜伏期。

对数生长期：细胞在完成物质和能量储备后，开始大量的增殖的时期。这个时期的细胞活力旺盛，且状态稳定，我们所做的绝大多数实验都是在这个时期开展的。停止期：随着细胞的生长，细胞密度越来越大，由于营养物质的消耗、细胞间的接触抑制等因素，细胞生长缓慢，甚至停止生长。这个时候，我们就要给细胞进行传代了，使细胞可以继续进行增殖，保持旺盛的活力。 3. 细胞生长所需要营养条件细胞的培养所需要的营养成份一般来自于基础培养基（比如DMEM培养基）和血清。基础培养基：主要是提供细胞生长所需要的氨基酸（组成蛋白质的基本单位）、维生素（细胞代谢中辅酶的组成成分）、无机离子（K+，Na+等）、碳水化合物（碳源和能量来源）和一些激素等营养物质。血清：主要是提供一些基础培养基不能提供的生长因子和低分子的营养物质，此外它还有促进细胞的贴壁、中和有害重金属离子等作用。如果只提供基础培养基而不提供血清，绝大多数细胞是无法生长的。血清对于我们实验的重要性就不言而喻了，那么什么样的血清才算是合格的血清呢？合格的血清需要通过各种检测，包括无细菌，无真菌，无支原体检测，无病毒污染。血清一般呈现为淡黄色，透明状液体，由于含有大量的蛋白质等成分，会略有黏稠。以全式金公司的TransSerum EQ Fetal Bovine Serum (FS201-02)为例，它通过了牛腹泻病毒、牛副

(复试) 细胞生物学专业分子细胞生物学

湖南师范大学硕士研究生入学考试自命题考试大纲考试科目代码：考试科目名称：分子细胞生物学一、考试形式与试卷结构一 1)试卷成绩及考试时间本试卷满分为100分，考试时间为180分钟。 2)答题方式答题方式为闭卷、笔试。 3)试卷内容结构各部分内容所占分值为：细胞生物学基本概述、细胞基本特性及研究方法约15分细胞膜, 内膜系统及各细胞器约25分基因表达及调控约30分细胞增殖、分化、衰老、凋亡及其社会联系与信号转导约30分 4)题型结构论述题：4小题，每小题15-30分，共100分二、考试内容与考试要求（一）细胞生物学基本概述、细胞基本特性及研究方法考试内容：细胞生物学研究的内容与现状；细胞学与细胞生物学发展简史；细胞的基本概念；原核细胞与古核细胞；真核细胞；非细胞形态的生命体－病毒与细胞的关系；细胞形态结构的观察方法；细胞组分的分析方法；细胞培养、细胞工程与显微操作技术。考试要求： 1、了解细胞生物学研究的内容、现状及发展。 2、掌握细胞的基本概念、基本共性及理解细胞是生命活动的基本单位；掌握病毒的基本分类及特征，理解病毒及其与细胞的关系；掌握真核细胞、原核细胞的结构

特征及进化上的关系；细胞生命活动的基本含义。 3、了解和掌握细胞生物学研究领域所使用的实验技术的基本原理和应用；理解细胞组分的分析方法；掌握细胞培养类型和方法及细胞工程的主要成就。（二）细胞膜及细胞的内膜系统及各细胞器考试内容：细胞质膜的结构模型；生物膜基本特征与功能；细胞骨架；膜转运蛋白与物质的跨膜运输；离子泵和协同转运；胞吞与胞吐作用。细胞质基质的涵义与功能；细胞内膜系统及其功能；细胞内蛋白质的分选与膜泡运输；线粒体与氧化磷酸化；叶绿体与光合作用；线粒体和叶绿体是半自主性细胞器；线粒体和叶绿体的增殖与起源；微丝与细胞运动；微管及其功能；中间丝；核被膜与核孔复合体；染色质；染色质结构与基因活化；染色体；核仁；核糖体的类型与结构；多聚核糖体与蛋白质的合成。考试要求： 1、了解生物膜的结构模型、组成与功能等基本知识。 2、掌握物质的跨膜运输的方式、特点、作用机理及生物学意义。 3、掌握细胞质基质的涵义、功能及细胞质基质与胞质溶胶概念；掌握内质网的基本类型、功能及与基因表达的调控的关系；掌握高尔基复合体的形态结构和高尔基体的极性特征、膜泡运输的分子机制高尔基体的功能以及它和内质网在功能上关系、高尔基体与细胞内的膜泡运输及内膜系统在结构、功能上的相互关系；掌握溶酶体与过氧化物酶体的差异以及后者的功能发生；了解细胞内蛋白质的分选与细胞结构的装配。 4、掌握真核细胞内两种重要的产能细胞器——线粒体和叶绿体的基本结构特征与功能机制。 5、掌握各种细胞骨架的动态结构和功能特征。 6、掌握细胞核的结构组成及其生理功能；掌握染色质、染色体的关系及中期染色体的形态结构和染色体DNA的三种功能元件；了解核仁的功能与周期；了解染色质的结构和基因转录。 7、掌握核糖体的结构特征和功能，蛋白质的生物合成和多聚核糖体的概念。（三）基因表达及调控

细胞生物学实验期末考试试题答案

。细胞生物学实验试题参考答案及评分标准一、填空题（本题共 22 空，每空 1 分，共22分） 1．分辨率；放大倍数，镜口率（数值孔径）。 2．激活巨噬细胞（数量增加、吞噬活性增强），台盼兰作为指示剂。 3．差速、密度梯度；细胞核，叶绿体。 4．中性红；核仁。 5．柠檬酸钠。 6．网格（笼形）蛋白；微丝。 7．SDS；Triton X-100；微粒体。 8．PEG；粉末。 9．0.9％。10．接触抑制。 11．戊二醛；甲醇：冰醋酸（3：1）。二、判断改错题（本题共8小题,每小题2分，其中判断0.5分，改错1.5分，共16分）1．×也可能会 2．×微管 3．×整合蛋白 4．×不同物种的细胞 5．√ 6．×光学显微镜 7．×微丝 8．×浓度偏低三、简答题（本题共_5_小题，共46分） 1．移动载物台，动则在玻片上（2分）；转动目镜镜头，动则在目镜上（2分）；否则在物镜上（2分）。（本题共6分） 2．含红细胞的吞噬泡与巨噬细胞内的初级溶酶体融合，进行消化；（8分） 3．一种糖蛋白（2分）；内质网合成、糖基化，高尔基体内进一步加工、分选，以分泌泡形式与膜融合，胞吐（8分）；它能与鸡红细胞膜表面的糖链专一性结合（2分）（本题共12分） 4．⑴ Giemsa染色前，细胞须固定（染死细胞），主要染的是核、染色质（5分）；⑵ Janas Green B 染的是活细胞（染色前不用固定），主要染的是线粒体（5分）。（本题10分） 5．⑴测量溶血时间（2分）；⑵主要取决于分子的大小和极性（4分）；小分子比大分子容易穿膜，非极性分子比极性分子易穿膜，而带电荷的离子跨膜运动则通常需要转运蛋白的协助（4分）。（本题共10分）四、论述题（本题共_1_小题,每小题 16 分，共 16 分）（0401、0402班同学请回答）答：外周血培养（2分）－秋水仙素处理（2分）－离心收集细胞（2分）－低渗处理（2分）－固定（2分）－制片（2分）－染色（2分）－镜检及显微摄影－核型分析（2分）（原理略）（本题共16分）（0403班同学请回答）答：外周血培养（2分）－秋水仙素处理（2分）－离心收集细胞（2分）－低渗处理（2分）－固定（2分）－制片－老化（2分）－显带处理－染色（2分）－镜检及显微摄影－带型分析（2分）（原理略）（本题共16分）

细胞生物学考试及研究生考试题库

一、细胞生物学题库 1、组织培养：使离体细胞在实验室人工模拟机体内的条件下生长发育、分裂增殖的一项重要的细胞生物学研究技术。 2、膜相结构：指真核细胞中以生物为基础的所有结构，包括细胞膜和细胞内的所有膜性细胞器。如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、核膜等。 3、单克隆抗体：由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）的高纯度抗体。 4、细胞株：具有有限分裂潜能适合于进行培养，并在培养过程中保持其特性和标志的细胞群。其分裂次数通常为25～50次，最后死亡。 5、细胞识别：指细胞与细胞之间通过细胞表面的信息分子相互作用，从而引起细胞反应的现象。 6、奢侈基因：即组织特异性表达基因，指特定类型细胞中为其执行特定功能蛋白质编码的基因。 7、G蛋白：具有GTP酶活性，在细胞信号通路中起信号转换器或分子开关作用的蛋白质。有三聚体G蛋白、低分子量的单体小G蛋白和高分子量的其他G蛋白三类。 8、G蛋白偶联受体：一种与三聚体G蛋白偶联的细胞表面受体。含有7个穿膜区，是迄今发现的最大的受体超家族，其成员有1000多个。与配体结合后通过激活所偶联的G蛋白，启动不同的信号转导通路并导致各种生物效应。 9、细胞系：原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。 10、细胞通讯：指一个细胞发出的信息通过介质（配体）传递到另一个细胞并与靶细胞相应的受体相互作用，然后通过细胞信号转导产生胞内一系列生理生化反应，最终表现为细胞整体的生物学效应的过程，是多细胞生物必需的。 11、第一信使：由细胞产生，可被细胞表面或胞内受体接受、穿膜转导，产生特定的胞内信号的细胞外信使。如激素、神经递质等。 12、Hayflick界限：即细胞最大分裂次数。细胞增殖次数与端粒DNA长度有关。DNA 复制一次端粒DNA就缩短一段，当缩短到Hayflick点时，细胞停止复制，走向衰亡。 13、细胞决定:细胞分化具有严格的方向性，细胞在未出现分化细胞的特征之前，分化的方向就已经由细胞内部的变化及受周围环境的影响而决定的现象。 14、信号肽：是由mRNA上特定的信号顺序首先编码合成的一段短肽，含15-30个氨基酸残基，它作为与粗面内质网膜结合的“引导者”指引核糖体与糙面内质网膜结合，并决定新生肽链插入膜内或进入内腔。

细胞生物学实验课自我测试题

细胞生物学实验课自我测试题 1、显微镜的光学系统主要有哪部分些构成 2、拿到一张固定装片，为了很快找到需要找到的物像，首先应该做什么 3、为避免显微镜的灯泡烧坏，应注意什么 4、在低倍镜下找到物像后，为了看得更仔细，向高倍镜转换过程中需要调整粗调节螺旋吗为什么 5、如何搬动显微镜 6、推血涂片时，要一次成功。即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重新开始。为什么 7、使用染色缸时，为避免拿出玻片时找不到涂有细胞的一面，应注意什么 8、如何知道试管中的红细胞溶血了 9、抓取小鼠注射的正确方法是怎样的 10、取蛙血时，从胸腔最先看到的一般是哪个器官如何快速找到心脏 11、细胞生物学实验要求学生掌握的最重要的技能是什么 12、鸡的红细胞和小鼠的巨噬细胞相比，哪个体积大 13、细胞处于高渗或低渗溶液中，如何判断水的运动方向 14、可自由扩散的脂溶性小分子对细胞的影响如何 15、显微镜下口腔粘膜细胞的线粒体的形状是什么样的 16、在细胞吞噬活动观察的实验中，如何在显微镜下快速找到巨噬细胞 17、推蛙血涂片时应注意什么 18、为什么要用派洛宁和甲基绿染的混合染液染色RNA和DNA 19、派洛宁和甲基绿染的混合染液染色细胞，细胞核和细胞质的颜色分别是什么颜色为什么 20、使用显微镜观察标本时，为什么必须按照从低倍镜到高倍镜，再到油镜的顺序进行 21、使用显微镜时，为什么要先将10倍物镜与标本表面的距离调节到6mm之内 22、如果标本片放反了，可用高倍镜或油镜找到标本吗为什么 23、怎样才能准确而迅速地在高倍镜或油镜下找到目标 24、如果细调焦螺旋已转至极限而物像仍不清晰时，应该怎么办 25、如何判断视野中所见到的污点是在目镜上 26、在对低倍镜进行准焦时，如果视野中出现了随标本片移动而移动的颗粒或斑纹，是否

细胞生物学实验

实验室规则和要求一般规定 1.上课第一天请先熟悉环境，牢记“安全”是进行任何实验最重要的事项。 2.在实验室内请穿著实验衣（最好长及膝盖下），避免穿著凉鞋、拖鞋（脚趾不要裸露）。留有长发者，需以橡皮圈束于后，以防止引火危险或污染实验。 3.在实验室内禁止吸烟、吃东西、饮食、化妆、嚼口香糖、嬉戏奔跑，食物饮料勿存放于实验室的冰箱中，实验桌上勿堆放书包、书籍、衣服外套及杂物等。 4.所有实验仪器、耗材、药品等均属实验室所有，不得携出实验室外。每组分配之仪器、耗材请在课程开始前确定清点与保管，课程结束后如数清点缴回。公用仪器请善加爱惜使用。实验前后，请把工作区域清理擦拭，并随时保持环境清洁。 5.实验前详阅实验内容，了解实验细节的原理及操作，注意上课所告知的注意事项。实验进行中有任何状况或疑问，随时发问，切勿私自变更实验程序。打翻任何药品试剂及器皿时，请随即清理。实验后，适切记下自己的结果，严禁抄袭，确实关闭不用之电源、水、酒精灯及瓦斯等。 6.身体不适、睡眠不足、精神不济或注意力无法集中，请立即停止实验。实验时间若延长，请注意时间的管制及自身的安全，不可自行逗留实验室。 7.实验完毕，请清理实验室、倒垃圾、灭菌、关闭灯光及冷气，离开实验室前记得洗手。 8.任何意外事件应立即报告教师或实验室管理人员，并应熟知相关之应变措施。

药品 1.使用任何药品，请先看清楚标示说明、注意事项，翻阅物质安全资料，查明是否对人体造成伤害，使用完毕请放回原位。 2.新配制的试剂请清楚注明内容物、浓度、注意事项及配制日期，为避免污染，勿将未用完的药剂倒回容器内。 3.挥发性、腐蚀性、有毒溶剂（如甲醇、丙酮、醋酸、氯仿、盐酸、硫酸、 -巯基乙醇、甲醛、酚等）要在排烟柜中戴手套量取配制，取用完应随即盖好盖子，若不小心打翻试剂，马上处理。 4.有毒、致癌药剂例如丙稀酰胺（神经毒）、溴化乙啶（突变剂）、SDS（粉尘）请戴手套及口罩取用，并勿到处污染，脱下手套后，养成洗手的好习惯。 5.使用后的实验试剂和材料，应放在专用的收集桶内。固体培养基、琼脂糖或有毒物品不得倒入水槽或下水道中。 6.使用刻度吸管取物时，切勿用嘴吸取，请用自动吸管或吸耳球。仪器 1.使用仪器前先了解其性能、配备及正确操作方法，零件及附件严禁拆卸，勿私自调整，并注意插座电压（110V或220V）之类别。 2.使用离心机时，离心管要两两对称、重量平衡，离心机未停下不得打开盖子。冷冻离心机于开机状态时，务必盖紧盖子，以保持离心槽之低温并避免结霜。 3.电源供应器有高电压，切勿触摸电极或电泳槽内溶液，手湿切勿开启电源。

(完整版)细胞生物学实验测试题

细胞生物学实验测试题 1、试述荧光显微镜的原理和用途。（并操作）原理：荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。（滤光镜片：获得所需波长的激发光；光源：高压汞灯）用途：荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。 2、试述酸性磷酸酶显示法的原理及主要步骤。原理：酸性磷酸酶（ACP）是溶酶体的标志酶，通常酸性磷酸酶在pH 为5左右时发挥作用能水解磷酸酯而释放出磷酸基，PO43-与底物中硝酸铅反应生成磷酸铅沉淀物。由于这些沉淀物是无色的，需再与黄色的硫化铵反应，生成棕黄色到棕黑色的硫化铅沉淀而被显示出来。其反应过程如下： β-甘油磷酸钠+酸性磷酸酶→甘油+PO43- PO43-+Pb(NO3)2 →Pb3(PO4)2↓ Pb3(PO4)2+(NH4)2S →PbS↓(棕黑色) 主要步骤： 1、前处理：获取小白鼠或大白兔腹腔液（猪肝） 2、制片：（1）、将腹腔液（肝细胞悬液）滴一滴于冰冻的干净载玻片上，用牙签涂开，自然干燥。（2）、放入10%中性福尔马林固定液中固定30min。（3）、蒸馏水中漂洗,3-5次。（洗去固定液）（4）、磷酸酶作用液，37°C，30Min。（5）、蒸馏水中漂洗3次，5min一次。（洗去游离铅离子）（6）、1%硫化铵处理（3-5min）; （7）、吉姆沙染液复染15min;（使细胞核、轮廓显示出来）（8）、制片观察。结果：阳性细胞内有大小不等的棕色或棕黑色的颗粒即为酸性磷酸酶。对照实验：标本放入作用液前先用高温（50℃）处理 30min，使酶失去活性，做好标记，其他步骤相同。 3、试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。原理：DNA经稀盐酸（1mol/L HCL溶液）处理后，可使嘌呤碱与脱氧

细胞生物学实验讲义 2018

细胞生物学实验讲义实验一不同细胞形态观察、大小测量，结构比较一、实验目的利用光学显微系统对生命的基本组成单位——细胞进行观察，了解不同细胞的形态、结构和大小区别。二、实验原理细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞是多种多样的。要对细胞进行研究，首先要从其形态结构入手。所以，要借助显微镜的成像及放大原理，在显微镜下，才能观察到细胞的基本形态结构。三、实验内容和步骤 A、血涂片的制作 1．取末梢血1 滴，置载玻片一端，取另一边缘光滑的载玻片作为推片，放在血滴前面慢慢后移，接触血滴后稍停。血液即沿推片散开，将推片与载玻片保持30～45°角，向前平稳均匀推动推片，载片上便留下一层薄血膜。血涂片制成后，立即在空气中挥动，使其迅速干燥，以免血细胞变形。 2．操作 ①将干燥血片用甲醇固定3-5分钟。 ②将固定的血片置于被pH6.4 -6.8磷酸盐缓冲液稀释10-20倍的Giemsa染液中，浸染10-30分钟（标本较少可用滴染法）。 ③取出用水冲洗，待干后镜检。注意： ①取血滴不宜过多，以免涂片过厚，影响观察。 ②要使涂片厚薄均匀、拿片角度和速度都要适中，用力要均匀。涂片时，血滴愈大，角度愈大，推片速度愈快则血膜愈厚，反之血膜愈薄。 ③涂片一般在后半部为好，白细胞在边缘和尾端较多。 B、洋葱表皮临时制片的制作 1.准备：擦净载玻片和盖玻片 2.制片 1)把载玻片平放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水 2)用刀片在洋葱鳞片叶内侧表皮上，划出2-5平方毫米的小方格，然后用镊

子撕下方格内的表皮放在载玻片的水滴中。 3)用镊子将表皮展平。 4)用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片上的水滴，慢慢放平。3.染色 1)用滴管在盖玻片的一侧滴适量稀释的碘酒。 2)用吸水纸在盖玻片的另一侧吸染液。 4.观察 C、人的口腔上皮细胞临时制片的制作 1.准备：擦净载玻片和盖玻片 2.制片 1)把载玻片平放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴生理盐水。 2)用凉开水漱口，取消毒牙签在口腔侧壁上轻刮几下，将刮下的碎屑在载玻片的液滴中涂抹均匀。 3)用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片上的液滴，慢慢放平。 3.染色 a)用滴管在盖玻片的一侧滴适量碘液。 b)用吸水纸在盖玻片的另一侧吸碘液。 4.观察四、实验准备 1.器材：普通光学显微镜，牙签、酒精棉球、载玻片。 2.材料：洋葱表皮，口腔上皮，血涂片，永久制片。 3.试剂：碘液，Giemsa染液，生理盐水，甲醇，香柏油。五、作业描绘你所观察到的各种细胞的结构及大小（以比例尺表示）。 1、血液涂片（必做）。 2、永久制片，洋葱表皮，人口腔上皮选做其一。实验二植物细胞微丝束的观察一、实验目的掌握考马斯亮蓝R250染植物细胞内微丝束的方法。了解在微丝束细胞内的分布特点。二、实验原理

细胞生物学实验复习题

细胞生物学实验复习题（动物部分） 1.细胞生物学实验绘图有哪些要求？ 2.细胞中的酶定位有哪些方法？酸性磷酸酶定位的原理是什么？ 3.试述DNA的Feulgen染色法的原理及主要步骤。 4.叙述“细胞膜的渗透性”实验的原理、主要步骤和应注意的问题。 5、细胞膜的通透性观察实验中溶血的原因是什么？NaCl溶液和葡萄糖溶液为什么不能产生溶血？ 6、推血涂片时，要一次成功，即使不成功，也不要再推第二次，一旦推片失败，必须重新开始，为什么？ 7、如何知道试管中的红细胞溶血了？ 8、动物细胞和植物细胞相比，有哪些重要区别？ 9、骨髓细胞染色体标本制备过程中，为了保证得到较理想的实验结果，哪些因素是你认为最重要的？ 10、你所完成的动物细胞试验共观察到几种动物细胞？根据你观察的结果，哪种细胞体积或者直径最大？哪个最小？判断依据是什么？ 11、细胞核、细胞质、线粒体、染色体、细胞骨架、酶、细胞中的DNA都分别用什么方法可以得到，用什么方法可以观察到？ 12、利用PEG介导的动物细胞融合，实验原理是什么？细胞生物学实验复习题（植物部分） 1. 倒置显微镜的特点及其用途如何？ 2. 相差显微镜与普通光镜相比有哪些特殊结构？ 3. 试述荧光显微镜的原理和用途。 4. 固定液的作用是什么？说出我们实验中所用过的几种不同的固定

液及它们的实用范围。 5. 常用的组织破碎方法有哪些？各自的适用范围如何？ 6. 什么是差速离心法、密度梯度离心法？各自的用途如何？ 7. 染色法有哪些方式？各如何进行？ 8. 显示染色体的实验，其材料往往要作什么预处理？取材部位如何选择？ 9. 如何进行细胞核的分离和鉴定？叙述细胞核的结构与功能。 10. 试述用考马斯亮蓝R250来显示细胞微丝骨架的原理及其应注意的事项。 11. 如何证明不同分化状态的组织细胞主要是由于基因的选择性表达而不是由于基因的丢失所造成的？ 12. 如何进行线粒体的分离和鉴定（并说明原理）？ 13. 在分离出线粒体后，若要对其进行深入研究，技术路线如何？ 14. 在使用高速离心机时，要注意那些问题？ 15. 试述叶绿体的分离和荧光观察的过程。在分离叶绿体时，如果发现分离出来的叶绿体很小，如何验证其是不是由于分离时所造成的叶绿体破碎的结果？

细胞生物学实验教案大全

细胞生物学实验教案【经典学习资料，收藏必备】

实验一、细胞形态结构与几种细胞器的观察【实验目的】在普通光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构，掌握生物绘图的方法。【实验原理】细胞在形态上是多种多样的，有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星形等。虽然细胞的形状各异，但是它们却有共同的基本结构特点，都由细胞膜（动物）、细胞壁（植物）、细胞质和细胞核组成。细胞中的各种细胞器，如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等，一般经过一定固定染色处理后，大多数在光学显微镜下是可以看见的（图）。细胞器的形态结构在普通光学显微镜下与电子显微镜下所看到的结构有很大的差别。（自拍图）（a）（b）（c）（d）图 1 细胞形态结构 a. 柿胚乳细胞示胞间连丝； b. 马蛔虫受精卵分裂中期示中心粒； c. 兔的神经细胞中高尔基体； d.小鼠肝细胞线粒体【实验仪器、材料和试剂】 1. 仪器：复式显微镜、擦镜纸 2．材料：洋葱根尖切片、小白鼠肝切片、兔神经节切片、马蛔虫受精卵切片3．香柏油或石蜡油、二甲苯【方法与步骤】

一、洋葱根尖切片细胞的观察先用低倍镜观察根尖的纵切面，注意分生区、伸长区、成熟区细胞的异同，然后再仔细观察细胞的形态结构，特别注意细胞的形状、大小，以及细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡的形态结构。二、兔神经节细胞切片高尔基体的观察先在低倍镜下找到兔神经节细胞，然后转用高倍镜观察，可看到细胞内淡黄色的背景上有黄褐色的细胞核，核的周围分布着许多深褐色的（硝酸银镀染）高尔基体，呈弯曲的线状，颗粒状，少量分散在细胞质。三、小白鼠肝细胞切片线粒体的观察先用低倍镜后用高倍镜观察，可见到许多肝小叶，每小叶有许多紧密排列成索状的多角形的肝细胞，细胞中央有大而圆的细胞核。这时，转用油镜观察，可见到细胞质内分布着许多被苏木精染成深紫色的线粒体，呈颗粒状和线状。四、马蛔虫受精卵切片中心体的观察 1．取马蛔虫受精卵切片，在显微镜下找到充满子宫腔的受精卵，每个马蛔虫受精卵外围有一层较厚的卵膜，膜内有宽大的围卵腔，各围卵腔内有处在不同分裂期的卵细胞。找到分裂中期的细胞，在细胞中央被染成蓝色条状或棒状的结构，这就是染色体。在染色体两侧可见各有一个较小的，亦被染成蓝色的小粒，称中心粒。在中心粒的周围可见呈放射状的星丝。实验一、细胞的显微测量【实验目的】掌握显微测微计的基本原理及使用方法。【实验原理】细胞长度、面积、体积的测量是研究正常的或病理组织细胞的基本方法之一。在显微镜下用来测量细胞长度的工具叫显微测量计，由目镜测微尺（ocular micrometer）和镜台测微尺（stage micrometer）组成，两尺要配合使用。目镜测微尺是放在目镜内的一直径为2cm圆形玻片上，里面有100等分格的刻度尺。每一小格表示的实际长度随不同的显微镜、不同放大倍数的物镜而不同。镜台测微尺是一块特制的载玻片，在它的中央由一片圆形盖片封固着一具有精细刻度的标尺，标尺全长为lmm，分为100等份的小格，每小格的长度为0.01 mm（10μm），标尺的外围有一小黑环，便于找到标尺的位置。显微测量时，先用镜台测微尺标定目镜测微尺每小格所表示的实际长度。在测量细胞时，移去镜台测微尺，换上被测标本，用目镜测微尺即可测得观察标本的实际长度。【实验仪器、材料和试剂】（一）仪器：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、解剖剪、解剖镊、注射器、载玻片、盖玻片、试管、无菌采血针（二）材料：血涂片（三）试剂：生理盐水、瑞氏（Wright）染色液【方法与步骤】

(完整版)分子生物学实验技术考试题库

一、名词解释 1.分配常数：又称分配系数，是指一种分析物在两种不相混合溶剂中的平衡常数。 2.多肽链的末端分析：确定多肽链的两末端可作为整条多肽链一级结构测定的标志，分为氨基端分析和羧基端分析。 3.连接酶：指能将双链DNA中一条单链上相邻两核苷酸连接成一条完整的分子的酶。 4.预杂交：在分子杂交实验之前对杂交膜上非样品区域进行封闭，用以降低探针在膜上的非特异性结合。 5.反转录PCR：是将反转录RNA与PCR结合起来建立的一种PCR技术。首先进行反转录产生cDNA,然后进行常规的PCR反应。 6.稳定表达：外源基因转染真核细胞并整合入基因组后的表达。 7.基因敲除：是指对一个结构已知但功能未知或未完全知道的基因，从分子水平上设计实验，将该基因从动物的原基因组中去除，或用其它无功能的DNA片断取代，然后从整体观察实验动物表型，推测相应基因的功能。 8.物理图谱：人类基因组的物理图是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对(bp，kb，Mb)作为基本测量单位(图距)的基因组图。 9.质谱图：不同质荷比的离子经质量分析器分开后，到检测器被检测并记录下来，经计算机处理后所表示出的图形。 10.侧向散射光：激光束照射细胞时，光以90度角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。 11.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的层析。 12.Edman降解：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。 13.又称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)：是能够特异识别双链DNA序列并进行切割的一类酶。 14.电转移：用电泳技术将凝胶中的蛋白质，DNA或RNA条带按原位转移到固体支持物，形成印迹。 15.多重PCR：是在一次反应中加入多对引物，同时扩增一份模板样品中不同序列的PCR 过程。 16.融合表达: 在表达载体的多克隆位点上连有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。 17.同源重组：发生在DNA同源序列之间，有相同或近似碱基序列的DNA分子之间的遗传交换。 18.遗传图谱又称连锁图谱(linkage map)，它是以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”，以遗传学距离为图距的基因组图。 19.碎片离子：广义的碎片离子为由分子离子裂解产生的所有离子。 20.前向散射光：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度向前方散射的讯号用于检测细胞等离子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 21.亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的一种层析法。(利用分子与其配体间特殊的、可逆性的亲和结合作用而进行分离的一种层析技术。)

细胞生物学实验

细胞培养基本理论一细胞培养概述细胞培养（cell culture）模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。群体培养（mass culture）将大量细胞置于培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，形成均匀的单层细胞或单细胞悬液。克隆培养（clone culture）即将少数的细胞加入培养瓶中，贴壁后彼此间隔距离较远，经过繁殖每一个细胞形成一个集落，称为克隆。组织培养（tissue culture）指把活体的组织取出，分成小块，直接置于培养瓶底或通过胶原纤维血浆支持物的培养瓶底来进行培养。特点：1.，组织不失散，细胞保持原有的组织关系。2，形成生长(cut growth)或形成由扁薄细胞构成的单层细胞培养物。3，在体外生长时，细胞间呈相互依存、互相影响的关系。器官培养（organ culture）将活体中器官或器官一部分取出，在体外生长、生存，并使其保持器官原有的结构和功能特征的培养。特点：1，培养的器官在合适的条件下能生长和分化，存活数周或1 年。2，观察受限，只能用组织切片的方法观察或用透射电镜、扫描电镜观察。细胞培养优点：.1．活细胞：同时、大量、均一性、重复性；2．可控制：各种物理、化学、生物等因素可调控；3．研究方法多样：倒置、荧光、电子、激光共焦显微镜、流式细胞术、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记；4．应用广：不同物种、年龄、组织，正常或异常缺点：人工所模拟的条件与体内实际情况仍不完全相同；当细胞被置于体外培养后，生活在缺乏动态平衡的环境中，时间久了，必然发生变化。三细胞的形态和类型由不同生长方式造成的差异呈悬浮生长时，因生长在液体环境中，胞内渗透压高于周围液体环境，因此胞体基本呈圆形。呈贴附于支持物上生长的细胞，开始为圆形，很快过渡成扁平形，并逐渐恢复至原先的细胞形态. 细胞来源：成纤维型细胞；上皮型细胞；其它，不定型细胞按生长方式：贴壁型细胞（Monolayer cells）；悬浮型细胞（Suspension cells）绝大多数有机体细胞属贴壁型细胞，只有少数细胞类型如某些肿瘤细胞和白细胞可在悬浮状态下生长。按细胞形态(贴壁细胞）：成纤维型细胞；上皮型细胞；其它，不定型贴壁型生长细胞或锚着依存性细胞处于体外培养状态下的贴附生长型细胞在形态上表现单一而失去了在体内原有的某些特征。形态各异反映其胚层起源。如来源于内外胚层的细胞多呈上皮型；来自中胚层的则易呈成纤维细胞型。分为成纤维型细胞；皮型细胞；游走型细胞；多形型细胞贴壁型细胞形态比较成纤维型细胞：梭形或不规则三角形；中央有卵圆形核；胞质向外伸出长短不同的突起；中胚层间质起源上皮型细胞：扁平不规则多角形；细胞中央有圆形核；紧密相连单层膜样生长；内、外胚层细胞如皮肤、表皮衍生物、消化管上皮等游走型细胞：散在生长，一般不连成片；细胞质经常伸出伪足或突起；活跃的游走或变形运动；羊水细胞培养的早期多形细胞型：难以确定规律和稳定的形态；如神经组织的细胞等

杨淑慎《细胞工程》复习总结

第一章细胞工程（Cell Engineering）是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。 1.植物细胞工程：以植物细胞组织为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物新个体，或获得有用物质的过程。 2.动物细胞工程：以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作，使细胞产生某些人们所需要的生物学特性，从而改良品质，加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。 3.外植体：是指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。 4.培养基的基本成分：水、无机盐、有机成分、激素、其他。 5.细胞工程分类：器官、组织和细胞培养；原生质体培养；植物胚胎培养；动物胚胎工程；转基因动植物；胚胎干细胞；染色体工程。 6.细胞学说的提出者：Schwann和Schleiden 第三章 1.细胞的全能性：一个细胞所具有的产生完整个体的固有能力。 2.植物细胞按照分裂能力分为三类：第一类是始终保持分裂能力，如茎尖、根尖及形成层细胞；第二类是永久失去分裂能力的终端分化细胞，如筛管、导管、气孔保卫细胞等特化细胞；细胞，如表皮细胞及各种薄壁细胞。第三类是在通常情况下不分裂，但在受到外界刺激后可重新启动分裂的G 3.细胞脱分化（dedifferentiation）：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程 4.蛋白体的出现及细胞质密度的增加是细胞开始脱分化的标志。 5.细胞分化（Differentiation）：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。 6.极性（polarity）：是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。 7.器官发生：是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。 8.器官发生的类型：1）、先芽后根；2）、先根后芽；3）、根芽同步发生。 9.影响器官发生的因素：1）、激素；2）、光照；3）、培养物的年龄；4）、外植体的生理状态 10.体细胞胚：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞），统称为体细胞胚或胚状体。 11.体细胞胚定义的3方面界定： 1）、体细胞胚是离体培养的产物，只限于离体培养范围使用，以区别于无融合生殖胚。2）、体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚。3）、体细胞经过了胚胎发育过程，以区别于离体培养中器官发生形成个体的途径。 12.体细胞胚形成途径：1）、直接从外植体上产生体细胞胚 2）、由愈伤组织产生 3）、悬浮培养中由胚性细胞复合体表面产生 4）、由悬浮培养中游离的单细胞产生 5）、由单倍体细胞产生 13.愈伤组织：是一团无序生长的细胞，这些细胞大都处于随机分裂状态。 14.离体培养下细胞全能性表达是通过细胞分化和再分化实现的。 15.器官发生和体细胞胚胎发生是植物细胞再生个体的基本途径。 16.人工种子又称合成种子或体细胞种子：是将植物离体培养产生的体细胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中在适宜的条件下发芽出苗。 17.人工种子的优点： 1）、培养条件可以人为控制具有省地省工可直接在田间播种等优点。2）、在人工种子制作中可加入营养物质、植物生长调节剂、固氮菌、杀虫剂等。3）、用于制作人工种子的体细胞胚可利用生物反应器大规模培养大大提高了效率。4）、一些难以得到天然种子的珍稀植物或脱毒苗、基因工程植株均可利用人工种子技术加速用于生产。第九章和第四章 1.体细胞无性系：由任何形式的细胞培养所产生的植株统称为体细胞无性系。 2.体细胞无性系变异：由体细胞无性系表现出来的变异。 3.离体培养中的遗传与变异特点: 1)、离体培养中的遗传稳定性 2)、离体培养下的变异特点:变异的普遍性;变异的局限性;嵌合性4.培养类型原生质体＞细胞＞组织器官。性细胞＞体细胞

细胞生物学实验步骤

冻存细胞的复苏 1、于液氮罐中取出冻存管。 2、37℃水浴锅中摇动，使之快速融化。 3、超净台内酒精棉球擦拭，打开冻存管，吸出细胞悬液，注入离心管中，再滴加2倍培养液，混匀。 4、离心：1500转/分，3分钟，弃上清。 5、吸取2-3ml培养液加入到离心管中，吹打制悬，接种到培养瓶中，37℃培养。组织块法培养骨骼肌细胞 1、将新生大鼠处死，再用酒精棉球擦拭其全身消毒，带入超净台内于肩关节和髋关节处剪取四肢（去爪），置培养皿中。 2、PBS液中，清理血污，剥去皮肤。 3、用PBS液洗涤两次，并剔除脂肪，结缔组织，血液等杂物。 4、用将肌组织从骨骼上剪切下来，PBS液清洗后转移至干净培养皿中。 5、加少量培养液，将组织剪成1mm3小块，用吸管将其转移到培养瓶，贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上，将培养液加至瓶中，培养液勿接触组织块。入37℃培养箱静置0.5-1小时，轻轻翻转培养瓶，使组织浸入培养液中（勿使组织漂起），37℃继续培养。贴壁细胞的传代和冻存 1、超净台中打开细胞培养瓶，用吸管将培养液吸出。 2、加入PBS液，使其覆盖培养瓶底部，轻轻摇动后倒掉。 3、加入消化液，以覆盖整个培养瓶底部，盖好瓶盖，于倒置显微镜下观察，待见到细胞质回缩、细胞间隙增大后于超净台内倒掉消化液。 4、加培养液终止消化。 5、用吸管吸取培养瓶中的培养液，反复吹打瓶壁，制备细胞悬液。 6、将细胞悬液吸入离心管中，离心1500转/分，3分钟，倒掉上清。 7、加入3ml培养液于离心管中，吹打制悬。 8、取2ml细胞悬液进行接种后，剩余细胞悬液继续离心1500转/分，3分钟。 9、去上清，加入1ml冻存液，制悬，转移到冻存管，再按照-4℃1小时→-20℃ 2小时→-80℃2小时→液氮的顺序进行冻存。细胞计数

细胞生物学实验考考试样题及实验思考题答案

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