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拟南芥室内培养技术_李俊华

拟南芥室内培养技术_李俊华
拟南芥室内培养技术_李俊华

植物学通报 2004, 21 (2): 201 ̄204

Chinese Bulletin of Botany

技术与方法

拟南芥室内培养技术①

1,3李俊华 2张艳春 1徐云远 1种 康② 3王 辉1 (中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室 北京 100093)2 (华东师范大学生物学系 上海 200062) 3 (西北农林科技大学农学院 杨凌 712100)

摘要 本文报道了室内培养拟南芥的一些简便易行的改进技术。采用我们改进的营养土、蛭石、素沙混合培养介质和直播方式培养拟南芥, 并根据其生物学特性在温度、空气湿度、土壤水分和光照等方面给予适当管理,能培养出生长更健壮、更好地满足实验要求的拟南芥植株。此外还介绍了播种、浇水、生育期调节、种子保存、病虫害防治和防混杂等环节的一些技巧措施。与其他培养方法相比,此法不仅简便、效果好,而且适合较简易的培养条件。

关键词 拟南芥,培养技术

Modification of Indoor Culture Techniques for

Arabidopsisthaliana

1,3 LI Jun-Hua 2ZHANG Yan-Chun 1XU Yun-Yuan 1CHONG Kang② 3WANG Hui1(The Key Laboratory of Photosynthesis and Environmental Molecular Physiology, Institute of Botany,

the Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093)

2(Department of Biology, East China Normal University, Shanghai 200062 )3(College of Agronomy, Northwest SciTech University of Agriculture and Forestry, Yangling 712100)

Abstract Arabidopsis thaliana is a model plant in research of genetics, molecular biology anddevelopmental biology. Several culture problems, however, exist in many laboratories of our country.We developed some indoor culture techniques of Arabidopsis for the laboratories. The modifiedprotocol provided an appropriate indoor conditions for Arabidopsis growth and development. Itemphasized culture medium, air humidity, temperature and photoperiod.

Key words Arabidopsis thaliana , Culture techniques

拟南芥(Arabidopsis thaliana)我国分类学者又称之为鼠耳芥, 是十字花科拟南芥属植物,由于其具有生育期短、个体小及基因组小等特点,长期以来被作为分子生物学、发育生物学和遗传学研究的模式材料,尤其是作为第一个经完全测序的有花植物,其基因组全序列在2000年底完全测定并公开发表后,更加激发了人们对其基因结构与功能进行更为详尽研究的兴趣(黄

①国家自然科学基金资助项目(30170094)。

②通讯作者。Author for correspondence. E-mail:chongk@ns.ibcas.ac.cn

作者简介:李俊华,男,1977年出生,硕士研究生,目前从事植物花发育的分子生物学和植物遗传育种研究。种康,博士,中国科学院植物研究所研究员,博士生导师。研究方向:植物发育功能基因组学。

王辉,西北农林科技大学教授,博士生导师。研究方向:小麦遗传育种。

收稿日期:2003-03-13 接受日期:2003-06-16 责任编辑:孙冬花

20221(2)娟和李家洋,2001)。虽然我国对于拟南芥的研究起步晚,研究的规模小,但是由于拟南芥作为模式植物的独特的优点,在许多植物学和农学等相关的实验室中,它已越来越多的被运用,其研究成果将有助于加深对其他植物相关信息的认识和理解,甚至直接应用于重要农作物的改良。实验过程中,培养好拟南芥是一个十分重要的环节。然而,拟南芥种子小,幼苗弱,对生长环境又有一定要求,这给它的培养带来了一定困难。目前,国内很少有实验室具备国外人工气候室培养拟南芥具备的全方位调控条件,在拟南芥培养方面存在成活率低,虫害严重,培养周期长等问题。本文提供笔者在与同行交流和长期实践中总结的在简易条件下培养拟南芥的一套简便、规范和高效的方法技巧,以供同行参考。

1 材料与方法

实验材料是拟南芥(Arabidopsis thaliana (L.) Heynh) Wassilewskija生态型, 选用了4种培养方法,即移栽法(陈敏和白书农,1995)、蛭石培养法、蛭石和营养土混合培养法和本实验室改进后的培养方法。

(1)移栽法:种子表面消毒后播于MS无菌培养基上光照培养,4周后将苗移栽到培养土(市售花卉营养土)和蛭石按体积比1:1混合的培养介质中,用塑料保鲜膜将盆覆盖2 d以缓苗;(2)蛭石培养法:将种子直接播于蛭石中,覆膜5 d,生育期内浇灌MS营养液;(3)蛭石和营养土混合培养法(1:1法): 将种子直播于营养土和蛭石按1:1混合的培养介质中,覆膜5 d;(4)3种基质培养方法:将种子直播于营养土、蛭石和素沙按体积比1:1:1均匀混合的培养介质中,覆膜5 d。在22℃、人工光照(白色荧光灯,16 h光照,8 h黑暗,光照强度为63 mE.s-1.m-2)和空气相对湿度为65%的培养间中培养。

2 结果与讨论

2.1 培养方法的比较

拟南芥在4种培养方法下的生长情况如表1所示。移栽法种植的拟南芥在移栽后需要经过一定时间的缓苗期才能转入正常生长,此过程使拟南芥成活率降低并且发育延迟,在培养土中扎根浅,导致其长势差;另外,移栽法种植拟南芥操作费工,对实验技术有一定要求,必须在前期培养基培养阶段完全避免污染。蛭石培养法培养拟南芥因蛭石不含养分,必须在拟南芥全生育期内人工提供养分;蛭石本身质地疏松,但浇水后却变黏重,通透性变差,易生真菌和藻类,造成烂根和根系活力降低,因此此法培养的拟南芥仍然成活率不高,苗弱,影响到了后期的开花结果。蛭石和营养土混合培养法是目前国内许多实验室使用的方法。实

表1 不同培养方法的拟南芥生长情况

Table 1 Growth of Arabidopsis thaliana

培养方法成活率始花时间开花时株高莲座直径果荚长度每荚种子数生活周期

CultureSurvivalTime needHeight when Diameter ofLength ofSeed numberLife cycle

method rate(%) for florescence floweringthe rosette the silique per silique (weeks)

 (weeks)(cm)(cm) (cm)

(1)705 ̄64.5 ̄6.01.8 ̄3.40.8 ̄1.020 ̄3012 ̄16

(2)756 ̄73.1 ̄4.81.7 ̄3.50.8 ̄1.020 ̄3012 ̄16

(3)808 ̄99.2 ̄10.54.5 ̄6.51.2 ̄1.445 ̄5513 ̄17

(4)10045.0 ̄6.13.3 ̄4.21.1 ̄1.230 ̄358 ̄10(1). Transplantation; (2). Vermiculite; (3). Vermiculate plus nutritive soil; (4). Three medium

2032004李俊华等:拟南芥室内培养技术

验发现,该法使用的培养基质过分黏重,通透性差,易积水,这些都易导致烂根及“烧苗”,造成幼苗夭折;从实验结果看,此法培养的拟南芥苗期长势弱,但营养生长逐渐变旺盛,生殖生长延缓,生活周期过长,不利于加快实验进程。采用3种基质培养法所使用的培养介质,既有拟南芥苗期根系生长所需的透水和透气性,又能为拟南芥后期生长持续提供养分,且水、肥和气供应均衡一致,因此在这种培养介质上培养的拟南芥成活率高,生长健壮,生长发育进程快且整齐,有关指标符合国际上文献报道中的标准,因此能最好地发挥拟南芥个体小和生育期短的优点,且降低了实验的系统误差。因此3种基质培养法可作为实验用拟南芥的简便易行且效果好的方法。

2.2 播种

种子播前需在湿润条件下置4℃冰箱内低温处理3 ̄4 d,对于已在冰箱内保存一个月以上的种子可不必低温处理。将准备好的培养基质填入培养盆中,微振使之平整,盆土不可装太满,土面到盆沿留约1.5 cm距离(图1),用水从盆底的孔将盆土浸湿。为使种子直播均匀和提高播种速度,可用蘸湿少许的竹签沾取单粒种子点播于培养介质表面。播时注意控制密度,每株拟南芥占约5 cm2空间即可。播后不需覆土。

2.3 培养条件

2.3.1 温度 拟南芥在22℃上下生长较好,温度过高(高于28℃)则开花结实受到一定影响,因此应特别注意避免培养间或培养箱在夏季长时间断电或发生空调故障而使温度失控。拟南芥在温度高时生长快,温度低时生长慢,因此可根据实验目的和进程安排通过选择不同的培养温度来调节拟南芥的生长速度(最低可在0 ̄4℃条件下放置,此时拟南芥几乎停止生长)。2.3.2 空气相对湿度 拟南芥喜湿润。为保持种子萌发时需要的较高空气湿度,播种后用塑料保鲜膜将盆覆盖(膜上扎数个通气孔),出苗后揭开(出苗约需5 d)。如需移栽,在移栽后也应覆膜2 d。生长环境的空气相对湿度比较高时拟南芥才能生长良好,否则结实少,植株瘦弱,叶易干枯。在22℃培养时培养室的RH值最好不低于50%,如有人工气候室条件,最好将RH值保持在80%以上。

2.3.3 土壤水分 拟南芥不耐旱,缺水时应及时浇水。培养盆可放于平底托盘上,浇水时往托盘中加水,使水从盆底部的孔上渗,这样可避免直接往培养基质上浇水时冲倒小苗。应该注意的是要严格控制浇水次数,盆土不干不浇。浇水过多则不利于壮根,介质表面易生藻类及苔藓,更为有害的是过湿的盆土易招蝇类(特别是一种称之为蘑菇蝇的昆虫)在基质表面繁殖蛆类幼虫,这些虫子可咬食根和莲座叶,尤其对幼苗危害大。

图 1 培养装置示意图Fig. 1 Culture pot2.3.4 光照 拟南芥在长光照下开花早(韩玉珍等,1998),生长周期短。一般采用16 h光照和8 h黑暗条件培养拟南芥。在24 h光照条件下培养的拟南芥略显瘦弱,开花期提前至21 d,此外未见其他生长异常现象。光周期也可用来调控拟南芥的生长,如在8 h光照和16h黑暗的短光照条件下,拟南芥营养生长期延长,开花晚(约需8周),但营养积累多。

2.4 收种及种子保存

果荚变黄后直接剪取收种。

国外有专门的塑料种子

20221(2)娟和李家洋,2001)。虽然我国对于拟南芥的研究起步晚,研究的规模小,但是由于拟南芥作为模式植物的独特的优点,在许多植物学和农学等相关的实验室中,它已越来越多的被运用,其研究成果将有助于加深对其他植物相关信息的认识和理解,甚至直接应用于重要农作物的改良。实验过程中,培养好拟南芥是一个十分重要的环节。然而,拟南芥种子小,幼苗弱,对生长环境又有一定要求,这给它的培养带来了一定困难。目前,国内很少有实验室具备国外人工气候室培养拟南芥具备的全方位调控条件,在拟南芥培养方面存在成活率低,虫害严重,培养周期长等问题。本文提供笔者在与同行交流和长期实践中总结的在简易条件下培养拟南芥的一套简便、规范和高效的方法技巧,以供同行参考。

1 材料与方法

实验材料是拟南芥(Arabidopsis thaliana (L.) Heynh) Wassilewskija生态型, 选用了4种培养方法,即移栽法(陈敏和白书农,1995)、蛭石培养法、蛭石和营养土混合培养法和本实验室改进后的培养方法。

(1)移栽法:种子表面消毒后播于MS无菌培养基上光照培养,4周后将苗移栽到培养土(市售花卉营养土)和蛭石按体积比1:1混合的培养介质中,用塑料保鲜膜将盆覆盖2 d以缓苗;(2)蛭石培养法:将种子直接播于蛭石中,覆膜5 d,生育期内浇灌MS营养液;(3)蛭石和营养土混合培养法(1:1法): 将种子直播于营养土和蛭石按1:1混合的培养介质中,覆膜5 d;(4)3种基质培养方法:将种子直播于营养土、蛭石和素沙按体积比1:1:1均匀混合的培养介质中,覆膜5 d。在22℃、人工光照(白色荧光灯,16 h光照,8 h黑暗,光照强度为63 mE.s-1.m-2)和空气相对湿度为65%的培养间中培养。

2 结果与讨论

2.1 培养方法的比较

拟南芥在4种培养方法下的生长情况如表1所示。移栽法种植的拟南芥在移栽后需要经过一定时间的缓苗期才能转入正常生长,此过程使拟南芥成活率降低并且发育延迟,在培养土中扎根浅,导致其长势差;另外,移栽法种植拟南芥操作费工,对实验技术有一定要求,必须在前期培养基培养阶段完全避免污染。蛭石培养法培养拟南芥因蛭石不含养分,必须在拟南芥全生育期内人工提供养分;蛭石本身质地疏松,但浇水后却变黏重,通透性变差,易生真菌和藻类,造成烂根和根系活力降低,因此此法培养的拟南芥仍然成活率不高,苗弱,影响到了后期的开花结果。蛭石和营养土混合培养法是目前国内许多实验室使用的方法。实

表1 不同培养方法的拟南芥生长情况

Table 1 Growth of Arabidopsis thaliana

培养方法成活率始花时间开花时株高莲座直径果荚长度每荚种子数生活周期

CultureSurvivalTime needHeight when Diameter ofLength ofSeed numberLife cycle

method rate(%) for florescence floweringthe rosette the silique per silique (weeks)

 (weeks)(cm)(cm) (cm)

(1)705 ̄64.5 ̄6.01.8 ̄3.40.8 ̄1.020 ̄3012 ̄16

(2)756 ̄73.1 ̄4.81.7 ̄3.50.8 ̄1.020 ̄3012 ̄16

(3)808 ̄99.2 ̄10.54.5 ̄6.51.2 ̄1.445 ̄5513 ̄17

(4)10045.0 ̄6.13.3 ̄4.21.1 ̄1.230 ̄358 ̄10(1). Transplantation; (2). Vermiculite; (3). Vermiculate plus nutritive soil; (4). Three medium

培养基制备的基本方法和注意事项

培养基制备的基本方法和注意事项 1.培养基配方的选定 同一种培养基的配方在不同着作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外.一般均应尽量收集有关资料.加以比较核对.再依据自己的使用目的加以选用,记录其来源。 2 .培养基的制备记录 每次制备培养基均应有记录,包括培养推各称,配方及其来源.和各种成份的牌号。最终pH 值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。 3.培养基成分的称取 培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱.最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后.还应进行一次检查。 4.培养基各成份的混合和溶化 培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化.也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。 待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。 5.培养塞pH 的初步调整 培养基各成分完全溶解后,应进行pH 的初步调正,因培养基在加热消毒过程中、pH 会有所变化,例如,牛肉浸液约可降低.而肠浸液pH 却会有显着的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH ,保证培养基的质量。 pH 调正后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。

室内设计专业职业生涯规划

我的职业生涯规划 环境艺术学院12421班 姓名:潘冠忠

在当前国际发展大环境的条件下,中国的室内设计行业虽然有了一定的发展。但是,正如大家所看到的那样,中国的室内设计无论从技术上还是设计上,都与发达国家有一定的差距。随着人类社会高速发展,无论在自然科学还是人文科学上,我们都取得了巨大的进步。近两百年的工业社会带给人们越来越丰富的物质生活,人们对生活品质的要求也相应的越来越高。 首先是住房问题,人们对家具以及室内设计的追求越来越完美。并且,随着国家对室内设计行业的重视,我们明显的感觉到室内行业成为提高人们精神享受不可或缺的一部分。据统计,每年中国消耗的长期成材木材占我国木材消耗量的一半左右(其中不包括进口木材)。 当代人类的生存环境,是以建筑群为特点的人工环境,城市是人工化的产物,但是生存环境越来越狭小,这就需要我们设计师的来创作出一种舒适的环境,或高贵典雅或清新质朴…带给人们一定的精神享受。无论是私人住宅还是公共环境的优雅,天长日久总会带给人重要的影响。 另外,社会发展和人类认识的不断提高,对设计的要求也越来越高,设计作品不仅要促进人类自身的发展,也要推动自然环境的改善和提高,我们可以在以下几个方面做出一定的努力来提高我们的设计水准。比如说:自然光源的利用,自然通风系统的建设使用,能源的节约,环保的注意等。 职业生涯规划,对大学生而言根据自己的专业特长,知识结构,兴趣爱好结合市场环境以及社会环境,对将来要从事的职业以及要达

到的职业目标所做的方向性的预测与初步定位。大学期间,学生的个体能力迅速提高,职业兴趣趋于稳定,逐步形成了对未来职业的预期。大学生职业生涯规划对未来个人职业走向和职业发展具有十分深远的影响。 通过对自己职业生涯的规划,大学生可以解决好职业生涯中的四定——定向、定点、定位、定心,尽早确立自己的职业目标,地域范围把握自己的职业定位,保持平稳和正常的心态,按照自己的目标和理想有条不紊,循序渐进的进行努力。 职业生涯规划有助于全面提高大学生的综合素质,避免学习的盲目性和被动性。规划个人的职业生涯,可以使职业目标和实施策略了然于心,并便于从宏观上予以调整和掌控,能让大学生在职业探索和发展中少走弯路,节省时间和精力;同时大学生职业生涯规划还能对大学生起到内在的激励作用,是大学生产生内在的学习和实践的动力,激发自己为实现阶段目标和终极目标而努力。 职业生涯规划可以发掘自我潜能,增强个人实力。一份行之有效的职业生涯规划将会引导你正确认识自身的个性特质,现有与潜在的资源优势,帮助你重新对自己的价值进行定位;树立明确的职业发展目标与理想;引导你评估个人目标与现实之间的差距。另外,职业生涯规划可以增强发展的目的性与计划性,提升成功的机会。最后,职业生涯规划帮助我们更好的应对竞争与市场经济带来的各种各方面的变化。 总之,做好一份切实可行的职业生涯规划对自身的发展具有十分

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艺术设计专业人才培养方案 (2013年修订) 一、专业名称:设计专业 二、专业代码:670101 三、入学要求:高中毕业生、中等职业学校毕业生或同等学历者 四、教育类型及学历层次 (一)教育类型:高等职业教育 (二)学历层次:全日制大专 (三)学制:三年 五、人才培养目标 本专业培养拥护党的基本路线,适应社会文化事业和文化产业需要的德、智、体、美全面发展的,具有必备的理论知识和较强的实践能力,能从事室内外设计、装饰设计、平面设计等岗位工作的高端技能型设计专业人才。 具体要求: 1、正确理解和掌握马列主义、毛泽东思想和中国特色社会主义理论体系等基本原理,热爱中国共产党、热爱社会主义祖国,做有理想、有文化、有道德、守纪律的为中国特色社会主义现代化服务的合格人才。 2、正确理解和掌握马列主义艺术理论和党的文艺方针、政策。 3、具有必备的艺术设计基础理论知识和艺术设计专业技能技巧,具有能适应室内外设计、建筑装饰施工管理、平面设计与制作、装饰设计与制作的工作能力。 4、具有较强的市场需求的适应能力,工作能力,有创业、创新精神,良好的职业道德和健全的体魄。具有相应的英语水平和一定的计算机能力。 5、具有良好的心理素质和文明的行为习惯,胜任岗位要求。 六、人才培养规格要求 1、知识结构与要求 ①具有必需的文化知识。

②掌握艺术设计理论基础、室内设计制图与识图、室内外设计效果图表现、装饰材料与工艺、VI设计、书籍装帧设计、广告招贴设计、装饰设计等相关理论知识。 ③熟悉、了解中、西方艺术设计的历史、发展脉络及学科前沿。 ④了解室内设计、平面设计、装饰设计的风格流派及其代表作品。 ⑤熟悉、了解相关的姊妹艺术,具有广阔的专业知识面。 2、能力结构与要求 ①具有室内方案设计与表现、平面设计与传达、装饰设计与制作的能力。 ②具有一定的装饰材料、施工工艺识别与选择能力。 ③具有一定的广告宣传与推广能力。 ④具有敏锐的专业视角艺术设计发展动态与艺术作品的能力。 ⑤具有辨析各流派、风格、时期的室内外设计、平面设计与装饰设计作品的能力。 3、素质结构与要求 ①掌握马克思主义、毛泽东思想等中国特色社会主义理论体系的基本原理。 ②热爱设计艺术,有较高的文化素养,遵纪守法,团结协作,爱岗敬业,树立德艺双馨的思想,具有良好的职业道德。 ③具有健康的体魄,美好的心灵和健康的人生观、世界观。 4、技能要求 设计专业室内设计专业方向毕业生应达到室内设计(室内设计员员)相应的职业岗位中级及以上技能水平并具有熟练室内方案设计及表现的基本能力与素养。 七、职业范围 艺术设计职业范围如下:

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选拔和培养人才的四个注意事项 --明阳天下拓展随着行业垄断和企业日扩大经营规模需求的日益增加,企业对人才的需求的情况可以说是求贤若渴。但由于空降兵在我国的短命,所以大多企业便把选拔人才的方向转到了企业内部。但我国的大多数企业,尤其是中小型企业很少有人才储备的观念,大都是到了破不得以的时候才赶鸭子上轿,开始虽然是周瑜打黄盖,但结果通常是不欢而散。所以,一个企业只有真正解决了人才储备,即对人才充分做到了选拔和培养,才能真正解决企业人才匮乏的问题。 一、如何选拔人才 在一次企业培训公开课中,笔者听到这样一个故事。从前有个蝎子想要过河,但它不会游泳。正在它发愁的时候旁边跳过来一只青蛙。于是它就对青蛙说:“青蛙、青蛙,你背我过河好么?”青蛙回答道:“当然好,但我不能,因为你可能在我背你过河的时候蜇我。”“可我为什么要这么做呢?”青蛙反问道,“这对我没有任何好处,如果你死了我也会葬身鱼腹的。”青蛙虽然知道蝎子的狠毒,但想想它的话也有道理。于是背着蝎子就游到了水中。这时突然蝎子弯起了尾巴蜇了青蛙一口。疼痛中的青蛙大声喊道:“你为什么蜇我,这对你也没有好处,如果我死了,你也会沉下去的。”可蝎子却边下沉边说:“可你千万别忘了我是蝎子,只要我还是蝎子,就一定会蜇你的,这是我的天性。” 这是一个很传统很古老的智慧。但我们不得不承认它在今天的社

会中依然很有用处。也许有些人会问到,人虽然本性难移,但还是可以通过教育培养得到改善的。或者说选拔人才的关键是要看才干和个人能力。这两点笔者当然不否认。但笔者更认为在注重这两点的同时,更应该注重的是这个人的本性和人品,尤其是比较重要的职位,更应如此。教育当然会改变很多,比如人的行为习惯和行为动机,也许你可以举出1000个例子来证明你的观点,但它要花费的时间和精力通常是我们企业负担不起的。不公平的说,优秀的企业是选拔合格的人才放在适当的位置上,而不是培养人才放在合适的位置上,尤其是考虑的企业运营资本和战略经营时机的时候。所以笔者认为选拔人才在先,培养在后。而不是普遍培养,重点选拔。不但费时费力,还会造成部分人员因为失望而产生不必要的流动。 二、提出合理的绩效 企业选拔人才,当然会有让他们做的事情。但如何能让他们委依重任,又能很好的完成工作任务呢?提出合理的绩效要求很是重要。过高或过低都是很不适宜的。要有挑战,又要够得到。但也不能只留下问题,而不予指导,这也是很多企业的通病。上级领导下目标,下级领导满地跑。为什么呢?不知道怎么做。所以,尤其是对待新提拔和新重用的人们来说,不但要给方向,还要帮助寻找路径,并提供相应的资助,才能达到令人满意的绩效。同时有两点也要格外注意。一是一定要有完成绩效的时间,另一个就是明确的叙述出公司的绩效标准是什么?也就是说在什么时间内完成什么样的任务。 三、适时的激励

室内设计专业个人职业生涯规划范文

室内设计专业个人职业生涯规划范文 做好职业生涯规划能帮助室内设计专业工作者提升个人在职业生涯过程中成功的机会。 下面是爱汇给大家整理的室内设计专业个人职业生涯规划范文,供大家阅读!室内设计专 业个人职业生涯规划范文篇 1 一、实习目的通过参观家具、灯具,配饰等的功能、造型、灯光、 尺度、风格、材料、色彩,了解室内装饰设计的基本原理和设计方法,开阔视野,为接下来的 我的室内设计创作打下基础。 二、实习内容室内空间既是人类赖以生存的居住空间,也是人们从事各种活动的建筑内部 空间场所,作为室内环境的设计者,首先应该满足使用者对空间的功能和审美需求。 所以,对于我们这些初学者,更应该多看。 在老师的带领下,我们来到济南的几家大型家具城,了解一些室内设计的知识。 第一天,我们来到银座家居,第一感觉,很震撼。 接下来,接连不断的震撼接踵而来。 每一家店面都主营一种风格和品牌,银座家居多数是进口产品,价格昂贵,但是他的审美 价值是名副其实的,无论从造型、色彩、材料、功能上,都让人眼前一亮。 通过导雇员的解释,这些昂贵的家具深深的吸引了我们的眼球。 尤其是那些样品房。 每一件样品房的风格、民族特色、地域特色、时代风貌都协调统一。 无论是简约型、现代型、中式的、欧式的,给我们最直观的感受就是温馨舒适。 我想,能够满足消费者居住要求的设计就是好的设计。 所以,室内空间的首要任务是根据整体空间的功能与审美要求来进行设计组织与规划定 位。 第二次,我们选择的是富雅家居,他的规模与银座家居相当,更多的是国产产品。 通过今天的参观,对室内设计有了新的认识,尤其是样品房,都有一些共性,无论这个建 筑物的功能上区别是很大的,如,商务酒店,KTV,学校等等,功能不同,却都少不了这些元 素。 这也是室内设计必须注意的几大要素。 第一,空间要素。 空间的合理化并给人们以美的感受是设计基本的任务。 要勇于探索时代、技术赋于空间的新形象,不要拘泥于过去形成的空间形象。 第二,色彩要求。 室内色彩除对视觉环境产生影响外,还直接影响人们的情绪、心理。 科学的用色有利于工作,有助于健康。 色彩处理得当既能符合功能要求又能取得美的效果。 室内色彩除了必须遵守一般的色彩规律外,还随着时代审美观的变化而有所不同。 第三,.装饰要素。

17级建筑室内设计人才培养方案模板

建筑室内设计专业人才培养方案 一、专业属性 二、人才培养目标及规格 (一)培养目标 本专业培养适应社会主义市场经济体制、现代化建设和社会进步需要的,德、智、体全面发展的,在具备装潢设计专业必备的理论知识基础上,能熟练掌握装饰设计的理念和现代设计表现手法、电脑辅助设计与制造手段,能根据不同的客户群体及客户提出的实际要求设计出各种创新新颖的设计方案、材料的预算、施工过程中的管理工作。同时具有较强的综合应用多种装饰学科的知识,才能更好的解决装潢设计所涉及的实际问题的能力,满足装潢行业设计、管理、服务的第一线需求。能胜任室内装饰艺术设计、室内陈设和施工监理工作的高素质技能应用型人才。

(二)培养规格与培养进度

三、就业面向及职业能力要求 (一)职业面向、岗位描述及能力要求

(二)典型工作任务及其工作过程 四、专业对应职业资格证书 获取下列必考类职业资格证书之一 五、课程体系培养规格的支撑 (一)课程体系设计思路 为了突出专业课程的职业性、实践性和开放性,注重与企业合作,按照职业岗位、能力需求、确认教学项目的运行机制来组织教学。依照学生应掌握的室内设计相关理论知识,按照本专业学生应具备的能力要求科学的设置课程体系。 本专业课程课程体系设计,以行业需求为导向,岗位需要为目标,坚持以校企合作。工学结合的原则,实现专业与产业链接。课程内容与职业标准对接、教学过程与设计过程对接、学历证书与职业资格证书对接,职业教育与终身学习对接、整个课程体系通过职

业素质、基本技能、专业选修职业智能这四大模块,努力把学生培养成具有“重信精神特质职业人”。 本专业课程体系架构由职业素养课程组、专业基础课程组、专业选修、和专业智能课程组(包括专业知识和专业技能)四大模块构成的立体框架,体现了由低级到高级的能力进阶规律课程体系。 (二)课程体系架构与课程路线

(完整版)实验室要求及注意事项_0

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 实验室要求及注意事项 实验室要求及注意事项上海畅通净化工程 changtongsys 上海畅通建筑装饰 changtongsh 首先要根据仪器的要求设计好相 对的房间,比如说精密天平要考虑,热源、震动、气流、静电等,原子荧光还要考虑空气的洁净,原子吸收要考虑排风等等。 总之实验室的装修原则是; 1 安全、 2 科学、 3 适用、 4 美观。 要做一个标准的实验室是要有很深的专业人员才能做到的。 1. 温湿度控制,涉及到空调,除湿机的配置等; 2. 通 风系统,一定要的; 3. 防震防火,一般没问题; 4. 防尘,注意门窗的设计; 5. 电源,注意有没有三相电和两相电的特别 需要。 6. 气体管路的布置,一般也没问题。 针对不同的客户群需要设计有全钢结构,钢木结构,铝木 结构,全木结构,全不锈钢结构及玻璃钢结构的产品;实验仪器:超净工作台,生物安全柜,烘箱,培养箱,电子天平等。 净化设备: 粗,中,高效过滤器;风淋室;净化空调;洁净传递窗;空 气自净器;净化工作台;洁净服;净化送风口等;一、实验 室要求理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污 染源的地方,最好在常年主风向的上风方向,尽量减少污染。 1/ 18

规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方,便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题: 一是所从事的实验的性质,即是生产性的还是研究性的,是基本层次的还是较高层次的;二是实验室的规模,规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。 一个组织培养实验室必须满足 3 个基本的需要: 实验准备(培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌)、无菌操作和控制培养。 此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。 实验室的大小取决于工作的目的和规模。 以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。 在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。 植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。

设计室内设计专业职业生涯规划书

目录 总论(引言) 第一章认识自我 1、个人基本情况 2、职业兴趣 3、职业能力及适应性 4、个人特质 5、职业价值观自我分析小结:第二章 职业目标及职业认知 1、职业目标 2、职业生涯条件分析(1)家庭环境分析(2)社会环境分析(3)职业环境分析职业生涯条件分析小结第三章职业目标与路径前期规划:2011-2014 学习期目标 1 : 达到职业学历要求——本科及以上学历1. 短期规划(近大一到大三期间)2. 中期规划(大四到读研究生时期) 目标 2 :达到职业技能要求——熟练掌握各种绘图软件 目标3:全面认识室内建筑工艺,结构,材

料,装修等 目标5:较强的责任心和自律心,团队合作意识等中期规划:2015-2018 探索期 后期规划:2019-2025 发展期 第四章评估与调整第五章结束语

引言: 我喜欢向着太阳的方向前行,因为那是光的所在,其实光明和黑暗不过是一线之隔,只在于一个人的选择和规划,没有谁的人生从一开始就五彩斑斓,人生最初不过是一张白纸,只有正确的规划,合理的设计职业生涯,才能给梦想插上翅膀,带我们飞向成功。 “人是自己幸福的设计者” 有位哲学家如是说。职业生涯是一个人一生中所有与职业相联系的行为活动,以及相关的态度、价值观等的连续性经历的过程。也是一个人一生中职业,职位的变迁及工作理想的实现过程。它是一个动态的过程,因此人必须为自己的职业生涯提早的做出规划,为以后提前做好准备。 作为大学生,处于人生中的黄金周期,那么又怎能不去给自己的人生作一番规划和设计呢?有了正确的导航,我们才能全面的饱览人生中的旖旎风景。如果没有规划,正如在航行中没有指明灯,茫茫黑夜中,怎能寻到成功的彼岸花开。 现今激烈的社会竞争和严峻的就业形势也为我们的职业生涯提出更加迫切的要求。我们要正确的认识自我,如何结合自身和环境确立自己的奋斗目标并制定出切实可行的实施方案,我们应搜集方方面面有用的信息,充分利用资源为自己的将来做好准备。 良好的开端是成功的一半。有了目标才会有动力。对于即将踏进社会的我们来说,把握好剩余的大学生活时间,捉紧时间多学习一些知识和技巧为将来打下基础。经过深思熟虑,我决定规划一下未来,好好的刻画自己人生的宏伟蓝图。

细胞培养的过程注意事项

细胞的培养过程及注意事项 根据培养过程中是否需要分割培养物进行再培养而将细胞培养分为原代培养和传代培养。 一、原代培养 (一)过程 原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种及培养等步骤。原代培养的方法很多,基本和最常用的是组织块培养法和分离细胞法。 1、组织块培养法 (1)基本操作过程 1)、用培养液湿润所取组织材料,并用锋利的眼科剪将附在其上的脂肪和结缔组织去除干净。再用平衡液(PBS)或Hanks液漂洗;用锋利的眼科弯剪将组织块剪成小块;再用PBS 或Hanks液漂洗多次,直至液体不浑浊、无油滴、清亮为止。 2)、用湿润的吸管吸取切碎的组织块,清清吹到培养瓶皿中,并将其按一定间距均匀放在培养瓶底壁上,量不要过多,要将组织块切面贴在培养瓶底壁上; 3)、将培养瓶翻转,使瓶底朝上,在种植了组织块一侧的对侧面加足培养液,勿使组织块与培养液接触,塞紧瓶塞; 4)、将种植了组织块的一侧朝上,静置于37℃培养箱中;待组织块贴壁1h到3h后翻瓶,使贴壁的组织块浸没与培养液中,静置; 5)、每隔2到3天更换一次培养液,或者根据培养瓶种颜色的变化确定换液时间。 2、注意事项 1)、组织块接种后的前3天,从组织块向外迁徙的细胞数很少,组织块的黏附不牢固,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。 2)、加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。 3)、用组织块培养时,要及时观察,当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的细胞,因为已漂浮的组织块和那些细胞碎片已经死亡,它们产生的有毒物质会影响原代细胞的生长,要及时清除。

(整理)1家具与室内设计方向专业培养方案.

木材科学与工程(家具与室内设计方向)专业培养方案 专业代码:082002 专业名称:木材科学与工程 Wood Science and Engineering 一、培养目标 本专业培养具有木材科学技术、家具设计与室内装饰技术的基础理论知识、基本技能和素质,能在家具与室内装饰行业及其相关领域,从事家具设计与制造、室内设计与装饰工程及管理、营销、教学、科研等方面工作的创新型设计与高级工程技术人才。 二、基本要求 掌握家具设计与室内装饰知识。能解决家具设计、制造工艺与设备等方面技术问题,可独立完成家具造型、结构、工艺设计,具备家具生产和管理能力。具有室内设计、装饰工程施工、概预算和管理的能力。 毕业生应具备的知识和能力: 1、掌握扎实的数学、物理、制图、计算机等工程技术类基础知识,熟练掌握一门外语。 2、具有较强的手绘、计算机绘图及模型制作等图形表达技能。 3、具有家具设计与制造的基本理论和基本技能,能综合运用专业基础知识在家具行业 从事设计、制造与管理工作的能力。 4、具有室内设计和室内装饰工程的基本理论和基本技能,能在建筑行业及其相关领域 从事设计、施工与管理工作的能力。 5、具有较强的调查研究、信息处理、沟通表达、团队协作精神与组织管理能力。 6、具有较强的发现与解决实际问题的创新能力。 三、主干学科及相关学科 主干学科:林业工程 相关学科:机械工程、艺术学 四、主干课程 设计表达、设计方法学、木质材料学、家具与室内装饰材料、家具造型设计、家具结构设计、家具制造工艺学、室内设计、室内装饰工程、装饰工程概预算等。

五、主要实践环节 实践教学共47周,35学分,包括:军事训练、劳动、两课实践、社会实践、工程训练、机械设计基础课程设计、专业实习、家具设计实训、室内设计与装修课程设计、创新创业技能、毕业设计(论文)等。 六、学分分配 七、学制 四年 八、授予学位 工学学士 九、毕业条件 毕业额定学分175(课内)+8(课外)。 课内:必修课90.5学分,选修课49.5学分,实践教学环节35学分。 课外:创新与技能8学分(课外)。 取得额定学分,方可准予毕业。

贴壁细胞培养步骤及注意事项

贴壁细胞培养步骤 一、复苏 1.把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化 后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。 2.把上述细胞悬液吸到装有10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存 管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。 3.把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm 培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。 4.标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后 换培养基。 5.3天换一次培养基(具体看细胞生长状态及培养液情况)。 二、传代 1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。 2.把原有培养基吸掉。 3.加入2毫升PBs洗两遍,最后吸净培养皿中的PBS 4.加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化(消化时长看情况而定)。 5.当看到细胞开始脱离培养皿时倒掉酶液,加入2毫升左右含血清的培养基终 止消化。 6.用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。 7.把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。 8.倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。 9.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传 3个,继续培养。 10.若是只培养一皿,只需吹散后倒剩1/4左右,重新加入培养液继续培养。 三、冻存 1.把原有培养基吸掉。 2.加入2毫升PBs洗两遍,最后吸净培养皿中的PBS 3.加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化(消化时长看情况而定)。 4.去掉酶液,加入2毫升左右含血清的培养基终止消化。 5.吹落后把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。 6.加入1毫升冻存液悬浮细胞,装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞 种类,冻存日期。 7.4℃30min,-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。

拟南芥培养Protocol

拟南芥培养Protocol 拟南芥生长的适宜温度白天为22℃-24℃,夜温最好比日温低2℃,适宜的湿度为60-70%,生长期适宜的光强为150μmol·s-1·m-2(6支36W日光灯下35cm处测得)。幼苗期不耐高光强,可适当遮荫.光质也较重要,应选用植物生长专用的日光灯(如荷兰产TLD型Philip豪华直管荧光灯).拟南芥在日照长于12小时下才会开花,一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳 1.准备发苗培养基:1/2 MS,Sucrose:10g/L,pH5.7,agar:0.7-0.8%.灭菌后,在超净台上分装入培养皿. 2.种子消毒:种子放在1.5ml试管中, 加入1ml10%NaClo,混匀,消毒5min,用无菌水洗5次以上(用移液枪吸). 3.播种:用移液枪将种子吸到培养皿上,可多加些水,将种子铺均匀(不要太密,太密根缠在一起不好移苗),用移液枪吸干水,在超净台上让培养皿干了,密封盖子,4℃暗处理两天后,移到光照培养箱(22℃,光周期12h),若种子较密,则在光照培养箱中生长1周后即可移苗,否则根长太长后易缠在一起,但太小的苗移栽后,需适当遮荫.最好是在每皿<30株这样的密度下,让其生长两周后再移苗. 4.移苗:将蛭石与珍珠岩按(3:1)的比例混好,装入花盆,将花盆放入有水的塑料周转框中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来,待花盆中的基质湿透后即可移苗.小心轻轻用镊子从培养皿中连根拉出小苗,把根平放在蛭石表面,用镊子把根轻轻压下.移苗结束后,用保鲜膜覆盖3-4天后揭膜.从苗期直至开花,可在塑料周转框中始终保持1-3cm的水层,在开始收籽期,不再需要过多的水分,可保持塑料周转框干燥,此时每隔2-3天浇一次水即可.整个生长期可浇3-4次拟南芥营养液. 5.收籽:在种荚变黄,变干时可以收籽.将种子抖落在纸上,用金属滤网过一下以除去杂质,将种子装入写了标记的小纸袋中,放于干燥的环境中让种子进一步干燥后,封存于1.5ml试管中.

高职院校建筑室内设计专业建设的规划

高职院校建筑室内设计专业建设的规划 建筑室内设计专业作为云南工程职业学院正在的建设特色专业之一,将不断从人才培养模式,实训体系与基地课程体系等方向进行规划和执行。 标签:高职;建筑室内设计;规划 云南工程职业学院建筑室内设计专业于2006年首次招生,至2017年累计招生12届,现有在校生三个年级(2015、2016级、2017级)共六百余人,近三年毕业生就业率保持在97%以上。室内设计技术专业于2013年立项为校级重点专业,2015年立项为校级特色专业。 2015年3月,通过对社会人才需求的调研分析,重新修订了《建筑室内设计专业人才培养方案》。在人才培养目标、规格和课程体系等各方面做了较大调整,使之更加适应云南省“十三五”期间的人才需求。 新修订的人才培养方案中,课程体系(公共课除外)分为专业基础课、专业课、职业技能实训课、综合实践课四部分。专业基础课与专业课是针对行业企业实际岗位,以职业资格标准为核心设置。 目前学院建成绘图制图一体实训室、模型设计制作实训室、装饰材料及施工实训室、室内设计实训室,共4类8个实训室。实训室以职业岗位要求设计安排,充分体现生产性、真实性,能够满足专业课程的实训要求,使学生能全面、系统地接受室内设计、艺术鉴赏、装饰材料、图纸绘制的训练,为毕业设计和顶岗实习打下了坚实的基础。 本专业的教学模式遵循是以工学结合为核心,贯彻设计表达和设计营销两个方向作为核心能力的培养体系,依靠“专业认知与基本技能”,“设计与创作表达”,“综合技能教学与实训”三个模块,通过课堂教学、校内实训、校外实训、顶岗实习四个环节,以此实现工学结合、理论学习与实践相互穿插、融合,切实提高学生职业能力与素质,为学生的就业与职业发展奠定了良好的基础。 那么,下一步建设发展规划将从如下几点开展。 首先进一步完善人才培养模式,打造一支高水平的教学团队;建立一批紧密合作型的校外实训与就业基地;强化专业技能,扩展创新及创业教育,全面提升学生的就业竞争力;构建由点至面的特色专业群,在院级特色的专业基础上取得一定高度。 依托校内实训基地,校外合作企业,通过“课堂教学、校内实训、校外实训、顶岗实习”四个环节,以生产性实训为特征的产教融合、工学结合的人才培养模式,培养具有一定专业理论知识、技术应用能力强、综合素质高的能胜任室内装饰设计、施工、预算与管理岗位能力要求并具有发展潜能的高端技能型人才。

室内设计培养方案(优.选)

张家口机械工业学校 平面设计专业人才培养方案 信息技术系编印

平面设计专业人才培养方案 (室内设计方向) (专业代码:090300) 一、职业描述 室内设计是根据建筑物的使用性质、所处环境和相应标准,运用物质技术手段和建筑设计原理,创造功能合理、舒适优美、满足人们物质和精神生活需要的室内环境。这一空间环境既具有使用价值,满足相应的功能要求,同时也反映了历史文脉、建筑风格、环境气氛等精神因素。明确地把“创造满足人们物质和精神生活需要的室内环境”作为室内设计的目的,现代室内设计是综合的室内环境设计,它包括视觉环境和工程技术方面的问题,也包括声、光、热等物理环境以及氛围、意境等心理环境和文化内涵等内容。 室内设计各岗位对从业人员的基本要求为:具备良好的思想素质和文化修养,在具有必备的专业基础理论和专业知识的基础上,重点掌握从事相关职业岗位实际工作的相关技术,具备相关的职业能力,具有良好的职业道德和职业素养;具有爱岗敬业、忠于职守、精益求精、一丝不苟、诚实正直、吃苦耐劳的工作精神;身体健康,心理素质强,具有较强的语言表达、与人沟通、团队合作和组织协调能力。 二、培养目标 本专业培养拥护党的基本路线,德、智、体、美全面发展,具有与本专业相适应的文化知识、专业知识和良好的职业道德,有较好的艺术审美能力;熟知艺术设计中的基本原则、规律和具有较强的绘图能力;具有较强的设计表现能力,包括效果图、电脑三维模型、实际三维模型制作等;具有较强创造能力,并能灵活地运用到室内设计、平面设计、商业展示设计及广告设计中。能对初级、中级平面设计与装潢专业人员进行培训和指导;能独立相关设计方案的高技能专门人才。 三、人才培养规格 (一)毕业生的就业职业范围和工作岗位(使用规格)

细胞培养的注意事项

相关疾病: 每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些惨痛经验教训可以分享呢? 早走早脱身,从此专注黑生物 1. 严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干。 2. 不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套。 3. 有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测。 4. 水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去)。 5. 晚上离开的时候最好给细胞房照紫外,超净台是用完就开。 6. 最好的是同一时间就你一个人在用细胞房在养细胞。 非科班出身经验分享 1. 别怕浪费。枪头什么的只要有可能污染就换,如果用酒精灯就什么都稍微烤一下,别直接放到火上,离一段距离。 2. 动作要既轻柔又有力。动作太重会有一堆一堆的气泡,动作太轻就吹不下来... 刚开始的时候吹细胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后来就是吹的时候枪里的培养基不要一次全都压出来,留一点,枪的最头部尽量深的在液面以下。 3. 离开过操作台的东西再进操作台之前一定要用酒精喷一遍,包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。 4. 实验结束后对实验台的消毒。紫外什么的,用前用后都照个30 分钟。 5. 身体的各个部分尽量的少接触不需要接触的地方的地方。比如实验台,又比如培养箱内部。 6. 细胞的密度根据细胞的性质、传代的时间以及自己的心情来定。培养基的话最多最多不要超过2 天就要换一次。细胞可以不传代,但是培养基是一定要换的。 大概就是,不该碰的地方不碰,有影响的地方少碰; 该使劲的时候绝对不含糊,不该使劲的地方一定忍住。如果是比较简陋的操作台就一定要摆个酒精灯,所有操作紧密围绕在酒精灯周围进行。如果是高级台子就多用酒精喷喷。感觉生物的实验,心疼钱就还是不要做了。 最后一点点绝对非科班的经验。癌细胞真是坚挺。有一次实在是不想传了,放了 5 天

拟南芥培养

实验目的:拟南芥无菌培养。 实验仪器:光照培养箱,盆.培养皿,超净台,灭菌锅. 实验试剂:营养土,蛭石,MS培养基 实验步骤: 1、配制MS培养基(一般装在三角瓶里,最好只装最大体积的70%以内),高温灭菌(115 度15分钟)在未固化情况下,(固化的话可以在微波炉里融化再使用)在超净台里倒入培养皿(一般一个培养皿内装25ml左右培养基,培养皿也是要灭菌的,一般用报纸或者牛皮纸包一排,十几个吧),待充分凝固之后平放密封保存(倒好之后最好静置15-20分钟,然后放在塑料袋里,保存在4度) 2、将拟南芥种子用10%消毒水(洗洁精体积分数)浸泡15分钟左右(要保证每粒种子都 浸透),无菌水冲洗3遍,加入适量0.12%的琼脂溶液(要灭菌的)用蓝枪头播在之前准备的灭菌MS固体培养基上(要在超净台中操作),点种子大概的确有点难以想象,下次你来拿种子和苗的时候我可以给你演示一下; 3、4℃春化2天后转到光照培养间,温度22℃/18℃(日/夜),16h/8h光周期, (也不用这么严格的,一般22-25度,5000-7000lx,白炽灯光照培养,光照强度五千Lx。 差不多就行了) 4、大约7-10天后,拟南芥根须和芽均已长出,长到3至4片叶后可以移入土中培养(平 板里长太久的话似乎会影响植物以后的生长)。 5、用营养土和蛭石以1:1的比例混合拌匀配制,以保证营养及透气性。用高温杀菌以杀 死土中的害虫。(我们现在种得多,土都不灭菌的,注意拔拔杂草就行了) 6、用镊子小心夹住培养皿中的拟南芥茎处,取出放在土上,卷起根须塞入土中。避免将叶 片带入土里。放在光照培养间,条件和长平板一样就行了 7、在托盘中浇水,通过毛细作用由底部的孔吸收上去,保证土壤湿润。刚移植的前两天可 以用基本上透明的盖子盖住盆顶。 MS培养基的配方是对的 单位mg/L 大量元素:NH4NO3 1 650 KNO3 1 900 CaCl2·2H2O 440 MgSO4·7H2O 370 KH2PO4 700 微量元素:KI 0.83 H3BO3 6.2 MnSO4·4H2O 22.3 ZnSO4·7H2O 8.6 Na2MnO4·2H2O 0.25 CuSO4·5H2O 0.025 CoCl2·6H2O 0.025 FeSO4·7H2O(27.8)+Na2-EDTA·2H2O(37.3) 有机成分:肌醇100 烟酸0.5 盐酸吡哆醇(维生素B6)0.5 盐酸硫胺素(维生素B1)0.5

植物组织培养的一些注意事项

植物组织培养的一些注意事项 一、常用培养基主要特性 1、高盐成分培养基包括MS、LS、BL、BM、ER 等培养基。其中MS 培养基应用最广泛,其钾盐、铵盐及硝酸盐含量均较高, 微量元素种类齐全, 其养分数量及比例均比较合适, 广泛用于植物的器官、花药、细胞及原生质体的培养。LS、BM、ER 培养基由MS 培养基演变而来。 2 、硝酸钾含量较高的培养基包括B5 、N6 、LH、GS 等培养基。 ①B5 培养基B5 培养基除含有较高的钾盐外, 还含有较低的铵态氮和较高的盐 酸硫胺素, 较适合南洋杉、葡萄及豆科与十字花科植物等的培养。 ②N6 培养基N6 培养基( 朱至清等1975 ) 系我国学者创造, 获国家发明二等奖, 适用于单子叶植物花药培养, 柑橘花药培养也适合, 在楸树、针叶树等的组织培养中使用效果也好。 ③SH 培养基是矿盐浓度较高的一种培养基, 其中铵与磷酸是由磷酸二氢铵 ( NH4 H2 PO4 ) 提供的, 这种培养基适合于某些单子叶及双子叶植物的培养。 3 、中等无机盐含量的培养基 ①H 培养基本培养基大量元素约为MS 培养基的一半, 仅磷酸二氢钾及氯化钙稍低, 微量元素种类减少, 而含量较MS 为高, 维生素种类比MS 多。适于花药培养。 ②尼奇培养基(Niotsch 1969 ) 此培养基与H 培养基成分基本相同, 仅生物素比 H 培养基高10 倍。也适合于花药培养。 ③米勒培养基(Miller 1963 ) 此培养基和Blaydes(1966) 培养基二者成分完全相同。适合大豆愈伤组织培养和花药等培养用。 4 、低无机盐培养基大多情况下用于生根培养基。有以下几种: ①改良怀特培养基(White 1963 ) ②WS 培养基(Wolter & Skoog 1966) ③克诺普液( Knop 1965 ) 花卉培养上用得多。 ④贝尔什劳特液(Berthelot 1934) ⑤HB 培养基( Holley & Baker 1963) 此培养基在花卉脱毒培养和木本植物的茎尖培养中效果良好。其成分是大量元素比1/ 2 克诺普( Knop ) 液稍多, 微量元

拟南芥室内简易栽培和田间大规模种植的方法_王爱荣 (1)

福建农林大学学报(自然科学版)第34卷第2期Journa l o f Fu jian A g ricu lt ure and Fo re stry U niversit y(N atura l Sc ience Edition)2005年6月 拟南芥室内简易栽培和田间大规模种植的方法 王爱荣,刘 丽,周 洁,鲁国东,王宗华* (福建农林大学教育部生物农药与化学生物学重点实验室,福建福州350002) 摘要:采用菜园土、草木灰、锯木屑体积比为4∶2∶1的培养基质,用1g L-1琼脂水悬浮种子直播培养拟南芥,根据其生物学特性在温度、空气相对湿度、土壤水分、光照以及病虫害防治等方面进行管理,培养出生长健壮、充分满足实验要求的拟南芥植株.用同样基质,适当遮荫,可以在田间大规模种植拟南芥.在月均温为11-14℃,日最低气温为2.1-4.7℃的自然条件下,夜间覆盖塑料薄膜,拟南芥仍能正常生长. 关键词:拟南芥;栽培技术;田间种植;突变体库 中图分类号:Q94-331文献标识码:A文章编号:1006-7817(2005)02-0252-03 I ndoor culture and large scale fiel d cultivation of A rabidopsis t h aliana WANG A i-rong,LI U Li,ZHOU Jie,LU G uo-dong,WANG Zong-hua (K ey Laborato ry for Biope sticide and Che m i ca l B io l ogy o f M inistry of Educati on,Fu jian Ag ricu lture and F orestry U ni ve rsit y, Fuzhou,Fuji an350002,Chi na) Ab strac t:The so il,p l ant ash and w ood chips at the propo rtion o f4∶2∶1we re used a sm ed i u m t o trea t t he seeds o f Arabi dopsis t ha li-ana,and t o sus pend t he m i n1g L-1aga r w ater so l u tion a t4℃for2-4day s and directl y s ow t he m onto tho se p repa red pots to m ake t he m ge r m i na t e and gro w at t he indoo r or ou t doo r conditions w it h regu l a r t emperature m anagement,w atering,fe rtiliza tion,and pest con tro.l A.t ha liana wa s still g row i ng we ll i n t he fie l d even when the ave rage mon t hly te m pe ra t ure w as a round11.0-14.0℃and the dail y m ini m u m te m pe ra t ure decli ned to2.1-4.7℃i n w i n t e r as l ong as covered w it h p l a stic fil m.The result prov i des a ne w w ay t o g row A.t hali ana a t l a rge sca le but w it h l ow co stwh ich may facilita t e the p l ant f unc tiona l geno m ics. K ey word s:Ar abidopsis tha li ana;culture technique;fie l d plan ting;m utan t base 拟南芥(Arabidopsis t h ali a na)属十字花科拟南芥属植物,具有显花植物的全部特征,且还具有基因组小、结构简单、形体小、生长周期短、繁殖系数高、自花授粉等优点[1],这些特点使它成为“植物界的果蝇”,分子生物学、发育生物学和遗传学研究的模式物种.2000年,其基因组全序列测定工作的完成更加激发了人们对其基因结构与功能进行更为详尽研究的兴趣[2].现在,我国越来越多的实验室以拟南芥为试验材料.但拟南芥种子小,幼苗弱,对生长环境又有一定要求,这给它的培育带来了一定困难.目前,拟南芥的栽培方法主要有2种:一种是移栽法,即先将种子种在无菌培养基上,1周后再移栽到土壤中;另一种是土壤培养法,即直接把种子种在土壤中[3].国际上,已有很成熟的拟南芥栽培方法和材料[4],但是国内的条件往往达不到规范的要求,为此,已有一些改进方法的报道[3,5-7],但这些方法对设施依赖性很强,成本高,难以大规模种植.本研究摸索了一套简便易行的室内和田间栽培方法,为大规模、低成本栽培拟南芥提供参考. 1 材料与方法 供试拟南芥为Co lu m bia-4、Co lu m bia-0、g l、W s等生态型. 根据福州市的取材情况和拟南芥的生长特点配制了多种基质.各基质不同组分的体积比为:菜园土∶沙子=1∶1、菜园土∶花土=1∶1、菜园土∶椰糠=1∶1、椰糠∶沙子=1∶1、菜园土∶椰糠∶沙子=1∶1∶1、菜园土∶泥炭土=1∶1、菜园土∶草木灰∶锯木屑=4∶2∶1.观察拟南芥在不同基质的生长情况. 将混合均匀的培养基质装入培养盆中,培养盆放置于托盘上,一个托盘可放置多个培养盆.播种前向 收稿日期:2005-01-14 修回日期:2005-03-25 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471178);福建自然科学基金资助项目(B0210018);福建省科技厅资助项目(2003F008). 作者简介:王爱荣(1975-),女,硕士.研究方向:分子植物病理学. *通讯作者.

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