(完整word版)乙肝血清标志物检测的临床意义

乙型肝炎病毒血清五项标志物（“两对半”）的

临床意义

1. 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

HBsAg是机体感染HBV的标志，也是在机体血清中首先出现的病毒标志物。HBsAg出现的时间，与机体感染HBV的途径和感染的剂量有关。如果系输用HBsAg 阳性血，2周后即可检测到HBsAg，如用RIA法检测，于接种后6天，血清中即可出现HBsAg阳性；如感染剂量少，HBsAg出现阳性的时间可达3～4个月，甚至6个月；一般在感染HBV后4～6周可出现HBsAg阳性。HBsAg出现阳性后1～7周(平均约4周)才出现肝炎症状和肝功能异常。经血感染者，其潜伏期约为2个月；经口感染者，其潜伏期大约为3个月。

急性乙肝病程一般持续１－３个月，80%～90%的患者可以临床治愈［1］。H BsAg阳性在血中一般持续１－６周，长者可达２０周（14－148天）；在肝炎症状出现后1～4周或血清转氨酶达高峰后1～12周消失，如果HBsAg阳性持续超过6个月仍不转阴则称为持续阳性或慢性携带状态; 如系急性乙肝，HBsAg 持续阳性超过6个月则提示慢性化。我国HBV感染(急性和慢性)的人群中每年大约有4%～10%的HBsAg阳性者转阴，同时每年又有约4%～10%的人群由易感人群成为受感染者，因而，人群HBV感染状态在不断变化［2］。HBsAg阳性持续的时间和急性乙肝慢性化的比例与感染者的年龄有关，年龄愈小，形成持续感染或病情慢性化的概率愈大；围产期感染的婴儿80%将成为HBsAg的携带者；幼儿期感染者约30%将成为持续HBsAg携带者，正常成年人感染HBV后形成持续性感染的比例可能在5%以下；社会普通人群中约35%～50%的HBsAg阳性

携带者是在母婴围产期感染的［3］。

临床上，HBsAg阳性可见于急性乙肝患者的潜伏期、急性期；慢性乙肝，无症状携带者；部分肝硬化和肝癌患者的血清中和受HBV感染的肝细胞浆中。

HBsAg阳性一般来说表明机体内存在HBV感染，但阴性也不能完全排除H BV感染。原因是：①可能由于HBV和HBsAg含量极少，检测方法不够灵敏而漏检，或因试剂质量和操作问题而出现假阴性；②S基因变异引起HBsAg的表达和分泌发生障碍，体内虽存在HBV，但血清中测不到HBsAg或很少[5,6]；③S

基因变异后所表达的HBsAg 不能被现在广泛使用的一些试剂所测出[7,8]。后两者虽HBsAg阴性，但往往伴有HBeAg、抗-HBe和抗-HBc等其他HBV感染标志物的阳性。即使真正阴性，也不能完全排除HBV感染，因为有8%的乙肝患者，症状开始之前HBsAg已转阴；如抗-HBs或抗-HBe于发病后2～9个月出现阳性者，仍可诊断为急性乙肝［9］。在暴发性乙肝中，常常抗-HBs提前出现，而HBs Ag阴性；输用HBsAg阴性而抗-HBc阳性的血液后，可发生急性乙型肝炎。采用PCR技术可以进一步证实，某些HBsAg阴性的肝炎患者及献血人员中的血清

中存在HBVDNA［10］。

在分析HBsAg阳性结果时，有几点应注意：①不能以HBsAg滴度的高低来判断肝炎或感染者病情的轻重。因为HBV感染者血清中HBsAg的滴度经常在波动，其滴度高低和病情之间并无直接关系，HBsAg滴度上升并不表明病情就严重，下降也不表明病情在好转；有人甚至认为HBsAg滴度和病情呈反比。②不能以HBsAg的滴度来判断肝炎的类型。③HBsAg的滴度高低，也不能用来判断传染性的有无。HBsAg本身不含病毒核酸，不具传染性，但HBsAg阳性血清，不论其滴度高低都可能含有具有传染性剂量的病毒颗粒。如果HBVDNA整合至宿主肝细胞DNA中，血清中无游离病毒颗粒，此时HBsAg阳性血液则无传染性。④HBsAg滴度不能作为评价或判断某药物临床治疗效果的指标。前面讲过，HBsAg既不反映病情的严重程度，又不含病毒的核酸成份，本身还经常波动，以HBsAg滴度的升降说明某种药物的效果，是没有科学根据的［11］。

2. 乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)

抗-HBs是一种中和抗体，对HBV具有保护性免疫，可中和HBV感染、抵御再次感染。多数自限性HBV感染的患者，其抗-HBs出现在急性感染的恢复期，80%的患者于HBsAg消失、临床症状消退数周至数月内出现抗-HBs。抗-HBs出现的早晚和滴度的高低，与重复感染有关。首次感染者，多在4～5个月出现，滴度不高，持续6个月～3年；再次感染者，2周后即可检出高滴度的抗-HBs。抗-HBs阳性率在急性乙肝恢复期最高，其他各型乙肝检出率均低。一般说来，抗-HBs阳性血清HBsAg/抗-HBs-IgM阴性，ALT正常。

抗-HBs阳性可见于：(1)乙型肝炎的恢复期；(2)HBV既往感染者；(3)乙肝疫苗接种后；(4)部分暴发性乙型肝炎；自然感染康复后的患者血清抗-HBs和抗-HBc呈双阳性，由于抗-HBc持续存在的时间较长(＞8～10年)，抗-HBs持续存在的时间较短(6个月～3年)，故单项抗-HBs阳性少见(接种乙肝疫苗除外)，单项抗-HBs阳性且为低滴度时多为非特异性反应所致假阳性［2］。

3. 乙型肝炎e抗原(HBeAg)

HBeAg是乙型肝炎核心抗原的可溶性成份，常常与血清HBVDNA、DNA-P及Dane颗粒同时存在，为HBV复制和具有传染性的标志。通常HBeAg迟于HBsAg 1周出现，先于HBsAg 2周消失；若HBeAg持续阳性超过10周，表明病情可能趋向慢性。血清中HBeAg阳性，仅见于：HBsAg阳性的急性肝炎、慢性肝炎、无症状HBsAg携带者和部分肝硬化、肝癌患者。慢性感染者，随着年龄增长，HBeAg阳性率下降；慢性乙肝患者HBeAg每年自然阴转率为25.6%。

无症状携带者为9.3%［14］。

4. 乙型肝炎e抗体(抗-HBe)

抗-HBe出现于HBeAg阴转后，抗-HBe的出现表明传染性下降。过去认为抗-HBe是HBV感染恢复或无传染性的指标。近年来研究发现，抗-HBe阳性的血清仍可能有传染性，只是远较HBeAg阳性的血清传染性为小而已。

一般来说，抗-HBe阳性患者血清中HBV复制水平较低，病情趋向稳定和恢复，但临床上仍可见到相当一部分抗-HBe阳性患者的病情仍波动，或在发展。其主要原因是HBV并没有因抗-HBe阳性而消除，HBV在机体内仍存在和复制。有研究表明：在抗-HBe阳性的慢性活动性肝炎中，采用PCR技术检测，87%的患者血清中可检出HBVDNA［10］。肝内HBsAg、HBcAg检测和HBVDNA原位杂交研究发现：抗-HBe阳性慢性肝炎患者中，26.7%HBV复制活跃，53.3%为不完全复制与表达，仅20%为非复制状态。慢性乙肝HBeAg向抗-HBe的血清学转换可伴有ALT水平升高，随之HBV复制水平降低，但并不意味着HBV的彻底清除［2, 10］，肝组织学正常的HBV携带者血清中可检出HBeAg，而组织学证实有慢性活动型肝炎存在的患者，其血清中抗-HBe可以阳性，说明HBeAg不一定是慢性乙肝活动的标志，抗-HBe亦不能作为健康携带的指标。

5. 乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)

抗-HBc是HBV抗体系统中出现较早的抗体，急性HBV感染，HBsAg出现后3～5周，临床症状出现之前即可检出，且在肝炎恢复期呈高滴度；HBsAg阳性的时间越长，抗-HBc的滴度越高［2, 9］。临床上，多以竞争抑制法检测抗-HBc，为总抗体，包括IgG、IgM、IgA和IgE型抗-HBc，早期以抗-HBcIgM为主，持续6～18周，以后以抗-HBcIgG为主，该抗体可在体内持续数年甚至数十年［11］。通常，高效价的抗-HBc，见于急、慢性肝炎和HBsAg携带者，并表明HBV复制可能仍活跃，血清具有传染性；低效价的抗-HBc则表示既往感染过HBV，一

般无传染性。

抗-HBc单项阳性是临床中一种常见的模式，对于这种单项抗-HBc阳性的解释：①急性感染的恢复早期(窗口期)。HBsAg减少或消失，而抗-HBs尚未产生，抗-HBc是唯一能检出的特异性HBV指标。②被动获得的抗-HBc。HBsAg携带者母亲所生婴儿，母亲体内IgG型抗-HBc可经胎盘转移给婴儿，此种母传抗-H Bc在婴儿体内可存在一年以上；输用抗-HBc阳性的血液或血制品。③远期感染伴抗-HBs消失。因抗-HBc可持续存在8～10年以上，而抗-HBs在机体内只持续存在6个月～3年。④远期感染伴低水平HBsAg。

1．HBsAg（乙肝表面抗原）：HBsAg在HBV感染的检测中一直是最为重要的标志物。HBsAg有一个特异的共同抗原决定簇“a”和至少两个亚型决定簇“d／y”和“w／r”，最常见的血清型为adw、adr和ayw。我国绝大多数地区以adr为主，adw次之(于长江以南诸省与adr混存)；新疆、西藏、内蒙古自治区的本地民族几乎全为ayw。目前国内最常用的HBsAg免疫测定方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)，使用针对HBsAg的a决定簇的单克隆和多克隆抗体，为双抗体夹心测定模式。ELISA简单、方便、快速，测定下限进口试剂盒可达0．15ng／na，国产试剂盒目前也能达到0．5 ng／m~以下，接近或好于某些进口试剂。血清中检出HBsAg是乙型肝炎的早期诊断指标之一。HBV感染后，除急性外，大部分人没有临床表现，绝大多数人病毒会被清除，但有部分人会转为慢性或携带者，携带者在血中可检出HBsAg，但没有临床症状。血清HBsAg仅为HBV感染的标志，由于其在血液多为不含病毒颗粒的

空壳，故而不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱及预后。

HBsAg的测定敏感性与HBV基因型或亚型有关，以单抗为基础建立的HBsAg免疫测定方法，当用于生产单抗的病毒株与流行人群的亚型／基因型或变异株不同时，可能得不到可靠的结果。编码HBsAg的S基因发生突变可导致HBsAg的a决定簇发生改变。如核苷酸587位发生G到A的点突变，可导致原来145位的甘氨酸残基由精氨酸残基取代，即G145R突变。已报道影响HBsAg氨基酸位点120、123、124、126、129、131、133、141和144的HBV S基因突变株，最相关的突变显然是G145R、K141E和

T131I以及在122与123位残基之间3个氨基酸的插入，这种突变明显影响HBsAg的抗原结构。a决定簇的氨基酸替换可导致其构型改变，这种改变可影响相应抗体的结合，从而出现HBsAg假阴性结果。目前的商品试剂盒对HBsAg突变株的测定能力可归为三类：(1)突变HBsAg和野生型均可检出。

(2)不能检出突变HBsAg。(3)与野生型抗原相比，突变HBsAg的检出能力明显降低。使用酶标多克隆抗体的商品试剂，大多数可归为第一和第三类。下述不常见的HBV感染血清学标志物模式或不一致的结果可能是由于HBsAg

的变异所致：(1)单独抗HBc阳性。(2)HBsAg阴性但HBeAg阳性。(3)血清HBsAg阴性但抗HBc和抗HBs阳性。(4)HBsAg(HBeAg)和抗HBs(大多为<100 IU／ml的低滴度)同时存在。(5)使用不同厂家的HBsAg 试剂盒得到的结果不一致。

HBV S基因变异所致HBsAg假阴性的最大的问题是输血安全性，尤其是逃逸突变株流行较广的地区。在使用单克隆捕获和标记抗体的HBsAg测定试剂中，突变可能会给出阴性结果，但在使用多克隆捕获抗体的方法中，则可以检出发生突变的HBsAg。在HBV高流行区域，突变株的流行率也高，因此，在这些地区应采用多抗或针对a决定簇及亚型的多个抗原表位混合单抗的HBsAg检测试剂进行血液筛查。

另一个要引起注意的问题是HBsAg突变株的存在导致疫苗免疫的失败。要在进行人群HBV分子流行病学研究的基础上，考虑研制针对主要流行HBsAg

变异株的乙肝疫苗，保证免疫的有效性。

2．抗HBs：急性乙肝患者处于恢复期后，随着HBsAg的逐步消失，血清中出现抗HBs，抗HBs是一种中和抗体，其能在体内存在相当长的时间。以HBsAg作为疫苗免疫机体产生的抗HBs，对HBV的感染具有保护性免疫作用。抗HBs检测的参考范围为0～10 IU／L，低于10IU/L说明免疫失败。低浓度的抗体保护作用非常有限，我院一般以时间分辨荧光定量检测值大于100IU/L才有保护价值。ELISA检测HBs抗体是半定量，与阴性孔的OD 值密切相关，而阴性对照的OD值重复性较差，因此不建议根据ELISA的值评价抗体的保护作用。接受乙肝疫苗接种者，体内血循环中除了抗HBs外，不应出现其他乙肝病毒感染血清免疫学标志物，如抗HBe、抗HBc等，一旦出现则应视为既往HBV感染。

一般情况下，血清中抗HBs和HBsAg不同时存在，若同时检出，可能为抗HBs产生的早期，或属于不同亚型的HBV感染，或由HBV的S基因变异所致。

自然发生的逃逸变异株可使某些慢性携带者同时存在HBsAg和抗HBs，产生的抗体直接针对血循环中HB Ag抗原所没有的表位，因而不具保护作用。但HBsAg和抗HBs同时存在的最常见的原因是所产生的抗HBs针对的是亚型，

而非HBsAg的a决定簇。

WHO抗HBs标准品针对的抗原主要是adw，相对来说，对ayw和adr 的结合能力降低，可使得抗HBs定量测定结果偏低。但基因型影响不大。一个可靠的抗HBs测定方法应能检测针对HBsAg的各种抗体。如只识别针对a

决定簇的抗体，则很难判断疫苗免疫后的效果。

对不同抗HB 检测试剂的比较研究表明，从不同试剂得到的抗HBs浓度有很大不同。较大比例的既往感染者抗HBs滴度低于100 IU／L，在10和100 IU／L之间的浓度范围，试剂盒间的测定结果差异尤其大，试剂生产厂家使用一致的抗原或表位来制备抗HBs检测试剂盒，可改善抗HBs测定的标准化，进而改善不同试剂和不同实验室间结果的可比性。

3．HBeAg：HBeAg为HBcAg的可溶性成分，一般血清HBeAg阳性者，HBsAg亦为阳性。当HBV前核心区发生点突变时，可使得HBeAg无法表达，表现为血清HBeAg或抗HBe测定持续为阴性，但血清HBsAg或HBV DNA可表现为阳性。HBeAg与病毒Dane颗粒、HBV DNA具有伴随关系，是HBV复制活跃的血清学指标，血清HBeAg阳性说明传染性强，急性乙肝患者血清HBeAg持续阳性3个月以上，则有疾病慢性化倾向。有时临床实验室可见到HBsAg(一)、抗HBs(+)、HBeAg(+)的模式，则很有可能在病毒编码HBsAg的基因区发生了突变。

4．抗HBe：当血清HBeAg转阴后，可出现抗HBe，两者同时阳性较少见。抗HBe阳性说明病毒复制减少，传染性弱，但并非没有传染性。抗HBe不是保护性抗体，这一点与抗HBs不同。

5．总抗HBc：在HBV感染中，最早出现的特异抗体是抗HBc。总抗HBc 包括抗HBc IgM、IgA、IgG和IgE等。抗HBc不是保护性抗体。抗HBc 在血中呈低滴度且与抗HBs同时存在，是既往感染的标志。在HBV高流行人群中，抗HBc常作为疫苗免疫前的筛检方法。在欧洲和美国，抗HBc还是血液筛查的一个指标。在我国，抗HBc没有作为血液筛查指标，其主要原因是抗HBc检测的假阳性导致血液废弃过多。

单项抗HBc真阳性反应性常为HBV DNA 阳性。单项抗HBc反应性常见于吸毒者、HIV感染者和HBV／HCV重叠感染者，在吸毒者中最高(>40％)，在妊娠妇女中单独抗HBc反应性的检出率为1．2％。在临床实际检测工作中，当出现单项抗HBc阳性时，首先要确认测定结果的特异性，排除假阳性。第二步如果单项抗HBc反应为真阳性，则应确定HBV感染阶段。单项抗HBc阳性一般见于HBV感染恢复期后(抗HBs消失或抗HBs浓度低)或在HBsAg 清除期(携带末期)，此时HBsAg浓度处于最敏感HBsAg测定方法的测定下限之下(<0．15 g／L)。小部分单项抗HBc阳性患者推测为自限性急性HBV 感染的窗口期，此时，HBsAg消失，几周后，抗HBs出现。

6．抗HBcIgM：抗HBc IgM可以说是机体感染HBV后在血液中最早出现的特异抗体，在肝炎的急性期呈高滴度，是判断急性乙型肝炎的重要指标，随着急性乙肝的恢复，抗HBc IgM滴度(以及抗HBc IgA)降低乃至消失，如持续呈高滴度，则常表明患者乙肝有慢性化倾向。研究表明在慢性活动性乙型肝炎患者血循环中，抗HBc IgM检出率及滴度亦较高，说明HBV在体内复制活跃，是传染性强的指标之一。

抗HBc IgM的定量测定对急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎的急性发作的临床诊断有重要价值。急性乙型肝炎，抗HBc IgM值高于500 PEIU／ml。如果为亚临床感染，或标本采集时间在急性发作前或急性HBV感染中晚期，则抗HBc IgM值较低。在慢性活动性肝炎，可见有中等程度(10～500 PEIU／m1)抗HBc IgM浓度出现。在目前国内的临床抗HBc IgM测定中，使用原倍血清标本进行检测，一则容易受到标本的非特异干扰物质的干扰，出现假阳性结果。二则对急性乙肝的诊断价值很小。因此，应选用定量测定试剂或要求稀释标本的试剂盒用于急性乙肝的检测。此外，定量测定抗HBc IgM还可监测慢性HBV感染活动性。高灵敏的定性测定对不常见的乙肝标志物血清学模式，如单项抗HBc阳性和HBsAg阴性的急性乙肝等的确定也有应用价值，其可与抗HBe和敏感的定性HBV DNA核酸扩增检测一起使用，以证实不常见模式结果的正确性，提供患者潜在的HBV相关的肝病信息，尤其是HBV DNA 测定阴性的患者。以10 PEIU／ml为阳性判断值，在8．5％证实为单独抗HBc反应性的患者中检出了特异的IgM抗体。抗HBc IgM作为疾病活动性的待选标志物，尚需标准化及进一步的临床评价，标准化的第一步就是诊断试剂的生产厂家使用一个共同的国际标准。

7．HBV DNA：HBV DNA检测是乙肝病毒抗病毒治疗惟一有效的疗效直接监测指标。目前国内用于HBV DNA定量测定的方法基本上为聚合酶链反应(PCR)，并以外标准作为定量依据。PCR用于HBV DNA定量检测，如是使用外部标准进行定量，再加上HBV DNA定量数值大，通常不同测定次间差异会较通常的检验项目大，一般量值变化在0．5个对数数量级内均可视为没有变化。乙肝病毒的抗病毒治疗效果的判断可以采用PCR方法动态检测患者血循环中HBV DNA，当患者经抗病毒药物治疗后，HBV DNA含量持续下降，然后维持在低水平，或低至方法能检出的含量(测定下限)以下，则说明治疗有效。观察抗病毒药物治疗效果不能凭两三次检测结果来判断，必须多次动态观察，每次检测的间隔天数不宜太短，一般为两周以上。可采用以检测次数为横坐标、HBV DNA量为纵坐标作图的方法来判断血清HBV DNA量的变化趋势，进而判断抗病毒治疗是否有效。

血循环中HBV DNA与HBeAg和HBsAg有一定的相关，但其浓度间并不呈正线性相关。HBeAg阳性的标本，HBV DNA通常有较高的浓度(>10 拷贝／m1)，HBeAg阴性、抗HBe阳性的标本，HBV DNA浓度通常较低(<10 拷贝／m1)。当HBV基因组前C区发生突变时，则可出现HBeAg阴性而HBV DNA仍保持在较高的浓度。单独抗HBc阳性的血液HBV DNA浓度通常很低。

关于血循环中HBV DNA浓度与患者传染性之间的关系，通常如血清(浆)HBV DNA浓度大于10^4拷贝／ml，则在日常生活密切接触中即具有较强的传染性。10 ～10^4拷贝／ml，则在日常生活密切接触中的传染性较小。小于10 拷贝／ml，则日常生活密切接触中几乎没有什么传染危险性。但不管HBV DNA的浓度为多少，哪怕是低于相应PCR方法的测定下限，也均会引起输血后的感染。

8.HBV preS1抗原检测：1979年国外学者首次完成了乙肝病毒基因组的克隆化研究，并将基因组分成4个开放读码框架。乙肝病毒蛋白的编码区分：S 区、C区、P区、x区。其中S基因编码S抗原、前S1抗原和前S2抗原。

最重要的介导部位是前S1蛋白的氨基酸(AA)21—47片段，变异的病毒只要这一区段完好就有传染性。前S1抗原主要存在于血清中HBV表面,机体内含有HBV就有前s1抗原,前s1抗原与HBV-DNA密切相关，能直接反映病毒活动性复制，可以作为HBV复制的标志之一。

9.乙肝两对半的常见模式及解释：

乙肝病毒血清标志物的临床意义

乙肝病毒血清标志物的临床意义（即常说的乙肝五项或称两对半） 序号HBsA g 表 面抗 原 抗 -HBs HBsA b 表 面抗 体 HBeA g E 抗原 抗 -HB e HBe Ab E 抗 体 抗 -HBc HBcA g 核 心抗 体 临床意义出现率 9种常见模式 1 - - - - - 过去和现在未感染过HBV。1-30% 2 - - - - + (1)既往感染未能测出抗-HBs；(2)恢复期HBsAg已 消，抗-HBs尚未出现；(3)无症状HBsAg携带着。 5-10% 3 - - - + + (1)既往感染过HBV；(2)急性HBV感染恢复期； (3) 少数标本仍有传染性。①HBV感染已过；②抗HBs 出现前的窗口期 2-10% 4 - + - - - (1)注射过乙肝苗有免疫；(2)既往感染；③假阳性1-6% 5 - + - + + 急性HBV感后康复。0.5-5% 6 + - - - + (1)急性HBV感染；(2)慢性HBsAg携带者；(3)传染 性弱。 10-15% 7 - + - - + 既往感染，仍有免疫力。HBV感染，恢复期。5-15% 8 + - - + + (1)急性HBV感染趋向恢复；(2)慢性HBsAg携带者； (3)传染性弱。即俗称的“小三阳”。 5-10% 9 + - + - + 急性或慢性乙型肝炎感染。提示HBV复制，传染强。 即俗称的“大三阳”。 30-40% 16种少见模式 1+ - - - - (1)急性HBV感染早期,急性HBV感染潜伏期； (2)

0 慢性HBV携带者，传染性弱。1 1 + - - + - (1)慢性HBsAg携带者易转阴；(2)急性HBV感染趋向 恢复。 1 2 + - + - - 急性HBV感染早期或慢性携带者，传染性强。1 3 + - + + + (1)急性HBV感染趋向恢复；(2)慢性携带者。1 4 + + - - - (1)亚临床型HBV感染早期；(2)不同亚型HBV二次感 染。 1 5 + + - - + (1)亚临床型HBV感染早期；(2)不同亚型HBV二次感 染。 1 6 + + - + - 亚临床型或非典型性感染。1 7 + + - + + 亚临床型或非典型性感染。1 8 + + + - + 亚临床型或非典型性感染早期。 HBsAg免疫复合物， 新的不同亚型感染。 1 9 - - + - - (1)非典型性急性感染；(2)见于抗-HBc出现之前的 感染早期，HBsAg滴度低而呈阴性，或呈假阳性。 2 - - + - + 非典型性急性感染。 2 1 - - + + + 急性HBV感染中期。 2 2 - + - + - HBV感染后已恢复。 2 3 - + + - - 非典型性或亚临床型HBV感染。2 4 - + + - + 非典型性或亚临床型HBV感染。

乙肝血清标志物与HBV—DNA定量检测对诊治乙肝的临床价值研究

乙肝血清标志物与HBV—DNA定量检测对诊治乙肝的临床价值研 究 目的：探讨乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测对诊治乙肝的临床价值。方法：选取2014年1月至2014年12月期间我院收治的乙肝患者50例，根据乙肝血清标志物将其分为A、B、C三组，其中A组为抗-HBc阳性、HBeAg、HBsAg，共14例；B组为抗-HBc阳性、抗-HBe、HBsAg，共29例；C组为抗-Hbe阳性、HBsAg，共9例。分别对三组患者进行HBV-DNA定量检测，并对检测结果进行分析。结果：A、B、C三组患者的阳性检出率分别为100%、74.1%与55.5%。HBV-DNA定量检测结果分别为（60.6±15.2）×107copies/mL、（37.8±13.4）×107copies/mL与（22.3±8.2）×107copies/mL。结论：乙肝血清标志物检测无法对乙肝病毒在机体内的复制情况作出明确的判断，易出现漏诊与误诊。而HBV-DNA定量检测可有效避免上述弊端，可对病毒在机体内的复制情况作出明确的诊断，降低漏诊与误诊几率。因此HBV-DNA定量检测对诊治乙肝病毒具有更高的临床价值。 标签：乙肝血清标志物；HBV-DNA定量检测；乙肝；价值 乙型肝炎是指由乙肝病毒（HVB）感染所引发的一类传染性疾病，该病主要临床诊断方法包括乙肝血清标志物诊断与HBV-DNA定量检测[1]。临床上对于该两种诊断方法的选择存在一定的争议。在本次调查中，笔者即对该两种诊断方法对于乙肝的诊断价值进行分析，详情如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2014年1月至2014年12月期间我院收治的乙型肝炎患者50例作为本次调查对象，其中男30例、女20例，患者年龄为25～65岁，平均（44.8±3.4）岁。根据乙肝血清标志物对患者进行划分，其中A组为抗-HBc阳性、HBeAg、HBsAg，共14例；B组为抗-HBc阳性、抗-HBe、HBsAg，共29例；C组为抗-Hbe阳性、HBsAg，共9例。 1.2 方法 1.2.1 乙肝血清标志物检测以酶联免疫法检测抗-HBe、抗-HBc、抗-HBs、HBsAg、HBeAg等五项。 1.2.2 HBV-DNA定量检测诊断仪器与试剂为Option DNA Engine型PCR增仪口荧光定量HBV-DNA试剂盒，选择荧光定量检测法PCR。所有步骤严格按照相关说明进行。

乙肝五项检测操作规程

乙肝五项检测(乳胶法) (一)检测目的 乙型肝炎病毒标志物(HBsAgHBsAh、HBeAg、HBeAb、HbcAb)检测。 (二)测定原理 HBsAg、HBsAh、HBeAg均采用双抗体(原)夹心法原理。用抗HBsAg多克隆抗体包被硝酸纤维素膜，配以红色乳胶标记的抗HBs鲰单克隆抗体HBsAh，应用双抗体夹心法原理，定性检测血清／血浆中HBsAg；用HBsAg重组抗原和链霉亲和素一BSA包被硝酸纤维素膜，配以红色乳胶标记的HBs如重组抗原和生物素一BSA及其他试剂，应用双抗体夹心法原理，定性检测血清／血浆标本中HBsAb；用抗HBeAg单克隆抗体(Ehl)包被硝酸纤维素膜，配以红色乳胶标记的抗HBeAg单克隆抗体(Eh2)。应用双抗体夹心法原理，用于定性检测血清或血浆中HBeAg。 HBsAg、HBsAb、HBeAg测试时，将血清／血浆标本滴人试剂板加样处．标本在毛吸效应下向E层析，如标本中含有相应的待测物质，在测试区(T)内会出现一条红色条带，则是阳性结果。如标本中不含有相应的待测物质，则测试区(T)将没有红色条带，是阴性结果。无论待测物质是否存在于标本中，一条红色条带都会出现在质控区内(c)。质控区内(c)所显现的红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。 HBeAh、HBcAh采用竞争法原理。用HBeAg重组抗原包被硝酸纤维素膜，配以乳胶标记的鼠抗HBeAg单克隆抗体。应用竞争抑制法原理，定性检测血清／血浆巾HBeAI，；用HBcAg重组抗原包被硝酸纤维素膜，配以乳胶标记的HBcAb单克隆抗体，应用竞争抑制法原理，定性检测血清／血浆中HB。Ah。 测试HB。Ah、HBcAb时，将血清／血浆标本滴入试剂板加样处，随之标本在毛吸效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体．则同膜上测试区(T)的单克隆抗体竞争与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体，预包被在乳胶颗粒上的相应抗原则同膜上测试区(T)的单克隆抗体全部结合。阳性标本，测试区(T)将没有红色条带；阴性标本，测试区(T)会出现明显的红色条带c无论相应的抗体是否存在于标本中，一条红色条带都会出现在质控区内(c)。质控医内(c)所显现的红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准． (三)操作步骤 具体方法参照试剂盒说明书。举例如下： 在进行任何测试前必须先完整阅读使用说明书．使用前将试剂板和血清／血浆标本恢复至室温(20～30％)。从原包装铝箔袋中取出试剂盒(注意：在扣开铝箔前应先恢复至室温)，在l小时内应尽快地使用。 1.将试剂盒置于干净平坦的台面上，用吸管吸取血清／血浆标本，逐滴垂直加入于试剂板的五个加样子L中(每孔2。3滴)。 2.加样后立刻开始计时，等待红色条带的出现，在15分钟时读取测试结果。在20分钟后读取的结果无效． (四)结果判定 由于前三个项目HBsAg、HBsAb、HBeAg使用双抗体(原)夹心法原理，后两个项日HBeAb、HbcAb 使用竞争法原理。因此前一：个项日与后两个项目判读方法是不同的．请注意区别。 l .HBsAg、HBsAb、HbeAg (1)阳性(+)：两条红色条带出现。一条于测试区(T)内，另一条位于质控区(C)。阳性结果表明：标本中含有待测物质。 (2)阴性(一)：质控区(c)出现一条红色条带，在测试区(T)内无红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。

乙型肝炎感染血清标志物检测结果及临床意义

乙型肝炎感染血清标志物检测结果及临床意义 HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb 临床意义 -- -- -- -- -- 过去和现在未感染过HBV + -- -- -- -- (1)急性HBV感染早期,急性HBV感染潜伏期；(2)慢 性HBV携带者，传染性弱。 + -- + -- + 急性或慢性乙型肝炎感染。提示HBV复制，传染强。 即俗称的“大三阳”。 + -- -- + + (1)急性HBV感染趋向恢复；(2)慢性HBsAg携带者； (3)传染性弱。即俗称的“小三 阳”。 + + -- -- + (1)亚临床型HBV感染早期；(2)不同亚型HBV二次 感染。 （3）免疫复合物的存在。 + -- -- -- + (1)急性HBV感染；(2)慢性HBsAg携带者；(3)传染 性弱。 -- + -- + + 急性HBV感后康复。 -- -- -- -- + (1)既往感染未能测出抗-HBs(2)恢复期HBsAg已消，抗 -HBs尚未出现；(3)无症 状HBsAg携带者。 -- + -- -- -- (1)注射过乙肝苗有免疫；(2)既往感染；③假阳性。 -- + -- -- + 既往感染过乙肝病毒，现病毒已基本清除，身体在康 复。 -- -- -- + + (1)既往感染过HBV； (2)急性HBV感染恢复期；(3) 少数标本仍有传染性。+ -- + + + (1)急性HBV感染趋向恢复；(2)慢性携带者。 + + -- + -- 亚临床型或非典型性感染。 + + -- -- -- (1)亚临床型HBV感染早期；(2)不同亚型HBV二次感 染。 + -- -- + -- (1)慢性HBsAg携带者易转阴；(2)急性HBV感染趋向 恢复。 -- + + -- -- 非典型性或亚临床型HBV感染。 -- -- + -- + 非典型性急性感染。注意爆发性乙肝 -- -- + + + 急性HBV感染中期。 -- -- + -- -- (1)非典型性急性感染；(2)见于抗-HBc出现之前的感 染早期，HBsAg滴度低而呈 阴性，或呈假阳性。 -- + + -- + 非典型性或亚临床型HBV感染。 + + + -- + 亚临床型或非典型性感染早期。HBsAg免疫复合物， 新的不同亚型感染。 -- + -- + -- HBV感染后已恢复

乙型肝炎病毒标志物免疫学检验的质量控制管理

乙型肝炎病毒标志物免疫学检验的质量控制管理目的探讨乙型肝炎病毒标志物免疫学检验的质量控制管理措施。方法以 乙型肝炎表面抗原酶联免疫吸附试验（ELIsA）检测为例，选择吉林省卫生厅临床检验中心下发的200份乙肝质量控制血清为检测对象，将其随机分为观察组、对照组，每组100份，分别采用常规检测及经实验室质控管理后的检测。结果观察组准确率96%，对照组74%，观察组要明显优于对照组（P＜0.05），具有可比性。结论加强乙肝病毒标志物的质量控制管理，建立有该实验室针对性的、科学可行的室内质控管理方法，同时做好室间质量控制管理，不仅可明显提高检验结果的准确性，又可有力促进检验过程的标准化，保障检验结果的准确性。 标签：乙型肝炎病毒；免疫学检验；质量控制管理 乙型肝炎是一种常见的传染性疾病，严重威胁着人民的身体健康。乙肝病毒（HBV）标志物俗称两对半，包括HBsAg和抗-HBs、HBeAg和抗-HBe、抗-HBc，乙肝病毒标志物检验是临床重要的检测项目。HBV病毒侵人人体血液引发病毒血症，随血液进入肝细胞转录复制，释放病毒抗原性物质，引发机体产生免疫反应形成抗原抗体复合物造成肝细胞造成损伤[1-2]。临床免疫学检验是一种常用的检验手段，包括免疫原与血清制备、抗原抗体反应、化学发光免疫、放射免疫等检测技术，是一种重要的临床疾病检验方式，检测结果是临床重要的诊断治疗依据[3-4]。加强乙型肝炎病毒标志物的免疫学检验可以尽早发现感染者，及早治疗。该文选择吉林省卫生厅临床检验中心下发的200份乙肝质量控制血清为检测对象，探讨进行乙肝病毒标志物免疫检验质量控制管理的相关措施。现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择吉林省卫生厅临床检验中心对乙型肝炎病毒检测进行质量控制管理研究下发的200份乙肝质量控制血清为检测对象，将其随机分为观察组、对照组，每组100份。 1.2 方法 1.2.1 检验方法及措施两组血清样本均采用常规（ELIsA）方法进行检验。试剂：HBsAg试剂盒（上海荣盛生物有限公司生产），质控品（省临床检验中心发放）；仪器：洗板机和酶标仪（上海三科仪器厂生产）。 1.2.2 检测质量控制管理措施对照组按照常规临床免疫检验质量控制管理措施。观察组：检测过程进行全面的质量控制管理，①定期检定实验室检测仪器设备，做好检测仪器的定期保养，保持实验室环境、检测仪器完好；②做好室间质量控制管理，选择可靠的室间质控试剂和质控品，以确保检测的规范化；③做好室内质量控制，做好检测标本的来源控制，在具体的加样、孵育、冼板、显色

乙肝检查结果对照表

1、乙肝表面抗原（HBsAg）阳性：代表被乙肝病毒感染。（病毒数量） 2、乙型肝炎表面抗体（HBsAb或抗-HBs）阳性：代表机体对乙肝病毒有抵抗力，能够杀灭乙肝病毒。（对病毒的抗体） 3、乙肝e抗原（HBeAg）阳性：代表乙肝病毒复制活跃，传染性强。（病毒复制性强弱） 4、乙肝e抗体(HBeAb或抗HBe)阳性：代表病毒复制相对减少，传染性弱。（同上） 5、乙肝核心抗体（HBcAb或抗HBc）阳性：代表感染了乙肝病毒或曾经感染过乙肝病毒已经痊愈。乙肝病毒血清标志物的临床意义（乙肝两对半） HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 意义 + - - - - 急性HBV感染潜伏期 + - + - - 急性肝炎早期，传染性强 + - + - + 急性或慢性感染传染性强 + - - + + 急性或慢性感染后期传染性低 + - - - + 急性或慢性乙型肝炎HBV携带者 + + + - + HBsAg免疫复合物，新的不同亚型感染 + + + + + ①一种亚型的HBsAg及异型的抗HBs（常见） ②血清从HBsAg转化为抗HBs的过程（少见） - + - - + HBV感染，恢复期 - - - + + ①HBV感染已过 ②抗HBs出现前的窗口期 - + - + + HBV感染恢复期 - + - - - ①注射疫苗后

②遥远的过去感染 ③假阳性

乙肝“两对半”化验结果对照表 检查乙型肝炎病毒（HBV）感染最常用的血清学标志是乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(抗-HBs)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(抗-HBe)及乙肝核心抗体(抗-HBc)共5项指标，故称“乙肝两对半”，其作用有三：1.判断有无HBV感染；2.判断HBV感染者传染性的大小；3.作为慢性乙肝患者抗病毒治疗及疗效判断的依据之一，以下是几种常见的结果及意义。 模式HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 诊断结果临床意义 1 ＋- + －+ “大三阳” 表明有HBV感染且病毒复制活跃，传染性较强 2 ＋- - + + “小三阳” 表明有HBV感染但病毒复制相对静止，传染性相对较弱 3 ＋- - - + 恢复初期表明有HBV感染但病毒复制相对静止，传染性相对较弱 4 - + - - + 恢复后期表明曾感染过HBV，但已产生保护性抗体，不具有传染性，也不需注射乙肝疫苗 5 - - - - + 恢复后期表明曾经感染过HBV 6 - + - - - 完全恢复表明注射乙肝疫苗后产生的保护性抗体，若未注射乙肝疫苗，则表明曾经感染过HBV，现已产生保护性抗体，不具有传染性，也不需要再注射乙肝疫苗。 说明：“乙肝两对半”仅反映HBV感染及复制情况并不能完全反映病情轻重，如“大三阳”病情不一定重，而“小三阳”病情不一轻。若要判断乙肝病情的轻重，除要检查“乙肝两对半”外，还应结合肝功能试验、肝纤维化指标及B超、CT表现才能准确判断当前病情。另外，若要更准确地判断HBV的复制状态及病人的传染性，还应做乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）的定量检查。 这个也可以看一下。

乙肝病毒感染免疫应答及常用血清标志物临床意义

乙肝病毒感染免疫应答及常用血清标志物临床意义 乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝病毒科,具有明显的种属及嗜肝特性(尽管其亦可感染肝以外的组织、器官或细胞,如脾、辜丸、人外周血单个核细胞等),可致持续性病毒感染。我国在世界上属于乙型肝炎病毒感染的高发区,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的携带者己超过10%,通常判断mv感染及其状况的指标为HBV的血清学标志物,如HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗mc(即所谓的"两对半")、抗HBc IgM和HBV DNA等,了解这些指标在什么情况下出现及其临床意义,对于我们检验工作者来说,亦具有重要意义。 1. 机体对HBV感染的免疫应答 机体感染HBV后,HBV的包膜和核壳抗原作为外来抗原物质可激发机体产生针对其的细胞和体液免疫应答。细胞免疫应答通过T细胞膜上抗原受体复合体的α自异二聚体识别经抗原提呈细胞处理的与HLA分子结合的病毒抗原短肤进行,而体液免疫应答是基于B细胞表面的免疫球蛋白受体特异识别原始的未经处理的分泌型或结构型病毒抗原,且根据在抗原结合中是否需要T细胞辅助,又分为T细胞依赖性和T细胞非依赖性两种方式。 1.1.细胞免疫应答 机体对HBV感染的细胞免疫应答包括HLKII和I类限制性T细胞应答。HBV的包膜抗原和核壳抗原均可激发机体的川一个或多个表位的HLA一II类限制性CD4+和I类限制性CD8+T 细胞应答。机体感染HBV后,最早出现的对HBV的T细胞免疫应答针对的是HBV的核壳抗原(HBcAg),且反应强烈,相对来说,针对mv包膜抗原(HBsAg等)的T细胞应答则要弱得多。一般认为,对HBV核壳抗原的这种强烈的HLA-II类限制性T细胞应答与病毒的清除有重要关系。其机制主要是通过诱导病毒特异的细胞毒T淋巴细胞(CTL)作用及通过旁路机制辅助HBV 包膜特异性的B细胞产生抗ms中和抗体。后者在急性乙型肝炎的抗HBs的产生中具有重要作用,因为在急性乙肝时,针对msAg的HLA一II类限制性T细胞应答很弱。在慢性HBV感染,外周血中针对所有HBV抗原的T细胞应答与急性肝炎时相比较明显要弱,肝组织中可检测到有T细胞应答,但应答率亦较低。当慢性肝炎出现急性发作时,随着病毒复制活跃,血循环中HBV DNA和HbeAg大量增加,机体针对病毒衣壳的特异性T细胞反应出现增强,但此时由于HbsAg浓度无明显变化,针对病毒包膜抗原的T细胞仍较弱。这表明针对病毒核衣壳的II类限制性TE细胞应答可能依赖于衣壳抗原一定阙水平的表达,而病毒包膜特异性的T细胞应答由于持续高水平的HBsAg的存在受到抑制。 急性自限性乙型肝炎患者体内存在强烈的针对HBV包膜、衣壳及多聚酶的多个表位的多克隆性HLA-I类限制的细胞毒T淋巴细胞(CTL)应答。目前已确定的CTL表位大多为HLA-A2限制的。不同患者的CTL应答所识别的病毒抗原表位有所不同,大多数都可识别核心18~27,包膜183~191,250~258,335~343和多聚酶455~463的表位,少数识别其它表位,说明对HBV 的CTL的反应有个体差异。到目前为止,在核衣壳抗原上只发现了一个HLA-A2限制的CTL 表位,而HBV包膜抗原中有11个识别表位,多聚酶有5个,与II类限制性CD4+T细胞应答正好相反。所产生的针对病毒包膜抗原的强烈的CTL反应可能与包膜抗原的强亲水性有关。一些CTL识别表位常常位于与病毒特异性功能有关的病毒氨基酸序列中。如核衣壳141~151位点与HBcAg定位于胞核以及mv基因包装信号有关,该位点同时又是HLA-A51和HLA-AW68限制的CTL的识别表位:又如HBV包膜250~269位点与HBsAg跨膜有关,同时又是HLA-A2限制的细胞表位。CTL识别表位与病毒特异性功能相关序列一致的现象在机体抗病毒免疫中具有重要意义,因为如果病毒的这些CTL识别表位在机体的免疫压力下发生变异从而逃避免疫清除,这种变异也势必影响病毒的生活周期。急性HBV感染者对HBV所有抗原均有强烈的CTL 反应,而慢性持续感染者常常仅呈现微弱的甚或检测不到的病毒特异CTL反应。 1.2. 体液免疫应答 对HBV包膜抗原的体液免疫应答是T细胞依赖的。由于抗HBV包膜抗原的抗体通常是在急性

乙肝五项定量检测及意义

一、乙肝五项定量检测指标 1、乙肝表面抗原（HBsAg）定量检测： 1）参考值：mL 2）临床意义： （1）可作为HBV携带者乙肝病毒复制的参考指标 （2）评价拉美呋定的治疗效果 （3）监测应用alpha-干扰素治疗病人的乙肝病毒复制 （4）确定肝移植病人免疫球蛋白的使用剂量 2、乙肝表面抗体（抗-HBs）定量测定： 是HBsAg刺激机体产生的特异性抗体，是一种保护性抗体，能中和HBV。 （1）抗-HBs含量在0-10mIU/ml，表示不具有保护性，需要注射乙肝疫苗（3针：0-1-6方案）。 （2）抗-HBs含量在10-100mIU/ml，表示具有保护性，但较弱，需要乙肝疫苗强化注射（1针）。 （3）抗-HBs含量大于100mIU/ml，表示具有很强的保护性，不需要注射乙肝疫苗。 3、乙肝病毒e抗原（HBeAg） HBeAg增高说明病毒复制，具有很强的传染性。 4、乙肝病毒e抗体（抗-HBe） 抗-HBe阳性说明病毒复制减少，传染性弱，但并非没有传染性。抗HBe不是保护性抗体。 5、乙肝病毒核心抗体（抗-HBc） 抗-HBc：不是中和抗体，有IgG和IgM两种形式。IgM在早期出现，而IgG在恢复期出现，可持续多年或终身存在。 二、乙肝五项定量检测的优点 由于乙肝病毒容易发生变异，再加上乙肝定性检测方法的局限性，会出现假阴性结果，导致不能及时发现乙肝的感染，也就不能得到及时的治疗，对医护人员和其他患者也存在着被感染的威胁。 乙肝五项定量应用目前最先进的化学发光法检测，避免了假阴性和漏检的问题，而且准确，尤其对乙肝病人的疗效观察提供了依据，这是检验发展的趋势。 乙肝五项定量检测及意义

乙肝病毒血清标志物实验室检测的临床意义

乙肝病毒血清标志物实验室检测的临床意义 乙肝病毒（以下简称HBV）血清标志物实验室检测（即乙肝两对半检测）的临床意义对临床医生和被检对象至关重要。为了解HBV血清标志物的意义更好的为服务对象提供更高质量的解释和服务工作，现就HBV五项血清标志物常见模式的临床意义和少见模式（HBsAg、抗-HBs、HBeAg /抗-HBe同时阳性）的临床意义进行解释。 一HBV五项血清标志物常见模式的临床意义 现在国内大多数的医疗机构对HBV的检测通常采用五项血清学标志物联检，并且已经习惯了把五项结果作为一种模式全面分析了解HBV感染后的免疫状态，并以此作为诊断和疗效观察的依据。现就HBV常见的十种模式及其相应的临床意义总结见表1（摘自文献1）。 表1 HBV五项血清标志物常见模式及临床意义 模式HBsAg 抗-HB s HBeA g 抗-HBe 抗-HBc 临床意义 1 - - - - - ①过去和现在未感染过HBV；②窗 口期 2 - - - - + ①既往感染未能测出抗-HBs；②恢复期HBsAg已消失，抗-HBs尚未出现；③隐匿性HBV感染 3 - - - + + ①既往感染过HBV；②急性HBV感染恢复期；③抗-HBs出现前的窗 口期 4 - + - - - ①注射过乙肝疫苗，有免疫力 5 - + - + + ①急性HBV感染后康复；②既往感 染有免疫力 6 + - - - + ①急性HBV感染；②慢性HBsAg携 带者；③传染性弱 7 - + - - + ①既往感染，有免疫力；②急性H BV感染，恢复期 8 + - - + + ①急性HBV感染趋向恢复；②慢性 HBsAg携带者 9 + - + - + ①急性或慢性乙型肝炎感染，提示 HBV复制，传染性强。 1 0 + - - - - ①急性HBV感染早期或潜伏期；② 慢性HBV携带者，传染性弱。

病毒性肝炎血清标志物检查(一)

病毒性肝炎血清标志物检查(一) 【摘要】病毒性肝炎的病原体为肝炎病毒，目前已明确的肝炎病毒有，5种，即甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)、戊型肝炎病毒(HEV)。除HBV为双链DNA病毒外，其余均为单链RNA病毒。我国是病毒性肝炎的高发区，尤以HAV、HBV、HCV的感染更为突出。因此，准确、快速地检测肝炎病毒的标志物，对于病毒性肝炎的防治具有重要的意义。临床上根据各种肝炎病毒有特异性的血清标志物，能准确地进行病毒性肝炎的分型。 【关键词】病毒性肝炎血清标志物 (一)甲型肝炎病毒IgM、IgG抗体(抗-HAVIgM、抗-HAIgG) 目前主要通过ELISA检测抗-HAVIgM和抗-HAVIgG两种血清标志物对甲型肝炎进行病原学的检测。 在甲型肝炎感染的早期(发病后几天)血清中即可出现抗-HAVIgM，滴度很快升至峰值并持续2～4周，发病后1～2个月滴度和阳性率下降，于3～6个月消失。因此，抗-HAVIgM阳性，尤其是滴度较高时(>103)，常表明急性HAV感染或复发。抗-HAVIgG出现较抗-HAVIgM稍晚，几乎可终身存在，抗-HAVIgG抗体阳性，则表示过去曾受过HAV感染，但体内已无HAV，是一种保护性抗体，可用于甲型肝炎(简称甲肝)的流行病学调查。 (二)甲型肝炎抗原(HAV-Ag) 在粪便或肝组织中检测到HAV-Ag可作为急性甲肝的证据，但检测不到HAV-Ag也不能排除感染甲肝的可能性，因为HAV-Ag的排出期很短，而且通常只在潜伏晚期。 发病前1～2周内，感染者可通过常规粪便检测HAV-Ag而被发现。此时尚未出现ALT／AST 升高，也未出现抗甲肝抗体。早期发现对于预防治疗很重要(在接触者中给予免疫球蛋白预防)。 粪便中HAV-Ag排泄的持续时间与传染持续时间之间的相关性很好。如果粪便HAV-Ag阴性，那么特殊的卫生措施，例如粪便消毒或隔离患者，就势在必行。 (三)乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg) 1．HBsAg是检测HBV感染的主要标志，主要在感染HBV后1～2个月在血清中出现，可以维持数周、数月、数年，也可能长期存在。 2．血清HBsAg阳性提示HBV感染，可见以下几种情况：乙型肝炎潜伏期和急性期；②慢性迁延性肝炎、慢性活动肝炎、肝硬化、肝癌；③慢性HBsAg携带者。 3．HBsAg也可从许多患者的体液和分泌物中测出，如唾液、乳汁、精液、阴道分泌物等。4．HBsAg阴性的HBV感染也有报道，可能与S基因变异使其抗原性和免疫原性改变所致。HBsAg阴性、HBV-DNA阳性的患者中发现其124位的半胱氨基缺失，结果导致HBsAg的分泌障碍。目前，临床检测发现HBsAg和抗-HBs同时阳性的检出率有增高趋势，提示有免疫复合物的形成、HBV多种亚型的交叉感染，以及机体免疫功能紊乱等多种可能。 (四)乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs) 1．抗-HBs是机体针对HBsAg产生的中和抗体，它是一种保护性抗体，能够清除病毒，防止HBV感染，在急性乙肝中出现最晚，表示机体开始恢复，其抗体可持续多年，滴度与特异性保护作用相平行。 2．抗-HBs阳性意义：既往曾经感染过HBV，但现已恢复，且对HBV有一定的免疫力；②乙肝疫苗接种后已产生抗体。 3．抗-HBs如果以与HBsAg形成免疫复合物的形式出现，提示可能与肝细胞的免疫病理损伤有关。 (五)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg) 1．HBeAg位于Dane颗粒的核心部分，是一种可溶性抗原，其合成受HBV遗传基因调控，

乙型肝炎的实验室诊断

乙型肝炎的实验室诊断 　［血清标志物］对于乙肝的病原学诊断最初、也是最常用的是乙肝病毒血清标志物（HBVM）检测。HBVM主要包括：两对半（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）、HBxAg、HBxAb、前S抗原及抗体、DNA多聚酶（DNA－P）及抗体等。通过检测HBVM可以间接的多角度了解患者HBV感染、复制以及病情恢复情况。常用血清标志物是两对半，临床意义如下： 1. 表面抗原（HBsAg）：位于病毒外壳表面，由HBV基因组S区和前S区基因编码，完整的大分子HBsAg是完整病毒的必需条件。血清HBsAg的出现，意味着HBV的现症感染，是乙肝血清学检查最重要的指标。HBsAg是虽然只是HBV存在的间接指标，但诊断乙肝的最常用也是最重要的指标，主是因它出现最早，一般在感染后3周出现，有利于早期诊断。第二，它持续时间长，急性患者至少持续5周，最长可持续5个月，并且在血液中的释放量大，非常容易检测。前S1和前S2紧随HBsAg而出现在血流中，并与HBeAg和HBV－DNA相关。 2. 表面抗体（HBsAb）:　由于病毒HBsAg抗原性诱发机体产生的保护性抗体，HBsAb是一种保护系抗体，在HBsAg消失后数周后出现，并可持续多年存在。HBsAb是所有乙肝要关抗体中出现最晚的。常与HBcAb同时存在，而很难与HBsAg同时被检出来。抗前S1抗体出现于潜伏期，是所有抗体中出现最早的。抗S3抗体出现在急性期，处于HBV复制终止前后，提示有清除病毒的作用。 3. e抗原（HBeAg）:　HBeAg是一种可溶性蛋白抗原，一般仅见于HBsAg阳性血清中，阴性中偶见。HBeAg出现在血中稍后于HBsAg，同时消失很快，所以窗口期也不能出现。HBeAg是由HBV－DNA开放读码框前C区编码，与HBV的活动性复制密切相关，是HBV传染性的重要指标。HBcAg是HBV复制的标记，而HBeAg是HBV正在复制的标记。 4. e抗体（HBeAb）:在病毒复制过程中，e抗原暴露诱发机体产生。有一定保护作用。HBeAb紧接着HBeAg消失而出现，表示HBV复制已经减少，传染性降低。HBeAb持续时间不长，几月后逐渐消退。血清中HBeAb的检出意味着病毒复制中止或减少。 5. 核心抗体（HBcAb）:　由病毒C区编码的HBcAg诱导产生，没

常见乙型肝炎病毒标志物及其检测意义

常见乙型肝炎病毒标志物及其检测意义 乙肝病毒表面抗原（HBsAg）： HBsAg是乙肝病毒外壳部分的蛋白质，乙肝病毒感染人体后，便在肝细胞内复制装配，其中外壳部分常有剩余，此剩物进入血液就形成HBsAg血症。由于HBsAg本身不是完整的乙肝病毒，不含核酸，也无DNA 聚合酶活力，故无传染性，但有抗原性。由于它常伴随乙肝病毒的存在，故已被定为现症HBV感染的指标之一。检测HBsAg有助于乙型肝炎的诊断。 在急性乙型肝炎，HBsAg常在感染乙肝病毒后6－12周出现，当氨基转移酶（ALT、AST）或胆红素开始上升时，HBsAg滴度达到高峰；当症状出现后HBsAg滴度开始下降，多在发病4－5个月内消失。由于HBsAg 是感染乙肝病毒后出现的第一个乙肝病毒标志物，故常用于急性乙型肝炎的早期诊断。 在乙型肝炎急性症状消失、肝功能恢复后，仍持续阳性者，常提示肝炎慢性化。另外需要指出的是：有相当一部分HBsAg阳性的肝炎病人，其原先可能就有乙肝病毒感染，常表现为无症状带毒者，病情在不知不觉中进展，一旦出现症状，已是慢性乙型肝炎，甚至已是肝硬化了。 HBsAg是乙肝病毒感染的主要指标，但HBsAg阴性并不能排除乙型肝炎，约有5％的乙型肝炎病人出现HBsAg阴性。原因如下：1：急性乙型肝炎HBsAg阴性可能是抗HBs出现前的窗口期，即HBsAg消失，抗HBs尚未出现之际。2：乙肝病毒和丁肝病毒重叠感染，丁肝病毒大量复制，对HBsAg合成有抑制作用。3：乙肝病毒的S基因变异，不表达HBsAg。4：低水平的乙肝病毒感染，其HBsAg阴性是因为目前检测HBsAg 的方法还不够灵敏。另外，即使HBsAg阳性，亦需澄清是否有其他肝炎病毒的混合感染。因甲型和乙型、乙型和丙型、乙型和丁型以及乙型和戊型肝炎病毒均有双重感染。 乙肝病毒表面抗体（抗HBs） 乙肝病毒表面抗原（HBsAg）可使机体产生相应的抗体，即乙肝病毒表面抗体（抗HBs）。抗HBs可作为乙肝病毒既往感染的判断指标。抗HBs在感染乙肝病毒后4－5个月出现，多数病例随着它的出现HBsAg消失，也偶有HBsAg和抗HBs同时出现，或HBsAg消失而抗HBs仍阴性的“窗口”现象。抗HBs是保护性抗体，它的出现多数意味着乙肝病毒感染的恢复，并已产生免疫力。 临床上常遇到单项抗HBs阳性的情况，其出现原因及意义如下： （1）正常人群有5％－10％的人仅检出单项抗HBs，其中大多数滴度较低，多由于非特异性反应反映所致，这种低滴度抗体不能防止乙肝病毒再感染，仍应作为乙肝疫苗接种的对象。少数滴度较高，对乙肝病毒具有免疫力。 （2）在注射乙肝疫苗或高效价乙肝免疫球蛋白（HBIG）后出现单纯抗HBs是正常现象。 （3）婴儿可出现一过性抗HBs阳性，这是因为少数人抗HBs可通过胎盘破损面或分娩过程母血污染而进入胎儿体内。但这种乙肝表面抗体持续时间短暂，仅为数周至数月。 乙肝病毒e抗原（HBeAg） 乙肝病毒e抗原（HBeAg）是乙肝病毒核心部分的可溶性蛋白，一般认为，HBeAg是病毒复制和具有传染性的指标。 在急性乙型肝炎发病早期HBsAg出现阳性后数日至2周，几乎所有病人血清都可检出HBeAg持续阳性，为时短暂,呈一过性,此时传染性最强,如HBeAg持续阳性,提示肝炎慢性化。 在慢性乙型肝炎，HBeAg可与乙肝病毒脱氧核糖核酸聚合酶（DNAP）同时存在，并与血中丹氏（Dane）颗粒密切相关。另外，HBeAg持续阳性，还是慢性乙型肝炎活动期的标志。在HBsAg携带者中，HBeAg持续不消失，提示有肝损害。

(完整word版)乙肝血清标志物检测的临床意义

乙型肝炎病毒血清五项标志物（“两对半”）的 临床意义 1. 乙型肝炎表面抗原(HBsAg) HBsAg是机体感染HBV的标志，也是在机体血清中首先出现的病毒标志物。HBsAg出现的时间，与机体感染HBV的途径和感染的剂量有关。如果系输用HBsAg 阳性血，2周后即可检测到HBsAg，如用RIA法检测，于接种后6天，血清中即可出现HBsAg阳性；如感染剂量少，HBsAg出现阳性的时间可达3～4个月，甚至6个月；一般在感染HBV后4～6周可出现HBsAg阳性。HBsAg出现阳性后1～7周(平均约4周)才出现肝炎症状和肝功能异常。经血感染者，其潜伏期约为2个月；经口感染者，其潜伏期大约为3个月。 急性乙肝病程一般持续１－３个月，80%～90%的患者可以临床治愈［1］。H BsAg阳性在血中一般持续１－６周，长者可达２０周（14－148天）；在肝炎症状出现后1～4周或血清转氨酶达高峰后1～12周消失，如果HBsAg阳性持续超过6个月仍不转阴则称为持续阳性或慢性携带状态; 如系急性乙肝，HBsAg 持续阳性超过6个月则提示慢性化。我国HBV感染(急性和慢性)的人群中每年大约有4%～10%的HBsAg阳性者转阴，同时每年又有约4%～10%的人群由易感人群成为受感染者，因而，人群HBV感染状态在不断变化［2］。HBsAg阳性持续的时间和急性乙肝慢性化的比例与感染者的年龄有关，年龄愈小，形成持续感染或病情慢性化的概率愈大；围产期感染的婴儿80%将成为HBsAg的携带者；幼儿期感染者约30%将成为持续HBsAg携带者，正常成年人感染HBV后形成持续性感染的比例可能在5%以下；社会普通人群中约35%～50%的HBsAg阳性 携带者是在母婴围产期感染的［3］。 临床上，HBsAg阳性可见于急性乙肝患者的潜伏期、急性期；慢性乙肝，无症状携带者；部分肝硬化和肝癌患者的血清中和受HBV感染的肝细胞浆中。 HBsAg阳性一般来说表明机体内存在HBV感染，但阴性也不能完全排除H BV感染。原因是：①可能由于HBV和HBsAg含量极少，检测方法不够灵敏而漏检，或因试剂质量和操作问题而出现假阴性；②S基因变异引起HBsAg的表达和分泌发生障碍，体内虽存在HBV，但血清中测不到HBsAg或很少[5,6]；③S

乙肝五项的检查及临床意义

乙肝五项的检查及临床意义 乙肝两对半即乙肝五项，是确诊和了解乙肝(又称B型肝炎)病情的重要依据。包括：乙肝表面抗原HBsAg、乙肝表面抗体HBsAb、乙肝e抗原 HBeAg、乙肝e抗体HBeAb、乙肝核心抗体HbcAb。正常情况下五项指标全部阴性或乙肝表面抗体HbsAb阳性。其中乙肝两对半检查中的“乙肝大三阳、乙肝小三阳”是了解乙肝(又称B型肝炎)病情最为重要的综合性指标。 一、乙肝两对半（包括了乙肝大三阳、乙肝小三阳）的检查及临床意义 HBV（乙肝病毒）感染后病毒产生的蛋白释放入血导致相应的血清标志物，主要有三对，即即表面抗原（HBsAg）和表面抗体（抗HBs或HBsAb）、e 抗原（HBeAg）和e抗体（抗HBe或HBeAb）、核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc 或HBcAb），但核心抗原在血清中一般不易检出，仅其余两对半在血液中可检测出。 1、乙肝两对半（乙肝五项）的简要临床意义 2、乙肝五项各指标的常见变化与简要临床意义：

以上简单罗列了感染乙肝（B型肝炎）病毒后两对半的常见的一些表现形式，针对个体，可能仍存在其它不同的表现组合，或在转归中。所以碰到不典型的组合，不必担心，建议过段时间再次复检，一般不典型的情况不会持续太久。 3、乙肝两对半检测中乙肝大三阳、小三阳以及部分指标的临床意义及对策

（１）乙肝大三阳（乙肝五项135阳性）--是指两对半检查中，表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）和核心抗体（HBcAb）为阳性。乙肝大三阳，说明乙型肝炎病毒在人体内复制活跃，传染性较强．这类患者体内的血液、唾液、精液、乳汁、宫颈分泌液都可有传染性，如果同时有转氨酶增高者，首先就应注意隔离，在家庭内患者的碗筷等餐具可单独与家人分开，定期消毒。 ★ 专家对策：患者应到专科医院就诊采用抗病毒，提高机体免疫力和对症降酶保肝措施。建议做肝功能和肝B超检查。如果都正常，不要乱治疗，定期每半年做一次肝功能和肝B超检查。可以服用中草药，比较安全有效，服用中草药调节肝脏免疫功能，促进肝细胞修复再生，增强肝的抵抗力，阻止肝脏纤维化。抗HBV-免疫疗法辩证治疗“大三阳”>>> （２）乙肝小三阳（乙肝五项145阳性）--是指在乙肝（又称B型肝炎）的“两对半”检查的五项指标中，表面抗原(HBsAg)、E抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)检测均是阳性。提示急性或慢性乙型肝炎，体内病毒复制，为乙型肝炎病毒复制状态。乙肝小三阳通常是由“乙肝大三阳”转变而来，是人体针对E 抗原产生了一定程度的免疫力。 ★ 专家对策：乙肝小三阳（乙肝五项145阳性）应检查HBV-DNA及肝功能，根据具体情况进行综合分析。如果HBV-DNA（+）且肝功能异常，说明病毒复制，传染性强，应该采取以抗病毒为主的综合治疗。如果HBV-DNA（-）且肝功能、B 超及AFP等均长期正常，则说明病毒已复制不活跃，传染性很低，所以已无需隔离与治疗。乙肝小三阳全面解析>>> （3）乙肝五项（2、5项为阳性），其余阴性。既往感染，急性HBV感染已恢复。其中第二项阳性说明已经产生抗体，不用打疫苗。第五项阳性只提示曾被乙肝病毒感染过，现已恢复。 ★ 专家对策：这种情况患者不需要治疗，只要保持好生活规律，劳逸结合，注意加强锻炼，增强体质，做好定期复查即可。 （4）乙肝五项（2、4、5项为阳性），其余阴性。2、4、5阳性表示的意思是：1、急性乙肝感染恢复期；2、既往感染过乙肝；3、注射乙肝疫苗等产生了表面抗体。第二项HBsAb、第五项HBcAb阳性是既往感染并产生抗体的证明，因第四项HBeAb可存在较长时间才被清除，固常可出现2、4、5阳性。 ★ 专家对策：此时是感染乙肝（B型肝炎）病毒以后的恢复期，虽然已经产生了乙肝表面抗体，对乙肝也已经有了免疫力，但是还是必须了解自身表面抗

乙肝病毒HBV血清学标志物检测的临床意义

乙肝病毒HBV 血清学标志物检测的临床意义 HBV 是一种小的有包膜病毒它被分类为嗜肝 DNA 病毒科中的一员。虽然HBV 在动物病 毒中有若干近亲，但人类病毒中没有与 HBV 相似者,HBV 的DNA 基因组只含四个编码病毒蛋 白的基因：编码三种形式的表面抗原的表面基因 S ,编码HBeAg 和HBcAg 的前核心/核心基 因C ,编码x 抗原的基因X 和编码HBVDNA 聚合酶的聚合酶基因 P 。 HBV 的复制 000*4^ A(n) cccDNA 转录 mRNA | 细胞核 HBV 利用一种与逆转录病毒如人类免疫缺陷病毒 Human 1mmunodeficiency Virus,HIV 复 制方式相关的新复制策略?在这一过程中，将 RNA 逆转录为DNA 是复制周期中极其重要的一 步。然而 与逆转录病毒不同的是 HBVDNA 在复制时并不整合到宿主细胞的 DNA 中去。当一 个有感染性的 HBV 颗粒结合并进入肝细胞时， HBVDNA 进入肝细胞并变为共价闭合环状 DNA,cccDNA,CoValent Closed C yc1ic DNA 。这种 cccDNA 是高度稳定的， 而且是 HBV 复 制过珵中重要的中间产物，其作用是作为 RNA 拷贝的模板。这些 RNA 拷贝中最大者被称为 HBV 前基因组mRNA ，它被转运到细胞浆中，它有双重功能，一方面作为合成新的 HBVDNA 的 模板;另方面又携带遗传信息指导病毒某些蛋白质合成 ，较小的HBVmRNA 则参与其他病毒蛋 白质的合成。病毒蛋白质合成开始之后，前基因组 mRNA 、HBV 核心蛋白和HBVDNA 聚合 酶装配在起形成新的病毒颗粒。 每个颗粒中的前基因组 mRNA 被HBVDNA 聚合酶转录为DNA 负链,minus sense,同时此RNA 模板被降解。而负链 DNA 再作为模板合成正链 DNA 。当 HBVDNA 的合成正在进行时，病毒颗粒在内质网中获得包膜并从细胞中输出到细胞外 ?少量新 的HBV 颗粒仍在细胞内，并以其DNA 补充细胞核内cccDNA 的储备。 有融染性的 HBVM 粒 肝细胞 (-)-DNA 畑胞浆 细胞核 DNA 有感染性的 卜一 HBVW 粒 、逆转录/ 内质网 、有包膜的 前基因 组

乙肝病毒血清标志物与HBV

乙肝病毒血清标志物与HBV 【摘要】目的：分析不同乙肝血清原标志物不同模式组与 hbv-dna定量检测结果的关系。方法：采用elisa方法检测乙肝病毒血清标志物5项，用荧光定量聚合酶链反应（fq-pcr）方法检测hbv-dna定量，比较两者之间的关系。结果：经fq-pcr检测，580份标本有hbsag标志物组成模式组4组，检出hbv-dna总阳性率占60.52%，其中hbsag、hbeag、hbcag、hbcab阳性模式组（大三阳）hbv-dna阳性占95.13%，hbsag、hbsab、hbcab、阳性模式组（小三阳）dna阳性占27.08%。hbsag、hbeag阳性模式组dna阳性占91.67%，“hbsag、hbcag”模式组hbv-dna阳性率为48.21%。全阴模式组和“hbsab、hbeab”阳性模式组hbv-dna检出阳性率为0。结论：血清中有hbsag标志物组成模式组均存在hbv-dna阳性检出率，大三阳模式组其hbv-dna阳性检出率高，将乙肝血清标志物和hbv-dna定量结合检测有利于病毒性肝炎乙型的诊断，判断传染性强弱以及治疗效果的评估。 【关键词】乙肝病毒；血清标志物； hbv-dna； elisa； fq-pcr 中图分类号 r512.6 文献标识码 b 文章编号 1674-6805（2013）19-0081-02 乙型肝炎病毒（hbv）感染是世界上最普遍的病毒感染之一。我国是hbv感染高流行区域，一般人群的感染率为9.09%[1]。急性乙肝有20%会转化为慢性乙肝，进而可能发展为肝硬化和肝癌。传统用elisa方法检查发现乙肝病毒血清标志物（即hbsag、hbsab、