一株对硝基苯酚降解菌的筛选鉴定及其降解特性
对硝基苯酚废水降解的初探.
广西轻工业 GUANGXI JOURNAL OF LIGHT INDUSTRY 化工与材料 2009年3月第3期（总第124期） 【作者简介】 杨红（１９７０－），女，广西大学化学化工学院实验师，研究方向：环境工程。【基金项目】 广西大学实验设备处教学改革项目《化学实验过程废水的处理研究》１前言 酚类废水主要是来自石油化工厂、树脂厂、塑料厂、合成纤维厂、炼油厂和焦化厂等化工企业，是水体的重要污染物之一。由于酚类化合物具有良好的化学、生物稳定性，不易降解，所以酚类废水的降解一直是废水处理中的难题 [1-3] ，对硝基苯酚也 有酚类的共性，是用于农药生产和染料合成工业中不可缺少的原料物质或中间产物，在化学工业生产中应用广泛。采用高级氧化水处理技术降解酚类废水是一种处理方法，液相高压放电技术是一种新型的水处理高级氧化技术，能处理造纸、制药、印染等生物难降解有机废水较理想的和有潜力的水处理技术。利用高压放电产生的臭氧协同过程中形成的紫外光和冲击波，可在水中形成·O 、·H 、·OH 等活性物质，可以将水中的有机物氧化降解，即利用在水中的放电形成紫外光、冲击波、臭氧等进行协同降解，强化了高浓有机废水的处理效果[4]。目前报道的高压放电技术能较好地解决这一问题[5-10]。本文在高压放电环境下考察对硝基苯酚降解效果及降解机理。
２实验方法 2.1实验方法 采用自制的高压放电电源可升高电压到30kV 。高压输出到图1所示反应器电极两端。 实验采用峰值电压为30kV ，频率为150Hz 脉冲高压，反应器为自制不锈钢针-筒曝气连续式反应器，针电极直径0.3mm ，放电电极水平间距2cm ，反应进行120min ，反应器处理循环废水量为300mL 。 图１反应装置示意图 2.2对硝基苯酚废水浓度的测定 采用高效液相色谱测定对硝基苯酚的浓度。Agilent 1200液相色谱仪，紫外光范围190-360nm ，ODS-C18反相色谱柱（krosmail, 250×4mm ），柱温：30℃，流动相是50%乙腈和0.2%醋酸的混合水溶液，流速为1.0mL ·min -1，检测波长为254nm 。 对硝基酚降解率按式D=X 0-! " X /X0×100%计算，其中D 为降解率，x 0为初始对硝基苯酚量，x 为降解后对硝基苯酚量。2.3对硝基苯酚放电降解过程紫外光谱分析 采用日本导津仪器有限公司UV-2501PC 型紫外可见分光光度计在200-500nm 波长段处进行扫描。2.4对硝基苯酚放电降解后产物的红外光谱分析 对实施放电处理过的对硝基苯酚进行浓缩与干燥后，采用KBr 压片法进行红外测试. ３结果与讨论 3.1对硝基苯酚模拟废水降解效果
土样中淀粉降解细菌的筛选综述
土样中淀粉降解细菌的筛选（设计性实验） 一、实验目的 1.掌握土壤样品中微生物菌种分离和筛选技术的实验设计方案。 2.掌握富集、平板稀释涂布法、分离筛选产淀粉酶菌株的基本原理。 3.初步掌握从土壤样品中分离筛选产淀粉酶菌株的基本技术。 二、实验原理 在自然条件下，产淀粉酶的细菌和其它各种细菌混杂生活在土壤中，要想分离出来必须建立相应的“筛子”。淀粉酶能使淀粉分解成葡萄糖，而淀粉与碘液发生反应形成蓝色化合物。葡萄糖不与碘液发生反应形成蓝色化合物，结果可使淀粉酶产生菌周围形成透明圈，从而筛选出淀粉酶产生菌。 微生物酶产生菌的筛选具体分为增殖培养、初筛和复筛过程。增殖培养是通过控制培养基的营养成分和/或培养条件使样品中的目的菌得以大量繁殖,而非目的菌的生长受到抑制或繁殖减缓,从而提高样品中目的菌的数量和比例。初筛是对所得的纯种进行检测。由于淀粉酶是胞外酶，在分离培养基中加适量可溶淀粉通过平板透明圈法来检测淀粉酶产生菌。筛选透明圈比值大的菌株接种到培养基中进行培养，再进行复筛。复筛的目的是淘汰底产菌。 三、实验材料 1、培养基：蛋白胨， NaCl，可溶性淀粉，琼脂，蒸馏水。 2、玻璃仪器: 培养皿10副，试管10支，三角瓶 6个，移液管 10支（1mL7支,10mL 3支），100mL量筒2个,玻璃棒，玻璃珠。 3、其它：酒精灯，硅胶塞,包装绳，包装纸,PH试纸，接种环，电子天平，称量纸,高压蒸汽灭菌锅，摇床，角匙，记号笔等。 四、方法与步骤 1、土壤样品: 食品厂、粮食加工厂、饭店等日常接触淀粉较多的肥沃土壤。 2、培养基的制备 (1)液体培养基：称取蛋白胨1.0 g、NaCl 0.5 g、可溶性淀粉0.2 g溶于装有100 mL蒸馏水的三角瓶中，调pH为7.2至7.4，分装为2个三角瓶,50mL/个,包扎，121℃高压蒸汽灭菌20分钟。 (2)固体淀粉培养基：称取蛋白胨1.5g， NaCl 0.75g，可溶性淀粉0.3g ，溶于
园林废弃物中高效降解菌的分离与鉴定
龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/7b1085764.html, 园林废弃物中高效降解菌的分离与鉴定 作者：周童袁泽斌万可牟昌红王从梅欧阳秀琴王波 来源：《天津农业科学》2018年第10期 摘要：为了更好地对园林废弃物进行资源化利用，试验以堆肥腐熟后的园林废弃物作为 供试材料，进行其菌株的分離和鉴定。通过细菌16S rDNA测序分析，鉴定出21株细菌，分 属于3门5纲7目10科13种，其中，厚壁菌门（Firmicutes）、变形菌门（Proteobacteria）和放线菌门（Actinobacteria）分别鉴定出4种、6种和3种；通过真菌rDNA ITS 测序分析，鉴 定出9株真菌，分属于1门（子囊菌门）2纲2目2科3属5种，其中青霉菌属（Penicillium）鉴定出3种，曲霉属（Aspergillus）和短梗霉属（Aureobasidium）各鉴定出1种。 关键词：园林废弃物；菌株；分离；鉴定 中图分类号：S961.6 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2018.10.001 Abstract： In order to make better use of garden wastes， the experiment was conducted to isolate and identify the strains from the garden wastes composting. According to the bacterial 16S rDNA sequencing analysis， 21 bacteria strains were identified， which were belonged to 3 phyla，5 classes， 7 orders， 10 families and 13 species. Among the three phyla， the bacteria of Firmicutes， Proteobacteria， Actinobacteria were identified 4 species， 6 species， and 3 species，respectively. According to fungal rDNA ITS sequencing analysis， 9 fungi strains were identified，which were belonged to 1 phylum （Ascomycota）， 2 classes， 2 orders， 2 families， 3 genuses， 5 species. Among the three genuses， the fungi of Penicillium， Aspergillus， and Aureobasidium were identified 3 species， 1 species， and 1 species， respectively. Key words： garden waste； strains； isolation； identification 随着城市绿化建设的飞速发展以及人们对生态环境要求的提高，园林废弃物的数量快速增加，焚烧、填埋、粉碎粗回收等非资源化的处理方式既带来了严重的环境问题[1]，同时也造 成了资源的浪费。大多数园林废弃物含有丰富的有机质，部分地区通过堆肥使其形成基质重新应用于园林和城市绿化，对土壤有很好的改良作用，是一种变废为宝的科学手段，一方面降低了对自然环境的污染，另一方面也节约了资源，是一种适合可持续发展的处置方式。 目前，处理园林废弃物堆肥的主要模式是参照农业废弃物的堆肥方式，然而，相较于一般的农业废弃物，园林废弃物中有更加丰富的、难以降解的木质纤维素，主要存在于植物细胞壁的微管组织中，纤维素分子链聚集成的微纤丝相互交织镶嵌排列形成结晶相和非结晶相，该结构具有超强的防御作用，化学试剂难以有效接触纤维素表面[2]，降解速率低，严重阻碍以园 林废弃物为原料的堆肥处理进程。
对硝基苯酚的分析检测现状[文献综述]
毕业论文文献综述 环境工程 对硝基苯酚的分析检测现状 1前言 硝基酚广泛地应用于农药、制药工业、杀虫剂、炸药、以及染料行业，具有致癌、致畸、致突变的潜在毒性，因此对其进行监测在生态环境研究中具有重要意义。硝基酚类的测定方法有气相色谱法、液相色谱法、紫外分光光度法、荧光光谱法和毛细管电泳法等[1]。最早采用的测定方法是分光光度法，其检测限偏高[2]；色谱法测定对硝基苯酚[3]，操作繁琐，仪器昂贵，分析成本高。后来又发展了一种操作更方便的直接用于测定的电化学方法[4-5]。本文将对对硝基苯酚的分析检测现状做一定的探讨。 2相关分析检测现状和发展 2.1气相色谱法 在各种色谱分析法中，气相色谱是一项广泛、实用、快速的分析技术。在石油化工、医药卫生、环境监测、食品检验、合成材料等行业都有广泛的应用。气相色谱分析法主要是气体和沸点低于400℃的各类混合物的快速分离分析。采用特殊技术，还可以分析高聚物的裂解产物，并进而对聚合物的结构进行鉴定。气相色谱与其他仪器联用技术的快速发展使其应用进一步扩展。仪器的微型化是气相色谱的重要发展方向之一。 在气相色谱法分析中，有关薄涂柱的研究已有报道[6]，用色谱法测定对硝基苯酚也有报道[7]。对硝基苯酚的沸点为279℃，近沸点就会分解。在硝基苯酚的合成中[8]，要测定对硝基苯酚，就要避免共存物质苯酚和邻硝基苯酚的干扰。柱温为150℃是，对硝基苯酚与其它成分分离开的出峰时间仅为3.19min，且峰形对称，容易定量，这样既避免了由于操作温度高时对硝基苯酚分解，又提高了定量准确性和分析速度，其最小检测量为0.84μg，回收率为96.00%,相对偏差为±5.01%[9]。
毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定
第26卷第9期 2006年9月 环 境 科 学 学 报 Acta Scientiae Circu m stantiae Vol .26,No .9Sep.,2006 基金项目:国家自然科学基金项目(No .20277001);安徽省优秀青年基金项目(No .04041067) Supported by the Nati onal Natural Science Foundati on of China (No .20771001)and Excellent Youth Foundati on of Anhui Pr ovince (No .04041067) 作者简介:吴祥为(1978—),男,讲师(硕士),E 2mail:wx wahau@ahau .edu .cn ;3通讯作者(责任作者),E 2mail:ri m aohua@ahau .edu .cn B i ography:WU Xiang wei (1978—),male,lecturer,E 2mail:wx wahau@ahau .edu .cn;3Correspond i n g author ,E 2mail:ri m aohua@ahau .edu .cn 吴祥为,花日茂,操海群,等.2006.毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定[J ].环境科学学报,26(9):1433-1439 W u X W ,Hua R M ,Cao H Q,et al .2006.Is olati on,identificati on and degradati on 2efficiency measure ment of chl or pyrifos 2degradaing bacteria [J ].Acta Scientiae Circum stantiae,26(9):1433-1439 毒死蜱降解菌的分离鉴定与降解效能测定 吴祥为1 ,花日茂 1,3 ,操海群1,汤 锋1,李学德1,岳永德 2 1.安徽农业大学资源与环境学院,安徽省“农产品安全”重点实验室,合肥230036 2.国际竹藤网络中心,北京100102 收稿日期:2005208201 修回日期:2006204214 录用日期:2006204229 摘要:取毒死蜱废水处理系统出口处的污泥进行驯化培养,分离出能降解毒死蜱的3株高效降解菌株B 、D 1和D 3,对降解效果最好的D 3菌株经中科院微生物研究所鉴定为玫瑰红红球菌(R hodococcus rhodochrous );3株菌株的生长情况及对毒死蜱的降解动力学研究表明,B 菌株在第3天繁殖增量达到最大,D 1、D 3菌株在第4天繁殖增量达到最大,B 、D 1和D 3菌株的最适宜生长温度都是在30℃;采用10mg ?L -1毒死蜱作为唯一碳源时,B 、D 1和D 3菌株对毒死蜱的降解速率分别为0.0543、0.0479和0.0620h -1;对于浓度为10mg ?L -1的毒死蜱,D 3菌投入的初始菌量 OD 223为0.4是最适宜的;D 3菌对不同初始浓度的毒死蜱降解表明,初始浓度增大,降解速率降低,半衰期延长. 关键词:毒死蜱;分离鉴定;降解;高效液相色谱 文章编号:025322468(2006)0921433207 中图分类号:X172 文献标识码:A Isol a ti on,i den ti f i ca ti on and degrada ti on 2eff i c i ency m ea surem en t of chlorpyr i fos 2 degrada i n g bacter i a WU Xiang wei 1 ,HUA R i m ao 1,3 ,CAO Haiqun 1,T ANG Feng 1,L I Xuede 1,Y UE Yongde 2 1.College of Res ources and Envir onment Anhui Agricultural University,The Key Laborat ory of Anhui Agri 2f ood Safety,Hefei 230036 2.I nternati onal Centre for Ba mboo &Rattan,Beijing 100102 Rece i ved 1August 2005; rece i ved in revised f or m 14Ap ril 2006; accepted 29Ap ril 2006 Abstract:Three bacterial strains that had a capability t o utilize chl or pyrif os as the s ole carbon and energy s ourceswere is olated fr om the sludge .Based on the mor phol ogy and physi o -bi ochem ical p r operties,the strain D 3which had the best degradati on capability t o chl or pyrif os was identified as Rhodococcus rhodochrous by I nstitute of M icr obi ol ogy Chinese Academy of Sciences .The bi omass got t o the maxi m um when strain B was cultivated f or 3d,however strains D 3and D 1need 4d .The op ti m al cultivating te mperature of all the strains was 30℃.I n aqueous s oluti on of chl or pyrif os at the concentrati on of 10mg ?L -1,the degradati on rate constants of strains B,D 1and D 3utilizing chl or pyrif os as the s ole carbon s ource were 0.0479,010543and 010620h -1,res pectively .It was op ti m al that the OD 223of strain D 3s oluti on attained 0.4for the degradati on of chl or pyrifos at the concentrati on of 10mg ?L -1.The results als o showed that the degradati on efficiency of the strain D 3t o chl or pyrif os decreased with initial concentrati on of chl or pyrif os increasing .Keywords:chl or pyrif os;is olati on and identificati on;degradati on;HP LC 1 引言(I ntr oducti on ) 化学农药主要是人工合成的生物外源化学物质,许多类型通常不易被生物降解,故称之为顽固性化合物(Recalcitrants )(王保军等,1998).大量研究证实微生物对土壤和水环境中的农药降解和污染消除起着重要作用,且已分离到一些能降解或转 化农药的微生物类群. 毒死蜱(chl or pyrifos ),化学名称:O,O —二乙基—O —(3,5,62三氯—22吡啶基)硫逐磷酸酯,是美国陶氏化学公司(Dow Che m ical Co .)于1965年开发并研制出来的一种广谱性有机磷酸酯类杀虫剂,被广泛用于农业和城市卫生害虫的防治(刘乾开,1993;吴慧明等,2003).目前,国内外关于毒死蜱的
废水中对硝基苯酚的性能和动力学
废水中对硝基苯酚的性能和动力学 随着现代化工行业的发展，含有对硝基苯酚的有机废水大量排放; 由于对硝基苯酚具有良好的生化稳定性，不易降解，从而造成了严重的水体环境污染. 目前，从废水中去除对硝基苯酚的方法主要有微生物降解法、萃取法、吸附法以及光催化氧化法[1, 2, 3, 4, 5]. 其中，吸附法由于不引入新的污染物，能耗较低，且能够从废水中分离污染物加以重新利用，备受广泛关注. 天然沸石独特的四面体结构、巨大的比表面积、稳定的化学性质，使得其具有较好的吸附性能，此外，沸石中的阳离子使其具有静电吸引力，对极性和易极化分子的吸附作用较强[6]. 针对废水中的对硝基苯酚，由于—C6H5基团是可极化基团，使得沸石能够被应用于废水中对硝基苯酚的去除[7, 8, 9, 10]. 然而，天然沸石表面硅氧结构所具有的亲水性，使得其吸附有机物的极限性能不理想，因此，为了提高沸石去除废水中有机污染物的能力，常在使用前对其进行改性处理[11, 12]，例如：天然沸石经质量浓度为5 g ·L-1十六烷基三甲基溴化铵溶液浸泡后，能够提高对酚类废水的去除效果[13, 14]. 本研究采用HDTMA对天然沸石进行改性，探讨改性条件对沸石吸附能力的影响，考察改性沸石吸附废水中对硝基苯酚的性能，在此基础上，研究吸附过程中的动力学和吸附等温线特征. 1 材料与方法 1.1 实验材料 实验所用天然沸石购自上海国药集团化学试剂有限公司，20-40目，经实验测得其阳离子交换量为0.36 mol ·kg-1，天然沸石样品经蒸馏水漂洗后，在105℃下烘干备用; 十六烷基三甲基溴化铵购自成都市科龙化工试剂厂(相对分子质量：364.45 g ·mol-1)，分析纯. 1.2 实验方法 1.2.1 HDTMA改性沸石的制备 基于现有研究[13, 14]，配制质量浓度为0.8%、 1.0%、 1.2%、 1.4%、 1.6%的不同pH值的HDTMA溶液，将天然沸石分别与配制好的HDTMA溶液以1 ∶10(质量体积比，质量单位g，体积单位mL)混合，于25℃，120 r ·min-1振荡6 h后，3 000 r ·min-1离心20 min 收集沉淀物，采用蒸馏水冲洗，相同条件下离心和冲洗4-5次，直到冲洗后的上清液中检测不到HDTMA，最后收集沉淀物于100℃下干燥12 h，获得改性沸石. 1.2.2 吸附实验 准确称取一定量的改性沸石添加至1.0 L浓度为20 mg ·L-1的对硝基苯酚溶液中，常温条件下120 r ·min-1搅拌2 h后，静沉30 min，取上清液经0.45 μm滤膜过滤后，测定其中的对硝基苯酚浓度. 废水pH采用0.1 mol ·L-1的HCl或NaOH溶液调节. 按下列公式计算对硝基苯酚吸附量qe和去除率η：
卡拉胶降解菌的筛选
卡拉胶降解菌的筛选 摘要：利用梯度稀释平板涂布的方法将经过富集的卡拉胶降解菌样品在涂布于 平板上，以卡拉胶为唯一碳源，在适宜的环境下培养，得到单个菌落，达到卡 拉胶降解菌的初步筛选的目的。 关键字：卡拉胶降解菌、初筛 前言：卡拉胶(Carrageenan)又名角叉菜胶、鹿角藻胶，是从红藻中提取的一种高分子亲水性多糖。根据其乳糖残基上硫酸酯基团的不同，可分为K一型、c-型、A一型、弘一型等7种最小重复结构单位。A一卡拉胶是一种高硫酸酯化的天然多糖资源，其降解产物A一卡拉胶寡糖的活性研究已得到充分的开展，如抗凝血、抗病毒、抗肿瘤等[1]。国内外的研究者从提取、结构、活性等方面对卡拉胶进 行了研究[2]。而不同的卡拉胶具有不同的凝固性和表面活性，可用于凝固剂黏 合剂、稳定剂、乳化剂、悬浮剂等，广泛用于食品工业。[3] 正文： 一．器材：试管16支，玻璃涂棒一根，1ml移液管3支，酒精灯一个，培养皿24个，试管架，1个锥形瓶，烘箱，高压杀菌锅 二．试剂：K2HPO4·3H2O，MgSO4·7H2O,FePO4·4H2O,CaCl2, H2O，NaNO3,NaCl卡拉胶，海水 三．步骤： 1.卡拉胶降解菌的初筛： （1）无机盐母液配制： K2HPO4·3H2O: 2.2g , MgSO4·7H2O: 1.25g ,FePO4·4H2O: 0.025 g , CaCl2: 0.25g 然后溶于水中，共配制250ml; [4] （2）培养基溶液配：NaNO3：0.7g , NaCl：5.25g ，卡拉胶：4.2g ， 溶于海水中，共配制350ml，并添加无机盐母液：35ml[5]
对硝基苯酚的制备
实验令邻、对硝基苯酚的制备P.178 【实验目的】 1掌握水蒸气蒸馏的原理及操作; 2学习苯酚的硝化反应。 【实验原理】一主反应 沸点214 C 279C 熔点45 C 114C 1副反应 （1）氧化；（2）二硝化。（措施：低温5-10C ） 2产物的物 质的量之比 苯酚:（邻+对）=1:1 3混合物分离 熔、沸点都相差很大（分子内氢键与分子间氢键） 二水蒸气蒸馏（第54页） 1必须满足的三个条件和适用的四种情况？ 2基本原理： 1 ）纯水体系 P 水增大》P总=1atm时，沸腾，100C 升温 2）水+A混合体系 NO2
P 总=P A + P水 P总P水、PA土匀增大升 P总=1atm时，沸腾，沸点＜100 C 温
二水蒸气蒸馏装置 1蒸汽发生器：产生蒸汽，加沸石，安全管的作用及位置。 2导气管：保持通畅、下斜，水夹的作用。 3蒸馏过程：先蒸出苯，后蒸出邻硝基苯酚。 【注意事项】 1逐滴滴入浓硝酸，才能维持温度5-10C 。 2对位产物重结晶后的滤液，不要倒掉。 3水蒸气蒸馏时，可以在三颈烧瓶的底部另加热少许。 4必要时，可以不用石棉网，直接给蒸汽发生器加热。 5反应残液处理：加10毫升1% NaOH 溶液。 【实验结果】 馏出液：含水、A 。 【实验装置与步骤】 一反应装置 铁圈 铁架台 l ；inL 沐硝酸 温度计 L - gIU L <7 5 5m 外 “ * 5 t 4 0 1 础 三实验步骤
1产品的颜色、形状: 2产率 M 邻 邻：产率= X100% M 理论 M 对 对：产率= X100% M 理论 M 邻+ M对 总产率二X100% M 理论 3实验得失分析: 【问题与讨论】第179页：1、2题 3简单的流程图，说明邻、对硝基苯酚二者从混合物到纯品的过程。
实验三高效苯酚降解菌的筛选及其性能测定课件.doc
实验三高效苯酚降解菌的筛选及其性能测定 一、实验目的 1、掌握微生物分离纯化的基本操作； 2、掌握用选择性培养基从环境中分离苯酚降解菌的原理和方法； 3、掌握微生物对酚降解能力的测定方法； 4、掌握4-氨基安替比林法测定苯酚含量的方法。 二、实验原理 在工业废水的生物处理中，对污染成分单一的有毒废水，可以选育特定的高效菌株进行处理。这些高效菌株以有机污染物作为其生长所需的能源、碳源或氮源，从而使有机污染物得以降解，具有处理效率高、耐受毒性强等优点。 苯酚是一种在自然条件下难降解的有机物，其长期残留于空气、水体、土壤中，会造成严重的环境污染，对人体、动物有较高毒性。本实验通过筛选苯酚降 解菌来处理含酚废水，将苯酚降解为为二氧化碳和水，消除对环境的污染。 + COOHCH2CH2COOH CH3COOH C O2+H2O 从环境中采样后，在以苯酚为唯一碳源的培养基中，经富集培养、分离纯化、降解实验和性能测定，可筛选出高效酚降解菌。 三、实验器材与试剂 1、样品 实验土样采自校园污水处理厂。 2、器材 恒温培养箱、恒温摇床、分光光度计、比色皿、试管、250mL三角瓶、100mL 容量瓶、培养皿、涂布玻棒、量筒、天平、灭菌锅、酒精灯、接种环、棉花、棉 线、牛皮纸、pH 试纸。 3、试剂 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、苯酚、四硼酸钠（Na2B4O7）、4-氨基安替比林、过硫酸铵（（NH4）2S2O8）、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4、琼脂。
苯酚标准溶液：称取分析纯苯酚 1.0g，溶于蒸馏水中，稀释至1000mL，摇 匀。此溶液溶度为1000mg/L。测定标准曲线时将苯酚浓度稀释至100mg/L。 Na2B4O7 饱和溶液：称取N a2B4O7 40g，溶于1L 蒸馏水中，冷却后使用，此 溶液的pH值为10.1。 3% 4-氨基安替比林溶液：称取分析纯4-氨基安替比林3g，溶于蒸馏水中， 并稀释至100mL，置于棕色瓶中，冰箱保存，可用两周。 2% （NH4）2S2O8 溶液：称取分析出（NH4）2S2O8 2g，溶于蒸馏水中，并稀 释至100mL，置于棕色瓶中，冰箱保存，可用两周。 4、培养基 富集培养基：蛋白胨0.5g，K2HPO4 0.1g，MgSO4 0.05g，水1000mL，调节pH 7.2-7.4，高压蒸汽灭菌，冷却后视需要添加适量的苯酚。 基础培养基：K2HPO4 0.6g，KH2PO4 0.4g，NH4NO3 0.5g，MgSO4 0.2g，CaC2l 0.025g，水1000mL，调节pH 7.0-7.5，高压蒸汽灭菌，冷却后视需要添加适量的苯酚。 四、实验步骤 （一）富集培养和驯化 采集活性污泥或土样，接种于装有100mL 富集培养基和玻璃珠并加有适量 苯酚（50mg/L）的三角瓶中，30℃振荡培养。待菌生长后，用无菌移液管吸取 1mL 转至另一个装有100mL 富集培养基和玻璃珠并加有适量苯酚的三角瓶中， 如此连续转接2-3 次，每次所加的苯酚量适当增加，最后可得酚降解菌占绝对优 势的混合培养物。 （二）平板分离和纯化 1、用无菌移液管吸取经富集培养的混合液10mL，注入90mL无菌水中，充 分混匀，并继续稀释到适当浓度。 2、取适当浓度的稀释菌液，加一滴于固体平板（由富集培养基加入2%的琼 脂组成，倒平板时添加适量的苯酚，浓度达到200 mg/L。）中央，用无菌玻璃涂 棒把滴加在平板上的菌液涂平，盖好皿盖，每个稀释度做2-3 个重复。 3、室温放置一段时间，待接种菌液被培养基吸收后，倒置于30℃恒温箱中 培养2-3d。 4、挑选不同菌落形态，在含适量苯酚的固体平板上划线纯化。平板倒置于
对硝基苯酚钠
对硝基苯酚钠化学品安全技 术说明书 第一部分：化学品名称化学品中文名称：对硝基苯酚钠 化学品英文名称：p-nitrophenol sodium salt 中文名称2：4-硝基酚钠 英文名称2：sodium 4-nitrophenoxide 技术说明书编码：2189CAS No.： 824-78-2 分子式： C 6H 4NO 3·Na 分子量：161.09第二部分：成分/组成信息 有害物成分含量CAS No.第三部分：危险性概述 健康危害：对人体有毒。对眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有刺激作用。 环境危害：对环境有危害，对水体可造成污染。燃爆危险：本品可燃，具腐蚀性、刺激性，可致人体灼伤。第四部分：急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。食入：饮足量温水，催吐。就医。第五部分：消防措施危险特性：遇明火、高热可燃。其粉体与空气可形成爆炸性混合物, 当达到一定浓度时,遇火星会发生爆炸。受高热分解放出有毒的气体。具有腐蚀性。有害燃烧产物：一氧化碳、二氧化碳、氮氧化物。灭火方法：消防人员须佩戴防毒面具、穿全身消防服，在上风向灭火。切勿将水流直接射至熔融物，以免引起严重的流淌火灾或引起剧烈的沸溅。灭火剂：雾状水、泡沫、干粉、二氧化碳、砂土。第六部分：泄漏应急处理应急处理：隔离泄漏污染区，限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴防尘口罩，穿防腐防毒服。不要直接接触泄漏物。小量泄漏：避免扬尘，小心扫起，收集于密闭容器中。大量泄漏：收集回收或运至废物处理场所处置。第七部分：操作处置与储存 有害物成分 含量 CAS No.: 对硝基苯酚钠 824-78-2
苯酚降解菌的分离和鉴定
目录 目录 (1) 摘要 (2) Abstract (3) 第一章绪论 (4) 1.1 苯酚降解菌的定义及分类 (4) 1.2苯酚降解菌的性质及其用途 (4) 1.3苯酚降解的研究现状 (5) 1.4苯酚降解菌生产菌的筛选 (6) 1.5本课题的研究思路及意义 (6) 第二章材料与方法 (7) 2.1试验材料 (7) 2.2试验方法 (8) 2.2.2苯酚降解菌的驯化 (8) 2.2.3菌种在不同条件下的降解能力 (9) 2.2.4最优菌种的鉴定 (9) 3.1苯酚降解菌筛选结果及性状初步研究 (11) 3.11筛选结果 (11) 3.1.1.1初步筛选的结果 (11) 3.1.1.2 菌种驯化中的结果 (11) 3.1.2 H-1菌株的性状初步结果 (13) 3.2 H-1菌株分类鉴定结果 (13) 第四章结论 (14) 4.1菌种的筛选结果 (14) 4.2菌种的鉴定 (14) 参考文献 (15) 致谢.......................................................................................... 错误!未定义书签。
一株苯酚降解菌的分离和鉴定 摘要 为了寻找能高效降解苯酚的微生物, 从土壤中筛选得到了一株苯酚降解菌,通过逐渐增加苯酚的浓度,然后驯化出一株高效降解苯酚的细菌H-1. 当在30 ℃培养48h 时其降解率高达92.11%. 经理化特征测定及外观鉴定,将其初步鉴定为假单胞菌属.再经过对比实验测各种因素(碳源、温度、pH、通气) 对该菌生长及降解苯酚能力的影响,得知该菌能以苯酚作为唯一碳源,最适生长温度为32 ℃,最适pH 为7.0. 该菌为好氧菌,在空气充足的条件下可提高降解能力. 该菌菌落较小，菌落呈微黄色。菌体呈直或微弯的杆装，没有菌柄也没有鞘。不产芽孢。对该菌做生化鉴定，可知该菌革兰氏染色为阴性，可水解苯酚，生长温度为32℃，生长pH为pH 6.5～7.5。参照东秀珠,蔡妙英的《常见细菌系统鉴定手册》等文献方法，以形态和培养特征为主，生理生化特性及生态特性为辅，经初步鉴定为假单胞菌属，命名为H-1，具体确定到种则需要进一步的研究。 【关键词】：筛选苯酚降解鉴定
对硝基苯酚的总结
对硝基苯酚（PNP） 英文别名：p-Nitrophenol;Phenol,4-nitro-;4-Nitrophenol;4-Hydroxynitrobenzene 分子式：C6H5NO3 分子量：139.11 结构式： 物理化学性质：纯品为浅黄色结晶。无味。熔点114-116℃，沸点279℃，闪点169℃，相对密度1.479（20/4℃）。常温下微溶于水（1.6%，25℃），不易随蒸汽挥发。易溶于乙醇、氯仿及乙醚。溶于酸液时，淡黄色逐渐退去，PH3-4之间，几乎无色。溶于碱液时，颜色加深。能升华。 最简易的制备法：将对硝基氯苯与氢氧化钾在氨中于75℃加热3h，反应后用盐酸酸化，即得对硝基酚。 储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房；远离火种、热源；包装密封；应与氧化剂、还原剂、碱类、食用化学品分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有合适的材料收容泄漏物。 健康危害：对硝基苯酚对皮肤有强烈刺激作用；能经皮肤和呼吸道吸收；动物实验可引起高铁血红蛋白血症，体温升高，肝、肾损害。 急性毒性：LD50：250 mg/kg(大鼠经口)。 危险特性：遇明火、高热或与氧化剂接触，有引起燃烧爆炸的危险。受热分解放出有毒的氧化氮烟气。 液相色谱的检测方法（HPLC：High performance liquid chromatographic）：色谱柱：柱长25 cm，内径4.6 mm，不锈钢柱 柱填料：反相C18柱（C18键合固定相，5～6μm） 柱温：55℃ 流动相：甲醇：水=50：50 流速：1.O mL/min 检测器波长：318 nm 例如：有关我课题的底物（IDAN）和产物（IDA）标样样品的液相色谱图如下：
PAHs降解菌的分离_鉴定及降解能力测定
第23卷 第3期海洋环境科学V ol.23,N o.3 2004年8月MARI NE E NVIRONME NA L SCIE NCE Aug.2004 PAH s降解菌的分离、鉴定及降解能力测定 徐 虹1,章 军1,刘陈立1,邵宗泽2 (1.厦门大学 生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建厦门 361005;2.国家海洋局 第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室,福建 厦门 361005) 摘 要:以芴、菲、蒽、芘为碳源和能源筛选、分离PAHs降解菌。14株能降解利用PAHs的菌株被分离。通过HP LC分析,在 含芴、菲、蒽、芘的混合培养基质中10号菌的降解能力最强。研究它的降解性能和生长情况,表明该菌在混合反应体系中培 养30d后对芴、菲、蒽、芘的降解率分别为95.27、90.46、28和80%;在只含一种PAH的单反应体系中该菌对芴、菲、蒽的降解 能力提高,降解率分别可达98.91、94.32和52.17%,而对芘的降解能力则降低,降解率仅为62.47%。与混合PAHs培养体系 相比,在单一PAH培养体系中,细菌的对数生长期缩短1/3。经生理生化鉴定和16S rDNA序列对比分析,确定10号菌株属 于假单胞菌,命名为P seudomonas sp FAP10。 关键词:生物降解;多环芳烃;假单胞菌 中图分类号:O625.15;X55 文献标识码:A 文章编号:100726336(2004)0320061204 Isolation and identification of PAH2degradating strains and their degradation capability X U H ong1,ZH ANGJun1,LI U Chen2li1,SH AO Z ong2ze2 (1.The K ey Laboratory of M inistry of Education for Cell Bilogy and Tum or Cell Engineering,School of Life Science,X iamen Univer2 sity,X iamen 361005,China;2.The Third Institute of Oceanography,S OA,X iamen 361005,China) Abstract:Fluorenen,phenathalene,anthracene and pyrene were used as carbon and energey s ource to is olate and screen PAHs2degrading strains.F ourteen strains capable of degrading PAHs were is olated from the petroleum in seawater contaminated.Analyses was done by HP LC,strain N o.10showed the strongest degrading ability in the mixing system of fluorene、phenathalene、anthracene and pyrene.Its degradation performance and growth curve were tested. The degradation rates of fluorenen,phenathalene,anthracene and pyrene were95.27%、90.46%、28%and80%respectively in the mixing system within 30d.Under the condition of single PAH existence,the degradation rates of fluorene、phenathalene and anthracene by strain N o.10increased to98.91%、94.32%、52.17%respectively while the degradation rate of pyrene decreased to62.47%.C om pared to the mixing system,the logarithmic growth phase of strain N o.10was shortened one third in single PAH system..Based on the results of physio-biochemical identification and phylogenetical analyses of 16S rDNA sequence,strain N o.10was belonged to P seudomonas sp,named as P seudomonas sp FAP10. K ey w ords:biodegradation;polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs);P seudomonas 目前对于海洋油污染的清除方法主要有物理方法、化学方法和生物修复方法。其中生物修复法能利用生物有机体将污染物转化为稳定、无毒的终产物和微生物自身的生物量从根本上消除环境中的油污染,具有成本低、投资少、效率高、原位降解及不易造成二次污染等优点而受到普遍重视[1,2]。因此生物修复方法已经广泛应用于油污染的研究中。对于石油中烷烃、苯、甲苯等组分,大多数种属的微生物都具较强的分解能力,但对于高脂溶性、难挥发、具致畸、致癌及致突变作用的多环芳烃(PAHs)的降解情况则不甚理想,为此,许多研究者也进行了大量研究,取得了不少成果[3～10]。本研究旨在从石油污染的海域初步筛选出对多种PAHs 组分均具较强降解能力的海洋降解菌,为将来研究PAHs生物降解的分子机制,构建能降解PAHs的基因工程菌奠定基础。 1 材料与方法 1.1 培养基 MS M培养基:NaCl24g/L,NH4NO31.0g/L, K Cl0.7g/L,KH2PO42.0g/L,Na2HPO43.0g/L, MgS O4?7H2O0.7g/L,CaCl20.02g/L,FeCl3 收稿日期:2003210217,修改稿收到日期:2003212201 基金项目:国家海洋局第三海洋研究所海洋生物工程重点实验室开放基金[A97304(021)] 作者简介:徐 虹(19732),女,湖南常德人,在职博士,主要从事基因工程与分子生物学研究。
多环芳烃高效降解菌的筛选.
多环芳烃高效降解菌的筛选 2011-01-18 摘要：以多环芳烃芘和苯并(a)芘为供试物,对多株土著菌和引进菌同时进行筛选试验.结果表明,引进菌经过驯化后对芘和苯并(a)芘都具有一定的降解能力,降解率在30%～80%,通过SPSS数理统计分析软件对数据进行处理后得出,引进细菌B61、B67、M-B和引进真菌Y219、Y220、M-Y作为固定化包埋的`菌种;土著菌对芘和苯并(a)芘的降解率可达40%～95%,经过筛选后确定,土著细菌B02、B07、B09和土著真菌F02、F05、F06作为固定化包埋的菌种.通过试验对上述各菌进行了生长曲线的测定,细菌和酵母菌的对数生长期是5～20 h,真菌的对数生长期是10～55 h,这为固定化微生物提供了一定的前提条件.作者：王 新李培军巩宗强张辉 V.A.Ver khozina WANG Xin LI Pei-jun GONG Zong-qiang ZHANG Hui V.A.Ver khozina 作者单位：王新,WANG Xin(中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁,沈阳,110016;沈阳工业大学理学院,辽宁,沈阳,110023) 李培军,巩宗强,张辉,LI Pei-jun,GONG Zong-qiang,ZHANG Hui(中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁,沈阳,110016) V.A.Ver khozina,V.A.Ver khozina(俄罗斯科学院西伯利亚分院闽诺格拉多夫地质研究所,伊尔库茨克,664033) 期刊：农业环境科学学报 ISTICPKU Journal：JOURNAL OF AGRO-ENVIRONMENT SCIENCE 年，卷(期)：2007, 26(z1) 分类号：X172 关键词：土著菌引进菌筛选对数生长期
聚乙烯以及PAEs降解菌筛选方法
一、P AEs（邻苯二酸甲酯）降解菌的筛选 1.样品来源 南极样品，连云港海域水样泥样，最好为工业废水排污口附近海域水样。 2.特殊药品 PAEs是邻苯二甲酸与一些醇类形成的酯的统称。 其中DMP、DMI、DMT、MMI等较为常见[1]。根据情况选择底物。至少包含3种 同的底物[1, 2]。 3.培养基 基础无机盐（MSM）培养基（g/L）: K2PHO4 5.8, KH2PO4 4.5, (NH4)2SO4 2.0,MgCl2 0.16,CaCl2 0.02, Na2MoO4 0.0024, FeCl3 0.0018, MnCl2 0.0015 pH=7按照200mg/L加 入PAEs（邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲 酸二正辛酯各50mg/L。如果药品种类有变化则按总量200mg/L平均加入。） 4.降解菌株的驯化与分离纯化方法 4.1从4个样品中分别取0.5g于PAEs-MSM液体培养基中。 4.225℃下振荡培养7d。 4.3将有浑浊样品逐步转接至PAEs浓度分别240mg/L、280mg/L、320mg/的培养基 中培养，每次转接在25℃下培养7天。 4.4纯化时，用接种针蘸取少量菌液，在PAEs平板上分离纯化。 5.降解菌降解能力的测定 根据文献，一般使用HPLC法对PAEs的降解菌降解产物进行分析[3]。 但是如果菌株可以在PAEs为唯一碳氮源的PAEs-MSM培养基中生长，则可以认为 菌株具有降解PAEs的能力。 二、聚乙烯降解菌的筛选 1.样品来源 南极土样，连云港海域泥样、水样，最好为近海潮间带塑料堆积处泥样。 2.特殊药品 分子量为2000和5000的无任何添加物的纯聚乙烯粉末 3.材料预处理 将聚乙烯粉末放在无菌操作台紫外灯下紫外杀菌3h。并用接种环挑取少量灭菌的粉 末分别接入牛肉膏蛋白胨培养基、马丁氏培养基和高氏一号培养基。在37℃和28℃ 下培养72h。如粉末周围均没有发现菌落生长，则粉末已彻底灭菌。 4.培养基（g/L） 高氏一号培养基：可溶性淀粉20，KNO3 1，NaCl 0.5，K2HPO4 0.5，FeSO4 0.01，琼脂粉20，pH 7.2 马丁氏培养基：葡萄糖10，蛋白胨5，KH2PO41, MgSO40.5 1/3000孟加拉红 100mL，琼脂18 自然pH 牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3，蛋白胨10，NaCl 5，琼脂18，pH 7.2 无碳氮源琼脂固体培养基：K2HPO4 0.7，KH2PO4 0.7, MgSO4 0.7g, NH4NO3 1, NaCl 0.005, FeSO4 0.002, ZnSO4 0.002 MnSO4 0.001 琼脂18，自然pH 培养基A：3cm*3cm膜片一张，蛋白胨10，石蜡油0.1mL，K2HPO40.7，KH2PO4 0.7, MgSO4 0.7g, NH4NO3 1, NaCl 0.005, FeSO4 0.002, ZnSO4 0.002 MnSO4 0.001， 培养基B牛肉膏3，3cm*3cm膜片一张，石蜡油0.1mL蛋白胨10，琼脂18， K2HPO4 0.7，KH2PO4 0.7, MgSO4 0.7g, NH4NO3 1, NaCl 0.005, FeSO4 0.002, ZnSO4 0.002 MnSO4 0.001