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分子生物学复习题总结

分子生物学复习题总结
分子生物学复习题总结

一、简述DNA二级结构的特点

双螺旋:DNA两条核苷酸链反向平行,以一定平行距离绕一个轴盘旋,形成一个右旋的双螺旋体。

主链:磷酸和核苷酸排列在双螺旋外侧,彼此通过3-5磷酸二脂键相连接,形成主链。

碱基配对:两条主链相对应的碱基按照AT和GC的配对原则由氢键相连,其中AT之间由两个氢键相连,GC之间由三个氢键相连。主链上碱基排列顺序储藏了遗传密码信息。

结构尺寸和大小沟:DNA双螺旋分子直径为2nm,螺距为,其中包括10个碱基对,碱基与碱基之间距离为。螺旋外部有两个凹槽,根据大小分为大小沟,都能使蛋白质分子进入而与碱基相接触。

二、核酸的变性

DNA二级结构和三级结构受到物理化学因素的破坏而解体,但其一级结构核苷酸间共价键并不断裂。

DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定性的因素,如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可引起核酸分子变性。

三、核酸的复性

变性DNA在适合的条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合,按原来的碱基对配对形成双螺旋结构的过程。

影响因素:DNA长度、序列、浓度

四、核酸杂交

不同来源但具有同源性的两条DNA或RNA单链按照碱基配对原则结合在一起,这一过程就是杂交。

杂交充分利用了核酸的变性和复性的特性,在DNA之间,DNA 和RNA之间以及RNA之间均可进行,已成为分子生物学中重要的技术。

五、DNA损伤、修复与基因突变三者的关系。

由体内因素和环境因素原因导致DNA分子结构的任何异常改变都可看作是DNA损伤。

细胞内还存在着长期进化中建立和发展起来的DNA修复保障系统,可针对DNA的损伤及时进行清除和修复。

突变是指突变生物体内DNA结构的任何改变,主要指DNA分子中核苷酸序列的改变,包括替换、插入、重排、缺失等。这些改变能够引起生物体基因组结构及功能的改变。

DNA损伤又称前突变,如果细胞不能将损伤完全修复,DNA不能恢复损伤前的结果形态,就形成不可逆的永久性、可遗传的改变,即发生了基因突变。

因此三者之间的关系是,DNA损伤是突变的基础,而修复时阻止损伤变成突变的手段,突变时损伤无法修复造成的后果。

六、DNA损伤主要的修复方式

DNA修复可以在三个水平上进行:

1、DNA复制前水平或非复制DNA的修复:如回复修复和切除修复。

回复修复包括:酶学光修复(修复嘧啶二聚体),单链断裂重组(连接缺口5磷酸根和3羟基形成磷酸二酯键),嘌呤直接插入(修复无嘌呤位点)。切除修复包括:碱基切除修复和核苷酸切除

修复。步骤为识别、切除、修补、连接。

DNA复制水平的修复,如错配修复。

错配修复:将DNA复制过程中未得到校正的错配碱基进行二次校正。

DNA复制水平后的修复,如重组修复及SOS修复。

重组修复:利用含有正常遗传信息的同源姐妹DNA分子进行重组修复。这种修复常发生在修复后,可以对发生在DNA两条链同一部位的损伤或者是复制时双链分开没有互补链可利用时的损伤进行修复。

SOS修复:SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式,修复结果只是能维持基因组的完整性,提高细胞的生成率,但留下的错误较多,故又称为错误倾向修复,使细胞有较高的突变率。

七、基因突变的分子机制

碱基替换(substitution)即DNA分子中原有的一个碱基对被另一个碱基对取代,其中嘌呤与嘌呤、嘧啶与嘧啶之间的互变称为转换(transition),嘌呤与嘧啶之间的互变称为颠换(transversion)。

碱基插入(insertion)在DNA序列中插入一个或几个额外的碱基对。

碱基缺失(deletion)DNA分子中丢失一个碱基对或一段序列。

重排(rearrangement)DNA位点的跨距离连接或指基因内部不同区域之间的跨越连接。

八、依据受到影响的氨基酸顺序方面的变化,可将基因突变分为几类:

如果碱基的改变并未改变其编码的氨基酸及其序列,称为同义突变(synonymous mutation),这类突变是沉默突变,因为突变基因与未突变基因编码完全相同的蛋白,对基因组功能没有影响。

如果碱基的改变引起了产物氨基酸顺序的改变,则称之为错义突变(missense mutation)。错义突变可以是致死性的,即致死突变(lethal mutation);也可能不影响蛋白质的活性,不表现出明显的性状变化,即中性突变(neutral mutation)。

如果碱基的改变使一个编码氨基酸的密码子转变为一个终止密码子,使蛋白质的合成提前终止,称为无义突变(nonsense mutation)或链终止突变(chain termination mutation)。

如果终止密码子转变为一个编码氨基酸的密码子,造成终止信号的通读(read through),结果会产生过长的肽链,称之延长突变(elongation mutation)或通读突变(read through mutation)。对多数蛋白,短的延长片段不会影响其功能,但长的延长片段则有可能影响蛋白的折叠,造成活性的下降。

有些基因突变的表型会通过第二次基因的突变得以恢复,这种第二次突变称为回复突变(back mutation 或reverse mutation);如果第二次突变不是通过“校正”第一次突变,而是通过抑制第一次突变效应的表现来恢复其表现型,则称之为抑制突变(suppression mutation)。

九、基因突变:突变是指突变生物体内DNA结构的任何改变,主要指DNA分子中核苷酸序列的改变,包括替换、插入、重排、缺失等。而这种改变没有被修复,就形成不可逆的永久性、可遗传的改变,即发生了基因突变。这些改变能够引起生物体基因组

结构及功能的改变。

基因突变热点:无论是自发突变还是诱发突变,生物体特定基因中发生的突变并不是随机分布的,而是常常局限于一定的位点,这些位点发生突变的频率远远高于其它位点,称为突变热点(hot spot)。

转座子:(transposon)是指能将自身插入基因组中一个在序列上无关的新位点的DNA序列。

十、基因转录的基本特征

1对于一个基因组,转录指发生于一部分基因,而且每个基因的转录都受到相对独立的控制。

2 转录是不对称的,基因转录只能以双链DNA分子中的一条链作为模板,而另一条链不能作模板。与mRNA有相同序列的成为有义链,另一条作为转录模板的称为模板链,也成为反义链。

3 基因转录的前体是4种核糖核酸三磷酸:ATP、GTP、CTP、UTP。

4 RNA的核苷酸序列是由DNA模板的核苷酸序列决定,即RNA 的碱基与DNA碱基相互配对。

5 RNA以5-3方向延伸,新加入的核苷酸分子以5-三磷酸基团与RNA链的游离3-OH反应,RNA链与模板链方向相反。

6 与DNA聚合酶不同,RNA聚合酶在RNA合成的起始阶段不需要引物参与。

7 RNA参与合成起始的第一个核苷酸以其3-OH供延伸反应,因此新合成RNA的5端具有三磷酸结构,第一个参与的一半都是嘌呤核苷酸。

8 RNA的生物合成包括3个阶段:RNA聚合酶与DNA模板特

殊区域的结合与起始;RNA链延伸;合成终止与新生RNA链释出。

十一、转录的过程:

1 转录起始:RNA聚合酶识别结合启动子(σ亚基);形成闭链复合物;形成开链复合物(17个碱基长度);RNA合成的起始。

2 转录的延长阶段:RNA合成方向沿5-3方向进行;RNA延伸过程中,要求在RNA合成位点处的模板DNA解链,产生一个长度为17+/-1碱基对的转录泡,合成的RNA暂时与DNA有义链形成约12bp的杂交链。随着RNA的延长,核心酶前面的DNA双螺旋不断解开,而后面的DNA重新回到解螺旋结果,同时RNA链也不断从RNA、DNA杂交体中分离出来;转录的忠实性要比复制低,但由于体内大多数基因是重复转录,再加上遗传密码子的简并性和错误合成不影响子代的性状,这样的错误率可以耐受。

3 转录的终止阶段:有两种形式,一种是ρ因子不依赖终止,一种是ρ因子依赖终止。

ρ因子不依赖终止:新合成的RNA链一旦出现发夹样的茎环局部二级结构,RNA聚合停止作用,磷酸二酯酶停止形成,RNA合成终止。

ρ因子依赖终止:ρ因子附着在新生RNA上,然后沿5-3方向朝RNA聚合酶移动,直到ρ因子接触到依赖ρ因子的终止位点暂停的RNA聚合酶,并与之反应,使新生的RNA链释放出来。

十二、transcription:转录;是以DNA为模板,在RNA聚合酶作用下合成RNA的过程,是遗传信息从DNA向RNA传递的过程。是生物合成RNA的主要方式。转录子;由2个和2个以上紧密连锁,并共同转录在一种mRNA分子中的结构基因组成的复合单位。(只存在于原核生物)。以转录子为模板转录生成的mRNA,可

以同时编码2种或2种以上的蛋白质,并参与同一代谢途径中的反应。

promoter:启动子;DNA分子上可与RNA聚合酶特异结合,使转录开始的一段DNA序列,启动子本身并不被转录。包括三个功能部位:识别部位(-35bp),结合部位(-10bp),起始部位(+1bp)。

transcription factor:转录因子;能直接和间接与调控元件起作用而影响基因转录的蛋白质因子。

十三、试述蛋白质合成的三个阶段

1 肽链合成的起始:甲硫氨酰tRNA与mRNA结合到核蛋白体上,生成翻译起始复合物。

原核生物:核蛋白体大小亚基分离;mRNA在小亚基定位结合;起始氨基酰-tRNA的结合;核蛋白体大亚基结合。

真核生物:核蛋白体大小亚基分离;起始氨基酰-tRNA结合;mRNA在核蛋白体小亚基就位;核蛋白体大亚基结合。

2 肽链合成的延长:根据mRNA密码序列的指导,顺序添加的氨基酸,从N端向C端延伸肽链,直到合成终止的过程。肽链延长在核蛋白体上连续性循环式进行,又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle),每次循环增加一个氨基酸,包括以下三步:进位(entrance):指根据mRNA下一组遗传密码指导,使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。

成肽(peptide bond formation):P位上的fMet-tRNAf Met的酰基与A位上aa-tRNA氨基成肽,A位成肽后,P位留下空载tRNA。转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。

转位(translocation):核糖体沿mRNA向前5-3移动一个密码子(3个核苷酸),其结果是脱酰tRNA从P位点排出,经E位点

离开核糖体,A位点的上新肽酰tRNA被移至P位点,核糖体又有空置A位点,可再次接受相应mRNA上密码子的氨酰tRNA分子。

真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。另外,真核细胞核蛋白体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。

3 肽链合成的终止:辨认终止密码子UAA、UAG、UGA;肽链从肽酰-tRNA水解出;mRNA从核蛋白体中分离及大小亚基的拆开。

十四、遗传密码子及其特征

⑴密码子的方向性:密码子的阅读方向及它们在mRNA上由起始信号到终止信号的排列方向均为5-3,与mRNA链合成时延伸方向相同。

⑵密码子的简并性:一个氨基酸可以有几个不同的密码子,编码同一个氨基酸的一组密码子称为同义密码子。这种现象称为密码子的简并性。64-3=61个代表20种氨基酸,仅甲硫氨酸AUG、色氨酸UGG只有一个密码子。

⑶密码子的连续性(读码)(无标点、无重叠):从正确起点开始至终止信号,密码子的排列是连续的。既不存在间隔(无标点),也无重叠。在mRNA分子上插入或删去一个碱基,会使该点以后的读码发生错误,称为移码,由这种情况引起的突变称为移码突变。

⑷密码子的基本通用性(近于完全通用):对于高等、低等生物都适用,从病毒直到人类,细胞核DNA指导的蛋白质合成都使用同一套遗传密码。只有一个例外:真核生物线粒体DNA。动物细胞的线粒体DNA、植物细胞的叶绿体DNA,在翻译时,其密码阅读方式不同。

⑸起始密码子和终止密码子:64种密码子中,AUG为甲硫氨酸的密码子,又是肽链合成的起始密码子,UAA,UAG,UGA为终止密码子,不编码任何氨基酸,而成为肽链合成的终止部位(无义密码子)。

⑹密码子的摆动性(变偶性):tRNA上的反密码子与mRNA 上的密码子配对时,密码子的第一位、第二位碱基配对是严格的,第三位碱基可以有一定变动,这种现象称为密码的摆动性或变偶性(wobble)。

十四、cis-acting element (CAE)顺式作用元件:就是指存在于基因旁侧序列中可影响基因表达的序列,主要包括启动子、增强子、负调控序列和可诱导元件等。

trans-acting factor (TAF)反式作用因子:则指参与基因表达调控的蛋白因子,它们可以与靶基因的顺式作用元件相结合而起作用,反式作用因子一般具有DNA结合域和蛋白—蛋白相互作用结构域,与特异基因不存在线性关系。

十五、基因表达调控从哪些环节发挥作用

从基因活化到蛋白质的合成和分解,至少有6个环节可以作为基因表达调控的控制点:1基因的活化(DNA水平)2前体RNA 的转录3转录后的加工4mRNA水平5翻译水平(翻译后的加工修饰)6蛋白质水平(蛋白质的降解)。

有以下四个基本的调控点:1.基因结构的活化。DNA暴露碱基后RNA聚合酶才能有效结合。活化状态的基因表现为:(1)对核酸酶敏感;(2)非组蛋白及组蛋白修饰;(3)低甲基化。2. 转录起始。最有效的调节环节,通过DNA元件与调控蛋白相互作用来调控基因表达。3. 转录后加工及转运。RNA编辑、剪接、转运。

4. 翻译及翻译后加工。翻译水平可通过特异的蛋白因子阻断mRNA 翻译;翻译后对蛋白的加工、修饰也是基本调控环节。

十六、原核生物和真核生物基因表达调控各有何特点?(一)原核生物:

? 1.多顺反子形式转录——许多功能相关的基因成簇地串联排列于染色体上,共同组成一个转录单位;

2.以操纵子为单位——几个结构基因受同一启动基因控制组成一个基因表达调控单元叫做操纵子;

3.基因的转录和翻译是偶联的。

(二)真核生物:

数量大,调控复杂;

2.真核生物的基因呈单顺反子转录,即一个基因对应于一条mRNA和一条多肽链;

3.真核细胞中的编码基因多是不连续的(断裂结构);

4.重复序列(单拷贝序列、中度重复序列、高度重复序列)

5.真核细胞中不存在操纵子式结构,功能相关的基因也大多分散在不同的染色体上(瀑布样型)。

(三)真核基因至少有三点区别与原核基因:

(1)转录的激活与被转录区的染色质结构变化有关;

(2)尽管正负调控元件都有,但正调控机制占主导地位;

(3)真核基因的转录和翻译有物理分割,分属于核内行为及胞质行为,这种时空差别使真核基因的调控更为复杂、有序。

十七、基因的分子生物学定义及基因组概念

基因:合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列(通常指DNA序列)。按照这个定义,一个基因不仅仅包括编

码蛋白质肽链mRNA的核酸序列,还包括为保证转录所必须的调控序列、5端不翻译序列、内含子以及3非翻译序列等所有的核酸序列。

基因组(genome)的概念不象基因那么严格。通常基因组指一个生物体的所有基因。人类细胞基因组通常指 23对染色体中的所有基因。而细胞线粒体中还有一小套基因,这些基因就称为人线粒体基因组。

十八、中心法则及其意义

中心法则描绘了遗传信息传递的基本规律。核酸序列可以通过复制、转录和反转录被传递和互换。但是自核酸翻译成蛋白质确是单向的,因为核酸序列不能从蛋白质序列中被寻回。

十九、HGP(human genome project)人类基因组计划:于20世纪80年代提出,由美、英、日、中、德、法等国参加并于2001年完成的针对人体23对染色体全部DNA的碱基对(3×109)序列进行排序,对大约25 000基因进行染色体定位,构建人类基因组遗传图谱和物理图谱的国际合作研究计划。

VNTR(variable number tandem repeat, VNTR)可变数目串联重复序列:是指广泛存在于人类基因组中具有高度遗传多态性和高度重复性的DNA片段。一般位于基因侧翼或是存在于基因内含子之中。目前常用于骨髓移植后的监测、遗传病基因诊断以及肿瘤的研究。

SNP(single nucledtide polymorphises)单核苷酸多态性:指人类基因组中单个碱基的变异,推测人类基因组至少有210万个SNP。是人类种族差异,个体分子差异的分子基础,成为第三代多态性标记,是基因组多样性和识别、定位疾病相关基因的一种新型手段。

二十、基因工程:在体外条件下,人工将DNA分子“剪切”并重新“拼接”,形成一个新的杂合的DNA分子,然后将它导入微生物或真核细胞中表达,产生人类所需要的基因产物或改造、创造新的生物类型的生物技术。

载体:是供插入目的基因并将其导入宿主细胞内表达或(和)复制的运载工具。常用的有质粒、噬菌体和病毒。可分为克隆载体和表达载体。

二十一、基因工程的基本程序:

1.目的基因(外源基因)DNA片段获得;

2.目的基因与载体的连接(体外重组);

3.连接产物转化至宿主细胞;

4.阳性重组体的扩增、筛选与鉴定;

5.目的基因在细胞中的表达;

6.表达产物的分离、鉴定等。

二十二、microRNA的定义

是广泛存在于真核生物中的一组短小的、不编码蛋白质的RNA家族,它们是由19-23个核苷酸组成的单链RNA(3‘端可有1~2个碱基长度的变化)

表达具有组织特异性和阶段特异性。即:在不同组织中表达有不同类型的miRNA;在生物发育的不同阶段里有不同的miRNA表达

表达具有组织特异性和阶段特异性。即:在不同组织中表达有不同类型的miRNA;在生物发育的不同阶段里有不同的miRNA表达

miRNA具有高度进化保守性,即各种miRNA都能在其他种系中找到同源体;

miRNA独有的特征:其5’端第一个碱基对U有强烈的倾向性,而对G却有抗性,但第二到第四个碱基缺乏U,一般来讲,除第四个碱基外,其他位置碱基通常都缺乏C

miRNA执行一定的生物学功能:对与其互补的mRNA表达水平具有调节作用;一些偏大的miRNA (27nt)可能参与了基因组的

重组装;参与生物的发育与多种生理、病理过程。

二十三、microRNA与siRNA的区别与联系

(完整版)分子生物学试题及答案(整理版)

分子生物学试题及答案 一、名词解释 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。 3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。 9.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子,弱化子等。 12.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 14.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15.考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。16.蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。18.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1. DNA的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。 2. RNA酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1)、(IF-2)和(IF-3)。 4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。5.启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。 6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、(DNA重组技术)三部分。7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、( T2噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:(hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接,)、 (mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。 9.蛋白质多亚基形式的优点是(亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法)、(可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响)、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从( S2)开始,无G时转录从( S1)开

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案一、名词解释 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.标准折叠单位:蛋白质二级结构单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块,此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。3.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 4.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 5.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 6.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。

除了5’ 3’外切酶活性 19.锚定PCR:用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20.融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1. DNA的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。 2. RNA酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1)、( IF-2 )和(IF-3 )。4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。 5.启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。 6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、( DNA重组技术)三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、( T2噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:( hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接,)、

《分子生物学》期末试卷及答案(C)

《分子生物学》期末试卷(C) 一、术语解释(20分,每题2分) 1、操纵子 2、增强子 3、启动子 4、内含子 5、外显子 6、顺式作用元件 7、反式作用因子 8、转录因子 9、单顺反子mRNA 10、多顺反子mRNA 二、选择题(20分) 1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( ) A.单考贝顺序 B.回文顺序 C.高度重复顺序 D.中度重复顺序 2. 下列有关Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)的叙述中错误的是: ( ) A.在mRNA分子的起始密码子上游7-12个核苷酸处的顺序 B.在mRNA分子通过 SD序列与核糖体大亚基的16s rRNA结合 C.SD序列与16s rRNA 3'端的一段富含嘧啶的序列互补 D. SD序列是mRNA分子结合核糖体的序列 3.原核生物中起始氨基酰-tRNA是: ( ) A.fMet-tRNA B.Met-tRNA C.Arg-tRNA D.leu-tRNA 4.下列有关TATA盒 (Hognessbox)的叙述,哪个是错误的: ( ) A. 保守序列为TATAAT B.它能和RNA聚合酶紧密结合 C. 它参与形成开放转录起始复合体 D.它和提供了RNA聚合酶全酶识别的信号 5. 一个mRNA的部分顺序和密码的编号是 140 141 142 143 144 145 146 CAG CUC UAU CGG UAG AAC UGA 以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为: ( ) A.141 B.142 C.143 D.144 6. DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确:( ) A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧 D. 维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。 7. DNA聚合酶III的描述中哪条不对:( ) A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物 B.具有5′→3′外切酶活性 C. 具有5′→3′聚合活性 D. 是DNA复制中链延长反应中的主导DNA聚合酶

分子生物学试题及答案

生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学(A)答案及评分标准 一、选择题,选择一个最佳答案(每小题1分,共15分) 1、1953年Watson和Crick提出(A ) A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的,常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是(D ) A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是(D ) A、按全保留机制进行 B、按3'→5'方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时(A ) A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述,哪一个是正确的?(B ) A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括(A ) A、加CCA—OH B、5'端“帽子”结构 C、3'端poly(A)尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括(C ) A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3'末端加poly(A)尾 D、特定氨基酸的修饰

8、有关肽链合成的终止,错误的是(C ) A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在,蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子:RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究(C ) A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件(B ) A、含有复制原点,抗性选择基因 B、含有复制原点,合适的酶切位点 C、抗性基因,合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是(D ) A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢,适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是(E ) A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由(D )编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时,细菌DNA修复酶基因表达反应性增强,这种现象称为(A ) A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成?(A ) A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时

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分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面? 1、结构分子生物学; 2、基因表达的调节与控制; 3、DNA重组技术及其应用; 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性:变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度):DNA加热变性时,紫外吸收达到最大值的一半时的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度) 4、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火 5、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致,称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座:可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子:染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点:1)DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成;2)DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在外侧;3)DNA分子表面有大沟和小沟;4)两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G ≡ C(碱基互补原则);5)螺旋的螺距为3.4nm,直径为2nm,相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm,每圈螺旋包含10个碱基对;6)碱基平面与螺旋纵轴接近垂直,糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构:编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点:1)真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp;2)单顺反子(单顺反子:一个基因单独转录,一个基因一条mRNA,翻译成一条多肽链;)3)基因不连续性断裂基因(interrupted gene)、内含子(intron)、外显子(exon);4)非编码区较多,多于编码序列(9:1) 5)含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点:极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成:由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制:转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制,使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座:整个转座子被复制,所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座:原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱

分子生物学复习题

1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术(基因工程) (1)可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; (2)可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; (3)可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化(时序调节),并随着内外环境的变化而不断加以修正(环境调控)。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) 一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提: (1)拥有特定的空间结构(三维结构); (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向: (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法? (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性,是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性,决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学,是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域,也是新世纪的带头学科。

(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的,同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质,它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中,成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容: (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕,两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧,3′,5′- 磷酸与核糖在外侧,彼此通过磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起,A与T相配对形成两个氢键,G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制,但根据碱基互补配对原则,当一条多核苷酸的序列被确定后,即可决定另一条互补链的序列。

期末考试分子生物学精彩试题

选择题 1.证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是(C )。 A.从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B.DNA 突变导致毒性丧失 C.生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 D.DNA 是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子 E.真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出(A )。 A.多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B.DNA 的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D.遗传物质通常是DNA 而非RNA E.分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3.DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述?(C,D ) A.哺乳动物DNA 约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B.依赖于A-T 含量,因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C.是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D.可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E.就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度 4.Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A.A型B.B型C.Z型 5.多种密码子编码一个氨基酸的现象,称为密码子的(B) A.连续性B.简并性C.通用性D.摆动性 6.真核基因经常被断开(B,D,E )。 A.反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B.因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C.因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上,所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E.表明真核基因可能有多种表达产物,因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7.选出下列所有正确的叙述。(A,C ) A.外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B.内含子经常可以被翻译 C.人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D.人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E.人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8.下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组?(B,C ) A.珠蛋白基因B.组蛋白基因 C.rRNA 基因D.肌动蛋白基因 9.细胞器基因组( A )。

分子生物学总结完整版

分子生物学总结完整版 1、结构分子生物学; 2、基因表达的调节与控制; 3、DNA重组技术及其应用; 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 2、 DNA复性:变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、 Tm(熔链温度): DNA加热变性时,紫外吸收达到最大值的一半时的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度) 4、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火 5、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、 C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致,称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座:可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子:染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分

9、 DNA二级结构的特点:1)DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成;2)DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在外侧;3)DNA分子表面有大沟和小沟;4)两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G ≡ C(碱基互补原则);5)螺旋的螺距为 3、4nm,直径为2nm,相邻两个碱基对之间的垂直距离为0、34nm,每圈螺旋包含10个碱基对;6)碱基平面与螺旋纵轴接近垂直,糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构:编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。特点:1)真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp;2)单顺反子(单顺反子:一个基因单独转录,一个基因一条mRNA,翻译成一条多肽链;)3)基因不连续性断裂基因(interrupted gene)、内含子(intron)、外显子(exon);4)非编码区较多,多于编码序列(9:1) 5)含有大量重复序列1 1、Histon(组蛋白)特点:极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成: 由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制:转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复

关于分子生物学试题及答案

分子生物学试题(一) 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的()片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为()、()两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是()、()和()。 4.蛋白质的跨膜需要()的引导,蛋白伴侣的作用是()。5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:()和()。6.分子生物学的研究内容主要包含()、()、()三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是()、()。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:()、()。 9.蛋白质多亚基形式的优点是()、()、()。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。 11.半乳糖对细菌有双重作用;一方面(可以作为碳源供细胞生长);另一方面(它又是细胞壁的成分)。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从(S2 )开始,无G时转录从(S1 )开始。 12.DNA重组技术也称为(基因克隆)或(分子克隆)。最终目的是(把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体)。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤: ①提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为(严紧型质粒),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为(松弛型质粒)。 14.PCR的反应体系要具有以下条件: a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物(约20个碱基左右)。 b、具有热稳定性的酶如:TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15.PCR的基本反应过程包括:(变性)、(退火)、(延伸)三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括: ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中; ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;

分子生物学期末试题

分子生物学期末考试试题 一、名词解释 1、反式作用因子:能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 2、基因家族: 3、C值矛盾:C值是指真核生物单倍体的DNA含量,一般的,真核生物的进化程度越高,C值越大,但在一些两栖类生物中,其C值却比哺乳动物大的现象。原因是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。 4、核型:指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。 5、RNA editing:转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 二、判断: 1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。(X ) 组蛋白的mRNA没有 2、由于密码子存在摇摆性,使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。(√ ) 3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。(X ) 以NAD作为能量来源 4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。(X ) tRNA还有其它的生物学功能,如可作为逆转录酶的引物

5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。(X ) RNA聚合酶的催化反应不需要引物 6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸(X ) 真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸 7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制(X ) 质粒具有复制起始原点,能在宿主细胞中独立自主地进行复制 8、RNA因为不含有DNA基因组,所以根据分子遗传的中心法则,它必须先进行反转录,才能复制和增殖。(X ) 不一定,有的RNA病毒可直接进行RNA复制和翻译 9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成。(X ) 细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成 10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。(√ ) 11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列(√ ) 12、SOS框是所有din基因(SOS基因)的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。(√ ) 三、填空: 1、原核生物的启动子的四个保守区域为转录起始点、-10区、-35区、-10区与-35区的距离。

现代分子生物学总结题库

第一章、基因的结构和功能实体及基因组 1、基因定义 基因(遗传因子)是遗传的物质基础,是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称,携带有遗传信息的DNA序列,是具有遗传效应的DNA分子片段,是控制性状的基本遗传单位,通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表现。 2、DNA修复 DNA修复(DNA repairing)是细胞对DNA受损伤后的一种反应,这种反应可能使DNA结构恢复原样,重新能执行它原来的功能;但有时并非能完全消除DNA的损伤,只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来(如细胞的癌变等),但如果细胞不具备这修复功能,就无法对付经常在发生的DNA损伤事件,就不能生存。对不同的DNA损伤,细胞可以有不同的修复反应。3、DNA损伤 DNA损伤是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变,并导致遗传特征改变的现象。情况分为:substitutation (替换)deletion (删除)insertion (插入)exon skipping (外显子跳跃)。 DNA损伤的改变类型:a、点突变:指DNA上单一碱基的变异。嘌呤替代嘌呤(A与G之间的相互替代)、嘧啶替代嘧啶(C与T之间的替代)称为转换(transition);嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤则称为颠换(transvertion)。b、缺失:指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。c、插入:指一个或一段核苷酸插入到DNA链中。在为蛋白质编码的序列中如缺失及插入的核苷酸数不是3的整倍数,则发生读框移动(reading frame shift),使其后所译读的氨基酸序列全部混乱,称为移码突变(frame-shift mutaion)。d、倒位或转位:(transposition)指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。 e、双链断裂:对单倍体细胞一个双链断裂就是致死性事件。 4、同源重组 同源重组,(Homologus Recombination)是指发生在姐妹染色单体(sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等;以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或holiday 结构(Holiday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段,即前联会体阶段、联会体形成和Holiday 结构的拆分。 a、基因敲除 基因敲除(geneknockout),是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外,还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因,也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 b、因转移法 同源重组(homologousrecombination)是将外源基因定位导人受体细胞染色体上的方法,因为在该座位有与导人基因同源的序列,通过单一或双交换,新基因片段可替换有缺陷的基因片段,达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组,重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点;attachmentsite,att)和位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组,因而重组具有特异性和高度保守性。

分子生物学复习题(有详细答案)

绪论 思考题:(P9) 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义? 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究,以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念,即将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面?什么是反向生物学?什么是 后基因组时代? 研究内容: DNA的复制、转录和翻译;基因表达调控的研究;DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学:是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能,在体外使基因突变,再导入体内,检测突变的遗传效应,即以表型来探索基因结构。 后基因组时代:研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式,人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件(年代、发明者、简要内容) 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文,提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年,重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术,并完成了第一个细菌基因的克隆,开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的? 随着基因组计划的完成,人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代,人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生,如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题:(P130) 1、基因的概念如何?基因的研究分为几个发展阶段? 概念:基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段:○120世纪50年代以前,主要从细胞的染色体水平上进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后,主要从DNA大分子水平上进行研究,属于分

分子生物学题库

分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序(Motifs) 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉(RNA interference) 15.反义RNA 16.启动子(Promoter) 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域(carboxyl terminal domain,CTD) 19.single nucleotide polymorphism,SNP 20.切口平移(Nick translation) 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体(vector) 38.位点特异性重组 39.原癌基因(oncogene) 40.重叠基因、 41.母源影响基因、

42.抑癌基因(anti-oncogene)、 43.回文序列(palindrome sequence)、 44.熔解温度(melting temperature, Tm) 45.DNA的呼吸作用(DNA respiration) 46..增色效应(hyperchromicity)、 47.C0t曲线(C0t curve)、 48.DNA的C值(C value) 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶(topoisomerase)、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒(telomere) 57.酵母人工染色体(yeast artificial chromosome, YAC)、 58.SSB蛋白(single strand binding protein)、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子(codon)、、 73.同义密码(synonymous codons)、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子(衰减子)(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白(阻遏蛋白)(repressor) 82.诱导物(inducer)、 83.CTD尾(carboxyl-terminal domain ) 84.载体(vector)、 85.转化体(transformant)

分子生物学(题库二)

习题2 一、比较下列概念 2.转录和翻译 3.RNA聚合酶和引物酶 4.启动子和增强子 5.同源重组和位点特异性重组 6. 密码子和遗传密码 7. 基因内抑制突变和基因间抑制突变 8 SD序列和Kozak序列 9.密码子和反密码子 10.同义密码子和偏爱密码子

11.-10序列( Pribnow box )和TATA框(Goldberg-Hogness box) 二、填空 1.位点特异性重组的结果与重组位点的位置和方向有关。如果重组位点以相反方向存在于同一DNA分子上,重组结果发生;重组位点以相同方向存在于同一DNA分子上,重组发生。重组位点在不同DNA分子上,重组发生。 2. 1956年,Crick提出了遗传信息传递的途径,称为,其内容概括为 3.被转录的DNA链称为模板链,又称链, 它与转录出来的RNA序列,非模板的DNA链为编码链,又称链;它与转录生成的RNA序列,不过在RNA中含有U而不含T。 4. 大肠杆菌中DNA指导的RNA聚合酶全酶的亚基组成为,去掉因子后剩 下的部分称为核心酶,这个因子使全酶能辩认DNA上的位点。 5. 利福平抑制细菌中转录的起始,因为。 6. 原核细胞中各种RNA是催化生成的。而真核细胞核基因的转录分别由 种RNA聚合酶催化,其中rRNA基因由转录,hnRNA基因由转录,各类小分子量RNA则是的产物。 7.在真核生物中,转录mRNA基因的酶是_____;转录tRNA基因的酶是____;转录18S和28S rRNA基因的酶是__________。 8. 一个转录单位一般应包括序列、序列和序列。 9.真核细胞每个mRNA一般只带一种蛋白质编码信息,是 mRNA; 原核细胞每个mRNA 分子常带有多个功能相关蛋白质的编码信息,是 mRNA 。 10.真核细胞中编码蛋白质的基因多为。编码的序列被保留在成熟mRNA中的 是,编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是。 11在基因中 ______被_____分隔开,而成熟的mRNA中序列被拼接起来。

分子生物学试题总结.

04级分子生物学期末题目 一、选择题(20题) 1、tRNA的5端剪切所需的酶(RNase P) 2、人体全基因组大小(3,200,000,000 bp) 3、(5S rRNA)是基因内部启动子转录的 4、线虫反式剪接所占比例(10%-20%) 5、与分枝位点周围序列碱基配对的剪接体(U2 snRNP) 6、Holliday中间体是(同源重组)的模型 7、Pribnow box 是原核生物的(启动子) 8、TATA box binding protein 在下列哪个启动子里面存在(三类都有)[英文] 9、UCE是(I)类启动子的识别序列 10、mRNA的剪切跟(II)类内含子相似 11、tRNA基因是RNA聚合酶(III)启动的[英文] 12、噬菌体通过(位点专一重组)整合到宿主中 13、在细菌中,色氨酸操纵子的前导区转录后,(翻译)就开始 14、Promoters and (enhancers) are cis-acting elements. 15、G-protein needs ( GTP ) as energy. (原句不记得了) 16、RNA干涉又叫(转录后的基因沉默,PTGS) 17、转录因子包括通用转录因子和(基因特异转录因子)[英文] 18、激活子的两个功能域,一个是转录激活结构域,另一个是(DNA结合域)[英文] 19、内含子主要存在于(真核生物) 二、是非题(10题) 1、RNA干涉是通过gRNA引导。F 2、U5 snRNP是参与两段外显子连接的。T [英文] 3、抗终止转录的机制是RNA聚合酶忽略终止子。T 4、原核生物RNA聚合酶有三种。F [英文] 5、Operon is a group of contiguous, coordinately controlled genes. T 6、枯草杆菌芽孢形成的转录控制通过变化RNA聚合酶的σ因子达成。T 7、enhancers and silencers are position- and orientation- free elements. T 8、RNA聚合酶II结合到启动子上时,其亚基的羧基末端域(CTD)是磷酸化的。F 9、细胞质中的poly(A)往往比细胞核中的poly(A)短。T 三、问答题(5题) 1、比较原核生物和真核生物翻译起始的异同 2、启动子在基因内的基因如何进行转录 3、组蛋白乙酰化对基因转录的影响 4、什么是选择性剪接及其生物学意义是什么 5、RNA编辑的机制 03级试题 一选择题 1 Holliday中间体是(同源重组)的模型 2 Pribnow box是原核生物的(启动子的共同序列) 3原核生物RNA聚合酶在转录延伸时不需要的因子(rou因子) 4 TBP结合蛋白在下列哪个启动子里面存在(三类都是) 5 UCE是(I)类启动子识别的序列 6乳糖操纵子与阻遏蛋白结合的物质是异乳糖。阻遏物与操纵区结合。 二判断题

分子生物学试题

分子生物学试题 一、名词解释 1、基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA 为多顺反子。 5、顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 7、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。 9、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子,与蛋白激酶相对应存在,共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。 16、载体:能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA 分子。 17、转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。 19、转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、 DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响。 22、 DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA 双螺旋结构。 23、退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交

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