克仑特罗杂质总结分享
盐酸克伦特罗的检测方法
盐酸克伦特罗的检测方法 科技信息职教与成教 盐酸克伦特骂硇楦测方法 河南科技大学林业职业学院刘荣森 [摘要]肉食中的盐酸克伦特罗严重危害人体健康.检测盐酸克伦特罗残留常用的方法有气相色谱一质谱联用法,高效液相色谱 法,酶标记免疫吸附测定法,毛细管电泳'~--(CE)等,本文分析了各方法的优缺点,指出了今后的研究方向. [关键词]盐酸克伦特罗检测方法研究进展 中央电视台2011年3.15晚会上,曝光了一些地方在动物饲养中滥 用"瘦肉精"的问题."瘦肉精"是盐酸克伦特罗的俗称,通用名称: Clenbuterol(CLB),化学名称:d一[(叔丁氨基)甲基卜4一氨基一3,5一二氯 苯甲醇盐酸盐,分子式:C.:H.C12N20?HC1,结构式: ]}H31. l 盐酸克伦特罗是一种B:一受体激动剂,具有蛋白同化作用,可以减 少脂肪的形成,提高瘦肉和脂肪的比率,因而被滥用于饲养业,造成该 药在动物体内蓄积,尤其是肝脏组织中的浓度较高.人类食用含有克伦 特罗残留的肉品后会出现头晕,心悸,手指震颇等中毒症状.滥用瘦肉 精已成为重大的食品安全问题. 中国严禁盐酸克伦特罗等在动物生产中使用.但目前非法使用情 况仍非常严重.近几年来,接连发生数起人食用有CLB残留的肉品中毒 事件.造成CLB屡禁不止的原因一方面是利益驱使;另一方面是现在 检测CLB的方法,手段还不完善,急需建立宰前监测体系和准确,迅速, 方便,精确的检测方法. 检测CLB残留常用的方法有气相色谱一质谱联用法(GC—MS),高 效液相色谱法(HPLC),酶标记免疫吸附测定法(ELISA),毛细管电泳法
(CE)等. 1.气相色谱一质谱联用法(GC—MS) 气相色谱一质谱联用法是我国CLB测定中的确证性方法 fNY/T468—2001].是最常用的CLB测定方法,能在多种残留物同时存在情况下对某种特定的残留物进行定性,定量分析.具有灵敏度高,假阳 性率低等特点.测定时一般需要柱前衍生,最常用的衍生试剂是双三甲 基硅基三氟乙酰氨(BSTFA).本办法具有前处理过程烦琐,检测时间 长,需贵重仪器等缺点. 吴银良等建立了同时测定动物肝组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱 克多巴胺残留量的固相萃取一气相色谱一质谱分析方法.样品在碱化 条件下经乙酸乙酯和异丙醇混合溶剂提取,浓缩后用乙酸乙酯溶解,经SCX固相萃取(SPE)柱净化,经氮气吹干后用双三甲基硅基三氟乙酰氨(BSTFA)衍生,外标法定量.盐酸克伦特罗的检出限为O.301~g/kg.盐酸 克伦特罗添加浓度在1.O～5.01zg/kg范围内,添加回收率为77.4%～88.3%;相对标准偏差(RSD)为3.1%～5.1%.胡明友等[21建立了克伦特罗的测定方法,用甲醇提取,正己烷脱脂净化,然后旋转蒸发冷冻离心浓 缩后加0.1mmol/L的盐酸溶解,加样到净化柱上,用4%氨化乙酸乙酯 洗脱后氮气吹干,甲苯溶解后加BSTFA衍生,用气相色谱一质谱法进行测定,内标定量.结果表明:添加56~10-9540x10(∞)浓度水平的克伦 特罗,方法回收率在89.3%～107%,相对标准偏差为7.3%～16.5%,线性相关系数r为0.998,克伦特罗的最低检测限为2.0xl0f∞).PeterBa—tioens等[31用气相色谱一质谱联用法测定了牛,羊,猪粪便中的盐酸克伦特罗含量,最低检测限为2n. 2.高效液相色谱法(HPLC) 高效液相色谱法是检测CLB残留常见的分析检测手段之一,适合 大批量样品的快速测定.我国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证法.HPLC法中常用的检测器有电化学检测器,紫外检测器;其优点是 检测精确度高,其最低检测限范围为1～15ng/g,而且假阳性率低,与GC—MS法相比样品不必衍生;缺点是检测过程繁琐,检测时间长,需贵
(瘦肉精)盐酸克伦特罗的理化性质及其主要危害
┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊装┊┊┊┊┊订┊┊┊┊┊线┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊ 第1章盐酸克伦特罗的理化性质及其主要危害 1.1 盐酸克伦特罗的理化性质 盐酸克伦特罗又称“瘦肉精”，是一种从天然儿茶酚胺衍生合成的化合物，化学名称为羟甲叔丁肾上腺素分子式为C12 H19 C13 N20，相对分子质量为313．5，熔点为174 ～175.5 ℃，其制剂常用盐酸盐，又称为盐酸双氯醇胺氨双氯醇胺呈白色或类白色的结晶粉末状，熔点161℃，无臭，味苦，化学性质稳定，溶于水、乙醇，微溶于丙酮。不溶于乙醚，加热到172 ℃才能分解，盐酸克伦特罗的化学结构稳定，在体内不会被破坏分解，能耐受100 ℃高温，126 ℃油煎5min才能破坏减半，常规烹调对盐酸克伦特罗残留起不到破坏作用。 1.2盐酸克伦特罗的主要危害 对人的危害：人食用超过盐酸克伦特罗残留限量的肉及其制品后，会发生急性中毒通常表现为肌肉振颤、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐等症状，特别是原有心律失常的病例会引起心室早搏，ST段与T波幅压低，还可引起代谢紊乱，产生酮体，对糖尿病病人可发生酮中毒或酸中毒，对心律失常、高血压、青光眼、糖尿病、甲状腺功能亢进、前列腺肥大等疾病的患者更容易产生急性中毒症状，严重的可导致死亡，因食用猪肉中残留有盐酸克伦特罗的急性中毒病人，临床症状以交感神经系、统兴奋性增高为主要表现，并在患者血尿中检出较高含量的盐酸克伦特罗。人食用残留有盐酸克伦特罗的畜产品后表现为肌肉兴奋性增强，有的人中毒后表现为肌肉震颤，重症者腓肠肌痉挛；同时引起心肌收缩加强，心率加快；对高血压患者危害更大，盐酸克伦特罗分解脂肪成游离脂肪酸进入血液，使血管壁弹性降低，引起血压升高，微循环血管膨胀，压迫刺激周围的神经，引起头痛头晕；引起人内脏横纹肌和平滑肌+兴奋性增强，表现为呕吐和腹泻。盐酸克伦特罗中毒的患者群中，对患心、脑血管疾病、糖尿病、甲状腺机能亢进、青光眼、前列腺肥大者可造成威胁生命的恶果。孕妇中毒又可导致癌变、胎儿致畸的严重危害性。 对动物的危害:虽然盐酸克伦特罗的毒性并不很强，小鼠、豚鼠静脉注射的半数
盐酸克伦特罗(瘦肉精)
综述盐酸克伦特罗的 药理作用、在机体内的残留性及检测技术 摘要：由瘦肉精引起的中毒事件屡见不鲜，而品种繁多的瘦肉精中盐酸克伦特罗是使用最普遍的一种，本文从盐酸克伦特罗的理化性质、药理作用、残留性、检测方法等方面详细介绍其对人体的危害，为我们更好的认识和抵制瘦肉精提供参考。 关键词：理化性质；药理作用；毒性；残留性；检测方法 瘦肉精是一类药物，而不是某一种特定的药物，任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国，通常所说的瘦肉精是指克伦特罗，而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。当它们以超过治疗剂量5-10倍的用量用于家畜饲养时，即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积，能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率，因此曾被用作牛、羊、禽、猪等畜禽的促生长剂、饲料添加剂。 1. 盐酸克伦特罗的理化性质及药理作用 1.1 理化性质 中文名：瘦肉精；克伦特罗；学名：盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride)，又称氨哮素、克喘素氨双氯醇胺，化学名称为羟甲叔丁肾上腺素，是一种平喘药。该药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂。相对分子量：313.7，分子式：C12-H18-Cl12-N2-O·HCl； 图1盐酸克伦特罗结构式 盐酸克伦特罗的外观与性状：白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦；熔点：174～175.5°C；溶解性：溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚[1]。 1.2 药理作用 20世纪70年代中后期,克伦特罗作为一种伦特罗1000～3000 μg 具有促进新的、选择性的β肾上腺受体激动剂逐步应用于临床试验,它能够引起交感神经兴奋在治疗剂量下,强而持久地松弛支气管平滑肌,口服治疗剂量仅为30～40 μg/d, 对支气管哮喘和伴随有逆性气道梗塞的慢性支气管炎均有良好的效果,能较长时间地增加肺的最高呼气量(PEFR)，用药剂量仅为舒喘宁片的1%, 副作用和对心血管系统的作用不明显。克伦特罗可作为支气扩张剂治疗慢性梗塞性肺部疾病,用吸入法给药,有效剂量可低至12ug；口服效果是特布他林的170倍，对心率和血压的影响不明显。克伦特罗进入机体后, 与广泛分布于呼吸道效应细胞膜上的β2受体结合,导致受体构型改变,激活腺苷酸环化酶,催化细胞内ATP转化为cAMP,后者激活cAMP依赖性蛋白激酶,促使胞浆中游离钙浓度下降钾通道开放引起平滑肌松弛而缓解喘息等症状除松弛支气管平滑肌外克伦特罗也激活β2肾上腺受体克伦特罗能增加神经生长因子的表达而起到保护神经系统的作用,也能防止大鼠诱导性肝细胞凋亡。此外,克伦特罗可能具有治疗过敏性炎症的作用并可以在抑制失神经肌萎缩的同时不影响或很少影
盐酸克伦特罗完全抗原的合成及其偶联工艺的优化
2009 年 4 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Apr. 2009文章编号：1003-9015(2009)02-0355-05 盐酸克伦特罗完全抗原的合成及其偶联工艺的优化 杨香瑜, 黄鹤 (天津大学化工学院生物化工系系统生物工程教育部重点实验室, 天津 300072) 摘要：为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原，本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride, CL)完全抗原，在强酸条件下CL先经重氮化，再与鸡卵清白蛋白(OV A)发生共价取代制备了盐酸克伦特 罗包被抗原(OV A-CL)，并以正交实验确定了共价取代反应的关键影响因素，进一步采用单因素实验确定了反应所需的 最佳条件，并通过紫外扫描对制得的包被抗原进行了鉴定。结果表明，投料比例是盐酸克伦特罗完全抗原合成的关键 因素，搅拌转速和反应时间也起着至关重要的作用。而且偶联反应在1 h内基本完成，延长反应时间对提高产物偶联 比影响不大。当投料比例为30:1，pH值约为8，低速搅拌状况下，包被抗原和免疫抗原的偶联比分别高达29:1和48:1，盐酸克伦特罗完全抗原合成条件的优化筛选取得了预期的效果。 关键词：盐酸克伦特罗；重氮化反应；完全抗原；偶联比 中图分类号：O625.14 文献标识码：A Synthesis of Clenbuterol Hydrochloride Complete Antigen and Optimization of its Conjugation Conditions YANG Xiang-yu, HUANG He (Key Laboratory of Systems Bioengineering, Ministry of Education, Department of Biochemical Engineering, School of Chemical Engineering and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, China) Abstract: In order to synthesize the immunogen and coatigen used for the rapid immunoassay, the diazotization was adopted to prepare the Clenbuterol hydrochloride (CL) complete antigen. During which, the CL was firstly activated under strongly acidic conditions, and the activated CL was then conjugated with ovalbumin (OV A) to form coatigen OV A-CL. The important factors affecting the conjugating reaction were determined by orthogonal experiments, and the optimum value of those important factors was confirmed by single factor experiments. The prepared OV A-CL was characterized by UV scan. It was found that the CL/OV A dropping proportion is the key factor for preparing the complete antigen, while the stirring speed and reaction time are important too. The conjugating reaction can be completed within one hour and prolonging the reaction time has little effect on the increase of coupling ratio. When the CL/OV A dropping proportion (molar ratio) is 30:1, the pH value is 8 and at a low stirring dispersion speed (<250 r?min?1), the coupling ratio of coatigen and immunogen can be up to 29:1 and 48:1, respectively. It indicates that the optimization of the conjugation conditions of Clenbuterol hydrochloride complete antigen achieves the expected results. Key words: Clenbuterol hydrochloride; diazotization; complete antigen; coupling ratio 1前言 盐酸克伦特罗是一种β2-肾上腺受体激动剂 [1]。大量用其作为饲料添加剂，可显著提高畜禽生长速率，瘦肉相对增加[2]。但该药易在牲畜体内沉积，人食用含有该药残留的动物产品后可引起食物中毒，严重 收稿日期：2008-01-29；修订日期：2008-06-02。 基金项目：天津市自然科学基金资助项目(06YFJMJC13200)。 作者简介：杨香瑜(1983-)，女，河北省沧州人，天津大学硕士生。通讯联系人：黄鹤，E-mail：huang@https://www.wendangku.net/doc/784991675.html,
盐酸克伦特罗有什么作用
盐酸克伦特罗有什么作用 盐酸克伦特罗属于肾上腺素类药物，能够促进肌肉以及代谢活动，尤其是对骨络机中蛋白质的合成有很好的效果，而且还可以抑制脂肪的合成，改善酮体品质，但是要注意这种药物对人体，造成的影响是比较大的，被人食用之后可能容易存在一些中毒症状，甚至会造成心律失常和猝死。 ★一、作用与用途 盐酸克伦特罗为β2受体激动剂，属于拟肾上腺素类药物，商品名为"氨哮素"、"克喘素"。80年代初，美国一家公司意外发现，盐酸克仑特罗可明显促进动物生长，并增加瘦肉率。它能够改变动物体内的代谢途径，促进肌肉，特别是骨骼肌中蛋白质的合成，抑制脂肪的合成，从而加快生长速度，瘦肉相对增加，改善胴体品质。这一新发现很快被一些国家用于养殖业，饲料中添加了盐酸克仑特罗后，可使猪等畜禽生长速率、饲料转化率、胴体瘦肉率提高10%以上，所以盐酸克仑特罗在作为饲料添加剂销售时的商品名又称为"瘦肉精"、"肉多素"等。
★二、危险性概述 不良反应:盐酸克伦特罗可使骨骼肌慢收缩纤维上的β受体，使之加速收缩，表现为手不能握住，走路困难，面颈部骨骼肌震颤，尤其是交感神经功能亢进者更易发生，日受体激动时可抑制淋巴细胞的增殖，抑制淋巴因子和抗体的形成，抑制诱发的血小板激活;盐酸克伦特罗可使血糖升高，胰岛素分泌增加，引起厌食;盐酸克伦特罗可激动骨骼肌细胞膜上Na/K+/ATP酶，促使K+进入细胞，血液中K+浓度下降，诱发心律失常。此外，β2受体兴奋能引起血乳酸、丙酮酸升高，并可出现酮体，引起代谢紊乱。这些药理作用是盐酸克伦特罗引起不良反应的原因。 ★三、急救治疗 如果被人食用后，会有急性中毒症状，如果不及时抢救有可能导致心率失常而猝死。盐酸克伦特罗又称瘦肉精，是一种白色或类白色的结晶粉末，猪食用后在代谢过程中能够促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高猪肉的瘦肉率。含有"盐酸克
盐酸克仑特罗膜标准
中文通用名盐酸克仑特罗 英文通用名Clenbuterol Hydrochloride 标准号WS-10001-(HD-0461)-2002 药品名称盐酸克仑特罗膜 药品英文名Clenbuterol Hydrochloride Pellicles 主要成分本品含盐酸克仑特罗（C12H18Cl2N2O·HCl）应为标示量的85.0%～115.0%。处方 性状本品为红色片状薄膜（速效膜）及无色透明片状薄膜（长效膜）的复合膜。鉴别（1）取含量测定项下的溶液5ml，加稀盐酸2ml，加0.1%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置3分钟，加0.5%氨基磺酸铵溶液1ml，摇匀，放置 10分钟，再加0.1%盐酸萘乙二胺溶液1ml，摇匀，即显橙红色。 （2）取含量测定项下的溶液，照分光光度法测定（中国药典2000年版二部附录IV A），在247nm与302nm的波长处有最大吸收，在270nm 的波长处有最小吸收。 （3）在含量均匀度项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。 检查长效膜释放度取本品2格，照释放度测定法（中国药典2000年版二部附录X D第一法），以500ml 0.00lmol/L的盐酸溶液为溶剂，转速为每 分钟100转，依法操作，经2小时、5小时、8小时，取溶液5ml，滤过， 取续滤液作为供试品溶液。精密称取盐酸克仑特罗对照品适量，用上述溶 剂稀释并制成每1ml中约含0.32μg的溶液，作为对照品溶液。取上述两 种溶液，照含量均匀度项下的色谱条件进行测定，计算出每片的释放量。 本品每格在2小时、5小时与8小时的释放量应分别相应为标示量的 10%～30%、20%～55%、75%以上，均应符合规定。 速效膜溶化时限分取速效药膜5格（剪去两端硬边），置25ml具塞试管中，加37℃的水25ml，使药膜均浸入水中，振摇4分钟，药膜应 全部溶化。如有不溶物，应再分取5格，照上述方法试验，结果应全部符 合规定。 含量均匀度照高效液相色谱法（中国药典20000版二部附录V D）测定。 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-甲醇-水-三乙胺（250︰125︰625︰1），用H3PO4调pH值至3.0为流 动相；检测波长为215nm。 测定法取复合膜1格，置1000ml量瓶中，加甲醇40ml，使药膜均浸入甲醇中，置60℃水浴中，不断振摇2小时，使药物全部溶解，放冷 至室温，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另精 密称取盐酸克仑特罗对照品适量，用同一溶剂稀释并制成每1ml中约含 1.2μg的溶液，滤过，取续滤液作为对照品溶液。取上述两种溶液各50μl， 分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算每格复合膜的 含量，除限度为±20%外应符合规定（中国药典2000版二部附录X E）。含量测定取长效膜10格、速效膜20格，分别置25ml量瓶中，各加无水乙醇适量，置60℃水浴中，不断振摇2小时，使药物全部溶解，放冷至室温，用无 水乙醇稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在302nm的波长处测定吸收 度，按C12H18C12N2O·HCl的吸收系数（E1% 1cm）为109计算，即得。
关于进一步加强盐酸克仑特罗管理的通知
关于进一步加强盐酸克仑特罗管理的通知 国食药监安[2012]12号 各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（药品监督管理局）、卫生厅（局）： 2011年9月，国家食品药品监督管理局下发通知，停止盐酸克仑特罗片剂在我国的生产、销售和使用。为进一步加强盐酸克仑特罗原料药及气雾剂、复方制剂等的管理，现就有关事宜通知如下： 一、规范生产行为,加强对原料药生产和使用的管理 目前在产（销）的两家盐酸克仑特罗原料药生产企业（常州亚邦制药有限公司、淮南佳盟药业有限公司）应当切实加强生产管理，根据市场需求情况，制定下一年度盐酸克仑特罗原料药生产计划，于每年年底前报所在地省级食品药品监督管理部门备案。药品生产企业需使用盐酸克仑特罗原料药用于制剂生产的，应当根据市场需求情况，制定下一年度盐酸克仑特罗原料药需用计划，并于每年年底前报所在地省级食品药品监督管理部门备案。省级食品药品监督管理部门应当对企业报备的生产或需用计划进行审查，严格把关。 药品生产企业应当加强对盐酸克仑特罗的管理，每半年向所在地设区的市级食品药品监督管理部门报送原料药及
单方制剂生产、购销、使用及库存等情况，市级食品药品监督管理部门应向上一级食品药品监督管理部门报告；省级食品药品监督管理部门应于每年年初，将行政区域内药品生产企业上一年度相关情况向国家食品药品监督管理局报告（见附件）。 目前已停产的盐酸克仑特罗原料药生产企业不得擅自恢复生产。确需恢复生产的，应根据市场需求情况，签订销售合同，向所在地省级食品药品监督管理部门报告；省级食品药品监督管理部门应对企业组织开展现场检查，对经检查认为生产质量管理体系运行正常，并符合相应安全管理要求的，方可恢复生产；省级食品药品监督管理部门应及时将企业恢复生产情况报国家食品药品监督管理局备案。 二、规范流通渠道，确保药品流向可追溯 需要使用盐酸克仑特罗原料药用于制剂生产的药品生产企业，应当按照备案的需用计划从原料药生产企业购买。盐酸克仑特罗气雾剂等单方制剂由具有蛋白同化制剂、肽类激素经营范围的药品批发企业经营，且不得零售。 药品生产、经营企业应当建立销售客户档案，核实并留存购买方资质证明文件、法人委托书和采购人员身份证明文件等，药品生产企业销售盐酸克仑特罗原料药还应查验备案
盐酸克伦特罗快速检测
盐酸克伦特罗快速检测 摘要 本实验采用了百睿TM盐酸克伦特罗快速检测卡对样品进行定性检测。盐酸克伦特罗快速检测卡适用于尿样、瘦肉、肝脏、肺脏、肾脏和饲料等样本中盐酸克伦特罗的测定。检出限为3ng/mL（3ppb）。 关键词盐酸克伦特罗快速检测卡定性检出限 前言 盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB),又名瘦肉精,分子式为C12H18Cl2N2O?HCl,药品名为克喘素、氨哮素等,为白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于丙酮、氯仿,不溶于乙醚和苯,化学性质稳定;它是一种人工合成的B-肾上腺素受体激动剂,具有扩张支气管的作用,常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病(Mersmann,1998)。当其应用剂量达到治疗量的5~10倍时,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉积减少,因此将其俗称为瘦肉精,在养猪业中一些非法使用者将其作为一种生长促进剂添加到饲料中(Kuip-er,1998),用以改善胴体的品质,但同时也造成了猪肉中盐酸克伦特罗的残留。当人们食用含有盐酸克伦特罗残留的肉品后,常常造成心动过速,低血钾,低磷酸盐血症,肌肉震颤,头晕,口干,失眠甚至于瘫痪等中毒症状,对心脏病患者更有生命危险。国家农业部农牧发[2002]1号文5关于发布食品动物禁用的兽药及其他化合物清单的通知6中,盐酸克伦特罗被列为所有食品动物禁止使用。 1实验步骤 （1）使用前将待测样本溶液恢复至室温 （2）取出检测卡平放，用移液枪吸取待测样品溶液100ul，垂直加于加样孔，开始计时 （3）结果应在3~5min读取，其他时间判读无效，根据示意图判定结果。
【结果判断】 2 实验结果 实验结果如下图 1 由图可知，左边表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于 3 ng/mL ，或不含有盐酸克伦特罗；右边样品中盐酸克伦特罗浓度高于3 ng/mL 。 3结果与讨论 3.1实验原理 若待测样品溶液中不含盐酸克伦特罗,当样品溶液进入测试端,盐酸克伦特罗金标单抗在硝酸纤维素膜上层析泳动,被硝酸纤维素膜上检测印迹处的盐酸克伦特罗-BSA 偶联物拦截形成盐酸克伦特罗-BSA 偶联物)金标盐酸克伦特罗单抗 复合物,并在该印迹处形成红色的条带(检测线); 测试端多余的金标盐酸克伦特阴性（-）：两条紫红色条带出现。表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于3 ng/mL ，或不含有。 阳性（+）：检测T 线无显色，则表示样品中盐 酸克伦特罗浓度高于3 ng/mL 。 无效：未出现质控C 线，表明操作过程不正确 或检测卡已失效。
动物组织中盐酸克伦特罗
动物组织中盐酸克伦特罗（瘦肉精）测定的前处理过程 主讲人：abc_1982 活动时间：2011年4月11日——4月25日 热烈欢迎abc_1982在极限色谱柱版面和大家一起讨论瘦肉精的前处理过程！ 前言： 克伦特罗：学名盐酸克伦特罗；分子式：C12-H18-Cl2-N2-O 白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，熔点161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。是一种平喘药。该药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂。 “瘦肉精”的来历： 在中国，通常所说的“瘦肉精”是指克伦特罗(它曾经作为药物用于治疗支气管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用),它可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。在上世纪90年代,国内错误的把其作为饲料添加剂使用在猪饲料中,因此叫做”瘦肉精”。但随着其明显的副作用显现, 轻则导致心律不整，严重一点就会导致心脏病,国际上已经禁止其使用在饲料中.我国也于199 7年开始全面禁止使用。 无论什么样品的检测，其前处理的好坏直接影响到最后样品的检测结果。而对时下大家较为关注的“瘦肉精”问题，已经严重的影响到了大家的日常生活。对于瘦肉精检测的方法有酶联免疫吸附法（ELISA ）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱法（GC-MS）三种，目前使用GC-MS较多，因为其检测限低，但这些方法的前处理过程是一样的。因此，今天我们将重点和大家一起分享“瘦肉
精”检测的前处理过程。 一.适用范围 适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克伦特罗药物检测的前处理过程。 二.处理过程 1.提取 1.1 将5g动物组织、15 mL乙酸乙酯、3 mL10%碳酸钠溶液置于50 mL离心管中，10000 rpm均质2 min。6000 rpm下离心2 min，将上清液转至另一离心管中。用15 mL乙酸乙酯重复提取一次，合并提取液。 1.2 向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L的盐酸溶液，涡动1 min，然后再6000 rpm下离心1 min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用 2.5 mol/L NaOH溶液调节pH至5.2，待净化。 注意事项： 剪样时，对于肌肉组织来说，需要将肌肉中的肌膜，脂肪除去干净；对于肝脏组织来说，需要将筋膜等去除。 盐酸克伦特罗为弱碱性药物，在碱性条件下（pH-pKa>2）时，盐酸克伦特罗以分子形式存在，易溶于乙酸乙酯；提取的第一步中采用10%的Na2CO3溶液碱化基质，再用乙酸乙酯将其萃取出来；在第二个步骤中，通过加入5 mL的0.1 M的盐酸溶液酸化基质，这时候盐酸克伦特罗以离子形式存在，更容易溶于水中，从而被反萃取到水溶中。 2.净化 2.1 活化/平衡：依次向Welchrom? P-SCX（60mg/3mL）中加入3 mL甲醇、
盐酸克伦特罗的残留与食品安全
肉类研究 盐酸克伦特罗的残留与食品安全 董昕?王娟 （长春市产品质量监督检验院 ） 肉和脏器中残留的“瘦肉精”毒性破坏。 ?盐酸克伦特罗残留对人体健康的危害 摘键要：十年来?食品动物生产使用违禁药物“瘦 肉精”——盐酸克仑特罗已受到了社会 各个层面的广泛关注?食品安全越来越 受到人们的重视。本文阐述了盐酸克伦 特罗在机体内的分解代谢、残留和对人 畜的危害。 长期或超标、滥用盐酸克伦特罗，特别是抗生 素及激素作为饲料添加剂，其危害不仅降低了动 物产品的品质，造成重大经济损失，更为严重的是 危害人体健康，影响生命质量。 关键词：盐酸克伦特罗；残留；食品安全 ??食物中毒 如果动物性食品中的盐酸克伦特罗残留严 重 ，人体一次摄入的量过大，就会引起急性中 毒反应。如??年?月，香港居民因食用了内 地供应的猪内脏，造成?人中毒。??年?月 ?????????????????????? ????????????????????????? ?日和?日，浙江省杭州、嘉兴、金华等地的大 量市民，因食用了含盐酸克伦特罗的猪肉而引 ??????????????????????? 发的食物中毒事件。还有，??年西班牙有? 个家庭的成员因吃了含大量的盐酸克伦特罗的 ?????? ??????????????????????牛肝而发生了集体食物中毒。??年?月?日 上海市民 多人因食含有盐酸克伦特罗的猪肉 民以食为天，吃饭是天下第一大事，是人类生 存、发展和健康之首。随着社会经济的发展，人们 生活、生产和环境中外源性化学物质的日益增多 和公众健康意识的提高，食品污染问题层出不穷， 食品安全越来越受到人们的重视。??年?月? 集体中毒。药物残留的危害绝大多数是通过长 期接触或在体内逐渐蓄积而造成的。 ??对胃肠道菌群的影响 在正常情况下，人体的肠道所寄生的细菌多 数为非致病性菌群或条件性致病菌群，少数属于 致病菌。这些菌群在相互抵抗下维持着平衡，构成 人体内外的微生态环境。当长期或大量摄入动物 性食品中残留的盐酸克伦特罗后，人体菌群失调， 正常的消化道微生态环境发生紊乱，敏感菌群受 到抑制，而不敏感的有害菌群乘机大量繁殖，导致 感染。常见的消化道不良反应如恶心、呕吐、腹痛、 腹泻等。 日上海《东方早报》报导：上海发生 多人“瘦 肉精”——盐酸克伦特罗中毒事件。让市民吃上 “放心肉”是当前亟待解决的问题。 ?盐酸克伦特罗的性质及特点 盐酸克伦特罗????????又名克喘素、 氨哮素、双氯醇胺，化学名为α?［?叔丁氨基）甲 基］?氨基??二氯苯甲醇盐酸盐，分子式： ? ? ????· 分子量为???。它是一种β ??过敏反应和变态反应 ? ? ? 肾上腺受体激动剂，是一种白色或类似白色的结 晶体粉末，无臭，微苦，化学性质稳定，加热到 ℃才能分解。因此，一般的烹调加热方法不能将猪 部分人对某些抗菌药物过敏，轻者引起皮肤 瘙痒、发热、寻麻疹、蜂窝脂炎及关节肿痛等，重 者可出现过敏性休克、急性血管性水肿，甚至危及 ? 肉类研究
盐酸克伦特罗
摘要 盐酸克伦特罗酶联免疫反应适用于尿样、组织和饲料等样品中克伦特罗残留的量检测，是一项筛查盐酸克伦特罗残留的新技术。克伦特罗作为一种主要的β- 兴奋剂应用于畜禽肉制品生产中, 用以提高肌肉和脂肪的比例并加快生长速度。由于克伦特罗可作为肌肉舒缓剂用于人类疾病治疗, 在畜禽中过量残留可能会对消费者造成危害, 为此, 被禁止在食品生产中应用。由于该检测方法技术性强，对试验环境要求特殊，因此影响ELISA检测质量的因素有很多，如试剂因素、标本因素和操作因素等。试剂的质量固然是影响检测结果准确性的关键因素,然而检测人员的操作是否规范合理对ELISA检测结果的影响也不可忽视。本论文就ELISA法检测猪的肝脏中盐酸克伦特罗含量以及试剂的选择、温育条件、洗涤次数、准确加样、显色时间等多个操作因素对检测结果产生的影响进行了分析并针对性的提出了相应的控制对策，从而为养殖者和政府监督管理部门提供了更准确快速的检测盐酸克伦特罗残留的方法。 关键词：酶联免疫；检测；盐酸克伦特罗；关键控制因素 摘要应该改为： 本论文就ELISA法检测猪的肝脏中盐酸克伦特罗含量以及试剂的选择、温育条件、洗涤次数、准确加样、显色时间等多个操作因素对检测结果产生的影响进行分析，针对性的提出了相应的控制对策，从而为养殖者和政府监督管理部门提供了更准确快速的检测盐酸克伦特罗残留的方法。试验结果表明，、、、、、、
Abstract Clenbuterol hydrochloride enzyme-linked immune response is applicable to urine, fodder and other groups and the amount of clenbuterol residues in the sample testing, clenbuterol hydrochloride residue is a screening of the new technology. Clenbuterol, as a main beta stimulants used in products production, to increase the proportion of muscle and fat and speed up the growth. Because of clenbuterol can be used as a muscle relieving agent in human disease treatment, in livestock and poultry excessive residues may cause harm to consumers, therefore, have been banned in food production in the application. Because the test method of technical and special requirement to the test environment, so that the influencing factors on the quality of the ELISA detection has a lot of, such as reagents, specimen and operating factors. Reagent is the quality of the key factors influencing the accuracy of the test results, however, check whether the operation of the personnel specification is reasonable on the result of ELISA detection also cannot be ignored. This thesis just ELISA method to detect clenbuterol hydrochloride content in pig's liver, as well as the choice of reagent, temperature condition, washing frequency, accurate sample and chromogenic time multiple operating factors on the impact of test results are analyzed and put forward the corresponding control countermeasures, which provides the farmers and the government supervision and regulation department more accurate rapid detection of clenbuterol hydrochloride residue method. Key words:enzyme-linked immune；Detection；Clenbuterol hydrochloride；The key control factors
盐酸克伦特罗试剂盒操作流程图
文档来源为:从网络收集整理.word 版本可编辑.欢迎下载支持. 1文档来源为:从网络收集整理.word 版本可编辑.欢迎下载支持. 盐酸克伦特罗试剂盒操作流程图 ELISA 测定CLB 项目调查题 1． 您对盐酸克伦特罗（CLB ）的了解程度是 ①不了解 ②一般了解 ③非常了解 2． 您对ELISA 方法的了解程度是 ①不了解 ②一般了解 ③非常了解 3． 您对ELISA 测定CLB 残留方法的了解程度是 ①不了解 ②一般了解 ③非常了解 4． 您承担或参加过CLB 残留检测的实验吗？ ①是 ②否 如果选择①，请您选择所采用的实验方法 ①HPLC ②GC-MS ③ELISA ④其他： 5． 通过本次培训，您最想了解的是 ①国内外现状 ②方法原理 ③实验操作程序 ④其他： 6． 本次培训结束后，您是否从事该方面的工作 ①是 ②否 取出所需的微孔板条并插入框架内 样品前处理 准备工作液 酶联免疫实验设计 加样（各50ul ） 加酶联结合物(除空白孔,各50ul) 倾空微孔板, 用250ul 冲洗液重复洗板5次 0标样 加克伦特罗抗体溶液(各100ul) 该反应速度快，建议使用多道移液器 轻轻敲击微孔板四周，室温20-25℃避光孵育30分钟 平行试验 试剂升温 尿样离心 洗液，样品稀释液，底物溶液 标样 空白 添加 样品 加显色液(各200ul) 加中止液(各50ul) 室温20-25℃避光孵育30分钟 充分混合 450nm 下读取OD 值 黄啟良 中国农业科学院植物保护研究所 副研究员 中国农业大学农业应用化学系 农药专业博士 主要从事农药剂型加工原理和农 药产品质量检测方法研究。 联系电话：（办） E-mail:
国家食品药品监督管理局、卫生部关于进一步加强盐酸克仑特罗管理的通知
国家食品药品监督管理局、卫生部关于进一步加强盐酸克仑 特罗管理的通知 【法规类别】药品管理 【发文字号】国食药监安[2012]12号 【发布部门】国家食品药品监督管理局(原国家药品监督管理局)（已撤销）卫生部(已撤销) 【发布日期】2012.01.09 【实施日期】2012.01.09 【时效性】现行有效 【效力级别】部门规范性文件 国家食品药品监督管理局、卫生部关于进一步加强盐酸克仑特罗管理的通知 （国食药监安[2012]12号） 各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（药品监督管理局）、卫生厅（局）： 2011年9月，国家食品药品监督管理局下发通知，停止盐酸克仑特罗片剂在我国的生 产、销售和使用。为进一步加强盐酸克仑特罗原料药及气雾剂、复方制剂等的管理，现 就有关事宜通知如下： 一、规范生产行为，加强对原料药生产和使用的管理 目前在产（销）的两家盐酸克仑特罗原料药生产企业（常州亚邦制药有限公司、淮南佳 盟药业有限公司）应当切实加强生产管理，根据市场需求情况，制定下一年度盐酸克仑 特罗原料药生产计划，于每年年底前报所在地省级食品药品监督管理部门备案。药品生
产企业需使用盐酸克仑特罗原料药用于制剂生产的，应当根据市场需求情况，制定下一年度盐酸克仑特罗原料药需用计划，并于每年年底前报所在地省级食品药品监督管理部门备案。省级食品药品监督管理部门应当对企业报备的生产或需用计划进行审查，严格把关。 药品生产企业应当加强对盐酸克仑特罗的管理，每半年向所在地设区的市级食品药品监督管理部门报送原料药及单方制剂生产、购销、使用及库存等情况，市级食品药品监督管理部门应向上一级食品药品监督管理部门报告；省级食品药品监督管理部门应于每年年初，将行政区域内药品生产企业上一年度相关情况向国家食品药品监督管理局报告（见附件）。 目前已停产的盐酸克仑特罗原料药生产企业不得擅自恢复生产。确需恢复生产的，应根据市场需求情况，签订销售合同，向所在地省级食品药品监督管理部门报告；省级食品药品监督管理部门应对企业组织开展现场检查，对经检查认为生产质量管理体系运行正常，并符合相应安全管理要求的，方可恢复生产；省级食品药品监督管理部门应及时将企业恢复生产情况报国家食品药品监督管理局备案。 二、规范流通渠道，确保药品流向可追溯 需要使用盐酸克仑特罗原料药用于制剂生产的药品生产企业，应当按照备案的需用计划从原料药生产企业购买。盐酸克仑特罗气雾剂等单方制剂由具有蛋白同化制剂、肽类激素经营范围的药品批发企业经营，且不得零售。 药品生产、经营企业应当建立销售客户档案，核实并留存购买方资质证明文件、法人委托书和采购人员身份证明文件等，药品生产企业销售盐酸克仑特罗原料药还应查验备案的需用计划。企业应当指定专人负责销售和出库管理，严格执行出库复核制度；开具发票和随货同行单，确保药品到达购买方《药品生产许可证》、《药品经营许可证》所载明的仓库地址或医疗机构药库。购买方应当指定专人负责采购和入库验收，查验无误后