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《基础分子生物学》复习题及参考答案

一、填空题

1.核酸分子中糖环与碱基之间为β型的糖苷键，核苷与核苷之间通过磷酸二酯键连

接成多聚体。

2.DNA变性后，紫外吸收增加，粘度下降，浮力密度升高，生物活性丧失。

3.DNA双螺旋直径为 2 nm，每隔 3.4nm上升一圈，相当于10个碱基对。

4.Z-DNA为左手螺旋。

5.hn-RNA是真核生物mRNA的前体。

6.用Sanger的链末端终止法测定DNA一级结构时，链终止剂是双脱氧核苷三磷酸。

7.维系DNA双螺旋结构稳定的力主要有氢键和碱基堆积力。

8.在碱性条件下，核糖核酸比脱氧核糖核酸更容易降解，其原因是因为核糖核酸

的每个核苷酸上-OH 的缘故。

9.DNA复制时，连续合成的链称为前导链；不连续合成的链称为随从链。

10.DNA合成的原料是四种脱氧核糖核苷三磷酸；复制中所需要的引物是RNA 。

11.DNA合成时，先由引物酶合成 RNA引物，再由 DNA聚合酶Ⅲ在其3′端合成DNA链，然后

由 DNA聚合酶Ⅰ切除引物并填补空隙，最后由 DNA连接酶连接成完整的链。

12.细菌的DNA连接酶以NAD为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以ATP为能源。

13.大肠杆菌RNA聚合酶的全酶由α2ββ′ζ组成，其核心酶的组成为α2ββ′。

14.RNA转录过程中识别转录启动子的是ζ因子，协助识别转录终止部位的是ρ因子。

15.真核细胞mRNA合成后的成熟过程包括戴帽、加尾、剪接、甲基化修饰。

16.遗传信息由RNA传递到 DNA 的过程称为逆转录，由逆转录酶催化。

17.反密码子第 1 位碱基和密码子第 3 碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶性。

18.在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3′端与mRNA5′端的 SD序列之间互补配对，确定

读码框架，fMet-tRNA f占据核糖体的 P位点位置。

19.细胞内多肽链合成的方向是从 N 端到 C 端，而阅读mRNA的方向是从 5′端到

3′端。

20.在形成氨酰- tRNA时，由氨基酸的羧基与tRNA3′末端的羟基形成酯键。为保证蛋白

质合成的正确性，氨酰tRNA合成酶除了对特定氨基酸有很强的专一性之外，还能将“错误”氨基

酸从氨酰化-tRNA复合物上水解下来。

21.转肽酶催化生成的化学键是肽键，该酶还具有酯酶活性。

22.肽链延伸包括：进位、成肽、和移位。

23.翻译延长阶段的进位，是指氨酰- tRNA 进入 A 位。翻译延长阶段的转位是指 mRNA

与核糖体做相对运动。

24.体内大多数蛋白质形成正确的构象需要分子伴侣的帮助，某些蛋白质的折叠还需要二硫键

互换酶和脯氨酰肽酰异构酶的催化。

25.正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用负调控模式，而真核细

胞常用正调控模式。

26.在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基因组成一个基因表达调控单位，称为启动

子，其调控区包括启动基因和操纵基因。

27.有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为管家基

因；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达

产物增加，这种基因是可诱导的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可

阻遏的基因。

28.在基因重组技术中，切割DNA用限制性核酸内切酶，连接DNA用 DNA连接酶。

29.除噬菌体外，质粒和病毒也是分子克隆的常用载体。

30.用动物病毒DNA改造的基因载体有腺病毒载体和反转录病载体。用于植物基因工程的常用载体

是 Ti质粒。

31.将重组质粒导入细菌称转化，将噬菌体DNA转入细菌称转导。

32.Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究DNA、RNA和蛋白

质转移和鉴定的几种常规技术。

二、选择题

1.有关核酸的杂交（A,C,D）

A.DNA变性的方法常用加热和碱变性

B.相同来源的核酸才能通过变性而杂交

C.不同来源的核酸复性时，若全部或部分碱基互补就可以杂交

D.杂交可以发生在DNA与DNA之间，RNA与DNA，RNA与RNA之间

E.把待测DNA标记成探针进行杂交

2.DNA的复性速度与以下哪些有关（E）

A.温度

B.分子内的重复序列

C.pH

D.变性DNA的起始浓度

E.以上全部

3.某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%，则胞嘧啶的含量应为(D)

A．15% B．30% C．40% D．35% E．70%

4.DNA变性是指(D)

A．分子中磷酸二酯键断裂 B．多核苷酸链解聚

C．DNA分子由超螺旋→双螺旋 D．互补碱基之间氢键断裂

E．DNA分子中碱基丢失

5.寡聚dT-纤维素柱层析用于(D)

A. 从总DNA中分离纯化质粒DNA

B. 从总核蛋白中分离DNP

C. 除去杂蛋白

D. 从总RNA中纯化mRNA

6.关于双螺旋结构学说的叙述哪一项是错误的(C)

A.由两条反向平行的脱氧多核苷酸链组成

B.碱基在螺旋两侧，磷酸与脱氧核糖在外围

C.两条链间的碱基配对非常严格，A与T间形成三个氢键，G与C间形成两个氢键

D.碱基对平面垂直于中心轴，碱基对之间的作用力为范德华力

E.螺旋每转一圈包含10个碱基对

7.下列关于双链DNA碱基含量关系，哪一个是错误的(B)

A．A=T，G=C B．A+T=G+C C．A+G=C+T D．A+C=G+T

8.下列是几种DNA分子的碱基组成比例。哪一种的Tm值最高(A)

A．A+T=15% B．G+C=25% C．G+C=40% D．A+T=80%

9．DNA复制时，下列哪一种酶是不需要的(E)

A．DNA指导的DNA聚合酶 B．DNA连接酶 C．拓朴异构酶 D．解链酶

E．限制性内切酶

10.DNA复制中的引物是(C)

A．由DNA为模板合成的DNA片段 B．由RNA为模板合成的RNA片段

C．由DNA为模板合成的RNA片段 D．由RNA为模板合成的RNA片段

E．引物仍存在于复制完成的DNA链中

11.DNA复制时，子链的合成是(C)

A.一条链5′→3′，另一条链3′→5′ B．两条链均为3′→5′

C．两条链均为5′→3′ D．两条链均为连续合成 E．两条链均为不连续合成

12.在E.coli细胞中DNA聚合酶Ⅰ的作用主要是(C)

A. DNA复制

B. E.coliDNA合成的起始

C. 切除RNA引物

D. 冈崎片段的连接

13.需要DNA连接酶参与的过程有(A)

A．DNA复制B．DNA体外重组C．DNA损伤的切除修复D．RNA逆转录

14.DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的(A)

A.嘧啶二聚体

B. 嘌呤二聚体

C.嘧啶-嘌呤二聚体

D.为两个单独的嘧啶碱基

15.真核细胞RNA聚合酶Ⅱ催化合成的是(B)

A．18SRNA B．mRNA C．tRNA D．5SRNA E．rRNA

16.转录指下列哪一过程(B)

A. 以RNA为模板合成DNA

B. 以DNA为模板合成RNA

C. 以RNA为模板合成蛋白质

D. 以DNA为模板合成DNA

17.hnRNA是(B)

A.存在于细胞核内的tRNA前体

B.存在于细胞核内的mRNA前体

C.存在于细胞核内的rRNA前体

D.存在于细胞核内的snRNA前体

18.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做(A)

A. 有义链

B. 反义链

C. 重链

D. cDNA链

19.下列关于逆转录酶的叙述哪一个是错误的(D)

A.它以RNA为模板指导DNA的合成

B.它也可以DNA为模板指导DNA的合成

C.它具有RNase H活性

D.逆转录酶的作用不需要引物

20.多肽链的氨基酸序列取决于(D)

A．tRNA B. 18S rRNA C. 28S rRNA D．mRNA E. 氨基酰-mRNA合成酶

21.密码GGC的对应反密码子是（A）

A．GCC B. CCG C. CCC D. CGC E. GGC

22.关于密码子，错误的叙述是(C)

A．每一密码子代表一种氨基酸 B. 某些密码子不代表氨基酸

C．一种氨基酸只有一种密码子 D. 甲硫氨酸只有一种密码子

E. 密码子有种族特异性

23.一个N端为丙氨酸的20肽，其开放的阅读框架至少应该由多少个核苷酸残基组成？(C)

A．60个 B. 63个 C. 66个 D. 57个 E. 69个

24.氨基酰- tRNA中，tRNA与氨基酸的结合键是(E)

A．盐键 B. 磷酸二酯键 C. 肽键 D. 糖苷键 E. 酯键

25.原核生物和真核生物翻译起始不同之处(B)

A．真核生物的Shine-Dalgarno序列使mRNA与核糖体结合

B．真核生物帽子结合蛋白是翻译起始因子之一

C．IF 比eIF种类多

D．原核生物和真核生物使用不同起始密码

E．原核生物有TATAAT作为翻译起始序列，真核生物则是TATA

26.关于核蛋白体转肽酶，错误的叙述是(C)

A．转肽不需要GTP B. 转肽不需要ATP C．活性中心在小亚基

D. 活性中心在大亚基 E．活性中心与rRNA有关

27.一个氨基酸参入多肽链，需要(B)

A．两个ATP分子 B．一个ATP分子，两个GTP分子

C．一个ATP分子，一个GTP分子 D．两个ATP分子，一个GTP分子

E．两个GTP分子

28.信号肽段的作用是(C)

A．指导DNA合成的启动 B．指导多肽链糖基化 C．引导多肽进入内质网 D．指导RNA合成的启动 E．指导蛋白质合成的启动

29.多肽链合成后，其Ser可(B)

A．乙酰化 B．糖基化 C．磷酸化 D．甲基化 E．硫酸化

30.蛋白质合成后加工不包括(D)

A．蛋白质的磷酸化 B．信号肽的切除 C．蛋白质的糖基化

D．酶的构像变化 E．蛋白质的乙酰化

31.以下哪一种抑制剂只能抑制真核生物的蛋白质合成(C)

A．氯霉素 B. 红霉素 C．放线菌酮 D．嘌呤霉素 E．四环素

32．一个操纵子通常含有（B）

A.一个启动序列和一个编码基因

B.一个启动序列和数个编码基因

C.数个启动序列和一个编码基因

D.数个启动序列和数个编码基因

E两个启动序列和数个编码基因

33．有关操纵子学说的论述，正确的是（B）

A.操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式

B.操纵子调控系统是原核生物基因调控的主要方式

C.操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成

D.诱导物与阻遏蛋白结合启动转录

E.诱导物与启动子结合而启动转录

34．转录因子是（C）

A.调节DNA结合活性的小分子代谢效应物

B.调节转录延伸速度的蛋白质

C.调节转录起始速度的蛋白质

D.调节转录产物分解速度的蛋白质

E.促进转录产物加工的蛋白质

35．阻遏蛋白（阻抑蛋白）识别操纵子中的（C）

A.启动基因

B.结构基因

C.操纵基因

D.内含子

E.调节基因

36.在下列哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高（A）

A.高乳糖，低葡萄糖

B.高乳糖，高葡萄糖

C.低乳糖，低葡萄糖

D.低乳糖，高葡萄糖

E.不一定

37.顺式作用元件是指（E）

A.基因的5ˊ侧翼序列

B.基因的3ˊ侧翼序列

C.基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列

D.基因的5ˊ和3ˊ侧翼序列以外的序列

E.具有转录调节功能的特异DNA序列

38.反式作用因子是指（E）

A.具有激活功能的调节蛋白

B.具有抑制功能的调节蛋白

C.对自身基因具有激活功能的调节蛋白

D.对另一基因具有激活功能的调节蛋白

E.对另一基因有调节功能的蛋白质因子

39.下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的（C）

A.它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNA

B.切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构

C.它能专一性降解经甲基化修饰的DNA

D.是重组DNA的重要工具酶

E.主要从细菌中获得

40.基因工程中，不常用到的酶是（C）

A.限制性核酸内切酶

B.DNA聚合酶

C.DNA解链酶

D.DNA连接酶

E.反转录酶41下列哪项不能作为表达载体导入真核细胞的方法？（D）

A.磷酸钙转染

B.电穿孔

C.脂质体转染

D.氯化钙转染

E.显微注射

42.重组体的筛选方法有（A）

A.抗药标志筛选

B.标记补救

C.分子杂交

D.免疫化学

E.酶联免疫检测

43.cDNA是指（D）

A.在体内合成的与病毒DNA或RNA互补的DNA

B.在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

C.在体外经转录合成的与DNA互补的RNA

D.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA

E.在体内经转录合成的与DNA互补的RNA

44．建cDNA文库时，首先需分离细胞的（C）

A.染色体DNA

B.线粒体DNA

C.总mRNA

D.tRNA

E.rRNA

三、判断题

(√)1.生物体内，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。

(√)2.RNA分子可以发生热变性，并有增色效应。

(×)3.水分子可以插入天然DNA分子双螺旋空隙中。

(×)4.从结构基因中的DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。

(√)5.提高盐浓度可使DNA分子的熔点（Tm）升高。

(√)6.RNA的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。

(×)7.在E.coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物。

(×)8.逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。

(×)9.RNA病毒不含DNA基因组，根据中心法则它必须先进行反转录，才能复制和增殖。

(×)10.原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶都能够直接识别启动子。

(×)11.大肠杆菌染色体DNA由两条链组成，其中一条链充当模板链，另外一条链充当编码链。

(×)12．由于遗传密码的通用性，用原核生物表达真核基因不存在技术障碍。表达出的蛋白质通常是有功能的。

(×)13.氨酰-tRNA合成酶可以通过合成反应的逆反应切除误载的氨基酸。

(×)14.所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3ˊ-羟基上。

(×)15.在核糖体上形成肽链所需的能量，由水解GTP来提供。

(×)16.生物合成蛋白质时，A 位的氨基酸转移到P位，使P位的肽链延长，A 位空载的-tRNA随后便脱落。

(×)17.蛋白质能够折叠成何种三维结构，主要是由分子伴侣决定的。

(√)18.高等真核生物的大部分DNA是不为蛋白质编码的。

(√)19.大多数管家基因编码低丰度的mRNA.

(×)20.乳糖可以诱导乳糖操纵子的表达，所以乳糖对乳糖操纵子的调控属于正调控系统。

(√)21.某些蛋白质既可以作为阻遏蛋白又可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。

(√)22.准备用原核生物表达真核基因时，最好通过cDNA获取目的基因。

(√)23.用原核生物表达真核生物的糖蛋白，其表达产物不会有正常的生物学功能。

(×)24.Ti质粒可以随土壤农杆菌进入植物细胞。

(×)25.用λ噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。

(√)26.基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸内切酶。

(×)27.采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。

(√)28．若1个氨基酸有3个遗传密码，则这3个遗传密码的前两个核苷酸通常是相同的。

四、名词解释（每题2分，共20分）

1.增色效应(hyperchromic effect)；核酸从双链变为单链的无规则卷曲状态时，在260nm处的吸光度增加，称“增色效应”。

2.分子杂交（molecular hybridization）；不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。

3. 聚合酶链式反应（PCR）；聚合酶链式反应（PCR）是扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。在该反应中，使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物，进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性，引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。

4. DNA的变性与复性（denaturation and renaturation of DNA）；DNA的变性是指DNA双螺旋区的氢键断裂，变成单链并不涉及共价键的断裂。DNA的复性是指变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构。

5. Tm；通常把加热变性DNA使增色效应达到最大增量一半时的的温度称为该DNA的熔点或熔解温度，用Tm表示。

6. 内含子与外显子:内含子是指结构基因中存在于外显子之间的非编码序列，也是基因中不表达的序列，属插入序列。外显子是指基因中编码蛋白质的序列。

7.半保留复制； DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。

8.冈崎片段；相对比较短的DNA链（大约1000核苷酸残基），是在DNA的滞后链的不连续合成期间生成的片段，这是Reiji Okazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。

9.复制体；一种多蛋白复合体，包含DNA聚合酶，引发酶，解旋酶，单链结合蛋白和其它辅助因子。复制体位于每个复制叉处，进行染色体DNA复制的聚合反应。

10.编码链；双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，其核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T）。

11.内含子；

在转录后的加工中，从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。术语内含子也指DNA中编码相应RNA的区域。12.外显子（exon）;既存在于最初的转录产物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。术语外显子也指DNA中编码相应RNA的区域。

13.遗传密码； DNA编码链或mRNA上的核苷酸，以3个为一组（三联体）决定1个氨基酸的种类，称为三联体密码。mRNA的三联体密码是连续排列的，因此，mRNA的核苷酸序列可以决定蛋白质的一级结构。

14.摆动假说； mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子相互辩认，大多数情况是遵从碱基配对规律的。但也可出现不严格的配对，这种现象就是遗传密码的摆动性，tRNA分子上有相当多的稀有碱基，例如次黄嘌呤（inosine,I）常出现于三联体反密码子的5′端第一位，它和mRNA密码子第3位的A、C、U都可以配对。

15.SD序列；位于mRNA分子AUG起始密码子上游约8～13个核苷酸处，由4～6个核苷酸组成的富含嘌呤的序列，以-AG-GA-为核心。SD序列同16S rRNA近3′-末端的序列互补，在核糖体与mRNA的结合过程中起重要作用。

16.信号肽；是未成熟的分泌性蛋白质中可被细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列。有碱性N-末端区、疏水核心区及加工区三个区段。蛋白质被转运到细胞的一定部位后，信号肽即被切除。

17.多聚核糖体;是由1个mRNA分子与一定数目的单个核糖体结合而成的串珠状排列。每个核糖体可以独立完成一条肽链的合成，所以多个核糖体上可以同时进行多条肽链的合成，可以加速蛋白质的合成速度，提高模板mRNA的利用

率。

18.操纵子；原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。

19.启动子；是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。

20.增强子；是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp 长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。

21.衰减子；在原核生物的Trp操纵子结构中，第一个结构基因与启动子P之间有一个区域含Trp密码子，称衰减子。当环境中Trp浓度很高时，它可通过编码并翻译，使正在转录的mRNA形成终止信号，从而终止Trp操纵子的表达。这种转录衰减实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶联，它是原核生物特有的一种基因调控机制。

22.反式作用因子；大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，通过与特异的顺式作用元件相互作用（DNA-蛋白质相互作用），或通过与基它调节因子的相互作用（蛋白质-蛋白质相互作用），反式激活另一基因的转录，故称反式作用蛋白或反式作用因子。

23.顺式调控元件：指可影响自身基因表达活性的真核DNA序列。根据顺式作用元件在基因中的位置、转录激活作用的性质及发挥作用的方式，分为启动子、增强子及沉默子等。

24.降解物基因活化蛋白；也就是cAMP受体蛋白（cAMP receptor protein,CRP），它与cAMP的复合物可以促进某些原核操纵子（如乳糖操纵子）的转录。

25.克隆技术；“克隆”作为名词指相同的分子或细胞构成的群体，或一个共同的祖先通过无性繁殖所得到的群体，作为动词指获取“克隆”的过程。克隆技术特指获取“克隆”的过程，包括分子克隆，细胞克隆等技术。

26.限制性核酸内切酶；就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制、修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA，对保持细菌遗传物质的稳定具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类，其中的Ⅱ类酶能特异性在一定的核苷酸序列处切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的应用。

27.基因组DNA文库；利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成一定大小的片段，将这些片段分子与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌内都携带一种重组DNA分子。不同细菌中的重组DNA分子可能包含不同的染色体DNA片段，这样，只要得到的转化细菌所携带的重组DNA分子种类足够多，则全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。存在于转化细菌内，由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组的全部基因信息。

28. cDNA文库以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA 文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。另外，对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接，去除了内含子的cDNA。一般来说，从cDNA文库获得的基因，因不含内含子而片段较小，更适合于用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在将hnRNA加工成mRNA的酶系统，若用原核生物表达真核基因，则

目的基因一定要通过cDNA获取。

五、分析计算题

1.简述B-DNA的结构特征。

（1）两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕形成右手螺旋；

（2）嘌呤和嘧啶碱位于双螺旋的内侧，磷酸和核糖在外侧，彼此通过3′，5′磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。碱基平面和纵轴垂直，糖环的平面则和纵轴平行；

（3）双螺旋的平均直径为2nm，两个相邻的碱基对之间相距的高度，碱基堆积距离为0.34nm，两个核苷酸之间的夹角为36度；

（4）两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相联系而结合在一起；

（5）碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制。

2.何谓Tm？影响Tm大小的因素有哪些？在实验中如何计算Tm值？

DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度范围内完成的，在这一范围内，紫外线吸收值的增加量达到最大增加量的50%时的温度为DNA的解链温度（溶解温度，melting temperature,Tm）。Tm值大小主要与GC 含量有关，GC含量越高，Tm值越大；另外核酸分子越大，Tm值也越大，溶液pH值大于11.3，核酸完全变性，小于5.0则核酸容易脱嘌呤。降低溶液的离子强度会使Tm值下降，尿素等变性剂也会使Tm值下降。在实验中，Tm值计算公式：Tm=69.3+0.41(G+C%),小于20bp的寡核苷酸：Tm=4（G+C）+2（A+T）。

3.如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA含量为6.4×109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少？是太阳-地球之间距离（2.2×109公里）的多少倍？已知双链DNA每1000个核苷酸重1×10-18g，求人体的DNA的总质量。

每个体细胞的DNA的总长度为：6.4×109×0.34nm = 2.176×109 nm= 2.176m，

3.人体内所有体细胞的DNA的总长度为：2.176m×1014 = 2.176×1011km

这个长度与太阳-地球之间距离（2.2×109公里）相比为：2.176×1011/2.2×109 = 99倍，每个核苷酸重1×10-18g/1000=10-21g，所以，总DNA 6.4×1023×10-21=6.4×102=640g

4.什么是DNA变性？DNA变性后理化性有何变化？

DNA双链转化成单链的过程成变性。引起DNA变性的因素很多，如高温、超声波、强酸、强碱、有机溶剂和某些化学试剂（如尿素，酰胺)等都能引起变性。 DNA变性后的理化性质变化主要有：（1）天然DNA分子的双螺旋结构解链变成单链的无规则线团，生物学活性丧失；（2）天然的线型DNA分子直径与长度之比可达1：10，其水溶液具有很大的黏度。变性后，发生了螺旋-线团转变，黏度显著降低；（3）在氯化铯溶液中进行密度梯度离心，变性后的DNA浮力密大大增加；（4）沉降系数S增加；（5）DNA变性后，碱基的有序堆积被破坏，碱基被暴露出来，因此，紫外吸收值明显增加，产生所谓增色效应。（6）DNA分子具旋光性，旋光方向为右旋。由于DNA分子的高度不对称性，因此旋光性很强，其[a]=150。当DNA分子变性时，比旋光值就大大下降。

5.什么是核酸杂交？有何应用价值？

热变性后的DNA片段在进行复性时，不同来源的变性核酸（DNA或RNA）只要有一定数量的碱基互补（不必全部碱基互补），就可形成杂化的双链结构。此种使不完全互补的单链在复性的条件下结合成双链的技术称为核酸杂交。用被标记的已知碱基序列的单链核酸小分子作为探针，可确定待检测的DNA，RNA分子中是否有与探针同源的碱基序列。用此原理，制作探针，再通过杂交，可用于细菌，病毒，肿瘤和分子病的诊断（基因诊断）。也可用于基因定位，

目的基因筛选，基因表达状况的分析等研究工作。

6.若使15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长三代，提取DNA，并用平衡沉降法测定DNA密度，其14N-DNA 分子与14N－15N杂合DNA分子之比应为多少？

15N标记的大肠杆菌利用培养基中的14N合成DNA，第一代DNA双链都是14N－15N杂合DNA分子。第二代分别是以第一代中的14N和15N链作为母链合成新的DNA，所以14N－DNA分子与14N－15N杂合DNA分子之比为1：1。第三代中的14N 和15N母链的分子之比是3：1，所以14N－DNA分子与14N－15N杂合DNA分子之比应为3：1。

7.真核生物DNA聚合酶有哪几种？它们的主要功能是什么？

真核生物的DNA聚合酶有α、β、γ、δ、ε五种，均具有5′→3′聚合酶活性，DNA聚合酶γ、δ和ε有3′→5′外切酶活性，DNA聚合酶α和β无外切酶活性。DNA聚合酶α用于合成引物，DNA聚合酶δ用于合成细胞核DNA，DNA聚合酶β和ε主要起修复作用，DNA聚合酶γ用于线粒体DNA的合成。

8.真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是什么？

真核生物的RNA聚合酶，按照对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶Ⅰ基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3mol/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8mol/L以下就会被抑制。RNA 聚合酶Ⅲ对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅱ之间，在10-5mol/L到10-4mol/L才会有抑制现象。RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中，其功能是合成5.8S rRNA、18 S rRNA和28 S rRNA。RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。RNA聚合酶Ⅲ也存在于核质中，其功能是合成tRNA和5 S rRNA及转录Alu序列。

9.真核生物三类启动子各有何结构特点？

真核生物三类启动子分别由RNA聚合酶I、II、III进行转录。类别I启动子包括核心启动子和上游控制元件两部分，需要UBF1和SL1因子参与作用。类别II启动子包括四类控制元件：基本启动子、起始子、上游元件和应答元件。识别这些元件的反式作用因子由通用转录因子、上游转录因子和可诱导的因子。类别III启动子有两类：上游启动子和基因内启动子，分别由装配因子和起始因子促进转录起始复合物的形成和转录。

10．论述遗传密码的特点。

（1）遗传密码为三联体：模板从mRNA5′端的起始密码子开始，到3′端的终止密码称为开放读码框架。在框架内每3个碱基组成1个密码子，决定1个氨基酸。（2）遗传密码的种类：遗传密码共64个，其中61个密码子分别代表各种氨基酸。3个为肽链合成的终止信号。位于5′端的AUG，除了代表甲硫蛋氨酸外，还是肽链合成的起始信号。（3）遗传密码的连续性：对mRNA分子上密码子的阅读方法叫读码。正确读码是每3个相邻碱基一组，不间断地连续读下去，直到出现终止密码为止。mRNA上碱基的插入和缺失，可导致框移突变。（4）遗传密码的简并性：有61个密码子代表20种氨基酸，每个密码子只代表一种氨基酸，而多数氨基酸都有2～4个密码子，这种由几个密码子编码同一氨基酸的现象称为简并性。从密码表上可看出密码子的第3位碱基通常是简并的。（5）遗传密码的摆动性：指密码子与反密码子配对不遵从碱基配对规律，此不严格的配对关系称为摆动性。如丙氨酰- tRNA反密码子的第1位碱基I 可以与密码子第3位的A、C或U配对。遗传密码的摆动性使一种tRNA可以识别几种代表同一种氨基酸的密码子。（6）遗传密码的通用性：从细菌到人的遗传密码都市通用的，但近年发现哺乳类动物线粒体的蛋白质合成体系中有个别例外。如UAG不代表终止密码子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表苏氨酸。（7）遗传密码的防错系统：由于遗传密码的简并性，有4个密码的氨基酸，其第三位的碱基被替换，仍编码同一种氨基酸，从遗传密码表可以看出，只要遗传密码的第二位是U，则第一位和第三位不论怎么变化，其编码的氨基酸总是疏水性的，如第二位是C，则其编码的氨基酸是非极性的或极性不带电荷的，若第二位为A或G，则编码的氨基酸R基是亲水性的，第一位是A或C，第二位是A或G，则编码的氨基酸R基是碱性的，若前两位是AG则编码的氨基酸R基是酸性的。这些规律使某些核苷酸的替换可以不引起肽链中氨基酸的变化，或被替换的氨基酸理化性质相似。这便是密码的防错系统。

11.如果mRNA上的阅读框已被确定，它将只编码一种多肽的氨基酸顺序。从一蛋白质的已知氨基酸顺序，是否能确定唯一的一种mRNA的核苷酸序列？为什么？

由于1个密码子只能编码一种氨基酸，在mRNA的开放阅读框确定后，用遗传密码可以推出其相应蛋白质的氨基酸序列。由于mRNA是由DNA转录而来的，如果基因（DNA）编码区的序列已知，也可由此推出相应表达产物的氨基酸序列。但是，由于除甲硫氨酸和色氨酸外的18种氨基酸均有一种以上的密码子，由蛋白质的氨基酸序列推断相应mRNA 的核苷酸序列时，我们会面临多种选择。比如，由7个氨基酸的序列推测其可能的mRNA编码区序列，若其中有5个氨基酸有2个密码，则能够与其相对应的核苷酸序列会有25种，即有32种。

12.如果E.Coli 染色体DNA的75%可用来编码蛋白质，假定蛋白质的平均相对分子质量为60000，以三个碱基编码一个氨基酸计算，（1）若该染色体DNA大约能编码2000种蛋白质，求该染色体DNA的长度？（2）该染色体DNA的相对分子质量大约是多少？（氨基酸残基的平均相对分子质量是120，核苷酸对的平均相对分子质量是640）。

（1）因为蛋白质的平均相对分子质量为60000，氨基酸残基的平均相对分子质量为120，则蛋白质的平均氨基酸残基的个数为60000/120=500个，编码2000种蛋白至少需要2000×500×3个密码子，而DNA碱基的75%用来编码这2000 个蛋白，则该染色体DNA的长度为：2000×500×3/75%=4000000bp。若该DNA为B-DNA，每个bp使螺旋轴延伸0.34nm，则其长度应为：0.34×4000000=1360000nm；（2）该染色体DNA的相对分子质量大约是640×4000000= 2560000000=2.56×109 Da。

13.原核生物与真核生物翻译起始阶段有何异同？

相同之处：（1）都需生成翻译起始复合物；（2）都需多种起始因子参加；（3）翻译起始的第一步都需核糖体的大、小亚基先分开；（4）都需要mRNA和氨酰- tRNA结合到核糖体的小亚基上；（5）mRNA在小亚基上就位都需一定的结构成分协助。（6）小亚基结合mRNA和起始者tRNA后，才能与大亚基结合。（7）都需要消耗能量。

不同之处：（1）真核生物核糖体是80S（40S+60S）；eIF种类多（10多种）；起始氨酰- tRNA是met- tRNA（不需甲酰化），mRNA没有SD序列；mRNA在小亚基上就位需5′端帽子结构和帽结合蛋白以及eIF2；mRNA先于met-tRNA 结合到小亚基上。（2）原核生物核糖体是70S（30S+50S）；IF种类少（3种）；起始氨酰- tRNA是fmet- tRNA（需甲酰化）；需SD序列与16S-tRNA配对结合，rps-1辩认识别序列；小亚基与起始氨酰-tRNA结合后，才与mRNA结合。

14.简述信号肽假说的基本内容。

蛋白质合成后的靶向输送原理，有几种不同的学说，信号肽假说是目前被普遍接受的学说之一。分泌性蛋白质的初级产物N-端多有信号肽结构，信号肽一旦合成（蛋白质合成未终止），即被胞浆的信号肽识别蛋白（SRP）结合，SRP与内质网膜的内侧面的受体即对接蛋白（DP）结合，组成一个输送系统，促使膜通道开放，信号肽带动合成中的蛋白质沿通道穿过膜，信号肽在沿通道折回时被膜上的信号肽酶切除，蛋白质在内质网和高尔基体经进一步修饰（如糖基化）后，即可被分选到细胞的不同部位。

15.肽链合成后的加工修饰有哪些途径？

蛋白质合成后的加工修饰内容有：（1）肽链的剪切：如切除N端的Met，切除信号肽，切除蛋白质前体中的特定肽段。（2）氨基酸侧链的修饰，如：磷酸化、糖基化、甲基化等。（3）二硫键的形成。（4）与辅基的结合。

16.简述操纵子的基本结构。

操纵子的调控区有一个操纵序列，一个启动序列及一个CAP位点，调控区下游有几个结构基因，还有一个调节基因编码阻遏蛋白，阻遏蛋白与操纵序列结合，使操纵子受阻遏而处于关闭状态。若cAMP 与CAP结合，形成的复合物与CAP位点结合，可增大操纵子的转录活性。阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节共同调节结构基因的表达，操纵子机制在原核基因表达调控中具有较善遍的意义，因其多是几个功能相关基因串联于同一操纵子上，故在同一启动序列控制下，可转录出能为多种蛋白质编码的mRNA，即多顺反子mRNA。

17.举例说明基因表达的诱导与阻遏，正调控与负调控。

在特定的环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，则这种基因是可诱导的。可诱导基因在特定的环境中表达增强的过程称为诱导。例如有DNA损伤时，修复酶基因就会在细菌内被诱导激活，使修复酶的活性增加。相反，如果基因对环境信号应答时被抑制则这种基因是可阻遏的，可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏，例如，当培养液中色氨酸供应充分时，在细菌内编码色氨酸合成相关酶的基因表达会被抑制。如果某种基因在没有调节蛋白存在时是表达的，加入某种调节蛋白后基因表达活性便被关闭，这样的控制为负调控。例如，乳糖操纵子。相反，若某种基因在没有调节蛋白存在时是关闭的，加入某种调节蛋白后基因活性就被开启，这种控制称为正调控。例如代谢物阻遏。

18.概述原核生物基因表达调控的特点。

原核基因表达调控与真核存在很多共同之处，但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构，其基因组结构要比真核生物简单，基因表达的调控因此而比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控，但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面：（1）ζ因子决定

RNA聚合酶的识别特异性：原核生物只有一种RNA聚合酶，核心酶催化转录的延长，σ亚基识别特异启动序列，即不同的σ因子协助启动不同基因的转录。（2）操纵子模型的普遍性：除个别基因外，原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上，共同组成一个转录单位即操纵子，如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列控制下，转录出多顺反子mRNA。（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性：在很多原核操纵子系统，特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时，结构基因的转录被阻遏或去阻遏。

19.概述真核生物基因组的特点。

（1）基因组结构庞大：哺乳动物基因组DNA由约

3?bp的核苷酸组成。大约有3万个左右的基因，90%

以上的DNA不为蛋白质编码。真核细胞DNA与组蛋白结合形成复杂的染色质结构，基因表达调控机制更加复杂。（2）单顺反子：真核基因转录产物为单顺反子，即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。许多蛋白质由几条不同的多肽链组成，因此存在多个基因的协调表达。（3）重复序列：重复序列在真核DNA中普遍存在，重复序列长短不一，短的在10个核苷酸以下，长的达数百，乃至上千个核苷酸。据重复频率不同分为高度重复序列、中度重复序列及单拷贝序列。（4）基因的不连续性：结构基因的两侧有不被转录的非编码序列，往往是基因表达的调控区。在编码基因内部有一些不为蛋白质编码的间隔序列，称内含子，而编码序列称外显子，因此真核基因是不连续的。

20.概述真核生物基因表达调控的特点。

同原核生物一样，真核基因表达调控的最基本环节也是转录起始，而且某些机制是相同的，但也存在明显差别：（1）RNA聚合酶：真核有3种RNA聚合酶，分别负责3种RNA转录。（2）活性染色质结构变化：当基因被激活时，可观察到染色体相应区域发生结构和性质变化。包括对核酸酶敏感，DNA拓扑结构变化，DNA碱基修饰变化和组蛋白变化。（3）正调节占主导地位：真核RNA聚合酶对启动子的亲和力极小或根本没有实质性的亲和力，二者的结合必须依赖一种或多种激活蛋白。尽管发现少量基因存在负性顺式作用元件，但普遍存在的是正性调节机制。（4）转录与翻译分隔进行：真核细胞有胞核及胞质等区间分布，转录与翻译在不同亚细胞结构中进行。（5）转录后加工：真核基因的内含子和外显子均被转录，内含子在转录后要被剪接去除，使外显子连接在一起，形成成熟的mRNA。不同剪接方式可形成不同的mRNA，翻译出不同的多肽链。因此，转录后加工是真核基因表达调控的另一重要环节。

21.简答真核生物基因表达的调控方式。

（1）DNA水平的调控：a.基因丢失，即DNA片段或部分染色体的丢失，如蛔虫胚胎发育过程有27%的DNA丢失。b.基因扩增，即特定基因在特定阶段的选择性扩增，如非洲爪蟾卵母细胞中的rDNA是体细胞的4000倍。c.DNA 序列的重排，如哺乳动物免疫球蛋白各编码区的连接。d.染色质结构的变化，通过异染色质关闭某些基因的表达。e.DNA 的修饰，如DNA的甲基化关闭某些基因的活性。（2）转录水平的调控。a.染色质的活化，如核小体结构的解开、非组蛋白的作用等。b.转录因子的作用，转录因子与RNA聚合酶及特定的DNA序列（启动子、增强子）相互作用实现对转录的调控。（3）转录后水平的调控。a.mRNA前体的加工，如5′端加帽、3′端加尾、拼接、修饰、编辑等。

B.mRNA的选择性拼接，如抗体基因的选择性拼接。（4）翻译水平的调控。a.控制mRNA的稳定性，如5′端的帽子结构、3′端polyA尾巴和mRNA与蛋白质的结合有利于mRNA的稳定。b.反义RNA的作用，反义RNA可以选择性抑制某些基因的表达。c.选择性翻译，如血红素缺乏时，通过级联反应使eIF2磷酸化。d.抑制翻译的起始。（5）翻译后水平的调控。a.多肽链的加工和折叠，如糖基化、乙酰化、磷酸化、二硫键形成、蛋白质的降解。b.氨基酸的重排，如合成伴刀豆蛋白A时，氨基酸序列大幅度地被剪接重排。c.通过肽链的断裂等的加工方式产生不同的活性多肽。

22.常用的限制性核酸内切酶有哪些特点？

Ⅱ型限制性核酸内切酶（限制酶）是基因工程中常用的重要工具酶，是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的核酸内切酶，常用的限制酶主要有以下特点：（1）均来自于微生物，并以其来源的微生物学名进行命名；（2）相对分子质量小，仅需Mg2+作为辅助因子，无需ATP；（3）识别特异性DNA双链顺序，在序列内特异切割产生特异性DNA 片段；（4）识别序列长度为连续的4/6/8bp；（5）识别序列呈二重旋转对称，称回文结构，富含GC；（6）有3种切口：5′端突出的黏性末端（如HindⅢ），3′端突出的黏性末端（如Pst Ⅰ）和平末端（如H加工）。

23.在基因克隆中，目的基因有哪些主要来源？

（1）从染色体DNA中直接分离：主要针对原核生物。（2）化学合成法：由已知多肽的氨基酸序列，推得编码这些氨基酸的核苷酸序列，利用DNA合成仪人工合成其基因。（3）从基因组DNA文库中筛选分离组织/细胞染色体DNA：利用限制性核酸内切酶将染色体DNA切割成片段，与适当的克隆载体连接后转入受体菌扩增，即获得基因组DNA文库，用核酸探针将所需目的基因从基因文库中“钓”取出来。（4）从文库中筛选cDNA：提取mRNA，利用反转录酶合成与其互补的DNA（cDNA）分子，再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后转入受体菌，即获得cDNA文库，然后采用适当方法从cDNA文库中筛选出目的cDNA。（5）用PCR从基因组DNA或cDNA中扩增目的基因。

24.什么是cDNA文库？cDNA文库与基因组文库有何差别？

同mRNA互补的DNA称为cDNA。cDNA文库是以某一细胞的总mRNA为模板，在无细胞系统中，在反转录酶的作用下，首先合成互补DNA的第一链，破坏RNA模板后，再以第一链为模板合成第二链，得到双链cDNA。选用适合的载体，与合成的cDNA重组，导入寄主细胞，经筛选得到的cDNA克隆群称为cDNA文库。由于cDNA技术合成的是不含内含子的功能基因，因此是克隆真核生物基因的一种通用方法。由于细胞内的基因在表达的时间上并非是统一的，具有发育的阶段性和时间性，有些则需要特殊的环境条件。所以，cDNA文库不可能构建得十分完全，也就是说任何一个cDNA文库都不可能包含某一生物的全部编码基因。cDNA文库与基因组文库的主要差别是：（1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列，cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响，cDNA文库克隆的是被转录DNA序列（因它受发育和调控因子的影响）。（3）基因组文库中的编码基因是含有内含子和外显子，而cDNA克隆的基因不含内含子。

25.用于DNA重组的载体应具备什么条件？常用的载体有哪一些？各有何特点？

DNA重组载体应具备的条件：（1）能自主复制；（2）具有一种或多种限制性内切酶的单一切割位点，并在位点中插入外源基因后，不影响其复制功能；（3）具有1～2个筛选标记；（4）克隆载体必须是安全的，不应含有对受体细

胞有害的基因，并且不会任意转入其他生物细胞；（5）易于操作，转化效率高。常用的基因载体有以下几种：（1）质粒：是细菌染色体以外的小型环状双链DNA分子，本身有复制功能，且带有某些选择信息，但可插入的目的基因片段较小。（2）噬菌体DNA：是一种病毒DNA，能插入比较大的外源DNA片段，在DNA分子上有多种限制性核酸内切酶识别位点，便于多种外源DNA酶切片段的克隆。（4）柯斯质粒载体和酵母人工染色体：前者结合了质粒和λ噬菌体载体的优点，也是一种环形双链DNA分子，具有质粒的性质，可以转化大肠杆菌，并自行复制和增殖，但它不会产生子代噬菌体，构建成的此种载体较小，因此能插入比较大的外源DNA片段，所以被广泛地用于构建基因组文库。后者既含有大肠杆菌来源的质粒复制起始位点，又含有酵母菌染色体DNA着丝点，端粒和复制起始位点的序列，以及合适的选择标记基因，可在转化的酵母菌细胞内，按染色体DNA复制的形式复制重组DNA，容纳外源DNA片段的能力比前3种载体大得多。

26.简述连接目的基因与载体的主要方法？

（1）黏性末端连接：用同一限制酶切割载体及目的基因后，产生完全相同的黏性末端，可以用DNA连接酶直接进行共价连接。或两种不同的限制性核酸内切酶切割产生的配伍末端（相同类型的黏性末端）之间也可以进行黏性末端连接。（2）平端连接：某些限制酶切割DNA后产生平头末端，由于平头末端5′端带有磷酸，3′带有游离羟基，可在DNA连接酶作用下直接连接，并且不管末端序列如何均可连接，但连接效率要比黏性末端之间的连接低。（3）同聚物加尾连接：利用同聚物序列，如多聚A与多聚T之间的退火作用完成连接。如果载体和目的基因上找不到共同的酶切点时，可经不同的限制酶切割后，用单链核酸酶将其各自的黏性末端切平，在末端核苷酸转移酶作用下，在DNA片段末端加上同聚物序列，制造出黏性末端，而后连接。（4）人工接头连接：将磷酸化接头连到平末端，使产生新的限有制性酶切核酸酶位点，再用限制酶切割，产生黏性末端后连接。

27.概述筛选和鉴定DNA重组体的常用方法。

在转基因操作以后，载体只能进入部分宿主细胞，即使含有载体的细胞，也并非都含有目的基因，有些宿主细胞可能含有自身连接成环的载体分子或非目的基因与载体形成的重组体。因此，须在不同层次不同水平上进行筛选和鉴定，以确定哪一菌落所含的重组DNA分子确实带有目的基因，这一过程为筛选。根据载体体系、宿主细胞特性及外源基因在受体细胞表达情况的不同，可采用：（1）直接选择法：针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因，直接测定该基因或基因表型的方法。a.抗药标志的筛选：载体具有某种抗生素的抗性基因，在转化后只有含载体的细菌才能在含该抗生素的培养平板上生长并形成单菌落，而未转化细胞则不能生长，这样即可将转化菌与非转化菌区别开来。

b.插入失活法：将目的基因插入载体某一耐药基因内使该基因失活，可区分单纯载体或重组载体（含目的基因）的转化菌落。如pBR322含amp r、Tet r双抗药基因，若将目的基因插入载体的Tet r基因中，则含目的基因的转化细胞只能在含Amp的培养液中生长，而不能在含Tet的培养液中生长。

c.标志补救：若克隆的基因能在宿主菌表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷互补，那么就可以利用营养突变菌株进行筛选，这称为标志补救。如重组体为亮氨酸自养型（Leu+），将重组子导入亮氨酸异养型（Leu-）的宿主细胞后，在不含Leu的培养液中可生长，而不含重组体的细胞则不能生长。α-互补法筛选（见43题）也是一种标志补救选择方法。

d.酶切图谱筛选：分别挑取独立的菌落，培养后快速提取重组体DNA，用重组时所采用的限制酶切割后，进行琼脂糖凝胶电泳，可以从DNA片段的大小和有无判断所选的菌落是否为阳性克隆。

e.核酸杂交筛选：将转化子DNA或克隆的DNA分子片段转移至合适的膜上，利用标记探针进行杂交，直接选择并鉴定目的基因。

f.原位杂交筛选：是将待选菌在平板上培养成菌落，按相应位置（原位）转移至合适的膜上，经变性使膜上的DNA成单链，再与标记的探针（与目的基因互补）杂交，找出平板上的菌落位置，即为重组的阳性菌落。（2）免疫学方法筛选：利用特异抗体与目的基因表达产物的特异相互作用进行筛选。这种方法不直接鉴定基因，属非直接筛选法。分为免疫化学方法及酶联免疫检测分析等。基本的工作原理是将琼脂培养板

上的转化子菌落经氯仿蒸汽裂解、释放抗原，再将固定有抗血清的膜覆盖在裂解菌落上，在膜上得到抗原抗体复合物，最后用合适的方法检出阳性反应菌落。

自测试题五及参考答案

单片机自测试卷五一、填空题（每空1分，共10分） 1.单片机内有组成微机的主要功能部件、和。 2.堆栈的特性是，8051的堆栈一般开辟在，其堆栈指针是。 232C是总线标准。是接口。有一个全双工的步串行口，有种工作方式。二、简述题（每题5分，共25分） 1.单片机的特性主要有哪些、8051、8751有何异同的位存储区在哪里寻址范围是多少的定时器/计数器有几个是多少位的有几种工作方式其工作原理如何有哪几个中断源哪些是内部中断源哪些是外部中断源三、判断题（20分） 1.判断以下各条指令是否正确（LL1和PROC为标号）（10分）（1）MOVX @R0，B （2）MOV A，30H （3）MOVX A，30H （4）ADDC A，R7 （5）SUB A，R2 （6）ANL #99H ，36H （7）MOV C，（8）ORL ，（9）JBC P0，LL1 （10）ACALL PROC 2.判断以下说法是否正确，不正确予以改正。（10分）（1）单片机是面向数据处理的。（2）定时器与计数器的工作原理均是对输入脉冲进行计数。（3）由于MCS-51的串行口的数据发送和接收缓冲器都是SBUF，所以其串行口不能同

时发送和接收数据，即不是全双工的串行口。（4）END表示指令执行到此结束。（5）ADC0809是8位逐次逼近式模/数转换接口。四、阅读程序（20分） 1.下列各条指令其源操作数的寻址方式是什么各条指令单独执行后，A中的结果是什么（5分）设（60H）=35H，（A）=19H，（R0）=30H，（30H）=0FH。（1）MOV A，#48H ；寻址方式：（A）= （2）ADD A，60H ；寻址方式：（A）= （3）ANL A，@R0 ；寻址方式：（A）= 2.阅读下列程序段，写出每条指令执行后的结果，并说明此程序段完成什么功能（15分） MOV R1，#30H ；（R1）= MOV A，#64H ；（A）= ADD A，#47H ；（A）= ，（CY）= ，（AC）= DA A ；（A）= ，（CY）= ，（AC）= MOV @R1，A ；（R1）= ，（30H）= 此程序段完成的功能：五、计算（画图）题（10分）若8051的晶振频率f osc为6MHz，定时器/计数器T0工作在工作方式1，要求产生10ms 定时，写出定时器的方式控制字和计数初值（分别写出TH0与TL0值）。六、编程题（15分） 1.阅读程序并填空，形成完整的程序以实现如下功能。（5分）有一长度为10字节的字符串存放在8031单片机内部RAM中，其首地址为40H。要求将该字符串中每一个字符加偶校验位。（以调用子程序的方法来实现。）源程序如下： ORG 1000H

自适应练习题及答案

2008练习题作业一：第三章、第四章第三章（一）书66页3.4题。对于加权矢量为T w w ],[21=w 的二阶自适应滤波器，给定下列数据 ??????=2112xx R ??? ???=87d x r 42}{2=d E 1) 写出}{2e E 与T w w ],[21=w 的关系；（3.1.10） 2) 求opt w ，写出}{2e E 与opt w w v -=的关系；（3.2.1） 3) 求将xx R 对角线化的正交矩阵Q ，v Q v T ='以及}{2e E 与'v 的关系式。 -------------------------------------------------------------- 书66页3.4题答案：解：（1）().T e d w X n =-Q 其中()[(),(1)]T X n X n X n =- 22(){[()]}T E e E d w X n =-Q 2 ()[()()]2[()]T T T E d w E X n X n w w E X n d =+- 2()2T T XX Xd E d w R w w r =+- (1) 将 2 21()42,12XX E d R ??==???? 及[78]T Xd r =代入（1）式，可得：222 121212[]222141642E e w w w w w w =++--+ （2）opt w 应满足2 []0w E e ?= 即220XX opt Xd R w r -=

∴ 1 1217128opt XX Xd w R r --????==??? ?????? 21711283-????=??????-???? [] 23T = ∴ {}()()22111 min min []()2T T XX Xd XX XX Xd XX Xd Xd E e E d R r R R r R r r ξ---==+- 211 2 1()2()T T Xd XX Xd Xd XX Xd T Xd XX Xd E d r R r r R r E d r R r ---=+-=- 21742[78]42384128???? =-=-=???? ???? ()()2 min []T opt XX opt E e w w R w w ξξ==+--Q 21()T T Xd XX Xd XX E d r R r v R v -=-+ (2) 将2 21()42,12XX E d R ??==???? 及[78]T Xd r =代入（2）,可得： []112221423812v v v v ξ?? ??=-+?????????? Q ＝2 2 12122224v v v v +++ （3）易求得2112XX R ??=???? 的特征值及归一化特征向量为：

模拟试题(二)含答案

《中国古建筑史》模拟试题（二）一、选择题（每题1分，共30分） 1．清明上河图所表现的是（c ）城的风貌。Ａ、西汉长安Ｂ、唐长安Ｃ、北宋汴梁Ｄ、明南京 2．《营造法式》是哪个朝代的著作？（c） A汉B唐C宋D清 3.我国砖普遍用于民居砌墙始于哪个朝代？（d） A秦B唐C宋D明 4.下面哪个城市不属于我国七大古都？（d） A杭州B南京C开封D苏州 5．唐长安城位于汉长安城的：（a） A东南B西南C东北D西北 6．按尊卑顺序排列，下列哪组屋顶形式是正确的？（c） A歇山顶、庑殿顶、硬山顶、悬山顶 B庑殿顶、歇山顶、硬山顶、悬山顶 C庑殿顶、歇山顶、悬山顶、硬山顶 D歇山顶、庑殿顶、悬山顶、硬山顶原始社会晚期黄河流域最具代表性的建筑类型是：（b） A干阑式建筑B木骨泥墙房屋C穴居D巢居 9．历代帝王陵墓中“因山为陵”的是：（b） A秦代B唐代C宋代D明代河南洛阳龙门石窟开凿于：（a） A北魏B北周C隋D唐我国用琉璃瓦的历史始于哪个朝代？（a） A南北朝B唐C春秋D西周 13．佛光寺东大殿平面柱网为：（c） A单槽B双槽C金厢斗底槽D分心槽 14．我国已知最早采用榫卯技术构筑房屋的实例是：（c） A浙江余姚河姆渡遗址B西安半坡村遗址C河南偃师二里头宫殿遗址D陕西岐山凤雏村遗址

15．原始社会晚期长江流域最具代表性的建筑类型是：（a） A干阑式建筑B木骨泥墙房屋C穴居D巢居 16．我国已知最早的庭院式建筑是：（b） A西安半坡遗址B陕西岐山凤雏村遗址C河南偃师二里头宫殿遗址D浙江余姚河姆渡村遗址 17．我国已知最早、最严整的四合院实例是：（b） A湖北蕲春建筑遗址B陕西岐山凤雏村遗址C河南偃师二里头宫殿遗址D安阳小屯村殷墟宫殿遗址我国瓦的普遍使用是在哪个时期？（b） A西周B春秋C战国D秦 19．我国砖的使用始于：（a） A西周B春秋C战国D秦 20．著名的河北赵县安济桥的设计人是：（b） A李诚B李春C宇文恺D鲁班 21．《园冶》的作者是：（a） A李诚B李春C计成D苏东坡 22．我国佛教的四大名山是指：（a） A五台山、九华山、峨嵋山、普陀山 B五台山、武当山、峨嵋山、普陀山 C武当山、九华山、峨嵋山、普陀山 D武当山、五台山、峨嵋山、九华山 23.著名的《考工记》成书于：（b） A春秋B西周C战国D商 24．明朝天坛祈年殿三檐颜色为：（d） A全部青色B全部绿色C全部淡蓝色D分别为青、黄、绿三色 26．《园冶》是哪个朝代的著作？（a） A明B唐C宋D清 28．现存甘肃敦煌莫高窟开凿于：（a） A北魏B北周C隋D唐原始社会晚期黄河流域最具代表性的建筑类型是：（b） A干阑式建筑B木骨泥墙房屋C穴居D巢居 30、我国宋代的建筑官书是。（c） A、《木经》 B、《考工记》 C、《营造法式》 D、《工程做法》

成人高考《高起专语文》自测试题及参考答案

2016年成人高考《高起专语文》自测试题及参考答案一、基础知识(18分，每小题3分) 1.下列词语中带横线的字，读音全部相同的一组是( )。 A.驱使腐蚀始料不及 B.魅力联袂梦寐以求 C.赦免摄取舍本逐末 D.萦怀聪颖义愤填鹰 2.下列词语中没有错别字的一项是( )。 A.天涯海角先法治人多愁善感 B.抑扬顿措横征暴敛风驰电掣 C.脍炙人口礼上往来患得患失 D.虎视眈眈扑朔迷离无懈可击 3.下列词语中加横线字的意义全都不相同的一组是( )。 A.名不副实名至实归名列前茅名闻遐迩 B.分门别类于差万别别有洞天离情别绪 C.改弦更张改邪归正改天换地改过自新 D.老羞成怒老当益壮老气横秋老调重弹 4.下列句子没有语病的一项是( )。 A.这个小区里的居民都能和睦相处，难怪新老住户都不想离开这里外迁他处。

B.作为一个单人独车作环球采访的摄影记者。我真是经历了不少危险。 C.群众的意见和建议，各级领导必须引起足够的重视，切不可置之不理。 D.对一切重大的责任事故，我们都必须严肃对待，一查到底，绝不纵容包庇。 5.跟下面的句子衔接最恰当的一项是( )。读者的“本钱”从何处积累呢?看来主要从生活中和书本上得来。 A.蒙童入学，未曾读过书，但他已在生活中认识了不少事物所以才能学懂浅近的课文。读书做学问都必然有一个从少到多、由浅入深的过程。两手空空而想在学术上成为“暴发户”，恐怕是不可能的。 B.读书做学问都必然有一个从少到多、由浅人深的过程。两手空空而想在学术上成为“暴发户”，恐怕是不可能的。蒙童入学，未曾读过书，但他已在生活中认识了不少事物，所以才能学懂浅近的课文。 C.蒙童入学，未曾读过书，但他已在生活中认识了不少事物，所以才能学懂浅近的课文。两手空空而想在学术上成为“暴发户”，恐怕是不可能的。读书做学问都必然有一个从少到多、由浅人深的过程。 D.读书、做学问都必然有一个从少到多、由浅入深的过程。蒙童入学，未曾读过书，但他在生活中认识了不少事物，所以才能学懂浅近的课文。两手空空而想在学术上成为“发户”，恐怕是不可能的。 6.下列句子的排列顺序，正确的一项是( )。 ①读书诮采用精读与渊读相结合的方法 ②因此这两种读书方法，不但不可以偏废，而且应该讲究巧妙的结合 ③如果对可以泛读的，采用精读的方法 ④又会浪费大量的时间，而只能吸收到司怜的一点点

指南测试题三及答案

汤塘镇中心幼儿园《3-6岁儿童学习与发展指南》测试题（三）单位姓名分数一、填空题（每题分,共15分） 1、中国教育部网站2012年10月15日发布，对防止和克服学前教育“小学化”现象提供了具体和。 2、《指南》分别对3至4岁、4至5岁、5至6岁三个年龄段末期幼儿应该、，大致可以达到什么发展水平提出了，指明了幼儿的具体方向。 3、幼儿做错事时要冷静处理，不，更不能。 4、《指南》教育建议部分列举了一些能够有效和幼儿学习与发展的）与。 5、《指南》的五大领域共有个子领域，个学习和发展目标，条教育建议。 6、幼儿的语言能力是在交流和运用的过程中发展起来的。应为幼儿创设的语言交往环境，鼓励和支持幼儿与、交流，让幼儿想说、敢说、喜欢说并能得到积极回应。 7、数学认知的目标是让幼儿初步感知生活中数学的和。 8、幼儿的思维特点是是以思维为主，应注重引导幼儿通过和（）进行科学学习，不应为追求知识和技能的掌握，对幼儿进行灌输和强化训练。 9、科学探究目标一体现了幼儿好奇心和探究兴趣的高度重视，可以用、、、三个关键词来概括。 10、幼儿园开运动会，跑步的跑道合理设计是3-4岁米、4-5岁米、5-6岁米。二、单项选择题（每题1分,共10分） 1、《指南》是谁制定的（）。 A、国务院 B、教育部 C、国家 D、教育厅 2、《指南》是哪一年颁布的（）。 A、2001 B、2010 C、2011 D、2012 3、《指南》从几个领域描述幼儿的学习与发展（）。 A、2 B、3 C、4 D、5 4、培养幼儿具有良好的生活与卫生习惯，不用脏手揉眼睛，4-5岁幼儿连续看电视等不超过多少分钟？（） A、10分钟 B、15分钟 C、20分钟 D、30分钟 5、《指南》以什么为目标（） A、促进幼儿体、智、德、美各方面的协调发展 B、促进幼儿学习与发展的教育途径与方法 C、帮助幼儿园教师和家长了解3-6岁幼儿学习与发展的基本规律和特点 D、为幼儿后继学习和终身发展奠定良好素质基础。６、以下说法，正确的是（） A、健康是指身体上的完满状态及良好的适应能力

模拟试卷2及答案

模拟试卷二一、选择题（请将正确答案的序号填写在题中的括号中。每题2分，满分30分） 1、在XY平面上，某圆弧圆心为(0，0)，半径为80，如果需要刀具从(80，0)沿该圆弧到达(0，80)，程序指令为（B ）。（A）G02 XO．Y80．I80.0 F300 （B）G03 XO．Y80．I-80．0 F300 （C）G02 X8O.Y0.J80．0 F300 （D）G03 X80．Y0．J-80．0 F300 2、在G00程序段中，（C）值将不起作用。（A）X （B）S （C）F （D）T 3、下列（D ）不适应在加工中心上生产。（A）需要频繁改型的零件（B）多工位和多工序可集中的零件（C）难测量的零件（D）装夹困难的零件 4、数控机床中把脉冲信号转换成机床移动部件运动的组成部分称为（C ）。（A）控制介质（B）数控装置（C）伺服系统（D）机床本体 5、数控机床的旋转轴之一B轴是绕（ B ）旋转的轴。（A）X轴（B）Y轴（C）Z轴（D）W轴 6、使用（B ）可使刀具作短时间的无进给光整加工，常用于车槽、镗平面、锪孔等场合，以提高表面光洁度。（A）G02 （B）G04 （C）G06（D）G00 7、数控机床坐标轴确定的步骤为（C ）。（A）X→Y→Z （B）X→Z→Y （C）Z→X→Y 8、下列（B ）的精度最高。（A）开环伺服系统（B）闭环伺服系统（C）半闭环伺服系统（D）闭环、半闭环系统 9、（B ）命令是有条件停止。（A）G00 （B）M01 （C）M05 （D）M19 10、在CRT/MDI面板的功能键中，用于刀具偏置数设置的键是（B ）。（A）POS （B）OFSET （C）PRGRM （D）SYSTEM 11、精车轮廓时，为保证零件加工面光洁度的一致性，应使用（C ）。（A）G94 （B）G95 （C）G96 （D）G87 12、单段运行功能有效时，（B ）。（A）执行一段加工结束（B）执行一段保持进给（C）连续加工（D）程序校验 13、程序“D01 M98 P1001”的含义是（D ）。（A）调用P1001子程序（B）调用O1001子程序（C）调用P1001子程序，且执行子程序时用01号刀具半径补偿值（D）调用O1001子程序，且执行子程序时用01号刀具半径补偿值 14、执行程序后G98 G81R3 Z-5 F50后，钻孔深度是（A ）。（A）5mm （B）3mm （C）8mm （D）2mm 15、（B ）与虚拟制造技术一起，被称为未来制造业的两大支柱技术。（A）数控技术（B）快速成形法（C）柔性制造系统（D）柔性制造单元二、判断题（请将判断结果填入括号中。正确的填“√”，错误的填“×”。每题2分，满分30分）（）1、机床回零后，显示的机床坐标位置一定为零。（√）2、加工中心具有刀库和刀具交换装置。

《商务英语4》自测试题附答案

一、选择填空题（每题10分，共5题）题目1 不正确获得10.00分中的0.00分标记题目题干 —You mean... like becoming a publicly-traded company? —That's right. ______________ . 选择一项： A. It's something we should give serious consideration to B. It will still be a privately held company C. It will become a privately held company 反馈你的回答不正确解析：本题考核“说服某人”的交际用语。选项A对于问话者做出积极的正面回应，使用强调句型，进一步给予说明和解释：“这事儿，我们应该认真考虑”；选项B和C说明答话者前后自相矛盾，所以答案是A。正确答案是：It's something we should give serious consideration to 题目2 正确

获得10.00分中的10.00分标记题目题干 —Okay, what is the decision? —As you know, we have been a privately held, family-owned company for over 120 years,_____________. 选择一项： A. and I think it definitely has a bright future B. but it may be time to consider some major changes C. but the company faces tough competition 反馈你的回答正确解析：本题考核“提出建议”的交际用语。第一说话人询问对方做出怎样的决定，回答者答语的前半句话表明公司的状况，答语的后半句话给出的应是具体的决定，即回答者的建议，只有选项B是针对第一说话人的问题进行回答，“但是可能是该考虑一些重大变化的时候了”，所以答案是B。正确答案是：but it may be time to consider some major changes 题目3 不正确获得10.00分中的0.00分

大学英语模拟题二及答案

2008年4月统考模拟试题二第一部分：交际英语（共10小题；每小题1分，满分10分）此部分共有10个未完成的对话，针对每个对话中未完成的部分有4个选项，请从Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四个选项中选出可以填入空白处的最佳选项，并用铅笔将答题卡上的相应字母涂黑。 1. --Can you turn down the radio, please? -- _________. A. Oh, I know B. I'm sorry, I didn't realize it was that loud C. I'll keep it down next time D. Please forgive me 2. -- Hello, I'd like to speak to Mark, please. -- _________. A. Yes, I'm Mark B. This is Mark speaking C. It's me here D. This is me 3. --Can I give you a hand. It seems pretty heavy. -- _________. A. It's none of your business B. Sorry, I don't know you C. Thanks, I can manage that D. No, it's not heavy 4. --I'd like to make a reservation for two days. My name is Wang Ming-Ming. -- _________. A. Single room or double room B. You're too late for the room C. We don't have any room D. Our hotel is very expensive 5. -- Would you fill in this registration form? _________? -- I don't know how to do that. A. What should I write B. It's too difficult. C. Where is the form D. Would you please help me 6. --Look, would you like to go out tomorrow evening? --________. My parents are coming to see me. A. I'm afraid I can't tomorrow evening B. I don't like to go out with you C. I have no time tomorrow evening D. I won't go out with you 7. --Do you mind turning off the TV? I'm studying for the exam.

(完整版)软件测试试题及答案

太原理工大学软件测试技术适用专业：软件工程2011级考试日期：2014.1 时间：120 分钟一、判断题 1. 测试是调试的一个部分（╳） 2. 软件测试的目的是尽可能多的找出软件的缺陷。（√） 3. 程序中隐藏错误的概率与其已发现的错误数成正比（√） 4. Beta 测试是验收测试的一种。（√） 5. 测试人员要坚持原则，缺陷未修复完坚决不予通过。（√） 6. 项目立项前测试人员不需要提交任何工件。（╳） 7. 单元测试能发现约80%的软件缺陷。（√） 8. 测试的目的是发现软件中的错误。（√） 9. 代码评审是检查源代码是否达到模块设计的要求。（√） 10. 自底向上集成需要测试员编写驱动程序。（√） 11. 测试是证明软件正确的方法。（╳） 12. 负载测试是验证要检验的系统的能力最高能达到什么程度。（√） 13. 测试中应该对有效和无效、期望和不期望的输入都要测试。（√）验收测试是由最终用户来实施的。（√） 14. 测试人员要坚持原则，缺陷未修复完坚决不予通过。（√）黑盒测试也称为结构测试。（╳）集成测试计划在需求分析阶段末提交。（╳） 15. 软件测试的目的是尽可能多的找出软件的缺陷。(√) 16. 自底向上集成需要测试员编写驱动程序。(√) 17. 负载测试是验证要检验的系统的能力最高能达到什么程度。(╳) 18. 测试程序仅仅按预期方式运行就行了。(╳) 19. 不存在质量很高但可靠性很差的产品。(╳) 20. 软件测试员可以对产品说明书进行白盒测试。(╳) 21. 静态白盒测试可以找出遗漏之处和问题。(√) 22. 总是首先设计白盒测试用例。(╳) 23. 可以发布具有配置缺陷的软件产品。(√) 24. 所有软件必须进行某种程度的兼容性测试。(√) 25. 所有软件都有一个用户界面，因此必须测试易用性。(╳) 26. 测试组负责软件质量。(╳) 27. 按照测试实施组织划分，可将软件测试分为开发方测试、用户测试和第三方测试。(√) 28. 好的测试员不懈追求完美。(× ) 29. 测试程序仅仅按预期方式运行就行了。( × ) 30. 在没有产品说明书和需求文档的条件下可以进行动态黑盒测试。( √) 31. 静态白盒测试可以找出遗漏之处和问题。( √) 32. 测试错误提示信息不属于文档测试范围。( × )

自测试题三及参考答案

单片机自测试题三一、单项选择题（30分） 1．在中断服务程序中至少应有一条（） A.传送指令 B.转移指令 C.加法指令 D.中断返回指令 2．当MCS-51复位时，下面说法准确的是（） A.PC=0000H B.SP=00H C.SBUF=00H D.（30H）=00H 3．要用传送指令访问MCS-51片外RAM，它的指令操作码助记符是（） A.MOV B.MOVX C.MOVC D.以上都行 4．ORG 2000H LACLL 3000H ORG 3000H RET 上边程序执行完RET指令后，PC=（） A.2000H B.3000H C.2003H D.3003H 5．要使MCS-51能响应定时器T1中断，串行接口中断，它的中断允许寄存器IE的容应是（） A.98H B.84H C.42H D.22H 6．JNZ REL指令的寻址方式是（） A.立即寻址 B.寄存器寻址 C.相对寻址 D.位寻址 7．执行LACLL 4000H指令时, MCS-51所完成的操作是( ) Ａ保护ＰＣＢ.4000H→PC C.保护现场 D.PC+3入栈, 4000H→PC 8.下面哪条指令产生WR信号( ) A.MOVX A,DPTR B.MOVC A,A+PC C.MOVC A,A+DPTR D.MOVX DPTR,A 9.若某存储器芯片地址线为12根,那么它的存储容量为( ) A. 1KB B. 2KB C.4KB D.8KB INT引脚上的一个正脉冲宽度,则TMOD的容应为( ) 10.要想测量0 A.09H B.87H C.00H D.80H

11.PSW=18H时,则当前工作寄存器是( ) A.0组 B. 1组 C. 2组 D. 3组 12.MOVX A,DPTR指令中源操作数的寻址方式是( ) A. 寄存器寻址 B. 寄存器间接寻址 C.直接寻址 D. 立即寻址 13. MCS-51有中断源( ) A.5 B. 2 C. 3 D. 6 14. MCS-51上电复位后,SP的容应为( ) A.00H B.07H C.60H D.70H https://www.wendangku.net/doc/7511517524.html, 0003H LJMP 2000H ORG 000BH LJMP 3000H 当CPU响应外部中断0后,PC的值是( ) A.0003H B.2000H C.000BH D.3000H 16.控制串行口工作方式的寄存器是( ) A.TCON B.PCON C.SCON D.TMOD 17.执行PUSH ACC指令, MCS-51完成的操作是( ) A.SP+1→SP, ACC→SP B. ACC→SP, SP-1→SP C. SP-1→SP, ACC→SP D. ACC→SP, SP+1→SP 18.P1口的每一位能驱动( ) A.2个TTL低电平负载 B. 4个TTL低电平负载 C.8个TTL低电平负载 D.10个TTL低电平负载 19.PC中存放的是( ) A.下一条指令的地址 B. 当前正在执行的指令 C.当前正在执行指令的地址 D.下一条要执行的指令 20.8031是( ) A.CPU B.微处理器 C.单片微机 D.控制器 21.要把P0口高4位变0,低4位不变,应使用指令( ) A.ORL P0,#0FH B.ORL P0,#0F0H C.ANL P0,#0F0H D.ANL P0,#0FH 22.下面哪种外设是输出设备( )

模拟试题二及答案

模拟试题二及答案一、（共20分，每小题5分）计算题 1.应用冲激函数的性质，求表示式23()t t dt δ∞-∞ ?的值。解:23()300t t dt δ∞-∞ =?=? 2．判断系统是否为线性时不变系统：()(2)r t e t =。解: 线性时变系统 3．有一LTI 系统，当激励)()(1t u t x =时，响应)(6)(1t u e t y t α-=,试求当激励 ())(23)(2t t tu t x δ+=时，响应)(2t y 的表示式。（假定起始时刻系统无储能）。解: ()()t t u t u t dt -∞?=?， ()()d t u t dx δ= ，该系统为LTI 系统。故在()t u t ?激励下的响应1 26()6()(1)t t t y t e u t dt e ααα ---∞ =?=--? 在()t δ激励下的响应2 2()(6())6()6()t t d y t e u t e u t t dx αααδ--= =-+ 在3()2()tu t t δ+激励下的响应1818 ()12()12()t t y t e e u t t αααδαα --=--+ 4．试绘出时间函数)]1()([--t u t u t 的波形图。

二、（15分，第一问10分，第二问5分）已知某系统的系统函数为2 5 ()56 s H s s s += ++，试求（1）判断该系统的稳定性。（2）该系统为无失真传输系统吗？请写出判断过程。 21255 ()56(2)(3) 2,s s H s s s s s s s ++= = ++++∴=-=-3,位于S复平面的左半平面所以,系统稳定. (2) 由于05 ()()3) jwt j H j Ke j j ωωωω-+= ≠+＋2（，不符合无失真传输的条件，所以该系统不能对输入信号进行无失真传输。三、（10分）已知周期信号f (t )的波形如下图所示，求f (t )的傅里叶变换F (ω)。 f (t )的傅里叶级数为 1j 1()e d t n T F f t t T ω-= ??3 j π2111 2 221()(1)e d 2n t G t G t t --??=--???? ?π sin 41(1)πn n n ??=--? ? 所以()()F F f t ω=????()2π πn n F n δω∞=-∞ =-∑()π sin 421(1)πn n n n n δω∞ =-∞ ??=---? ?∑ 四、（15分）求下列函数的拉普拉斯逆变换。

人工智能与未来教育自测试题及答案

人工智能与未来教育自测单选题（共30题，每题2分） 1．为了解决如何模拟人类的感性思维，例如视觉理解、直觉思维、悟性等，研究者找到一个重要的信息处理的机制是（）。 ?A．专家系统 ?B．人工神经网络 ?C．模式识别 ?D．智能代理参考答案：B 答案解析：暂无 2．专家系统是以（）为基础，以推理为核心的系统。 ?A．专家 ?B．软件 ?C．知识

解决问题参考答案：C 答案解析：暂无 3．神经网络研究属于下列（）学派 ?A．符号主义 ?B．连接主义 ?C．行为主义 ?D．都不是参考答案：B 答案解析：暂无 4．下列使用投影机的不正确操作有（）?A．同时切断投影机电源和投影机灯泡的电源?B．投影机灯泡上的污迹可以用透镜纸擦拭 ?C．较长时间不使用投影机，应切断投影机电源

严禁搬动处于工作状态的投影机参考答案：A 答案解析：暂无 5．人工智能的含义最早由一位科学家于1950年提出，并且同时提出一个机器智能的测试模型，请问这个科学家是（） ?A．明斯基 ?B．扎德 ?C．图林 ?D．冯.诺依曼参考答案：C 答案解析：暂无 6．关于概念图下列说法不恰当的是（） ?A．概念图也叫思维图 ?B．概念图是一种评价工具

概念图可以作为一种认知工具 ?D．概念图的使用对发展学生的思维能力没有帮助参考答案：D 答案解析：暂无 7．下列关于人工智能的叙述不正确的有（）。 ?A．人工智能技术它与其他科学技术相结合极大地提高了应用技术的智能化水平。 ?B．人工智能是科学技术发展的趋势。 ?C．因为人工智能的系统研究是从上世纪五十年代才开始的，非常新，所以十分重要。 ?D．人工智能有力地促进了社会的发展。参考答案：C 答案解析：暂无 8．属于认知主义理论观点的是() ?A．学习是刺激——反应的联结

2018年高考语文模拟试题(卷)二(附答案解析)

一、现代文阅读（35分）（一）论述类文本阅读（本题共3小题，9分）阅读下面的文字，完成1～3题。在人类文学艺术的宝库里，喜剧艺术的重要性不言而喻。俄国思想家巴赫金就说过：“一切真正伟大的东西，都应包含有笑的因素。” 当前，喜剧文化日益成为中国审美文化的重要形态。电视娱乐化浪潮此起彼伏；喜剧电影日趋繁荣；在戏剧演出市场，喜剧颇受观众青睐。各种形式、各种风格的喜剧艺术奏响了这个时代的喜剧大合唱。不过，当下的喜剧发展也是问题丛生。各种搞笑、逗乐、嬉闹，都被视为喜剧，将喜剧等同于娱乐，喜剧成了一个容纳所有娱乐形式的大箩筐，搞笑的东西都往里装。当今时代，喜剧的处境非常尴尬，有些所谓“喜剧”，实际是闹剧而已，甚至为了逗乐而陷入低俗娱乐。喜剧被扭曲、被矮化，喜剧因戴上了名缰利锁而失魂。何谓喜剧之魂？乐观自信、理性超脱、自由狂欢的喜剧精神乃是喜剧之魂。伟大的喜剧艺术作品一定是喜剧精神高扬的作品。以戏剧为例，中外戏剧史上，真正优秀的戏剧作品，要么悲剧精神强烈，要么喜剧精神鲜明。而优秀的正剧也并非悲喜调和、不悲不喜，而是悲喜交融、有喜有悲。而当代不少所谓的“喜剧”作品，则多是不喜不悲、平淡寡味的平庸之作。数年前，哲学家俞吾金曾断言，一个“以喜剧美学为主导性审美原则的时代已经悄然来临”。当今时代，人们需要通过喜剧的笑声来稀释沉重、抵抗孤独、化解焦虑。喜剧是嘲讽愚陋、抨击邪恶、褒美贬丑、祛邪扶正的艺术。喜剧就是vx理性的精神、敏锐的眼光、智慧的头脑、批判的视角审视纷繁复杂的现实人生，让人对自己的存在及其周围的环境保持清醒的认识，能够以“轻松、幽默和爽朗”的乐观态度面对生活的种种考验。一部喜剧艺术史证明，那些贴近现实人生、针砭时弊、鞭挞邪恶、追求真理、充分高扬起喜剧精神的作品，才是老百姓乐于接受的。可是，多年来，已经很难看到这种精·心构思、发人深思的喜剧作品了。有追隶轻松效果、浅薄庸俗的滑稽楚剧，却缺少从心灵深处汲取的智慧；有对历史的随意篡改和戏说，却失去了对是非善恶的判断力和追求正义与真理的勇气。有“巨无霸”式的大制作，却没有灵魂的大震撼。当代的喜剧精神内涵容易被“一种肤浅的现世观念和欲望的快乐原则所取代”。如果将喜剧等同于平庸浅薄的逗乐、搞笑，那将是喜剧的矮化和异化，是喜剧的悲剧。真正的喜剧是理性和智慧的产物。伟大的喜剧作家，不仅才华横溢，而且胆识超群，他正视现实、敢说

自测试题及答案

预防与控制医院感染一、选择题【A型题】 1、下列监测不符合的有（） A、层流洁净手术室空气细菌数≦10cfu/m3 B、重症监护室医护人员手≦5cfu/cm2 C、供应室无菌区物体表面细菌数≦5cfu/cm2 D、一次性注射器和输液器细菌培养阴性，试验阳性 E、传染病病房物体表面≦15cfu/cm2 2、关于洗手指征错误的是（） A、接触病人前后 B、进行无菌技术操作前后 C、戴口罩和穿隔离衣前后 D、接触血液、体液和被污染的物品前后 E、脱手套后 3、下列哪项不属于微生物( ) A、病毒 B、支原体 C、细菌 D、衣原体 E、钩虫 4、下列不符合环境卫生学标准的是（） A、层流洁净手术室物体表面细菌数≦5cfu/cm2 B、普通手术室空气细菌数≦500cfu/m3 C、治疗室医务人员手细菌数≦10cfu/cm2 D、传染病房物体表面细菌数≦15cfu/cm2 E、婴儿室空气细菌数≦200cfu/m3 5、通过空调冷却水传播最常见的细菌（） A、金黄色葡萄球菌 B、沙门菌 C、大肠埃希菌 D、军团菌 E、棒状杆菌 6、下述不属于灭菌剂的是（） A、20%戊二醛 B、过氧乙酸 C、环氧乙烷 D、甲醛 E、含氯消毒剂 7、妊娠妇女不宜用的抗菌药物是（） A、青霉素 B、磷霉素 C、林克霉素 D、四环素 E、头孢菌素 8、不属于高度危险物品的是（） A、腹腔镜 B、导尿管 C、体温表 D、穿刺针 E、手术器械 9、下述各项中错误的是（） A、小儿呼吸道感染不需要隔离 B、医院污物应分类收集、分别处理，以防止污染扩散 C、大面积烧伤或多重耐药菌感染应进行接触隔离 D、洗手是预防医院感染的重要措施 E、传染病区应严格划分清洁区、半污染区、污染区 10、发生医院内尿路感染最常见的诱因是（） A、长期卧床 B、留置导尿管 C、膀胱冲洗 D、膀胱内注药 E、膀胱镜检查 11、下列消毒剂中属高水平消毒剂的是（） A、戊二醛 B、聚维酮（络合碘） C、苯扎溴铵(新洁尔灭) D、乙醇 E、碘酊 12、关于医院感染的概念错误的是（） A、入院时处于潜伏期的感染不是医院感染 B、医院感染是指在医院内获得的感染

自测试题一及参考答案

单片机自测试题一一、判断题（每题1分，共10分） 1.单片机的引脚EA端口接高电平“1”时，CPU从片外程序存储器开始读取指令。（） 2.堆栈指针SP的作用就是指出栈区的位置，修改SP就意味着堆栈区发生了变化。（） 3.特殊功能寄存器PSW用来存放CPU运算结果的一些特征。（） 4.当CPU访问外部存储器时，会自动向P0的每个口锁存器写入“1”，所以对用户而言P0作为地址/数据总线时，是一个真正的双向口。（） 5.Ri作为地址指针仅能访问片内RAM，DPTR作为地址指针主要访问片外RAM。（） 6.当T1进行加“1”计数运行时，T0可以工作于任何工作方式下。（） 7.在MCS-51系列单片机指令系统中仅有对位才能进行状态测试。（） 8.对于MCS-51系列单片机来说，每个中断源的中断请求标志位的置位都是通过内部硬件电路自动完成。（） 9.当外中断源处于下降沿触发时，中断请求的撤除必须强迫进行。（） 10.串行通信中波特率的设置与定时器T0的设置没有关系。（）二、选择题（每题1分，共10分） 1.单片机复位时，CPU自然选中（）组工作寄存器。（A）第0 （B）第1 （C）第2 （D）第3 2.MCS-51单片机中的位地址00H～7FH，指的是（）单元中各位的位地址。（A）片内RAM 00H～1FH （B）片内RAM 20H～2FH （C）片内RAM 80H～FFH （D）片外RAM0020H～002FH 3.8051单片机外接存储器时，（）可以作为普通I/O口使用。

（A）P0、P2口（B）P1、P3口（C）P3口（D）P0、P1、P2、P3口 4.以下指令中，哪条指令将使标志位CY清0？（）（A）MOV A，#00H （B）CLR A （C）ADDC A，#00H （D）DIV AB 5.访问外部数据存储器应采用以下哪条指令？（）（A）MOVX @R0，A （B）MOVC A，@A+DPTR （C）MOV @R0，A （D）MOV @DPTR，A 6.下面程序段被执行后，累加器A中的内容应该是（）。 MOV R0，#0FFH MOV A，R0 CLR C RLC A ORL A，R0 SJMP $ （A）7FH （B）FEH （C）BBH （D）FFH 7.为了准确地读取从P1口输入的外部信号，应选择下面（）段程序。（A）ORL P1，#0FFH （B）ORL P1，#00H MOV A，P1 MOV A，P1 （C）MOV A，#0FFH （D）MOV A，#00H MOV A，P1 MOV A，P1 8.试判断下面哪条指令是错误的？（）（A）CLR ACC （B）CLR A （C）CLR ACC.1 （D）CLR E0H.7 9.若单片机系统只有一个中断源，则CPU响应中断需要（）个机器周期。（A）1 （B）3～8 （C）8 （D）3

2012考研专业课自测试题及答案现代汉语

现代汉语语法练习题一、单项选择题 1、“人、百、个”这三个词都是（）。 A.体词 B.谓词 C.加词 D.代词 2、（）能用数量短语修饰。 A.代词 B.动词 C.形容词 D.名词 3、（）不能用“不”修饰。 A.动词 B.形容词 C.名词 D.副词 4、（）表示动作的量。 A.名量词 B.动量词 C.时量词 D.形量词 5、能带宾语的是（）。 A.名词 B.动词 C.形容词 D.副词 6、“上来”是（）。 A.助动词 B.判断动词 C.趋向动词 D.及物动词 7、“国营、民用、大型”是（）。 A.动词 B.名词 C.副词 D.区别词 8、“不、没”都是（）。 A.程度副词 B.时间副词 C.范围副词 D.否定副词 9、“很、挺、十分”是（） A.程度副词 B.范围副词 C.语气副词 D.情态副词 10、“我、你、他”是（）。 A.指示代词 B.疑问代词 C.人称代词 D.名词 11、“他在黑板上写字”的“在”是（） A.动词 B.副词 C.介词 D.方位词 12、“着、了、过”是（）。 A.结构助词 B.动态助词 C.其他助词 D.语气词 13、“哎哟”是（）。 A.拟声词 B.语气词 C.叹词 D.助词 14、“今天星期日”是（）。 A.主谓短语 B.述宾短语 C.述补短语 D.偏正短语 15、“彻底解决”是（）。 A.主谓短语 B.述宾短语 C.述补短语 D.偏正短语 16、“去打电话”是（）。 A.主谓短语 B.连动短语 C.兼语短语 D.同位短语 17、“明代医药家李时珍”是（）。 A.主谓短语 B.联合短语 C.偏正短语 D.同位短语 18、“你的到来”是（）。 A.体词性短语 B.谓词性短语 C.加词性短语 D.主谓短语.