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HPLC测定食品中维生素B2的研究
作者:李华峰张钢等
来源:《品牌与标准化》2014年第10期
本文研究以HPLC分析食品中维生素B2,用HCI从样品中提取维生素B2,通过C18柱,以甲醇—水为流动相,用荧光检测器测定,方法准确度高,回收率高,最低检出量为0.1ng。
维生素B2在营养学上是一种重要化合物,目前的测定方法有比色、极普、荧光和微生物法。极谱法分析灵敏度低,只能用于药物和维生素B2含量较高的洁净食物;微生物法可靠性和准确性较好,但使用不便,目前常用的以荧光分光光度法居多。本文提出使用高效液相色谱荧光检测器法对食品中维生素B2进行测定。
(1)实验部分
仪器与试剂高效液相色谱仪;荧光检测器;甲醇;盐酸,0.05M、0.1M;0.3M NaOH;维生素B2标准溶液;准确称取在干燥器内干燥24h的维生素B2 0.0250g于小烧杯中,用0.1M HCI溶解,移入1000ml容量瓶中并稀释至刻度,浓度为25.0μg/ml。此溶液放棕色瓶中置于冰箱保存。
(2)样品处理条件的选择
选择将含有等量维生素B2的溶液调成不同PH值。PH9.08则峰高显著下降。pH9.00的溶液放置12天后,峰高由原来的69mm下降至15mm,这可能是由于碱性水解所致。测定时选
用pH1.5-2.0为宜。
温度的影响对饼干成品和半成品(未经烤制的)分别进行多次测定,同时对鲜奶进行了不同温度的实验,结果对测定无影响。
(3)样品处理
强化糕点类:准确称取含Vit-B2-5μg的研碎样品一定量放入10ml具塞锥形瓶中,加入0.5M HCI30ml,加塞振荡10min,静置30min,经4-5号砂芯漏斗抽滤,提取液供液相色谱分析,进样4.0μl。
蔬菜、水果、鲜奶类准确称取含hit-B25--7μg的此类食品于100ml具塞锥形瓶中,加入
30ml 0.1M HCI调节pH至2.0,用0.05M HCI定容至100ml,经4-5号砂芯漏斗抽滤,提取液供液相色谱分析,进样20.0μl。
(4)操作条件选择