组培室设计说明

示意图对照说明

该组培室分3层建设，拟设计楼梯升降梯各1个；二三层应为无菌层，楼梯电梯出入口配备风淋设备。

第一层包含缓冲区和准备区

1.缓冲区：进入试验室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入试验室杂菌。缓冲区最好安装紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。

2.准备区主要进行一些常规的试验操作，如植物组织培养试验中所需的器皿的清洗和保存、培养基的制备、培养基的灭菌、常规的组培苗生理生化分析、试验记录统计等工作，都在准备室完成。准备室中必须有水源，用以对试验仪器的清洗，药品试剂柜保存试验试剂。

第二层包含接种区和培养区

主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。主要仪器设备: 超净工作台、培养架和光照培养箱。

第三层包含培养区和炼苗区

第三层的培养区与第二层目的一致，炼苗区主要用于对无菌幼苗强行锻炼的场所，使其定植后能够迅速适应露地的不良环境条件。

附需要设备参考清单

灭菌洗涤室：水槽，中央实验台，洗涤试剂，高压灭菌锅，电磁炉，超声波清洗器，干燥灭菌器，酸度计，落水架，推车。

缓冲间：鞋架，衣帽挂钩，实验使用的拖鞋，工作服，紫外灯。

无菌操作室（接种室）：超净工作台，紫外灯，空调，解剖镜，消毒器，酒精灯，接种器械（接种镊子，剪刀，解剖刀，接种针），医用推车，实验台，搁架，贮藏70%酒精棉球的广口瓶。

培养室：自动摇时器，空调，紫外灯，光照培养箱，数显恒温水浴振荡器，生化培养箱，摇床，转床，广播，温度计，湿度计，照度计，自动控温空调，风窗，换气窗，培养架，日光灯，排气扇。

温室：供水设施，弥雾装置，荫棚，移植床，钵，盆，塑料布，草炭，蛭石，粗沙。

植物组培实验室配置清单

植物组培实验室建设 目录 1、功能简述 (1) 1)准备室 (1) 2)灭菌室 (1) 3)缓冲间 (2) 4)无菌操作室 (2) 5)培养室 (2) 6)驯化室 (3) 7)温室 (3) 8)辅助实验室（非必要） (3) ①细胞学实验室 (3) ②生理生化分析室 (4) 2、设备及耗材清单 (4) 1)试验设备清单 (4) 2)常备试剂清单 (6) ①MS培养基必备试剂 (7) ②常备激素及辅助试剂 (7)

植物组培实验室建设 1、功能简述 植物组织培养实验室一般应包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，这也是组织培养实验所必须具备的基本条件。要培养成大田苗还要有相应的驯化室、温室。 1)准备室 用途：又叫化学实验室，进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、晾置、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 设备：准备室应具备实验台、药品柜、水池、落水架、仪器、药品、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平（0.1g、0.0001g分度各一台）、干热消毒柜（可省去）、蒸馏水器（可省去）、酸度计(又称pH计，为节约成本和减少维护可用pH试纸代替)、过滤灭菌器、培养皿、培养瓶、三角瓶、试管、电磁炉、水浴锅、漏斗、量筒、刻度移液管（为操作简便起见可购买移液枪1ml、5ml各一个代替）、玻璃棒、酒精灯、镊子、试管架、琼脂、纱布、棉塞、封口膜、大量元素、微量元素、蔗糖、有机物和植物激素的母液（详细内容见附表）、NaOH、盐酸、滤纸、脱脂棉、橡皮筋、牛皮纸等。 图1 准备室图2 灭菌室 2)灭菌室 用途：完成各种器具的保存、培养基的灭菌等。 1

组培室建设

简易组培室 1 基本实验室 1.1 准备室 主要用于配制药品、洗涤烧杯、器具以及灭菌，大小视实际情况，主要放电子天平、PH计、自动灭菌锅、烧杯、组培瓶、冰箱、蒸馏水、电炉或电磁炉等。 设备：准备室应具备实验台、药品柜、水池、仪器、药品、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。 1.2接种室 主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序. 接种室宜小不宜大（空间大易污染），能放下一个超净工作台和一张桌子即可，当然人还要操作。要求在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 设备：紫外灯、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀），桌子，超净工作台。 1.3培养室 主要就是培养架和空调。必须有空调，植物的最适宜温度在24摄氏度左右。培养架一般有5层，最低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架即高1．7m 左右。日光灯一般用40W，固定在培养架搁板的下面，每层有两支日光灯，距离在20cm，光照强度为2000-3000lx。这个一般的组培公司都有卖，看你的需要定量了。 另外如果你们做的量不是很多，买一个人工气候箱就可以了，可控光照，温度的，这个你上网问一下价格。 植物组织培养实验室(组培室)规划设计 一、实验室要求 理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方，最好在常年主风向的上风方向，尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方，便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题：一是所从事的实验的性质，即是生产性的还是研究性的，是基本层次的还是较高层次的；二是实验室的规模，规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何，实验室设置的基本原则是：科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要：实验准备（培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌）、无菌操作和控制培养。此外，还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施，使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织

【组培设备】组培室仪器设备配置

组培室仪器设备配置 在植物组织培养过程中，根据所培养的植物种类、生产规模，选择合适的器材、设施是十分必要的，只有这样才能确保整个操作过程的顺利进行。在器材、设施的选择上，不要贪大求洋，应该在其是否实用上多下功夫。在研究型的组织培养操作中，往往对器材、设施的要求较高；而在生产型的组织培养中，则对器材、设施的要求却较为粗放，因此管理者必须根据实际情况来进行培养器材、设施的遴选。 亚龙组培-中国植物组织培养系统建设第一品牌 在植物组织培养的过程中，从外植体的采收到试管苗的定植都必须要在特定的环境中进行，例如，培养基的配制要在专用的器材、设施中进行；外植体的接种要在专用的器材、设施中进行。应该根据植物组织培养不同阶段的需要，选择不同的器材、设施。只有从降低投入、提高工效、节约劳力等诸方面加以考虑，才能降低培养成本、提高培养效率。 在植物组织培养过程中，所使用的器材种类较多，但它们通常可以分为通用器具、盛具、计量器械、灭菌器械、接种器械、培养器械等几种类型。在使用这些容器、设备时，必须要了解它们的基本用途，并学会它们的基本用法。例如，不能给容量瓶加热；必须用磨砂玻璃灯罩来熄灭正在燃烧的酒精灯；应该定期更换超净工作室的无菌滤膜等等。详细操作可参考具体设备、容器的使用说明。组培设备 （1）通用器械 ①烧杯：用来盛放、溶解化学药剂等。常用的规格有50ml、100ml、250ml、

500ml、1000ml。 ②烘箱：用来烘干器械。 ③恒温水浴：用来溶解琼脂等物质。 ④玻璃搅拌棒：用来配制培养基。 ⑤洗耳球：用来辅助吸取、转移少量液体。 ⑥冰箱：用来贮存化学药剂、植物材料等。 ⑦牛角勺：用来转移化学药剂。 ⑧玻璃漏斗：用来过滤溶液。 ⑨剪刀：用来修剪外植体或剪切嫩茎。 ⑩器械架：在无菌操作期间用来放置灭菌的器械。 （2）各种盛具 ①搪瓷浅盘：用来承载各种器械容器。 ②塑料盆：用于清洗培养容器。 ③铁丝筐：用来盛放灭菌容器等物品。 ④纯水水桶：用来存放去离子水或蒸馏水。常用的规格有10L、20L。 ⑤塑料桶：用来存放洗涤溶液、废弃溶液。 ⑥各种规格的磨砂玻璃瓶：用来盛放培养母液，以及各种植物生长物质。（3）计量器械 ①量筒：用来量取一定体积的液体。常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。 ②容量瓶：用来配制标准溶液。常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml。 ③大肚移液管：用来吸取定量溶液。常用的规格有1ml、5ml、10ml。

组培实验

一、实验室器具洗涤工艺流程：浸、刷、冲、涮、干、存。 洗净判定标准：透明锃亮，内外壁水膜均一，无成股的水流或不挂水珠。 二、无菌室及培养室的日常维护方法：1 启用时清扫擦拭灰尘；2 定期、不定期给予紫外线照射，用来苏尔、福尔马林、双氧水、漂白粉等消毒房间。 三、外植体消毒的一般程序（菊花为例）：选取幼苗——切下合适外植体——流水冲洗10-30min——75%酒精泡30s（倒入废液桶）——0.1%升汞泡10min（倒入升汞回收瓶）——无菌水洗三至五遍。 四、与固体培养基凝固有关因素：1 琼脂浓度过高或用量不足；2 灭菌时间过长或灭菌时未排气；3 灭菌温度过高；4 ph值过酸或过碱；5、操作失误。 五、无菌操作技术要点：1 组培室消毒处理；2 超净工作台开紫外线照射10-20min送风；3 严格消毒外植体；4 已消毒的外植体接触的所有工具、器皿，包括空气均须是无菌的。六、高压灭菌锅的使用方法：1 开盖：向左旋转移动手轮数圈，直至移动到顶，使锅盖充分提起，拉起左力柱上的保险栓，侧向推开横梁； 2 通电：插好插头，将控制面板上的电源开关按至on处；3 加水：加入约8L淹没发热管；4 堆放：各包之间应留有一定的间隙，勿将灭菌包堵住安全阀气孔；5 密闭：使锅盖与锅体充分密合，绿灯亮时，表示容器密闭到位； 6 灭菌：控制面板上的加热灯亮，待指针指向0.05mp时打开排气阀让少量蒸汽排除，待排尽后关闭排气阀，可以达到灭菌温度均衡的目的； 7 排气：灭菌完成，关闭电源开关，拔掉插头，待压力表指示为零后，开启安全阀，放尽气体； 8 起盖。 七、污染率=100%污染数/总接种数成活率=100%成活的/未污染的 八、继代培养的目的：愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，为植株生长提供营养物质。 九、菊花快繁生根培养，选择1/2MS作为培养基的原因：选择1/2MS作为培养基，即降低了无机盐的含量，降低了渗透压，有利于芽系从培养基中吸水，促进根的生长。 十、大蒜脱毒的方法及原理：方法：选择品种和母株——获取茎段——芽段消毒——剥离茎尖接种—分化成苗——保存无毒试管苗——扩展或试管诱导——原种——生长种。原理：由于病毒在植株体内分布不均匀，存在于根尖，茎尖部分病毒含量低，或无病毒，以茎尖作为外植体，能获得脱毒植株，供繁种、生产使用。 十一、配方1/2MS+BA2.0+NAA0.05+蔗糖3%+琼脂0.7%+PH5.4的含义：1/2MS：降低了无机盐的含量，降低了渗透压，有利于芽系从培养基中吸水，促进根的生长；BA2.0+NAA0.05：即BA=2.0mg/L，NAA=0.05mg/L，Ni=BA/NAA=40,根据植物生长激素CTK/AUK生长调控理论，Ni值越大，越有利于跟的生长。配置方法：1、洁净的白色搪瓷杯，取蒸馏水700ml，待冒白气加入7g琼脂搅拌至溶化后，加30克蔗糖溶解；2、移取母液（1/2MS):用移液管分别量取MSI 25ml、MSII 5ml、MSIII 5ml、MSV 5ml、MSIV 5ml，取1mlNAA 加入其中;3、将上述溶液定容至1000ml调节ph至5.8; 4、趁热分装，包扎封口；5、高压灭菌锅灭菌15-20min，降温冷却，备用。 十二、快繁的技术路线：取植物外植体——（j1）-诱导丛生芽——（j2）-丛生芽增值——(j3)生根——再生根 十三、大蒜脱毒的工艺流程：选择品种和母株——获取茎段——芽段消毒——剥离茎尖接种—分化成苗——保存无毒试管苗——扩展或试管诱导——原种——生长种。 十四、大蒜脱毒效果检测方法： 十五、简述配500mlMS+BA0.5+NAA0.2+蔗糖3%+琼脂0.7%+PH5.6的过程：1、洁净的白色搪瓷杯，取蒸馏水300ml,待冒白气加入3.5g琼脂搅拌至溶化后，加15克蔗糖溶解；2、移取母液（1/2MS):用移液管分别量取MSI 25ml、MSII 5ml、MSIII 5ml、MSV 5ml、MSIV 5ml，

植物组织培养实验室(组培室)规划设计

植物组织培养实验室 (组培室规划设计 2009年 05月 31日星期日 10:18一、实验室要求 理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方, 最好在常年主风向的上风方向, 尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方, 便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质, 即是生产性的还是研究性的, 是基本层次的还是较高层次的; 二是实验室的规模, 规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足 3个基本的需要:实验准备 (培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌、无菌操作和控制培养。此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解, 以便因地制宜地利用现有房屋, 或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时, 应按组织培养程序来没计, 避免某些环节倒排, 引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件, 需要一定的设备、器材和用具, 同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 二、实验室组成 (一基本实验室 基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产,年产 4万 -20万, 需 3-4间实验用房,总面积 60平方米。

植物组织培养实验设计及.doc

植物组织培养实验设计及 常用设备的使用与维护 一．实验目的 1.熟悉植物组织培养实验室的组成及设备 2.掌握植物组织培养实验室的设计要求 3.熟悉植物组织培养所需的仪器设备 二．实验原理 植物组织培养是通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。要达到无菌操作和无菌培养，就需要人为创造无菌的环境，使用无菌的器皿及器械，同时还需要人工控制的温度,光照，湿度等培养条件。无菌环境和培养条件的创造需要一定的设施及设备。 三．实验步骤 1.实验室的设计要求 功能齐全、布局合理、环境清洁、易于灭菌 2.实验室的组成及功能 实验室的组成： 洗涤室、药品室、称量室、培养基配制室、灭菌室、接种室、培养室、观察记录室、储藏室、移苗室 实验室的功能： 洗涤室用于玻璃器皿、实验用具的清洗、干燥、培养材料清洗、预处理也可在本室完成。室内应建造大型水槽和一个或几个浸泡

池，水槽最好上一内衬白瓷片的水泥槽，为防止碰坏玻璃器皿，下面可铺一活动的橡胶板。备有晾瓶架，用于放置刷净的培养器皿，配备有一定数量的周转盘或小推车，用于运输培养器皿。地面要注意防滑，排水通畅，墙壁要有耐湿、防潮功能。 药品室用于存放各种药品试剂。室内要求干燥、通风，避免光照，配有药品柜、冰箱等设备。化学试剂物品分类存放于柜中，有毒物质如升汞需要专人密封保存。原药可室温下存放，配好的母液，宜置于4℃冰箱中保存。药品室紧邻称量室较好，便于工作。 称量室进行化学药品的称量。要求干燥、密闭，无直射光照，避免腐蚀性药品和水气直接接触。有固定的水磨石平台，安放普通天平、精密天平和分析天平，要有电源插座，最好设计在阴面的房间，这样对怕光药品的保存和称量有利，称量室紧邻培养基配制室较好，以方便配制母液和培养基。房间较少时，可以与药品室合二为一。 培养基配制室主要进行母液的配制，培养基的配制、分装、包扎和灭菌前的暂时存放。在条件允许下，面积宜大不宜小，室内应有大型实验台。配有电炉、锅子、量具、培养基分装器具、吸管、培养容器、水浴锅和酸度计等。如规模较小，可与洗涤室、灭菌室合并在一起。

植物组培室设计

植物组织培养实验室设计 一、实验室基本组成 （一）基本实验室 1.准备室： 进行一切与实验有关的准备工作，完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 要求：最好有25平方米左右。要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面应便于清洁，并应进行防滑处理。 设备：准备室应具备实验台、药品柜、水池、仪器、药品、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。 2、洗涤灭菌室 完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。 要求：洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制在25平方米。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型玻璃器皿，地面应耐湿并排水良好。 设备：水池、落水架、中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器等。 3、缓冲间 是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋，戴上口罩，才能进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。 要求：缓冲间需5-10平方米，可建在准备室外或无菌操作室外，应保持清洁无菌；备有鞋架和衣帽挂钩，并有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的工作服；墙顶用1-2盏紫外灯定时照射，对衣物进行灭菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。缓冲间的门应该与接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。 设备：1-2盏紫外灯、水槽、实验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩。

组培室管理制度

组培室管理制度 为了严格管理，预防污染，使组培室生产正规化、标准化和制度化，特制作本规定。本章程是试行方案，部分内容将根据执行情况作进一步调整。本章程于公布之日起开始试行。 1、组培室工作人员必须严肃认真、求真务实、努力提高操作水平。 2、服从负责人管理，坚持按时上下班制度，不得随便请假。 3、各无菌室及组培室不准随意领闲杂人员出入，如工作需要、务必做好消毒工作。参观时有专门人员负责陪同，为防止污染，请按指定的路线行走，不可进入工作间。维修和安装人员请在指定的地点工作，不要随意走动，以防污染。 4、工作人员出入必须严格做好消毒工作，各无菌室和组培室及时严格做好消毒。工作人员进入组培室和工作区时必须穿好工作服。 5、各无菌室和组培室等地严禁吸烟，严禁使用通讯设备。上班期间不得接待与工作无关的来人。组培室内不可高声喧哗、更不许吵闹，不准吃零食。不得随意串岗和闲谈。 6、各无菌室和组培室及时严格消毒，镊子、剪刀、手术刀、接种盆、工作服、口罩等器具必须定期高压消毒。 7、准备室必须严格按照技术人员要求进行培养基生产。

培养瓶洗刷要求干净彻底，瓶内、瓶外无残留物。母液配制必须由技术人员统一配制并做好记录。培养基配制，必须严格按照操作规程进行。 8、培养基制备严格按操程序进行，做到安全、及时、有效，药品的称量，必须准确、及时登记。 9、接种室：必须在上班半小时内做好各项准备工作，接种人员必须严格按着技术人员的要求进行操作，标好名称、代号、时间、接种人员信息等，并及时清点计数。瓶苗接种数量要足够，大瓶25--30株，小广口瓶20--25株。接种十天之内污染控制3%以内。 10、培养室：注意保持培养室内无菌环境，要定期及时的进行污染清查，并做好记录，技术人员要做好培养室光照、温度等调控工作并每周对培养室进行消毒一次。 11、炼苗室必须严格按照炼苗操作规程进行操作。 12、保持各室卫生，要坚决杜绝脏、乱、差，要做到物品摆放有序，地面整洁，各台面无灰尘，各室做到无蚊无蝇。打碎的瓶子及培养基必须及时清理。下班后必须将各仪器物品摆放到原位。此外，组培室外环境要清洁干净，拉圾当日清理，以免细菌滋生。 13、一切从效益出发，不浪费材料（包括接种材料），下班时及时切断电源、水源，关锁好门窗，如发现问题要追究当班人员责任。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA ）的比例，决定了根和芽的分化。 三实验器材 （一）试剂 乙醇、IAA 或 2 ，4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ） MS 培养基 （二）仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 （1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。 （2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，

组培室无菌化操作规程

无菌操作 一、接种室的消毒 1、每天开始工作前用75%酒精喷雾自己周围环境。 2、一天的工作结束后，值日、值班人员要对培养基储存间、三个接种室、两个培养室及风淋室进行紫外灯及臭氧灭菌20~30min。 3、风淋室两个门随时关紧，灭菌间和储存间之间的门除了放培养基外不得随意开门。风淋室与接种间之间的门要随时关闭！接种四人间对着的门绝对不允许开！ 二、无菌操作要求 1、在一楼换各自的护士鞋。 1、进实验室首先要穿过风淋室吹风，换工作服，换拖鞋，戴好帽子、把头发全部包进去、不许有头发留在外面，之后进入实验室。 2、自己的工作服、帽子一周清洗一次。口罩要保持干净。 4、必须剪除长指甲，接种时用75%酒精擦洗。 5、接种时禁止谈话并戴上口罩。 6、接种过程尽量减少工作人员在接种室的走动。 三、接种前应做好相应的准备工作 1、超净台紫外灯灭菌20min，值日值班人员提前10min 开台子。 2、打开高温灭菌消毒器，温度达到200℃左右时可以使用。 3、此时将当天或某时间段所需要的原瓶苗、培养基、盘子、一瓶无菌水及放置瓶盖的空框子准备好，待紫外灯关闭5min后进入接种室， 4、将事先准备好的原瓶苗及其他物品放到医用小推车上（有条理的

摆放，便于在操作时使用）。 5、于8：20之前和14:50之前进入操作室超净台前进行接种工作。 四、具体的无菌操作步骤如下： 1、首先要拉下超净台挡风板，隔离人体和无菌苗，减少菌的发生。 2、操作前要用酒精喷壶喷洒超净台并用抹布擦干净。 3、将两把解剖刀和镊子放入灭菌消毒器内进行2~3min灭菌，之后放在灭菌支架上，冷却或不烫手的情况下使用。每做完一瓶无菌分化材料，都应将刀子镊子进行灭菌，否则会引起交叉污染。 3、器具及用品（盘子、培养基、原瓶苗）用酒精喷壶消毒之后，放在超净工作台面上待用（台内只放无菌器具和用品）。盘子在酒精消毒后，小心地打开报纸，反扣在台面上，手不要触碰碟子，否则碟子会积聚菌，导致瓶苗污染。 4、操作前要检查好所取苗子是否为无菌苗，在发生真菌性污染（在培养基表面有粉状、毛状菌）、细菌性污染（在培养基表面有油状、浓状菌斑）时要将瓶苗放在一边，不可以打开瓶盖，以免发生超净台环境污染。 5、用镊子夹无菌碟并小心放到酒精灯右前方（忌用手拿碟子）。 6、将消毒后的镊子（左）和刀子（右）架在无菌碟上 7、打开瓶盖对无菌分化苗瓶口进行火焰灭菌（打开的瓶盖右手扔进空框里），左手托着瓶身，瓶口斜对着酒精灯火焰，瓶身由里向外旋转2~3圈即可。 8、用镊子夹分化苗放入无菌碟中。分化苗多的情况下可以分两次放

植物组织培养实验室(组培室)规划设计 #组培技术#

植物组织培养实验室(组培室)规划设计 #组培技术# 一、实验室要求 理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方，最好在常年主风向的上风方向，尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方，便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题：一是所从事的实验的性质，即是生产性的还是研究性的，是基本层次的还是较高层次的；二是实验室的规模，规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何，实验室设置的基本原则是：科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要：实验准备（培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌）、无菌操作和控制培养。此外，还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施，使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的设备、器材和用具，同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 二、实验室组成 （一）基本实验室 基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产，年产4万-20万，需3-4间实验用房，总面积60平方米。 1、准备室（化学实验室） 功能：又叫化学实验室，进行一切与实验有关的准备工作：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 要求：最好有20平方米左右。要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备，方便多人同时工作；同时要求通风条件好，便于气体交换；实验室地面应便于清洁，并应进行防滑处理。

实验一 组培室组成、主要设备使用方法

实验一实验室组成、主要设备使用方法、常用药剂配制及洗涤、灭菌 一、目的 了解植物组织培养实验室的基本组成，掌握主要设备的使用方法及常用药剂的配制。 二、实验室的组成：参观本院的组织培养室 三、主要设备的使用方法（课堂现场操作） 纯水仪、高压灭菌锅、分析天平、微波炉、酸度计、超净工作台、摇床、生物显微镜、体视显微镜等。 四、几种常用药剂的配制 （一）用95%酒精配制不同浓度酒精 学习配制70%和75%酒精 （二）消毒剂 1、20%次氯酸钠溶液称取20g次氯酸钠用适量的去离子水（或蒸馏水）溶解，然 后用去离子水（或蒸馏水）定容至100ml。 2、0.1%升汞（HgCl2）溶液称取0.1g HgCl2用适量的去离子水（或蒸馏水）溶解， 然后用去离子水（或蒸馏水）定容至100ml。 （三）洗涤剂 1、硫酸—重铬酸钾洗液 称取10g重铬酸钾加入蒸馏水90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸175ml，放入棕色试剂瓶备用（注意：切记不可将盛过酒精、甲醛等还原剂的药品试剂瓶直接放入溶液中，因为重铬酸钾是一种强氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，就会失去洗涤作用）。 这些玻璃器皿必须用自来水冲洗干净并晾干后再浸入洗液。 （四）1摩尔浓度NaOH和1摩尔浓度HCl配制 摩尔浓度是指用1升（1000ml）溶液中所含溶质的分子量数来表示的溶液浓度。用M 表示。 1、NaOH摩尔浓度（M） NaOH摩尔质量=分子克数=40g 1MNaOH是指1000ml溶液里含有40克摩尔质量的NaOH，现要配制100ml，即需NaOH4克。称取NaOH4克，用少量的去离子水（或蒸馏水）溶解，然后定容至100ml。 2、HCl摩尔浓度 具体配制酸的摩尔浓度时，应考虑原浓酸的比重摩尔浓度。 V=要配制的摩尔浓度×需配制体积×原酸分子量/原酸百分浓度×原酸的比重×1000 配制1.0MHCl100ml，即量取38%，比重为1.19的HCl8.06ml加去离子水（或蒸馏水），定容至100ml。 五、洗涤 （一）新购置玻璃器皿的洗涤 因有游离碱性物质，使用前先用1%稀盐酸浸泡一夜，然后用肥皂水浸泡、洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。 （二）已用过玻璃器皿 先将残渣除去，用清水洗净，再用热肥皂水或洗衣粉浸泡、洗净，清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗一次，干后备用。 六、灭菌 （一）器皿和用具常用灭菌方法： 1、热压灭菌法

组培设计实验

综合实验沙棘组织培养实验方案设计及实施 实验目的：1 熟练掌握植物组织培养的基本原理 2 熟练掌握培养基的配制与消毒等操作 3 掌握组织培养外植体的消毒、接种、诱导等操作，能独立的完成植物组织培养 的各项设计及操作 实验原理：利用沙棘种子的培育出无菌的幼苗，在用无菌的幼苗的各个器官作为外植体进行培养。沙棘种子不受接种时间限制，易于诱导;种子有果实包被，与外界环境接 触较少，相对茎段、根等外植体更容易消毒，机上种皮坚硬，消毒时对组织伤 害较小，植株容易成活并可减少褐化。种子萌发出的无菌秒可分别选取上下胚 轴‘腋芽、子叶及胚根为外植体诱导分化，建立快繁体系. 实验材料; 沙棘种子 仪器：天平超净工作台解剖到枪型镊子刀片酒精灯等 药品：MS培养基次氯酸钠酒精无菌水等 实验步骤： 1、预处理 对试验台等操作工具进及沙棘的种子进行消毒处理及培养基的配制与消毒等准备工作 2、无菌幼苗的萌发 将消毒后的沙棘种子接种在灭过菌的培养皿中，使其萌发。（培养皿中有两层无菌滤纸，用无菌水润湿） 3、前期消毒 对萌发的种子幼苗取其下胚轴进行消毒（升汞消毒:步骤与番茄无菌种子萌发的制备相同） 4、启动 将消毒好的外植体接入培养基中（启动分化培养基为1?2M S+ 4 号细胞分裂素1. 0 mg?L+ 3 号生长素0. 2 mg?L + 琼脂代用品8 g?L） 外植体接种于启动培养基后, 非染菌芽20 d 左右可见有芽萌发, 30～45 d 侧芽可长至3～ 5 cm 5、分化 外植体接种于启动培养基后, 非染菌芽20 d 左右可见有芽萌发, 30～45 d 侧芽可长至3～ 5 cm 6、诱导增殖 待诱导出芽后转于诱导增殖培养基,增殖分化培养后1. 5～ 2. 0 cm 长的单芽可用于生根培养, 在单芽转入生根培养基后, 在合适的培养基上7 d 左右可见芽基部长出白色粒状愈伤组织,很快生根。 （芽增殖培养基为M S+ 2 号细胞分裂素0. 5～2. 5 mg/L+ 3 号生长素0. 05～0. 25 mg?L + 0. 5% 活性碳+琼脂代用品8 g/L 。

组培室筹建估算

实验室筹建清单：(以下估价仅供参考)47158+5904+12960 磁力搅拌器一台168元 PH酸度计一台520元 普通榨汁机一台130元 精密电子分析天平一台2000元 普通电子天平一台400元 300g/0.001g 纪铭电子天平 高压灭菌锅150L 一台15000元 超净工作台2—3台2300元苏州净化SW-CJ-1G单人单面估计配3台 高温灭菌器一台520元每个超净工作台配一个 酒精灯、镊子、手术剪、手术刀不锈钢切盘、碗具等一套50元一个超净台配一套培养架一组七层500元根据场地大小定制一般一个标间10~20组臭氧发生器一台500元 定时器一台40元每个标间需要4个左右 电磁炉一台200元 不锈钢汤锅一个200元一般要2个。 温湿度计一个30元一个标间1个+ 普通温度计一支 组培框一个14元根据生产量配制。一般一层使用3个 周转框一个23元根据生产适量配备 兰花瓶一个 2.5元根据生产量定一般一层60个 培养瓶一个1元根据生产量定 推车一个400元一般一间配一个 纯水器一套用自来水需要配置 高压水枪套装一套100元 立式空调一台3500元一般估计要2台 壁挂式空调一台1500元一般估计要3台 备用发电机一台2000元 实验器材及耗材设施 烧杯、量筒、容量瓶、玻璃棒、移液管、蓝盖瓶、滴管、称量纸、塑料冲洗瓶、标签纸、脱脂棉、塑料量杯、消毒试剂、校验试剂、。乳胶手套、一次性手套、袖套、工作服、鞋套等数量若干。一次性采购估计1500元 耗材：大量元素100元/斤、微量元素220元/斤、有机物450元/斤、铁盐50元/斤、植物生长调节剂500元花宝一号、二号。一次性采购估计2000元 购置母苗费用 稍微按2个28平方米的标间来预估，以上投资大约在10万左右 后面运作资金： 场地租金 水电费 人工工资 流动资金

组培培养室的功能及器材配置

组培圈（ID：zupeiquan）往期内容介绍了组培实验室的布局和总体设计要求，及其他各个分 室的功能和器材配置，有兴趣的朋友可以在后台回复“1”查看目录。 今天介绍的是组培实验的核心分室之一——培养室。 培养室 培养室顾名思义就是培养材料的地方，所以它的设计要求都是围绕着植物生长的环境因子来 开展的。 1. 主要功能 在培养室主要进行离体植物材料的培养。 2. 设计要求 培养室的设计主要考虑以下几个方面： 2.1 培养室大小 根据生产规模和培养架规格、数目及其他附属设备而定。培养室不宜过大，面积10-20平方 米即可，以便于对条件的均匀控制。 2.2 表面易于灭菌 要求天花板和墙壁光滑平整、绝热防火，最好用塑钢板或瓷砖装修；地面用水磨石或瓷砖铺设，平坦无缝，方便室内灭菌，并能提供室内的亮度。 2.3 控制温度 培养室最重要的因子是温度，一般保持在20-27℃左右。因不同种类植物所要求温度不同， 最好将不同种类的植物分室培养，便于用空调器调控培养室内的温度。 培养室面积较小时，采用窗式或柜式的冷暖型空调；培养室面积较大时，最好采用中央空调，以保证培养室内各部位温度相对均衡。 2.4 控制湿度 培养室湿度要求恒定，相对湿度以保持在70-80%为宜。门窗密封性要好，有条件的可用玻璃砖代替窗户，兵安装排气扇，以备在湿度高、空调有故障时可以打开排气扇通风排气。 南方湿度高的地方可以考虑在培养室安装除湿器；北方干燥，可安装加湿器以便调节湿度。

2.5 控制光照 培养架上装置日光灯时，可安装定时开关钟控制照明时间，植物组培培养的光照强度一般在1000-4000lx，每天照明10-16小时，也有需要连续照明的。 现代组培实验室设计大多以充分利用空间和节省能源为原则，所以逐渐用LED植物灯替换日光灯，LED灯具有节能，发热率低，寿命长等优点。 还有采用天然太阳光照作为能源，这样不但可以节省能源，而且组培苗接受太阳光生长得粗壮，驯化也易成活。在阴雨天可用灯光作为补充。培养室最好设在向阳面，在建筑朝阳面设计双层玻璃墙或加大窗户，以利于接收更多的自然光线，高度比培养架略高为宜。 2.6 培养架设计 培养架要求使用方便、节能、充分利用空间和安全可靠。培养架大多由金属制成，一般设6层，高2米，最下一层距地面0.2米，层间距为0.3米，架宽0.6米；培养架长度一般为1.3米为宜（根据培养架上日光灯长度而定）；每层2盏日光灯为宜，多个组培架可以用1个时控器，具体看规模情况，以灵活控制为原则。 2.7 供电保证与安全 培养室内用电量大，赢设置供电专线和配电设备，并且配电板置于培养室外，保证用电安全和控制方便。 3 仪器与用具配置 空调、排气扇、培养架、组培灯、光照时控器、加湿器/除湿器、干湿温度器、温度自动记录仪等。

《植物组织培养技术》 组培室设计与管理

《植物组织培养技术》组培室设计与管理 模块介绍 本模块介绍了组培室的基本组成与功能定位、组培仪器设备（包括构造、原理、使用和保养）与器械用品、组培室日常管理知识，重点阐述了组培室设计的原则、总体要求和各分室设计的具体要求，以及玻璃器皿的洗涤方法，并通过任务训练完成常用组培设备的使用、玻璃器皿的洗涤和组培室设计，参与日常管理组培室等项目活动，旨在培养学生组培室的规划设计与管理能力。模块结构设计见表1。 表1 模块结构设计 项目1 组培室设计 一、学习目标 （一）终极目标 会设计简易组培室。 （二）促成目标 1．了解组培室的基本组成与功能定位； 2．清楚组培设备、器械用品及各自用途； 3．掌握组培室的设计原则与总体要求；

4．进一步熟悉组培苗生产流程； 5．具备无菌意识，具有协作精神和创新意识。二、学习内容 1．组培常用设备的使用； 2．玻璃器皿的洗涤； 三、知识点 1．组培室的基本组成及各自功能； 2．组培设备、器械用品及各自用途； 3．组织培养的工作程序； 4．组培室的设计原则与要求； 5. 设计图一般格式要求。 四、技能点 1.设计组培室。 五、教学重点 1.组培室的设计原则与要求； 2.组培室的组成与各自功能； 3.组培常用设备与器械用品。 六、教学难点 1.接种室与培养室的设计； 2.组培室平面设计图的格式要求； 3.组培室与常规实验室设计的区别； 4. 组培室设计的依据。 七、教学设计 项目1 组培室设计

八、拓展学习 1.复习内容 传统实验室平面布局。 2、拓展学习：组培育苗工厂设计；家庭组培室设计 九、作业 1.绘制1份组培室平面设计图。 十、学习建议 1.结合课上所学及参观所得，先弄清组培室的基本组成及各分室功能，其次是试着再现所参观的组培企业或科研单位组培室平面规划草图，最后再过渡到组培室设计。 2.设计组培室之前，要认真学习组培工作程序与苗木生产操作流程，深刻理解组培室设计原则与要求。 3.比较学习思考组培室与常规实验室的差异点。 十一、教学评价

组织培养实验室设计及要求

低山丘陵区生态修复重点实验室组培室设计（图书馆） 一. 组培室面积：约179平方米 二. 组培室布局及装修要求： 1、组培室布局：共设9个房间，其中包括1个隔离区，1个接种 室，7个培养室，具体布局详见附图。 2、装修要求：要求大房间四壁要加隔温层，保证实验室温度可以 严格控制，不同实验室间要完全密闭隔离。 3、不同房间规格： 缓冲区：10.2m×2.0m 接种室：4.5m×3.7m 培养室：①②⑤⑥⑦为4.5m×3.7m，③④为4.5m×4.0m 4、具体装修要求及标准以设计图纸为准。 三. 组培室主要设备配置： 1、缓冲区： 1）空调机1台 2）专用水池1个 3）药品架1个 4）专用紫外杀菌灯2个 2、接种室： 1）专用冰箱1个 2）双人超净工作台1台 3）专用紫外杀菌灯2个 3、培养室 专用培养架42个 4、通道：

1）专用空调机3个 2）臭氧发生机3个（安装位置与空调机相同） 四. 不同设备具体规格及要求： 1、培养架的规格及设计标准 1）型号为T5，外形尺寸：长1250mm×宽500mm×高1700mm 2）五层式结构，每层间距可调 3）架体采用优质喷涂钢板 4）每层配专用日光灯6个，设置光照独立开关，可根据培养需要任意调节开灯数量 5）在每层培养苗位置安装自动控温开关 6）内置式布线，使整个培养架更加整洁、美观 7）加装漏电保护开关，增强使用安全性 2、专用水池： 要求具有耐酸碱的水池和排水口，每天都有大量的植物材料碎片、琼脂等东西堆积，因此排水口一定要安装过滤网。 3、药品架： 规格为：长1250mm×高1700mm 4、空调配置： 型号：格力T系列专用空调 5、臭氧发生机： 型号：WG-K3G 6、专用杀菌紫外灯 规格：uvG13

组培室实训教学方案(精选.)

曲靖农校农林技术学部组培中心实训教学方案 组培中心在各位学校领导的关心和指导下，在学校基建修缮科等 有关职能部门的大力支持下；经过农林技术学部及曲靖开发区昌茂农业科技有限公司的有效合作、努力工作，现在，组培中心设备及各项配套设施除部分设备外已经安装到位；2012年3月21日至今，中心已经开始试生产，在老师的教导和带领下，30余位同学参与到了生产中，教学、训练、生产有机结合，效果较好：学生学到了技能，企业生产也实现了稳步推进。为了实现学校利用组培中心所具有的设备、技术和植物品种资源等条件，充分为教学服务、让学生学到一技之长之目的，特制订本实训教学方案。 一、实训教学方式：《植物组织培养技术》课程的理论教学在教室进行，实训教学在组培中心进行，实训教学集讲授、现场示范、学生操作及生产技术各个环节的教学有机统一进行；实训教学以批次轮训的形式进行，每批10个同学，每班每次原则上不超过5名同学（以免影响其他课程的教学）。 二、实训教学时间：14天（2周）。 三、实训教学教师：唐合昌。 四、实训教学的内容。 1、培养器皿的洗涤。掌握洗瓶机的操作程序和注意事项，在操作过程中必须轻拿轻放，认真洗涤瓶子、盖子及接种盘，做到瓶、盖、盘内外无残渣无污物，洗涤好后倒扣在培养框里。 2、培养基制作。熟练掌握培养基制作的程序和步骤，在制作过 程中要做好所放药品的数量和顺序并做记录。防止药品漏加少加。 3、培养基分装。让学生掌握不同培养阶段，培养基所需要的量。在分装过程中做到准、快、正（培养基量要准、速度要快、位置要正）不能将培养基倒到瓶外壁。 4、培养基灭菌。熟悉高压锅灭菌的原理及高压锅的使用方法。在使用过程中严格按照操作规范操作，把安全放到第一位。要求学生在开门前必须确定内室压力已经回到“零”。 5、组培苗的转接（接种）。此阶段需要10天时间。首先必须让学生了解无菌操作的技术要领，培养学生规范的接种操作习惯。在操作过程中不断纠正不规范、不正确的动作。到操作基本熟练后对种苗的不同切割方法、部位进行分组对比试验，让学生能领悟到不同切割方法对种苗生长的影响。 6、组培苗的培养。让学生掌握组培苗在整个生长过程中对温度、光照的需求。 7、生根苗炼苗。是生根苗对室外自然光照，温度的一个适应和过渡。让学生懂得该阶段的必要性。 8、学习效果自查。实训教学结束30天后让学生利用课余时间再次回到组培室对在学习期间所做的苗进行观察，找出自己在操作过程中的不足之处和成功之处。 五、参加实训教学学生的基本要求。到组培中心进行实训学习的学生必须事先写出申请，班主任及组培中心老师同意，学部批准后方能参加实训学习，实训学习期间其他课程的学习学生必须通过自学的方式解决，不能因为参加实训学习而拉下其他课程的学习。学习结束后每个学生必须写一个组培中心实训学习的专题学习报告。 六、学生实训学习成绩评定。实训结束，教师要给参与实训学习的学生打出

组培实验报告

篇一：植物组织培养实验报告 植物组织培养实验报告 一、实验目的 1．掌握无菌操作的植物组织培养方法； 2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。 二、实验原理（一）植物组织培养 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。（二）植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。（三）组织的分化与器官建成 外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。 （四）培养基的组成 培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。 三、实验器材 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、实验材料 豌豆种子 五、实验药品 药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。 六、实验步骤 （一）培养基母液的配制 表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l） 表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数 名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素 扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml) 500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l 20 20 20 20 20 10 10 5 （注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积） 表3.配制母液所需的药品及称取量 （注：根据表1与表2计算各物质的称取量） 药品名称 nh4no3 kno3 kh2po4