红细胞洗涤液(pH7.2)

北京雷根生物技术有限公司 https://www.wendangku.net/doc/7b10726861.html,

红细胞洗涤液(pH7.2)

简介：

在生物科研领域，经常需要去除红细胞。去除红细胞的方法有ACK Lysis Buffer 、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer 等，在裂解红细胞之前，可以采用PBS 清洗红细胞，亦可用专门的红细胞洗涤液，以便充分清洗细胞。本试剂为无菌溶液，主要由磷酸盐、氯化钠、氯化钾等组成。

组成：

操作步骤(仅供参考)：

1、取新鲜抗凝血，离心，去除血浆。

2、 加入红细胞洗涤液(pH7.2)，清洗2～3次。

注意事项：

1、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。

2、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。

3、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期： 12个月有效。

相关：

编号 名称 CS0004 Storage 红细胞洗涤液(pH7.2) 100ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称

CC0130 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%)

CS0006 Tris-氯化铵红细胞裂解液

DA0020 Hoechst33342/PI 细胞凋亡染色试剂盒

DG0005 糖原PAS 染色液

NR0003 Lezol(总RNA 提取试剂)

TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)

裂解液配制方法

1、红细胞裂解液（去除红细胞） 配制试剂所需材料： 1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solution a) NH4Cl (1.5 M) 80 g b) KHCO3 (100 nM) 10 g c) Na4EDTA (10 nM) 3.7 g d) Distilled H2O 1000 mL 2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用） 配制步骤： 1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中； 2.调节溶液pH值到7.2-7.4，加去离子水定容到1000ml； 3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。 保存： 1.10x 储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）； 2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。 2、ripa裂解液 NP-40 or Triton-100 1% TrisHCl (pH 8.0) 50mmol/L NaCl 150mmol/L PMSF（苯甲基磺酰氟）0.1mmol/L(100μg/ml) Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/L(0.7μg/ml) Leupeptin（亮抑制肽）0.5mg/ml Aprotinin（抑蛋白酶肽）0.3μmol/L(1μg/ml) （注：PMSF 贮存液：100mmol/L即17.4mg/ml于异丙醇中； Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于0.01mol/LHEPES(pH8.0)； Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中； Pepstatin 贮存液10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存） 3、细胞裂解液（Tris－HCL） 1．1M Tris 溶液的配置 取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。 2．1M Tris－HCL Ph=8.0溶液的配置 取1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0（需浓盐酸约8.5ml），加ddH2O 定容至200ml，高压灭菌备用。 3. 0.5M EDTA溶液的配置 称EDTA－Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml NaOH（10M）使EDTA －Na2溶解，再用NaOH（10M）溶液调至Ph=8.0，加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。 4. 细胞裂解液的配制 称15gCTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）（先用约600ml ddH2O加热溶解）放入烧杯中，加入75ml 1M Tris－HCL（Ph=8.0），58.5g NaCL（先用少量ddH2O溶解），30ml 0.5M EDTA，定容至1000ml，混合均匀备用。

中医八项护理操作及注意事项

【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评和关注，我将一如既往为您服务】 八项中医护理技术操作目的、注意事项 一、耳针法（耳穴埋豆） （一）、目标 遵照医嘱选择穴位，解除或缓解各种急、慢性疾病的临床症状。通过其疏通经络，调整脏腑气血功能，促进机体的阴阳平衡，以达到防病治病的目的。（二）、禁忌证 耳部炎症、冻伤的部位，以及习惯性流产史的孕妇禁用 （三）护理及注意事项 1 在针刺中及留针期间，患者感到局部热、麻、胀、痛或感觉循经络放射传导为“得气”，应密切观察有无晕针等不适情况。 2 执行无菌操作，预防感染。起针后如针孔发红，应及时处理。 3 使用耳针法治疗扭伤及肢体活动障碍者，埋针后待耳廓充血具有发热感觉时，嘱患者适当活动患部，并配合患部按摩、艾条灸等，以提高疗效。 二、艾条灸法 （一）、目标 1 遵医嘱选择穴位，解除或缓解各种虚寒性病证的临床症状。 2 通过运用温通经络、调和气、消肿散结、祛湿散寒、回阳救逆等法，达到防病保健、治病强身的目的。

（二）、禁忌证． 1 凡属实热证或阴虚发热者，不宜施灸。 2 颜面部、大血管处、孕妇腹部及腰骶部不宜施灸。 （三）护理及注意事项 1 采用艾柱灸时，针柄上的艾绒团必须捻紧，防止艾灰脱落灼伤皮肤或烧毁衣物。 2 施灸后局部皮肤出现微红灼热，属于正常现象。如灸后出现小水疱时，无需处理，可自行吸收。如水疱较大时，可用无菌注射器抽去疱内液体，覆盖消毒纱布，保持干燥，防止感染。 三、拔火罐法 （一）、目标 1 缓解风寒湿痹而致的腰背酸痛、虚寒性咳喘等症状。 2 用于疮疡及毒蛇咬伤的急救排毒等。 （二）、禁忌证 1 高热抽搐及凝血机制障碍者。 2 皮肤溃疡、水肿及大血管处。 3 孕妇腹部、腰骶部均不宜拔罐。 （三）、护理及注意事项 1 拔罐时应采取合理体位，选择肌肉较厚的部位。骨骼凹凸不平和毛发较多处不宜拔罐。 2 操作前一定要检查罐口周围是否光滑，有无裂痕。

卟啉病常见的症状有哪些,卟啉病的早期症状介绍

https://www.wendangku.net/doc/7b10726861.html,/ 卟啉病常见的症状有哪些，卟啉病的早期症状介绍 卟啉病的常见症状 卟啉病有什么症状 一、症状体征： 1.皮肤征状群： 多在婴儿期也可在成人出现(迟发性皮肤血卟啉病)。为光照后，在皮肤暴露部出现红斑、疱疹、甚至溃烂。结痂后遗留瘢痕，引起畸形和色素沉着。皮疹可为湿疹、荨麻疹、夏令痒疹或多形性红斑等类型。口腔粘膜可有红色斑点，牙呈棕红色。同时可并发眼损害如结膜炎、角膜炎及虹膜炎等。部分病人皮肤过敏炎症后期萎缩、黑色素沉着及类似硬皮病或皮肌炎的现象。严重者可有鼻、耳、手指皮肤结瘢变形。可有特殊紫色面容。红细胞生成性血卟啉病和迟发性皮肤型，可有多毛症。肝性血卟啉病除皮肤症状外，可同时或在病程演进中伴有腹部或神经精神症状，即为混合型。 按起病缓急和病程进展，可分为缓进型和急进型，以缓进型多见。 2.腹部征状群： 特征为急性腹痛，伴恶心、呕吐。 3.神经精神征状群： 表现为下肢疼痛、感觉异常;亦可为脊髓神经病变、出现截瘫或四肢瘫痪;也可表现为大脑病变，产生神经、精神、植物神经症状，如腹痛、高血压等。 二、检查： 可行血常规检查。 三、诊断： 根据检查和相关体征能明确诊断。 四、分类： 卟啉病可根据特异酶缺乏来准确分类。其他根据临床特征来分类，有临床实用性但互相有重叠交叉。急性卟啉病引起神经症状，往往是间歇性的;皮肤卟啉病引起皮肤光敏感。急性间歇性卟啉病，ALA脱水酶缺乏卟啉病，遗传性粪卟啉病和肝卟啉病组成急性卟啉病。迟发性皮肤卟啉病，遗传性粪卟啉病，肝卟啉病，红细胞生成性原卟啉病，先天性红细胞生成性卟啉病和肝红细胞生成性卟啉病组成皮肤卟啉病。肝性卟啉病，过多的血红素前体主要来自肝脏；红细胞生成性卟啉病，过多的血红素前体主要来自骨髓。 文章来自：39疾病百科 https://www.wendangku.net/doc/7b10726861.html,/blb/zztz/

红细胞裂解液使用说明

红细胞裂解液使用说明 货号：R1010 规格：100ml/500ml 保存：2-8℃保存，保质期2年。常温运输。 产品简介： 红细胞裂解液是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。 红细胞裂解液经无菌处理，主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。 使用说明： 1.1倍体积的新鲜全血，加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液，轻轻涡旋或颠倒混匀。 2.冰上放置15分钟，其间轻轻涡旋混匀两次，红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。 3.收集细胞：4℃，450×g离心10分钟以沉淀白细胞，小心吸弃上清液。 4.向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml，则加入2ml的红细胞裂解液。 5.4℃，450×g离心10分钟沉淀白细胞，小心并彻底吸去上清液。 6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，最好于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。 （组织细胞处理：新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液，其余同上。） 注意事项：

本裂解液为无菌产品，分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品： D8210DEPC P10201×PBS，PH7.2-7.4，0.01M H1020Hanks，含钙镁，含酚红 31800RPMI Medium1640 T1300胰蛋白酶－EDTA消化液(0.25%)不含酚红 P1400青链霉素混合液(100×) D1800全血基因组DNA提取试剂盒 G1010姬姆萨染色液（工作液）

通用细胞裂解液

通用细胞裂解液 产品简介： 多种成分均可以从细胞中提取总蛋白，例如去Triton、SDS、NP-40等。通用细胞裂解液(Common Lysis Buffer )，是采用一种非变性裂解方法来裂解细胞，并获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于PAGE电泳，Western，免疫沉淀(Immunol Precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)等，主要由Tris、Triton X-100等组成，并含有多种蛋白酶抑制剂成分，可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。 用Common Lysis Buffer得到的蛋白，可以用leagene BCA蛋白浓度测定试剂盒(PT0001)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不宜用Bradford 法测定由通用细胞裂解液获得样本的蛋白浓度。 主要成分：主要由Tris-HCl、NaCl、低浓度Triton X-100，低浓度sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA等多种蛋白酶抑制剂组成。 自备材料： 1、高速离心机 2、微量移液器 3、PMSF，亦可采购Leagene的苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)(PI0011) 操作步骤（仅供参考）： (一)贴壁培养细胞 1、取Leagene Common Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，使用前取适当量的裂解液 加入PMSF，使其最终浓度为1mM。 2、去除贴壁细胞的培养液，用PBS、NS或无血清培养液清洗1次，低速离心，弃上清， 留取沉淀。 3、按照6孔板每1孔加入100～200μl含有PMSF的裂解液的比例，加入Common Lysis Buffer。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。冰上或4℃裂解30～60min。 4、10000～12000g，4℃离心10～15min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。

皮肤性病学第八章

1．疥疮好发于什么部位？ A. 头皮 B. 颈部 C. 背部 D. 皮肤薄嫩部位 E. 四肢伸侧 2．疥疮的临床特点，下列哪项错误？ A. 剧痒，夜间为甚 B. 典型皮损为密集水疱 C. 阴囊处可有结节 D. 通过直接或间接接触传染 E. 指缝间常见米粒大小丘疹、丘疱疹 3．疥疮的防治，下列哪项正确？ A. 治疗过程中应勤洗澡 B. 疥疮结节不能外用糖皮质激 素 C. 污染物品应煮沸消毒 D. 婴幼儿可外用10％硫磺软膏 E. 治疗以口服止痒药为主 7．疥疮的好发季节为 A. 春季 B. 夏季 C. 秋季 D. 冬季 E. 以上都不对 1．下列因素可直接刺激肥大细胞释放介质 A.药物 B.毒素 C. 食物 D.寒冷或热 E.以上均可 2．接触性荨麻疹属于 A.Ⅰ型变态反应 B.Ⅳ型变态反应 C.非免疫性 D.细胞毒反应 E.以上均不对 3．抢救荨麻疹致过敏性休克下列哪项不正确 A.0.1/100肾上腺素皮下注射 B.皮质类固醇激素静滴 C.吸氧、必要时气管切开 D.首先使用抗组胺药物 E.氨茶碱 4．胆碱能性荨麻疹的特点是

A.多由运动、受热、情绪紧张后发作 B.风团较小、数目多、消退快 C.可有全身症状 D.可用654-2治疗 E.以上均对 5．下列哪些疾病可伴发荨麻疹 A.甲状腺机能亢进 B.系统性红斑狼疮 C.淋巴瘤 D.糖尿病 E.以上均是 6．与遗传有关的荨麻疹有 A.遗传性家族性荨麻疹综合征 B.家族性冷荨麻疹 C.延迟性家族性局限性热荨麻疹 D.红细胞生成性原卟啉病 E. 以上均是 7．下列哪些疾病可导致冷荨麻疹 A.梅毒 B.冷球蛋白血症 C.巨球蛋白血症 D.冷纤维蛋白原血症 E.以上均是 8．荨麻疹性血管炎哪项错误 A.风团持续时间长 B.风团消退不留痕迹 C.伴关节痛、腹痛等症状 D.对抗组胺药无效 E.为Ⅲ型变态反应 9．荨麻疹的治疗哪项错误 A.抗组胺药物 B.维生素C、K、E、B 12 C.慢性荨麻疹一般不用皮质类固醇激素 D.组胺球蛋白对冷荨麻疹以及机械性荨麻疹疗效佳 E.尽可能不联用H 1及H 2 受体拮抗剂 10．血管性水肿特点包括下述各点，除了 A.凹陷性水肿 B.局限性水肿 C.好发于眼睑、包皮等

红细胞生成过程关键步骤确定

红细胞生成过程关键步骤确定 一个健康的成年人每天必须生成1千亿个新红血细胞，才能维持其血液循环中的红细胞数量。来自洛桑联邦理工学院（EPFL）的一个研究人员小组确定了红细胞生成过程中一个关键的步骤。这一研究发现可能不仅有助于阐明如贫血等血液疾病的病因，还使得医生们的梦想离现实更近了一步：在实验室能够制造出红血细胞，由此提供一个潜在的取之不竭的血液主要成分资源，用于输血。 红细胞，其本质就是一袋将氧气输送到全身的血红蛋白。其生命起始于骨髓中的造血干细胞，经历一个高度受控的增殖和分化过程后，获得其最终的身份。 在这一分化过程中的一个关键步骤就是线粒体自噬（mitophagy）。随着线粒体耗尽，细胞血红蛋白负载能力达到最大。然而直到现在，都还没有清楚了解控制线粒体自噬的机制。 在发表在本周《科学》（Science）杂志上的一篇论文中，洛桑联邦理工学院的Isabelle Barde及其同事通过试验证实，KRAB型锌指蛋白与KAP1辅因子协同作用，以精细且复杂的方式调节了线粒体自噬。 论文的资深作者、病毒学家Didier Trono多年来一直对KRAB/KAP1系统感兴趣。众所周知，其在“沉默”哺乳动物基因组反转录因子元件中发挥作用，已有3.5亿年历史。它们最初是可以整合到感染生物体遗传密码中的逆转录病毒。“它做着如此好的一份工作，以致在进化过程中它被指派完成了很多其他的事情，”Trono说。 KRAB/KAP1系统承担的职责之一就是调控线粒体自噬。研究人员发现，遗传改造缺失KAP1的小鼠迅速变得贫血，因为它们无法生成红血细胞。更特别的是，他们发现，干细胞分化过程在成红血细胞（erythroblast，红细胞前体）中线粒体降解的阶段停止。且在人类血细胞中敲除KAP1也会产生相似效应，表明其调控线粒体自噬的作用在从小鼠到人类的整个进化中是保守的。 研究人员进一步证明，KRAB/KAP1系统是通过抑制线粒体自噬阻遏物来发挥功能。换句话说，就像负负得正，它激活了这一靶过程。这表明，这一调控系统中的各种元件突变有可能导致了如贫血和某些类型白血病等血液疾病，从而反过来指出了这些疾病的未来治疗靶点。它还指出了有可能在实验室中模拟红血细胞合成的途径。 但这些研究发现还具有更广泛的意义。虽然线粒体对于许多细胞正常功能至关重要，但如果它们生成破坏性自由基（某些情况下细胞呼吸作用的副产物）对于细胞也会是致命的。这些自由基引起的氧化性应激与肝脏疾病、心脏病和肥胖有关联。因此，了解线粒体自噬受控机制，有可能促成更好地了解以及治疗这些疾病。 Trono认为这一多层次组合调控法则或许适应于广泛的生理系统。“它为自然完成生理活动赋予了极高水平的模块性。”他将之比喻为管风琴的运行方式。 每个风琴师都有一个键盘，以及受他掌控的脚踏板。他通过各种组合应用它们来调整乐器产生的声音。相似的，微调一个或几个控制元件可以在许多生物过程中产生显著的影响。尽管其中任何一个元件发生突变都可能导致故障，但由于每个的贡献很小，损害往往是有限的。反过来，这赋予了系统稳固性。Trono相信，这种稳固性是数亿年来进化一直在选择和改进的。（来源：生物通何嫱） 更多阅读 《科学》发表论文摘要（英文） A KRAB/KAP1-miRNA Cascade Regulates Erythropoiesis Through Stage-Specific Control of Mitophagy 1.Isabelle Barde1,

2020年安徽省《皮肤性病学》考前练习(第330套)

2020年安徽省《皮肤性病学》考前练习考试须知： 1、考试时间：180分钟。 2、请首先按要求在试卷的指定位置填写您的姓名、准考证号和所在单位的名称。 3、请仔细阅读各种题目的回答要求，在规定的位置填写您的答案。 4、不要在试卷上乱写乱画，不要在标封区填写无关的内容。 5、答案与解析在最后。 姓名:___________ 考号:___________ 一、A1(共30题) 1.相对而言,( )突变导致的残毁性掌跖角化病的表型常伴耳聋。 A.兜甲蛋白 B.连接蛋白26 C.角蛋白1 D.角蛋白9 E.角蛋白14 2.基底膜在电镜下的结构区域不包括( )。 A.胞膜层 B.透明层 C.致密层 D.角质层 E.致密下层 3.鱼鳞病的治疗措施中不正确的是( )。

A.做产前诊断 B.外用维A酸可改善角化程度 C.局部用药以温和、保湿、轻度剥脱为原则 D.口服维A酸可根治此病 E.有感染者外用抗菌药物 4.毛囊角化病的皮损好发于( )。 A.皱褶部位 B.暴露部位 C.皮脂溢出部位 D.四肢伸侧 E.躯干部 5.皮内试验观察结果的时间为( )。 A.2小时 B.1~2小时 C.20~40分钟 D.15~20分钟 E.8小时 6.水疱的直径通常应小于( )。 A.5Cm B.4Cm C.3Cm D.2Cm E.lCm 7.关于多基因遗传病的特点描述正确的是( ) A.由遗传因素和环境因素共同决定发病

B.发病常具有一定的家族聚集倾向 C.在家系中的传递方式不遵循孟德尔分离规律 D.涉及两对或两对以上等位基因 E.以上都正确 8.下列关于角化棘皮瘤描述,不正确的是( )。 A.多发型最常见,可发生于全身各处,常发生于青年,男性较多见 B.临床上可分为三型:单发型,多发型,发疹型 C.单发型主要发生于暴露部位,较大损害可转移 D.是一种可以自愈的皮肤肿瘤 E.该病可能与某些皮肤病如着色性干皮病、银屑病、药疹等并发 9.艾滋病的各种感染主要位于( )。 A.心脏 B.血液系统 C.肾脏 D.皮肤 E.肺、胃肠与神经系统 10.下列有关带状疱疹的病因及发病描述,不正确的是( )。 A.病原体为水痘-带状疱疹病毒 B.病毒经呼吸道黏膜侵入体内 C.病毒侵入体内后潜伏于脊神经后根 D.病毒经破损的皮肤黏膜侵入体内 E.机体免疫力下降时,潜伏的病毒再次活动,产生神经痛 11.天疱疮治疗的首选药物为( )。 A.丙种球蛋白 B.环磷酰胺

红细胞裂解液的配制

红细胞裂解液的配制 我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是：1.在37度预热；2.充分混匀细胞我就是这样做的，效果还可以。不过我只做流式细胞仪的检测，活性没测。我的裂解液是0.16M NH4Cl，0.13mM EDTA，12mM NaHCO3 我用的方法： 全血：裂解液=1：3，如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液，充分混匀后，室温静置5mim，1000rpm离心6~10min。红细胞裂解得非常充分。 0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma) Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 M Potassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mM EDTA 0.37 g 1mM H2O 1l. Filter with 0.45μm filter aliquot in 100 ml aliquots filter the solution to be used with 0.2μm filter. 我们用的是Tris-NH4Cl, 具体配方如下: NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml; Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌, 用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好. 9月29日我用的配方

氯化铵3.735g，tris 1.3g，加在500ml水中，ph约7.2。 将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟，发现5分钟组细胞要多些，15分钟组细胞要少些，而且红细胞仍然有。

少见卟啉病

少见卟啉病 δ-氨基乙酰丙酸脱水酶缺乏（ALA脱水酶缺乏卟啉症） 常染色体隐性遗传性疾病，是最为罕见的卟啉症形式，由ALA脱水酶缺乏引起。 ALA脱水酶的一些不同的突变基因已在不同家系的病人中发现。该症首例报道在德国，但可能遍及全世界。它可引起神经系统的症状和有时贫血。 该病的症状和体征和急性卟啉症相似，但是它包括溶血和贫血。症状可始发于婴儿或儿童。尿中ALA，粪卟啉Ⅲ和红细胞锌卟啉显著增加。在组织中过多的ALA代谢为粪卟啉Ⅲ。粪卟啉排泄正常或处于正常的上限。ALA脱水酶缺乏性卟啉症（ADP）的患儿在红细胞或非红细胞的ALA脱水酶几乎没有活力而他们双亲的酶有50%的活力。 诊断是根据在尿中有过量的ALA和粪卟啉和在红细胞中ALA脱水酶缺乏。本酶缺乏的其他原因，像铅中毒和酪氨酸血症没有排除。它也可出现和急性卟啉症极为相似的表现（腹痛，肠梗阻和运动神经病）。铅中毒，红细胞中ALA脱水酶不足可通过应用硫氢基化合物得到恢复，而遗传性酶缺乏则不能恢复。在遗传性酪氨酸血症，延胡索酰乙酰乙酸酶先天性缺乏导致琥珀酰丙酮积聚。ALA结构类似物是脱水酶的有力抑制剂。其他重金属或苯乙烯暴晒也能抑制ALA脱水酶。 ADP的治疗经验很有限，但是可以参考急性间隙性卟啉症。 先天性红细胞生成性卟啉病 （Günther疾病；红细胞生成性卟啉病；先天性卟啉病；先天性血卟啉病；红细胞生成性尿卟啉病） 该症常染色体隐性遗传，罕见，是由于尿卟啉原Ⅲ聚合酶缺乏引起的一种严重的疾病。 至今报道的先天性红细胞生成性卟啉病（CEP）不足200例。种族和性别的倾向不明。这种卟啉症在动物（例如牛）中很少发生。有趣的是，所有狐狸松鼠虽然它们的卟啉显著增加，但是并没有疾病的表现。 发病机制 人类尿卟啉原Ⅲ聚合酶许多不同的突变基因已被确定。大部分病人有"正常"的双亲并且遗传了不同的突变。残留的聚合酶的活力持续存在于大多数严重的病例。溶血性贫血引起血红素生成急性增加，但是它发生在消耗相当积聚的羟甲基胆色烷（HMB）时。医学教育网，收集。整理过量的HMB转化为（非酶促）尿卟啉原Ⅰ，然后酶促为粪卟啉原Ⅰ。Ⅰ型卟啉原不是血红素的前体，然而它们积聚后自发氧化为相应的卟啉。过量的卟啉积聚在骨髓大多在红细胞成熟阶段，血红蛋白合成旺盛时。它们引起髓内溶血和缩短红细胞的生成周期。 症状和体征

裂解液配制方法

裂解液配制方法 The manuscript was revised on the evening of 2021

1、红细胞裂解液（去除红细胞） 配制试剂所需材料： 1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solution a) NH4Cl (1.5 M) 80 g b) KHCO3 (100 nM) 10 g c) Na4EDTA (10 nM) 3.7 g d) Distilled H2O 1000 mL 2. 1N HCl or 1N NaOH（调节pH值用） 配制步骤： 1. 将以上a、b、c试剂溶于900ml 去离子水中； 2.调节溶液pH值到，加去离子水定容到1000ml； 3.在制备工作液时，将此储存液稀释10倍后使用。 保存： 储存液储存于2-8°C不能超过半年（六个月）； 2.在使用前，工作液每天都应该新鲜配制放置于室温，当日用不完的弃掉。 2、ripa裂解液 NP-40 or Triton-100 1% TrisHCl (pH 50mmol/L NaCl 150mmol/L PMSF（苯甲基磺酰氟） L(100μg/ml) Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/Lμg/ml) Leupeptin（亮抑制肽） ml Aprotinin（抑蛋白酶肽）μmol/L(1μg/ml) （注：PMSF 贮存液：100mmol/L即ml于异丙醇中； Aprotinin 贮存液：10mg/ml溶于LHEPES； Leupeptin 贮存液：10mg/ml溶于水中；

Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存） 3、细胞裂解液（Tris－HCL） 1．1M Tris 溶液的配置 取Tris242.2g，加ddH2O至1600ml，加热溶解。 2．1M Tris－HCL Ph=溶液的配置 取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=（需浓盐酸约），加ddH2O定容至200ml，高压灭菌备用。 3. 0.5M EDTA溶液的配置 称EDTA－Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解，加入14ml NaOH（10M）使EDTA－Na2溶解，再用NaOH（10M）溶液调至Ph=，加ddH2O定容至 200ml，高压灭菌备用。 4. 细胞裂解液的配制 称15gCTAB（Hexadecyltrimethylammonium bromide）（先用约600ml ddH2O 加热溶解）放入烧杯中，加入75ml 1M Tris－HCL（Ph=），58.5g NaCL（先用少量ddH2O溶解），30ml 0.5M EDTA，定容至1000ml，混合均匀备用。 4、组织裂解液配方：` 7M Urea(60. 06) 4.2042 g 2M thiourea g 100mM DTT? g 4% CHAPS g 0.5mM EDTA? 0.00146 g 40Mm Tris? g 2%(v/v) NP-40 ml

护理记录书写注意事项及样例(完整资料).doc

【最新整理，下载后即可编辑】 【最新整理，下载后即可编辑】 护理记录书写注意事项及样例 护理文书书写对象：凡是诊断尚未明确的病人（如：腹痛查因）、高热病人（如：高热抽搐）、阑尾炎、脑血管意外、昏迷病人、头部重度损伤有可能引起颅内出息的病人、中毒病人、中重度输液反应等。 护理文书书写要求：一般病人每小时记录“巡视病人”一次，生命体征正常的每四小时记录一次生命体征，如有病情变化随时记录，危重病人使用监护仪每小时记录一次生命体征，有病情变化或特殊情况随时记录。 护理记录使用24小时制，具体按新的护理文书书写要求执行，吸氧病人请注明吸氧方式（鼻导管、面罩等）、吸氧流量及单位，退热药、止痛药等用后要记录效果。 何时给病人做检查、治疗、护理等均应写清楚时间，重症病人应有生命体征，（T P R BP SO2）如08：00 T P R BP SO2 ，护送患者行x线拍片或B超等检查，08：30 T P R BP SO2 ，患者返回抢救室，如生命体征异常或检查科室报告危极值，应及时向医生汇报，同时在护理记录内记录“汇报医生，嘱……” 护理文书书写遇房颤病人时，需同时记录P 、HR，经处理后是否转律（包括别的心律失常病人）都要交待处理后心律情况。 头部外伤病人：观察神志、瞳孔、受伤史、头部外伤病情记录、相关检查、相关治疗及生命体征。 脑血管意外、脑梗病人：记录神志、瞳孔、面部表情、临床表现、四肢肌力、肌张力、既往史、生命体征。 肌力及肌张力的区别： 肌力是指肌肉收缩的力量，是人的机体或机体的某一部分肌肉工作（收缩或舒展）时克服内外阻力的能力。 肌肉静止松弛状态下的紧张度称为肌张力。肌张力是维持身

红细胞的生成与破坏

红细胞的生成与破坏 红细胞的生成过程 红细胞系发育的过程是从原红细胞开始的。原红细胞体积大，胞核也大而圆，染色质细粒状，核仁1～3个，胞质呈强碱性。由原红细胞发育成为早幼红细胞时，核染色质变粗，胞质内开始合成血红蛋白。早幼红细胞约经四次分裂发育为中幼红细胞。中幼红细胞胞体较小，核染色质呈粗块状，胞质内血红蛋白渐增多。中幼红细胞再增殖，分化，发育成为胞体更小、核固缩、胞质内充满血红蛋白的晚幼红细胞。晚幼红细胞已无分裂能力，它脱去细胞核后就成为网织红细胞，网织红细胞再发育成为成熟红细胞而释放入血液循环。 红细胞生成的调节 组织缺O2是促进红细胞生成的有效刺激。不论何种原因而引起的组织缺氧，都能促进红骨髓加速生成和释放红细胞。实验表明，缺O2能促进肾脏产生一种红细胞生成酶，此酶作用于血浆中促红细胞生成素原，使它转化为促红细胞生成素（激素）。这种激素由血液运送至骨髓，作用于原红细胞膜上的受体，促使这些细胞加速增殖分化并发育为成熟的红细胞，此外，肝细胞和巨噬细胞也可能产生促红细胞生成素。 雄性激素不但能直接刺激骨髓成血组织，加速红细胞生成，而且还能作用于肾脏使红细胞生成酶的活性提高，从而使血液中红细胞数量增多。这就可能解释成年男性红细胞的数量多于女性的原因。 红细胞的破坏 红细胞因衰老而被破坏，但也可因其他物理的、化学的或其他病理原因而被破坏。正常时红细胞的更新率每日约为1％，比其他组织为高。红细胞衰老时，细胞膜的可塑性减小而脆性增加，它可因血流撞击血管壁或因穿过毛细血管被压挤变形而破裂，此时膜内酶活性下降也影响膜的坚固性而导致破裂。此外，麻醉剂和毒素等也可使红细胞膜的脂质溶解；在免疫过程中，抗体和补体吸附到细胞膜上可使红细胞致敏并产生凝集现象，最终导致细胞破裂。红细胞破坏后，血管中的中性粒细胞和单核细胞可将其吞噬，也可当血液流经肝和脾脏时，被其中的网状内皮系统的巨噬细胞清除。红细胞被吞噬后，血红蛋白分解成珠蛋白和血红素，二者均可被摄取回收再利用。 红细胞异常增多与贫血 红细胞不断被破坏，也不断再生成，形成动态平衡，使红细胞数量保持相对稳定。如生成或与破坏发生异常，即造成红细胞数量过多或过少。 红细胞增多症红细胞数高达6～8百万/mm3，或以上时，称之为红细胞增多症。例如由于空气中氧含量减少或由于机体运输氧的功能发生障碍，造成组织缺氧，使造血器官活动加强，生成更多的红细胞。它也可以由于造血器官过多增生或癌发而造成。红细胞数量增多可使血液粘滞度增加，使微血管易于阻塞，循环阻力加大，心脏负担加重。 贫血外周血液中血红蛋白量或红细胞计数低于正常值，均称为贫血。它的发生可以由于①生成原料缺乏：最常见的为缺乏Fe2+时，为缺铁性贫血；其次是缺乏VB12、叶酸等促使红细胞分化和成熟的物质，为恶性贫血。②造血器官功能障碍：某些化学毒物或X、γ射线的

《中国卟啉病诊治专家共识(2020年)》要点

《中国卟啉病诊治专家共识（2020年）》要点 卟啉病（Porphyria）是由于血红素生物合成途径中的酶活性缺乏，引起卟啉或其前体［如δ-氨基乙酰丙酸（δ-ALA）和卟胆原（PBG）］浓度异常升高，并在组织中蓄积，造成细胞损伤而引起的一类代谢性疾病。卟啉病是罕见病，不同类型的卟啉病发病率不一，成人中以迟发性皮肤卟啉病（PCT）、急性间歇性卟啉病（AIP）和红细胞生成性原卟啉病（EPP）最常见。 一、卟啉病的分型和分类 1. 根据酶的缺陷可分为8种类型（图1、表1）。 （1）X连锁原卟啉病（XLPP）： （2）ALA脱水酶卟啉病（ADP）： （3）AIP： （4）先天性红细胞生成性卟啉病（CEP）： （5）家族性/散发性PCT：

（6）HCP： （7）VP： （8）EPP： 2. 按卟啉生成的部位可分为红细胞生成性卟啉病和肝性卟啉病。 3. 按临床表现可分为皮肤光敏型、神经症状型及混合型卟啉病。 4. 按发病机制可分为遗传性和获得性卟啉病。 二、卟啉病的临床表现 1. 皮肤光敏：卟啉经循环进入皮肤，暴露在光下生成氧自由基，产生光敏性。 （1）大疱性皮肤卟啉病： （2）急性非发疱性皮肤卟啉病：

（3）可并发眼损害如结膜炎、角膜炎及虹膜炎等。 2. 神经内脏症状：由神经功能障碍引起，间歇性急性发作，严重时可能危及生命。 （1）急性腹痛： （2）感觉和运动神经病： （3）自主神经系统受累： （4）急性神经精神表现： （5）中枢神经系统受累： 3. 急性发作期间患者的尿液可能呈棕红色。 4. 溶血： 5. ALA、PBG和卟啉持续升高的患者可能出现肝功能异常。 6. 长期并发症如高血压、慢性肾功能不全。

Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书

北京索莱宝科技有限公司 Tris-氯化铵红细胞裂解液说明书 货号：R1012 规格：500mL 保存：4℃保存，12个月有效。 产品说明： 在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NH4Cl Red Blood Cell Lysis Buffer)，也称为Tris-NH4Cl Lysis Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。 Tris-NH4Cl Lysis Buffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌，经过Tris-NH4Cl Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。 自备材料： 胰蛋白酶、离心机、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液、胎牛血清 注意事项： 1、制备细胞悬液时应根据实验需要，不一定要制备成单细胞悬液。 2、后续试验如果是用于细胞培养，操作过程中应注意无菌操作，尽量在超净工作台内操作。 3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。 4、常规步骤与快速步骤的区别在于：常规步骤多了一步洗涤过程的离心，可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好，不需要大体积的离心管；快速步骤少了一次离心过程，洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 5、离心洗涤后，通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。 6、如果经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取，在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液，即无需在该操作中特意去除RNase。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 第1页共1页

红细胞裂解

对于组织细胞样品： 1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2. 加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。 3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤： 1. 新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。 2. 对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。 3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。 4. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 5. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。 对于血液样品： 1. 取新鲜抗凝血，400-500g离心5分钟，离心弃上清。 2. 加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞 裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时 间至4-5分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。 3. 400-500g离心5分钟，弃红色上清。4℃离心效果更佳。 4. 如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。 5. 洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500g离心2-3分钟，弃上清。可再重复1 次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。 6. 根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。 注意：对于微量或少量的血液样品，可以在第一步中不进行离心弃上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂 解液，并在室温或4℃裂解4-5分钟。对于鼠的血液，裂解4-5分钟已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10分钟，但 通常不宜超过15分钟，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤： 1. 每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-5分钟。本步骤在

促红细胞生成素的研究

促红细胞生成素的研究进展 XXX （X班 X学院 XX大学 XX 000000） 摘要：促红细胞生成素是由肾脏分泌产生的一种特异性糖蛋白，由于其糖蛋白分子结构中特异性的糖链结构能与骨髓红细胞表面的特异性的糖链识别受体结合，促进骨髓红细胞的增殖与成熟。其最早用来治疗遗传、癌症、慢性肾衰以及其他一些炎症引起的的贫血症，随着促红细胞生成素产生机制与信号转导机制的研究，促红细胞生成素在神经系统以及血管壁修复、心肌疾病等方面的研究有了新的应用并广泛应用于临床实践。 关键词：促红细胞生成素（EPO）；促红细胞受体（EPOR）；生物学活性；信号转导；临床应用 The research progress of Erythropoietin Xxx Abstract：Erythropoietin is produced by the kidneys secrete a specific glycoprotein because of their sugar specificity of the molecular structure of protein, sugar chain structure of the surface of red blood cells with bone marrow-specific sugar chain recognition receptor binding to promote the bone marrow of red blood cells proliferation and maturity。It used to treat some disease that caursed by genetic, cancer, chronic renal failure and other inflammation caused by anemia. with the mechanism of erythropoietin signal transduction mechanism study of erythropoietin in the nervous system and blood vessel wall repair,so it widely used in many aspect especially in clinical practice. Key words: erythropoietin (EPO); erythropoietin receptor (EPOR); biological activity; signal transduction; clinical application 促红细胞生成素（EPO）是调节红细胞产生的必需的细胞因子，在胎儿期主要由肝脏产生，成年肌体主要来源于肾脏，由肾小管及管旁毛细血管内皮细胞与间质细胞合成分泌[1]。由于EPO是一种糖蛋白，其特异性的糖链结构能被EPO 识别，因此作用于特定的靶细胞，促进细胞增殖成熟。EPO最早用于治疗再生障碍性贫血，后期发现其在AIDS引起的贫血、恶性肿瘤性贫血以及自身免疫性贫血等疾病贫血症中得以广泛应用，近期EPO的生产多用采用基因工程技术，

引流管护理注意事项

胸腔闭式引流管注意事项告知 1、妥善固定:用灭菌敷贴固定穿刺口,做好管道标识,评估导管滑脱风险,患者卧床时可将引流袋用绳子固定在床旁, 起床活动时防止引流管脱出, 引流袋的高度应低于引流口。 2、引流通畅:保持引流管通畅,勿折叠扭曲,改变体位时勿压迫。 3、卧位与休息:取舒适体位,呼吸困难者取半卧位。 4、饮食:选择高蛋白,高热量,富含维生素及钙的食物。 5、观察引流液的颜色,性质,量,如有异常,及时告诉医务人员。 6、预防感染:引流袋要低于穿刺点,防止引流液返流。 4、腹部引流的护理 (1)妥善固定引流管与引流袋,防止病人在变换体位时压 迫、扭曲或因牵拉引流管而脱出。另外,还可避免或减少因 引流管的牵拉而引起疼痛。 (2)保持引流通畅,若发现引流量突然减少,病人感到腹 胀、伴发热,应检查引流管腔有无阻塞或引流管就是否脱 落。 (3)注意观察引流液的颜色、量、气味及有无残渣等,准 确记录24小时引流量,并注意引流液的量及形状的变化,以 判断病人病情发展趋势。

(4)注意观察引流管周围皮肤有无红肿、皮肤损伤等情 况。 (5)疼痛观察:引起病人引流口处疼痛常就是引流液对周 围皮肤的刺激,或由于引流管过紧地压迫局部组织引起继 发感染或迁移性脓肿所致,这种情况也可能会引起其她部 位疼痛,局部固定点的疼痛一般就是病变所在。剧烈腹痛突 然减轻,应高度怀疑脓腔或脏器破裂,注意观察病人腹部体 征的变化。 (6)每1周更换2～3次无菌袋,更换时应注意无菌操作, 先消毒引流管口后再连接引流袋,以免引起逆行感染。 注意事项:(1)要妥善的固定,防止扭曲,受压,折叠、(2)接引流管时注意无菌技术操作,引流管应低于出口平面,防止逆行回流感染、(3)夹引流液的量,色,质,正常色泽为淡红色,后期为黄色,清亮液,每日0----100ML,若每小时量大于50ML,持续3小时且呈红色则为异常,或血浆管引流液呈胆汁色,或颜色混浊均为异常,应立即告之医生、(4)每30分钟挤捏管道一次、(5)若为双套管引流管,注意要保持排气管的通畅,不可将其折叠,外套一薄膜手套,留出孔不可扎紧,以利排气,防止管壁塌陷、 1)胃肠减压期间应禁食、禁饮,一般应停服药物。如需胃内注药,则注药后应夹管并暂停减压0、5～1小时。适当补液,加强营养,维持水、电解质的平衡。 (2)妥善固定:胃管固定要牢固,防止移位或脱

护理观察中的注意事项

护理观察中的注意事项 临床护理观察过程中，需全面、正确地收集病人信息，并及时反馈和处理，护理人员应注意以下几点。 一将满足病人生理需要放在首位 护理工作中应把满足病人生理需要放在首位，如在接待“120”转运来的新 生儿窒息病人时，首先应满足病人对于氧气的需要，给予吸痰、开放呼吸道、氧 气吸人。 另外，护理观察应针对疾病各个时期的不同特点来进行，疾病不同时期护 理观察的内容不同，如一位急性阑尾炎病人，人院初期对于腹痛、腹部体征以及 体温的观察是最重要的，而术后则应重点观察病人肛门排便、排气的情况，伤口 情况以及有无咳嗽、打喷嚏等。 二收集信息要精确 护理观察中所收集到的病人数据或者信息是否正确，直接影响到病情的判 断。因此，应倍加重视。 1．收集信息的对象要准确在询问病人有无过敏史或家族史时，提供信息 的应该是病人本人或者父母以及与病人生活最亲近的人；接待转诊病人时，应由 当地医院的主管医师提供病史资料。如资料无法收集时，应根据护理体格检查和 临床经验来判断，如卡介苗接种史不详时，可通过手臂上的接种瘢痕来判定。如 确实无法判定时，则不能作为病情诊治的依据。 2．收集信息的时间要精确①收集痰培养或血培养标本时，应在病人人院 后尚未使用抗生素之前，或在发热时采集标本。②采集病人24小时尿蛋白定量 标本时，应从晨起排空膀胱内储留小便后算起。③留取肝功能血液检测标本时， 成人应空腹8小时，婴幼儿空腹3~4小时。 3．收集信息的过程要准确收集细菌培养标本时应保持无菌，如不慎污染， 应重新留取；留取抗凝血液标本时，应充分摇匀后及时送检。在采集标本的过程 中应保证各种常规和特殊标本采集的剂量准确，如一般血培养应采血5mL，而 为亚急性细菌性心内膜炎的病人做血培养时，为提高细菌培养阳性率，采血量可 增加至10~15mL。