乳腺癌细胞药敏试验临床应用价值探讨
体外肿瘤药敏试验方法研究进展
体外肿瘤药敏试验方法研究进展 甘萍 治疗肿瘤的方法主要有3种，包括肿瘤化疗、放疗、手术。其中肿瘤化疗在消灭微小肿瘤转移灶和手术切除后的残留肿瘤细胞治疗中有着手术与放疗无法达到的显著优势，但肿瘤化疗中仍有许多问题：①肿瘤病人个体间对化疗药物敏感性差异大；②肿瘤对化疗药物有耐药性；③化疗药物对许多类型的肿瘤特别是实体瘤的有效率不高；④化疗药物的选择性差，毒性大，杀伤癌细胞的同时也杀伤正常细胞，给病人机体造成较大的损害。对于上述出现各种问题在临床上经验的化疗用药是无法保证肿瘤患者的个体有效性，因此个体化化疗在临床肿瘤化疗中就显得尤为重要。目前公认的较好的方法就是做肿瘤化疗药物敏感性试验(简称肿瘤药敏)，该方法的特点是直接从患者体内获取新鲜的肿瘤组织进行首次培养，由于肿瘤细胞刚刚离体，生物学性状尚未发生大的变化，能较真实地反映整个肿瘤细胞群体的特性及不同供体的个体差异，能够比较确切地代表体内状态，为不同的病人准确筛选敏感的化疗药物,并确定其剂量，真正实现临床的个体化用药，以提高化疗的靶向性，减少化疗药物的不良反应，降低细胞耐药性，成为肿瘤治疗中迫切需要解决的问题。 目前，预测肿瘤药敏的方法已发展为体内和体外两大系列20多种药敏试验，并不断地朝着简单、快速、敏感、筛选作用方式不同的药物与临床有良好的相关性的方向迈进。而本文针对体外肿瘤药敏试验方法进行综述。 1 人体肿瘤细胞集落测定(HTCA) 它是利用肿瘤细胞悬液，置于双层琼脂中培养，通过选择性加入化疗药物培养后，计数细胞繁殖形成的集落数目，再评估肿瘤细胞对该药的敏感性。该法的优点：敏感、直接评价细胞增殖死亡。缺点：用于临床标本检测率低、周期长、集落计数繁琐。 2 放射性标记代谢物前体掺入法(3H-Tdr assay) 该法利用氚标记的胸腺嘧啶核苷和尿嘧啶作为核酸代谢物前体，测定一定时间内放射性标记的代谢物前体掺入的多少来判断药物对细胞增殖活性的抑制作用。该法的优点：操作简便、所需时间短、灵敏度高、重复性好，临床相关性与集落形成法相近，可适用于绝大多数恶性肿瘤。缺点：存在放射性污染，只能用于标记指数>5%的样品，显然无法测出药物对G0期细胞的杀灭作用，而且胸腺嘧啶池的大小也可影响结果，故标记指数的变化不一定系抗癌药所致。此外，同位素的放射性也限制了它的应用。 3 快速荧光分析法(FMCA) 它是采用一些特殊的荧光染料(荧光素二乙酸酯)对细胞的特定成分进行染
药敏试验实验报告
药敏试验： 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test 法），和自动化仪器等。 简介： 体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。 根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A 组抗生素）或临床使用的主要抗生素（B组抗生素）进行药敏试验。 抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。 随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参
考，并提高疗效。农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 实验步骤： 实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备） 细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
药敏试验方法
一、纸片扩散法 该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。 二、稀释法 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读。 2.2 肉汤稀释法 三、抗生素浓度梯度法 四、自动化仪器法 一、实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备）
细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 二、实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。 三、实验操作方法 3.1 药敏片法 3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密） 3.1.2 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。 3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。 3.2 牛津杯法 3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，
乳腺癌常用化疗方案及分析
乳腺癌常用化疗方案及 分析 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
乳腺癌辅助化疗方案 1、TAC方案 多西他赛 75mg /M2 d1 阿霉素 50 /M2 d1 环磷酰胺 500 /M2 d1 共6个周期，21天为1周期 多西他赛预处理：地塞米松8mg Bid连续3天（-1,1,2） 适用于高度复发危险的病例 该方案中多柔比星的不良反应主要为心脏毒性，心肌毒性与剂量累计密切相关，辅酶Q10，维生素C，维生素E可清除自由基，可能会降低心脏毒性。 该方案的剂量限制性毒性是造血系统毒性，白细胞，尤其是粒细胞下降，易引起发热性粒细胞下降和感染。而且粒细胞下降发生早，最早发生在用药后3~4天，降至最低点的时间是第8天，通常再降至最低点1周左右能完全恢复。，预防使用G-CSF可有效地预防严重的骨髓抑制的发生。 如出现发热性粒细胞下降应注意以下几点：拍摄胸片，查血常规；尽量避免有创操作，仔细检查并尽可能发现感染病灶及感染；常规进行血、尿培养、中心静脉置管或可疑感染部位的培养；经验性应用广谱抗生素，根据药敏试验结果更换抗生素等。本方案致吐性为中等程度，应用5-HT3拮抗剂。 2、AC-P方案 阿霉素 60mg /M2 d1 第1-4周期 环磷酰胺 600mg /M2 d1 第1-4周期 紫杉醇 175mg /M2 d1 第5-8周期 21天为1周期 紫杉醇预处理：地塞米松20mg 口服（用药前12h、前6h）苯海拉明40mg肌注、西咪替丁400mg静脉注射（用药前30min） 适用于高度复发危险的病例 注意事项：紫杉醇用药需测量血压（化疗前30min、0min、后15min、后 30min、后60min、后2h、后3h），静滴时间：3h； 紫杉醇在滴注的最初几分钟内，有可能发生过敏反应。如发生过敏反应症状较轻微，如脸红或局部皮肤反应，则不需终止治疗。如果发生严重过敏反应，如血压下降超过20mmHg、支气管痉挛或全身皮疹或红斑，则需立即停止滴注，并进行对症治疗。 紫杉醇用药2-3天后会感到关节和肌肉疼痛，在给予G-CSF治疗的病人肌肉疼痛会加重。可自行缓解。向患者解释清楚。
如何看药敏实验
S（susceptible）， 是指细菌对抗菌药敏感，使用常规剂量时的平均血浓度超过MIC5倍以上，用常规剂量通常有效； 是指细菌对抗菌药中度敏感，常规剂量时平均血浓度等于或略高于MIC，需用高剂量或对体内药物浓缩部位的感染可能有效； R（resistance）是指细菌对某种抗菌药耐药，药物对细菌的MIC高于应用常规剂量时的血浓度，应用常规剂量治疗通常无效。 SDD：susceptible-dose dependent剂量依赖性性敏感：细菌对抗生素药物的敏感性依赖于对患者的用药方案，为了使血药浓度达到临床疗效，采用的给药方案可以是以较高的给药剂量或增加给药频率。 MIC 最低抑菌浓度 定量方法：MIC 定性分析法：纸片扩散法（RAD） MIC值那个小选哪个？MIC值一样选哪个？根据数值和中介的距离。（我们的没法看） 不同标本报告的药物不同。 脑脊液标本一般不常规报告口服药物，第一二代头孢菌素、克林霉素、大环内酯类、四环素、喹诺酮类。 药敏报告出现WT,WT为野生型菌株的意思。这种细菌无耐药机制。 如果报告中出现头孢曲松和头孢噻污一个中介，一个耐药，需要复核药敏。 折点有没有更新。现在头孢曲松和头孢噻污折点，≤1敏感，2中介，≥4耐药 亚胺培南和美罗培南一般抗菌活性一样，如果出现异常，可能需要复核。 分级报告 革兰阴性菌：万古霉素、利奈唑胺等不用做 一般报告中，根据分级报告原则：如果对第一代头孢敏感，第二代、三代等也敏感。相反如果，二代等耐药，一代敏感可以问一下有没有复核。 临床应用有效，但是药敏中没有这个药。可能这个药还是有效。 呋喃妥因在尿路中敏感浓度5倍。如果是中介，也可以用。 替代原则 头孢唑啉敏感的话，头孢他定之类也可以用 苯唑西林和头孢西丁只报一个就行。苯唑西林耐药，头孢西丁也耐药。 BLAC：耐药 对四环素敏感的药物对多西环素和米诺环素也敏感，但对四环素耐药的，也可能对多西环素敏感。
药敏试验方法
药敏试验方法： 默认分类 2009-05-06 22:37 阅读285 评论0 字号：大中小 K-B法： 1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单 位。 2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤 出过多的菌液。 3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接 种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。 4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个 纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。 5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。 6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。 说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K- B法. 肺炎链球菌胶乳凝集测定法 1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。 2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidex pneumo-kit)于室温。 ·3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。 4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。 5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。 注：R3为阳性对照。 药敏纸片的选择 1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科）
头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ） 氨苄西林（AM）哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN） 头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM） 庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA） 头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB） 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ）亚安培南头孢匹肟（FEP）头孢克罗（CEC） 2、铜绿假单孢菌/不动杆菌 妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT） 头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟 头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ） 左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南哌拉西林/三唑巴坦 3、金黄色葡萄球菌 苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN）红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP） 万古霉素奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦 头孢噻吩（CF） 4 、肠球菌 氨苄西林（AM）万古霉素环丙沙星（CIP） 庆大霉素（GM）红霉素（E）氧氟沙星（OFL） 5、除肺炎链球菌外链球菌 氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素 红霉素（E）氧氟沙星（OFL）克林霉素(CM) 肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌和大肠杆菌ESBLs的检测
乳腺癌常用化疗方案及分析
乳腺癌辅助化疗方案 1、TAC方案 多西他赛 75mg /M2 d1 阿霉素 50 /M2 d1 环磷酰胺 500 /M2 d1 共6个周期，21天为1周期 多西他赛预处理：地塞米松8mg Bid连续3天（-1,1,2） 适用于高度复发危险的病例 该方案中多柔比星的不良反应主要为心脏毒性，心肌毒性与剂量累计密切相关，辅酶Q10，维生素C，维生素E可清除自由基，可能会降低心脏毒性。 ： 该方案的剂量限制性毒性是造血系统毒性，白细胞，尤其是粒细胞下降，易引起发热性粒细胞下降和感染。而且粒细胞下降发生早，最早发生在用药后3~4天，降至最低点的时间是第8天，通常再降至最低点1周左右能完全恢复。，预防使用G-CSF可有效地预防严重的骨髓抑制的发生。 如出现发热性粒细胞下降应注意以下几点：拍摄胸片，查血常规；尽量避免有创操作，仔细检查并尽可能发现感染病灶及感染；常规进行血、尿培养、中心静脉置管或可疑感染部位的培养；经验性应用广谱抗生素，根据药敏试验结果更换抗生素等。本方案致吐性为中等程度，应用5-HT3拮抗剂。 2、AC-P方案 阿霉素 60mg /M2 d1 第1-4周期 环磷酰胺 600mg /M2 d1 第1-4周期 紫杉醇 175mg /M2 d1 第5-8周期 21天为1周期 （ 紫杉醇预处理：地塞米松20mg 口服（用药前12h、前6h）苯海拉明40mg肌注、西咪替丁400mg静脉注射（用药前30min） 适用于高度复发危险的病例 注意事项：紫杉醇用药需测量血压（化疗前30min、0min、后15min、后30min、后60min、后2h、后3h），静滴时间：3h； 紫杉醇在滴注的最初几分钟内，有可能发生过敏反应。如发生过敏反应症状较轻微，如脸红或局部皮肤反应，则不需终止治疗。如果发生严重过敏反应，如血压下降超过20mmHg、支气管痉挛或全身皮疹或红斑，则需立即停止滴注，并进行对症治疗。 紫杉醇用药2-3天后会感到关节和肌肉疼痛，在给予G-CSF治疗的病人肌肉疼痛会加重。可自行缓解。向患者解释清楚。
常见细菌药物敏感性试验报告规范
常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识 微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。 一、药物敏感性试验的意义和基本原则 (一)意义 药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。 (二)基本原则 1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药： 天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。常见菌种对各类药物的天然耐药见文献[3,4]。实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。 2．药敏试验测试的前提条件[5]： 实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。错误示例：来自痰标本的溶血葡萄球菌，未作标本质量评估和半定量培养，进行药敏试验；来自粪便标本肠球菌属进行药敏试验等。 3．测试结果应准确： 实验室应遵照C L S I文件或相关规范建立本医院药敏试验的质量管理体系。质控菌株、频率、质控范围符合相关要求；定期参加实验室室间比对项目。建议保留菌株，以便复核。 二、具体的专业要求 (一)标本类型 临床微生物学的一大特点是标本种类繁多，而不同药物在这些部位的分布不同。标本的规范采集、质量保证、立即运送和有效保藏有赖于临床、实验室以及相关各方的密切合作。
药敏试验程序及步骤
药敏试验程序及步骤 微生物标本的采集 通常有血液、脑脊液、尿液、伤口的脓液、胸水腹水、粪便、痰液及泌尿生殖系统的分泌物。1）采集的一般原则： a早期采集 b 无菌采集注意对局部及周围皮肤的消毒，渎道底部采集的标本（外通道）正常菌群 寄生部位采集的标本应明确目的菌，采用选择培养基。 C 不同菌不同采集方法 D 采集适量标本，量不应过少，注意采集不同时间不同部位标本，要全面有特征 E 安全采集 2）标本处理 2h送到检验处，部分菌应保温于一定环境中保存注意安全尤其对烈性传染病。有时可以直接用抽取标本的注射器 如尸检组织、支气管洗液、心包液、痰、尿等标本要保存于4℃环境中，脑脊液保存于25℃ 3）各部位标本的采集及注意事项 A 血液 皮肤消毒采血部位采血量采血次数采血时间不同动物有所不同血液应马上送检室温保存不可冷藏。 配置的培养基血液和肉汤比为1：5～1：10 血液中常见的病原体引起的疾病有葡萄球菌菌血症，肠球菌菌血症、革兰隐性杆菌、厌氧菌菌血症真菌血症。 B 脑脊液 采集脑脊液一般用腰椎穿刺术获得。采集后立即送检，一般不要超过1h，避免凝固和混入血液一般取3～5ml 35度保温送检不可至于冰箱保存做病毒检查时应放置冰块4度保存72h
常见细菌性脑膜炎如流行性脑脊髓膜炎肺炎球菌脑膜炎，链球菌脑膜炎等 真菌性脑膜炎常见隐球菌脑膜炎假丝酵母菌脑膜炎等特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易并发。如AIDS 恶性肿瘤严重糖尿病等 流行性乙型脑炎是一种人兽共患病肠道病毒可见多种病毒引起脑膜炎和肺炎 c 脓液标本的采集 首先用无菌生理盐水清洗脓液及病灶的杂菌，在采集标本，用针和注射器抽吸采取，再移入无菌容器立即送检也可用拭子在伤口深部采集渗出物，对于皮肤或下表皮的散播性感染，应采集病灶出边缘而非中央处的感染组织送检。脓肿标本以无菌注射器抽取为好，也可用排液法取得，先用70的酒精擦拭病灶部位，袋干燥后用以无菌刀切开排脓，以无菌拭子采取，不能及时送检可放冰箱冷藏，厌氧菌培养的标本只能放于室温下。厌氧菌感染的脓液常有腐臭味，采集和运送要注意不要接触空气，可直接针筒送检或置于厌氧运送培养基送检。 外伤性创伤感染以葡萄球菌和链球菌多见，放线菌，结核分枝杆菌，大肠埃希菌，铜绿假单胞杆菌也常见。深部感染极易引起破伤风和气性坏死感染。 烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染和革兰阳性球菌感染 急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌感染溶血性链球菌肺炎链球菌感染所致慢性化脓性骨关节炎慢性骨髓炎常由结合分支杆菌感染所致。 放线菌感染可发生在免疫功能下降时或由于拔牙口腔粘膜损伤一起的感染。 d痰液标本的采集 自然咳痰法和支气管镜采集法对呼吸道感染诊断有重要意义，细菌性肺炎为下呼吸道感染最常见的类型。支原体肺炎常以不典型肺炎表现。真菌性肺炎和病毒性肺炎也常见。 E 粪便标本的采集 用药前自然排便采集脓血粘液部分2～3g，粪便表面采样，液体便取絮状物1～2ml置于无菌容器内送检。 细菌性痢疾细菌真菌病毒引起的胃肠炎细菌性食物中毒致病性大肠埃希菌的肠道感染幽门螺杆菌感染导致消化性溃疡，主要部位是十二指肠球部。 F 尿液标本采集 采集清洁中段尿最好早晨取样，先清洗尿道口。必要时导尿或膀胱穿刺留尿样本采集容器要求清洁无菌、密封、加盖、防渗透、广口、容积大于50ml。主要主要经尿道口上行感染，极少数血道感染，可反映肾脏，膀胱，尿道，前列腺等处的炎症变化。
特殊细菌药敏试验规范化操作
特殊细菌药敏试验的规范化操作 一、目前我国细菌药敏试验现状 20年以来，我国在卫生部和各地临床检验中心和检验学会的共同努力下引进CLSI药敏系列标准，使全国微生物实验室能在同一标准下进行质量控制活动。当前，微生物实验室对常见临床分离细菌的药物敏感试验的水平已有了显著的提高，但对特殊细菌的药敏试验的各个环节的规范操作还不能得到普及，对目前还无折点的细菌能否做药敏试验，以及如何判断细菌的药物敏感和耐药，仍然概念模糊，有待进一步规范和普及。 目前常见错误做法： （一）铜绿假单孢菌的药敏判断标准用于其他非发酵细菌；嗜血杆菌的标准用于卡他莫拉菌等的错误做法时有发生。 （二）借用同属细菌敏感标准 （三）借用同类抗生素的敏感标准 二、各菌属的药物敏感性报告及试验方法的CLSI药敏标准 （一）“嗜麦芽”菌属药敏报告标准 1.CLSI对“嗜麦芽”纸片药敏判断标准 2.CLSI对“嗜麦芽”稀释法判断标准 （二）无折点细菌的药物敏感试验报告 1. 其他药物的敏感性报告: CLSI推荐的药物可以报告MIC值和敏感度（S、I、R），临床需要的其他药物的药敏试验报告可以直接报告MIC值但不报告S、I、R。 2. 不要用认为相近细菌的折点代替报告S、I、R，这会误导医生用药。
（三）洋葱伯克霍德菌的药物敏感试验 1.CLSI 洋葱伯克霍德菌纸片法折点： 2. CLSI洋葱伯克霍德菌稀释法折点： （1）氯霉素不常规报告结果,只有在尿路感染时分离的细菌才报告结果。 （2）在纸片法药敏中只允许报告表中4个药物的敏感性,对其他药物可用于临床治疗但还没有足够的研究建立纸片扩散的折点。 （四）莫拉菌属的药物敏感试验报告 莫拉菌属至今尚无由CLSI颁布的标准操作方法和敏感性折点,该菌属是人体皮肤、黏膜、呼吸道正常细菌，很少会致病，有过报道的病例有该菌属引起的眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、脑脓肿、心包炎和心内膜炎。实验室药敏报告只能报告MIC 值但不能报告敏感性。文献报告的资料是推断性。 （五）金黄杆菌属的药敏试验报告 脑膜败血性黄杆菌是最常见于临床标本，是条件致病菌，有文献报道的病例有新生儿脑膜炎，对成人很少致病，感染与插管有关。CLSI未颁布标准操作方法和敏感折点，药敏试验可报告MIC值。该菌属耐药特点：对氨基糖甙类、β-内酰胺类、四环素类、氯霉素类天然耐药；对治疗革兰阳性细菌药物利福平、红霉素、克林霉素、司帕沙星、复方新诺明和万古霉素敏感。 （六）丛毛菌属和食酸菌属的药敏试验 推荐用肉汤稀释方法或E-test方法，报告MIC值，不适合用纸片药敏方法。 （七）产碱杆菌属、无色杆菌属和苍白杆菌属的药敏试验
药敏试验
药敏试验 2010-06-13 药敏试验根据美国临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法进行，药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片，试验所选择药物必须包括下列抗生素：氨苄西林（AMP），阿莫西林/克拉维酸（AMC），头孢噻吩（CFT），头孢噻肟（CTX），庆大霉素（GEN），萘啶酸（NAL），环丙沙星（CIP），四环素（TBT），利福平（RFA），复方新诺明（SMZ）。药敏结果判定标准按照NCCLs手册2005版。 1. 操作方法：（1）将待检菌接种于普通营养琼脂平板，37℃培养16～18小时，然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落，悬于3ml生理盐水中，混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景，调整浊度与比浊管（0.5麦氏单位）相同。（2）用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。（3）待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面，纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片，每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。（4）将平板反转，孵育18～24小时后取出，用游标卡尺测量抑菌圈直径，从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录（附表6）。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长，进入抑菌环，磺胺药在抑菌环内出现轻微生长，这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。（5）每次药敏试验必须用ATCC 25922大肠杆菌做质控。只有当质控菌株的抑菌圈直径在允许范围内测试菌株的结果才可以报告。ATCC 25922的结果必须与测试菌株同时记录和报告在附表6中。 0.5麦氏比浊管配制方法： 0.048M BaCL2 (1.17% W/V BaCL2 . 2H2O) 0.5ml 0.36N H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml 将二液混合，置螺口试管中，放室温暗处保存。用前混匀。有效期为6个月。 2. 注意事项： (1) 制备MH琼脂平板应用直径90mm平皿，在水平的实验台上倾注。琼脂厚为4±0.5mm（约25-30ml培养基），琼脂凝固后塑料包装放4℃保存，在5日内用完，使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。倾注平皿前应用pH计测pH值是否正确(pH应为7.3)。pH过低会导致氨基糖苷类，大环内酯类失效，而青霉素活力增强。 (2) 药敏纸片长期储存应于－20℃，日常使用的小量纸片可放在4℃，但应至于含干燥剂的密封容器内。使用时从低
药敏试验的再认识
抗生素广泛使用，甚至滥用，造成耐药得细菌越来越多，药敏试验得作用显得愈加重要。由于各种细菌耐药得机理与程度互不相同，不同得药敏试验方法，检测结果会存在一定差异。对于药敏试验得理解与使用中应注意得问题，概括如下几点。 一、药敏试验得目得与性质 药敏试验得目得就是检出细菌得耐药性，确定病原细菌对哪种药物有抗药性，避免医生将其作为治疗用药。“耐药”就是药敏试验得正结果。只有已知可能出现耐药菌株得药物才需要做药敏试验。如青霉素就是金黄色葡萄球菌感染得首选药，但耐药株很多，必须做药敏试验。已知没有耐药性得细菌不做药敏试验。如化脓链球菌对青霉素无耐药株，常规不做药敏试验，实际上，目前还没有相应得药敏试验方法。已知细菌全部耐药得药物更不必做药敏试验。如耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)不应做氨基苄青霉素得药敏试验。正确认识药敏试验得目得，利于有针对性地选择药敏试验得药物；根据细菌得耐药特点，开发新得药敏试验方法。 药敏试验就是定性试验，理论上说，只有“耐药”与“敏感”两种结果。细菌耐药，表示不能按常规或以往成功得经验进行治疗，敏感得含义相反。抗菌治疗，要求药敏试验提供选择或不选择某种药物得依据，回答必须就是肯定或否定，所以就是临床治疗得需要决定了药敏试验得性质。 在常规实验室，将药敏试验提高到定量水平一般没有临床价值。比如，肠球菌对万古霉素，最低抑菌浓度(MIC)＞4 μg/ml为中度耐药或耐药［1］。用筛选试验或纸片法便可检出耐药株，确定能否使用该药。用定量方法，无论测出MIC 就是8 μg/ml或64 μg/ml，临床没有更大得价值。 二、细菌对药物得敏感特征 对特定药物，一种细菌得MIC值就是从小到大连续不断，还就是跳跃得? 回答就是后者。绝大多数情况，一种细菌对一种药物，表现为敏感：MIC值较低，与耐药：MIC值较高，两个群体，少有中间状态。如粪肠球菌，万古霉素敏感菌株，MIC＜2 μg/ml，耐药菌株MIC＞16 μg/ml。也有只表现为敏感或耐药
药敏判断标准的新观点
近年来，有呼声要求重新评估肠杆菌科细菌对头孢菌素类的折点，在第十五届欧洲临床微生物学与感染病大会（ECCMID）上，与会者也一致提出更改这一折点的观点，主要是因为： 1. 世界各国的折点不一致； 2. 现有的CLSI折点不能反映耐药机制； 3. 没有很好地与PK/PD相结合； 4. 与临床疗效不完全一致。 一、药敏判断标准的新观点 将药代动力学—药效学（Pharmacokenetics-Pharmacodynamics,PK-PD）及蒙特卡洛分析法（Monte Carlo Simulation）与体外MIC值综合就能计算出肠杆菌科菌对头孢菌素类药敏折点，即PK/PD-MIC 折点。 （一）MIC值与临床结局关系 比较MIC值与ESBLs试验的关系证实，临床疗效与MIC及T＞MIC有关，与是否产ESBL无关，单纯的断定有没有药效，仅仅通过检测ESBL是不是阳性，是不合理的。这一新观点，也是ECCMID提出来的。 Paterson教授收集了2001～2004年的数据，显示： 1.所有病原菌产ESBLs； 2.所有病原菌对第三、第四代头孢菌素的MIC值均≤8μg/ml（按NCCLS折点均判为敏感）； 3.进一步细分MIC值并比较疗效 用头孢菌素单药治疗ESBL阳性、对头孢菌素敏感的42名菌血症病人临床结果： 从上表可以看出， MIC与疗效的关系更为密切，不能仅凭ESBL阳性来决定哪些药能用，哪些药不能用。 （二）CLSI的努力 基于以上这些情况，CLSI也做出了一些努力，以使得药敏试验的结果和疗效更加一致。 NCCLS2000年公布：由于临床实践证明许多口服抗生素对中度耐青霉素的肺炎链球菌是有效的，所以将它们对肺炎链球菌的折点值升高了，即将敏感率升高了一个档次。例如： 从上表可以看出，1999年以前，阿莫西林加棒酸，敏感度≤1，中介度为2，耐药性≥4。但实际上，病人往往用2ug时，效果就已非常好，所以现在将它的折点提高了，≤2是敏感，4是中介度，≥8是耐药。其他的抗生素如头孢克罗、头孢呋肟脂、头孢博肟、氯碳头孢也是同样。
药物敏感试验判断标准的新观点
药物敏感试验判断标准的新观点 卫生部北京医院张秀珍 近年来，有呼声要求重新评估肠杆菌科细菌对头孢菌素类的折点，在第十五届欧洲临床微生物学与感染病大会（ECCMID）上，与会者也一致提出更改这一折点的观点，主要是因为： 1. 世界各国的折点不一致； 2. 现有的CLSI折点不能反映耐药机制； 3. 没有很好地与PK/PD相结合； 4. 与临床疗效不完全一致。 一、药敏判断标准的新观点 将药代动力学—药效学（Pharmacokenetics-Pharmacodynamics,PK-PD）及蒙特卡洛分析法（Monte Carlo Simulation）与体外MIC值综合就能计算出肠杆菌科菌对头孢菌素类药敏折点，即PK/PD-MIC折点。（一）MIC值与临床结局关系 比较MIC值与ESBLs试验的关系证实，临床疗效与MIC及T＞MIC有关，与是否产ESBL无关，单纯的断定有没有药效，仅仅通过检测ESBL是不是阳性，是不合理的。这一新观点，也是ECCMID 提出来的。Paterson教授收集了2001～2004年的数据，显示： 1.所有病原菌产ESBLs； 2.所有病原菌对第三、第四代头孢菌素的MIC值均≤8μg/ml（按NCCLS折点均判为敏感）； 3.进一步细分MIC值并比较疗效 用头孢菌素单药治疗ESBL阳性、对头孢菌素敏感的42名菌血症病人临床结果： 从上表可以看出，MIC与疗效的关系更为密切，不能仅凭ESBL阳性来决定哪些药能用，哪些药不能用。 （二）CLSI的努力 基于以上这些情况，CLSI也做出了一些努力，以使得药敏试验的结果和疗效更加一致。 NCCLS2000年公布：由于临床实践证明许多口服抗生素对中度耐青霉素的肺炎链球菌是有效的，所以将它们对肺炎链球菌的折点值升高了，即将敏感率升高了一个档次。例如： 从上表可以看出，1999年以前，阿莫西林加棒酸，敏感度≤1，中介度为2，耐药性≥4。但实际上，病人往往用2ug时，效果就已非常好，所以现在将它的折点提高了，≤2是敏感，4是中介度，≥8是耐药。其他的抗生素如头孢克罗、头孢呋肟脂、头孢博肟、氯碳头孢也是同样。 如果按照PK-PD的差异来修改折点，对疗效的评价会更好。CLSI在2001年建立了肺炎球菌对头孢曲松和头孢噻肟的两种折点（脑膜炎、非脑膜炎）。在患有脑膜炎时，病人脑膜的通透性增加，药物容易通过脑膜，所以在制定折点时，要制定两个折点，一个是脑膜炎时候的，另一个是非脑膜炎时候的。 2006年，CLSI改变了万古霉素的判断标准。2005年的标准为，≤4是敏感，中介度是8～16，≥32是耐药。而2006年的标准为，≤2是敏感，中介度是4～8，≥16是耐药。 从上表可以看出，CLSI的药敏实验遵循的一个规则是最低风险原则，即不让一点危险发生在治疗的过程中。目前，耐万古霉素的金黄色葡萄球菌已经出现，并且大概有6株。以万古霉素已使用了40年的历史来看，出现这样的耐药不足为奇。从上表可以看出，在13981株金葡菌中，MIC≤0.5的占52.1 %，MIC＜1的占47.3 %，MIC＜2的占0.6 %，MIC＜4的只占0.001 %。只有极少数病人在MIC＜4的时候，治疗效果可能差一些，但为了保证治疗的风险性降到最低，将MIC的判断标准，给提高到了4。 二、抗真菌药物敏感试验的临床意义 近年来，特别是近五年来，真菌感染的人数越来越多，主要是因为低免疫的人群越来越多，如艾滋病患者、脏器移植的病人等都是真菌感染的高危人。因此对抗真菌药物敏感实验临床价值的研究应引起高度重视。1997年NCCLS（现为CLSI），公布了致病性酵母样真菌药敏标准：M27-A，在实际工作中，发现药品药敏试验结果与上述标准不一致，列举如下： （一）氟康唑 NCCSI标准规定，氟康唑MIC≤8为敏感、16～32为剂量依赖性敏感、≥64为耐药。有时实验室
药敏试验结果解读及临床应用
药敏试验结果解读及临床应用 一、药敏试验的目的 药敏试验是使用体外试验的方法检测细菌的耐药性，预测抗菌药物的临床治疗效果，在药物种类的选择上为临床医生提供帮助，以实施个体化治疗。 当前，“对症下药”已经变得难以奏效。首先，致病菌的种类发生了改变，一种疾病可以由多种病原菌所引起，包括致病菌和条件致病菌；其次，感染人群发生变化，从健康人群到老年人、长期使用激素、免疫抑制剂及放疗、化疗的人群，临床症状常常不典型；最后，早期不规使用抗生素，也会导致临床症状不典型。 与此同时，“对菌下药”又难以获得满意效果。耐药菌尤其是多重耐药菌的出现，使临床医师按照抗生素的作用机制选择1～2种抗菌药物不能覆盖常见的病原菌。因此，药敏试验成为临床工作的重要手段之一。 二、哪些细菌需要做药敏试验？ 对任何分离的可疑病原菌，若不能从该菌的种属特征可靠地推知其对抗菌药物的敏感性，就需要进行药敏试验。以下情况不必进行药敏试验：正常定植菌与感染的关系不明确时；污染菌；已知细菌对某种抗生素天然耐药；已知细菌对某种抗生素全部敏感。检验地带网三、药敏试验中药物的选择 主要根据细菌种类和抗生素作用机制选药。选择试验的药物应具有确切的临床疗效，试验药物的体外试验结果可以接受，并且试验药物具有代表性。 目前我国临床实验室采用美国国家标准化委员会（NCCLS）/美国临床实验室标准化研究所（Clinical and Laboratory Standards Institute , CLSI）药敏试验执行标准选药。NCCLS抗生素选择分组为： A组：为首选药物，作常规试验和报告。 B组：为首选药物，可与A组药物平行作药敏试验，但只在以下情况下进行选择性报告：细菌对A组抗生素耐药，病人对A组抗生素过敏，严重感染或多部位、多种细菌混合感染，要获得耐药性监测资料。 C组：为备选药物，作为替代或补充，在下列情况下使用：对一个或多个首选药耐药的地区流行株感染，对不常见菌感染的治疗，控制传染病的流行，获得耐药性监测资料。 U组：为备选药物，仅用于尿路感染的治疗。 四、药敏试验所采用的方法 常用的试验方法包括纸片扩散法、稀释法、自动化仪器法、E-TEST（浓度梯度法）。 五、细菌的主要耐药机制 1、产生水解酶，如β－酰胺酶、钝化酶。 2、细菌上与抗生素的结合靶位改变，如青霉素结合蛋白2a。 3、细菌表面通道蛋白改变，可以使其渗透性发生改变。 4、细菌产生泵出机制。 5、其他机制，如病原菌产生生物被膜、休眠状态等。 六、临床常见病原菌的归属和分类 临床常见病原菌主要包括以下四大类： 1、革兰阳性球菌：如葡萄球菌属、肠球菌属。 2、革兰阴性杆菌：如肠杆菌科细菌（大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠杆菌属、枸橼酸杆菌属）和非发酵菌（铜绿假单孢菌、不动杆菌）。
药敏实验流程
药敏实验 1.目的 提供细菌对抗菌药物的敏感试验的标准采集与操作方法，选择敏感药物用于临床。 2.范围 适用于实验室分离菌及常见菌的抗菌药物敏感试验。 3.采样对接人 服务专家针对病死猪进行解剖根据临床症状采集相应的病料。 4.设备和材料 无菌剪刀、无菌手术刀、无菌试管、无菌生理盐水、无菌平皿、三角烧瓶、酒精灯、接种环、打火机、75%酒精棉球、一次 性手套、营养琼脂培养基、M-H琼脂培养基或特殊培养基、0.5 标准麦氏比浊管、药敏纸片、待测病料、记号笔、眼科镊子、 2ml或5ml一次性注射器、试管架、超净工作台、恒温培养箱、带刻度直尺。 5.采样及送样操作 采集：病料新鲜度→无菌操作采样→有目的进行采样→保证组织完整性→独立存放到封口袋中并做好标记。 运输：采集好病料放入保温箱（泡沫纸箱+冰袋）中，冷藏即可，不可冷冻。 常见细菌分离采样部位 5.1样品的标识
要求有样品编号、样品名称、样品来源、样品数量、初步诊结果抽样日期及周龄、检测项目等内容。 5.2采样数量 猪一般采集3-5头， 6.细菌分离 在无菌操作条件下，将待测病料（含有典型临床症状部分）用平板划线分离法接种于普通营养琼脂培养基或特殊培养基上（血琼脂、SS琼脂、麦康凯琼脂、BP琼脂等），于37℃±1℃恒温培养箱中培养18-24h后备用。 细菌在培养基上生长特点 7.药敏试验操作步骤 7.1制作待检菌液 在超净工作台内挑取培养18-24h普通营养琼脂平板上的菌落，悬于含3ml无菌生理盐水的试管中。混匀后与比浊管比浊，调整浊度至0.5麦氏标准（相当于1-2*10 cfu/ml）。 7.2接种细菌 在超净工作台内用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余的菌液，均匀涂抹整个平板表面，最后沿平板内缘涂抹一周（用接种环密集划线法也可以）。
乳腺癌原代细胞培养及体外药敏试验的应用研究
[收稿日期] 2003-05-23;[修回日期] 2003-06-16[基金项目] 3本课题受四川省卫生厅2001年～2004年 度科学基金资助,课题号:川卫科教发2001(41) [作者简介] 魏寿江(1966-),男,重庆市永川人,讲师,医 学硕士。主要从事肿瘤治疗及基础研究。 乳腺癌原代细胞培养及体外药敏试验的应用研究3 魏寿江,王崇树,赵国刚,侯华芳 (川北医学院附属医院普外科,四川南充637000) [摘要] 目的:通过乳腺癌体外原代细胞培养,对乳腺癌近年常用的化疗药物进行敏感性检测,探讨乳腺癌在 不同化疗药物之间的敏感性差异,以期指导临床化疗。方法:通过体外肿瘤细胞药敏试验即M TT 法实验对82例乳腺癌新鲜标本进行体外肿瘤细胞原代培养及化疗药物的敏感性检测,并将其化疗药物的敏感性结果进行比较。结果:无论是单药组间比较,还是联合药物组间比较,其敏感性均无差异(P >0105)。乳腺癌对各单药的敏感性分别与对其相应的联合药物的敏感性比较,敏感性均有显著差异(P <0101)。其中,以52FU 加MMC 和52FU 加 M TX 的敏感性为好,敏感率分别为78105%、79127%。结论:体外肿瘤细胞原代培养及化疗药物的敏感性检测对 临床肿瘤化疗用药有很强的预见性,且能发现耐药病例;对乳腺癌患者进行化疗时,应尽量选择联合用药方案。 [关键词]肿瘤;乳腺癌;化疗药物;敏感性 [中图分类号]R73-35 [文献标识码]A [文章编号]1002-0281(2003)03-0132-03 Applied Study on The Primary Culture and Drug Sensitivity of H uman Breast C ancer Cells WEI Shou 2jiang ,WAN G Chong 2shu ,ZHAO Guo 2gang et al (Depart ment of General S urgery ,A f f iliated Hospital , N orth S ichuan Medical college ,N anchong ,S ichuan ,637000Chi na ) [Abstract]Objective :To investigate the sensitivities of different chemothera peutic drugs on breast carcinoma by the methed of primary culture of breast cancer cell ,to get the reference guidance for clinical treatment of breart cancer pa 2tients.Methods :The breast cancer cell were taken from the fresh s pecimems of 82cases with breast cancer ,and were cul 2tured in vitro primarily to test the drug sensitivity by M TT method.R esults :There was no significant difference in sensi 2tivity (P >0105)among the single drug groups and among the combined drug groups.The significant difference was ob 2served (P <0101)between a single drug and the combined drugs containing this drug.The 52Fu combined with MMC and the 52Fu combined with M TX showed optimal results with the sensitivity rates of 78.05%and 79.27%,res pectively.Conclusion :The primary culture and the drug sensitivity test of the breast cancer cells in vitro gave some guidance for the clinic chemotherapy of the patients with breast cancer.The results showed that combined chemothera py should be selected for these patients. [K ey w ords]Breast Cancer ;Chemotherapeutic Drug ;Sensitivity 乳腺癌是实体瘤中应用化疗最有效的肿瘤之一,化疗是乳腺癌综合治疗的重要组成部分。特别是浸润性乳腺癌,术后应用化学药物辅助治疗,可以 改善其生存率[1]。由于乳腺癌对化疗药物的敏感性存在个体差异,因而如何提高化疗药物对肿瘤的疗效以及降低不良反应是当前肿瘤学界一个重要的课题。本课题组采用M TT 法实验对我科2001年1月～2003年4月收治、经手术及病理确诊的82例乳腺癌患者的标本进行肿瘤细胞原代培养,用近年临床乳腺癌常用的抗癌药物及不同的组合药物方案对其进行敏感性检测,为临床乳腺癌患者选择合理、高效的化疗方案提供客观依据。 2 31魏寿江等1乳腺癌原代细胞培养及体外药敏试验的应用研究