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组织非特异性碱性磷酸酶活力的原位红外光谱检测-19届福州

组织非特异性碱性磷酸酶活力的原位红外光谱检测-19届福州
组织非特异性碱性磷酸酶活力的原位红外光谱检测-19届福州

收稿日期:2016-04-30 修订日期: xxxx

基金项目:国家自然科学基金委项目(21373101)、吉林省教育厅“十三五”科研项目(2016137)、吉林化工学院博士启动基金(2016002)资助。作者简介:任重远,原吉林大学博士生;现工作于吉林化工学院讲师 *通讯联系人E-mail: yqwu@https://www.wendangku.net/doc/7b1440245.html,

组织非特异性碱性磷酸酶活力的原位红外光谱检测

任重远1, 3,Saida Mebarek 2,René Buchet 2,吴玉清3*

1

吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林,132022

2

Laboratory ODMB UMR 5246, UniversitéLyon I, Villeurbanne France 69622

3

吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室,长春,130012

摘要 本文以孵育17天的小鸡胚胎中,富含组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的细胞外微结构——基质囊泡(MVs)作为研究模型,利用焦磷酸盐(PP i )作为TNAP 酶的天然底物,在近生理条件下,以红外(IR)光谱为监测工具,原位检测MVs 水解PP i 的反应过程,根据红外谱图特征吸收峰的变化,计算TNAP 酶活力值。

关键词:基质囊泡;生物底物;IR 光谱;原位检测;酶活力 中图分类号:O657.3 文献标识码:A 文章编号:

组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)是人体骨骼矿化形成的生物标志物,其酶活力的高低能够直接反映矿化形成能力的强弱。目前,测试TNAP 酶活力的主要方法是利用其外源性荧光底物——4-硝基苯磷酸(p -NPP)、在碱性条件下(pH=10.4)监测405 nm 处荧光强度来检测TNAP 的酶活力值。但是,这种测试条件与人体生理环境下的pH 值相距甚远。因此,开发一种在生理条件下、以生理化合物作为检测底物的快速、经济的检测碱性磷酸酶活性的方法,将作为热点研究。在骨骼中,具有矿化能力的成骨细胞、成牙细胞以及肥大的软骨细胞等,能够将含有高TNAP 活性表达的基质囊泡(MVs )释放至细胞外环境中,并从而引发矿化形成[1];MVs 是细胞外微观结构,能够为无机磷酸离子及钙离子提供沉积位点,是矿化产物羟磷灰石(HA )晶体形成的场所,因此MVs 也可视为新骨骼产生矿化的基本单位[2]。本文选择孵育17天的小鸡胚胎中所提取并纯化的细胞外微结构——基质囊泡(MVs),并将其作为研究模型,红外光谱技术为检测工具,利用焦磷酸盐(PP i )作为TNAP 酶的天然底物,在近生理条件下,监测MVs 水解PP i 的反应过程。同时,根据红外谱图特征吸收峰的变化,计算TNAP 酶活力值。

PP i 作为TNAP 酶的底物,水解过程中产生2个无机磷酸盐(P i )分子,因此,我们首先对反应过程中的反应物(PP i )及产物(P i )进行红外表征。实验结果显示,在红外指纹区(1300-900 cm -1),相同浓度(50 mM)的PP i 与无

P i 的红外光谱谱图存在明显的差异,而且它们相互之间不发生重叠。PP i 在1107 cm -1位置存在一个明显特征峰,而P i 在1076及990 cm -1分别存在两处明显的吸收峰,这是由于磷酸盐分子中HPO 42-反对称伸缩振动与对称伸缩振动所引起的[3]。

在37 °C ,pH 8.0反应条件下,利用红外光谱技术对MVs 水解PP i 过程实时监测,每隔5min 红外扫描一次,并持续60分钟。红外光谱检测结果显示,4000-1300 cm -1的光谱范围在整个水解过程中并未明显特征峰的变化。然而,在1300-900 cm -1的红外区域内却发生了明显的特征峰的变化(Fig.1)。

Fig. 1 Difference IR spectra of MVs with PP i (spectrum recorded at the indicated time minus that recorded immediately). Significant variation in the intensity of

absorption bands of PP i located at 1120-1100 cm-1 as well as other variations attributed to P i at 1075-1080 cm-1and 990 cm-1 were observed.

如红外差谱结果所示(Fig.1),在60分钟反应内,作为底物的PP i在1107 cm-1处不但发生了明显的强度减弱,还产生了一定的红移(1120 cm-1);与此同时,P i在1070-1080 cm-1范围内及990 cm-1位置的红外吸收峰强度随时间逐渐升高。PP i在1120 cm-1产生负吸收峰,而P i在1076 cm-1及990 cm-1两处同时产生正吸收峰。这说明,MVs能够有效水解PP i并同时产生其水解产物P i。这种连续、动态的反应过程,通过红外光谱监测能够很清晰地展示出来。基于以上实验结果,我们对TNAP酶活力进行分析。利用1100-1120 cm-1、1070-1080 cm-1及990 cm-1三处红外特征吸收峰的变化,根据Beer-Lambert 定律(A = ε?l?C),我们可以利用光吸收强度的变化,计算出水解反应过程中反应物及产物的浓度变化,而单位时间内反应物及产物的浓度变化,即反映了TNAP水解能力(酶活力值)。通过对反应物PP i及水解产物P i的摩尔吸光系数的计算,我们获得了不同蛋白浓度MVs下TNAP酶活力的比活值(Table. 1)。(ε-PPi-1107= 2158 ± 211 M-1.cm-1, ε-Pi-1080= 1215 ± 131 M-1.cm-1, ε-Pi-990= 443 ± 50 M-1.cm-1)

Table. 1Specific activities of TNAP in the different concentration of MVs.

MVs

mg/mL

Specific Activity

U/mg

1 1.484

1.5 1.368

2 1.566

2.5 1.83

然而,原位红外检测TNAP酶活力方法在实际应用过程中仍存在局限性。例如,以α-G-1-P、β-GP等生物底物进行水解时,峰位选取不准确和谱带重叠将给酶活力的测试结果带来偏差。因此,将数据进行二维相关分析[4],可对计算结果校准改进。

参考文献

[1] Anderson HC. The role of matrix vesicles in physiological and pathological calcification.Curr Opin

Orthop.2007 18, 428.

[2] Anderson HC, Garimella R, Tague SE. The role of matrix vesicles in growth plate development and

biomineralization. Front Biosci. 2005 10, 822.

[3] Ren ZY, Do LD, Bechkoff G, et al Direct determination of phosphatase activity from physiological substrates

in cells. PLoS One. 2015,10, e0120087.

[4] Noda I, Ozaki Y, Two-dimensional correlation spectroscopy-applications in vibrational and optical

spectroscopy. Wiley Press, Chichester, 2004.

In Situ Infrared Spectroscopic Determination of Tissue Non-Specific Alkaline Phosphatase Activity

REN Zhongyuan1, 3,Saida Mebarek 2,René Buchet 2, WU Yuqing 3*

1.College of Biology and Food Engineering, Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 132022, China

https://www.wendangku.net/doc/7b1440245.html,boratory ODMB UMR 5246, UniversitéLyon I, Villeurbanne, 69622, France

3. State Key Laboratory of Supramolecular Structure and Materials, Jilin University, Changchun, 130012, China

Abstract In this work, we chose matrix vesicles as a modeling which extracted from femurs of 17-day-old chicken embryo chondrocytes was rich in tissue nonspecific alkaline phosphatase (TNAP). To assay TNAP activity, we demonstrated the ability of IR spectroscopy to directly determine in situ a phosphatase activity using natural substrates under near physiological condition.

Keywords Matrix Vesicles; Natural Substrate; Infrared Spectroscopy; In Situ Assay; Enzymatic activity * Corresponding author

组织及血液碱性磷酸酶(AKP ALP)活性检测试剂盒说明书 微量法

组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒说明书微量法 货号:BC1595 规格:100T/48S 产品说明: AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。在碱性环境中,AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。 自备仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。试剂组成和配制: 试剂一:液体×1瓶,4℃保存。 试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存。 试剂三:液体×1瓶,4℃避光保存。 试剂四:液体×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用。 标准品:液体×1支(EP管中),2μmol/mL酚标准液,4℃保存。 操作步骤: 一、粗酶液提取: 1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂 一)进行冰浴匀浆,4℃、10000rpm离心10min,取上清液待测。 2.血液可直接测定,或者适当稀释后测定。 二、测定步骤: 1.分光光度计预热30min以上,调节波长到510nm,蒸馏水调零。 2.试剂三置于37℃水浴中预热30min以上。 3.空白管:取EP管,加入4μL蒸馏水,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;

加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A空白管。 4.标准管:取EP管,加入4μL标准品,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min; 加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A标准管。 5.对照管:取EP管,加入40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min;加入试剂 四120μL,混匀;最后加入4μL上清液,混匀后于510nm测定吸光度,记为A对照管。 6.测定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL试剂二,40μL试剂三,混匀后置于37℃水浴中保温15min; 加入试剂四120μL,混匀后于510nm测定吸光度,记为A测定管。 其中标准管和空白管只需做一管,测定管和对照管每个样均需做。 三、AKP/ALP活性计算: a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下 1.血液中AKP/ALP活力计算 活性单位定义:37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚定义为一个活性单位。 AKP/ALP活力(U/mL)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总]÷V样×V样总÷T=6.8×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) C标准品:2μmol/mL;V反总:反应体系总体积(mL),1020μL=1.02mL;V样:加入反应体系中上清液体积(mL),0.020mL;V样总:1mL;T:反应时间(min),15min。 2.组织中AKP/ALP活性计算 (1)按蛋白浓度计算 活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1μmol酚。 AKP/ALP(U/mg prot)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总]÷(Cpr×V样)÷T = 6.8×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr (2)按样本质量计算 活性单位定义:37℃中每克样品每分钟催化产生1μmol酚。 AKP/ALP(U/g)=[C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总]÷(V样÷V样总×W)÷T

碱性磷酸酶活性测定

碱性磷酸酶活性测定 磷酸酶 磷酸酶能酶促有机磷化合物的水解。试验表明,土壤微生物对于土壤含磷有机物的矿化起着主要的作用;某些高等植物的根系也有磷酸酶活性。土壤的磷酸酶活性可以表征土壤的肥力状况(特别是磷的状况)。 基本原理: 土壤磷酸酶活性的测定常用各种磷酸酯作为基质。应用得最多的是酚酞磷酸酯、苯磷酸酯、甘油磷酸酯、ɑ-或?-萘磷酸酯和p-硝基苯磷酸酯等的水溶性钠盐。当它们被酶促水解时,能析出无机磷和基质的有机基团。因此磷酸酶活性的测定时测定基质水解后的无机磷或酚的部分。这里介绍的方法是测定基质水解时生成的酚量。该法可用于测定各种磷酸酶的活性:碱性磷酸酶(用PH10的硼酸盐缓冲液),中性磷酸酶(用PH7.0的柠檬酸盐缓冲液),酸性磷酸酶(用PH5.0的乙酸盐缓冲液) 试剂配制: 1)甲苯 2)0.5% 磷酸苯二钠 3)硼酸盐缓冲液(PH9.6与PH10.0):称取12.404g硼酸(H3BO3)溶于700ml 去离子水,用稀NaOH溶液调节至PH10.0,用去离子水稀释至1000ml 4) 氯代二溴对苯醌亚胺试剂:取0.125g 2,6-二溴苯醌氯酰亚胺,用10ml 96%的乙醇溶解,贮于棕色瓶中,存放在冰箱里。保存的黄色溶液未变褐色之前均可使用。 5)标准溶液:(a)母液:1g酚溶于蒸馏水中,并稀释至1000ml,溶液保存在暗色瓶中;(b)工作液:10ml溶液(a)稀释至1000ml(1ml含10ug酚)6)0.3%硫酸铝溶液 标准曲线绘制: 取0,1,3,5,7,9,11和13ml酚工作液(b),置于50ml容量瓶中,每瓶加入5ml缓冲液和4滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂,显色后稀释至刻度,30min后比色测定。以光密度为纵坐标,浓度为横坐标绘成标准曲线。 操作步骤: 1)取5g风干土置于200ml三角瓶中,用2.5ml甲苯处理 2)处理15min后,加入20ml 0.5%磷酸苯二钠 3)将反应混合物置于37℃恒温箱中,培养24h后,在培养液中加100ml 0.3%硫酸铝溶液用致密滤纸过滤。 4) 无土对照:不加土样,其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度,整个实验设置一个对照 5)无基质对照:对每个土样,设置以等体积的水代替基质,其他操作与样品实验相同。

骨碱性磷酸酶250的平衡方法

如对您有帮助,可购买打赏,谢谢 骨碱性磷酸酶250的平衡方法 导语:骨碱性磷酸酶250是关于我们身体成长的指标,我们应该尽可能的去平衡骨碱性磷酸酶250的值,可能我们大家对于这种问题还不是很熟悉吧,我们这 骨碱性磷酸酶250是关于我们身体成长的指标,我们应该尽可能的去平衡骨碱性磷酸酶250的值,可能我们大家对于这种问题还不是很熟悉吧,我们这方面的内容关注的比较少,但是骨碱性磷酸酶250却与我们每天的生活息息相关,但是现在很多人出现了骨碱性磷酸酶250不平衡的情况,如果出现问题就会威胁我们的身体健康,所以我们一定要想办法平衡它,那么骨碱性磷酸酶250怎么平衡呢,下面就让我们跟随文章来一起了解一下吧。 平衡方法: 1.碱性磷酸酶升高主要与肝脏和胆囊疾病有关,但是任何检查项目判断疾病都是要相互联系的,不可单一来看。如果仅仅是ALP升高,且升高幅度不大,转氨酶、胆红素、GGT、B超等都正常的话,基本没有什么大碍。小孩母亲是大三阳,有可能在怀孕或生产过程中将病毒传染给孩子,小孩如果也是乙肝病毒携带者的话,只要转氨酶、胆红素正常,B超没问题就可以不予治疗,只要做到每半年检查肝功能、B 超一次即可。肝功能正常的乙肝病毒携带者是不需要任何治疗的,平时做到饮食均衡,不要熬夜,不要喝酒,不要服用有损害肝脏副作用的药物,心情开朗就可以避免发病。但由于免疫激活,有些人到一定年龄后就可能发生肝炎,这时才需要服用护肝、抗病毒药物治疗。 2.如果是生理性的原因,就属于正常现象,大家不必担心。如果是病理性的原因,患者首先要弄清楚是哪种病引起的,并在医生的指导下积极主动地进行治疗。乙肝患者碱性磷酸酶偏高,主要还是由于乙 预防疾病常识分享,对您有帮助可购买打赏

骨源性碱性磷酸酶

骨源性碱性磷酸酶 骨源性碱性磷酸酶即为NBAP. 骨碱性磷酸酶(NBAP)是成骨细胞的表型标志物之一,它可直接反映成骨细胞的活性或功能状况,是近年来主要用于小儿佝偻病早期诊断和亚临床鉴别的特异性参考指标,也是目前用于评价人体骨矿化障碍的最佳指标。 骨源性碱性磷酸酶是由骨质中分泌出来,当骨头中钙盐沉淀不足时,该酶分泌增多,骨中钙盐充足时就分泌减少,所以用来帮助检查有无钙吸收不足。 骨碱性磷酸酶参考值≤200单位/L 检测小儿血中骨源性碱性磷酸酶催化活性,籍以筛查或辅助诊断因钙营养不良引起的骨钙化障碍或其他原因引起的代谢性骨病。 骨碱性磷酸酶参考值如下: 正常水平≤200u/L 预防水平 250u/L 医疗水平 300u/L 你好!骨源性碱性磷酸酶是用于检测佝偻病的一个指标,当缺少维生素D和钙时,骨头钙化不好时,它会升高,但一般明显升高才有诊断意义。你孩子的结果只比参考值的上限(200)高10,可以是实验误差造成,也可以是佝偻病的早期造成,是不必过度担心,补充维生素D和钙剂,过些日子再复查一次,很可能就正常了。 追问 昨天医生给我宝宝开了龙牡浸在壮骨颗粒和复方三维右酸钙糖浆,可是我的宝宝复方三维右酸钙糖浆吃不下,有没有什么别的药让他可以吃的 回答 你好!如果我没有记错的话,龙牡壮骨颗粒中已含有维生素D和钙,你的孩子缺维生素D和钙并不重,已经够了,两种都吃恐怕不是很必要。 补维生素d 最天然的方法是,多晒太阳,晒太阳可帮助身体合成维生素d ,可以说是没副作用的补VD方法 另外,就是吃含补维生素d 多的食物做成的粥或汤, 而通过食物摄取维生素D是不会引起中毒的。含量较多的食物有大马哈鱼、红鳟鱼、鳕鱼肝油、比目鱼肝油、奶油、鸡蛋、鸡鸭肝等动物肝脏以及牛奶等,或是买回维生素d的保健品进行补VD

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP微板法)

碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 微板法) 产品简介: 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase ,简称ALP 或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。 Leagene 碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP 微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP 比色法,其检测原理是Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在碱性磷酸酶的作用下生成p -nitrophenol 。在碱性条件下p -nitrophenol 转变成醌式结构,呈较深的黄色,产物黄色越深,说明碱性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过分光光度比色法测定处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酶活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 产品组成: 自备材料: 1、 水浴锅或恒温箱 2、 96孔板 3、 酶标仪 操作步骤(仅供参考): 1、 配制显色工作液: 取出1支pNPP ,恢复至室温后溶解于ALP Assay buffer ,混匀, 冰上预冷备用。新配制的显色工作液应在6h 内用完。 2、 配制标准品工作液:取出p -nitrophenol(10mM)恢复至室温后,取10μl 溶解于190μ 编号 名称 TE0002 100T Storage 试剂(A): ALP Assay buffer 15ml 4℃ 试剂(B): pNPP 2支 -20℃ 避光 试剂(C): p -nitrophenol(10mM) 0.1ml -20℃ 避光 使用说明书 1份

骨碱性磷酸酶偏高的治疗方法

如对您有帮助,可购买打赏,谢谢骨碱性磷酸酶偏高的治疗方法 导语:骨碱性磷酸酶是关于我们身体成长的指标,我们应该尽可能的去平衡骨碱性磷酸酶的值,可能我们大家对于这种问题还不是很熟悉吧,我们这方面的 骨碱性磷酸酶是关于我们身体成长的指标,我们应该尽可能的去平衡骨碱性磷酸酶的值,可能我们大家对于这种问题还不是很熟悉吧,我们这方面的内容关注的比较少,但是骨碱性磷酸酶却与我们每天的生活息息相关,但是现在很多人出现了骨碱性磷酸酶偏高的情况,如果出现问题就会威胁我们的身体健康,所以我们一定要想办法平衡它,那么骨碱性磷酸酶偏高怎么平衡呢,下面就让我们跟随文章来一起了解一下吧。 平衡方法: 1.碱性磷酸酶升高主要与肝脏和胆囊疾病有关,但是任何检查项目判断疾病都是要相互联系的,不可单一来看。如果仅仅是ALP升高,且升高幅度不大,转氨酶、胆红素、GGT、B超等都正常的话,基本没有什么大碍。小孩母亲是大三阳,有可能在怀孕或生产过程中将病毒传染给孩子,小孩如果也是乙肝病毒携带者的话,只要转氨酶、胆红素正常,B超没问题就可以不予治疗,只要做到每半年检查肝功能、B 超一次即可。肝功能正常的乙肝病毒携带者是不需要任何治疗的,平时做到饮食均衡,不要熬夜,不要喝酒,不要服用有损害肝脏副作用的药物,心情开朗就可以避免发病。但由于免疫激活,有些人到一定年龄后就可能发生肝炎,这时才需要服用护肝、抗病毒药物治疗。 2.如果是生理性的原因,就属于正常现象,大家不必担心。如果是病理性的原因,患者首先要弄清楚是哪种病引起的,并在医生的指导下积极主动地进行治疗。乙肝患者碱性磷酸酶偏高,主要还是由于乙 预防疾病常识分享,对您有帮助可购买打赏

碱性磷酸酶测定试剂盒注册技术审查指导原则(2016年修订版)

附件1 碱性磷酸酶测定试剂盒注册 技术审查指导原则 (2016年修订版) 本指导原则旨在指导注册申请人对碱性磷酸酶测定试剂盒注册申报资料的准备及撰写,同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。 本指导原则是对碱性磷酸酶测定试剂盒的一般要求,申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用,若不适用,需具体阐述理由及相应的科学依据,并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件,不涉及注册审批等行政事项,亦不作为法规强制执行,如有能够满足法规要求的其他方法,也可以采用,但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的,随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展,本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、适用范围 碱性磷酸酶测定试剂盒是指基于分光光度法原理对人血

清、血浆或其他体液中的碱性磷酸酶活性进行体外定量测定的试剂。本指导原则适用于进行产品注册和相关许可事项变更的产品。 碱性磷酸酶活性的测定方法目前主要有连续监测法和比色法两类: 1.连续监测法(磷酸对硝基苯酚底物法) 碱性磷酸酶催化水解磷酸对硝基苯酚(4-NPP),生成对硝基苯酚(4-NP),在特定波长处监测吸光度变化速率,可计算碱性磷酸酶活性。 2.比色法(磷酸苯二钠底物法) 碱性磷酸酶催化水解磷酸苯二钠,生成游离酚,酚与4-氨基安替比林结合,经铁氰化钾氧化生成红色的醌衍生物,在特定波长处监测吸光度值,可计算碱性磷酸酶活性。 从方法学考虑,本文主要指以碱性磷酸酶水解底物引起特定产物的吸光度的改变对碱性磷酸酶活性进行定量测定的体外诊断试剂,不包括干化学和酶联免疫检测试剂。 依据《体外诊断试剂注册管理办法》(国家食品药品监督管理总局令第5号)、《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》(食药监械管〔2013〕242号),碱性磷酸酶检测试剂属于酶类检测试剂,管理类别为Ⅱ类,分类代号为6840。 二、注册申报资料要求

骨源性碱性磷酸酶与血钙测定结果对比

骨源性碱性磷酸酶与血钙测定结果对比 目的对比分析骨源性碱性磷酸酶与血钙测定结果。方法指定一名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检查人员完成80例佝偻病患儿骨源性碱性磷酸酶及血钙检测,记录患儿两种检测结果,给予统计学分析后得出结论。结果80例佝偻病患儿经不同方法检测后,骨源性碱性磷酸酶检测结果准确率高达97.50%,显著高于血钙检测准确率73.75%,对比结果具有统计学意义(P<0.05)。结论骨源性碱性磷酸酶与血钙检测结果均可作为佝偻病诊断依据,但血钙误诊率较高,而骨源性碱性磷酸酶检测准确率较高,临床医生应根据患儿实际情况进行综合判断,从而提高患儿诊断正确率及治疗效果,保障其预后及生活质量。 标签:骨源性碱性磷酸酶;血钙;对比 佝偻病是威胁儿童身心健康的严重疾病,发病原因主要为机体中钙营养严重丢失,目前主要通过临床实验室及影像学检查诊断此类疾病。本文将对我院自2013年1月1日~12月31日前来就诊的80例佝偻病患儿给予临床研究,从而对比分析骨源性碱性磷酸酶与血钙测定结果,为提高佝偻病患儿检出率提供可靠依据,现总结如下。 1资料与方法 1.1一般资料80例佝偻病患儿中男童49例、女童31例,年龄1~6岁,平均年龄( 2.98±1.02)岁。 1.2方法 1.2.1纳入与排除标准①经临床检查符合世界卫生组织(WHO)制定的佝偻病诊断标准;②无肝脏、肾脏、心脏等机体重要器官严重器质性疾病;③无胃肠道疾病、血液系统疾病、恶性肿瘤疾病、精神类疾病、免疫系统疾病、内分泌系统疾病;④体温正常,无骨折、强直性骨关节炎等疾病;⑤对本次研究具有知情权。 1.2.2研究方法指定一名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检查人员完成80例佝偻病患儿骨源性碱性磷酸酶及血钙检测,记录患儿两种检测结果,给予统计学分析后得出结论。抽取患儿静脉末梢血液2ml作为检测样本,骨源性碱性磷酸酶检测方法为碘硝基四氮唑紫法,由北京中生金域诊断技术有限公司提供ZS0iso APNB试剂盒,以检测结果不大于200U/L为阴性,反之为阳性;血钙采用偶氮砷法检测,由深圳迈瑞公司提供BS-800生化分析仪及其配套试剂,以检测结果不小于1.55mmol/L为阴性,反之为阳性。 1.3统计学方法使用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析,计量资料采用t检验(由x±s表示),计数资料采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

骨型碱性磷酸酶在骨肿瘤诊断中的价值

作者单位:100044北京大学人民医院检验科[葛艳玲(现工作单位100035北京积水潭医院检验科)] 通讯作者:张正,电子信箱:zhangzh4768@https://www.wendangku.net/doc/7b1440245.html, ?临床实验诊断研究? 骨型碱性磷酸酶在骨肿瘤诊断中的价值 葛艳玲 张正  【摘要】 目的 检测恶性骨肿瘤、良性骨肿瘤及转移性骨肿瘤患者血清中的总碱性磷酸酶 (T ALP)和骨型碱性磷酸酶(BALP)活性,以观察T ALP和BALP在骨肿瘤的鉴别诊断中的价值及在监 测恶性骨肿瘤治疗中的作用。方法 对2004年积水潭医院骨肿瘤科收治的40例恶性骨肿瘤、40例 良性骨肿瘤及14例转移性骨肿瘤患者,采用法国临床化学会推荐的速率法测定血清T ALP及酶联免 疫吸附(E L I S A)方法测定BALP水平。结果 恶性骨肿瘤组的T ALP活性为(325155±356136)U/L, BALP活性为(177119±240167)U/L,与同龄对照组T ALP(120170±70159)U/L,BALP(61130± 44145)U/L比较有统计学意义(P<0105)。转移性骨肿瘤组的T ALP(100114±35139)U/L,BALP (32193±15168)U/L,与同龄对照组T ALP(57164±11106)U/L,BALP(19192±7153)U/L比较有 显著性统计学意义(P<0101)。而良性骨肿瘤组与同龄对照组相比无统计学意义(P>0105)。同时 恶性骨肿瘤与其他两组比较也都有统计学意义(P<0101),并且恶性骨肿瘤组患者化疗前后的结果 也有统计学意义(P<0105)。结论 血清T ALP和BALP是反映骨肿瘤骨代谢的一个灵敏而简便的 生化指标,并对骨肿瘤的鉴别诊断及疗效观察具有一定的临床意义。作为骨肿瘤的检测指标,血清 BALP比T ALP更为特异和敏感。 【关键词】 碱性磷酸酶; 骨肿瘤 Appli ca ti on of bone2spec i f i c a lka li n e phospha t a se i n bone tu m or GE Yan2ling,ZHAN G Zheng1 D epart m ent of C linical L aboratory,B eijing U niversity Renm ing Hospital,B eijing100044,China(G E Yan2ling, D epart m ent of C linical L aboratory,B eijing J ishuitan Hospital,B eijing100035,China) Corresponding author:ZHAN G Zheng,Em ail:zhangzh4768@yahoo.co https://www.wendangku.net/doc/7b1440245.html, 【Abstract】 O bjecti ve To deter m ine the seru m levels of t otal alkaline phos phatase(T ALP)and bone2s pecific alkaline phos phatase(BALP)in patients with malignant bone tu mor,benign bone tu mor and malignant tu mor metastasized t o the bone and t o exp l ore the value of T ALP and BALP in identifing and diagnosing of bone tu mor,als o in monit oring the effect of therapy about malignant bone tu mor1M ethods  Seru m T ALP and BALP in40malignant bone tu mor patients,40benign bone tu mor patients and14malignant tu mor metastasized t o the bone patients in2004were studied1Seru m T ALP was assayed by SF BC rate method and BALP by enzy me linked i m mu mo abs orbence assay(E L I S A)1Results The seru m levels of T ALP and BALP were(325155±356136)U/L and(177119±240167)U/L res pectively in malignant bone tu mor gr oup were significantly higher than those of the sa me age contr ol gr oup(120170±70159)U/L and (61130±44145)U/L(P<0105)1The seru m levels of T ALP and BALP were(100114±35139)U/L and (32193±15168)U/L res pectively in malignant tu mor metastasized t o the bone gr oup were als o significantly higher than those of the sa me age contr ol gr oup(57164±11106)U/L and(19192±7153)U/L(P<0101) 1The seru m levels in benign bone tu mor gr oup were higher than those of the sa me age contr ol gr oup,but the t w o gr oup s have no significantly statistics(P>0105)1A t the sa me ti m e,the seru m levels in malignant bone tu mor gr oup were significantly higher than those of benign bone tu mor gr oup and malignant tu mor metastasized t o the bone gr oup(P<0101)1The seru m levels of T ALP and BALP in p re2therapy malignant bone tu mor gr oup were significantly higher than those of post2therapy(P<0105)1Conclusi on Seru m T ALP and BALP were sensitive and convenient bi oche m ical indexs which reflected metabolis m of patients of bone tu mor1Moreover,they have clinical i m portance f or differential diagnosis and observati ons of therapy1 A s an index of bone tu mor,seru m BALP was more s pecific and sensitive than T ALP1 【Key words】 A lkaline phos phatase; Bone tu mor 骨肿瘤虽不是常见病,但在骨科领域内占有重 要地位。骨肿瘤的诊断必须是临床、影像和病理三

婴幼儿佝偻病早期骨碱性磷酸酶检测的临床意义

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/7b1440245.html, 婴幼儿佝偻病早期骨碱性磷酸酶检测的临床意义 作者:黄开明杨波 来源:《中外医学研究》2013年第30期 【摘要】目的:研究骨碱性磷酸酶(BALP)在婴幼儿佝偻病早期诊断中的临床意义。方法:对142例佝偻病患儿进行BALP检测,同时设立正常对照组,分析佝偻病组血清钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)测定值,比较两组X线、BALP检测结果。结果:早期佝偻病患儿血BALP阳性检出率达89.0%,与血钙、磷、ALP阳性率比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:血清BALP的检测有利于婴幼儿佝偻病的早期诊断、早期发现和早期治疗,值得临床普及和推广。 【关键词】佝偻病;骨碱性磷酸酶(BALP);婴幼儿;临床意义 中图分类号 R726.8 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2013)30-0062-02 骨碱性磷酸酶(bone alkalin ephosphatase,BALP)是碱性磷酸酶同工酶亚型的一种[1]。 佝偻病亚临床状态时,骨碱性磷酸酶可出现升高,其升高程度与佝偻病的活动程度具有相关性[2]。文献[3-4]报道,当婴儿体内维生素D缺乏时,骨盐沉积不良,骨形成发生障碍,成骨细胞功能活跃,骨碱性磷酸酶合成增多并释放入血,造成血中BALP活性增高,且血清BALP的变化比骨骼的影像变化更早出现。测定BALP活性对于筛查、诊断、预防和治疗小儿佝偻病有巨大的临床价值。本研究对2008年6月-2012年7月来笔者所在医院就诊的142例佝偻病患儿进行骨碱性磷酸酶活性测定,同时测定血清钙、磷、ALP,进行X线检查,设立正常对照组,分析相关数据,研究结果用以早期阶段防治婴幼儿佝偻病,现分析报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 根据我国卫生部1986年发布的婴幼儿佝偻病防治方案全国统一标准[5],共收集笔者所在医院儿科2008年6月-2012年7月符合标准的佝偻病患儿142例,其中男82例,女60例;0.05),具有可比性。 1.2 方法 对佝偻病患儿组和对照组分别进行BALP测定,实验室检查血清钙、磷、ALP浓度,并进行左腕部X线检查。

骨型碱性磷酸酶

骨型碱性磷酸酶的检测方法和临床应用 文章来源:医学网发表时间:2007-07-04 09:51:00 关键字:磷酸酶 碱性磷酸酶(ALP,EC3. 1.3.1)是在碱性条件下水解多种磷酸酯并具有转磷酸基作用的一组酶,包括由不同结构基因编码的小肠、胎盘、生殖细胞和非特异型4种同工酶。前三者基因定位于染色体重2q34-37的相邻位点,后者基因定位于染色体的1q36-34之间,其中非特异性型碱性磷酸酶在基因表达后经过不同的修饰形成肝、肾、骨等次级同工酶。对这些同工酶的理化性质、分子生物等特性、作用机制的深入研究以及准确的定量测定将有助于其在临床上的应用。本文拟就年来国际上常用的骨型碱性磷酸酶(BAP)研究方法及其在临床上的应用研究进展作一综述。 1骨型碱性磷酸酶的特性 骨型碱性磷酸酶是成骨细胞的一种细胞外酶,为糖蛋白,分子量约为12000道尔顿。该酶在细胞内合成时新生的酶蛋白先在内质网糖基化,再通过高尔基体转运到细胞膜表面,通过多糖链与磷酯酰肌醇相连嵌合到细胞膜的外浆膜。在多糖-肌醇磷酸特异水解酶的作用下,骨型碱性磷酸酶能被释放到血循环中。骨型碱性磷酸酶在机体的生理功用主要是在成骨过程中水解磷酸酯,为羟磷灰石的沉积提供必须的磷酸;同时,水解焦磷酸盐,解除其对骨盐形成的抑制作用,有利于成骨过程。骨型碱性磷酸酶在体内的其他生化功用有待进一步的阐明。 2骨型碱性磷酸酶的检测

人血清中含有的碱性磷酸酶同工酶分别来自骨骼、肝脏、小肠和胎盘组织(在妊娠时)。胎盘型和小肠型碱性磷酸酶同工酶的活性能相对容易被区分,而区别骨型和肝型这两种同工酶活性就相当困难,因为这两种同工酶来源于同一基因,其动力学性质、电泳迁移率和其他理化性质均十分相似,且相互间有交叉免疫反应,目前鉴别和定量测定骨型碱性磷酸酶的方法可以分为两大类:电泳法和非电泳法。 电泳法主要利不同的同工酶之间物理性状、分子大小及荷电量的不同而进行。根据所用的支持特和操作的方法可分为:醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和亲和电泳等。其中以等电聚焦电泳和亲和电泳的分辨效果较好。等电聚焦电泳分辨率高特别适合次级同工酶的分离。Sinaha等报告的一种固相pH梯度等电聚焦电泳以聚丙烯酰胺为载体,用两性电解质制成固定的pH梯度凝胶,避免了由于不稳定的pH梯度而引起的所谓“阴极漂移”现象。该法可将等电点准确到小数点后两位并把正常血清的10条酶带压缩在pH3.90~4.79范围。Rosalki等建立的亲和电泳法是利用麦胚植物血凝素(WGA)能特异地和骨型碱性磷酸酶结合形成WGA-骨型碱性磷酸酶复合物,该复合物在电场中不泳动或泳动很慢,从而将骨、肝型碱性磷酸酶清楚地分开。该方法简便,重复性好,骨型碱性磷酸酶的批内与批间CV分别为3.2%和5.2%。亲和电泳的分离效果与WGA的浓度有关,其最适浓度随电泳条件而异。因此,采用不同的电泳载体和不同的缓冲液时均应重新评价WGA的最适用量。

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒使用说明

碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法) 货号:G5610 有效期:6个月有效。 产品内容: 产品规格 试剂(A):ALP Assay buffer 2.5ml 试剂(B):ALP显色液 2.5ml 试剂(C):显色基液7.5ml 试剂(D):Phenol标准(1mg/ml)1ml 试剂(E):ddH2O1ml 产品说明: 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。 碱性磷酸酶检测试剂盒(磷酸苯二钠微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用磷酸苯二钠比色法,其检测原理是磷酸苯二钠在碱性条件下,可在碱性磷酸酶的作用下生成游离酚和磷酸。在碱性条件下酚与氨基安替比林结合,并经氧化生成红色醌式结构物,呈深浅不一的红色,产物红色越深,说明碱性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过酶标仪测定510nm处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试

剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 自备材料: 96孔板、水浴锅或恒温箱、酶标仪 操作步骤(仅供参考): 1、配制标准品工作液:取出Phenol标准(1mg/ml)恢复至室温后,取0.1ml溶解于1.9ml ddH2O,使浓度达到0.05mg/ml,即为标准品工作液-Phenol(0.05mg/ml)。按照下表稀释系列标准品溶液。 012345 010******** Phenol(0.05mg/ml)(μ l) ddH2O(μl)55453525155 相当于金氏单位(U/L)010******** 2、准备样品: (1)细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-80℃冻存,用于碱性磷酸酯酶的检测。 (2)血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-80℃冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。 (3)高活性样品:如果样品中含有较高活性的碱性磷酸酶,可以使用原有的裂解液或PBS 等进行稀释,如鸡血清、血浆可稀释5~10倍后检测。

小儿骨源性碱性磷酸酶检测结果浅析

小儿骨源性碱性磷酸酶检测结果浅析 Analysis of Pediatric Bone Alkaline Phosphatase Test Results/XIAO Xiang-dong.//Medical Innovation of China,2012,9(23):092-093 Bone alkaline phosphatase;Rickets;Early diagnosis First-author’s address:Zhangdian Maternity and Child Care Center of Zibo,Zibo *****,China doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.23.059 佝偻病(Rickets)是婴幼儿时期常见的慢性营养缺乏性疾病,是因维生素D缺乏,导致钙磷代谢失常,而使骨骼钙化不良所致。它不但影响患儿的骨骼发育,同时还影响患儿神经、肌肉、造血、免疫等多组织、器官的功能。佝偻病很少直接危及生命,但因发病缓慢,易被忽视,一旦发生明显症状时,机体的抵抗力低下,易并发肺炎、腹泻、贫血等其他疾病。20世纪90年代后,中国严重佝偻病发病率已逐年降低,但轻、中度佝偻病发病率仍较高。因此早期发现、预防佝偻病比治疗佝偻病具有更重要的意义。小儿骨源性碱性磷酸酶(NBAP)在佝偻病发病初期即出现升高,而且升高程度与佝偻病活动程度密切相关。因此,小儿NBAP检测对佝偻病的早期筛查、诊断、预防和治疗都有很大的应用价值。 1资料与方法 1.1一般资料随机抽取了儿童保健门诊3~36个月婴幼儿400例,其中男212例,女188例;年龄3~12个月174例,13~24个月121例,25~36个月105例,对其进行外周血NBAP检测。采用小儿NBAP检测试剂盒。 1.2方法采用小儿NBAP检测试剂盒。NBAP试剂盒为北京中生金域诊断技术有限公司生产。试剂盒组成:NBAP反应装置、显色液、洗涤液、终止液、一次性定量取血管(含吸头)、使用说明书(含标

BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒

仅供科研使用版本号:180718 BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒 【产品组成】 【保存条件】 4℃,避光,12个月。 【产品概述】 BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物,在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。 BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定,也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。 【使用方法】 1、对于组织切片或细胞样品或膜,在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗 涤液洗涤3~5次,每次3~5min。 2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适当洗涤液洗涤3~5次,每 次3~5min。 3、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液: 4、洗涤完毕后,去除洗涤液。 5、加入适量BCIP/NBT染色工作液,确保能充分覆盖样品。 5、室温避光孵育5~30min或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。 6、去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸馏水洗涤1~2次即可终止显色反应。 7、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。

土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒

货号: QS2902 规格:50管/48样 土壤碱性磷酸酶活性测定试剂盒 分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响。通常按照其最适pH范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。 测定原理: 碱性环境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出S-AKP/ALP活性。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、无水乙醇和甲苯。 试剂组成和配制: 试剂一:液体×1瓶,4℃避光保存。 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。用前加50mL蒸馏水充分溶解。 试剂三:液体×1瓶,4℃保存。 试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1152μL无水乙醇(自备),48 μL蒸馏水充分溶解。(变褐色后不能再使用) 标准品:液体1.5mL×1瓶,0.5μmol/mL苯酚标准液,4℃保存。 催化反应: 称取风干混匀土壤约0.1g,加入50μL甲苯(自备),轻摇15min;加400μL试剂一并且摇匀后,置于37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应24h;到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。8000g,25℃离心10min,取上清液置于冰上待测。 显色反应: 1. 分光光度计预热30 min,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。 2. 空白管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL蒸馏水,100 μL试剂三,20 μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水830 μL,混匀后25℃静置30 min,于660 nm测定吸光度,记为A 空白管。 3. 标准管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL标准液,100 μL试剂三,20 μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水830 μL,混匀后25℃静置30 min,于660 nm测定吸光度,记为A 标准管。 4. 测定管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL上清液,100 μL试剂三,20 μL试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水830 μL,混匀后25℃静置30 min,于660 nm测定吸光度,记为A 测定管。 注意:空白管和标准管只需测定一次。 第1页,共2页

血清骨型碱性磷酸酶质量的测定

如对您有帮助,可购买打赏,谢谢 血清骨型碱性磷酸酶质量的测定 导语:当大人们带着自己的小孩子去体检的时候总有一项检测是血清骨型碱性磷酸酶质量的测定,很多家长们啊看到一长串读不通顺的字肯定是不懂得这个 当大人们带着自己的小孩子去体检的时候总有一项检测是血清骨型碱性磷酸酶质量的测定,很多家长们啊看到一长串读不通顺的字肯定是不懂得这个到底是测量什么的,事实上呢,这个血清骨型碱性磷酸酶质量啊是看看小孩子有没有佝偻病的,下面来具体的讲一讲吧。 你好,碱性磷酸酶是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。单独升高一点并没有关系,要结合其他的检察才能确诊。 碱性磷酸酶升高主要见于: 1.肝胆疾病:阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等。 2.由于骨组织中此酶亦很活跃。因此,孕妇、骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松等血清碱性磷酸酶会升高。 3.白血病、甲状腺机能亢进时,血清碱性磷酸酶亦可升高。 如果有条件可以做一下碱性磷酸酶同功酶,或者要求医院用热稳定试验鉴别是来自肝脏还是来自骨骼. 维生素D缺乏病(vitamin D deficiency)是由于日晒少(皮肤经紫外线照射后,可使维生素D前体转变为有效的维生素D)、摄入不足(奶、蛋、肝、鱼等食物)、吸收障碍(小肠疾病)及需要量增加(小儿、孕妇、乳母)等因素,使体内维生素D不足而引起的全身性钙、磷代谢失常和骨骼改变。同时影响神经、肌肉、造血、免疫等组织器官的功能,严重影响儿童的生长发育。 现在的食物什么的都有那么多的毒素农药什么的,小孩子们因为缺少了应该的要得到的营养元素很容易就会得上佝偻病的,很多家长们 预防疾病常识分享,对您有帮助可购买打赏

骨源性碱性磷酸酶在骨质疏松及类风湿性关节炎诊治中的意义

骨源性碱性磷酸酶在骨质疏松及类风湿性关节炎诊治中的意义 【摘要】目的:探讨血浆骨源性碱性磷酸酶(BAP)在骨质疏松及类风湿性关节炎(RA)诊治中的意义。方法:选择30例骨质疏松症和30例RA患者和30例健康体检者(对照组),进行血浆BAP浓度水平测定,计算其血浆浓度并进行比较。结果:30例骨质疏松症患者与健康对照组及30例RA患者与健康对照组BAP 水平差异均有显著性意义(P<0.01),而30例骨质疏松症患者与30例RA 患者血浆BAP浓度比较,无显著性差异。结论:BAP在骨质疏松及RA患者诊断及治疗过程中有很好的临床指导意义。 【关键词】血清骨源性碱性磷酸酶;类风湿性关节炎;骨质疏松;诊断治疗。 骨质疏松和内风湿性关节炎(RA)是危害中老年人身体健康的常见病,都可造成患者骨关节骨质丢失和破坏,而且这两种疾病本身又有一定相关性,严重危害人类健康,而在其发生、发展过程中,患者大多存在不同程度骨代谢标志物骨源性碱性磷酸酶(BAP)水平的升高。现就我院2004年6月~2007年11月收治的30例骨质疏松症患者和30例RA患者BAP水平的测定情况,与同期在我院体检的30例健康人群做对比,以了解BAP在该类疾病中的临床应用价值。 1 材料与方法 1.1 对象:30例骨质疏松症患者和30例RA患者均系我院住院患者,年龄42~76岁,30例骨质疏松症患者中男14例,女16例,30例RA患者中男12例,女18例,以上病例均为确诊病例,(其中RA符合美国风湿病学院1987年制定的诊断标准;骨质疏松症经临床及放射线检查符合WHO1994年确立的诊断标准)。对照组:体检中筛选的健康人30例,年龄30~56岁,男15例,女15例。 1.2 方法:对所选病例组及健康对照组由专人负责采集空腹肘静脉血,按要求做BAP测定。标本检测使用美国Metra公司提供的试剂盒,将抗凝血以3 000 r/ min 离心15 min,取血浆检测。 1.3 统计方法:测定结果用均数±标准差表示,采用配对t 检验。 2 结果

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