GDF11抑制肝癌细胞增殖作用的研究

目录

中文摘要 (Ⅰ)

Abstract (Ⅲ)

缩略语 (Ⅶ)

前言 (1)

研究现状、成果 (1)

研究目的、方法 (4)

一、对象和方法 (5)

1.1材料和仪器 (5)

1.2试剂配制 (6)

1.3实验方法步骤 (7)

1.3.1细胞培养 (7)

1.3.2Western blot检测GDF11蛋白表达 (10)

1.3.3CCK-8法检测SMMC-7721细胞体外增殖能力 (14)

1.3.4平板克隆形成实验 (14)

1.3.5CCK-8检测SMMC-7721细胞顺铂敏感性 (15)

1.3.6流式细胞术检测细胞周期分布 (15)

1.3.7裸鼠皮下移植瘤增殖实验 (16)

1.3.8免疫组化法检测GDF11、Ki-67蛋白表达及肿瘤微血管密度 (17)

1.3.9免疫组化结果判定 (18)

1.3.10统计学方法 (18)

二、结果 (20)

2.1GDF11在肝细胞癌SMMC-7721细胞中表达水平检测 (20)

2.2 GDF11过表达明显降低肝细胞癌SMMC-7721细胞体外增殖能力 (20)

V

2.3 GDF11过表达明显降低SMMC-7721细胞的克隆形成能力 (21)

2.4 GDF11过表达增加肝细胞癌SMMC-7721细胞对顺铂的敏感性 (22)

2.5 GDF11过表达将肝细胞癌SMMC-7721细胞阻滞在G1期 (23)

2.6 GDF11过表达抑制SMMC-7721细胞裸鼠皮下移植瘤的增殖能力 (24)

2.7 GDF11、Ki-67、及CD34蛋白在裸鼠皮下移植瘤组织中的表达 (25)

2.8 GDF11蛋白、Ki-67蛋白、MVD的相关性分析 (27)

讨论 (28)

结论 (33)

参考文献 (34)

发表论文和参加科研情况说明 (40)

综述 (41)

GDF11蛋白研究进展 (41)

综述参考文献 (46)

致谢 (49)

个人简历 (50)

VI

缩略语/符号说明

英文缩写英文全称中文译名

HCC Hepatocellμl ar carcinoma 肝细胞癌

GDF11 Growth and differentation factor 11 生长分化因子11 TGF-βTransforming growth factor beta 转化生长因子βCCK-8 Cell counting kit 细胞检测试剂盒PBS phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液

OD optical density 光密度

FBS fetal bovine serum 胎牛血清

TEMED tetramethylethylendediamine 四甲基乙二胺DMSO dymethyl sμl foxide 二甲基亚砜

SDS sodium dodecyl sμl phate 十二烷基硫酸钠MVD microvessel density 微血管密度

TACE transcatheter arterial chemoembolization经肝动脉化疗栓塞术TKI tyrosine kinase inhibitor 酪氨酸激酶抑制剂OS overall survival 总生存期

VEGF vascμl ar endothelial growth factor血管内皮生长因子Ang-2angiopoietin-2血管生成素-2

FGF Fibroblast growth factor纤维母细胞生长因子mtDNA Mitochondria DNA线粒体DNA

ROS reactive oxygen species活性氧物质

DDR DNA damage response DNA损伤应答EMT Epithelial Mesenchymal Transition 上皮间质转化

SCID severecombinedimmunodeficiencydisease 严重免疫缺陷

NSA nutrient-sensing pathways营养敏感途径

PI3K phosphoinositide 3-kinase磷脂酰肌醇三激酶mDNA Mitochondria DNA线粒体DNA

DDR DNA damage response DNA损伤应答ROS reactive oxygen species 活性氧物质

INPs immediate neuronal precursors 直接神经前体细胞

VII

HuH-7 人肝癌细胞

HuH-7 人肝癌细胞 Catalogue No.: C165 Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium:89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application:Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY. Components Operation steps for cell culture 1.吸走用于培养基，加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞； 2.吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰酶 浸没细胞表面，培养瓶放37度培养箱消化； （细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。） 3.加入6-8ml完全培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀； 4.将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min，弃上清，再用新鲜培养基 重悬37度培养箱继续培养； 传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。 Cell cryopreservation 1.冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择） 2.降温步骤：4度10min，-20度2h，-80过夜后液氮保存。

2020肝细胞癌免疫治疗现状(完整版)

2020肝细胞癌免疫治疗现状（完整版） 肝细胞癌（HCC）是原发性肝癌中最常见的病理类型，也是癌症相关死亡的主要原因之一。早期HCC可以通过手术或消融治疗，但对于晚期HCC，可用的治疗均为姑息性治疗。目前大量的研究支持免疫疗法应用于HCC。本综述将讨论免疫检查点抑制剂（ICB）在HCC中的应用现状。 ICB在晚期HCC的疗效 目前已有几种ICB在针对晚期HCC的1、2和3期临床试验中进行了验证。ICB单药治疗的缓解率（ORR）为15％-23％，联用靶向治疗或其他ICB的ORR可达到30%（表1和表2）。其中研究显示，纳武利尤单抗、帕博利珠单抗以及纳武利尤单抗联合伊匹木单抗在HCC中具有持久的抗肿瘤反应。 Check Mate 040研究显示，在经索拉非尼治疗的晚期HCC中，单用纳武利尤单抗的ORR为18.7%，纳武利尤单抗联合伊匹木单抗的ORR为33％；中位总生存期（OS）分别为15个月（单用纳武利尤单抗）和23个月（联合用药）。KEYNOTE-224研究显示经索拉非尼治疗的晚期HCC 中，帕博利珠单抗的ORR为17％，中位OS为13个月。 表1 ICB在晚期HCC疗效观察的部分1/2期试验

缩写：NR，未报告；ORR，总体缓解率；OS，总生存期；PFS，无进展生存期；TTP，出现进展的时间。a仅包括样本量35例以上的试验；b根据实体瘤反应评估标准（RECIST）版本1.1.16；c具有3种不同给药方案的三臂；d根据修改后的RECIST。 尽管1/2期研究获得了阳性结果，但纳武利尤单抗和帕博利珠单抗在随后开展的针对晚期HCC的2项3期随机试验中未达到预定的主要终点。第一项是CheckMate 459研究，其比较了纳武利尤单抗和索拉非尼在晚期HCC中的疗效，未达到预定的OS主要终点事件。但纳武利尤单抗的中位OS较索拉非尼有所延长（16.4 vs. 14.7个月）；纳武利尤单抗的ORR是索拉非尼的2倍（15％vs. 7％），且4％的纳武利尤单抗患者完全缓解；纳武利尤单抗的安全性和生活质量也明显高于索拉非尼。 另一项是KEYNOTE-240研究，其在经索拉非尼治疗的晚期HCC患者中比较了帕博利珠单抗与安慰剂的疗效，也未达到预定的OS主要终点事件。结果显示，帕博利珠单抗组的OS长于安慰剂组（13.9 vs. 10.6个月；

原发性肝癌外科治疗进展

原发性肝癌外科治疗进展 发表时间：2018-12-17T11:14:41.903Z 来源：《大众医学》2018年9月作者：吕瑞昌宋海霞田高波 [导读] 外科手术治疗是当前肝癌的首选治疗手段，通过手术治疗的肝癌5年生存率总体达20-40%。 外科手术治疗是当前肝癌的首选治疗手段，通过手术治疗的肝癌5年生存率总体达20-40%。近年来，随着对肿瘤生物学探索不断深入、对肝脏解剖认知水平的加深以及外科治疗技术的发展，原发性肝癌外科治疗模式也取得很大突破。 首先，术前评估是原发性肝癌不容忽视的部分，主要包括对肿瘤生物学行为、患者肝硬化程度及肝炎状态这三方面进行评估。从微观、宏观两个角度整体把握，对肝切除术式选择有指导意义，有利于对术后的预后进行正确评估。同时改善手术不利因素，为手术治疗创造有益条件。 近年来，外科技术也取得了“更精准”和“更微创”的进展。精准外科，包括精准的病理诊断、精准的手术方案选择、精准的方案规划、精准精细的手术解剖等。“更微创”包含微创手术和微创伤两个理念。 随着对肝脏解剖水平的认识加深、腔镜技术及肝门阻断技术的精进，与手术相关的大出血死亡原因极为罕见，外科手术更安全。除此之外，肝移植技术日渐成熟，已成为某些医疗单位的常规手术项目。多结节肝癌中微血管侵犯（MVI）的问题长期以来是外科治疗的难点，主要挑战在手术后复发转移的风险比较高。 术后复发是影响肝癌患者长期生存的最主要因素。术后肝内复发有两种类型，一类为起源于原肿瘤的肝内转移性肝癌，复发间隔时间常小于1年，另一类是由于长期肝病引起的多中心发生的复发性肝癌，复发间隔时间常大于1年。后者由于是多中心发生的新生肿瘤，手术效果较理想；而前者，因有可能存在影像学检查无法探及的微小转移灶，通常手术再切除的效果较差。有学者认为，对于1年内复发的肝癌，可先行肝动脉化疗栓塞术（TACE），再根据治疗效果考虑是否进行手术切除。 肝移植一直以来是肝癌治疗最好的方法之一，特别是符合Milan标准的肝癌患者（单病灶<5cm，2-3个病灶，每病灶<3cm）获益尤佳，但由于肝源缺乏，多数患者在等待肝移植期间肿瘤进展，失去移植机会，因此“挽救性肝移植”（SLT）的观点应运而生，即在肝癌移植患者等待供肝期间，可选择行手术切除病灶，延缓肿瘤进展，为获得肝移植提供更多的机会。研究显示，挽救性肝移植对符合Milan标准的肝癌患者其1、3、5年的总生存率及无病生存率与初次肝移植相比并无明显差异，从而为肝癌的外科治疗提供新的选择。

肝癌相关成纤维细胞的培养和鉴定及其对肝癌细胞增殖的影响

［文章编号］　１６７１－５８７Ⅹ（２０１２）０３－０４３８－ ０５［收稿日期］　２０１１－０４－ １６［基金项目］　国家自然科学基金面上项目资助课题（ＮＳＦＣ　 ３０９７２９１４）；广东省科技计划项目资助课题（２００９Ｂ０６０７０００２４）；广东省自然科学基金面上项目资助课题（１０１５１００８９０１０００２０８ ）；中山大学高校基本科研业务费重大项目培育基金资助课题（１０ｙｋｊ ｃ０３）［作者简介］　汪田甜（１９８３－） ，女，安徽省明光市人，医师，医学硕士，主要从事肝脏恶性肿瘤方面的研究。［通信作者］　吴祥元（Ｔｅｌ：０２０－８５２５２２１７，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｘｙ３０７＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ）肝癌相关成纤维细胞的培养和鉴定及其对肝癌细胞增殖的影响 汪田甜１，贾昌昌２，张　琪２，董　敏１，李　星１，陈冠中２，吴祥元１ （１．中山大学附属第三医院肿瘤内科，广东广州５１０６３０；２．中山大学附属第三医院肝移植中心，广东广州５１０６３０）［摘　要］　目的：分离、培养及鉴定原代肝癌相关成纤维细胞（ ｈＣＡＦ），阐明其在肝癌发生发展中的作用。方法：采用酶消化法分离、纯化人ｈＣＡＦ，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ法鉴定其相关蛋白标记物的表达，流式细胞术检测肝癌细胞Ｈｅｐ ３Ｂ经ｈＣＡＦ上清处理后的增殖速度及细胞周期的变化，建立裸鼠移植瘤模型，观察ｈＣＡＦ对肝癌细胞生长的影响。结果：在肝癌组织标本中成功分离出ｈＣＡＦ，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示ｈ ＣＡＦ特异性地高表达α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）。ＣＣＫ８细胞增殖检测试剂盒检测证实，经ｈＣＡＦ上清处理后的Ｈｅｐ ３Ｂ细胞增殖量为完全培养基处理４８ｈ细胞增殖量的１２６．０％、１２５．０％及１２０．５％，细胞增殖量差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５） 。流式细胞术结果显示，经ｈＣＡＦ上清处理后的Ｈｅｐ ３Ｂ细胞增殖速度及细胞周期中处于Ｓ期的细胞数目均高于完全培养基处理的Ｈｅｐ３Ｂ细胞（Ｐ＜０．０５）。ｈＣＡＦ与Ｈｅｐ ３Ｂ共同接种至裸鼠皮下的成瘤体积［（１．３４±０．５２）ｃｍ３］明显大于单独接种Ｈｅｐ ３Ｂ组［（０．５１±０．０９）ｃｍ３］，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论：ｈＣＡＦ可以明显促进肝癌细胞系Ｈｅｐ ３Ｂ的生长，其可能在肝癌生长过程中发挥重要作用。［关键词］　癌相关成纤维细胞；肝细胞肿瘤；增殖；肿瘤微环境 ［中图分类号］　Ｒ３２２．４７ ［文献标志码］　Ａ Ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐ ａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｐ ｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆ　ｈｅｐ ａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓＷＡＮＧ　Ｔｉａｎ－ｔｉａｎ１，ＪＩＡ　Ｃｈａｎｇ－ｃｈａｎｇ２，ＺＨＡＮＧ　Ｑｉ　２，ＤＯＮＧ　Ｍｉｎ１，ＬＩ　Ｘｉｎｇ１，ＣＨＥＮ　Ｇｕａｎ－ｚｈｏｎｇ２，ＷＵ　Ｘｉａｎｇ －ｙｕａｎ１（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｔｈｉｒｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｕｎ　Ｙａｔ－ｓｅｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇ ｚｈｏｕ５１０６３０，Ｃｈｉｎａ；２．Ｌｉｖｅｒ　Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｔｈｉｒｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｕｎ　Ｙａｔ－ｓｅｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ，Ｇｕａｎｇ ｚｈｏｕ　５１０６３０，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｓｏｌａｔｅ，ｃｕｌｔｉｖａｔｅ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　 ｔｈｅ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ（ｈＣＡＦ）ａｎｄ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅｉｒ　ｐ ｏｓｓｉｂｌｅ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｐｒｉｍａｒｙ　ｈＣＡＦ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　 ｅｎｚｙｍｅ　ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｈＣＡＦ　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ｂｙ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ　 ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｃｙｃｌｅｓ　ｏｆ　Ｈｅｐ３Ｂｃｅｌｌｓ　ａｆｔｅｒｈＣＡＦ　ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　 ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｈＣＡＦ　ｏｎ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｔｈｏｕｇｈ　ｂｕｉｌｄｉｎｇ　 ａ　ｘｅｎｏｇｒａｆｔ　ｔｕｍｏｒ　ｍｏｄｅｌ　ｉｎ　ｎｕｄｅ　ｍｉｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｈＣＡＦ　ｗｅｒｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ　ａｎｄ　ｈｉｇｈｌｙ　ｓｐｅｃｉｆｉｃｌｙ　 ｅｘｐｒｅｓｓｅｄα－ｓｍｏｏｔｈ　ｍｕｓｃｌｅ　ａｃｔｉｎ（α－ＳＭＡ）ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃａｐａｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｈｅｐ３Ｂｗａｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　 ａｆｔｅｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｈＣＡＦ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ　ｍｅｄｉａ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｃａｐａｃｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｈｅｐ３Ｂｗｅｒｅ　１２６．０％，１２５．０％ａｎｄ　１２０．５％ｏｆ　ｔｈｏｓｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｍｐ ｌｅｔｅ　ｍｅｄｉｕｍｆｏｒ　４８ｈ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　Ｓ　ｐｈａｓｅ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇ ｈｅｒ８３４第３８卷　第３期２０１２年５月吉　林　大　学　学　报　（医　学　版）Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｊｉｌｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．３　Ｍａｙ 　２０１２

Rab27A和Rab27B在4种不同人肝癌细胞株中的表达

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/7b16628752.html, Rab27A和Rab27B在4种不同人肝癌细胞株中的表达 作者：刘鼎刘建生 来源：《中国当代医药》2015年第16期 [摘要] 目的检测Rab27A与Rab27B在3种人肝癌细胞系及1种永生化肝细胞系中的表达情况，初步研究Rab27A与Rab27B表达对肝癌细胞生物学特性的影响。方法采用RT-PCR及Western blot技术，检测Rab27A与Rab27B mRNA在3种人肝癌癌细胞HepG2、Huh-7、Li-7及1种永生化肝细胞系HL-7702中的表达。结果 Rab27A与Rab27B在肝癌细胞系及原发性肝癌组织中存在差异性表达。Rab27A mRNA在3种人肝癌细胞系中表达明显强于1种人永生化肝细胞系；Rab27B mRNA在3种人肝癌及1种人永生化肝细胞系中均明显表达但无显著差异。结论 Rab27A与Rab27B与原发性肝癌密切相关，可以为临床采取合理诊断措施提供有效的参考依据。 [关键词] Rab27A；Rab27B；肝细胞癌；RT-PCR；Western blot [中图分类号] R735 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2015）06（a）-0004-04 Expression of Rab27A and Rab27B in the four different hepatocellular carcinoma LIU Ding LIU Jian-sheng▲ The First Clinical Medical College of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China [Abstract] Objective To investigate the expression of Rab27A and Rab27B in 3 human HCC lines and the immortalized hepatic cell line and its effect on biology characteristics of the cells. Methods The mRNA expression of Rab27A and Rab27B was detected by RT-PCR，and Western-blot in 3 human HCC lines of HepG2，Huh-7，Li-7 and the immortalized hepatic cell line of HL-7702. Results Rab27A and Rab27B were differentially expressed in cell lines and primary HCC tumors.The expression of Rab27A in 3 human HCC line was significantly better than that expressed in the immortalized hepatic cell line；the mRNA of Rab27B in 3 human HCC lines and the immortalized hepatic cell line were significantly expression but there was no significantly difference. Conclusion Rab27A and Rab27B expression are closely correlated HCC，it can provide the clinical reasonable diagnostic measures as valuable effective reference basis. [Key words] Rab27A；Rab27B；Hepatocellular carcinoma；RT-PCR；Western blot 肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是消化系统最常见的恶性肿瘤之一，具有极高的侵袭性和转移性，出现典型症状时，往往已经为晚期。目前与HCC进展相关的因子包括癌

原发性肝癌临床治疗进展

原发性肝癌临床治疗进展 发表时间：2019-07-23T09:36:45.350Z 来源：《医师在线（学术版）》2019年第10期作者：朱茜1,吕盼盼1,王金阳1,申显英1,熊绍权2 [导读] 对于原发性肝癌的治疗有手术、局部消融、TACE、免疫治疗、靶向治疗、中医药治疗等多种选择。 1.成都中医药大学,四川成都 610075 2.成都中医药大学附属医院,四川成都 610072 [摘要]：原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,具有发病率高、进展快、死亡率高的特点。目前对于原发性肝癌的治疗有手术、局部消融、TACE、免疫治疗、靶向治疗、中医药治疗等多种选择。 [关键词]：原发性肝癌,治疗进展 原发性肝癌(primaryhepaticcarcinoma,PHC)是在肝细胞或肝内胆管上皮细胞引起的恶性肿瘤,其全球发病率和死亡率分别位于恶性肿瘤的第5位和第3位[1]。其治疗目前以内科与外科相结合综合治疗为主,其中手术治疗是主要手段。以下就原发性肝癌临床治疗进展作一综述。 一、手术治疗 1、手术切除包括根治性切除和姑息性切除,除了门静脉高压外几乎没有其它手术禁忌,是临床根治PHC的首选方案。通过精确的术前评估与精细化的手术解剖、规范化的手术方式,精准的外科操作能彻底清除病灶、最大限度地控制手术出血和全身性创伤,术后个体化管理课降低手术并发症发生率、提高手术切除率,促进患者康复。但手术治疗也有其局限性,对于中晚期肝癌和巨大肝癌的根治率低,疗效差。 2、肝移植术是肝功能无法耐受肝切除的早期肝癌及复发性肝癌治疗的一种重要手段。活体及劈离式肝移植可增加肝脏供者,但供者年龄、供肝脂肪变性、缺血再灌注损伤及门静脉过度灌注等可影响移植术后减体积移植肝的再生；制订针对上述因素的评估标准有助于实现活体及劈离式肝移植供者精准选择,提高成功率［2］。 二、局部治疗 1、肝动脉化疗栓塞术（TACE）TACE被认为是非手术治疗PHC的首选手段,通过阻断肝动脉血供、持续以化疗药物来促进肿瘤病灶缩小、缺血或坏死延缓肿瘤进展。TACE在临床上可与其他方法联合应用。研究显示,利用TACE治疗PHC患者,近期部分缓解率、稳定率及 2、3年生存率均明显高于单纯行肝动脉栓塞治疗,而进展率明显较低[3],认为其能有效延长患者生存期。 2、射频消融术射频消融治疗（RFA）RFA是利用电中高频率的射频波与组织细胞离子震荡撞击产生的温度使肿瘤细胞坏死,是早期PHC 根治的有效手段之一[4]。RFA治疗PHC时创伤小,对肝功能损害小,并发症少,其显著疗甚至被认为可以替代手术治疗的疗效。 三、放疗与化疗 1、放疗放疗是治疗恶性肿瘤的有效方法之一,但传统的放射治疗会损伤大量正常的肝细胞并导致肝脏疾病的发生率,故其应用有很大的限制。近年来三维适形放疗技术的应用使得放疗过程中正常肝细胞耐受量减少而得到有效保护,且肿瘤局部控制率有所提高。 2、化疗对于不适合手术的PHC患者可行化学药物治疗。静脉化疗方案包括FOLFOX方案、XELOX方案等。常用化疗药物有:氟尿嘧啶、顺铂、丝裂霉素等。大多数化疗药对PHC的敏感性较差[5]。因此临床常采用联合化疗的方法来治疗PHC,例如化疗常常与分子靶向药物、外科等相联合,从而降低药物剂量、减少毒副作用,来提高PHC的有效治疗率。 四、靶向治疗 分子靶向治疗采用抑制血管生成、阻断信号转导通路、封闭受体等方法作用于肿瘤细胞特定的靶点,从而达到特异性地抑制肿瘤细胞生长的目的。目前的靶向药物包括针对生长因子(EGFR)信号通路的西妥昔单抗、吉非替尼、乐伐替尼；针对血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的贝伐单抗、甲磺酸阿帕替尼、卡博替尼等；c-Met信号通路的Tepotinib；针对Ras/Raf/Mek/Erk信号通路索拉非尼；针对PI3K/Akt/mTOR 信号通路的依维莫司；针对NF-кB信号通路的硼替佐米等［6］。 五、免疫治疗 大量研究指出,免疫治疗可作为晚期肝癌的一种可选择的有效治疗手段。目前临床应用及研究用于肿瘤生物治疗的免疫活性细胞主要有树突状细胞、细胞因子诱导的杀伤细胞、自然杀伤细胞、嵌合抗原受体T细胞等［7］。与手术、放化疗相比,细胞免疫治疗是目前已知的最有望完全杀灭肿瘤细胞的治疗手段之一,是通过给荷瘤机体输注具有抗肿瘤免疫效应细胞的方法来调节机体细胞免疫水平、清除肿瘤微小病灶及抑制肿瘤细胞增殖,最终达到治疗肿瘤的目的[8]。 六、中医药治疗 中医将肝癌归为“肝积”“黄疸”等范畴,是由于多种致病因素导致脏腑气血亏虚,使湿热、痰毒、血淤等互结于肝脏所引起。临床常用的方药有逍遥散加减、茵陈蒿汤加减、柴胡疏肝散等。有大量临床研究表明中医药治疗能提高PHC近期疗效及远期生存率[9]。 七、结语 我国作为原发性肝癌的高发区,在制定肝癌的综合治疗方案时,一定要多方面综合评估,结合多种治疗方法,为患者争取最大的获益,改善患者的生存质量,提高患者的远期生存率。 [参考文献] [1]陈万青,郑荣寿,张思维,等.2012年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J].中国肿瘤,2016,25(1):1-8. [2]李蕊利,万娟.原发性肝癌射频消融预后的影响因素分析[J].现代肿瘤医学,2015,23(20):2970-2972. [3]胥栋,袁伟东.肝动脉插管化疗栓塞术治疗原发性肝癌临床疗效分析[J].实用肝脏病杂志,2015,18(2)：195-196. [4]欧盛钊.原发性肝癌的治疗进展[J].基层医学论坛,2013,17(13):1741-1743. [5]邵艳,管静芝.原发性肝癌治疗进展[J].传染病信息,2016,29(4):248-252. [6]徐琦,应杰儿.晚期原发性肝癌内科治疗进展[J].中国肿瘤,2019,28(05):373-380. [7]许洋,刘子荣,张雅敏.原发性肝癌的免疫治疗进展[J].山东医药,2017,57(02):104-107. [8]丁晓燕,陈京龙,孙巍,等.低剂量白介素-2联合肝动脉化疗栓塞术序贯CT引导下射频消融术在≥5cm的原发性肝癌的疗效和安全性[J].临床药物治疗杂志,2014,12(3)：23-29. [9]侯帅,樊琳琳,戴光荣.非手术治疗原发性肝癌研究进展[J].实用肝脏病杂志,2016,19(2):249-252.

白藜芦醇对肝癌细胞增殖和凋亡影响及其机制

现代生物医学进展https://www.wendangku.net/doc/7b16628752.html, Progress in Modern Biomedicine Vol.12NO.1JAN.2012 白藜芦醇对肝癌细胞增殖和凋亡影响及其机制* 戴维奇徐凌王锋卫巍沈杰黄银实杨丽娟何姗姗郭传勇△ （同济大学附属第十人民医院消化内科上海200072） 摘要目的：研究白藜芦醇（resveratrol ，Res ）对肝癌细胞LM3周期及凋亡的影响并探讨其可能的分子机制。方法：分别用50、 100、150、200μmol/L 浓度的Res 作用LM3肝癌细胞24、48和72h ，CCK-8测定Res 对细胞的增殖作用；分别以相同剂量的DMSO 及 无处理的LM3细胞为随机和空白对照，观察150μmol/L Res 作用72小时后对肿瘤细胞周期及凋亡的影响； Real time-PCR 及Western blot 分析Res 对LM3细胞中Bak 和Bcl-2mRNA 及蛋白表达的影响。结果： Res 体外能明显抑制肝癌细胞LM3的生长增殖，在一定范围内呈现作用浓度（F=101.183，P ＜0.001）和时间依赖性（F=192.371，P ＜0.001）； 150μmol/L Res 作用72小时后能显著减缓肝癌细胞LM3的周期转换（P ＜0.001），并诱导明显的细胞凋亡效应（P ＜0.001）；进一步的检测发现Res 作用LM3细胞后，Bak mRNA （P=0.002，0.007）及蛋白（P =0.004，0.01）表达增强，而Bcl-2mRNA （P=0.027，0.007）及蛋白（P =0.001，0.001）表达 出现显著下降。结论：Res 可能通过对Bak 及Bcl-2表达的调节来抑制肝癌细胞LM3的增殖，并诱导其细胞凋亡。 关键词：肿瘤；周期； Bcl-2；Bak 中图分类号：R735.7，R285.6文献标识码：A 文章编号：1673-6273（2012） 01-16-04Effects of Resveratrol on Cell Cycle and Apoptosis of Hepatocellular Carcinoma Cells and its Possible Mechanism* DAI Wei-qi,XU Ling,WANG Feng,WEI Wei,SHEN Jie,HUANG Yin-shi,YANG Li-juan,HE Shan-shan,GUO Chuan-yong △ （Tong Ji University,Department of Gastroenterology,Tenth People's Hospital,Shanghai,200072） ABSTRACT Objective:To investigate the effect of resveratrol (Res)on cell cycle and apoptosis of hepatocellular carcinoma LM3cells and the possible molecular mechanisms.Methods:Cell counting kit-8(CCK-8)assay was used to examine the effect on cell prolifer-ation of hepatocellular carcinoma LM3cells treated by Res with the concentration of 50μmol/L for 24and 72hours;LM3cells were treated by DMSO or no treatment as randomized and blank control,and then were detected.The expression of Bak and Bcl-2mRNA and protein in LM3cells treated by Res were evaluated by Real-time PCR and western blot,respectively.Results:Res inhibited the prolifera-tion of LM3cells in time-dependent manner （F=101.183，P ＜0.001）and concentration-dependent manner （F=192.371，P ＜0.001）in vit-ro.It was found that Res could accelerate cells cycle transition and induce apoptosis after treatment by Res at 150μmol/L for 72hours.The expression of Bak mRNA (P=0.002，0.007)and protein （P =0.004，0.01） were obviously up-regulated on treated LM3cells,while the expression of Bcl-2mRNA （P=0.027，0.007）and protein （P =0.001，0.001） decreased remarkably.Conclusion:Res can not only in-hibit proliferation of LM3cells but also induce cellular apoptosis through accommodating the expression of Bak and Bcl-2. Key words:Carcinoma;cycle;Bcl-2;Bak Chinese Library Classification(CLC):R735.7,R285.6Document code:A Article ID:1673-6273(2012)01-16-04 *基金项目：国家自然科学基金(81072005)。上海市科委基金(0941*******) 作者简介：戴维奇(1985-)，男，硕士生； E-mail ：dai_yue@https://www.wendangku.net/doc/7b16628752.html, △通讯作者：郭传勇， E-mail ：guochuanyong@https://www.wendangku.net/doc/7b16628752.html, （收稿日期：2011-07-12接受日期：2011-08-06）前言 原发性肝癌（primary liver cancer,PLC ）包括肝细胞癌（hep- atocellular carcinoma,HCC ）、肝胆管细胞癌（cholangiocarcino- ma ）、肝细胞及胆管混合癌等几种类型， PLC 是我国高发肿瘤，位于恶性肿瘤病死率第二位，这其中又以乙型肝炎病毒感染后 的肝细胞癌为主[1]。因此， 针对能够明显抑制原发性肝细胞肿瘤的药物研究就显得十分重要。 白藜芦醇（Resveratrol,Res ）是1940年首次从毛叶黎芦的 根部分离得到的非黄酮类多酚化合物。Res 在新鲜葡萄皮中含 量较高，在中药植物虎杖中含量最为丰富。因Res 具有抗炎、抗氧化、抑制血小板聚集、保护心血管、鳌合自由基等作用，长期以来一直广泛用于心血管病的防治中。最近研究表明Res 可显著抑制多种人类肿瘤细胞的生长增殖[2-6]，本研究主要通过白藜芦醇处理肝癌细胞株LM3，观察白藜芦醇对肝癌细胞增殖及凋亡的影响，检测相关基因及蛋白的变化情况，以期阐明白藜芦醇抗肿瘤的可能机制。1材料与方法1.1细胞和主要试剂人肝细胞癌细胞株LM3(购自美国ATCC 公司)；Res(纯度>99.9％)(Sigma)用二甲基亚(DMSO)溶解后配成100mmol ／L 16··

GDF11抑制肝癌细胞增殖作用的研究

目录 中文摘要 (Ⅰ) Abstract (Ⅲ) 缩略语 (Ⅶ) 前言 (1) 研究现状、成果 (1) 研究目的、方法 (4) 一、对象和方法 (5) 1.1材料和仪器 (5) 1.2试剂配制 (6) 1.3实验方法步骤 (7) 1.3.1细胞培养 (7) 1.3.2Western blot检测GDF11蛋白表达 (10) 1.3.3CCK-8法检测SMMC-7721细胞体外增殖能力 (14) 1.3.4平板克隆形成实验 (14) 1.3.5CCK-8检测SMMC-7721细胞顺铂敏感性 (15) 1.3.6流式细胞术检测细胞周期分布 (15) 1.3.7裸鼠皮下移植瘤增殖实验 (16) 1.3.8免疫组化法检测GDF11、Ki-67蛋白表达及肿瘤微血管密度 (17) 1.3.9免疫组化结果判定 (18) 1.3.10统计学方法 (18) 二、结果 (20) 2.1GDF11在肝细胞癌SMMC-7721细胞中表达水平检测 (20) 2.2 GDF11过表达明显降低肝细胞癌SMMC-7721细胞体外增殖能力 (20) V

2.3 GDF11过表达明显降低SMMC-7721细胞的克隆形成能力 (21) 2.4 GDF11过表达增加肝细胞癌SMMC-7721细胞对顺铂的敏感性 (22) 2.5 GDF11过表达将肝细胞癌SMMC-7721细胞阻滞在G1期 (23) 2.6 GDF11过表达抑制SMMC-7721细胞裸鼠皮下移植瘤的增殖能力 (24) 2.7 GDF11、Ki-67、及CD34蛋白在裸鼠皮下移植瘤组织中的表达 (25) 2.8 GDF11蛋白、Ki-67蛋白、MVD的相关性分析 (27) 讨论 (28) 结论 (33) 参考文献 (34) 发表论文和参加科研情况说明 (40) 综述 (41) GDF11蛋白研究进展 (41) 综述参考文献 (46) 致谢 (49) 个人简历 (50) VI

人肝癌细胞株中FOXM1及NF_B的表达及意义_王琦1_柴磊2_蒋少青3_马丽4

网络出版时间：2014-02-17 09:02 网络出版地址：https://www.wendangku.net/doc/7b16628752.html,/kcms/detail/64.1008.R.20140217.0902.004.html 人肝癌细胞株中FOXM1 及NF-κB的表达及意义 王琦1，柴磊2，蒋少青3，马丽4 ，金栋5 ，殷利军5，张桂香5，谢岩青5 （1.宁夏医科大学总医院肝胆外科，银川 750004；2.宁夏回族自治区第三人民外科，银川750004；3.宁夏医科大学总医院药剂科，银川 750004；4.宁夏医科大学总医院心脑血管疾病医院药剂科，银川 750004；5.宁夏医科大学总医院心脑血管疾病医院血管外/普外科，银川750004）1 [摘要] 目的探讨不同肝癌细胞株中转录因子FOXM1（Forkhead Box M1）及核转录因子NF-κB（nuclear factor kappa B）的表达强度及意义。方法采用Western blot、RT-PCR法，检测不同肝癌细胞株（QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721）中FOXM1及NF-κ B 在蛋白及mRNA 水平的表达情况。结果在3株肝癌细胞中FOXM1及NF-κB的表达无论是mRNA水平还是蛋白水平均存在显著差异，细胞株（QGY-7703、BEL-7402）中FOXM1及NF-κB的表达同时都明显高表达于细胞株SMMC-7721。结论肝癌细胞株中FOXM1蛋白及mRNA表达与NF-κB表达趋势一致，提示FOXM的表达可能与NF-κB的活化有关。 [关键词] FOXM1；NF-κB；肝细胞肝癌 [中图分类号]R735.7 [文献标识码]A Expression and significance of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B in human liver carcinoma cells WANG Qi1，CHAI Lei2，JIANG Shao-qing 3，MA Li4，JIN Dong5，YIN Li-jun5 ,ZHANG Gui-xiang5，XIE Yan-qing5，（1. Dept.of Hepatobiliarysurgery，the Affiliated Hospital of Ningxia Med. Univ. Yinchuan 750004；2. Dept.of Surgical， the Third People′s Hospital of Ningxia. Yinchuan 750004；3. Dept.of Pharmacy，the Affiliated Hospital of Ningxia Med. Univ. Yinchuan 750004；4. Dept.of Pharmacy，the Cardio-Cerebral Vascular Disease Hospital of Ningxia Med. Univ. Yinchuan 750004；5. Dept.of Vascular/General Surgery， the Cardio-Cerebral Vascular Disease Hospital of Ningxia Med. Univ.Yinchuan 750004） ABSTRACT Objective（1）To investigate the expression and significance of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B in human liver carcinoma cells. Methods The expression of Forkhead Box M1 and nuclear factor kappa B protein and micro-RNA in hepatocellular carcinoma cell lines(QGY-7703、BEL-7402、SMMC-7721)were detected with the application of Western blot analysis and RT-PCR analysis，respectively. Results The expression 基金项目：宁夏自然科学基金（项目编号：NZ1236） 作者简介：王琦(1983-),硕士，主任医师，肝癌复发相关分子机制的研究。 通作者：谢岩青，Email：xie-yanqing@https://www.wendangku.net/doc/7b16628752.html,

纯中药治疗肝癌晚期的案例

在现在人们的生活当中，人们不仅仅只追求是所谓的物质生活，健康也是人们越来越追求的了，因为如果没有了健康，所有的物质也都是白搭，肝癌就是危害健康的一大杀手，随着中医治癌理念的普及与广泛应用，不少饱受过西医肿瘤治疗副作用的患者转而求诊于副作用小、较为安全的中医施治。可是已经经过了病痛折磨，都不免想要仅服用中医药施治，那么，是否有纯中医药治疗肝癌晚期的案例呢?下面，我们就来详细说明下。 纯中医药治疗肝癌晚期的案例有不少 患者会问是否有纯中医药治癌的案例，应该是疑惑纯中医药施治的功效。其实，大量临床研究表现，癌肿虽然发生在身体的局部部位，但实际上是一种全身性疾病，肿块仅是全身性病变的局部显现。局部的癌肿，会通过血液循环、淋巴循环等在全身各个部分广泛扩散、转移。对大多数肿瘤患者而言，仅是局部切除肿块，或灭杀肿瘤不可能长期稳定，治疗后容易复发、转移。 纯中医药可以施治晚期肝癌，正是因为，中医治癌具有整体观，可以从肝癌整体出发，既考虑局部癌肿与病灶的治疗，又采取扶正固本的方法，提高及巩固免疫机能、体质，维持机体免疫功能与肿瘤对抗平衡。 有时候，患者服用几个疗程的中医药后，经检查发现肿块没有明显缩小，便自觉中医无用。其实，瘤体已经被控制，虽然不见肿块缩小，但肿块也不会扩张、增大。肝癌非一日之病，是机体长期受内忧外患干扰的结果，那整体施治的中医药治疗，对机体的调养也应是循序渐进的，有较长的调养周期。 在临床上，坚守在中医治癌临床前线近四十年的肿瘤老中医袁希福就以亲身实践表明，纯中医药施治晚期肝癌的可行性。自2004年到2017年，整整十三年间，郑州希福中医肿瘤医院连续召开五届希福中医百名抗癌明星康复经验交流会，见症了数万人的康复奇迹!一个人的康复，也许只是幸运;十个人的康复，可能是偶然;一百个人的康复，传递的就是希望!而且参加大会的百余名患者中，其中不少都是已经发展到晚期，甚至是已经被医院判“死刑”的患者。因此，肝癌晚期患者一定不要轻易放弃，应积极配合治疗，尽可能延长生存期，提高生存质量，甚至实现临床康复或长期带瘤生存。那么多中医药治疗肝癌晚期的康复案例，自是症明了纯中医治疗晚期肝癌的有效性。 袁希福提出的中医抗癌三联平衡理念还指出：确保中医治癌疗效的关键在于辩症论治。肝癌病因不明，但其发生、发展、转移有一定规律性，肝癌患者普遍具有相同的元气亏虚、痰凝血瘀、癌毒结聚表现。在治疗上，辩症论治要根据晚期肝癌患者的分期情况、症状不同、表现不同、转移部位不同，抓住肝癌患者的实质内涵，主要病机“虚”“淤”“毒”三大本质进行灵活辩症，才可以实现对症下药、有的放矢。从而全面调整患者全身阴阳、气血、脏腑生理功能平衡，提高及巩固机体免疫力，增强患者体质，调动患者自身免疫力，让瘤体趋于稳定，有效预防病情反复，从而提高生存质量，延长生存期，进而达到长期带瘤生存。 【真实案例】依据三联平衡理念为指导，在辩症施治基础上治疗的肝癌患者前后现状

原发性肝癌与炎症关系的研究进展

原发性肝癌与炎症关系的研究进展 摘要原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，与炎症密切相关。在我国，肝癌患者中约大多数有慢性乙型病毒性肝炎感染病史；在欧美及日本，肝癌与丙型病毒性肝炎有关。本文总结原发性肝癌与炎症关系的最新研究进展，探讨多种炎症介质对肝癌发生、转移的促进机制，通过阻断相关炎症介质作用，探索出抑制原发性肝癌的发生、发展，减少复发、转移的新治疗途径。 原发性肝癌（primary hepatic carcinoma PHC）是世界卫生组织公布的十大恶性肿瘤之一，全世界每年新发及死亡病例约占所有恶性肿瘤的5.4%。最新的流行病学调查结果显示，其发病率及死亡率均有上升趋势。原发性肝癌是一种与炎症密切相关的恶性肿瘤，炎症在肝癌的发生和转移过程中具有促进作用[1][2]。本文就原发性肝癌与炎症关系的研究作一综述。 概述 Rudolph Virchow[3]第一次提出炎症在恶性肿瘤进展中起一定的作用，认为慢性炎症可促进肿瘤的生长；随后Wiemann B[4]证明：通过给患者注射化脓性链球菌和粘质沙雷菌引起的急性炎症可使部分患者的恶性肿瘤退化。目前炎症与肿瘤关系的研究成为热点。 大量流行病学调查提示：炎症是导致肿瘤发生或促进肿瘤发展的最主要因素之一，约20%的恶性肿瘤由炎症诱发或促进[1] [2] [5]。炎症与肿瘤发展的多个环节相关，包括肿瘤细胞形成、进展、逃逸、增生、浸润、血管生成、转移。炎症引起恶性肿瘤的分子和细胞机制尚未完全明确，有研究认为：炎症发生后，炎性细胞在迁入炎症部位的过程中产生大量的活性氧、活性氮物质，而且在慢性炎症过程中，内生抗氧化机制的抑制作用也可以产生超负荷的活性物质，这些活性物质诱导DNA损伤，破坏增生细胞的基因稳定性，最终在炎症和活性物质的反复破坏下，细胞基因改变，包括点突变、基因缺失、基因重组[6]。 在我国，原发性肝癌患者中约1/3有明确的乙型病毒性肝炎病史，欧美及日本，肝癌主要与丙型肝炎病毒感染及酒精性肝病有关。肝癌与肝炎病毒、酒精性肝病的关系，国内外已有大量研究，部分机制已经阐明。研究证实：乙型肝炎病毒（HBV）是一种DNA病毒，它可以整合插入宿主基因组，改变宿主体细胞基因的表达，导致宿主细胞基因组的不稳定，易发生基因改变，从而转化为肝癌细胞[7]；丙型肝炎病毒（HCV）为单链RNA病毒，可以和多种细胞蛋白作用，促进肝细胞向肝癌细胞转化[8]；酒精性肝病诱导肝癌形成过程中，酒精产物乙醛可直接损伤肝细胞或乙醇代谢产生的反应性氧化剂和脂质过氧化物直接造成DNA损伤[9]。原发性肝癌通常发生在慢性肝损伤的基础上，包括慢性肝炎、肝硬化，这些被认为是癌前病变。慢性肝损伤引起的炎症反应促进肝硬化的发展，并且激活了肝细胞的再生能力[10]。肝脏的修复机制若被短暂的激活，肝脏的结构和功能可迅速恢复，修复机制的持续激活可促进肝癌的形成和发展，肝炎病毒感染和长期饮酒可激活先天性免疫功能，维持持久的炎症反应，从而促进肝癌的形成和发展[11]。 目前研究已证明，在炎症与癌症的关系中，许多炎症介质具有重要作用。炎症介质产生于炎症反应过程中，也可以由肿瘤细胞产生，其中起关键作用的炎症介质包括环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，Cox-2）、核转录因子—kappaB（NF-kB）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、补体系统。. 原发性肝癌与Cox-2 环氧化酶（cyclooxygenase，Cox）是花生四烯酸转变为前列腺素的限速酶，又称前列腺素内过氧化物合成酶，是一种完整的膜结合蛋白，至少有三种形式：Cox-1位于内质网，属于结构型基因，多种正常组织