Wntβ-catenin 途径是调控细胞生长增殖的关键途径

糖尿病患者的皮肤感染可见有疖、痈、蜂窝织炎、糖尿病性大疱病、毛囊

导致Wnt 信号通路的重要变化。Wnt 信号途径未激活时，β-catenin 与GSK3，Axin，

大肠腺瘤样息肉基因(APC)组成复合物，GSK3β可以将β-catenin 磷酸化，磷酸化的β

-catenin 通过β-TRCP 连接泛素，进而由蛋白酶降解，维持胞内β-catenin 的稳定。此时

核内的LEF/TCF，与Groucho 和CtBP 抑制蛋白结合，抑制基因转录。当经典的Wnt

信号途径被激活后，分泌到胞外的Wnt 与跨膜受体Lrp5/Lrp6 以及Fzd 结合形成复合物，然后Lrp5/Lrp6 的胞内段被某个蛋白激酶(目前尚不清楚)磷酸化，Dishevelled 被磷酸化

而激活，进而抑制GSK3β活性，多蛋白复合体随之解离，未被降解的β-catenin 在胞

质内大量聚集，当胞内β-catenin 达到一定的水平时，形成的游离的β-catenin 进入胞核内，取代抑制蛋白与转录因子LEF1/TCF 结合，调控下游基因的转录

[11-12]

。

Wnt/β-catenin 途径是调控细胞生长增殖的关键途径，在胚胎发育中起着重要作用

[13]

。新近的研究表明，Wnt/β-catenin 信号可通过激活下游靶基因(如cyclinD1 和c-myc)

促进多种类型干细胞及前体细胞自我更新的能力，包括胚胎干细胞

[14]

、肠干细胞

[15]

、

表皮干细胞

[16]

、造血干细胞

[17]

等。在CNS 发育过程中，Wnt/β-catenin 通路同样具有

重要作用。Wnt1 的缺失引发中脑、小脑及脊髓的严重缺陷

[18-20]

，Wnt3a 的缺失则引起

海马的整体丧失

[21]

。上述现象可归结为Wnt 的缺失扰乱了脑室区干细胞或前体细胞的

增殖。脑室区的神经上皮前体细胞持续表达稳态的β-catenin 使前体细胞储蓄量增加，

从而扩大了大脑皮质区。J. Viti 等将逆转录病毒携带的Wnt7a 转染小鼠前脑后，促进

神经前体细胞增殖

[22]

。N. Israsena 等从小鼠皮质分离NSCs，使之过表达β-catenin，

在bFGF 存在下，继发神经球的形成显著增加。由此进一步提示Wnts 促进NSCs 增殖

的功能

[23]

。

纵上所述，Wnt/β-catenin 在神经发育过程中神经干细胞增殖分化过程发挥了重要

的作用。众所周知，在胚胎发育过程中，由于完整脉管系统尚未形成，无法提供血供，

因此神经系统的发育是处于低氧(1~5％O

2

)环境

[24-25]

，表明Wnt/β-catenin 通路在低氧

状态下具有促进胚胎NSCs 增殖的功能。

Wnt/β-catenin 不仅在胚胎过程，在成体中也扮演重要的角色，Wnt/β-catenin 信

号异常在多种疾病，尤其是肿瘤发生中发挥重要作用

[26]

。组织学上肿瘤细胞往往出现

β-catenin 的过表达。基因突变导致的Wnt/β-catenin 通路的异常激活可能通过

cyclinD1/c-myc 刺激癌细胞的增殖而促进肿瘤的进展。肿瘤细胞生存的微环境中存在

着共性，即由于细胞的过度增生而血供相对不足，因此处于缺氧的状态，进一步提示，Wnt/β-catenin 信号通路在缺氧的环境具有活性。

综上所述，低氧损伤后NSCs 的增殖与胚胎发育、肿瘤发生过程均存在低氧这一51

共性。但对于低氧条件下的NSCs 中Wnt/β-catenin 信号通路分子的变化尚无明确的

报道。

本实验首先采用RT-PCR 法检测常氧条件下的新生GFP 转基因小鼠海马NSCs 中

Wnt/β-catenin 通路分子的表达情况。结果显示，Wnt/β-catenin 通路中的主要分子，

包括Frz1，β-catenin，Axin1，GSK-3β和LEF1 均可检测到，表明新生GFP 转基因

小鼠海马NSCs 具备对Wnt 信号反应的能力。

TOPFlash 报告质粒的启动子序列带有3 个重复的TCF 结合位点，其下游的荧光

素酶表达可以间接表明β-catenin 的活性状态。NSCs 转染TOPFlash 后，置于低氧孵

箱内分别培养12 h 和24 h 后，经荧光素酶检测分析，以FOPFlash 作为系统内参，结果显示，低氧条件上调NSCs 中荧光素酶活性，分别是常氧组的 1.6 和 2.1 倍(P<0.05)，间接表明低氧增加NSCs 中β-catenin 的含量。

本研究从蛋白水平进一步检测低氧条件对β-catenin 和靶基因cyclinD1 表达的影

响。结果表明，低氧培养12 h 和24 h 后，β-catenin 和cyclinD1 的蛋白含量均增加。表明低氧可以增加β-catenin 和cyclinD1 的表达。

综上所述，新生GFP 转基因小鼠海马NSCs 具备对Wnt 信号反应的能力。经低氧

培养后，该通路的关键调节分子β-catenin 和靶基因cyclinD1 的表达量均有增加。对

于Wnt/β-catenin 是否参与低氧诱导的海马NSCs 增殖，将在下一部分进行探讨。

细胞增殖练习题

第6章细胞的生命历程 第1节细胞的增殖 一、选择题 1.要观察植物细胞的细胞板结构,所选择的细胞应处于有丝分裂的() A.前期 B.中期 C.后期 D.末期 解析:植物细胞有丝分裂末期在赤道板位置上由高尔基体形成细胞板逐渐扩展成为细胞壁,分裂成两个子细胞。 答案:D 2.下列选项中,两类细胞的染色体数目均可呈周期性变化的是() A.蛙的红细胞与淋巴细胞 B.小鼠骨髓瘤细胞与皮肤生发层细胞 C.人的胚胎干细胞与成熟红细胞 D.牛的精细胞与精原细胞 解析:染色体数目呈周期性变化的细胞必须是能进行连续分裂的细胞,A选项中蛙的红细胞进行无丝分裂,无染色体变化;C选项中人的成熟红细胞、D选项中牛的精细胞都不再分裂;B选项中小鼠的骨髓瘤细胞与皮肤生发层细胞均能进行连续的有丝分裂,染色体数目呈周期性变化。 答案:B 3.菠菜根的分生区细胞不断分裂,对该过程的叙述,正确的是() A.细胞分裂间期,DNA复制,DNA和染色体的数目增加一倍 B.细胞分裂前期,核膜和核仁逐渐消失,中心体发出星射线形成纺锤体 C.细胞分裂中期,染色体形态稳定、数目清晰,适于染色体计数和形态观察 D.细胞分裂末期,在细胞中央赤道板的位置出现一个由膜构成的细胞板 解析:本题主要考查细胞有丝分裂的过程。间期复制的结果是DNA含量加倍,染色体数目不变;中心体发出星射线形成纺锤体只发生在动物细胞和部分低等植物细胞中;细胞板没有膜结构。 答案:C 4.在人体成熟的红细胞、蛙的红细胞以及鸡的红细胞中均能进行的生理活动是() A.中心体发出星射线 B.细胞膜中央凹陷 C.ATP合成 D.着丝点分裂 解析:人的成熟红细胞没有细胞核和复杂的细胞器,所以不能分裂,但是可以通过无氧呼吸产生乳酸和ATP。蛙的红细胞能够进行无丝分裂,先核分裂,然后细胞膜中央凹陷,缢裂形成两个子细胞,能进行有氧呼吸产生二氧化碳、水和ATP。鸡的红细胞有细胞核和各种具膜的细胞器,可以进行有氧呼吸产生二氧化碳、水和ATP。 答案:C 5.在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中,以下操作和结论正确的是() A.剪取5 cm根尖,用酒精和吡罗红混合液解离染色 B.右图是高倍显微镜下调节细准焦螺旋看到的视野 C.持续观察,视野中的K细胞将分裂成两个子细胞 D.视野中,N细胞的染色体数目是M细胞的一半 解析:解离时用的解离液是酒精和盐酸混合液,且剪取的根尖长2~3 mm。该实验所观察的细胞在解离时已经死亡,不会继续分裂。M细胞的着丝点尚未分裂,染色体数目并没有加倍;N细胞中着丝点分裂,染色体数目加倍。所以N细胞的染色体数是M细胞的两倍。

细胞生长曲线的绘制实验报告

细胞生长曲线的绘制实验报告 篇一：实验五微生物生长量的测定及生长曲线的绘制 一、实验目的 学习了解微生物生长量测定的方法 学习了解细菌生长曲线的绘制方法 学习掌握血细胞计数板的使用方法 微生物生长量的测定 计数法重量法生理指标法 1、显微镜直接计数法 利用血细胞计数板计数 涂片计数 2、活菌菌落计数法 3、滤膜法 细菌生长曲线 将单细胞细菌接种到恒定容积的液体培养基中，不补充营养物或移去培养物，细菌以二分裂方式繁殖，以时间为横坐标，细菌数目的对数值为纵坐标，可画出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线，称为生长曲线 篇二：细胞生长曲线的测定 细胞生长曲线的测定 一、实验目的

掌握测定细胞生长曲线的方法。 二、实验器具 24孔细胞培养板、微量加样器、eppendorf管、吸头、吸头盒、显微镜、细胞计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、普通显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。 三、实验方法 1. 培养细胞：首先在24孔细胞培养板内分别接种相同数量的细胞，计数并记录接种的细胞悬液密度，接种时间记为0小时。 2. 计数细胞密度：从接种时间算起，每隔24小时计数3孔的细胞密度，算出平均值。为提高准确率，对每孔细胞可计数2-3次，如此操作至第七天结束。 3. 绘制曲线：以培养时间为横坐标、细胞密度为纵坐标，将全部结果在坐标纸上绘图，即得所培养细胞的生长曲线。 篇三：MTT法绘制生长曲线 实验材料： 1，5%FBS-L-DMEM, 5x104个/ml细胞悬液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS,2, 96孔板共7个,酶标仪,50ml离心管，1.5ml离心管，0.22μm滤膜，锡箔纸，MTT工作液 实验步骤： 1，分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。接种到96孔板，每孔接种200μl 细胞悬液进行培养。

(完整版)细胞工程练习题(附答案)

细胞工程练习题 一．选择题 1. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件 是不需要的 A．消毒灭菌B．适宜的温度C．充足的光照D．适宜的养料和激素 2. (08江苏生物)下列关于植物组织培养的叙述中，错误 ．．的是 A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同3．下列选项中能正确说明生物工程技术的是（） A．植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体 B．动物克隆的技术的基础是动物的细胞培养 C．人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造 D．动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物 4．下图是“白菜 —甘蓝”杂种植 株的培育过程。 下列说法正确的 是 A．所得到的“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B．愈伤组织是已高度分化的细胞 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D．诱导原生质体融合时可用聚乙二醇 5．下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图，相关叙述中正确的是 A．②阶段会发生减数分裂过程B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素C．此过程体现植物细胞具有全能性D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体6．右图为将胡萝卜的离体组织在一定条 件下培育形成试管苗的过程示意图。 有关叙述正确的是 A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 7. 各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是 A．通过植物体细胞杂交培育白菜——甘蓝杂种植株 B．通过多倍体育种培育无子西瓜 C．通过单倍体育种培育优质小麦 D．通过基因工程培育转基因抗虫水稻 8. （09浙江卷）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性D．植物体细胞杂交过程中，需用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种体细胞 9. 动物细胞培养必需条件的是 A.无菌、无毒的环境 B.适宜的温度和pH C.O2等气体环境 D.适宜的光照条件 10. 物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是 A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分 11. (08上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④12. 能有效打破物种界限，定向改造生物的遗传性状，培育新的优良品种的生物技术是A.基因工程技术B．诱变育种技术C．杂交育种技术D．组织培养技术13. 某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料， 通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为 A．小鼠体内只有一种抗体B．小鼠体内只有一种B淋巴细胞 C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞 D．可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞14. (08理综Ⅰ)下列关于细胞工程的叙述，错误 ．．的是 A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 ③ ② ① 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体植株

实验：计数法测定细胞生长曲线

实验内容：计数法测定细胞生长曲线 作者：王卫东实验日期：2001.10.24-2001.10.31 实验目的：学习细胞计数的方法；熟悉测定生长曲线的基本原理、方法，了解其应用。 实验原理：一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮后贴壁，随后度过长短不一的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期，在达到饱和密度后，细胞停止 生长，进入平顶期，然后退化衰老。典型的生长曲线即可分为潜伏期、 指数生长期、平顶期及退化衰老四个部分，其中的三个不同生长时相 （潜伏期、指数生长期和平顶期）是每个细胞系所共有的特征。通过 测定生长曲线，不仅可以了解培养细胞生物学特性的基本参数、测定 细胞绝对生长数、判断细胞活力，而且也可用于测定药物等外来因素 对细胞生长的影响。本实验采用计数法测定细胞生长曲线，通过连续 对细胞计数（通常为7d，一般应每次计数3瓶细胞取平均值），然后 以存活细胞数对培养时间作图，即得该种细胞的生长曲线。 仪器、材料和试剂： 培养箱、超净工作台、倒置显微镜、血球计数板 1、仪器：CO 2 2、材料：培养瓶、试管、吸管、移液管、废液缸、HeLa细胞、盖玻片、酒精灯 3、试剂：培养基（含小牛血清）、0.25%胰蛋白酶 实验步骤： 1、细胞悬液制备：取生长良好接近汇合的HeLa细胞，胰酶消化，再加新鲜培 养基制成细胞悬液后计数。 2、接种：根据细胞计数结果，按每瓶5×104个接种细胞（加3mL培养基，实际 接种每瓶5.9×104个）作传代培养（理论上应该每人接种21瓶细胞，每天取3瓶计数，但实际每人只接种7瓶）。 3、计数：24h后开始作细胞计数，以后每隔24h计数一次，连续计数7天。 4、绘图：根据计数结果，绘制HeLa细胞生长曲线。 结果与讨论： 1、细胞计数结果如下：

生物必修一第六章第一节细胞的增殖知识总结

第六章细胞的生命历程 第一节细胞的增殖 一、细胞通过分裂来增殖： ①单细胞生物通过细胞增殖来繁殖。 ②多细胞生物从受精卵开始，经细胞增殖和分化发育而来。 ③衰老、死亡的细胞需经细胞增殖加以补充。 1、意义：细胞增殖是重要的细胞生命活动，是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础。 2、过程：①物质的准备阶段；②细胞的分裂阶段。 3、方式：原核细胞：二分裂 真核生物：有丝分裂、减数分裂、无丝分裂 二、有丝分裂：是真核生物进行细胞分裂的主要方式，细胞进行有丝分裂具有周期性。 1、细胞周期：连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始到下一次分裂完成为止。 △不同的细胞，细胞周期的时间不相同，只有连续分裂的细胞才有细胞周期。例如皮肤的生发层细胞、根的分生区细胞、植物形成层细胞等；而高度分化，失去分裂增殖能力的细胞，例如神经细胞，就不具有细胞周期。 2、两个阶段：分裂间期、分裂期。 ㈠、分裂间期： ⑴概念：整个细胞周期中的一部分，在这个期间细胞完成染色体中 DNA的复制和相关蛋白质的合成，染色质呈现出长的细丝状。 ⑵分裂间期与分裂期的关系：分裂间期为分裂期提供物质上的准备。 ⑶阶段：①G1期（DNA合成前期）：RNA和蛋白质迅速合成，细胞 体积显著增大，为进入S期准备。 ②S期（DNA合成期）：DNA的合成。 ③G2期（DNA合成后期）：RNA和蛋白质大量合成，为进入M期准备。 ⑷特点：为分裂期进行活跃的物质准备，完成DNA的复制和蛋白质的合成，同时细胞也有适度的生长。 ㈡、分裂期（M期）：分裂期是一个连续的过程，为了研究的方便，人为分为四个时期，即：前期、中期、后期和末期。 ⑴动植物细胞在分裂过程中的异同点

下载习题-增殖及其调控

细胞增殖及其调控 一、名词解释 1.MPF 2.细胞周期蛋白 3.APC 4.复制起点识别复合体 5.DNA复制执照因子学说 6.G0期细胞 7.癌基因 8.长因子 9.细胞周期10.联会复合体11.抑癌基因 二、选择题 1.G1期PCC(染色体超前凝集)为( ),S期PCC为( ),G2期PCC为( )。 A.粉末状，细单线状，双线状 B.细单线状，粉末状，双线状 C.双线状，细单线状，粉末状 D.双线状，粉末状，细单线状 2.周期蛋白中有一段相当保守的含100左右氨基酸序列,称为。 A.破坏框 B.PEST序列 C.周期蛋白框 D.PSTAIRE序列 3.破坏框主要存在于周期蛋白分子中。 A.G1期 B.S期 C.G2期 D.M期 4.G1中序列,与G1期周期蛋白的更新有关。 A.PEST序列 B.PSTAIRE序列 C.破坏框 D.周期蛋白框 5.CDK激酶结构域中,有一段保守序列,称( ),此序列与( )结合有关。 A.信号肽,破坏框 B.信号肽,周期蛋白 C.PSTAIRE,周期蛋白 D.PSTAIRE,破坏框 6.APC活性受到监控。 A.纺锤体检验点 B.检验点 C.Mad2 D.cdc2o 7.S期起始的关键因子是。 A.cyclinA B.cyclinB C.cyclinD D.cyclinE 8.染色质在期获得DNA复制执照因子。 A.G1 B.M C.S D.G2 9.复制起点识别复合体的蛋白质为。 A.Acp B.Orc C.Mcm D.Pcc 10.第一个被分离出来的cdc基因是( ),又称( )。 A.cdc2 CDK2 B.cdc1 CDK1 C.cdc2 CDK1 D.cdc1 CDK2 11.RNA和微管蛋白的合成发生在。 A.G1期 B.S期 C.G2期 D.M期 E.G0期 12.有丝分裂器的形成是在。 A.间期 B.前期 C.中期 D.后期 E.末期 13.对药物的作用相对不敏感的时期是。 A.G1期 B.S期 C.M期 D.G2期 E.G0期 14.CyclinA的合成发生在。 A.G1期向S期转变的过程中 B.S期向G2期转变的过程中 C.G2期向M期转变的过程中 D.M期向G2期转变过程中 E.S期 15.下列有关成熟促进因子（MPF）的叙述哪一条是错误的。

细胞的分化练习题(附答案)

“分子与细胞”第六章第2节《细胞分化》练习题 1．下列细胞中不能合成蛋白质的是() A．胰腺细胞B．肠黏膜细胞C．成熟红细胞D．白细胞 2．在生物的个体发育中，一个受精卵能形成复杂的生物体，主要是下列哪一生理过程起作用() A．细胞分裂B．细胞生长C．细胞成熟D．细胞分化 3．下列人体细胞中分化程度最低的是() A．胚胎干细胞B．造血干细胞C．胰腺细胞D．肌肉细胞 4．下列关于细胞分裂和细胞分化的叙述，错误的是() A．生物体的生长发育是细胞分裂和细胞分化的结果 B．生物体通过细胞分化，细胞之间逐渐发生了稳定的差异 C．细胞分裂是细胞分化的基础D．细胞分化过程中细胞中的遗传物质种类发生变化 5．动物体内各种类型的细胞中具有高全能性的细胞是() A．体细胞B．生殖细C．受精卵D．肝脏细胞 6．以下能证明植物细胞具有全能性的生产实践是() A．从一粒菜豆种子长成一棵植株B．用植物激素培育无子果实 C．用一小片土豆叶片，培养成一株完整的植株D．杂交育种 7．对于细胞全能性的理解正确的是() A．从理论上讲，生物体的每一个细胞都具有全能性。 B．未脱离植株的幼叶，在适当的情况下能表现出全能性 C．在个体发育的不同时期，由于细胞内基因发生变化，导致细胞不能表现出全能性 D．脱离了植株的芽，一定能表现出全能性 8．绵羊的乳腺细胞是高度特化的细胞，但用乳腺细胞的细胞核与卵细胞的细胞质融合成一个细胞后，这个细胞核仍然保持着全能性，这主要是因为() A．细胞核内含有保持物种发育所需要的全套遗传物质 B．卵细胞的细胞质内含有物种发育所需要的全套遗传物质 C．卵细胞的细胞质为细胞核提供营养物质D．细胞核与细胞质是相互依存的关系 9．下列关于细胞分化的说法错误的是（） A．细胞分化发生在生物体的整个生命进程中 B．细胞分化是生物界的一种普遍存在的生命现象 C．细胞分化仅发生在胚胎时期 D．细胞分化是细胞在形态、结构和功能上发生稳定性差异的过程 10．高度分化的细胞仍然有发育成完整个体的能力，也就是保持着细胞的全能性。目前能够从体细胞培育成完整生物体的生物种类是( ) A.所有生物体细胞 B．动物细胞 C.植物细胞 D．尚无发现 11．细胞分化与细胞增殖的主要不同是( ) A、细胞数量增多 B、细胞的形态、结构和生理功能 C、细胞在生理功能上相似 D、相同细胞的后代在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异性的过程

细胞增殖及其调控

第十二章细胞增殖及其调控 主要内容 ●细胞增殖(cell proliferation)的意义 ●细胞周期与细胞分裂 ●细胞周期调控 细胞增殖(cell proliferation)的意义 ◆细胞增殖是细胞生命活动的重要特征之一，是生物繁育的基础。 ◆单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。 ◆多细胞生物由一个单细胞(受精卵)分裂发育而来，细胞增殖是多细胞生物繁殖基础。 ◆成体生物仍然需要细胞增殖，主要取代衰老死亡的细胞，维持个体细胞数量的相对平衡和机体的正常功能。 ◆机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等，都要依赖细胞增殖。 ◆细胞增殖受到严密的调控。 第一节细胞周期与细胞分裂 ●细胞周期(cell cycle)概述 ●有丝分裂(mitosis) ●胞质分裂(Cytokinesis) ●减数分裂(Meiosis) 细胞周期调控的主要研究内容 一、寻找与细胞周期调控密切相关的基因及其表达蛋白，研究它们在细胞周期中的动态变化及相互作用的规律。 二、这些基因和蛋白如何启动和影响细胞周期各时相发生的分子事件，进而影响细胞周期的表型。 三、内外环境因素是怎样通过细胞内信号传递系统影响细胞周期的。 第二节细胞周期的调控(Cell-Cycle Control) ●细胞周期调控系统的主要作用 ●细胞周期检验点(Cell Cycle Checkpoint) ●MPF ●Cyclin-Cdk复合物的多样性及细胞周期运转 ●细胞周期运转的阻遏(细胞周期运转的负调控) 一、细胞周期(cell cycle)概述 ●细胞周期 ●细胞周期中各个不同时相及其主要事件 ●细胞周期长短测定 ●细胞周期同步化 ●特异的细胞周期 二、有丝分裂(mitosis) ●前期(prophase) ●前中期(prometaphase) ●中期(metaphase) ●后期(anaphase) ●末期(telophase)

(完整版)细胞增殖的练习题及答案(2)

细胞的增殖作业 一、选择题： 1、在一个细胞周期中，最可能发生在同一时期的是（） A．着丝点的分裂和细胞质的分裂 B．染色体数加倍和染色单体形成 C．细胞板的出现和纺锤体的出现D．染色体复制和中心粒复制 2．科学家用15N的硝酸盐作为标记物浸泡蚕豆幼苗，追踪蚕豆根尖细胞分裂情况，得到蚕豆根尖分生区细胞连续分裂数据如下，则下列叙述正确的是（） A．高尔基体、线粒体、叶绿体在蚕豆根尖细胞分裂过程中活动旺盛 B．蚕豆根尖细胞的DNA分子结构稳定性最低的时期有0—2h、19.3—21.3h、 38.6—40.6h C．基因重组可发生在19.3—21.3h D．蚕豆根尖细胞分裂的一个细胞周期为19.3h 3．下列有关“观察植物细胞有丝分裂”实验现象的叙述，其中错误的是（）A．分生区的细胞呈正方形 B．根尖的整体呈乳白色，尖端（根冠）略显淡黄 C．处于分裂前期的细胞均无核仁 D．向左下方略移动装片，图像向右上方移动 4．种子萌发时，在利用光能之前，不会发生下列哪种现象（） A．细胞分化B．细胞分裂 C．细胞呼吸D．利用无机物合成有机物 5．有关细胞分化的叙述，正确的是（） A．分化只发生在人的胚胎时期 B．分化过程中，细胞器种类和数量不会发生改变 C．分化过程中遗传物质发生了改变 D．生物体生长发育过程是细胞发生分化的过程 6．癌细胞属于恶性分化的细胞，表现为（） A．细胞表面糖蛋白减少B．存在大量游离核糖体 C．细胞代谢速率下降D．细胞含水量急剧下降 7．下图中甲—丁为某动物（染色体数=2n）睾丸中细胞分裂不同时期的染色体数、染色单体数和DNA分子数的比例图，关于此图叙述中错误 ．．的是（）

2021年高中生物 第6章 第1节 细胞的增殖典例精析 新人教版必修1

2021年高中生物第6章第1节细胞的增殖典例精析新人教版必 修1 细胞体积与物质运输的关系 【例1】科学家研究发现，微生物细胞的代谢异常旺盛，每小时所转化的物质可达自身重量的上万倍，这是同等重量的高等动植物所望尘莫及的。资料显示，一般情况下生物越小，越能迅速地与外界环境进行物质交换，其单位时间内所转化物质的重量与其体重之比就越大。请你用以下所给的材料用具设计一个模拟实验，以验证这一事实，然后再回答下面提出的问题。(提示：物质的转化量可用物质的吸收量来反映) (一)设计实验 实验材料：琼脂块，质量分数为0.01% 的NaCl溶液(可被琼脂块吸收)，天平，小刀，尺子等。 实验步骤 第一步：用小刀将琼脂块切成三组边长分别为3 cm、2 cm和1 cm的立方体小块。 第二步： ________________________________________________________________________。 第三步：

________________________________________________________________________。 第四步： ________________________________________________________________________。 预期结果： ________________________________________________________________________。 实验结论： ________________________________________________________________________。 (二)回答问题 (1)该研究中所用的三种大小不同的琼脂块代表________。 (2)有人计算了三种琼脂块表面积与体积得出的相关数据如下表：通过对表中数据的分析，你得出的结论是 ________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________ _。

高一生物必修一细胞的增殖复习题有答案

1．下列关于细胞周期的叙述中，正确的是（） A．细胞周期分为前期、中期、后期、末期 B．加入DNA合成抑制剂，细胞将停留在分裂期 C．细胞分裂间期为细胞分裂期提供物质基础 D．成熟的生殖细胞产生后立即进入下一个细胞周期 2．下列关于染色体的叙述中，不正确的是（） A．染色体是细胞核中容易被碱性染料染成深色的物质 B．严格地说，只有在细胞分裂期才能形成染色体 C．蓝藻细胞在进行有丝分裂时也能形成染色体 D．染色体和染色质是同一种物质在细胞不同时期的两种存在状态3．如图是同一细胞不同分裂时期的图像，据图分析可做出的判断是（） A．图②③④表示一个完整的细胞周期 B．若按分裂的先后顺序排列，应为①→④→③→② C．该种生物的叶肉细胞中共含有6个DNA分子 D．图③过程染色体数保持不变 4．下列关于高等动物细胞有丝分裂的叙述，正确的是（） A．前期核膜解体成磷脂分子和蛋白质分子 B．中期是观察染色体数目和形态的最佳时期 C．后期着丝粒断裂导致染色单体数目加倍 D．末期囊泡聚集成的细胞板形成新的细胞膜 5．有关动物细胞有丝分裂的叙述，正确的是（） A．细胞板在细胞有丝分裂末期形成 B．同源染色体配对通常发生在分裂前期 C．在分裂末期，细胞膜内陷形成两个子细胞 D．在分裂中期，两个中心粒复制形成两组中心粒 6关于细胞有丝分裂的叙述，正确的是（） A．赤道板是有丝分裂过程中出现的一种结构 B．有丝分裂间期DNA的复制和有关蛋白质的合成过程需要酶参与

C．分裂后期细胞中形成纺锤体，使子染色体被拉向细胞两极 D．细胞周期中，分裂间期的持续时间通常比分裂期的持续时间短 7．在一次有丝分裂中，最可能发生在同一时期的是（） A．着丝点的分裂和细胞质的分裂B．染色体数加倍和染色单体形成 C．细胞板的出现和纺锤体的出现D．染色体复制和中心粒复制 8．【2017-2018学年福建省厦门双十中学高一下学期第二次月考】下面是动物细胞有丝分裂不同时期染色体（a）数目、核DNA分子（b）数目的柱形统计图，对此进行的有关叙述正确的是（） A．①时期染色体复制，核DNA和染色体数目都加倍 B．③时期核膜、核仁重建，细胞中部出现细胞板 C．①→②表示着丝点分裂，染色体数目加倍，但核DNA分子数目不变 D．②→③表示染色单体相互分离，染色体和核DNA分子数目也随之减半 9．【2019届黑龙江省哈尔滨市第六中学高三上学期10月月考】如图是蛙红细胞的无丝分裂过程，和有丝分裂相比，下列叙述正确的是（） A．分裂过程中没有出现纺锤丝，但有染色体的出现 B．有DNA和染色体的复制 C．分裂过程中细胞核缢裂成两个细胞核，因此子细胞中染色体减少一半 D．无丝分裂和有丝分裂都有核膜与核仁的周期性消失和重建 10．【2017—2018学年浙江省温州市十五校第二学期联考】下列关于“制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片”实验的叙述，错误的是（） A．在解离环节，需要在室温下解离10?15分钟 B．在漂洗环节，需要放入盛有水的培养皿中漂洗1?2分钟 C．在制片环节，需要在盖玻片上覆盖滤纸，然后用橡皮或笔端轻轻敲击盖玻片几下，使细胞分散开 D．制作有丝分裂临时装片和永久装片的方法是不同的

M TT 比色法测定细胞生长曲线 - 资料中心 - 生物在线

M TT比色法测定细胞生长曲线 郝新保　张利朝　殷　缨　韩秀珍　陶秦渝　郝晓柯　张盈华(第四军医大学唐都医院中心实验室　西安710038) 关键词　细胞生长曲线　M T T比色法 中图号　Q28 在有关肿瘤细胞生物学的研究中,我们常常要测定细胞的生长状态,制作细胞生长曲线,以往的方法是取少量细胞在镜下或计数仪中计数,然后标注在坐标纸上,制作出细胞生长曲线.这种方法对同一样品要求计数几次取平均值,不但操作繁琐、费时,更主要的是误差较大,可达到20%～30%[1],包括取样误差、计数误差等.为了能简便、准确地测定细胞数,我们建立了基于M T T比色法的细胞生长曲线制作方法. 1　材料和方法 1.1　试剂　R P M I1640培养基为G I BCO公司产品,小牛血清为杭州四季青产品,M T T为SERV E产品,其它试剂均为国产. 1.2　仪器　HL22029P型酶标自动分析仪为国营二六二厂产品,P rofile ,E lite型流式细胞仪为美国COUL T ER 公司产品. 1.3　细胞培养　选用人乳腺癌细胞系SK2BR23.细胞培养在含10%小牛血清的R P M I1640培养基中,37℃,5% CO 2. 1.4　镜下计数测定细胞数　细胞消化后悬浮在一定量的培养基中,用计数板按常规方法在倒置显微镜下计数,每个样品测三次,取平均值. 1.5　流式细胞仪计数　细胞消化后悬浮在一定量的培养基中,取0.2m l细胞过滤后用流式细胞仪自动计数. 1.6　M T T比色法计数　M T T比色法计数为间接计数,先要做出细胞的标准曲线,然后根据欲测样品的A值计算出相应的细胞数. 1.6.1　制作标准曲线　准备细胞悬液,从1×107细胞 200Λl 孔开始在96孔板中倍比稀释至1×102细胞 孔,每个稀释度三孔细胞,培养板置37℃培养4h后细胞贴壁,每孔中加入20Λg M T T继续培养4h,然后吸出150Λl培养液,加入等量DM SO,37℃20m in,570nm处测定吸光度[2],用二六二厂酶标自动分析仪程序绘出细胞标准浓度曲线. 1.6.2　制作生长曲线　调整细胞的浓度,按2×103 孔接种在96孔板中,置37℃培养,每天用M T T比色法测定3孔细胞的A值,在标准曲线上计算出相应的细胞数,即可绘出细胞的生长曲线. 郝新保,男,32岁,讲师,主治医师2　结果 2.1　细胞数与A值的标准曲线　根据各稀释度的A值制作细胞浓度的标准曲线, 如图1. 图1　SK2BR23细胞浓度的标准曲线 2.2　肿瘤细胞的M T T比色法生长曲线　根据每天测定的三孔细胞的A值在标准曲线上求得其对应的细胞数,7～10d 后即可绘制细胞生长曲线,如图2. 图2　SK2BR23细胞的生长曲线 2×;--0.2×;…20×. 2.3　细胞接种密度对生长曲线的影响　当细胞接种密度较低(2×102 孔)和较高(2×104 孔)时,对细胞生长曲线的形状有一定的影响,如图2. 2.4　M T T比色法与镜下计数法及流式细胞仪计数法的比较　为了比较M T T比色法和镜下计数法制作的细胞生长曲线,用流式细胞仪的计数结果作为参照,结果表明M T T 比色法与流式细胞仪计数结果更接近,明显优于镜下计数法的结果. 3　讨论　从结果可以看出,用M T T比色法制作细胞生长

高中生物 第一节细胞的增殖

学案设计 第四单元第一章第一节 细胞的增殖 东营市二中单以涛 一、学习目标： 1.了解有丝分裂的过程。 2.说明细胞周期的概念，过程。 3. 说明动植物有丝分裂的区别。 4.体会有丝分裂的意义。 二、学习重点 有丝分裂的过程 三、学习难点 有丝分裂的特点 四、导学策略 （补充上） 五、导学流程 知识点1：细胞不能无限长大 【基础回顾】 1、多细胞生物体体积的增大，主要依靠增加细胞的数量，还要靠_________增大细胞的体积。 2、“细胞大小与物质运输的关系”实验 琼脂块的表面积与体积之比：随琼脂块的增大而 NaOH的扩散速度（深度）：随琼脂块体积的增大，扩散的速度（深度） NaOH扩散的体积与整个琼脂块体积之比：随琼脂块体积的增大而 3、细胞不能无限长大的原因 限制了细胞的长大；细胞核是细胞的；如果细胞太大，的“负担”就会过重，从而限制了细胞的长大。 【疑难探究】 1、生物体器官的大小取决于什么？细胞体积是不是越小越好呢？

生物器官大小主要取决于细胞数目的多少，也与细胞体积的增大有关。 细胞基本生命活动所需的物质与结构所占用的体积有最小值，因此细胞体积不能无限小。 2、为什么卵细胞的体积可以远大于一般细胞？ 卵细胞的卵黄中贮存了大量营养物质，卵裂初期所需的营养物质由卵黄提供，不是靠细胞外物质的输入；细胞的表面积与体积之比限制细胞的物质运输，而卵细胞内部储存了大量的营养物质，可以长得比较大。 知识点2：细胞通过分裂增殖、无丝分裂、细胞周期 【基础扫描】 1、细胞增殖是重要的细胞生命活动，是生物体、、、的基础。 2、细胞增殖包括和整个连续的过程。 3、细胞的分裂方式有三种：、和。 4、无丝分裂的过程：一般式先延长，核中部凹陷，缢裂成个细胞核；接着，从中部缢裂成两部分，形成两个子细胞。 【疑难探究】 思考真核细胞的三种分裂方式有什么区别和联系，并填写下表： 【跟踪训练】 1、进行有性生殖的生物，对维持其前后代体细胞染色体数目的恒定起重要作用的生理活动是： ( ) A．无丝分裂与受精作用 B．无丝分裂与有丝分裂 C．减数分裂与有丝分裂 D．减数分裂与受精作用

第十二章 细胞增殖及其调控

第十二章细胞增殖及其调控 一、名词解释 1、细胞周期：细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。从一次细胞分裂结束开始，经过物质累积过程，直到下一次细胞分裂结束为止，称为一个细胞周期。 2、细胞周期检验点：是细胞周期中的一套保证DNA复制和染色体分配质量的检查机制。是一类负反馈调节机制。当细胞周期进程中出现异常事件，如DNA损伤或DNA复制受阻时，这类调节机制就被激活，及时地中断细胞周期的运行。待细胞修复或排除故障后，细胞周期才能恢复运转。（百度） 3、细胞分裂周期基因：与细胞分裂和细胞周期有关的基因，称为cdc基因。最早是在简单真核生物芽殖酵母和裂殖酵母中发现并分离出约40-50个细胞增殖必须的基因，根据被发现的先后顺序，分别命名为cdc2，cdc25，cdc28等。（百度） 4、细胞周期蛋白：其含量随细胞周期进程的变化而呈现出周期性变化。一般在细胞分裂的间期内积累，在分裂期内递减，尤其在后期急剧下降，在下一个细胞周期中又重复这一消长现象。简称周期蛋白。 5、CDK： 6、G0期细胞：指暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，去执行一定的生物学功能。一旦得到信号指使，会快速返回细胞周期，分裂增殖的细胞。 7、细胞促分裂因子MPF: 在成熟的卵细胞的细胞质中，可以诱导卵母细胞成熟的一种物质，称为促成熟因子。 8、早熟凝集染色体PCC：与M期细胞融合的间期细胞产生了形态各异的染色体凝集，称之为早熟凝集染色体 9、联会复合体：在联会的部位形成的一种特殊复合结构，沿同源染色体长轴分布，宽1.5-2μm，在电镜下可以清楚地显示其细微结构。 10、细胞周期同步化：是指在自然过程中发生或经人为处理造成的整个细胞群体处于细胞周期的同一时期 二、判断题 1、在细胞分裂时内质网也要经历解体与重建的过程。 2、在细胞有丝分裂的前期，染色体的动粒与动粒微管结合，形成纺锤体。 3、在细胞分裂时，动粒微管和极微管都参与了染色体的运动。 4、细胞周期分为G1、S、G2和M期，但不是所有的分裂细胞都有这四个时期。 5、部分细胞不能分裂。 6、细胞周期具有差异性，细胞周期时间的长短主要决定于G1期的时间长短。 7、减数分裂是生殖细胞分裂的方式。 8、在G1期，细胞会合成大量的营养物质，如糖、脂和所有的蛋白质。 9、减数分裂中，只有S期进行DNA的复制。 11、减数分裂中，在M期也会有部分DNA的复制。 12、组蛋白在S期合成。 13、中心粒在G1期复制。 14、磷酸化和去磷酸化对蛋白质的活性有重要的影响。 15、细胞分裂时，内质网和高尔基体等细胞器会解体成膜泡，在胞质分裂时这些膜泡会平均分配到两个子细胞中去。 16、减数分裂I结束后染色体的数量减半，但遗传物质的量不减半。 17、PCC现象的出现是因为M期细胞内具有促进染色质包装的因子。

细胞生长曲线

一细胞生长曲线： A、目的：学习细胞生长曲线的测定方法，观察细胞生长基本规律。 B、背景知识 细胞生长曲线是观察细胞生长基本规律的重要方法。只有具备自身稳定生长特性的细胞才适合在观察细胞生长变化的实验中应用。因而在细胞系细胞和非建系细胞生长特性观察中，生长曲线的测定是最为基本的指标。 原理（选填项目）： 细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。 C、材料 （一）仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃） 5.倒置相差显微镜 6.培养箱（37℃、5%CO2、饱和湿度） （二）玻璃器皿 1.吸管（弯头） 2.培养瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.废液缸 （三）塑料器皿 1.吸头 2.枪头 3.24培养板 4.胶塞 （四）其他物品 1.微量加样枪

2.红血球计数 板（五）试剂 1.D-Hanks液 2.小牛血清 3.R PMI1640 4.双抗（青霉素、链霉素） 5.0.08%胰酶 （四）、操作步骤 1.取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液； 2. 计数，精确地将细胞分别接种于21～30个大小一致的培养瓶内或培养孔（以24孔培养板为宜），每瓶或孔细胞总数要求一致，加入培养液的量也要一致。 3. 每天或每隔一天取出3瓶（孔）细胞进行计数，计算均值。培养3～5d常要给未计数的细胞换液。 4.以培养时间为横轴，细胞数为纵轴（对数），描绘在半对数座标纸上，连接成曲 线后即成该细胞的生长曲线。 9 （五）、注意事项 1．细胞生长曲线虽然最为常用，但有时其反映数值不够精确，可有20～30%的误差，需结合其它指标进行分析。 2．现在很多实验室利用培养板采用MTT法进行生长曲线测定，较为简便。 3．标准的细胞生长曲线近似“S”形，一般在传代后第一天细胞数有所减少，再经过几天 的潜伏适应期，然后进入对数生长期，达到平台期后生长稳定，最后到达衰老。 4．在生长曲线上细胞数量增加1倍时间称为细胞倍增时间，可以从曲线上换算出。 二、四唑盐试验（ MTT）比色试验 （一）、目的 学习四唑盐比色试验，检测细胞存活和生长情况。

细胞增殖习题及答案

细胞增殖测试题 一、选择题 1．有关真核细胞分裂的叙述，正确的是(多选)( ) A．无丝分裂过程核膜不消失 B．动物细胞仅以有丝分裂方式进行增殖 C．动物细胞有丝分裂末期不形成细胞板 D．无丝分裂仅出现于高等生物的衰老细胞 2．有1位同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜中观察到的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是( ) ①取材位置不合适②取材时间不合适③制片时压片力量不合适④解离时间不合适⑤视野选择不合适 A．②③B．②⑤ C．①②⑤ D．①③④ 3．在制作洋葱根尖压片观察细胞有丝分裂时，不可能用到的试剂是( ) A．龙胆紫染液 B．醋酸洋红染液 C．稀盐酸溶液 D．30%蔗糖溶液 4．下列有关体细胞有丝分裂的叙述，错误的是( ) A．细胞周期中，间期时间较短，分裂期时间较长 B．分裂完成后两个正常子细胞的DNA序列相同 C．分裂中期，着丝粒排列在赤道板上 D．间期发生DNA复制和蛋白质合成 5．下列有关正常动物体细胞有丝分裂间期的叙述错误的是( ) A．分裂间期发生DNA复制 B．分裂间期有蛋白质合成 C．分裂间期有RNA合成 D．分裂间期有逆转录发生 6．细胞有丝分裂完成后，平均分配到两个子细胞的物质是( ) A．叶绿体DNA B．线粒体DNA C．细胞核DNA D．核糖体RNA 7．连续分裂的动物体细胞的生长即体积增大，发生在细胞周期的( ) A．分裂间期 B．分裂前期 C．分裂中期 D．分裂后期 8．人体细胞有丝分裂时，产生的四分体个数是( ) A．46 B．23 C.4 D.0 9．能在细胞分裂间期起作用的措施是( ) ①农作物的诱变育种②用秋水仙素使染色体数目加倍 ③肿瘤的化疗④花粉离体培养 A．①③ B．①④ C．②③ D．②④ 10．用高倍显微镜观察洋葱根尖细胞的有丝分裂。下列描述正确的是( ) A．处于分裂间期和中期的细胞数目大致相等 B．视野中不同细胞的染色体数目可能不相等

MTT法绘制生长曲线

MTT实验 实验材料： 1，5%FBS-L-DMEM, 5x104个/ml细胞悬液，5mg/mlMTT溶液，DMSO,0.01M PBS, 2, 96孔板共7个,酶标仪,50ml离心管，1.5ml离心管，0.22μm滤膜，锡箔纸，MTT 工作液（1ml/管） 实验步骤： 1，分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。接种到96孔板，每孔接种200μl细胞悬液进行培养（每孔1x104 细胞）。 2，培养16-48后，每天选择6个培养孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃继续孵育。 3，孵育4h后终止培养，吸出孔内上清，此时应该倾斜96孔板，用枪头小心的将上清液吸去，不可吸去下面的结晶颗粒，慢慢吸去。每孔加入150μlDMSO,室温振 荡10min，使结晶充分溶解，于试验孔平行设不加细胞只加培养液的空白对照1 孔。

注意事项： 【1】1, 两种方法分离小型猪骨髓间充质干细胞的比较 分别取两组0,1,3代细胞，制成1x103的细胞悬液，接种到96孔板，每孔细胞悬液200微升，置37℃、5%CO2饱和湿度孵箱内孵育，各组每24小时分别取出4孔，每孔加入MTT（2mg/ml）20微升37℃孵育，4h后吸弃孔内培养液，每孔加入150微升分析纯的二甲基亚砜，移至酶联免疫检测仪上振荡10min,用分光光度计在492nm波长处测定每孔的吸光度值（OD492），以OD(492)值为纵坐标，时间为横坐标绘制生长曲线 【2】来自：SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养的实验研究 大鼠MSCs生长曲线测定：为了定量测定大鼠BMSCs的生长状况，对来源于同一动物的原代细胞进行连续培养。分别选取生长良好的P1、P3、P5代BMSCs消化后制备成细胞悬液，调整细胞密度为5x104/ml。接种到96孔板，每孔接种200μl细胞悬液进行培养（每孔1x104细胞）。次日起每天选择6个培养孔各自加入MTT溶液（5mg/ml）20μl，37℃继续孵育4h后终止培养，吸出孔内上清，每孔加入150μlDMSO,室温振荡10min，使结晶充分溶解，于试验孔平行设不加细胞只加培养液的空白对照1孔。在酶标仪上选择570nm波长，以空白孔调零，测定各孔吸光度（A）值，连续测7天，以时间为横轴，A值为纵轴绘制细胞生长曲线。

第九章 细胞的增殖与分化 问答题

问答题 1.细胞分裂间期的各时期发生有哪些主要事件？ 期调控中的作用机制与意义。 2.请简述P53蛋白在G １ 3.简述基因表达的调控机制。 4.试述细胞进入M期的调控。 5.细胞增殖的调控因素有哪些？它们是如何调控细胞增殖的。 6.细胞周期调控蛋白有哪几种？它们在细胞周期调控中是如何发挥其功能的？ 7.简述Cyclin-Cdk的组成与作用? 8.什么是成熟促进因子MPF，有何作用？ 9.细胞周期中有哪些主要检查点？细胞周期检查点的生理作用是什么？ 10.何谓细胞周期检查点？它有何作用？ 11.简述分化细胞的特点。 12.为什么说细胞分化是基因选择性表达的结果？ 13.什么是基因的差别表达？在细胞分化中有什么作用？ 14.什么是细胞决定？与细胞分化的关系如何? 15.以血细胞为例，简要说明细胞分化潜能的变化。

参考答案 二、问答题 1.细胞分裂间期的各时期发生有哪些主要事件？ 细胞增殖周期是细胞从一次分裂结束开始，到下一次分裂终了所经历的全过程，可分为间期和分裂期。与分裂期细胞的急剧而明显的形态变化相比，间期细胞的形态变化不明显，但其间进行着比较复杂的化学变化。间期细胞最显著的特征就是进行DNA的复制，其次就是进行RNA和蛋白质的合成。根据DNA的合成情况，又可把间期分为DNA合成前期(G l 期)、DNA 合成期(S期)、DNA合成后期(G 2 期)。 其中G l 期非常重要，G l 期的限制点(R点)是控制细胞增殖的关键，决定了细胞的3种不 同命运：①继续增殖细胞，细胞通过R点，连续进行增殖，始终保持旺盛的增殖活性，能量代谢和物质代谢水平高，对外界信号高度敏感，分化程度低，周期时间较为恒定；②暂不增殖细胞，细胞长时间地停留在G l 期，合成大量特异性的RNA和蛋白质，在结构和功能上发 生分化。随后，代谢活性下降，处于细胞增殖的静止状态(G 期)，但并没有丧失增殖的能力，在适宜的条件下被激活成增殖状态；③不再增殖细胞，细胞丧失了增殖能力，始终停留在 G l 期，结构和功能上发生高度分化，直至衰老死亡。细胞越过R点后，就加速合成DNA复制所必须的各种前体物质和酶，同时，DNA解旋酶和DNA合成启动因子也急剧增加，为进入S 期DNA复制作准备。 S期最主要的特点是DNA复制和组蛋白、非组蛋白等染色体组成蛋白质的合成，通过DNA 复制精确地将遗传物质传递给M期分裂的子细胞，保证遗传性状的稳定性。因此，S期是整个细胞周期中最关键的阶段。 G 2 期中加速合成RNA和蛋白质，其中最主要的是合成有丝分裂因子和微管蛋白等有丝分裂器的组分，另外细胞成分如磷脂的合成增加并进行ATP能量的积累，为有丝分裂进行物质和能量准备。 总而言之，有丝分裂间期主要是细胞积累物质的生长过程，只有缓慢的体积增加，形态上看不到明显的变化，但其间进行着旺盛的细胞代谢反应，进行DNA的复制、RNA和蛋白质的合成，为有丝分裂作准备。 2.请简述p53蛋白在G１期调控中的作用机制与意义。 G1期是从分裂完成到DNA复制前的时期，又叫合成前期。合成rRNA、蛋白质、脂类和 糖类。在末期，DNA合成酶活性增加。G l 期非常重要，存在于G1晚期的G1/S检查点是控制细胞增殖的关键，在酵母中称start点，在哺乳动物中称R点(restriction point)，控制细胞由静止状态的G1进入DNA合成期，相关的事件包括：DNA是否损伤？细胞外环境是否适宜？细胞体积是否足够大？ 在G1期检查点监视到DNA损伤时，损伤修复机制使p53蛋白被磷酸化而激活，活化