显微镜及数码成像系统操作简要
第一部分观察方法步骤
1、明场观察方法步骤
2、相差观察方法步骤
3、荧光观察方法步骤
第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察)
第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)
第一部分观察方法步骤
1、明场观察方法步骤
步
骤涉
及部件
打开电源开关
主开关拨到“I”
选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内
聚光镜选择明场(BF)聚光镜选择钮
相差移出光路
放入标本于载物台
载物台、标本夹
选择合适物镜进入光路
物镜选择钮
开始观察
调节瞳间
距观察筒瞳间距调节
调节屈光
度目镜屈光度调节环
寻找标
本载物台控制手柄
手动调焦
调节光照亮度
图像采集
准备工作:柯勒照明光轴中心调节
第一次观察须完成此调试,完成后不需要再调节,直至装卸过部件后,使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
1 聚光镜升高到最高位
置聚光镜高度升降旋钮
2 用10X物镜聚焦至清晰
3 视场光阑打至最
小
视场光阑
4 逐步下降聚光镜,使视场中出现清晰正多边形图像聚光
镜升降旋钮
5 调节聚光镜中心调节旋钮,使正多边形移至视场中心聚光镜中心调
节旋钮
6 逐步打开视场光阑,使正多边形与视场边缘内
切视场光阑
7 稍加大视场光阑,使它的图象刚好与视场外切即
可视场光阑
2、相差(PH)观察方法步骤
步
骤涉
及部件
打开电源开关
主开关拨到“I”
选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内
放入标本于载物台
载物台、标本夹
选择合适物镜进入光路
物镜选择钮
选择与物镜匹配的相差环进入光路
聚光镜选择钮
PH1对应10X物镜、PH1对应20X物镜、PH2对应40X物镜
开始观察
调节瞳间
距观察筒瞳间距调节
调节屈光
度目镜屈光度调节环
寻找标
本载物台控制手柄
手动调节
调节光照亮度
图像采集
3、荧光观察方法步骤
准备工作:高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯)
步
骤涉及部件
打开电源开关
主开关拨
到“I”
选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内
聚光镜选择明场(BF)聚光镜选择CD+或CD-钮
相差环移出光路
放入标本于载物台
载物台、标本夹
选择合适物镜进入光路
物镜选择钮
标本定位
调节瞳间
距观察筒瞳间距调节
调节屈光
度目镜屈光度调节环
寻找标
本载物台控制手柄
手动调焦
卤素灯电源调至最暗
机身架光强调节按钮
打开汞灯电源供电器
主开关拨到“I”
选择合适的荧光激发块
打开光闸
开始观察
选择合适的物
镜物镜选择按钮
选用合适的ND滤色
片荧光反射照明器上ND片插槽
调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均
一汞灯透镜聚焦旋钮
调节视场光阑和孔径光阑改善反
差视场光阑/孔径光阑
图像采集
准备工作:
高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯)
调整完成后,请不要触动对中部件,如汞灯对中旋钮,视场光阑对中钮等。
汞灯供电器开关打到“I”
汞灯供电器主开关:拨到“I”,待弧光稳定后进行调节。
选择目镜察光路
光路选
择杆
标本放于载物台中
载物台选择蓝色荧光激发块进行调节,打开光闸,光路通过
荧光激发块选择按钮
载物台控制手柄
10X物镜转入光路,标本聚焦清晰
物镜选择
钮
手动调焦
调节瞳间距观察筒
调节屈光度屈光度调节环
取下物镜或使空物镜孔进光路
物
镜转盘
视场光阑拉出至最小,此时对中标本表面出现2个斑点
视场光阑杆
使两斑点最清晰汞灯透镜聚焦调节旋钮
使两斑点重合(先水平后重合)汞灯中心调节旋钮
10X物镜转入光路,向对中标本聚焦清晰,视场光阑推进至最大
物镜选择按钮
视场光阑杆
调节视场亮度均匀一致集光透镜聚焦旋钮
(亮度最大)
对中视场光阑
视场光阑拉出至最小
调整正多边形至视野中
央视场光阑中心调节钮
完成高压汞灯对中
第二部分使用IPP 拍摄图像流程
1. 在桌面点击以下图标打开IPP。
2. 在菜单栏中,(采集)Acquire 菜单下点击(视频/数字图像采集)
Video/Digital Capture,或点击工具栏中,即出现控制CCD 拍照的对话框。
3. 有两种拍照界面可选,点击图一Basic Dialog 和图二Advance 即可在两种模式下自由转换(以下操作将主要以图二的对话框为主)。
4. 点击图三More/Less 按钮即可在基本对话框和扩展对话框间转换。
5. 相机有两种状态可选:,一种是预览(Preview)模式,用来观察动态图像,一般在聚焦和确定感兴趣区域时使用;另一种是拍摄(Snap)模式,用来获取图像。
6. 点击预览后,如果显示的图像为完全黑色,最大的可能是光路转换器没有切换到CCD,所以请把光路转换器切换到CCD。
7. 点击预览后,一般会有图像太亮或太暗的情况,这是因为曝光时间不适合造成的,如下面两图所示。
8. 自动曝光:自动曝光可以帮我们找到比较适合的曝光时间,即我们关心的样本看到比较清晰。当出现一个非常暗或者非常亮的图像时,可以通过以下三种方法之一获得自动曝光时间。
A.点击自动曝光按钮。
B.先点击Auto Exp Area(自动测光区域),用鼠标在预览图上选定感光区域(或者点击Reset to Full Frame 恢复全图预览),然后点击Calc Auto Exp,就可以根据设定的区域自动计算曝光时间。
B方式 C方式
C.点击Auto Set,此时软件将先自动计算曝光时间,然后提示选取一个区域做自动白平衡(一般选在图像上最亮白的地方,此部分的详细操作请参考下面的“第12步:自动白平衡”)。
9. 预览时图像覆盖着一层透明膜的效果:在预览图片上点击右键,Transparency 选择OFF可以关闭此功能。
10. 预览图像的直方图实时显示:在预览图像上点击右键,选中Live Histogram 即可显示,此功能可以帮助我们判断图像效果,但波峰在直方图中间部分时效果比较好。
11. 如果预览图像中有很多红色的条带或比较多的红色点:这是因为我们选中了“饱和提示Saturation Warning”功能,如下图所示,把“饱和提示”功能关闭即可。
12. 自动白平衡:在预览图像上右击鼠标,可以选择自动白平衡(Auto White Balance),或者点击以下菜单上的“Auto White Balance”,此时可以在预览图像上选定白色区域,然后点击Calculate 按钮即可实现自动白平衡。(下图中的选项在图像拍摄界面点击More后即可显示)
13. 手动调整曝光时间:当使用了自动曝光以后,可以通过手动调整来更加精确的得到更好的图像效果。
选中“Adjust Exp for Binning”后,可以看到曝光时间会自动调整,此时虽然预览和拍摄曝光时间不同,但是图像效果相同。
14. 预览和拍摄图像条件的锁定:很多状况下,预览和拍摄的图像效果不一致,可以锁定界面中的锁定钮使两种状况一致。包含以下条件的锁定:
A.拍摄区域的锁定:
如果要改变区域,点击“SET PVW AREA”的按钮,即可看到以下界面
此时,选择Select Area from Live Preview 即可在图像上划定感兴趣的区域;选择Resetarea to full frame 即可重新把感兴趣区域划定为全图。
B.预览和拍摄Binning 锁定:如果标本荧光较弱,可以采用Binning模式增强CCD 敏感度。
C.预览和拍摄Gain,Gamma,Offset 的锁定
D.当以上条件均已锁定,但色彩仍然不一致时,请到:Camera Configuration —〉Active Camera Settings,在Color Correction 下面,把Preview 和Acquire 都选中或者都不选中。
15. 拍摄动态图像:
如果需要连续拍摄动态多幅图像,把拍摄界面转化到基本模式,并点击
Image,如下所示:
一般情况下,拍摄单张图像时,选取New Image,拍摄连续动态图像时,一般选取Sequence(如果需要直接存储在硬盘中,选取File…Browse…输入图像名称)。IPP 提供两种拍摄动态图像的模式,一种是以最快的速度连续拍摄,另一种是图像有间隔时间拍摄,
A.需要以最快速度拍摄时,请输入拍摄帧数,并选中“Use Minimum possible Interval”,做了此设定后,在点击拍摄时,就会以最快的速度拍摄一定帧数的图像。
B. 需要以一定间隔时间拍摄时,把“Use Minimum possible Interval”去掉,
然后点击Set Time,在弹出的对话框中输入两幅图像的间隔时间,比如:10 秒,点击OK 确定。
此时,界面如下图所示。
在拍摄帧数下就会有两幅图像之间间隔时间的显示。
做了如此设定后,再点击拍摄时,就会以10s 的时间间隔拍摄一定帧数的图像。警告:当不使用动态拍摄模式时,请务必把Image 选项选中
“New Image”,否则,每次点击拍摄,都会得到动态图像。
16. CCD 属性对话框的使用:Camera Configuration:
A.当使用单色CCD 时,有时会看到彩色图像,这是因为在相机确认里选择了彩色滤镜,所以,到Camera Configuration 中,把Color Filter 的选项去掉即可。B.制冷型CCD 要选择制冷模式,使芯片工作在制冷状态下,所以,到Camera Configuration 中,选中Enable Cooling,如下图所示:
17. 当以上条件可以满足一定的试验要求时,可以保存所有的参数设置,这样,以后做类似试验时,可以直接调出相关试验条件,从而节省时间,并使试验过程简化。
操作:直接点击Save/Save as,然后输入文件名,选择目录保存即可。
调出时直接点击标有三个黑点的钮,选择要调出的文件即可。
IPP 提供了六个试验条件文件调出的快捷方式,如下图所示:
这样调出的文件可以显示在基本模式的简单控制条中,便于试验使用。
第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)
打开DP-BSW软件
启动DP控制器。
调节显微镜。(见明场观察部分)
显示预览图象。①
设置曝光时间。②
手动
③
曝光模式?
设置曝光时间
自动
选择测光区域
(30%,1%,0.1%)。④
按下手动控制盒自动对焦红色按键,进行自动
聚焦。(打开BX2-BSW软件)
手
动
精细调节曝光时间
曝光模式?
自动
移动曝光区域,
校正曝
光。⑤
调节白平衡。⑥
记录图
象。⑦
⑧
进入DP管理器。
添加注释或图释。⑨
储存图象。⑩
③
具体的参照图见下页的内容。
DP-BSW软件:
测光模式
(30%/1%/0.1%)
曝光模式
预览
拍照
校正曝
光。⑤
调节白平衡。⑥
记录图
象。⑦
⑧
进入DP管理
器。
添加注释或图
释。⑨
储存图
象。⑩
③
具体的参照图见下页的内容。DP-BSW软件:
测光模式
(30%/1%/0.1%)
曝光模式
预览
拍照
Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明 操作步骤: 本显微镜的荧光光路与明视场(相差、DIC也属明视场)光路相对独立。当使用明视场时,无需打开荧光光源,进打开总电源即可。当使用荧光观察时,可同时打开总电源和荧光电源。 明视场观察: 1.开机:按动总电源开关“1”处接通电源,此时开关和指示灯点亮,打开显微镜底座左侧的透射照明器开关,从小到大调节照明器开关下方的亮度调节旋钮,使照明亮度适当。 2.首先将聚光器模板A放入光路,用10×物镜对样品进行对焦,调节目镜的屈光度调节环,然后换用40×物镜观察样品。 3.关机:将亮度调节旋钮旋至亮度最暗位置,关掉显微镜底座左侧的透射照明器开关,然后按动总电源开关“0”处关闭电源。 DIC微分干涉观察: 开机、关机等与明视场观察相同,区别是要使用聚光器相对应的DIC模板N1及起偏器、检偏器,将其放入光路后,再使用专用的银白色DIC物镜对焦观察。在观察过程中可旋转起偏器,达到最佳的观察效果。 相差观察: 开机、关机等与明视场观察相同,区别是要使用聚光器相对应的相差模板PH1。 荧光观察: 1.开机:先打开荧光灯电源开关,然后按住电源开关上方的荧光灯激发按钮3秒钟后松开,即可见荧光灯点亮。 2.打开荧光转盘上的荧光拨杆至“0”位置,此时荧光光路打开。旋转荧光转盘,转入所对应的滤光片位置即可进行荧光观察;在观察过程中可插入位于荧光灯源前方的减光片,以改变荧光强度,减弱对活细胞样品的损伤。 3.关机:直接关掉荧光灯电源开关即可。 注意事项: 1.短时间内频繁开关荧光灯电源,将极大的缩短荧光灯寿命。 2.荧光光源打开后即可使用,但必须使用20分钟才可以关闭;关闭30分钟以后才可以再次打开,否则会导致荧光灯损坏。 3.不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮,否则会导致显微镜损坏。 4.粗动调焦钮达到限定位置后,如果继续向同一方向旋转会引起显微镜故障。请不要旋转过度。 5.显微镜光源在工作时会产生高温,因此小心不要接触光源以防烫伤,也不要将易燃品如纸张、布、塑料和酒精等放置于光源附近。
1、目的:制定显微镜的操作规程,使检验人员正确使用显微镜。 2、适用范围:适用于显微镜的操作。 3、责任人:检测员。 4、正文: 4.1.仪器调整 4.1.1.将亮度调节轮调至最小,并关上开关。 4.1.2 将电源插头插入外接电源插座(插入前应检查外接电源电压与仪器所需输入电压是否一致)。 4.1.3 开启开关,拨动亮度调节轮至适当位置。 4.1.4 转动物镜转换器,将4×物镜置入光路中。 4.1.5 转动聚光镜升降手轮,使聚光镜上升至定位位置。 4.1.6 将标本置于载物台上,用片夹将其固定,利用载物台纵横移动手轮,将标本欲观察部分移入可观察的光路中。 4.1.7 拨动光栏拨杆,将孔径光栏升至中间位置。 4.1.8 用右眼观察,转动粗手轮使载物台缓慢上升至标本轮廓可见,再用微调手轮精细调焦到标本物象清晰。 4.1.9 视度调节,通常人的左右眼视度不完全一致,显微观察时应进行视度补偿。此时用左眼观察,并转动左目镜筒上的视度调节圈,使之成像清晰。 4.1.10 瞳距调节,双手握住双目外壳转动,使两目镜出瞳中心距离适合您的两眼瞳距(使两眼观察图像重叠合一为止)。 4.1.11 根据需要,选择10×, 40×, 100×等物镜后通过微调,对物体进行精调焦直至清晰。 注意:使用高倍物镜时,标本盖玻片厚度应为0.17±0.01mm,否则会影响图像的清晰度。 4.2 物像衬度调整:一般情况下,目镜视场中像的衬度依赖于标本物体本身的衬度,然而对于同一标本物体,合理地调整光源亮度,孔径光栏大小,会得到良好的物像衬度。所以不应只靠关小孔径光栏来降低视场中的亮度,当取下目镜向镜筒内观察时可看见孔径光栏像,调整孔径光栏,使其像充满物镜后光孔的70%-80%,通常效果会比较好。
WT-1000GM操作手册 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司
相机及操作软件介绍 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司专业开发显微镜数字相机CMOS系列(TCA-1.3C,TCA-1.3B/W,TCA-3.0C,TCA-5.0)及CCD 系列(TCC3.3MP、TCC-1.4HICE)广泛应用于显微镜成像、凝胶成像、化学发光成像等众多科研质检生产领域。 WT-1000GM 为通用相机操作、图像处理、图像测量软件,该软件操作方便,功能专业,性能稳定,界面友好,是您工作科研的得力助手。
相机安装及软件操作介绍 1.1 操作系统要求 本公司相机及软件支持windows XP, vista, 2000, 操作系统,但要求系统安装Directshow 9.0 components. 1.2Hardware requirement 1.2.1电脑要求配置 CPU: Intel Pentium 4-2.6G; 内存RAM: 512 MB 硬盘HDD: 10GB USB: USB2.0 interface 安装相机驱动 2.1安装相机 2.1.1. 自动安装 1.打开光盘内TCA-1.3驱动Driver文件夹,运行安装程序 。 2.出现下面窗口,选择下一步。
3.出现该窗口选择,仍然继续4.TCA-1.3已经成功安装到计算机内
5. 安装完毕右下角任务栏会提示硬件安装完成,选择设备管理器可以看到如下 位置有该相机的属性显示。 2.1. 3. 安装软件 直接运行WT-1000GM文件夹里的Sutup.exe文件就可以将软件安装到指定的位置了 1. 双击“setup.exe”
光学显微镜标准操作规程 1 目的 规范光学显微镜标准操作规程,确保光学显微镜正确使用。 2 授权操作人员 经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。 3 原理 当被观察物体置于镜前的焦点稍远处时,物体反射的光线经物镜放大后成一倒立实像位于目镜前焦点附近,再经目镜放大呈倒立虚像位于观察者的明视距离(约250mm)处。 4 工作环境 相对湿度:10% ~ 85%;运行温度:15 ~ 30℃。 5 操作程序 5.1 准备:将光学显微镜放置在采光好的实验台上,避免振动。向上转动粗调螺旋至一定高度后,将载物片放于载物台上。 5.2 调焦与低倍镜观察:将10×低倍物镜对准镜筒,转动粗调螺旋使物镜下降到快接触标本处后,选择平面反光镜的角度,调整聚光器的上下高度和光栅大小,使目视亮度适宜,再用细调螺旋上下调节焦点,使物像清晰。 5.3 高倍镜观察:转换40×高倍镜对准镜筒,一般不需重新调焦,仅调节细螺旋即可看到清晰物像。 5.4 油镜观察:于革兰氏染色处滴加香柏油一小滴,将玻片放在载物台上。使油镜头(100×)对准镜筒,转动粗调螺旋使之降至与玻
片轻轻接触。然后升高聚光镜使其与载物台平齐,将光栅放至最大,选择凹面反光镜调节角度,使射入光线最强。再转动粗调螺旋使物镜上升,待见到标本中物像后,调节细调螺旋使物像清晰,对标本进行顺序观察。 5.5 收镜:显微镜使用完毕,取下载物片,用擦镜纸将油镜头揩干净(必要是可滴一滴清洁液于擦镜纸上)。用绸布擦拭镜身,将物镜转成“八”字形,镜筒、聚光器下降至最低处,反光镜放水平位,以右手握镜臂,左手托镜座,轻轻放入显微镜箱内。 6 维护及保养 光学系统清洁,一般情况下可用洗耳球吹气、小毛刷刷除仪器表面的灰尘。当光学系统有污染时,可用擦镜纸蘸清洁液擦拭,如被尿、便等污染时可用棉签蘸1%氨水擦拭污染区。 7 应急处理 出现不能解决的故障,应及时联系维修人员并通知微生物负责人。 8 注意事项 8.1 要培养良好的操作习惯,使用螺旋时要注意,当对焦时以转动粗调螺旋为主,尽量少用细调螺旋,以延长机械系统的寿命。在转换高倍镜,特别是油镜观察时,切记粗调螺旋只能将镜头上移而不能下移,以免压碎载物片,碰坏镜头。 8.2 显微镜存放的环境条件应防震、防潮、防尘、防日晒、防温差过大。
Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜操作手册 目录: 1 系统得组成 系统组成及光路示意图 实物照片说明 2 系统得使用 2、1 开机顺序 2、2 软件得快速使用说明 2、3 显微镜得触摸屏控制 2、4 关机顺序 3 系统得维护 1 系统得组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。 系统组成及光路示意图: 电脑工作站 激光器 电动荧光显微镜扫描检测单元 实物照片说明: 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO2 培养系统控制器 激光器 电脑工作站 2 系统得使用 2、1 开机顺序 (1)打开稳压电源(绿色按钮) 等待2 分钟(电压稳定)后,再开其它开关 (2)主开关[ MAIN SWITCH ]“ON” 电脑系统[ SYSTEMS/PC ]“ON” 扫描硬件系统[ PONENTS ]“ON” (3)打开[ 电动显微镜开关] 打开[ 荧光灯开关] (注:具有5 档光强调节旋钮) (4)Ar 离子激光器主开关“ON” 顺时针旋转钥匙至“—” 预热等待约15分钟, 将激光器[ 扳钮] 由“Standby”扳至 “Laser run”状态,即可正常使用 (5)打开[ 电脑开关],进入操作系统
注:键盘上也具有[ 电脑开关] 2、2 软件得快速使用说明 (1)电脑开机进入操作系统界面后,双击桌面共聚焦软件ZEN 图标 (2)进入ZEN 界面,弹出对话框: “Start System”——初始化整个系统,用于激光扫描取图、 分析等。 “Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件,用于已 存图像数据得处理、分析。 (3)软件界面: 1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition)、图像处理(Processing)、维护(Maintain) (注:Maintain仅供Zeiss专业工程师使用) 2 动作按钮; 3 工具组(多维扫描控制); 4 工具详细界面; 5 状态栏; 6 视窗切换按钮; 7 图像切换按钮;8 图像浏览/预扫描窗口;9 文档浏览/处理区域;10 视窗中图像处理模块 动作按钮: Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。 Start ——开始扫描单张图片或一个实验流程(1组图片,如XYZ、XYT 等)。 Stop ——暂停/结束扫描。 New ——建立一个新图像扫描窗口/文档。 激光连接状况检查 眼睛观察/相机/共聚焦LSM 光路切换(ZEN软件界面右上角): Ocular ——通过观察筒用眼睛观察。(激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。) Camera ——光路切换至相机。 LSM ——共聚焦扫描成像光路。 显微镜设置: “Ocular”——> “Light Path”——> 点击物镜图标,选择物镜——> 样品聚焦。 透射光控制(Transmitted Light Control) 反射光光闸控制(Reflected Light Shutter) 荧光激发块选择(Reflector) 共聚焦LSM 扫描设置 点击“LSM”(ZEN软件界面右上角),系统切换至共聚焦扫描光路: 光路设置: Smart Setup ——自动预设光路 选取“荧光探针”、“颜色”、扫描方法, 应用“Apply”。 (注:Fastest 为最快速扫描,多条激光谱线同时扫 描。Best signal 为最佳信号扫描,多条激光谱线顺 序扫描。Best promise 为兼顾速度与信号得折
稳定同位素质谱实验室规章制度 1.实验人员上机前必须经过培训,认真执行本室相关安全制度和操作规程。 2.进入无菌室需更换拖鞋,非实验室人员不得进入实验室。 3.禁止携带有毒、有害、易燃、腐蚀的物品进入实验室。 4.实验室内要保持清洁卫生,桌柜等表面保持无尘,杜绝污染。 5.仪器运行最佳温度为28℃,禁止自行调节实验室空调温度。 6.禁止挪动微克电子天平。 7.实验人员需详细填写使用记录,仪器出现故障时应立即停止使用并报告管理 人员,不可擅自拆卸仪器。 8.禁止使用U盘和移动硬盘等在主控计算机上拷取数据。 9.本实验室物品不经批准不得擅自外借或转让,更不得私自拿出。 10.离开实验室前,认真检查并关闭电源以及气体阀门,关好门窗方可离去。
扫描电镜操作规程 开机操作: 1.开变压器电源 2.开主电源 3.开真空(VAC SW I键点亮) 4.开水箱电源 5.开操作系统(右手OPE SW I键点亮) 6.开电脑(账户和密码均为SEMUser) 7.开软件(桌面PC_SEM)Guest账户,无密码 8.仪器进行自检,等待5分钟后,所有自检变绿通过,初始化样品台,主机上EXCHPOSN 灯亮起。 9.推入样品,EXCHPOSN以及HLDR灯亮起 10.开电子枪Maintance-Gun-Star up 电源会持续增加Filament Current 至 2.29 Extract Voltage 至3.0 11.半个小时后电子枪稳定,SIP-1<9E-8, SIP-2<2E-6 12.若真空读数稳定低于至5.0E-4后,则可进行实验 关机操作: 1.关闭主屏上观察OBSERATION OFF 2.关电子枪MAINTANENCE-GUN-SHUT DOWN 等待Filament Current 慢慢变为0 3.打开Camera,确认所有探头均退出样品舱,将样品取出或退到准备舱 4.关软件操作系统File-exit-exit 5.关闭电脑 6.关闭电镜操作系统(控制台右下方OPE SW 上O键点击变亮其中I键为开启) 7.关闭真空系统(控制台左下方VAC SW O键) 8.关水箱(控制台右后方的白色箱子MAIN 阀门拉下) 9.5分钟后,关闭主电源(控制台左下方MIAN SW O键点亮) 10.确定备用电源处于工作状态(控制台面上左上方,白色盒子,工作时绿灯亮起,电流 超过20uA) 11.关闭变压器(机器后,最左侧蓝色箱子,阀门拉下)
荧光显微镜操作手册 Olympus BX51 物镜: 4 ×0.16 (无DIC) 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 荧光滤色块转盘: 1. WU 蓝 2. WIB 绿(长通) 3. WIBA 绿(带通) 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄 操作步骤:(注意:样品须在低倍镜下放置和取下) DIC观察:
1.打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关) 2.将样品置于载物台上,用样品夹夹好 3.将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC棱镜应 与相应的物镜倍数相匹配 4.先选用低倍物镜(“10×”) 5.调节透射光的强度,调节焦距,找到视野 6.换到高倍镜头,观察样品 7.DIC观察时,光路选择拉杆拉到中间位置,既可观察,也可拍照 荧光观察: 1.打开明场电源开关 2.打开汞灯电源开关 3.将样品置于载物台上,用样品夹夹好 4.检偏器、DIC棱镜在光路外 5.将荧光光路shutter打开(“○”为开,“●”为关),需保护样品时关闭shutter 6.光路选择拉杆推至最里边 7.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置 8.通过两组减光滤片调节激发光强度 9.从低倍镜开始观察,调焦,找到预观察视野, 10.依次换到高倍镜头,观察样品 11.拍照时光路选择拉杆完全拉出 普通明场观察: 1.打开明场电源开关(“︱”为开,“○”为关) 2.将样品置于载物台上,用样品夹夹好 3.起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外,荧光滤块转盘拨到“1”位置,DIC棱镜拨到 明场(BF)位置 4.先选用低倍物镜(“4×”) 5.调节透射光的强度,调节焦距,找到视野 6.依次换到高倍镜头,观察样品 7.光路选择拉杆拉到中间位置既可观察,也可拍照 关机: 1.关闭汞灯电源(注意:汞灯需使用半小时以上方可关闭,关闭半小时以后方可再次 开启) 2.将透射光调到最小,关闭明场电源开关 3.将镜头转到低倍镜,取出样品,若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头 4.确认数据已经保存,关闭软件 5.使用光盘拷贝数据(禁止使用移动储存设备拷贝数据) 6.关闭电脑,登记使用时间、荧光数字等使用情况
正置显微镜操作规程 1 目的 1.1 规范正置显微镜的使用和维护操作程序和方法,确保检验观察的正确性。 2 范围 2.1 适用于本中心正置显微镜的使用和维护。 3 职责 3.1 设备使用人有责任按本规程进行正确的操作和维护。 4 程序说明 4.1 操作前准备 4.1.1首先根据需要安装好目镜,物镜和光源部分,将准备好的载玻片置于载物台上。 4.1.2旋转物镜转换器,将物镜置于光路中,先自低倍开始,根据被观察物的特征,依次增高显微镜倍数。 4.1.3每次观察前,先将物镜调至与载玻最近距离处,再从目镜注视视野情况,缓慢由下向上凋节升降螺旋至视野内出现物像后,再调节细螺旋,至物像清晰。 4.2 低倍镜观察 4.2.1取镜和放置:显微镜平时存放在台面或箱中,使用时,右手紧握镜臂,左手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边1-2寸为宜,便于坐着操作。 4.2.2对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔。打开光圈,上升集光器,直到视野内的光线均匀明亮为止。 4.2.3放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位推到通光孔的正中。 4.2.4调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢的上升至物镜
距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离(>5. 40毫米)而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目的上升镜台。 4.3 高倍镜观察 4.3.1选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度才能进行高倍镜的观察。 4.2.2转动转化器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。 4.2.3调节焦距:转换好高倍镜后,一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0. 5-1圈,即可获得清晰的物象。如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时.必须顺时针转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。 4.4 油镜观察 4.4.1在使用油镜之前,必须先经低、高倍镜观察,然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。 4.4.2将集光器上升到最高位置,光圈开到最大。 4.4.3转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。 4.4.4慢慢转动细调节器至物象清晰为止。如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时,应按照低倍→高倍→油镜程序操作;在加油区内重找应按照低倍→油镜程序操作,不得用高倍镜,以免由沾污镜头。 4.4.5油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去,
显微镜使用说明 1,显微镜开关时卤素灯电压一般应调至最低。 2,转换物镜时,应旋转物镜架,不要用手直接转物镜。 3,荧光光源汞灯由于使用寿命短,为保证尽可能的延长使用时间和安全,汞灯电源开/关间隔时间必须大于三十分钟。 4,显微镜的各光学部件应调节到位(如,DIC 插件,荧光滤片,物镜等),以免影响显微镜的正常工作。如果不到位,那么观察时 通常会看到月牙形阴影. 5,使用油镜时应使用专业用油,不要用其它介质(如香柏油),以免损伤镜头。每次使用完油镜后,需将油镜擦拭干净(物镜及 玻片)。(正置显微镜,油滴在样品上。倒置显微镜,油直接滴 在物镜上。) 6,不要用手直接触摸光学部件的表面(如物镜,荧光模块,目镜等),以免留下手指印在上面,影响观察效果。 7,在拆卸全自动显微镜的聚光镜,荧光滤片盒(倒置显微镜)等部件时,应在断电的情况下进行操作。 8,因为各款显微镜的有效工作距离/特性等各有不同,使用前应充分了解所用仪器的特性及观测范围,以免因不恰当的操作,对 显微镜及其配件造成损害。 提示:1,观测样品时(特别是金相样品),切不可将物镜撞及样品,以免将物镜镜头压碎。 2,移动显微镜时,应做到小心轻放,以免因震动而对光学部件及光路造成损害,影响显微镜的使用。(建议移动显微镜时,先将各光学部件拆 除,移位后,再重新安装。) 二一般观察方式的调节 为了观察和拍摄好图像,需要对显微镜和CCD以及CCD软件都要求进行调节。 在进行显微观察和摄影前,首先要做的就是对显微镜进行调节。调节项目包括柯勒照明、相差环调节、荧光中心调节等。其中后两项一般在安装是已经调节好,以后一般情况下就不需要再调节了。 柯勒照明调节方法如下:
Tescan 钨灯丝扫描电镜操作规程 1.点击Vent (操作界面右下方)按钮,放气。等待右下方显示Venting Finish,即可进行下一步操作。 2.装载试样。需将试样用导电胶粘紧。(放样时注意操作界面Z轴距离,钨灯丝100以上。)检查每一个螺丝是否拧紧。不应有露在外的螺丝头。 3.小心关上仓门,点击Pump(位于Vent旁边)。抽真空。等待Chamber 真空度钨灯丝到达5*10-2以上即可进行下一步。 4. 操作前参数检查: A,首先检查高压(HV)是否为所需值,若不是可先点击右边信息盘的HV 再在右上边输入所要求值。 B,其次检查Beam intensity值,正常扫描时为10,打能谱时调节为12。 C,点样品操作盘,想要做的第一个样品所在位置(1-7标号)。样品台会移动到视野内。 5.调节Z轴逐次减小,使样品接近镜筒。(这个值为样品台到镜筒的距离。所以合适的值既是自己样品中最高的样的高度加10的余量)比如:自己样品中最高的为10,则最终可以调节z 轴至20。 6. 找好试样位置(点击鼠标的滚珠可以调节位置),开始先点击Mag(视野右手边一竖行快捷键中),再在右上边输入放大倍数(刚开始可先输入100倍),逐级放大。当视野中图像模糊,
但有图像时,点击WD(视野右手边一竖行快捷键中),在再视野中双击左键可以出现一个小方框(右键调节方框大小),再左右滚动左手边放置的轨迹球聚焦至图像清楚。再放大,再聚焦,直至达到需求即可。 如果图像无法调清楚则观察是否为以下两种情况: 1)调节WD时图像有移动,选择右下方HV附近Adjustment 中第三项弹出一个对话框点Next 视野中会弹出一个闪动图像,然后调节轨迹球(按住F11调节上下方向,F12调节左右方向)直至图像在中心跳动(而不是左右或上下移动)再聚焦。 2)图像有单一方向的拉长,则判断为有相散,点击Stg右手边一竖行快捷键中。然后调节轨迹球。(按住F11调节上下方向,F12调节左右方向)直至图像不在变形,再聚焦。 (一般要求调节清楚地放大倍数大于需要拍照倍数。例如:需要1000倍,则应将2000倍调节清楚。) 7.拍照之前应检查亮度对比度是否合适,视野右手边一竖行快捷键中选择选项,然后轨迹球上下调节对比度,左右调节亮度。 8.右手边一竖行快捷键中选择Speed选项选择扫描速度6 或7,(调节时Speed选择4以下)。然后点击右手边一竖行快捷键中最后一项保存照片。 9.重复6-8完成拍照。 10.实验完成后归位操作: A. 将Z轴输入钨灯丝100,使样品台降回原位。
显微镜及数码成像系统操作简要 第一部分观察方法步骤 1、明场观察方法步骤 2、相差观察方法步骤 3、荧光观察方法步骤 第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)
1、明场观察方法步骤 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” 准备工作:柯勒照明光轴中心调节 第一次观察须完成此调试,完成后不需要再调节,直至装卸过部件后,使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。 ① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰 ③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜,使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮,使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑,使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑,使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑
步骤 涉及部件 I ” 载物台、标本夹 3、荧光观察方法步骤 准备工作:高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” CD+或CD-钮
主开关拨到“I ” ND 片插槽 /孔径光阑 准备工作: 高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 调整完成后,请不要触动对中部件,如汞灯对中旋钮,视场光阑对中钮等。 ,待弧 载物台
观察筒 视场光阑中心调节钮 第二部分使用IPP 拍摄图像流程 1. 在桌面点击以下图标打开IPP。 2. 在菜单栏中,(采集)Acquire 菜单下点击(视频/数字图像采集)Video/Digital Capture,或点击工具栏中,即出现控制CCD 拍照的对话框。
Philips XL30-ESEM环境扫描电镜操作规程 一、开机 1.分别打开电源总开关、主控面板上电源开关、UPS电源开关,等待计算机主机启动。 2.按照显示屏提示按CTRL+ALT+DEL键及桌面上的XL30图标,提示做Home时按Yes图标。 3.用鼠标点击真空Pump图标抽真空,待提示 Vac OK时,按主控面板上的高压钮,鼠标点击 显示屏高压图标,图象显示。 二、样品安装 1.关闭显示屏上的高压图标,关真空VENT图标,待镜筒完全放气后轻轻拉开样品室门,装入 样品(带手套),慢慢推回样品室门。 2.用鼠标点击真空图标抽真空,待提示真空OK时,鼠标点击显示屏高压图标,图象显示。 三、扫描图象观察 1.调整好亮度和反差,用鼠标右键横向移动粗调焦。按放大倍数要求设好样品高度,高倍下选 区扫描,用鼠标右键横向移动细调焦。 2.扫描速度1、2用于选择和粗调焦,扫描速度3、Photo用于细调焦及照相。 3.高倍下用Shift+鼠标右键横向移动消象散。 四、图象记录、储存和打印 1.点击扫描速度3或Photo进行慢扫描,扫描完成后点击显示屏上雪花图标锁定图象。 2.打开我的电脑E盘USR目录,按客户姓名建立文件名,点击显示屏In/Out菜单中的Imag e,输入样品名称,点击Save图标存盘。再点击In/Out菜单中的Photo,用120相机拍摄底片。 五、合轴操作及环境扫描模式 按仪器说明书操作。 六、关机 1.样品高度调至20毫米,放大倍数调至100倍,样品位置调至中心。 2.依次关闭显示屏上的高压图标、主控面板上的高压钮、真空Vent图标,点击显示屏左下角 的开始图标,选择现在关机。 3.待提示安全关机后,关闭主控面板上的电源、UPS电源和电源总开关。
荧光显微镜使用方法和荧光显微镜操作规程 荧光显微镜是中的一种。 关键字: 荧光显微镜使用方法 荧光显微镜操作规程 荧光显微镜使用 使用方法和荧光显微镜操作规程 1. 用窗帘遮蔽光线,关闭房间内的灯光,除去显微镜的防尘罩,确保显微镜灯室通风良好、无遮盖。装上汞灯灯箱,并转动灯箱卡圈上的拨杆,将灯箱与镜臂连接。 2. 将汞灯灯箱的电源插头插入荧光电源箱后的插座,再将荧光电源箱的插头插入220V外接电源。 3. 打开电源开关,电压表显示出电源电压,如电源电压波动不大于额定电压值的±5%,即可按下启动开关点燃汞灯,如因天气太冷或电压不稳定等原因,一次启动未点燃汞灯,可以多揿动几次。待超高压汞灯弧光达到稳定状态并达到最大发光效率,即可开始工作。 4. 灯泡的调中: (1)任选一块标本放在载物台上. (2)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移出光路,转动滤色片组转换手轮,将紫光(V)或蓝光(B)或绿光(G)激发滤色片组转入光路,并将10×荧光物镜转入光路。
(3)调节粗微调手轮,将标本像调焦清晰。 (4)前后推动垂直照明器右边的聚光镜调焦推杆,使视场光栏成像清晰,转动视场光栏拨杆将视场光栏收小,调节视场光栏调中螺钉使视场光栏居中,然后再将视场光栏开至最大。 (5)转动镜臂上的聚光镜旋钮使聚光镜移入光路,前后调节灯箱上的聚光镜拨杆,使汞灯的弧光在视场内成像清晰。 (6)调整灯箱上的灯泡水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使汞灯的弧光居中。 (7)调整反光镜水平调节螺钉和垂直调节螺钉,使光源的反射像与汞灯的弧光分开。 (8)转动聚光镜旋钮把聚光镜移出光路,此时视场照明均匀。 5. 荧光观察: (1)将荧光染色标本放到载物台上。 (2)将10×平场物镜或40×荧光物镜转入光路,调节载物台纵横移动手轮,将标本移入光路。 (3)转动滤光片转换拨轮,将荧光染色标本所需要的激发滤光片组转入光路。激发滤光片组编号刻在滤片组转换拨轮上。 滤光片选择正确与否,是荧光显微镜能否得到正确应用的关键。选用滤光片时,必须遵守斯托克斯定律:激发滤光片的透射波长<双色束分离器的透射波长<阻断滤光片的透射波长。 由于激发滤光片、双色束分离器和阻断滤光片,出厂时已按其用途和本身的光学特性进行了严格的组合匹配,在观察和摄影时,只需选择滤光片组即可。 (4)调节粗调手轮,当看清荧光图像轮廓后,再用微调手轮调焦,直至看到清晰的荧光图像。 (5)当需要得到较强的荧光图像时,可转动聚光镜旋钮把聚光镜移入光路,可获得较明亮的荧光图像。
德国Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 快速操作手册 制作制作::Zeiss 光学仪器光学仪器((上海上海))国际贸易有限公司 孙 凯 2009年6月
目录目录:: 1 系统的组成 系统组成及光路示意图 实物照片实物照片说明说明 2 系统的使用 2.1 开机顺序 2.2 软件的软件的快速快速快速使用使用使用说明说明 2.3 显微镜显微镜的的触摸屏控制 2.4 关机顺序 3 系统的维护
1 系统的组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由::电动荧光显微镜电动荧光显微镜、、扫描检测单元扫描检测单元、、激光器激光器、、电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成。。 系统系统组成及光路组成及光路组成及光路示意图示意图示意图:: 电脑工作站 激光器 扫描检测单元 电动荧光显微镜
实物照片说明实物照片说明:: 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO 2培养系统控制器 激光器 电脑工作站
2 系统的使用 2.1 开机顺序 (1)打开稳压电源打开稳压电源((绿色按钮绿色按钮)) 等待2分钟(电压稳定)后,再开其它开关 (2)主开关 [ MAIN SWITCH ]“ON ” 电脑系统 [ SYSTEMS/PC ]“ON ” 扫描硬件系统 [ COMPONENTS ]“ON ” (3)打开 [ 电动显微镜开关 ] 打开 [ 荧光灯开关 ] (注:具有5档光强调节旋钮) (4)Ar 离子激光器离子激光器主开关主开关 “ON ” 顺时针旋转钥匙 至 “—” 预热预热等待约等待约15分钟分钟,, 将激光器 [ 扳钮 ] 由“Standby ”扳至 “Laser run ”状态状态,,即可正常使用 (5)打开 [ 电脑开关 ],进入操作系统 注:键盘上也具有 [ 电脑开关 ]
Zeiss-Supra55扫描电子显微镜简明操作指南 一、开机启动 1、按下绿键。 按下绿键后,电脑会自动启动,输入计算机密码:zeiss 2、启动SmartSEM软件。 用户名:system 密码:无 3、检查真空值。 二、换样品(换样或加高压观察样品) 1、装试样。 在备用样品座上装好样品,并记录样品形状、编号和位置。 注意:各样品观察点高度基本一致。确认样品不会脱落,并用洗耳球吹一下。 2、关高压。 3、检查插入式探测器状态 打开TV,将EBSD等插入式探测器拉出。 4、放气。 点Vent等待3-5 分钟。 注意:确认Z move on vent选上,这样,放气时样品台会自动下降。 5、拉开舱门。 注意:拉开舱门前,确认样品台已经降下来,周围探测器处于安全位置。 6、更换样品座 注意:抓样品座时戴手套,避免碰触样品。 7、关上舱门。 注意:舱门上O圈有时会脱落,关门时勿夹到异物。 8、抽真空。 点击Pump,等待真空就绪(留意Vacuum面板上真空状态),等待3-5分钟。 注意:当System Vacuum<2×10-5mBar时,会自动打开CIV阀门(column isolation valve),并启动离子泵。 当Gun Vacuum=<5×10-9mBar时,可启动灯丝(Gun On),左下角Ready。 等待过程中,可先移动样品台初步定位样品。 9、换样完成。 加高压,观察样品台TV 三、成像过程 1、定位样品。 打开TV,移动样品台。升至工作距离约在8~10mm处,平移对准样品。可打开stage navigation帮助定位。 2、开高压。 根据检测要求和样品特性,设定加速电压; 3、观察样品,定位观察区。 全屏快速扫描(点击工具栏上); 选择Inlens或SE2探头; 缩小放大倍数至最小; 聚焦并调整亮度和对比度(Tab键可设置粗调Coarse或细调Fine);
显微镜标准操作规程 目的:制订显微镜的标准操作规程。 适用范围:各类检定菌及物料的显微镜鉴别。 责任:显微镜操作人员对本规程实施负责。 程序: 1.显微镜主要包括物镜、目镜、聚光镜、反射镜四部分。还包括照明光源、滤光片、载玻 片和盖玻片。 2.采光 2.1用低倍镜对准栽物台中央之圆孔。 2.2打开光圆对好光源(不能直接对太阳光)。 3.观察照明是否良好,视野是否均匀。 4.调节焦距:从侧面注视物镜头,将大螺旋把镜筒转下,至镜头将接近标本玻片为止(注意 两者不能相碰,避免损坏),再从目镜观察,同时将大螺旋把镜筒慢慢转上,至视野内可见物象为止,再用小螺旋调节光线,以供视野内可见物象为止,再用小螺旋调节至物象清楚。 5.调节光线:使用聚镜或光圈调节光线,以供视野适宜光度。 6.观察步骤 6.1先用低倍镜观察全景,再转高倍镜进行局部观察。 6.2从低倍镜转到高倍镜时,必须在低倍镜下把目视移到视野中心,然后把镜筒转上,再转 动物镜转盘,将高倍镜对准标本,然后调节焦距。 6.3镜检时,须两眼同时睁开、用左眼观察,以便右眼以绘图或记录。 6.4使用完毕,进行使用登记。 7.注意事项 7.1拿镜时必须用右手紧握镜臂,左手平托镜座,注意放平放稳。 7.2使用时必须按步骤小心缓慢转动。 7.3使用高倍镜观察液体标本时,一定要加盖玻片,否则,不仅清晰度下降,而且试液会浸 入高倍镜的镜头内,使镜片受到污染和腐蚀。 7.4显微镜应在清洁、干燥、无震动、无腐蚀性气体存在的工作室操作。
7.5要保持清洁,勿使尘埃、污物、手指等接触光学部分。 7.6镜内零件不得任意拆出,或与他镜调换。 7.7用完后,把镜臂复原,物镜转成人字形,接近载物台。 7.8擦拭光学系统,必须用镜头纸,不准用毛巾、手帕、衣服擦拭,更严禁用手擦拭。乙醚、 酒精不可用得过多,以免脱胶。镜片表面有一层紫兰色的透光膜,不要误作污物来擦拭。
荧光显微镜(Fluorescence microscope)及其操作 某些物质经一定波长的光(如紫外光)照射后,物质中的分子被激活,吸收能量后跃迁至激发态;当其从激发态返回到基态时,所吸收的能量除部分转化为热量或用于光化学反应外,其余较大部分则以光能形式辐射出来,由于能量没能全以光的形式辐射出来,故所辐射出的光的波长比激发光的要长,这种波长长于激发光的可见光部就是荧光(fluorescence)。所谓荧光就是某些物质在一定波长光(如紫外光)的照射下、在极短时间内所发出的比照射光波长更长的可见光。由此可见,被照射物质产生荧光必须具备以下两个条件:①物质分子(或所特异性结合的荧光染料)必须具有可吸收能量的生色团;②该物质还必须具有一定的量子产率和适宜的环境(如溶剂、pH、温度等)。荧光显微术是利用荧光显微镜结可发荧光的物质进行观测的一种实验技术。某些物质在一定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态,从激发态回到基态时, 就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如见光),这种光就称为荧光。有些生物体内的物质受激发光照射后可直接产生荧光, 称为自发荧光(或直接荧光),如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。有的生物材料本身不能产生荧光,但它吸收荧光染料后同样却能发出荧光,这种荧光称为次生荧光(或间接荧光),如叶绿体吸附吖啶橙后便可发出桔红色荧光。荧光显微镜具特殊光源(多为紫外光光源),提供足够强度和波长的激发光,诱发荧光物质发出荧光。在视场中所所观察到的图像,主要是样品的荧光映像。 (一)光源 现在多采用200W的超高压汞灯作光源,它是用石英玻璃制作,中间呈球形,内充一定数量的汞,工作时由两个电极间放电,引起水银蒸发,球内气压迅速升高,当水银完全蒸发时,可达50~70个标准大气压力,这一过程一般约需5~15min。超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光,足以激发各类荧光物质,因此,为荧光显微镜普遍采用。 超高压汞灯也散发大量热能。因此,灯室必须有良好的散热条件,工作环境温度不宜太高。 新型超高压汞灯在使用初期不需高电压即可引燃,使用一些时间后,则需要高压启动(约为15000V),启动后,维持工作电压一般为50~60V,工作电流约4A左右。200W超高压汞灯的平均寿命,在每次使用2h 的情况下约为200h,开动一次工作时间愈短,则寿命愈短,如开一次只工作20min,则寿命降低50%。因此,使用时尽量减少启动次数。灯泡在使用过程中,其光效是逐渐降低的。灯熄灭后要等待冷却才能重新启动。点燃灯泡后不可立即关闭,以免水银蒸发不完全而损坏电极,一般需要等15min。由于超高压汞灯压力很高,紫外线强烈,因此灯泡必须置灯室中方可点燃,以免伤害眼睛和发生爆炸时造成操作。 超高压汞灯(100W或200W)光源的电路和包括变压、镇流、启动几个部分。在灯室上有调节灯泡发光中心的系统,灯泡球部后面安装有镀铝的凹面反射镜,前面安装有集光透镜。 国产超高压汞灯GCQ-200型性能良好,可以代替HBO-200等型的进口灯泡,平均寿命在200h以上,价格也比较低。 我国研制的一种简易轻便型高色温溴钨荧光光源装置,体积小,重量轻,功率小,交、直流两用(自带直流电源),易于携带,使用方便,已推广应用。
为了保证使用过程中对设备操作的规范性,为操作人员提供一份标准的操作方法,避免因人为操作不当造成设备损坏,以保证使用的正常进行和设备的使用寿命。 2.范围: 此标准操作程序适用于XSP-1C显微镜。 3.职责: 实验室人员按此文件正确的使用和维护XSP-1C显微镜。 4.内容: 4.1. 操作前准备: 4.1.1. 将显微镜平稳的放至在实验桌上。 4.1.2.打开开关,调节光源,将10*平场目镜转入通光孔,将聚光器上的虹彩光圈打 开到最大位置,用左眼观察目镜中视野的亮度,转动反光镜,使视野的光照达 到最明亮最均匀为止。光线较强时,用平面反光镜;光线较弱时,用凹面反光 镜。 4.1.3. 用擦镜纸将10*平场目镜、物镜(10*/0.25、100*1.25消色差物镜,半平场物 镜40*/0.65) 擦拭干净。 4.2.操作程序 4.2.1. 低倍镜观察: A. 将标本片放置载物台上,用标本夹夹住;转动横向、纵向移动手轮,使被观察 的标本处在物镜正下方。 B. 转动粗动手轮,使载物台降至最低位置,旋上所需物镜。 C. 把10*平场目镜转入光路,插入目镜,并降聚光镜升至最高位置。 D. 转动粗调节旋钮,慢慢升起载物台,直至物像出现。 E. 再用细调节旋钮使物像清晰为止。 4.2.2. 高倍镜观察: A. 用半平场物镜40*/0.65观察: a. 先按步骤2使物像清晰,转换高倍物镜。 b. 从目镜观察,调节光源亮度。 c. 缓慢调节粗调节旋钮,使载物台上升,直至物像出现。 d. 再用细调节旋钮使物像清晰为止。 B. 用100*1.25消色差物镜观察(油镜): a. 先按步骤2使物像清晰,转出物镜。 b. 在玻片标本的物检部位滴上一滴香柏油。 c. 从侧面注视,用粗调节旋钮将载物台缓缓的上升,使100*1.25消色差物镜 浸入香柏油,使镜头几乎与标本接触。 d. 重新调节光线亮度:从目镜内观察,放大视场光阑及聚光器上的虹彩光圈, 上调聚光器至顶位,使光线充分照明。
显微镜结构示意图
显微镜使用说明 您现在使用的是1600倍生物显微镜,配有三个目镜(5X、10X、16X)和三个物镜(10X、40X、100X) 1.低倍目镜和低倍物镜的使用(低倍镜容易找到目标):(1)准备:将显微镜取出,平放于桌面上,转动粗调焦旋钮,将镜筒略升高使物镜转换器与载物台距离拉开,以便安装物镜,按任意顺序装上三个物镜(物镜转换器有一个孔上有防尘盖,装物镜时需取下),物镜需顺着螺纹方向旋到底;取下目镜筒上的防尘盖并插上一个低倍的目镜,安装完毕将显微镜置于前方略偏左侧,必要时使镜臂倾斜以便观察。再旋转物镜转换器,将低倍物镜对准载物台中央的通光孔(可听到“咔哒”声)。 (2)对光:打开光圈,转动聚光镜使其上升(其作用是把光线集中到所要观察的标本上),双眼同时睁开,以左眼向目镜内观察,同时调节反光镜的方向,直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其他景物映入视野,一般用凹面镜对光,光线不足时,可使用电光源(电光源的安装见下文)。 (3)放标本片:标本片朝上放到载物台上用移动尺的两个夹子夹住标本片(640倍的显微镜是用压片压住标本),调节移动尺的两个旋钮把要观察的部分移到通光孔的正中央。 (4)调节焦距:从显微镜侧面注视物镜镜头,同时旋转粗调焦旋钮,使镜筒缓慢下降,大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时,再用左眼从目镜里观察视野,左手慢慢转动粗调焦旋钮,使镜筒缓缓上升,直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰,可转动细调焦旋钮,使物像更加清晰。
如果按上述操作步骤仍看不到物像时,可能由以下原因造成: ①转动调焦旋钮太快,超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距. ②物镜没有对正,应对正后再观察。 ③标本没有放到视野内,应移动标本片寻找观察对象。 ④光线太强,尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时,易出现这种现象,应将光线调暗一些后,再观察。 2.低倍物镜转高倍物镜(40倍物镜)的使用 (1)依照上述操作步骤,先用低倍镜找到清晰物像。 (2)眼睛从侧面注视物镜,用手转动物镜转换器,换高倍镜(40倍)。注意,此时不需要调节粗调焦旋钮。 (3)眼睛向目镜内观察,同时微微上下转动细调焦旋钮,直至视野内看到清晰的物像为止。 如按上述操作仍看不到物像时,可能由下列原因造成: ①观察的部分不在视野内,应在低倍镜下寻找到后,移到视野中央,再换高倍镜观察。 ②标本片放反了,应把标本片放正之后,再按上述步骤操作。 ③焦距没调好,应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时,应该先把镜筒升高,然后把标本片取下再换上。 3.油镜的使用(100倍的物镜称为油镜) 应先按上述步骤用低倍镜、高倍镜找到要观察的物像,然后再用油镜观察,操作如下: (1)先用10倍物镜观察标本的概况; (2)更换40倍物镜,把所要观察的部分移到视野中央; (3)把镜筒上升约厘米,再把油镜转到工作位置;