HIV抗体检测试验(ELISA法)原始记录
编号:(张疾控)字(原始记录)第()号第页共页
试剂名称:(英科新创)试剂批号:试剂效期:样品状态:
样品来源:送检人群:环境温度:
检测仪器:1.北京普朗DNM-9602型酶酶标仪 2.北京普朗DNM-9620型洗板机
3. 电热恒溫水浴箱
4. 移液器
检测地点:检测日期:检测份数:
检测依据:《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)
实验步骤:
1.实验准备:样品、试剂、酶标条置室温(18-25℃),平衡时间_30_分钟。按实验室SOP做好试剂准备。2.温育期间配制洗涤液:按1:19稀释,取20×洗涤液 ml,加蒸馏水 ml。()
3. 将酶联反应板从密封袋中取出,取下孔板条,放在板架上。按顺序编号,设一个空白对照孔,两个阳性(1)对照孔,两个阳性(2)对照孔,两个阴性对照孔。()
4.取阳性对照和阴性对照分别充分混匀后各50μl加入对照孔中,空白孔不加,其余每个孔加待检血清50μl,轻轻振荡,充分混匀。并填写加样顺序表(见下表)。()
5.用不干胶封片封盖反应板,置37℃温育60分钟。()
6.撕去贴膜,用洗涤液洗5次(洗板机洗,程序已编好),然后在吸水纸上拍干。()
7.除空白孔外每孔加酶标抗原100μl,用不干胶片封盖反应板。37℃温育30分钟。()
8. 撕去贴膜,用洗涤液洗5次(洗板机洗,程序已编好),然后在吸水纸上拍干。()
9.每孔加显色剂A 50μl ,显色剂B 50μl,轻轻振荡后置37℃避光暗处显色30分钟。()
10. 每孔加终止剂50μl。混匀。()
11.选择酶标仪450nm或630 nm双波长测定,空白孔调零点,测定各孔的吸光度。并打印结果。()
12. 加样顺序表:
A
B
C
D
E
F
G
H
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14.判定公式:Cut off值=阴性对照平均值+0.10 当阴性对照平均值≤0.05时,按0.05计算。本次检测临界值为:____________。标本A值小于1值为阴性,大于或等于1值为阳性。
15.结果分析:呈阳性反应,需确认;其余均为阴性反应。
检验者:复核人签字: