硫酸亚铁铵容量法测定钒钛球团中五氧化二钒的含量

硫酸亚铁铵容量法测定含钛球团中五氧化二钒的含量

徐有璞

西宁特钢集团公司

摘要：试样用过氧化钠熔融，在硫酸磷酸溶液中于室温用高锰酸钾将V4+氧化到V5+，过量的高锰酸钾在尿素存在下以亚硝酸钠还原，以N-苯代邻氨基苯甲酸为指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定至亮绿色。

关键词：钒钛球团熔融氧化

前言：某钢铁公司为了延长高炉的寿命，用含钛球团进行护炉。一般情况下含钛球团原矿中钒和钛属于共生矿，而五氧化二钒含量过高对护炉起负作用，所以对其中的五氧化二钒的含量进行精确测定，具有一定的现实意义。本实验起草了操作规程，在起草过程中借鉴了GB/T6730.32-1986硫酸亚铁铵容量法测定钒含量；GB/T8704.5-2007 钒铁、钒含量的测定硫酸亚铁铵滴定法和电位滴定法。本规程采用强碱分解试样，硫酸磷酸溶液中于室温用高锰酸钾将V4+氧化到V5+，过量的高锰酸钾在尿素存在下以亚硝酸钠还原，以N-苯代邻氨基苯甲酸为指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定。

一.试验部分

1.1主要试剂

1.1.1磷酸：

1.1.2硫酸：（1+1）

1.1.3尿素20%

1.1.4亚硝酸钠（1%）

1.1.5硫酸亚铁（4%）

1.1.6高锰酸钾（2%）

1.1.7 N-苯代邻氨基苯甲酸（0.2%）：称取0.2g无水碳酸钠溶于100ml水中，将溶液微微加热，再称取0.2gN-苯代邻氨基苯甲酸倒入溶液中，溶解。

1.1.8硫酸亚铁铵：0.002mo l∕L

1.2试验方法

准确称取0.5000g试样于刚玉坩埚中，加4-5g过氧化钠，搅拌均匀，再覆盖1-2g过氧化钠于700℃马弗炉中熔融5—10分钟，取出，冷却.于30ml水和30ml（1+1）硫酸的250ml烧杯中浸取，洗净坩埚，移入500ml三角瓶中，加入30ml（1+1）硫酸，10ml浓磷酸，体积控制180—200ml，煮沸至冒大泡，冷至室温，加2ml硫酸亚铁（4%）放置2-5分钟，然后在不断搅动下，滴加高锰酸钾呈稳定的红色，并过量两滴，放置时间不低于2分钟，加入10ml尿素（20%）摇匀,在不断搅动下逐滴加入亚硝酸钠溶液至红色退去，并过量2滴，摇匀，加3-5滴N-苯代邻氨基苯甲酸，用硫酸亚铁铵标准溶液逐滴滴至亮绿色为终点。

1.3计算

根据以下公式计算五氧化二钒的含量

V2O5%= (A/V0)×V

A:标准样品含V2O5的量

V0:滴定标准样品时所消耗硫酸亚铁铵标准溶液的毫升数

V:滴定样品时消耗的硫酸亚铁铵标准溶液的毫升数

1.4结果与讨论

1.4.1温度影响：按分析步骤操作，改变氧化钒时的温度（见表1）

表1. 温度影响试验

温度（℃）10 20 30 40 50 60

含量0.256 0.259 0.260 0.264 0.269 0.271 结果证明，在30℃以下温度氧化钒均能得到稳定的结果，40℃以上由于高锰酸钾可以氧化部分铬，使结果偏高。

1.4.2高锰酸钾氧化后放置的时间：按照分析步骤操作改变高锰酸钾氧化钒至溶液呈稳定的紫色并过量1-2滴后放置的时间不同（见表2）

表2 高锰酸钾氧化后放置的时间试验

时间（S）0 30 60 180 300 420 600

含量0.247 0.250 0.256 0.259 0.255 0.260 0.254

实验结果表明放置1-5分钟均能得到稳定的结果。本法选择2分钟。

1.4.3滴加亚硝酸钠的速度及用量：为了还原过量的高锰酸钾需要加入亚硝酸钠，经过试验证明，亚硝酸钠须逐滴加入，并且须在振摇下滴加亚硝酸钠，避免一次加入量太多，使结果偏低，用1%的亚硝酸钠还原高锰酸钾后过量1-2滴就足够了。

1.4.4共存元素的影响：为了避免高价铬离子的存在，在高锰酸钾氧化之前，加入硫酸亚铁铵溶液以还原高价铬

1.4.5加亚硝酸钠溶液后必须放置1-2分钟，以保证过量的亚硝酸钠完全分解，否则指示剂加入将被破坏而不显色。

1.4.6煮沸时间的实验：见表3

表3 煮沸时间的实验

时间（S） 1 3 5 7 9 10 12 14

含量0.273 0.271 0.256 0.259 0.255 0.260 0.254 0.257

实验证明：煮沸时间在5-10分钟之间结果比较稳定，煮沸时间短了，分析结果波动较大。

1.4.7N-苯代邻氨基苯甲酸系氧化还原指示剂，标准电位（+1.08V）比V4+氧化到V5+标准点位（+1.20V）低，所以该指示剂先被偏钒酸氧化成氧化物存在，显示樱桃红，滴加亚铁时，还原电位高的偏钒酸先被还原，当偏钒酸被滴定后，还原电位低的指示剂才被亚铁还原，由红色转变为亮绿色。为了保证充分作用以免过量，滴定快到终点时应该慢，多摇荡。

1.5.方法的精密度试验

对钒钛铁矿1#（YSBC19719-2009攀枝花钢铁研究院制）和钒钛磁铁矿2#（GBW07225攀枝花钢铁研究院制）进行按实验操作，（见表4）

表4 精密度试验

钒钛铁矿1# 钒钛磁铁矿2#

0.561 0.216

0.564 0.207

0.559 0.214

0.570 0.223

0.565 0.225

0.557 0.217

0.555 0.213

0.550 0.209

0.564 0.213

A VG 0.556 0.215

SD 0.016 0.006

RSD% 2.99 2.74

通过实验精密度达到了生产要求。

二．结论

本方法通过以上实验，制定出了操作规程，该法灵敏度高，分析速度快，既有严密的科学性又有良好的实用性，完全能满足生产的需要。

参考文献：

【1】张向宇，等编.实用化学手册，国防工业出版社

【2】徐盘明、赵祥大，主编实用金属材料分析方法合肥：中国科学技术大学出版社1990. 【3】铁合金化学分析方法标准汇编冶金工业信息标准研究院冶金标准化研究所、中国标准出版社第五编辑室编北京：中国标准出版社

【4】矿产品、原料及其试验方法标准汇编（第二版）冶金工业信息标准研究院冶金标准化研究所、中国标准出版社第五编辑室编

作者简介：徐有璞，男，助理工程师，2005年毕业于青海大学，现从事化学分析。

硫酸亚铁铵滴定法

硫酸亚铁铵滴定法 9 适用范围 本标准适用于不和废水中高浓度（大于1mg/L ）总络的测定。 10 原理 在酸性溶液中：以银盐作崔化剂，用过硫酸铵将三价铬氧化成六价铬。加入少量氯化钠并煮沸，除了过量的过硫酸铵及反应中产生的氯气。以苯基代邻氨基苯甲酸做指示剂，用硫酸亚铁铵溶液滴定，使六价铬还原为三价铬，溶液呈绿色为终点。根据硫酸亚铁铵溶液的用量，计算出样品中总铬的含量。 钒对测定有干扰，但在一般含铬废水中钒的含量在允许限以下。 11 试剂 在测定过程中，除非另有说明，均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水。 11.1 5%（V/V ）硫酸溶液。 取硫酸（4.2）100ml 缓慢加入到2L 水中，混匀。 11.2 磷酸（H3PO4,ρ=1.69g/ml）。 11.3 硫酸--磷酸混合液：取150ml 硫酸（4.2）缓慢加入到700ml 水中，冷却后，加入150ml 磷酸（11.2）混匀。 11.4 过硫酸铵〔(NH 4）2S 2O 8〕:250g/L 溶液。 11.5 铬标准溶液：称取于110?C 干燥2h 的重铬酸钾（K 2Cr 2O 7，优级纯） 0.5658±0.0001g,用水溶解后，移入1000ml 溶量瓶中，加入稀释至标线，摇匀。此溶液lml 含0.2mg 铬。

11.6硫酸亚铁铵溶液。 称取硫酸亚铁铵〔（NH 4） 2 Fe(SO 4 ) 2 ·6H 2 O〕3.95 0.01g，用500ml硫酸溶液 （11.1）溶解，过滤至2000ml溶量瓶中，用硫酸溶液(11.1)稀释至标线。临用时，用铬标准溶液（11.5）标定。 标定：吸取三份各25.0ml铬标准溶液（11.5）置500ml锥形瓶中，用水稀释至200ml左右。加入20ml硫酸--磷酸混合液（11.3），用硫酸亚铁铵溶液（11.6）滴定至淡黄色。加入3滴苯基代邻氨基苯甲酸指标剂（11.12），继续滴定至溶液由线色突变为亮绿色为终点，记录用量V。 三份铬标准溶液所消耗硫酸亚铁铵溶液的毫升数的极差值不应超过0.05ml，取其平均值。按式（2）计算： T == (2) 式中： T––––硫酸亚铁铵溶液对铬的滴定度，mg/ml。 11.7硫酸锰：10g/L溶液。 将硫酸锰（MnSO 4·2H 2 O）1g溶于水并稀释至100ml。 11.8硝酸银：5g/L溶液。 将硝酸银（AgNO 3 ）0.5g溶于水并稀释至100ml。 11.9无水碳酸钠：50g/L溶液。 将无水碳酸钠（Na 2CO 3 ）5g溶于水并稀释至100ml。 11.10氢氧化铵：1+1溶液。 取氨水（ρ=0.90g/ml）加入等体积水中，混匀。 11.11氯化钠：10g/L溶液。

(抗体的纯化)硫酸铵沉淀法

抗体的纯化( 硫酸铵沉淀法） 一，基本原理 硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。 二，试剂及仪器 1 .组织培养上清液、血清样品或腹水等 2. 硫酸铵（NH 4 ）SO 4 3. 饱和硫酸铵溶液（SAS ） 4. 蒸馏水 5. PBS( 含0.2g /L 叠氮钠) 6. 透析袋 7. 超速离心机 8. pH 计 9. 磁力搅拌器 三，操作步骤 以腹水或组织培养上清液为例来介绍抗体的硫酸铵沉淀。各种不同的免疫球蛋白盐析所需硫酸铵的饱和度也不完全相同。通常用来分离抗体的硫酸铵饱和度为33% —50% 。 （一）配制饱和硫酸铵溶液（SAS ） 1.将767g （NH 4 ）2 SO 4 边搅拌边慢慢加到1 升蒸馏水中。用氨水或硫酸调到硫酸pH7.0 。此即饱和度为100% 的硫酸铵溶液（4.1 mol/L, 25 °C ）. 2.其它不同饱和度铵溶液的配制 （二）沉淀 1.样品（如腹水）20 000 ′g 离心30 min ，除去细胞碎片； 2.保留上清液并测量体积； 3.边搅拌边慢慢加入等体积的SAS 到上清液中，终浓度为1 ：1 4.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6 小时或搅拌过夜（4 °C ），使蛋白质充分沉淀。 （三）透析 1.蛋白质溶液10 000 ′g 离心30 min （4 °C ）。弃上清保留沉淀； 2.将沉淀溶于少量（10-20ml ）PBS -0.2g /L 叠氮钠中。沉淀溶解后放入透析袋对 PBS -0.2g /L 叠氮钠透析24-48 小时（4 °C ），每隔3-6 小时换透析缓冲液一次，以彻底除去硫酸氨； 3.透析液离心，测定上清液中蛋白质含量。 四，应用提示 （一）先用较低浓度的硫酸氨预沉淀，除去样品中的杂蛋白。 1.边搅拌边慢慢加SAS 到样品溶液中，使浓度为0.5:1 (v/v) ； 2.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6 小时或过夜（4 °C ）； 3.3000 ′g 离心30 min （4 °C ），保留上清液；上清液再加SAS 到0.5:1(v/v) ，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS ，同前透析，除去硫酸氨； 4.上清液再加SAS 到0.5:1 (v/v) ，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS ，同前透析，除去硫酸氨； 5.杂蛋白与欲纯化蛋白在硫酸氨溶液中溶解度差别很大时，用预沉淀除杂蛋白是非常有效 （二）为避免体积过大，可用固体硫酸氨进行盐析（硫酸氨用量参考表1 ）；硫酸氨沉淀法与层析技术结合使用，可得到更进一步纯化的抗体。

硫酸亚铁铵中铁含量测定

硫酸亚铁铵中铁含量测定 一、实验目的 1. 掌握重铬酸钾法测定亚铁盐中铁含量的原理和方法； 2. 了解氧化还原指示剂的作用原理和使用方法。 二、实验原理 K 2Cr 2 O 7 在酸性介质中可将Fe2+离子定量地氧化，其本身被还原为Cr3+，反应式为： Cr 2O 7 2- + 6Fe2+ + 14H+═ Cr3+ + 6Fe3+ + 7H 2 O 滴定在H 3PO 4 —H 2 SO 4 混合酸介质中进行，以二苯胺磺酸钠为指示剂，滴定至溶液 呈紫红色，即为终点。 三、试剂 硫酸亚铁铵（学生自制）、K 2Cr 2 O 7 （AR）、二苯胺磺酸钠0.2%、H 3 PO 4 85% 等。 四、实验步骤 1、准确称取1～1.5g（NH 4） 2 SO 4 ?FeSO 4 ?6H 2 O样品，置于250 mL烧杯中，加入8 mL 3 mol?L-1H 2SO 4 防止水解，再加入蒸馏水加热溶解，然后定量转移至250mL容量 瓶中定容，充分摇匀。平行移取三份25.00 mL上述样品溶液分别置于三个锥形 瓶中，各加50 mL H 2O、10 mL 3 mol?L-1 H 2 SO 4 ，再加入5～6滴二苯胺磺酸钠指 示剂，摇匀后用K 2Cr 2 O 7 标准溶液滴定，至溶液出现深绿色时，加5.0 mL 85% H 3 PO 4 ， 继续滴至溶液呈紫色或紫蓝色。计算试液中Fe的含量。 实验流程

五、数据记录与处理 K 2Cr 2O 7标准溶液， 用滴定管准 确量取25.00ml 上述溶液于锥形瓶中 溶液呈深绿色时加入5mL 磷酸

五、注意事项： 1、滴定至溶液呈深绿色时加入磷酸 六、思考题： 1、本实验中加入硫酸和磷酸的作用是什么？ 2、以二苯胺磺酸钠为例，说明氧化还原指示剂的变色原理 参考文献：张龙、潘亚芬《化学分析技术》 邢文卫、李炜《分析化学实验》

硫酸铵分级沉淀

一，基本原理 硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。盐浓度通常用饱和度来表示。硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。 二，试剂及仪器 1 . 组织培养上清液、血清样品或腹水等 2. 硫酸铵（NH 4 ）SO 4 3. 饱和硫酸铵溶液（SAS ） 4. 蒸馏水 5. PBS( 含0.2g /L 叠氮钠) 6. 透析袋 7. 超速离心机 8. pH 计 9. 磁力搅拌器 三，操作步骤 以腹水或组织培养上清液为例来介绍抗体的硫酸铵沉淀。各种不同的免疫球蛋白盐析所需硫酸铵的饱和度也不完全相同。通常用来分离抗体的硫酸铵饱和度为33% — 50% 。 （一）配制饱和硫酸铵溶液（SAS ） 1.将767g （NH 4 ）2 SO 4 边搅拌边慢慢加到1 升蒸馏水中。用氨水或硫酸调到硫酸pH7.0 。此即饱和度为100% 的硫酸铵溶液（4.1 mol/L, 25 ° C ）. 2.其它不同饱和度铵溶液的配制 （二）沉淀 1.样品（如腹水）20 000 ′ g 离心30 min ，除去细胞碎片； 2.保留上清液并测量体积； 3.边搅拌边慢慢加入等体积的SAS 到上清液中，终浓度为1 ：1 （

4.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6 小时或搅拌过夜（4 ° C ），使蛋白质充分沉淀。（三）透析 1.蛋白质溶液10 000 ′ g 离心30 min （4 ° C ）。弃上清保留沉淀； 2.将沉淀溶于少量（10-20ml ）PBS -0.2g /L 叠氮钠中。沉淀溶解后放入透析袋对 PBS -0.2g /L 叠氮钠透析24-48 小时（4 ° C ），每隔3-6 小时换透析缓冲液一次，以彻底除去硫酸氨； 3.透析液离心，测定上清液中蛋白质含量。 四，应用提示 （一）先用较低浓度的硫酸氨预沉淀，除去样品中的杂蛋白。 1.边搅拌边慢慢加SAS 到样品溶液中，使浓度为0.5:1 (v/v) ； 2.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌6 小时或过夜（4 ° C ）； 3.3000 ′ g 离心30 min （4 ° C ），保留上清液；上清液再加SAS 到0.5:1(v/v) ，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS ，同前透析，除去硫酸氨； 4.上清液再加SAS 到0.5:1 (v/v) ，再次离心得到沉淀。将沉淀溶于PBS ，同前透析，除去硫酸氨； 5.杂蛋白与欲纯化蛋白在硫酸氨溶液中溶解度差别很大时，用预沉淀除杂蛋白是非常有效（二）为避免体积过大，可用固体硫酸氨进行盐析（硫酸氨用量参考表1 ）；硫酸氨沉淀法与层析技术结合使用，可得到更进一步纯化的抗体。 今天作的实验是利用硫酸铵沉淀蛋白质，从之前作过的经验知道，这一个步骤是有名的烦，要慢慢用敲的把硫酸铵缓缓的加入蛋白质溶液中。 相关的原理可以在庄荣辉学习网站中找到，与盐溶刚好相反，在蛋白质溶液中加入硫酸铵，会使得蛋白质的溶解度下降，因而沉淀出来。因为硫酸铵所解离的离子容很大，所带的电子数也多(NH4+, SO42-)，因此当其溶入水中时，会吸引大量水分子与这些离子水合。 蛋白质分子表面多少有一些较不具极性的区域，水分子会在这些非极性区的表面聚集，形成类似『水笼』的构造(请见下图)，以便把蛋白质溶入水中。一旦蛋白质溶液加入硫酸铵，后者吸引了大量水分子，使水笼无法有效隔离蛋白质的非极性区，造成这些非极性区之间的吸引，因而沉淀下来。因此，分子表面上若有越多的非极性区域，就越容易用硫酸铵沉淀下来。 在计算所添加的硫酸铵的重量方面，找到了一个不错的网站——硫酸铵计算机 这个网页上可以靠着输入实验温度、溶液体积、想要到达的百分浓度以及初始的百分浓度这四个数值，就可以得到需要添加的硫酸铵克数，以及在加入固体硫酸铵后所增加的体积，算是一个很不错的网站。 此外另一个比较值得提的，是我有用两种方式加入硫酸铵，第一种是固体的硫酸铵模碎加入，另一种是将硫酸铵溶成饱和溶液再加入，各有各的优缺点，比较如下： 1.造成蛋白质变质的程度：固体的硫酸铵>硫酸铵饱和溶液 利用硫酸铵饱和溶液真的超棒，滴入的速度可以很快而不造成变质(没试过用倒入的)。不像固体的硫酸铵只能磨碎慢慢加入，速度一快蛋白质就坏了(溶液有致密的白色气泡产生)。 2.操作的容易度：硫酸铵饱和溶液>>固体的硫酸铵 固体硫酸铵最大的缺点就是操作不容易，要一直敲敲敲又不能太快，所以当你要溶解的蛋白质很多时，这是很累的步骤。然而硫酸铵饱和溶液比较麻烦只有在配制部分，要先加热让它饱合后，回到操作温度让它过饱和，最后用滤纸把硫酸铵结晶去掉。

辛酸硫酸铵纯化抗体

辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG 一、 实验目的 1初步掌握从血清中提取纯化 IgG 的方法步骤。 2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。 二、 实验原理 辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白，辛酸为短链脂肪酸，在酸性条件下 可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非 Ig 蛋白质；第二步利用硫酸铵盐析将 Ig 沉淀下来, 操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE 电泳检测能得到电泳纯度较高的 Ig 。 _______ ?沉淀(白蛋白和其他ir igG 蛋白质) 匕消液(igG) 硫酸钱沉淀 T 沉淀(IgG) T 溶解沉淀 图3—竹辛酸一硫酸谖法从血漬中纯化IqG 操作流程 三、仪器、原料和试剂 1、仪器 磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。 2、原料 抗血清(兔抗鸡血清)。 血清或腹水 丫酸沉淀

3、试剂 (1) 乙酸-乙酸钠缓冲液：60mmol/L, pH4.0。 (2) 10X磷酸盐-NaCI 缓冲液(PBS : 100mmol/L PBS pH7.4。称NaCI 80g、Ns fe HPO12H2O 29g、KCl 2g、KHPQ 2g,加蒸馏水溶解，加入100mmoI/L EDTA 20ml，用去离子水定容至1000ml 。 (3) 透析液10mmol/L Na 2HPQKH2PQ缓冲液，含15mmol/L NaCl，pH7.2。 (4) 硫酸铵。 ⑸辛酸。 四、操作步骤 1、抗血清用4倍体积乙酸-乙酸钠缓冲液稀释，用0.1mol/L NaQH调至血清稀释液为pH4.5。 2、室温下边搅拌(磁力搅拌器或电功搅拌器)，边缓慢滴加辛酸( 25ml/L血清稀释液)， 滴加完后继续搅拌30min。 3、离心(10000r/min , 30min)，收集上清夜，弃去沉淀。 4、上清液用多层纱布过滤。 5、按1/10 体积加入10X PBS 用5mol/L NaQH 调至PH7.4。 6、上清液4 C预冷，计算溶液总体积，在4C按277g/L加入硫酸铵粉沫(45%包和度)，边 加边搅拌，加完后继续搅拌30min。 7、离心(5000r/min , 15min))，弃去上清液。收集沉淀。 8、沉淀用少量透析液溶解(一般为血清体积的1/10 ),透析并更换两次透析液或用Sephadex G-50脱盐。 9、Ig溶液在50?55C水浴中加热20min，离心(5000r/min , 20min),上清液-20 C保存或冻干保存。

硫酸铵沉淀

在计算所添加的硫酸铵的重量方面，找到了一个不错的网站——硫酸铵计算机 这个网页上可以靠着输入实验温度、溶液体积、想要到达的百分浓度以及初始的百分浓度这四个数值，就可以得到需要添加的硫酸铵克数，以及在加入固体硫酸铵后所增加的体积，算是一个很不错的网站。 此外另一个比较值得提的，是我有用两种方式加入硫酸铵，第一种是固体的硫酸铵模碎加入，另一种是将硫酸铵溶成饱和溶液再加入，各有各的优缺点，比较如下： 1.造成蛋白质变质的程度：固体的硫酸铵>硫酸铵饱和溶液 利用硫酸铵饱和溶液真的超棒，滴入的速度可以很快而不造成变质(没试过用倒入的)。不像固体的硫酸铵只能磨碎慢慢加入，速度一快蛋白质就坏了(溶液有致密的白色气泡产生)。 2.操作的容易度：硫酸铵饱和溶液>>固体的硫酸铵 固体硫酸铵最大的缺点就是操作不容易，要一直敲敲敲又不能太快，所以当你要溶解的蛋白质很多时，这是很累的步骤。然而硫酸铵饱和溶液比较麻烦只有在配制部分，要先加热让它饱合后，回到操作温度让它过饱和，最后用滤纸把硫酸铵结晶去掉。 3.蛋白质溶液的体积放大程度硫酸铵饱和溶液>>固体的硫酸铵 这是使用硫酸铵饱和溶液最头痛的部分，举例来说，要让100 ml的硫酸铵百分比从0%到25%，如果是加入固体的硫酸铵，只会让溶液从100 ml变成107 ml左右，但若是加入硫酸铵饱和溶液，会让溶液变成125 ml！而且若是要提高到50%，须加等量的硫酸铵饱和溶液，所以会让蛋白质溶液从100 ml变成200 ml。 因此在加入硫酸铵时，若是低百分浓度可以利用硫酸铵饱和溶液，然而如果是高百分浓度的，除非不在意蛋白质溶液体积的放大(反正都要离心离下来)，否则还是用固体硫酸铵来的好。 所以今天从0%拉到25%及从25%拉到50%时，都是利用硫酸铵饱和溶液，但是当要从50%拉到75%时，我选择利用固体硫酸铵，因为如果用硫酸铵饱和溶液，离心机无法离那么多的溶液体积。

硫酸亚铁铵(0.1 ) 滴定液07.5.30

硫酸亚铁铵滴定液（0.1mol/L）配制与标定标准操作程序 1.目的：建立硫酸亚铁铵滴定液（0.1mol/L）配制与标定的标准操作程序，保证正确操作。 2.适用范围：本标准规定了硫酸亚铁铵滴定液(0.1mol/L）配制与标定的方法和操作要求；适用于本公司质量控制室硫酸亚铁铵滴定液(0.1mol/L)的配制、标定与复标。 3.责任：配制、标化及复标检验员。 4.内容： 4.1 误差要求： 4.2试剂与试药：邻二氮菲指示剂硫酸亚铁铵硫酸 4.3试剂的配制：按《化学试剂配制标准操作程序》（SOP-H10-04）相关条款配制 4.4仪器与设备：三角瓶(250ml) 酸式滴定管（50ml）移液管（25ml）分析天平 4.5操作步骤： 4.5.1 Fe(NH)(SO4)2 . 6H2O＝392.13 39.21→1000ml 4.5.2配制：取硫酸亚铁铵40g,溶于预先冷却的40ml硫酸和200ml水的混合液中，加水适量使成1000ml，摇匀。（本液临用前标定浓度） 4.5.3标定：精密量取本液25ml，加邻二氮菲指示液2滴，用硫酸铈滴定液（0.1mol/l）滴定至溶 编号：SOP-H08-032-04 共 2 页第 2 页 液由浅红色转变为淡绿色，根据硫酸铈滴定液（0.1mol/l）的消耗量，算出本液的浓度。即得。

4.5.4计算公式： F= V 25.00× F 式中：F为硫酸铈滴定液（0.1mol/l）浓度 v 为滴定所消耗硫酸铈滴定液的体积（ml） 4.5.5反应原理：硫酸铈是一种氧化剂，它可与还原性物质定量反应，四价铈被还原为三价铈，用已知浓度的硫酸铈与被测还原性物质反应，根据到达终点所消耗的硫酸铈滴定液的浓度和毫升数，可计算出被测物质的含量。 半反应式： Ce4＋＋e Ce3＋ 4.6注意事项： 4.6.1配制溶液时应注意严禁将水注入硫酸中，并应避免将瓶口对准自己或别人，以免硫酸飞溅 伤人。 4.7引用标准：《中华人民共和国药典》（2005年版二部附录） 《中国药品检验标准操作规范》（2005年版）

硫酸亚铁铵的制备实验报告2020年

硫酸亚铁铵的制备 一．实验目的 1. 学会利用溶解度的差异制备硫酸亚铁铵。 2. 从实验中掌握硫酸亚铁、硫酸亚铁铵复盐的性质 3. 掌握水浴、减压过滤等基本操作 4. 学习pH 试纸、吸管、比色管的使用 5. 学习用目测比色法检验产品质量。 二．原理 铁屑溶于稀硫酸生成硫酸铁。硫酸铁与硫酸铵作用生成溶解度较小的硫酸亚铁铵。 Fe + H 2SO 4 = FeSO 4 + H 2 ↑ FeSO 4 +(NH 4)2SO 4+6H 2O = FeSO 4(NH 4)2SO 4·6H 2O 晶，形成(NH 4)2FeSO 4·6H 2O 晶体。 比色原理：Fe 3+ + n SCN- = Fe(SCN)n (3-n) (红色) 用比色法可估计产品中所含杂质 Fe 3+的量。Fe 3+由于能与SCN －生成红色的物质[Fe(SCN)]2+，当红色较深时，表明产品中含Fe 3+较多；当红色较浅时，表明产品中含Fe 3+较少。所以，只要将所制备的硫酸亚铁铵晶体与KSCN 溶液在比色管中配制成待测溶液，将它所呈现的红色与含一定Fe 3+量所配制成的标准Fe(SCN)]2+溶液的红色进行比较，根据红色深浅程度相仿情况，即可知待测溶液中杂质Fe 3+的含量，从而可确定产品的等级。 三．仪器及药品 洗瓶、250ml 烧杯、锥形瓶（150mL ，250mL 各一个）、移液管（1mL,2mL 各一根）10ml 量筒、吸滤瓶、比色管（25mL ）、比色架、铁粉、2mol/L 盐酸、3mol/L 硫酸、25%KSCN 四．实验步骤 1. 硫酸亚铁制备 2. 硫酸亚铁铵的制备

配（NH 4）2SO 4饱和溶液：0.005*3*132=1.98g （（NH 4）2SO 4)，1.98*100÷75=2.64g(水) 3. Fe 3+的限量分析 不含氧水的准备 ：在250mL 锥形瓶中加热150mL 纯水至沸，小火煮沸10～20分钟，冷却后备用。

硫酸铵沉淀

硫酸铵沉淀: 有生物活性的蛋白一般在做硫胺沉淀的时候要小心一点。最保险的做法就是,把硫酸铵配成饱与溶液,把蛋白溶液置于冰浴上,再把饱与硫胺溶液一滴一滴的加到您的蛋白溶液中,最好边加边搅拌,避免局部硫胺浓度过高,但搅拌的时候注意不要搅出气泡。按照您的比例加完之后,最好放冰箱静置至少2h,充分沉淀后离心即可。 4M的硫酸铵pH值为4、6,在这个酸度下可能会有一些蛋白质变性,要小心。硫酸铵会破坏蛋白质水化层,最好就是缓与地加入。边加入边搅拌,如果在磁力搅拌器上搅拌,小漩涡中心有很多泡沫就表示蛋白质变性,使得溶液粘度增加,泡沫难破,那就很难保证您的蛋白质有没有变性了。 溶解度,在一定温度下,某固态物质在100g溶剂中达到饱与状态时所溶解的质量, 其单位就是“g/100g水”。在未注明的情况下,通常溶解度指的就是物质在水里的溶解度。 溶液饱与度(化学) 某种溶液的饱与度就是指在100g该溶液中溶质在溶液中所占质量分数、一般情况下,一种溶液的饱与度在同一温度下不会变、要想使不饱与溶液饱与度增加可以选择增加溶质、在刚好有晶体析出的时候就就是溶液刚好饱与的时候、溶液饱与度不会出现100% 加固体比较好,加得越慢越好。如果加快了,会造成局部浓度过大,造成意想不到的沉淀。

硫酸铵沉淀的时候应该要注意pH值的变化,就我的实验来说,一株产淀粉酶曲霉固态发酵之后用超纯水浸泡离心,得到含有酶的上清液的pH值为6、5,但就是淀粉酶能耐受pH4、5,为了去除更多杂质蛋白质,我把硫酸铵浓度调节到2摩尔每升的同时会控制pH值为4、5,4度过夜之后离心取上清液再调节到pH值7、0,4度放置,离心,又去除一部分杂质蛋白质,上清液直接用pH7、0的疏水层析系统来纯化。 一个纤维素酶的纯化我也用类似的方法,只不过第一步就是用4、0。 硫酸铵就是酸式盐,2M时pH值约为5,4M时更低,用来沉淀蛋白质的时候情况就更复杂了,所以最好知道自己需要的蛋白质的耐受情况,不要搞死了。 透析之前要选用一个不影响自己想要的蛋白质的pH值,硫酸铵沉淀与透析都要保持一致,才能使损失减少。透析时候产生的沉淀不知道就是不就是您想要的蛋白质,不过下次做最好谨慎一点,做我说过的预备实验。 分段盐析的方法 对分离目的蛋白的盐析,最好采用分段盐析。由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同,改变盐的浓度与溶液的pH值,可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,这种分离蛋白质

硫酸亚铁含量测定

硫酸亚铁中铁含量的测定 一、实验目的 了解K 2Cr 2O 7法测定铁含量的原理和方法。 二、实验原理 在强酸性条件下，K 2Cr 2O 7可以将Fe 2+离子定量氧化： Cr 2O 72- + 6Fe 2+ + 14H + = 2Cr 3+ + 6Fe 3+ + 7H 2O 因此，可用K 2Cr 2O 7标准溶液在H 2SO 4/H 3PO 4混合酸介质中，以二苯胺磺酸钠为指示剂（溶液变紫色为终点）直接滴定Fe 2+离子，测得试样中铁的含量。 三、器材与药品 1.器材 分析天平（0.1mg ），酸式滴定管（50mL ），容量瓶（250mL ），锥形瓶（250mL ）等。 2.药品：K 2Cr 2O 7（基准试剂），H 2SO 4（3mol ?L -1），磷酸（85%），二苯胺磺酸钠指示剂（0.2%），FeSO 4·7H 2O （样品）。 四、实验方法 1、K 2Cr 2O 7标准溶液的配制（约0.02mol ·L -1） 准确称取烘干的K 2Cr 2O 7基准试剂1.3～1.5g 于小烧杯中，加入适量去离子水溶解，然后定量转入250mL 容量瓶中，定容，摇匀。 K 2Cr 2O 7标准溶液浓度的计算： 0.250294.18722272O Cr K O Cr ?=-m c 2、硫酸亚铁中铁含量的测定 准确称取0.6~0.7g FeSO 4·7H 2O 样品于250mL 锥形瓶

中，加入10mLH 2SO 4、50mL 去离子水和5mLH 3PO 4，混合 均匀后加入3～4滴二苯胺磺酸钠指示剂①，立即用K 2Cr 2O 7 标准溶液滴定至溶液呈紫色或蓝紫色②，即为终点。重复测 定三次。 硫酸亚铁中铁含量计算：样m cV 55.85 )6(722O Cr K Fe ?=ω，取三次测 定的平均值。 附注 ①二苯胺磺酸钠指示剂变绿时，不能使用。 ②酸性介质中Fe 2+易被空气氧化，故应立即滴定。

硫酸亚铁铵的制备及组成测定

硫酸亚铁铵的制备及组成测定

硫酸亚铁铵的制备及组成测定 一、实验目的 1．学习制备复盐(NH4)2SO4·FeSO4·6H2O的制备方法和实验条件。 2．熟练掌握水浴加热、过滤、蒸发、结晶等基本无机制备操作。 3．学习制备无机化合物有关投料、产率、产品限量分析等的计算方法。 4．掌握测定硫酸亚铁铵中各组分的的原理与方法。 二、实验原理 1．硫酸亚铁铵的制备 硫酸亚铁铵(NH4)2SO4·FeSO4·6H2O）商品名为莫尔盐，为浅蓝绿色单斜晶体。一般亚铁盐在空气中易被氧化，而硫酸亚铁铵在空气中比一般亚铁盐要稳定，不易被氧化，并且价格低，制造工艺简单，容易得到较纯净的晶体，因此应用广泛。在定量分析中常用来配制亚铁离子的标准溶液。 和其他复盐一样，(NH4)2SO4·FeSO4·6H2O在水中的溶解度比组成它的每一组分FeSO4或(NH4)2SO4的溶解度都要小。利用这一特点，可通过蒸发浓缩FeSO4与(NH4)2SO4溶于水所制得的浓

与KSCN溶液在比色管中配制成待测溶液，将它所呈现的红色与含一定Fe3+量所配制成的标准[Fe（SCN）]2+溶液的红色进行比较，确定待测溶液中杂质Fe3+的含量范围，确定产品等级。 2．Fe2+ 含量测定 （1）重铬酸钾法测铁，是铁矿中全铁量测定的标准方法。 在酸性溶液中，Fe2＋可以定量地被K2Cr2O7氧化成Fe3＋，反应为： 6Fe2＋＋Cr2O72－＋14H＋＝6Fe3＋＋2Cr3＋＋7H2O 滴定指示剂为二苯胺磺酸钠，其还原态为无色，氧化态为紫红色。 必须加入磷酸或氟化钠等，目的有两个：一是与生成地Fe3＋形成配离子 [Fe（HPO4）]+，降低Fe3＋/ Fe2＋电对的电极电势，扩大滴定突跃范围，使指示剂的变色范围在滴定的突跃范围之内；二是生成的配离子为无色，消除了溶液中Fe3＋黄色干扰，利于终点观察。 （2）采用邻菲啰啉比色法测定亚铁含量 在一定酸度条件下，试液中亚铁离子（Fe2+）

硫酸铵沉淀

硫酸铵沉淀： 有生物活性的蛋白一般在做硫胺沉淀的时候要小心一点。最保险的做法是，把硫酸铵配成饱和溶液，把蛋白溶液置于冰浴上，再把饱和硫胺溶液一滴一滴的加到你的蛋白溶液中，最好边加边搅拌，避免局部硫胺浓度过高，但搅拌的时候注意不要搅出气泡。按照你的比例加完之后，最好放冰箱静置至少2h，充分沉淀后离心即可。 4M的硫酸铵pH值为，在这个酸度下可能会有一些蛋白质变性，要小心。硫酸铵会破坏蛋白质水化层，最好是缓和地加入。边加入边搅拌，如果在磁力搅拌器上搅拌，小漩涡中心有很多泡沫就表示蛋白质变性，使得溶液粘度增加，泡沫难破，那就很难保证你的蛋白质有没有变性了。 溶解度，在一定温度下，某固态物质在100g溶剂中达到饱和状态时所溶解的质量，叫做这种物质在这种溶剂中的溶解度。固体的溶解度是指在一定的温度下，某物质在100克里达到饱和状态时所的克数，用字母s表示，其单位是“g/100g水”。在未注明的情况下，通常溶解度指的是物质在水里的溶解度。 溶液饱和度(化学) 某种溶液的饱和度是指在100g该溶液中溶质在溶液中所占质量分数.一般情况下，一种溶液的饱和度在同一温度下不会变.要想使不饱和溶液饱和度增加可以选择增加溶质.在刚好有晶体析出的时候就是溶液刚好饱和的时候.溶液饱和度不会出现100%

加固体比较好，加得越慢越好。如果加快了，会造成局部浓度过大，造成意想不到的沉淀。 硫酸铵沉淀的时候应该要注意pH值的变化，就我的实验来说，一株产淀粉酶曲霉固态发酵之后用超纯水浸泡离心，得到含有酶的上清液的pH值为，但是淀粉酶能耐受，为了去除更多杂质蛋白质，我把硫酸铵浓度调节到2摩尔每升的同时会控制pH值为，4度过夜之后离心取上清液再调节到pH值，4度放置，离心，又去除一部分杂质蛋白质，上清液直接用的疏水层析系统来纯化。 一个纤维素酶的纯化我也用类似的方法，只不过第一步是用。 硫酸铵是酸式盐，2M时pH值约为5，4M时更低，用来沉淀蛋白质的时候情况就更复杂了，所以最好知道自己需要的蛋白质的耐受情况，不要搞死了。 透析之前要选用一个不影响自己想要的蛋白质的pH值，硫酸铵沉淀和透析都要保持一致，才能使损失减少。透析时候产生的沉淀不知道是不是你想要的蛋白质，不过下次做最好谨慎一点，做我说过的预备实验。 分段盐析的方法

辛酸硫酸铵纯化方法

所需溶液配制： 1.0.06mol/L pH=4.8醋酸盐缓冲液：无水醋酸钠0.29g，冰醋酸0.141mL，纯水定容至100mL。 2.2mol/L氢氧化钠溶液：16g氢氧化钠固体用于200ml纯水中。 3.2mol/L盐酸溶液：取33m L36.4%的浓盐酸定容至200mL纯水中。 4.0.1mol/L PBS缓冲液：80.0 NaCl，KCl 2.0g，Na2HPO4· 12H2O 29.0g，KH2PO4 2.0g， 加超纯水定容至1L。 单克隆抗体采用辛酸-硫酸铵方法纯化，具体步骤如下： （1）将腹水从-20°C冰箱拿出室温解冻。腹水用双层滤纸过滤，初步除去杂质、脂肪及细胞碎片。4°C,12000r/min，离心15min，收集上清，弃沉淀。精确定量腹水体积。 （2）一份体积的腹水与2-4份体积的醋酸盐缓冲液磁力搅拌混匀，用2mol/L HCL 调PH至4.5-4.8。 （3）磁力搅拌下缓慢加入正辛酸，33μL/mL腹水，加完后室温磁力搅拌半小时，后置4°C静置2h以上。 （4）4°C ,12000r/min，离心5min，收集上清，双层滤纸过滤，收集滤液。 （5）量取滤液体积，加入1/10体积的0.1M pH=7.4 的PBS,用2mol/L NaOH（记录NaOH 体积）调pH至7.4。 （6）将上清冰浴预冷，加硫酸铵固体至0.277g/mL，边加边搅拌，并于30min内加完，置4°C过夜。 （7）12000r/min，离心15min，弃上清。用一定体积的0.01mol/LPBS溶解沉淀。用PB 透析两天后换0.01mol/LPBS 透析两天。收集透析液，12000r/min，离心15min，取上清，置-20°C预冻后真空冻干成粉保存。 张道宏师姐版本：用1/10原腹水体积的0.01mol/L pH值7.4 PBS溶解沉淀；对0.01mol/L pH值7.4的PBS透析一天，离心去掉不溶杂质，用纯水进行透析，优球蛋白析出后离心收集澄清抗体溶液，置于-20°C预冻；冻干保存。

化学分析测硫酸亚铁操作规程

1.目的： 规范化学分析测硫酸亚铁含量的操作方法，以确保该方法操作的标准化及规范化。 2.范围： 本规定适用化学分析测硫酸亚铁含量的操作。 3.内容： 3.1 Fe 2+的检测 3.1.1 检测原理 在酸性条件下，用高锰酸钾标准滴定溶液滴定，使二价铁氧化成三价铁，从而得出二价铁含量。 +++++→+322755Fe Mn Fe Mn 3.1.2试剂 3.1.2.1硫酸溶液：1+1 3.1.2.2磷酸溶液：1+1 3.1.2.3高锰酸钾标准滴定溶液：c （1/5KMnO 4） =0.05 mol/L 3.1.3仪器设备. 3.1.3.1锥形瓶：250ml 3.1.3.2滴定管：50ml 3.1.3.3 电子分析天平：精确到0. 0001 3.1.4 分析步骤 称取0.5000g 样品（精确到0.0001g ），置于250ml 锥形瓶中，加50ml 水溶解。加10ml 磷酸溶液和4ml 磷酸溶液。以高锰酸钾标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色（30s 不褪色）即为终点。同时做空白试验。最后计算Fe 2+含量。 3.1.5 Fe 2+的计算公式 w 1=c ×（V 1?V 0）×55.85×10?3m ×100% 式中： w 1------样品中Fe 2+的含量，% c------高锰酸钾标准滴定溶液的浓度，mol/L V 1------滴定时消耗高锰酸钾标准滴定溶液的体积，ml V 0------空白时消耗高锰酸钾标准滴定溶液的体积，ml

m ------样品的质量，g 55.85------铁的摩尔质量，g/mol 3.2 总铁的检测 3.2.1总铁的检测原理： 在酸性条件下，氯化亚锡先将大部分三价铁还原成二价铁，必要时滴加过氧化氢消去过量的二价锡。以钨酸钠溶液为指示剂，用三氯化钛进一步将三价铁还原成二价铁，然后以二苯胺磺酸钠为指示剂，用重铬酸钾标准滴定溶液滴定二价铁，从而得出铁含量。 2Fe 3++Sn 2+=2Fe 2++Sn 4+ Ti 3++Fe 3+=Ti 4++Fe 2+ 6Fe 2++Cr 2O 72?+14H +=6Fe 3++2Cr 3++7H 2O 3.2.2 试剂 3.2.2.1 过氧化氢 3.2.2.2 浓盐酸 3.2.2.3 硫磷混酸（15:15:70） 3.2.2.4 氯化亚锡（100 g/L ） 3.2.2.5 三氯化钛溶液(2%) 3.2.2.6 重铬酸钾标准滴定溶液：)6 1(722O Cr K c =0.05 mol/L 3.2.2.7 钨酸钠指示液（10%） 3.2.2.8 二苯胺磺酸钠指示剂（5g/L ） 3.2.3 仪器设备 3.2.3.1 滴定管：50mL 3.2.3.2 电子分析天平：精确到0.0001g 3.2.3.3 锥形瓶：250 mL 3.2.3.4 万用电炉 3.2.4 分析步骤 称取0.5000 g （准确到0.0001 g ）样品置于250mL 锥形瓶中，.加入5mL 盐酸和20ml 的蒸馏水，低温溶解后.加热至近沸。趁热边摇边加入氯化亚锡溶液，至溶液颜色由棕黄色变为浅黄色（若氯化亚锡过量，溶液呈无色，则滴加过氧化氢至溶液呈浅黄色）。 加入4-5滴钨酸钠指示液，边摇标滴加三氯化钛溶液，至溶液呈浅蓝色。立即流水冷却，加入50mL 的蒸馏水，用重铬酸钾标准滴定溶液滴定至蓝色刚好消失（1-2滴，不计读数）。加水

硫酸亚铁铵晶体的成分分析和检验

硫酸亚铁铵晶体的成分分析和检验 【探究一】定性探究硫酸亚铁铵晶体的组成 1、选择合适的药品和试剂，设计实验方案，确定浅绿色晶体是硫酸亚铁铵 对象所需试剂和药品实验方案 【探究二】定量探究硫酸亚铁铵的组成 2、取3 份均为7.84g 的(NH 4)x Fe y (SO 4)z .nH 2 O，进行实验。 ①向一份中加入过量NaOH 溶液，加热，得到0.68gNH 3 ； ②向第二份中加入过量的BaCl 2 溶液，充分反应后过滤、洗涤、干燥得到9.32g 沉淀。 ③加热第三份晶体使其分解，剩余固体质量与温度的关系如图所示。

已知：硫酸亚铁铵晶体受热时，200 ℃以下只失去结晶水 相对原子质量：H-1 、N-14 、Fe-56 、S-32 、O-16 、Ba-137 (1) 加入NaOH 产生NH 3 的离子方程式；加入BaCl 2 产生白色沉淀的离子方程式。 (2) 请求出化学式中X、Y、Z 的比值。 (3) 请写出硫酸亚铁铵晶体的化学式。 (4) 写出A 点到B 点反应的化学方程式。 (5) 过滤所需的玻璃仪器有烧杯、玻璃棒、，过滤操作中滤纸有多种折法，为了加快过滤速率，你选择折法是 A B C (6) 请描述洗涤沉淀的操作 (7) 判断沉淀是否洗涤干净： 【探究三】定量探究硫酸亚铁铵中Fe2+ 的物质的量

3、为探究硫酸亚铁铵晶体的纯度，称取2g 的该硫酸亚铁铵样品，制成溶液。 用0.040mol/L 的标准酸性KMnO 4 溶液进行滴定。 (1) 本实验的指示剂。 A. 酚酞 B. 甲基橙 C. 石蕊 D. 不需要 (2) 滴定时，将KMnO 4 酸性溶液装在(填“酸式”或“碱式”)滴定管。写 出滴定过程中的离子方程式 (3) 判断该反应到达滴定终点的现象为 (4) 滴定操作中，如果滴定前装有酸性KMnO 4 标准溶液的滴定管尖嘴部分有气 泡，滴定结束后气泡消失，则滴定结果将（填偏大、偏小或不变）(5) 滴定终点时，用去25 mL 酸性KMnO 4 溶液，则该硫酸亚铁铵样品的质量分 数为。 【实战演练】某化学小组制备硫酸亚铁铵晶体并设计测定其组成，他们进行了以下实验： I．向FeSO 4 溶液中加入(NH 4)2SO 4 溶液，经过“一系列操作”后得到一种浅蓝绿色硫酸亚铁铵晶体，这种晶体俗名“摩尔盐”，它比绿矾稳定得多．将摩尔盐低温烘干后，称取7.84g 加热至100 0C 失去结晶水，质量变为 5.68g II．选择下图所示部分装置连接起来，检查气密性后，将上述 5.68g 固体放入 A 装置锥形瓶中，再向锥形瓶中加入足量NaOH 浓溶液，充分吸收产生气体并测出气体质量0.68g ．

蛋白纯化硫酸铵沉淀盐析法

蛋白纯化硫酸铵沉淀盐析 还能想起那些在荧屏中曾经震撼过我们，具有超能力的英雄么？ 蜘蛛侠，敏捷，灵活迅速飞流直下，忽闪直冲高楼； 绿巨人浩克，力量，速度，耐力，在我们的想象力中膨胀； 还有，我们随身携带星形盾牌，品格高尚的美国队长…… 幻想里中的人物形象存在我们的记忆力，然而生物背景出身的我们，总归要锻炼出属于自己的实验技能，即便是相同的实验步骤，每个人做出来的结果也不尽相同，差别在哪？反复练习，用心总结出属于自己的心得，转化为自己的实验“超能力”吧。本文总结了蛋白纯化硫酸铵沉淀详细的实验原理、步骤，供大家参考。 -------锻炼属于我们自己的实验“超能力”之一 我是超级蜘蛛精 看我有劲儿不？ 冲啊，我是美国队长 而我是一只冷静的科研小蜗牛 这次，我们所要分享的便是一种很常见，但是也很重要的蛋白质纯化方法：硫酸铵沉淀蛋白法，一起走进实验室吧。 硫酸铵沉淀法是粗分离蛋白时常用的纯化和浓缩蛋白的技术。蛋白质的溶解度和盐浓度密切相关，在低浓度的条件下，随着盐浓度的增加，蛋白质的溶解度

增加；但在高浓度的盐溶液里，盐离子竞争性的

结合蛋白表面的水分子，破坏蛋白表面的水化膜，溶解度降低，蛋白质在疏水作用下聚集形成沉淀。每种蛋白质的溶解度不同，因此可以用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。硫酸铵的溶解度大，解离形成大量的NH4+、SO42-离子，会结合大量的水分子，使蛋白质的溶解度下降，另外，其温度系数小，不易使蛋白质变性，因此，蛋白质粗分离时硫酸铵沉淀法是很重要的一种技术，后续可采用层析技术进一步纯化蛋白，效率更高。硫酸铵沉淀法是常用的分离免疫球蛋白的方法。 各种不同蛋白质盐析需要不同浓度的硫酸铵溶液。在实验中建议配置不同梯度浓度的硫酸铵溶液来确定蛋白质沉淀所需的最佳浓度。 （1）参照如下表格配置不同浓度的硫酸铵溶液； 例如，在25 ℃条件下，配置饱和度为100 %的硫酸铵溶液，称取767 g的硫酸铵固体，边搅拌边加入到1 L的蒸馏水中，完全溶解后，用氨水或者硫酸调节pH 到7.0。 （2）沉淀蛋白 将样品离心，去除沉淀，保留上清液并测量体积；一边搅拌一边慢慢的加入硫酸

硫酸亚铁铵法测定Li_Ni_1_x_y_Co_xMn_yO_2中的锰含量

研究与设计 ２０１２．４Ｖｏｌ．３６Ｎｏ．４ 收稿日期： ２０１２－０３－０５作者简介：刘平（１９８０—），女，天津市人，工程师，主要研究方向为理化分析与电池材料。 ４７４ 硫酸亚铁铵法测定ＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２中的锰含量 刘 平，樊勇利 （中国电子科技集团公司第十八研究所，天津３００３８１） 摘要：详细阐述了用硫酸亚铁铵法测定锂离子电池正极材料ＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２中的锰含量。本方法锰的回收率为９９．４０％～１０２．２０％，精确度高，准确度好，适用于规模化生产中的品质控制。本方法能够替代使用氰化钾的ＥＤＴＡ络合滴定法测定锰含量的方法。 关键词：ＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２中锰含量测定；硫酸亚铁铵法；锂离子电池中图分类号： ＴＭ９１２文献标识码： Ａ文章编号： １００２－０８７Ｘ（２０１２）０４－０４７４－０２ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍａｎｇａｎｅｓｅｃｏｎｔｅｎｔＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２ｂｙａｍｍｏｎｉｕｍｉｒｏｎ（Ⅱ）ｓｕｌｆａｔｅｍｅｔｈｏｄ ＬＩＵＰｉｎｇ，ＦＡＮＹｏｎｇ－ｌｉ （ＴｉａｎｊｉｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｏｗｅｒＳｏｕｒｃｅｓ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００３８１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍａｎｇａｎｅｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎＬｉ－ｉｏｎｂａｔｔｅｒｉｅｓｃａｔｈｏｄｅｍａｔｅｒｉａｌＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２ｂｙ ａｍｍｏｎｉｕｍｉｒｏｎ（Ⅱ）ｓｕｌｆａｔｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｅｘａｃｔｗｉｔｈａｍａｎｇａｎｅｓｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆ９９．４０％－１０２．２０％，ｗｈｉｃｈｉｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｈｅｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ，ａｎｄｃａｎｒｅｐｌａｃｅｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆＥＤＴＡｃｏｍｐｌｅｘｏｍｅｔｒｉｃｔｉｔｒａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｐｏｔａｓｓｉｕｍｃｙａｎｉｄｅ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍａｎｇａｎｅｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２；ａｍｍｏｎｉｕｍｉｒｏｎ（Ⅱ）ｓｕｌｆａｔｅｍｅｔｈｏｄ；Ｌｉ－ｉｏｎｂａｔｔｅｒｙ 锂离子电池正极材料氧化镍钴锰锂（简称三元材料）自从２００１年由Ｔ．Ｏｈｚｕｋｕ［１］发现以来，一直是人们研究的热点。经过这１０年的深入研究，其性能得到进一步的挖掘，如其较高的容量和较好的安全性能；另外，其缺点如压实密度偏低和循环过程的析气问题经过用先进的合成手段［２］和表面修饰的方法得以改善［３］。当前， 它作为动力型锂离子电池的正极候选材料之一，再次成为研究的重点［４］。ＬｉδＮｉ１－ｘ－ｙＣｏｘＭｎｙＯ２中镍、钴、锰的不同比例影响着其电化学性能［５］ ，因此，在规模化生产中控制镍、钴、锰的比例是重要关键技术之一，而如何测定三种元素的含量是检验配料准确性的实质体现，对于规模生产的品控有重要意义。 在前述的文章［６］中，建立了常量级化学分析方法测定镍、钴、锰三种元素的含量。其中，在测定锰含量时，为了消除镍和钴元素对铬黑Ｔ的封闭作用，采用了氰化钾作掩蔽剂。然而，众所周知，氰化钾是毒性强烈、作用迅速的剧毒物质，研究表明口服５０～１００ｍｇ即可引起猝死。其中毒原理是与细胞色素氧化酶中的Ｆｅ３＋起反应，形成氰化细胞色素氧化酶，失去了传递氧的作用。如果长期在此环境下工作会引起神经衰弱等病证，对人的危害较大。因此，氰化钾作为剧毒物质之一其购买 与使用途径是严格受到公安部门控制的。出于购买困难与安全健康的考虑，应研究另一种测定锰含量的方法以替代使用氰化钾的ＥＤＴＡ络合滴定法。本文建立了以磷酸为介质，硝酸铵为氧化剂，用硫酸亚铁铵标准溶液测定锰含量的方法，使三元材料主体成分的测定方法更加完善。 １实验 １．１实验原理［７］ 在２２０～２４０℃的热磷酸介质中，硝酸铵将Ｍｎ（Ⅱ）氧化为Ｍｎ（Ⅲ），以二苯胺磺酸钠为指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定。 Ｃｏ（Ⅱ）和Ｎｉ（Ⅱ）不被硝酸铵氧化，因此不干扰测定。其反应方程式如下： ＭｎＨＰＯ４＋Ｈ３ＰＯ４＋ＮＨ４ＮＯ３→ＮＨ４ＭｎＨ２（ＰＯ４）２＋ＮＯ２↑＋Ｈ２Ｏ２ＮＨ４ＭｎＨ２（ＰＯ４）２＋２ＦｅＳＯ４·（ＮＨ４）２ＳＯ４＋Ｈ２ＳＯ４→２ＭｎＨＰＯ４＋Ｆｅ２（ＳＯ４）３＋２ＮＨ４Ｈ２ＰＯ４＋２（ＮＨ４）２ＳＯ４ １．２主要试剂 盐酸（１∶１），磷酸，硝酸铵，二苯胺磺酸钠（５ｇ／Ｌ），硫酸亚铁铵标准溶液（０．１ｍｏｌ／Ｌ）， Ｍｎ标准溶液（１ｍｇ／ｍＬ）。１．３实验方法 １．３．１样品的制备 准确称取２ｇ（精确至０．０００１ｇ）样品置于２００ｍＬ烧杯中，加少量水润湿，加入２０ｍＬ盐酸（１∶１）， 加热溶解并蒸发至近