微生物标本操作流程

竹山县人民医院检验科微生物室样本操作流程图

微生物室样本接收处理流程

微生物标准操作流程

目录 生物安全柜操作规程及维护 (3) 实验室高压蒸气灭菌器操作程序 (6) 物体表面细菌监测 (8) 医护人员手指细菌监测 (9) 空气中细菌含量的监测 (10) 环境卫生学监测质控标准 (12) 使用中消毒剂与无菌物品保存液的质控程序 (13) 一次性医疗用品微生物监测 (14) 紫外线消毒质量控制程序 (15) 污水的细菌监测(总大肠菌群) (16) 正确洗手的手法 (18)

生物安全柜操作规程及维护 1.目的： 为了满足生物安全操作的要求，并且达到在操作时保护操作人员的目的，使细菌操作达到无菌操作的要求，便于操作的标准化。 2.原理： 通过使用空气超高过滤器（ULPA）的过滤，使仪器内部的空气洁净度达到100级，使细菌的一般操作限制在一个相对密闭的环境中，不但保护操作人员，还可满足操作的标准化。 3.工作条件： 环境温度：18－30℃相对湿度：<80% 安装的环境必须达到一定的洁净度；远离人员通道及有潜在干扰气流的位置；柜后及两侧各留30cm的空隙，顶部30-35cm空隙。 环境必须有良好的通风设备。 4、操作步骤： 生物安全柜的设置已经设置完全，如果需要重新设置请参看HFsafe生物安全柜使用说明。具体操作步骤为： 4.1将电源插头插入准备好的固定插座，连通电源。 4.2有系统管理员(即本室负责人)开启玻璃门门锁，并将总开关置于开位置“！”，此时系统开始上电。 4.3检查显示及按钮的各项功能，具体见后附注（注意：UV灯的测试除外，开启UV灯时必须将前玻璃门关闭）。 4.4当系统稳定后，对设备进行安全性检查。（检查项目包括：工作室平均垂直风速；工作室内可操作区域洁净度达到100级；设备的密封有没有被破坏。所有的安全检查项目中的洁净度建议由当地卫生防疫部门来进行尘埃粒子数、沉降菌和菌落数的检测，看是否符合其工作室的洁净度要求）。 4.5如果安全性测试通过，系统已经可以使用，请在《使用记录》上写下相应的信息。在使用时需要注意的是，操作必须在工作台板无孔区域进行，物品也必须放置于无孔区域。 4.6操作者应先把手臂放进安全柜内大约1分钟，以使柜子适应并且让气流扫过手臂手臂移入移出柜内应保持前门气流的连续性，应缓缓移入移出，并且方向和前门垂直；为使跨越前门的动作量降低，在实验开始前应把所需的物品放入柜子；柜子在开始工作前以及完成后至少要运行5分钟是，使柜子净化，以便于污染空气从柜内排出。实验操作方向应从清洁区到污染区，一般要求为左→右。 4.7 当工作完成后需要关机前，将试验使用的所有材料和其他物品从设备中取出。

药品微生物限度检验方法标准操作规程

标准操作规程 目的：建立一个药品微生物限度检验标准操作规程。 范围：适用于本企业生产的所有品种，本企业所有洁净生产区域，QC微生物限度检查室，洁净工作室等。 责任者：QC主任、化验员。 规程： 本规程引至《中国药典》2000年版。 1. 概述：微生物限度检查系指非规定灭菌制剂及其原辅料受到微生物污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。我公司QC设无菌操作室，用于微生物限度检查。无菌操作室的管理及使用制度见本文附录一。 2. 抽样：供试品应按批号随即抽样，一般抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍。抽样时，凡发现有异常可疑的样品，应缺陷选用疑问的样品，但因机构损伤明显破裂的包装不得作为样品，凡已能从药品、瓶口（外盖内侧及瓶口周围）外观看出长螨、长霉、虫蛀及变质的药品，可直接判为不合格，无需要再抽样检验。 3. 供试品的保存：供试品在检验之前，应保存在阴凉干燥处，以防供试品中的污染菌因保藏条件所引起致死、损伤或繁殖。供试品在检验之前，应该保持原有包装状态，严禁开启，包装已开启的样品不得作为供试品。 4. 检查： 4.1. 使用设备：电热恒温培养箱、电热恒温水温箱、试管、刻度吸管、量筒、三角瓶、培养皿、试管架、注射器、针头、注射器盒、研钵、75％酒精棉球、紫外灯（365nm波长）。 4.2. 检查的全过程应严格遵守无菌操作，严防再污染。使用设备、仪器、人员及无菌操作室常用的消毒、灭菌方法见本文附录二。除另有规定外，供试品制备成供试液后，均在均匀状态取样。制成供试液后，应该在60分钟内注皿操作完毕。 标准操作规程

4.3. 培养：除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30－35℃，霉菌、酵母菌培养温度为25－28℃，控制菌培养温度为36±1℃，检验结果的报告以1g、1ml或10cm2为单位。 4.4. 复检 4.4.1. 菌数测定不合格者应复检，控制菌检查以一次检出为准，不再复试，但应保留检出菌株一个月备查。 4.4.2. 以复试项下不合格项目为准，作单项复试。复试需另取同批号样品，测定2次。 4.4.3. 复试报告，以3次测定结果的算术平均值报告。 4.5. 检验报告 4.5.1. 检验报告以1g、1ml或10cm2为单位。 4.5.2. 测定菌数报告，以每次测定结果全部平均值报告。 4.5.3. 控制菌按检验结果报告，如未检出控制菌时，报告为“按规定抽样检验结果未检出XX菌”，如抽样中任意一样品要检出控制菌时，报告为“按规定抽样，检出XX菌，不符合药品微生物限度标准。” 4.6. 培养基、试药及稀释剂的相关内容见本文件附录三。 4.7. 供试液的制备：按供试液的理化特性与生物学特性可采取适宜的方法制成供试液。 4.7.1. 供试品的取样及注意事项 供试品取样应有一定数量，以使检验结果具有代表性，正常的供试品一般每批应随机抽取两瓶或两盒以上的包装单位，检验时每次应分取两瓶(盒)以上的样品共10g或10ml。 供试品在检验前，应严格保持包装的原有状态，不得启开，并放在阴凉干燥处，防止微生物再繁殖，以免影响检验结果，凡已将原包装启开，则无代表性应另取样。 供试品稀释后须在1－2小时内操作完毕，防止微生物繁殖或死亡。 供试品稀释成供试液后，应在均匀状态下取样，凡因抑菌或不溶于水的剂型，其供试品应作特殊处理后进行检验。 4.7.2. 液体供试品：取供试品10ml，加入稀释剂90ml中，混匀，作为供试液。油剂可加适量 聚山梨酯80，混匀，吸取相当于10g或10ml供试品，标准操作规程 再稀释成100ml作为供试液；合剂（系指含王桨或蜂蜜者，下同）可用供试品作为供试液。 4.7.3. 固体、半固体或黏稠液供试品：称取供试品10g，置0.9%无菌氯化钠溶液100ml中，用匀浆仪或其他适宜的方法混匀后作为供试液。在制备过程中，必要时可加适量聚山梨酯80，并适当加温，但不应超过45℃。 （1）非水溶性供试品：取供试品5g（5ml）加入含溶化的无菌司盘80 5g、单硬脂酸甘油酯3g、聚山梨酯80 10g混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45℃左右的0.9%无菌氯化钠溶

检验标本溢洒应急预案

检验标本溢洒应急预案Newly compiled on November 23, 2020

1. 目的：规范检验科标本溢洒处理流程，防止污染进一步扩散，经处理使之达到无害化程度。 2. 适用范围：检验科 3. 定义：检验科标本溢洒是指各种临床检测标本、培养物等发生的溢出，对实验人 员、环境或培养对象造成的危害或潜在危害。 4. 职责：当事人负责容器破碎及感染性物质的溢出处理。 5. 标准 准则 5.1.1 对工作人员进行宣传教育与培训，充分认识标本溢洒危害性，提高防患 意识。 5.1.2 工作人员必须严格遵守检验科标本溢洒处理流程。 应急响应 5.2.1 做好个人防护，戴手套，穿防护服，必要时戴眼罩和护目镜。 5.2.2 用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。 5.2.3 然后在上面倒上消毒剂，由外向内进行处理。 5.2.4并使其作用适当时间（30分钟），将布、纸巾以及破碎物品清理掉；玻 璃碎片应用镊子清理。 5.2.5 然后再用消毒剂擦拭污染区域 5.2.6 如果用容器清理破碎物，应当对他们进行高压灭菌或放在有效的消毒液 内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容 器内。 5.2.7 如果实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制，并将 原件置于盛放污染性废弃物的容器内。 5.2.8 填写《不良事件记录本》。 培训及演练 5.3.1培训： 5.3.1.1培训周期：每年组织全科人员学习生物安全实验室相关法规和 文件等。 5.3.1.2培训内容：重点学习个人防护用品的使用，消毒剂的使用，标 本溢洒的处理。

表面微生物测试标准操作规程

表面微生物测试标准操作规程（接触平皿法） 1．目的 建立表面微生物测试标准操作规程，保证测试人员操作规范化、标准化。 2．依据《药品生产质量管理规范》（2010年修订本） 3．范围 本规程适用于本公司对洁净区的表面微生物的检测。 4．责任 质量控制化验员负责实施，QC主管负责监督执行 5．内容 洁净区微生物测试点选择表面微生物监测的采样点数目及其布局根据以下几个方面设置： 空调系统验证的结果 房间的大小和布局 房间的用途 与产品的距离 人流物流方向 如何布点：对于同一洁净区，每个相同的取样物体在其不同的地方采2个样。如墙面2个采样点，地面2个采样点，洁净区主要设备2个采样点。

注：表面微生物监测的取样点数应依下列因素确定： 1.洁净区（室）的大小； 2.设备、管路等的复杂程度； 3.生产活动的重要性； 4.易受污染的部位等。 应考虑包含以下部位：每扇门、每个门把手、地板（至少两点）、墙壁（不易被清洁/消毒的部位，至少两点）、公用介 质的管路（不易被清洁/消毒部位）、生产设备的关键性部位（如灌装针、易与人员接触的塑料帘膜、胶塞筒、传输带）等。根据洁净区内设施、设备等表面对产品和洁净室环境的影响程度，通常将表面分为三类：关键表面（与产品、容器及密封件直接接触或暴露于产品、容器及密封件的表面）一般表面（如设备的外表面、墙壁等）和地板，并且分别设定不同的微生物限度要求。 表面微生物的每点取样面积宜控制在25cm2左右。 为避免干扰，宜在生产活动结束后取样。 洁净区微生物测试频率和限度 日常监控一月一次 接触碟（55mm）50cfu/25cm2 ，警戒40cfu/25cm2 ，纠偏 45cfu/25cm2 。 洁净区表面微生物测试方法（接触平皿法）。 洁净区表面微生物测试必须在动态下监测。

标本洒溢处理流程

襄垣县人民医院 检验科标本洒溢处理流程 一、标本或感染性废物发生洒溢时，首先根据洒溢位臵判断是否会立即造成工作人员职业暴露，如果洒溢发生在实验室未直接接触医务人员身体的地方，应先设臵洒溢标识，防止其他工作人员接触到或被污染。 二、各种区域处理程序 1、工作人员在处理洒溢事件时必须穿工作服或防护服，戴口罩、手套等防护设备。 2、实验室地面，台面，桌面的消毒：发生洒溢后（洒溢量超过10mL）立即用清洁布或吸水纸覆盖受污染的物品表面或区域，然后在上面倒上含500mg/L有效氯消毒液，覆盖30分钟后擦拭清洁污染区域。洒溢量少于10mL时直接向洒溢处倾倒含500mg/L有效氯消毒液，覆盖30分钟后擦拭清洁污染区域，然后将擦拭后的清洁布或吸水纸放于感染性废弃物的容器内。再用清洁的抹布擦洗溢出区域，去除残留的消毒液。用后的抹布臵于含500mg/L有效氯的消毒液内30 分钟。 3、实验室内使用材料、试验仪器内外表面有感染性物质洒溢时，一般选择小型喷雾器喷雾消毒，以降低有机材料

被损害的程度。 4、衣物被污染后应立即脱下浸泡于含500mg/L有效氯消毒液30分钟后清洗。 5、潜在感染性标本在离心时发生破裂与洒溢时应立即关闭离心机电源，先使离心机仓内气溶胶沉淀30分钟再打开离心机盖处理，处理玻璃碎片时应当使用镊子或镊子夹着棉花来进行，玻璃碎片应臵于利器废物盒处理。离心机腔内发生洒溢的部位均应用500mg/L有效氯消毒液擦拭2-3次，然后用清洁水擦拭干净并干燥，将所有的擦拭物品按感染性废物处理。 7、若标本或感染性液体溅入眼睛或口鼻腔，立即用大量生理盐水反复冲洗。 8、标本洒溢导致工作人员意外吸入或意外接触暴露后应立即处理，并及时报告科主任和院感科，如工作人员在处理操作过程中不慎被锐器损伤，应立即按相关程序紧急处理。

标本洒溢处理流程

xx人民医院 检验科标本洒溢处理流程 一、标本或感染性废物发生洒溢时，首先根据洒溢位臵判断是否会立即造成工作人员职业暴露，如果洒溢发生在实验室未直接接触医务人员身体的地方，应先设臵洒溢标识，防止其他工作人员接触到或被污染。 二、各种区域处理程序 1、工作人员在处理洒溢事件时必须穿工作服或防护服，戴口罩、手套等防护设备。 2、实验室地面，台面，桌面的消毒： 发生洒溢后（洒溢量超过10mL）立即用清洁布或吸水纸覆盖受污染的物品表面或区域，然后在上面倒上含500mg/L有效氯消毒液，覆盖30分钟后擦拭清洁污染区域。洒溢量少于10mL时直接向洒溢处倾倒含500mg/L有效氯消毒液，覆盖30分钟后擦拭清洁污染区域，然后将擦拭后的清洁布或吸水纸放于感染性废弃物的容器内。再用清洁的抹布擦洗溢出区域，去除残留的消毒液。用后的抹布臵于含500mg/L有效氯的消毒液内30分钟。 3、实验室内使用材料、试验仪器内外表面有感染性物质洒溢时，一般选择小型喷雾器喷雾消毒，以降低有机材料被损害的程度。 4、衣物被污染后应立即脱下浸泡于含500mg/L有效氯消毒液30分钟后清洗。 5、潜在感染性标本在离心时发生破裂与洒溢时应立即关闭离心机电源，先使离心机仓内气溶胶沉淀30分钟再打开离心机盖处理，处理玻璃碎片时应当使用镊子或镊子夹着棉花来进行，玻璃碎片应臵于利器废物盒处理。离心机腔内发生洒溢的部位均应用500mg/L有效氯消毒液擦拭2-3次，然后用清洁水擦拭干净并干燥，将所有的擦拭物品按感染性废物处理。 7、若标本或感染性液体溅入眼睛或口鼻腔，立即用大量生理盐水反复冲洗。

8、标本洒溢导致工作人员意外吸入或意外接触暴露后应立即处理，并及时报告科主任和院感科，如工作人员在处理操作过程中不慎被锐器损伤，应立即按相关程序紧急处理。襄垣县人民医院 医务人员职业暴露应急处置预案 医务人员职业暴露，是指医务人员在从事诊疗、护理活动过程中接触有毒、有害物质，或传染病病原体，从而损害健康或危及生命的一类职业暴露。 一、局部紧急处理： 1、用肥皂和流动水冲洗被污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜，至少10分钟。 2、如有伤口应立即从伤口周边由近心端向远心端轻轻挤压，尽可能地挤出伤口部位的血液，禁止局部按压。 3、用75%酒精或 0.5%碘伏等消毒剂消毒伤口，并包扎。 二、评估与上报 1.发生暴露30分钟内向本科主任报告，科主任在2小时内上报医院感染管理科。 2.做好登记表的填写及资料保存。 3.确定患者是否具有传染性及职业暴露当事人免疫情况，立即进行检测，检测项目包括HCV、HBV、HIV、梅毒。 4.请感染科专家对患者、操作者的检验结果、发生职业暴露的暴露级别和暴露源的病毒载量水平进行评估，确定下一步预防或治疗方案。 5.若患者HCV、HBV、HIV、梅毒抗原检测阴性或职业暴露当事人HCV、HBV、HIV、梅毒抗体检测阳性无需做特殊处理。

常见微生物标本的采集

常见微生物标本的采集、处理与检测 标本采集的基本原则：尽早采集、根据可疑的病原体，选择不同采集时机和标本种类、在抗生素应用前采集、遵守无菌操作、正确保存和运送。容器应密封不易碎，标本不得污染容器的口和外壁。 1.血液标本正常人的血液是无菌的。当细菌侵入时可引起严重的菌血症或败血症。 一般情况下在患者发热初期或发热高峰时采集；持续性菌血症可随时采集；间歇性菌血症，应预测其体温上升期进行采血。一般在使用抗生素前采集2~3次；多部位采集，如两侧肘静脉或动、静脉同时采取；对于已使用抗生素而无法停止的患者，也应在下次用药前采取。在感染局部的附近血管中采血，可提高阳性率。采血量成人一般5~10ml，婴幼儿1~2ml。 采集的血液标本注入培养瓶中先进行增菌培养，培养基和血液标本量的比例应>10：1，将血液中的各类杀（抑）菌物质充分稀释。需氧菌常用培养基有胰酪蛋白大豆胨肉汤和葡萄糖酚红肉汤等，常加入对氨基苯甲酸（PABA）50μg/ml中和磺胺类，青霉素酶2单位/ml破坏青霉素类，硫酸镁中和链霉素、四环素、土霉素、金霉素、新霉素及多粘菌素等抗生素。加入0.03~0.05%的聚茴香磺酸钠（sodium polyanethol sulfonate, SPS）可抑制血清中的抗菌物质，并对氨基糖苷类和多肽类抗生素有灭活效果。并加入Ⅹ、Ⅴ因子等生长因子。 培养瓶每天观察一次。如发现①培养瓶内液体浑浊；②血球层上面出现颗粒状的生长物，并且有自下而上的溶血；③有明显的凝块；④液体表面有菌膜，培养液清晰或浑浊等，表明有细菌生长。直接进行涂片染色初步报告。同时分别接种血平板、巧克力（色）平板，普通培养和5%CO2 35℃培养。也可直接进行体外药敏试验。无细菌生长迹象的培养瓶孵育至第7d，接种血平板、巧克力（色）平板，分别进行普通培养和5%CO2环境35℃孵育24h。为了提高检出的速度，在培养的第2~3d时应移种一次。 有厌氧菌感染时，同时注入需氧瓶和厌氧瓶，厌氧培养基通常用硫乙醇酸盐培养基、牛心脑浸液肉汤等；培养液中有刃天青，无氧时无色，有氧时呈红色。需氧瓶和厌氧瓶同时浑浊，或需氧瓶无生长而厌氧瓶液体浑浊，提示厌氧菌生长。分别接种血平板和厌氧血平板，置需氧和厌氧环境中，如果都只生长1种细菌，则为兼性厌氧菌；如果仅在厌氧环境中生长，可以直接报告“有厌氧菌检出”。 若长期应用抗细胞壁类抗生素，应考虑细菌L型存在，将血液接种高渗培养基中，分别进行需氧、厌氧和5%CO2环境培养。每周移种2~3次于高渗固体培养基上，观察有无细菌L型菌落生长。 2.呼吸道标本 正常上呼吸道有正常菌群。下呼吸道正常情况下无细菌或仅有少量细菌侵入

标本处理(核酸纯化)程序

1目的：保证标本处理标准化、规范化，使不规范操作因素对实验结果造成的影响减至最小。 2适用范围：乙型肝炎病毒核酸提取、解尿支原体核酸提取、沙眼衣原体核酸提取、HPV核酸提取、HCV核酸提取、结核杆菌核酸提取、淋球菌核酸提取。 3操作人：李成庭、李丽蒙、高子文李华娇张国华 4标准操作程序 4.1乙型肝炎病毒（DNA血清） 1）双手戴上手套，从冰箱取出标本，将离心管依次编号。 2）取出1.5ml离心管，对应标本编号，置于离心管架上。 3）将移液器调到70卩l，先混匀DNA提取液，再吸取70^1加入到已编号的离心管中。然后吸取30 ^1血清，加入离心管中混匀，注意每吸取一份血清标本应更换一次枪头。处理全部标本，然后将离心管插到金属浴孔内，100C加热10分钟。 4）裂解完成后将离心管取出，然后10000rpm离心5分钟，取上清液 20 ^1加样上机。 5）收拾台面至准备状态。 4.2 CT、UU NGH DNA（分泌物）

1）双手戴上手套，从冰箱取出标本，将化验单和离心管依次编号。 2）双手换上新手套，取出1.5ml灭菌离心管，对应标本编号，置于 离心管架上 3）向有棉拭子的离心管中加入2ml 无菌生理盐水，振荡混匀，将混悬液用移液器吸取1.0ml 加入到已编号的离心管中。10000rpm 离心5分钟，弃上清液，留取沉淀加50微升DNA提取液混匀，金属浴100C 加热10 分钟。4）裂解完成后取出离心管，然后lOOOOrpm离心5分钟，取上清液2 口1 加样上机。 5）收拾台面至准备状态。 4.3结核杆菌（DNA痰液、胸腹水等） 1）双手戴上手套，从冰箱取出标本，将化验单和离心管依次编号。 2）双手换上新手套，取出1.5ml 灭菌离心管，对应标本编号，置于离心管架上。 3）用移液器吸取4倍体积4%NaO到痰液容器，液化30分钟，用移液器调吸取1ml加入到已编号的离心管中，然后lOOOOrpm离心5分钟，弃上清，留取沉淀，用无菌生理盐水洗涤两次，沉淀加50ulDNA 提取液，充分震荡混匀。胸腹水、脑脊液直接混匀后，用移液器调吸 取1ml加入到已编号的离心管中，然后lOOOOrpm离心5分钟，弃上清，留取沉淀，加5OulDNA提取液，充分震荡混匀。然后将离心管插到金属浴孔内，1OO C加热1O分钟。 4）裂解完成后将离心管取出，然后lOOOOrpm离心5分钟，取上清液 2 口1加样上机。

微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项 正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。据相关统计：微生物标本的检测误差来源：80%来源于分析前20%来源于分析中和分析后其它检验样本的检测误差来源：45%分析前10%分析中（仪器））45%分析后.检验标本采集质量控制的重要性,分析前的误差来源所占比例的这个数据是惊人的，在我们的大型医院都存在这个问题，而在我们医院应该不会低于这个数据。 可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。为此应正确采集各种细菌学标本。 一、血液标本的采集 1、采集方法 （1）75%酒精清洁局部皮肤。 （2）待皮肤干后，再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm （直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。 （3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5-10ml，婴幼儿1-5ml。 （4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。 2、注意事项 （1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38.5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。 （2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，应在抗菌药物浓度最低时采集也即在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。 （3）培养基与血液之比以10:1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质；有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。 （4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。 （5）每例至少采血两次，间隔0.5-1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。 （6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。 （7）采血后立即送检，如不能立即送检可置室温，而不能放置冰箱。 （8）如临床表现很似败血症，而血培养多次阴性者，提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。 二、呼吸道 1、痰标本 （1）采集方法 ①清晨起床后用凉开水漱口多次，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出肺深部的脓痰，置于清洁干燥容器中或无菌管中送检。 ②痰量极少者可用45℃ 3%-10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。

实验室标本处理的流程

一.实验室接受标本 (1）时间 实验室接受标本后应予以准备离心。标本凝集时间要充分；加促凝剂的标本可于血液采集后5min～１5miｎ尽早处理;加抗凝剂的血液标本可以立即离心。 (2）温度冷却(2℃~８℃)标本应保持在这个温度直到准备离心。条件许可时推荐采用温度控制离心机。 （3）试管位置实验室接受标本后,仍应保持标本管垂直，管口(管塞)向上放置。 (4)试管封口采血管应一直有试管塞塞紧管口。试管塞移去后，由于血液中二氧化碳丢失,会造成ｐH（增加)、离子钙(减少）、酸性磷酸酶（减少)等变化,尤其pH的增高会影响某些试验结果的准确性;试管的封口还可以减少标本之间的交叉污染及标本的蒸发,防止标本喷溅和逸出。 （5)标本拒收规定有下列情况的标本不接受。 ①标本信息不明 ②血量不足 ③使用不正确的标本试管 血标本采集试管选择错误会直接影响试验结果的准确性，应该根据不同的试验目的选择不同种类(无添加剂或加不同添加剂）的血标本采集试管。 ④溶血静脉穿刺不顺利或标本收集后处理不当可造成人为的标本溶血；溶血性疾病等可造成病理性溶血。前者所致的体外“中度溶血”时,将导致某些试验结果不准确。 ⑤抗凝不当,标本凝固 标本接收时,血常规．血沉.凝血标本等应注意标本是否凝固。 ⑥储存温度不当例如：应冷藏运送到实验室的标本未予冷藏;应冰冻运输的血清或血浆,未予冰冻；应常温及时送检的标本未能及时送检。 ⑦标本采集时间不准确 空腹标本.皮质醇或ACＴH应注意采集时间,采集时间不准确对检验结果有严重影响。 ⑧样本外漏,容器破损 由于现在一般都采用真空采血管,上述情况很少发生，但仍应注意,避免标本间的污染。二．标本接收记录 实验室工作人员接收标本时,应认真核对试管上的检验条形码（核对标本来源及其类型、检验目的等）,对有关情况应做认真记录。 三．离心标本准备 直到离心后、取出血清或血浆样品前标本管应一直保持封闭。离心时间和相对离心力（RCF)：离心时间为5miｎ～10min，RCＦ（以g来表示）为1000~120０×g。 四．温度控制离心 离心时产热影响分析物的稳定性，一般条件下应使用温度控制离心机。 五．标本离心要及时 从标本收集时间算起,应在２h内分离血清／血浆,尽可能缩短从标本采集到分离血清/血浆的时间。 六.分离的血清或血浆贮存 为保证分析物的稳定性和试验结果的准确性,必须有标本的确切的处理和贮存条件。实验室的室温及血清/血浆的贮存温度，是分析物稳定性的重要参数。 （一)已分离的血清/血浆,在２2℃保存不超过8h;如果试验在8h内不能完成,血清/血浆应转入冰箱(2℃～8℃）保存，所有标本应都在48小时能完成。 (二)带分离胶的试管，离心后血清或血浆可以在凝胶屏障上停留一定时间;而应用非凝胶分离

手术室标本管理制度及送检流程

手术室标本管理制度 1、凡在手术室内实施手术时取下的组织、器官或与患者疾病有关的物体、异物等均视为手术标本。 2、无病理价值和保留价值的组织、器官、肢体等均应让家属看后并做好手术标本的登记，然后将其用标本固定液固定，派专人送到殡仪馆烧毁。对无病理检查价值的体内异物、内固定物等，让患者家属看后做好登记并按医疗废弃物处理。 3、洗手护士负责妥善保管术中切下的标本，术后与手术医生核对无误后，由手术医生用标本固定液固定，放入标本存放柜内并做好登记。特殊感染标本应有标记，标识醒目。 4、每日下午由手术室护士将标本登记，病理检查单及标本袋上标签逐一核对无误后由手术室标本送检人员送往病理科，与病理科医生进行核对并签字。 5、手术过程中需要做细菌培养、涂片者应事先开好化验单并记账，标本取下后应立即送检。 6、手术标本需放入带锁的存放柜内，家属看标本时不可带出手术室，严禁有实习生、进修生或其他人代为固定、存放、代送标本，

防止标本遗失。 7、切下的手术标本必须及时用标本固定液固定。固定液不少于标本的5－10倍，必须将标本全部浸泡在液面以下并封口，防止标本风干和腐败现象发生。特大标本应剖开浸泡。

冰冻切片管理制度 1、术中需做冰冻切片及细菌培养的标本，应立即干燥送检。严禁在标本袋内加入福尔马林等液体，如天气炎热，应用塑料袋装好冰块后放在冰冻切片标本周围，防止标本腐败。巡回护士和手术医生、洗手护士三方核对确认后方可送检。 2、巡回护士将标本放入标本袋内，袋外贴上标签，注明病人科室、姓名、性别、年龄、床号、住院号、标本名称、标本数量等，巡回护士携带标本告知家属后，及时交给手术室标本送检人员，双方核查签字后，由送检人员立即（15分钟内）将标本送病理科或细菌培养室，并与病理科医生查对签收。 3、如果是特殊感染病人的冰冻标本，应在标本袋外注明感染标示。 4、病理科应在30分钟内报告结果，手术室原则上不接受病理科电话报告冰冻结果，应以书面反馈或电话传真报告结果。 5、接收报告人员收到报告结果后，及时送往手术间，和巡回护士查对，巡回护士及时将结果告知手术医生。并将纸质结果保存于病历中。

临床微生物室标准操作程序

遂昌县中医院 临床微生物室 标准操作程序 SOP

临床微生物室标准操作程序（SOP）目录 1.标本采集与送检原则标准操作程序----------------------WSW-SOP-1 2.血液及骨髓标本的采集标准操作程序——————————WSW-SOP-2 3.呼吸道标本留取标准操作程序—————————————WSW-SOP-3 4.尿液标本留取标准操作程序——————————————WSW-SOP-4 5.脓及创伤感染标本留取标准操作程序——————————WSW-SOP-5 6.生殖道分泌物标本采集标准操作程序——————————WSW-SOP-6 7.粪便标本采集标准操作程序——————————————WSW-SOP-7 8.穿刺液标本留取标准操作程序--------------------------WSW-SOP-8 9.脑脊液、胆汁标本采集标准操作程序——————————WSW-SOP-9 10.组织标本的采集标准操作程序—————————————WSW-SOP-10 11.静脉道管标本采集标准操作程序————————————WSW-SOP-11 12.眼、耳及乳突分泌物标本采集标准操作程序———————WSW-SOP-12 13.样本接收、核对、接种、培养标准操作程序———————WSW-SOP-13 14.菌株的纯化、鉴定、药敏流程标准操作程序———————WSW-SOP-14 15.普通MicroScan板接种培养流程标准操作程序——————WSW-SOP-15 16.判读普通革兰阳性板标准操作程序----------------------WSW-SOP-16 17.判读普通革兰阴性板标准操作程序----------------------WSW-SOP-17 18.普通Microscan 板报告标准操作程序--------------------WSW-SOP-18 19.常见标本培养结果解释标准操作程序--------------------WSW-SOP-19 20.KB法药敏试验标准操作程序----------------------------WSW-SOP-20 21.超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测标准操作程序——————WSW-SOP-21 22.β-内酰胺酶检测标准操作程序-------------------------WSW-SOP-22 23.革兰染色标准操作程序————————————————WSW-SOP-23 24.抗酸染色标准操作程序————————————————WSW-SOP-24 25.解脲/人型支原体培养标准操作程序---------------------WSW-S O P-25 26.AccuStep衣原体抗原检测标准操作程序------------------WSW-SOP-26 27.ATB FUNGUS2真菌药敏标准操作程序--------------------WSW-SOP-27 28.培养基的制备标准操作程序-----------------------------WSW-SOP-28 29.触酶试验标准操作程序---------------------------------WSW-SOP-29 30.氧化酶试验标准操作程序-------------------------------WSW-SOP-30 31.芽管试验标准操作程序---------------------------------WSW-SOP-31 32.临床微生物实验室安全标准操作程序---------------------WSW-SOP-32

标本溢洒应急处理

标本溢洒应急处理公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

1、目的 检验标本溢洒时，应根据标本状态及时进行处理，以免造成实验室污染及工作人员职业暴露感染，根据检验标本的特点，特制定以下程序，发生标本溢洒时应严格按照以下流程进行处理。 2、适用范围 标本发生溢洒时的处理，及工作人员的防护。 3、具体内容 3.1标本溢洒时，首先要根据标本溢洒的位置判断是否会立即造成工作人员职业暴露，如果溢洒发生在实验台面等未直接接触医务人员身体的地方，应先设置标本溢洒标识，防止其他工作人员接触标本 3.2容器破碎及感染性物质的溢出 3.2.1实验室台面、桌面消毒，立即用清洁布覆盖受污染的物品或区域，然后在上面倒上1000mg/L有效氯消毒液，覆盖45分钟后擦拭污染区域，用于清理的清洁布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内，所有操作过程都应戴手套。 3.2.2实验室内使用材料、试验仪器内外表面感染性物质的溢出的消毒，为使有机材料损害程度降到最低，一般选择小型喷雾器喷雾消毒。 3.2.3地面消毒，采用局部暴露性消毒法：首先将局部暴露部位用1000mg/L有效氯消毒液消毒，然后用吸水性好的多层纱布或纸巾覆盖暴露表面，覆盖面积要超过25%，覆盖45分钟后，小心地将污染区上覆盖所有污染物品一起放入到事先准备好的耐高压污染物袋中。 3.2.4衣物的消毒，立即脱下被污染的衣物，放于500mg/L有效氯消毒液中浸泡30min，做好个人防护。 3.3潜在感染性物质的离心管发生破裂 3.3.1如果机器正在运行时发生破裂或怀疑发生破裂，应关闭机器电源，让机器密闭（如30min）使气溶胶沉积。如果机器停止后发现破裂，应立即将盖子盖上，并密闭（例如30min）。

检验科微生物室室内质量控制流程

检验科微生物室室内质量控制流程 一、实验室仪器设备的性能维护 微生物室常用仪器设备主要包括：细菌培养箱、细菌鉴定及药敏测试仪、显微镜、高压灭菌器、冰箱、水浴箱等。这些仪器设备的质量维护对于检验结果的质量保证至关重要。性能维护方法及维护频率参照制造商提供的使用手册进行。如使用手册中未详细注明或实验室自身无法完成，由生产厂家协助解决，每年至少一次。 二、培养基的质量控制 要求对培养基进行两方面的质量控制：无菌试验以及已知菌生长试验。无菌试验一般为随机抽样3-5%，在35℃条件下培养48h，每批培养基至少进行一次无菌试验；已知菌生长试验的前提条件是实验室有足够的已知菌储备，其中包括标准菌株(如ATCC或NCTC标准菌株)及经过准确鉴定的临床分离菌。如果条件允许，提倡使用标准菌株。已知菌生长试验应明确预期结果。每批培养基至少进行一次已知菌生长试验。三、细菌染色的质量控制 在临床细菌学检查过程中，革兰染色和抗酸染色使用频率最高。 1．革兰染色IQC要求：利用标准菌株(金黄色葡萄球菌ATCC25923及大肠埃希菌ATCC25922)或其他已知的革兰阳性菌及革兰阴性菌至少每周进行一次质量验证。 2．抗酸染色：利用已知的抗酸杆菌(AFB)阳性涂片每周或在更新炭酸复红染液时至少进行一次质量验证。 四、细菌鉴定或鉴别常用试验的质量控制 细菌鉴定或鉴别试验的IQC就是利用已知菌或标准菌株(如ATCC或NCTC标准菌株)进行鉴定或鉴别试验相关影响因素的质量监控。应用频率较高的试验IQC每周至少一次，频率较低的试验IQC随标本一同进行。五、微生物药物敏感试验的质量控制 临床常用抗微生物药物敏感试验包括一般β-内酰胺酶测试、超广谱β-内酰胺酶(ELBLs)测试、纸片扩散法药敏试验以及定量药敏试验(即MICs测定法)。 1．一般β-内酰胺酶测试的质量控制：至少每周一次。质控菌株可使用临床分离的已知菌株，但最好使用标准菌株，如淋病奈瑟菌ATCC31426(β-内酰胺酶阳性绿脓杆菌ATCC27853)和淋病奈瑟菌ATCC43069(β-内酰胺酶阴性或金黄色葡萄球菌ATCC25923)。 2．ESBLs测试的质量控制：美国临床实验室标准化协会(CLSI：原NCCLS)目前仅提供了肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌ESBLs的测试标准。其测试标准参照最新的CLSI文件。质量控制随临床测试菌株一同进行。 3．纸片扩散法及MIC测定法药敏试验的质量控制：质控试验条件、质控菌株选择及质控允许范围参照最新的CLSI规定。频率为每周至少一次。 4．某些耐药菌检测的质量控制：一些耐药菌株如高水平氨基糖苷类耐药的肠球菌、苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌以及万古霉素耐药的肠球菌等的IQC具体方法、质

临床微生物标本和医院环境卫生学监测标本采集培训试题

临床微生物标本和医院环境卫生学监测标本采集培训试题一填空（15分，每空格1分） 1、采集血培养要从不同的部位获得＿＿套血培养，一套血培养包括一个＿＿＿＿ ＿和＿＿＿＿＿，“双侧双套”是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 2、从静脉取血不宜从静脉导管或静脉留置口取血，除非怀疑＿＿＿＿＿；若从导 管取血，必需同时从＿＿取血。 3、尿液标本尽量采集晨起第一次尿，且应在膀胱内停留＿＿小时以上，所以夜间 最好＿饮水。尿液培养标本宜立即送检，＿小时内接种。 4、抽血培养时的皮肤消毒程序：首先＿＿＿＿擦拭静脉穿刺部位30秒，再用＿＿ 30秒或＿＿60秒；最后用＿＿脱碘并待干。 5、婴幼儿采血量不能超过全血量的（）不能少于（）ML. 6、空气细菌培养（自然沉降法） （1）、采样时间:选择后与进行之前采样。 (2)、采样高度:与地面垂直高度米（洁净手术室等除外）。 (3)、布点方法（洁净手术室除外） （3、1）、室内面积，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点。 （3、2）、室内面积，设两条对角线，于东、西、南、北、中取五点，其中东、西、南、北距墙均1米。 （4）、采样方法及培养时间:用直径普通琼脂平皿放置各采样点，打开后盖面朝＿＿斜扣到底盘，在采样点准确暴露规定时间后盖上平皿盖，及时送检。 （5）、要求标准: （5、1）门诊手术室、美容科手术室、宫腔镜室、介入科、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数。 （5、2）儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、注射室、治疗室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析室、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，空气中的细菌菌落总数。 7、物体表面细菌培养 （7、1）、采样时间：在后或有关时进行采样。

病原微生物标本采集、运送

病原微生物检验标本采集、运送操作规程正确的标本采集，运送，保存和处理对于微生物检验工作质量至关重要，为了准确检出病原菌，避免漏检与误诊，临床医护人员和实验室工作人员应掌握微生物标本的选择，采集，运送，保存及处理的一般原则。 一、标本采集的一般原则 1.早期采集 采集时间最好在病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药物之前采集，确保病原菌的检出。 2.无菌操作 采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近或皮肤黏膜正常菌群的污染，使病原菌与正常菌群混淆，造成临床误诊。采集的标本应存放在无菌容器内，容器不能使用消毒剂处理，标本中也不能添加防腐剂，以免降低病原菌的检出。3.适量的标本 标本量过少可能导致假阴性结果。 4.适当的采集方法 对于厌氧菌，需氧菌或兼性厌氧菌的采集方法是不同的，用于厌氧菌培养的标本应尽量用注射器采集抽取物，室温保存，不能冷藏和冷冻。 5.盛放标本的容器 采集标本应存放在无菌，防漏，应带有螺旋盖的容器内。 二、标本的运送 1.标本采集后立即送检，若有延迟也应在2小时内送到实验室，否则会影响病原菌的检出，一般性的细菌培养标本若需延迟送检时，应置于4度冰箱保存，且不能超过24小时。 2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量，少量液体（小于1ml）或组织（小于1cm3）应在15~30分钟内送到实验室，较多量的标本置于运送培养基中可放12~24小时，厌氧培养标本原则上是床边接种，如延迟送检，需保存在厌氧运送培养基中，室温保存，不得超过24小时。 三、不同标本的采集，运送 （一）血液标本采集，运送

1.血培养指针征 当患者出现：发热（大于38度）或低温（小于36度），寒战，白细胞增多,皮肤黏膜出血，休克，多器官衰竭，血压降低，c反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，具备上述一种或几种体征时，临床怀疑菌血症应采集血液标本进行血培养，对入院危重感染患者应在未使用抗菌药物治疗前，及时做血培养。 2.对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。成年患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本），采血量每瓶不少于5ml;婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本,采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）.在采取血培养后的2—5天内，无需重复采取血培养。两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。 3.血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 检出率与采血量成比例增长，每增加1ml的血液，病原菌的检出率就会相应增加。儿童患者血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。采用一对（需氧瓶+厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。采血量不能满足推荐的量时，应首先满足需氧瓶的需要。 推荐从外周静脉采集血液标本,不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读。 4.血标本采集的注意事项 在采血之前，血培养瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并等待足够的消毒时间。严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套.不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头;采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室,血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。 (二)痰培养标本采集，运送 1.痰培养指征 上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，会咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子标本

微生物检验标准操作规程

1 目的 建立微生物限度检查的操作规程，为微生物检查人员提供正确的标准操作方法。 2 范围 适用于原辅材料、内包装材料、半成品、成品的微生物限度检查。 3 责任 QA对本规程的有效执行承担监督检查责任，QC对本规程的实施负责。 4 程序 4.1 简述: 微生物限度检查法系指检查非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物 污染程度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。螨，属于节肢动物门，蛛形纲，蜱螨目。种类繁多，分布甚广。其生活习性各异，分为自由生活和寄生生活两种类型。在土壤、池沼、江河和湖海里，动、植物体上，贮藏食品和药品中，都可能有它们的存在。药品可因其原料、生产过程或包装、运输、贮存、销售等条件不良，受到螨的污染。螨可蛀蚀损坏药品，使药品变质失效，并可直接危害人体健康或传播疾病。能引起皮炎及消化系统、泌尿系统、呼吸系统等的疾病。因此，药品特别是中成药，必须进行活螨检查。 4.2 器皿、仪器及用具。 4.2.1 玻璃器皿： 250ml锥形瓶、250ml具塞三角烧瓶、研钵（陶瓷制，直径10-12cm）、培养皿（90mm）、量筒（100ml）、试管（18×180mm）及塞、吸管（1ml分度0.01,10ml 分度0.1）、注射器(20或30ml)、注射针头、载玻片、盖玻片、 玻璃消毒缸（带盖）。 4.2.2 用具：大、小橡皮乳头（放于干净带盖的容器中，并应定期用70%-75%乙 醇溶液浸泡）,无菌衣、帽、口罩、手套灭菌，备用, 显微镜、放大镜（5-10倍）、实体显微镜、解剖针（尖端宜尖细且粗糙，否则不易挑取体表光滑的螨体）、发丝针（由一根长约10cm的小金属棒，将其一端磨成细尖，另取长约1.5cm的头发一根，以其长度的一半紧贴在金属棒的尖端上，用细线将其缠紧，然后粘上加拿大树胶或油漆，即得。适用于挑取行走缓慢且体表刚毛较多的螨体）、小毛笔（即绘图毛笔。适用于挑取活动快的螨类，笔锋宜尖细，以免螨体夹在笔毛之间）、载玻片、盖玻片、酒精灯、培养皿或小搪瓷盘（内衬黑色纸片）、扁形称量瓶（高3cm、宽6cm）。 4.2.3 仪器：匀浆仪、培养箱、鼓风干燥箱、台式灭菌器、恒温水浴锅、超净工