DNA的复制
〖学习目标〗
1.概述DNA分子的复制。
2.探讨DNA复制的生物学意义。
〖学习重点〗DNA分子复制的条件、过程和特点。
〖学习难点〗DNA分子复制的过程。
【自主学习】
一、对DNA分子复制的推测:
沃森和克里克关于DNA复制的假说:DNA分子复制时,DNA分子的双螺旋将解开,互补的碱基之间的氢键断裂,解开的两条单链作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。由于新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,因此,这种复制方式被称做半保留复制。
二、DNA半保留复制的实验证据(选学):
1、1958年,梅赛尔和斯特尔(Meselson-stahl)以大肠杆菌为实验材料,运用同位素标记法,证实了DNA是以半保留方式复制的。
2、如何区分亲代与子代的DNA?
根据离心后试管中DNA的位置区分
3、实验过程:
Cl的培养液中培养大肠杆菌,让大肠杆菌繁殖若干代,提取DNA离心,①在含有15NH
4
得到 15N/15N-DNA 。
②将含有15N/15N-DNA的大肠杆菌转移到14N的普通培养液中。
③在不同时刻收集大肠杆菌,提取 DNA ,再进行离心,并记录结果。
4、预期:
①半保留复制的结果:
实验中应该出现三条DNA带:一条带是15N-15N DNA,密度最大,靠近试管底部;一条带是15N-14N DNA,其位置居中;还有一条带是14N-14N DNA,居最上。
②全保留复制的结果:
实验中应该出现二条DNA带:一条带是14N-14N DNA,居上;另一条带是15N-15N DNA,居下。
5、结论:DNA的复制是以半保留的方式进行的。
三、DNA分子复制的过程:
1、概念:DNA的复制是指以亲代DNA 为模板合成子代DNA 的过程。
2、复制条件:
①模板:以解开的每一段母链为模版;
②原料:游离的4种脱氧核苷酸;
③能量: ATP 等
注:解旋时能量来自ATP的水解,形成磷酸二酯键时能量来自脱氧核苷三磷酸(dNTP)中高能磷酸键的水解。
④酶:解旋酶催化碱基之间 H 键断裂; DNA聚合酶催化脱氧核苷酸之间磷酸二酯键的形成。
3、复制过程:
①解旋:在解旋酶的作用下,消耗能量,把两条螺旋的双链解开。
②合成子链:
以解开的每一段母链为模板,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一段子链。
③复旋:每条子链与其对应的母链盘绕形成双螺旋结构。
④复制结果:形成两个完全相同的DNA分子。
【合作探究】
1、DNA复制有怎样的特点?
①半保留复制:子代DNA分子中,都保留了亲代DNA分子中的一条连。
②边解旋边复制:一般为多起点的双向复制,因此加快了复制速度,减少了DNA突变的可能性。
2、DNA分子为什么能够精确复制?
①DNA分子独特的双螺旋结构,为复制提供了精确的模板。
②通过碱基互补配对,保证了复制能够准确地进行。
3、DNA复制有怎样的意义?
DNA分子通过复制,使遗传信息从亲代传给了子代,保持了遗传信息的连续性。
〖课堂检测〗
1、一个双链DNA分子为第一代,经过3次自我复制,在第四代DNA分子中,有几条第一代脱氧核苷酸的长链()
A、2
B、4
C、8
D、16
2、将大肠杆菌置于含15N的培养基中培养一段时间,然后把DNA被15N完全标记的大肠杆菌作为亲代,转移到只含14N的普通培养基培养,使其繁殖两代形成4个新个体,则它们的DNA中含14N的链与15N的链的比是()
A.3:1 B.2:1 C.1:1 D.7:l
3、DNA的复制不可能发生在()
A、细胞核中
B、叶绿体中
C、线粒体中
D、核糖体中
4、具有100个碱基对的一个DNA分子片段,内含40个胸腺嘧啶,如果连续复制2次,需游离的胞嘧啶脱氧核苷酸()
A、60个
B、80个
C、120个
D、180个
5、如果将细胞中的一个DNA分子用15N进行标记,然后放在含14N的培养基中连续分裂4次,则最后含有标记的细胞占细胞总数的()
A. 1/32
B. 1/16
C. 1/8
D. 1/4
6、某DNA分子有2000个脱氧核苷酸,已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4,若该分子复制一次,则需腺嘌呤脱氧核苷酸的数量是()
A.200 B.300 C.400 D.800
7、某DNA分子中共有a个碱基,其中含胞嘧啶m个,则DNA复制3次,需要游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸数为()
A.7(a—m) B.8(a—m) C.7(1/2a—m) D.8(2n—m)
8、用15N标记的DNA分子,放入14N培养基中进行复制,当测得含有15N的DNA分子占12.5%时,该DNA分子已复制的次数是 ( )
A.1 B.2 C.3 D.4
9、某DNA分子中含有1000个碱基对(P元素只是32P)若将该DNA分子放在只含31P的脱氧核苷酸的培养液中,让其复制两次,则子代DNA分子的相对分子质量平均比原DNA 分子()
A.减少1500 B.增加1500 C.减少1000 D.增加1000
10、实验室内现有如下材料:从某生物体细胞内提取的一个DNA分子,具有放射性同位素3H标记的4种脱氧核苷酸。要在实验室内合成新的DNA分子:
(1)除以上物质外,还必须有能量和酶,才能合成第二代的DNA分子。
(2)在第二代的DNA分子中,有 2 条含3H的链。
(3)在第二代的DNA分子中,含有3H链的碱基序列不同(相同或不同)。
(4)在第五代的DNA分子中,有 2 条不含3H的链。
11、将大肠杆菌放在含有同位素15N培养基中培育若干代后,细菌DNA所有氮均为15N,它比14N分子密度大。然后将DNA被15N标记的大肠杆菌再移到14N培养基中培养,每隔4小时(相当于分裂繁殖一代的时间)取样一次,测定其不同世代细菌DNA的密度。实验结果:DNA复制的密度梯度离心试验如下图所示。
(1)中带含有的氮元素是15N、14N 。
(2)如果测定第四代DNA分子的密度,15N标记的DNA比例为 1/8 。
(3)如果将第一代(全中)DNA链的氢键断裂后再测定密度,它的两条DNA单链在试管中的分布位置应为处于轻带和重带的位置。
(4)上述实验表明,子代DNA合成的方式是半保留。
12、已知某一DNA分子用15N标记(0代)将含有该标记DNA分子的细胞(或细菌)转移到只含14N的培养基中培养(进行DNA复制)若干代后,其DNA分子数、脱氧核苷酸链数及相关比例为,如下表: