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实验动物麻醉药物使用指南

实验动物麻醉药物使用指南
实验动物麻醉药物使用指南

实验动物麻醉药物使用指南

第一部分不同类型麻醉药物的一般特性

一、镇静剂和安定剂

镇静剂使用前动物的生理状态能显著影响镇静的程度。给药前攻击性强的、不听话的、极其兴奋的动物会比较难处理,除非给予高剂量的呼吸抑制药物。

1.吩噻嗪类Phenothiazines

?常用制剂:乙酰丙嗪acepromazine,氯丙嗪chlorpromazine,丙嗪

promazine

?理想疗效

●增强麻醉剂、安眠药和麻醉性镇痛药的效果(包括减少药物

剂量,延长作用时间和顺利地从麻醉中恢复)

●止吐作用

●促进骨骼肌松弛

●引起兔耳静脉血管扩张

?不良反应

●中度低血压

●导致低体温症

?潜在的、与研究相关的并发症

●基底神经节多巴胺阻塞

●降低自发肌动活动

●阻塞儿茶酚胺的外周作用

●下丘脑儿茶酚胺耗尽引起的低体温症

●高剂量阻碍FSH和LH的释放

●提高鼠、绵羊和山羊的催乳素水平

●发生肾上腺素通过肾上腺髓质释放引起的高血糖

●应用于猫,小剂量可减小肾上腺素导致的血管加压作用,大

剂量可翻转血管加压作用

●减少动物的血细胞比容

●拮抗阿朴吗啡诱发的犬呕吐

●可能引起犬心律不齐

●高剂量的氯丙嗪使猫产生颤动和僵硬

●可能导致胎鼠产生唇裂和腭裂

●长时间使用可产生眼部病变

2.苯二氮平类药物Benzodiazepines

?常用制剂:地西泮diazepam,咪达唑仑midazolam

?理想疗效

●镇静作用因物种而异(作用最小的是犬,最大的是兔子和鼠)

●增强大部分麻醉药和麻醉镇痛药的药效

●良好的松弛骨骼肌作用

?不良反应

●正常剂量下无不良反应

●管制药物

?潜在的、与研究相关的并发症

●主要通过作用脑干网状结构抑制中枢神经系统

●阻断脊髓多突触反射作用

●减少大鼠脑和纹状体边缘区多巴胺的合成

●增强GABA介导的中枢神经系统抑制

●在犬静脉注射后产生瞬时的动脉降血压作用

●人的腭裂的发生与怀孕期间母体摄入该药物有关

?其他

●应通过静脉注射地西泮,肌肉注射和皮下注射会引起全身不

均一的吸收。地西泮在溶液中不与其他药物相溶,因此不应与其他

药物在同一注射器内混合(除氯胺酮)

●咪达唑仑可以通过肌肉注射或皮下注射途径给药,也可与某

些其他药物联合使用

3.α-2-肾上腺素受体激动剂

?常用制剂:美托咪定xylazine,甲苯噻嗪medetomidine,地托咪定

detomidine

?理想疗效

●中枢神经系统抑制剂,镇痛肌肉松弛剂,非麻醉镇静剂

●对大多数麻醉剂有增强作用

?不良反应

●当作为主要麻醉剂时,动物会出现疼痛反应

●可产生高血糖和多尿症

●心血管系统的影响多样,常见低血压现象

●反刍动物需要的剂量是食肉动物的十分之一

●引起缓慢性心律失常和心输出量减少

?潜在的、与研究有关的并发症

●由于直接刺激中枢神经系统的催吐中心,引起犬诱导性呕吐

●抑制心肌收缩力,减少心输出量

●增加心脏对肾上腺素的敏感性,导致室性心律失常,包括纤

维性颤动

●犬静脉注射后,动脉血压一过性升高,动脉血pH值,氧分

压,二氧化碳分压不改变

●对未经治疗的猪没有影响

●犬的吞气症引发的气胀恶化

●可能导致流产

?其他

●甲苯噻嗪(Xylazine)是一种强效的镇静药和中枢神经系统

的抑制剂。它被用在与其他药物的组合产生麻醉作用。它的肌肉松

弛和镇痛作用都非常好。但会导致很强的心血管抑制。美托咪定

(Medetomidine)和地托咪定(detomidine)是新开发的、更特效的

α-2受体激动剂,导致比甲苯噻嗪作用时间更长、镇静和镇痛作用更

强大,并减少对心血管的副作用。

二、注射用麻醉剂

1.氯胺酮(Ketamine),最常见注射用麻醉剂之一,可以产生一种分离麻醉

状态,其特征是僵直状、浅镇静、遗忘与显著镇痛,并能进入梦境、出现幻觉。麻醉深度与剂量有关。可选择性抑制丘脑内侧核,阻滞脊髓网状结构束的上行传导,兴奋边缘系统。注射后迅速在肝脏中经肝P-450微粒系统代谢为去甲氯胺酮(脱甲基氯胺酮)。主要的代谢物通过尿液和胆汁排出体外。

?理想疗效

●对大多数哺乳动物物种的安全、有效

●无严重的呼吸系统或心血管系统的抑制或肝,肾功能的变化

●与α-2-肾上腺素能激动剂(甲苯噻嗪)联合使用,增加镇静

和镇痛作用

●许多反射保持不变:角膜瞬目反射,喉,咽反射

?不良反应

●不适合单独作为手术麻醉药物,必须与其它麻醉剂联合使用

●唾液分泌物增加,可能会阻塞呼吸道,使用阿托品预防

●伴随刺激产生自发的运动

●动物保持睁眼,可能会导致角膜干燥,使用温和的眼用软膏

预防

●副作用可能包括恢复过程中的抽搐、眩晕和兴奋

●与苯二氮平类药物(地西泮)联用可缓解肌肉僵硬症状

?潜在的、与科研相关的并发症

●可选择性抑制丘脑内侧核、兴奋边缘系统

●中枢神经系统中GABA结合的强效抑制剂

●阻断单胺类神经递质的传导过程,如5 - 羟色胺,多巴胺和

去甲肾上腺素

●发挥选择性的激活心肌作用

●增加心输出量,平均主动脉压,肺动脉压,中心静脉压,心

●增加心肌耗氧量

●咽和喉反射维持不变,导致喉痉挛的发病率增加,由咽或喉

部的分泌物引发的支气管痉挛和咳嗽

●增加犬脑血流量的80%

●对甲苯噻嗪的影响,当与氯酮氨联合使用时,甲苯噻嗪是育

亨宾的拮抗剂,α-2-肾上腺素受体阻断剂

2.替来他明(乙胺噻吩环己酮)/唑拉西泮(Tiletamine/zolazepam),替来他明是一种注射用麻醉剂,化学结构与氯胺酮相近。唑拉西泮是一个二氮杂酮类的轻微镇静剂。

?理想疗效

●安全,有效的麻醉时间长达25分钟

●适用于小手术,但不适用腹部手术

●咽喉反射保持正常

●提供轻度至中度的镇痛

?不良反应

●产生似强直性昏厥的麻醉效果;颅神经和脊髓反射良好并可

能引起一些运动,该运动与麻醉深度无关

●动物保持睁眼,瞳孔放大;必须使用温和的眼药膏,以防止

角膜干燥

●建议采用有疼痛反应的刺激监测动物的麻醉深度

●角膜和踏板反射保持不变,该指标不能代表麻醉深度

●产生大量唾液,可通过阿托品预处理来控制

●注射可产生疼痛

?潜在的、与科研相关的并发症

●使犬产生持续性心动过速,心博量下降,伴随净心输出量微

小变化

●增加收缩压和舒张压

●呼吸频率倍增,潮气量降低到一半以下,动脉氧分压水平下

●穿过胎盘屏障,抑制新生儿呼吸

3.巴比妥类(Barbiturates)不同于其他镇静剂和麻醉剂,在达到麻醉状态前,它的剂量与抑制的深度正相关。但使用中间剂量的巴比妥类药物可能诱导兴奋。巴比妥类药物的主要用途是诱导和保持全身麻醉。根据巴比妥类静脉注射后麻醉时间的不同分为四组药物:

(1)超短效:美索比妥(methohexital)(作用时间5-15分钟)

(2)短效:硫戊巴比妥钠(thiamylal sodium),硫喷妥钠(thiopental

sodium)(作用时间10-45分钟)

(3)中效:戊巴比妥钠(pentobarbital sodium)(作用时间1-3小时)

(4)长效作用:苯巴比妥(phenobarbital), 仲丁硫巴比妥(inactin)(作

用时间8-24小时)

?理想疗效

●对大多数物种的静脉注射产生平稳快速的作用效果

●通常给予1/3-1/2 静脉注射剂量即达到有效的血药浓度,然

后再静注到手术需要的水平

?不良反应

●手术麻醉所需剂量与导致呼吸衰竭所需剂量相近

●心血管系统和呼吸系统抑制较为常见

●啮齿动物腹腔内快速注射存在种内差异

●镇痛作用差

●血管周围注射可能会引起局部组织坏死(保持在2%以下)

●戊巴比妥恢复时间延长,重复注射麻醉时间缩短,静脉注射

后出现呼吸暂停是常见的现象

●与葡萄糖,肾上腺素和氯霉素共同用药可能会延长恢复时间

●管制药物

?潜在的、与科研相关的并发症

●降低脑耗氧量高达55%

●降低多突触连接对乙酰胆碱的去极化作用的敏感性

●提高脊髓反射的阈值

●戊巴比妥对犬的血液动力学效应:平均动脉压先下降,然后

恢复到控制水平,最终略有下降,动脉收缩压显著降低,心输出量

开始上升,然后逐渐下降,总外周阻力最初下降,然后上升到高于

控制值,每搏输出量显著下降,心肌收缩力显著下降。

●心室纤维性颤动发生率增加

●动脉内注射引起动脉壁痉挛,可能会导致坏疽。

●在大鼠中,如果在正常的促性腺激素的释放之前注射戊巴比

妥,阻止LH和FSH的释放

●外周血管舒张加重低体温症

●反复使用产生由肝微粒体酶的代谢率增加引起的耐药。

4.丙泊酚(Propofol)是酚衍生物,可作为单一麻醉剂进行短效操作或作为诱导剂在全身麻醉前使用。它是一种油基的乳剂,必须由静脉给药。它药效迅速,但持续时间短。必须每3?5分钟一次静推注射或持续性滴注以维持麻醉。即使是长时间麻醉,复苏时间也很短。丙泊酚不作为单一麻醉剂应用在大型侵入性外科手术中,因其镇痛作用不够。它可与其他药物联合使用,如地西泮,产生更持久的麻醉效果和平缓的麻醉后恢复过程。在与其他药物如地西泮联合使用时,丙泊酚的使用剂量应减少来降低不良反应(如低血压)。

?理想疗效

●安全剂量范围较宽

●麻醉后恢复时间短

●有效的帮助兔的气管插管术

?不良反应

●可能引起复杂的心血管系统和呼吸系统抑制

●开瓶不能存储超过8小时

●可能出现兔的呼吸系统抑制

●兔不产生有效镇痛

5.尿烷(Urethane),该药物在临床兽医学没有应用,只在较少的研究中使用,通常只有特殊的或非存活性程序中。

?理想疗效

●持久(8-10小时),麻醉平稳

●提供足够的小型啮齿动物手术所需的镇痛作用

●仅有微小的心血管和呼吸抑制

?不良反应

●仅适用于非存活性程序中

●致癌物质,有细胞毒性,应尽量减少或避免使用

●安全使用剂量范围较窄

?潜在的、与科研相关的并发症

●缓慢的进入氨基酸和乙醇代谢途径

●产生肝损害

●长时间麻醉后产生肺水肿

?处理建议:尿烷是已知的动物致癌物质,应被视为一个潜在的人类

致癌物。处理建议如下:

●处理聚氨酯的结晶或粉末状时,需戴口罩、防护眼镜和手套

●应在通风橱中混合,防止吸入

●应戴手套处理尿烷麻醉动物的血液或血清

●承装尿烷的容器,应密封,防止挥发

●如果发生意外接触皮肤,眼睛或粘膜,应用大量清水清洗

●孕妇不使用尿烷

6.三溴乙醇(TBE)是一种不挥发的注射性麻醉剂,导致广义的中枢神经系统抑制,包括呼吸和心血管系统。它由肝脏代谢,并以三溴乙醇的葡糖醛酸的形式从尿液中排出体外。药物级别的三溴乙醇(例如圣阿韦坦)已经退出市场,用

非药物级别的TBE溶解于叔戊醇中来取代。该试剂不应用在临床兽医学中,但科研中广泛应用于产生基因工程大鼠小鼠的胚胎移植手术中。但该试剂应用于啮齿动物日常麻醉是有争议的,因此采用有效的药物级的其他药物替代。在实验动物中的三溴乙醇使用必须经IACUC审查和批准。如果有足够的科学必要性,该试剂的使用可被批准,实验室负责人需要保障该药物准备,储存和使用的过程,以确保其稳定,无菌和有效(准备和处理建议见下)。推荐三溴乙醇仅用在非存活性程序中。

?理想疗效

●对大部分的啮齿类动物产生手术麻醉作用

●良好的肌肉松弛作用

?不良反应

●麻醉持续时间不稳定

●常用的腹腔注射时,伴随严重的不良反应(腹腔炎或死亡)。

建议该药物尽量用在非存活性程序中。如果实验动物经腹腔注射三

溴乙醇后,需要连续几天的悉心照料和密切监视,如出现任何病症

和死亡应报告校园兽医

●所用的溶剂,要远离火源,存储在防爆冰箱中

●三溴乙醇刺激皮肤,眼睛和呼吸道,应在通风橱中准备和处

理,并戴手套,口罩,防护眼镜和穿白大褂。

●安全使用剂量范围较窄

?制备和处理

●将化合物2,2,2-三溴乙醇和叔戊醇,混合以制备原液,三

溴乙醇体积占66.7%,得到三溴乙醇浓度为1g/mL的母液。该母液

应避光保存在冰箱中

●施行麻醉前配置新鲜工作液,用后处理掉。文献中描述的大

多数溶解在叔戊醇中的三溴乙醇含有无菌生理盐水。该工作液必须

加热至溶解,加热时注意温度不要超过40度。在给动物麻醉前经过

0.2微米的过滤器除菌

三、吸入性麻醉剂

吸入性麻醉剂作用迅速、恢复快。对大多数动物的麻醉深度的可控性和麻醉作用稳定是其优点。但该类麻醉剂需要专门的设备,并持续监测动物状态。

麻醉师可通过调节麻醉剂浓度和肺通气量来控制吸入性麻醉剂的麻醉深度和持续麻醉时间。不同吸入性麻醉剂溶解度的差异决定动脉血中的麻醉剂浓度增加量。高溶解度的吸入性麻醉剂需要更多的时间来达到药效浓度,因此所需诱导期和恢复期也较长。相反,难溶的吸入性麻醉剂因血药浓度可迅速改变而更容易控制,但是,难溶的吸入性麻醉剂危险性更高。

以下的设备对其他吸入剂也适用:载气(通常是氧气或空气);挥发性麻醉剂的喷雾器;呼吸系统和气管内导管。许多装置已在文献中报道,并有商业产品出售。该类麻醉剂使用时必须有适当的清除装置,或在通风橱中,以避免人员接触。

1.异氟烷(Isoflurane)

?理想疗效

●诱导,恢复和麻醉水平的变化均快速

●不进入代谢,几乎完全随空气呼出,因此,对药物代谢和毒

理学实验产生的干扰微小

●不易燃,也不爆炸

●控制神经系统的程序,因它保持等电位脑电图,并降低代谢

的氧需求

?不良反应

●抑制呼吸

●需要校准,精确的喷雾产生高的汽化压力;不适合开放式滴法

●与其他药物相比,较大的减少全身血管阻力

?潜在的、与科研相关的并发症

●提高动脉的CO2浓度,降低动脉血pH值

●使房室传导无作用

●不影响中枢神经系统的兴奋

2.二氧化碳

?理想疗效

●组织中无药物残留

●诱导和恢复快速

●体积比CO2/O2=60/40混合物是最安全的

?不良反应

●非常短效,不到2分钟

●只有啮齿类动物较适用

?潜在的、与科研相关的并发症

●过度暴露会导致酸中毒和心脏传导阻滞心脏骤停。

●最初产生呼吸道刺激作用

四、镇痛剂

通常情况下,引起人类疼痛的实验和外科手术应预计在实验动物中也引起疼痛。然而,对动物造成的精神上的伤痛无法确定,该伤痛决定动物的术后不安和痛苦。为了确定哪一个程序需要术后麻醉和哪一个麻醉剂合适,下面几个因素应该考虑:

操作的侵袭程度:

●是否体腔被侵入和暴露?

●是否涉及特别敏感的组织,如骨骼或牙齿?

●是否存在显著的组织破坏或炎症反应?

预期的疼痛严重程度:

●与人类类似的手术相比较,是否人类在无麻醉的情况下可以

承受相似的疼痛?

●与未经手术直接麻醉的动物相比术后动物的行为异常情况,

例如活动水平,食欲,被毛粗糙度。

术后镇痛是外科手术必须的,包括皮下组织穿刺。涉及侵入骨骼,关节,牙齿或其他组织的重大破坏或炎症的手术,如果不适用镇痛药,主要研究负责人有责任在他/她的动物使用协议中提供足够的理由。

下表是对不同手术的疼痛等级的界定,有助于帮助研究负责人决定是否需要使用术后补充麻醉剂。

1.阿片类药物激动剂:吗啡(morphine),芬太尼(fentanyl),二氢吗啡酮(Dilaudid),羟二氢吗啡酮(Numorphan)

?理想疗效

●强效催眠和镇痛作用

●在大多数动物中可待因/对乙酰氨基酚可用于轻度至中度的

疼痛缓解,啮齿动物和兔子可将其溶解在水中给药

●硬膜外麻醉给药不仅提供良好的局部镇痛,且无全身不良反

●可被纯阿片受体拮抗剂(如纳络酮)逆转药效

?不良反应

●吗啡刺激犬的胃肠道(哌替啶无刺激作用)

●抑制心血管和呼吸系统,改变体温调节机制

●作用持续时间短,吗啡,羟吗啡酮是2至4小时,其他药物

小于2小时

●可能在猫、鼠和农场动物身上出现不良激励

●可引起镇静,尤其是犬和灵长类动物

●可刺激组胺释放,引起周围血管扩展和低血压症

●管制药品

●增加脑脊髓液的压力,必须在术后小心使用

?潜在的、与科研相关的并发症

●吗啡

●提高下丘脑垂体对抗利尿激素,生长激素,泌乳素释放

●抑制黄体生成素释放

●引起犬呕吐

●有效地抑制咳嗽

●通过释放血清素引起兔,犬和猴子的低体温症

●引发山羊,牛,马高热病

●低剂量引起豚鼠,大鼠,小鼠过高热,高剂量诱导低体

温症。

●缓慢给药能减少兔子低体温症症状

●影响动物瞳孔的大小,增大羊和马瞳孔,缩小犬,大鼠

和人类瞳孔

●首先兴奋犬的呼吸系统,再抑制犬的呼吸活动

●可能出现Cheyne-Stokes呼吸

●有意识的犬中,引起冠状动脉血管收缩,减慢冠状动脉

的血流量,血管阻力增加(与对人类作用相反)

●最初引起犬的胃肠道排空,然后是便秘

●需要在硬膜外注射吗啡

●芬太尼

●镇痛效力是等当量吗啡的百倍

●与氟哌利多联合用药,产生精神运动的镇静和镇痛作用

●芬太尼可能会引起犬的胸廓肌肉僵硬,干扰正常的呼吸

功能。

●羟吗啡酮

●镇痛效力是等当量吗啡的十倍

●对犬的镇静作用良好

●可产生心动过缓,使血压略有下降

●肠道蠕动减少,胃排空时间增加

2.阿片类药物-部分激动剂:丁丙诺啡(buprenorphine)

?理想疗效

●强效镇痛药-比吗啡强30倍以上

●与吗啡相比,有副作用少,包括镇静作用小

●对所有常见的实验动物有效

●有效时间长达6-12小时

?不良反应

●可能的呼吸/心血管抑郁症罕见的镇痛剂量

?潜在的、与科研相关的并发症

●仅在阿片受体存在时发挥激动剂作用

●可能会降低或极少增加心跳率和血压

●呼吸抑制

●可能增加胆道内压力

●产生轻度的镇静作用

●提升脑脊液压力

3.阿片类药物-激动剂/拮抗剂:布托啡诺

?理想疗效

●比丁丙诺啡药效弱的镇痛药,

?不良反应

●布托啡诺是IV类管制药物

●非人灵长类动物受布托啡诺产生呼吸抑制

?潜在的、与科研相关的并发症

●镇痛效力是等当量的吗啡的四倍

●15?30分钟后静脉注射后,产生降低动脉血压作用

●与其他阿片类激动剂不同,不引起组胺释放

●很强的止咳活动

●产生轻度的镇静作用

●很少产生厌食,恶心,腹泻

●兴奋Kappa Sigma受体,拮抗阿片类受体

4.非甾体类抗炎药:阿司匹林,酮洛芬,氟尼辛葡甲胺,卡洛芬

?理想疗效

●外周作用

●抗炎特性

●新药(卡布洛芬carprofen,美洛昔康meloxicam)有良好

的镇痛活性

●可与阿片类药物联用

?不良反应

●胃肠道副作用,包括溃疡和消化道出血

●可促进出血,因此不应该用于术前患者或出血性疾病患者

●可能会影响肾功能,因此,应该只使用在肾功能良好的患者

?潜在的、与科研相关的并发症

●阿司匹林

●除兔外,阿司匹林通过阻止下丘脑的致热源发挥解热作

●强效的前列腺素合成酶抑制剂

●抑制豚鼠白细胞三烯D和缓激肽引起的支气管肌肉收缩

●抑制过敏反应

●通过抑制凝血酶诱导的血小板中前列腺素E2和F2的释

放,抑制血小板聚集

●可能产生胃刺激和溃疡

●氟尼辛葡甲胺

●解热作用

●镇痛效力比保泰松,喷他佐辛,度冷丁,可待因强很多

●如果动脉给药,产生共济失调,呼吸急促,肌肉无力和

不正常兴奋

五、局部麻醉

局部麻醉剂用于引起皮肤,局部组织或区域的脱敏和镇痛作用。总体上,这些麻醉剂用于局部浸润,主要神经周围浸润或硬膜外。它们通过干扰神经细胞膜的通透性,阻止神经冲动的产生和传输。这些麻醉剂可以与血管收缩剂(如肾上腺素)联用,增加镇痛强度和持续时间。但不能经静脉给药。

该类药物在实验动物麻醉中的使用越来越普遍。它们经常沿切口线渗透,产生局部麻醉。通过使用该类药物可减少主要麻醉剂和术后镇痛剂的使用量,要求最大限度地减少这些药物可能引起的不良影响。局部麻醉剂药物的副作用是小,但处理小型啮齿动物时,必须谨慎使用。

利多卡因(Lidocaine)

?中级麻醉效力

?即时起效

?使用0.5%至2%浓度来浸润和阻塞神经

?持续时间可达2小时

?由肝脏代谢

?小鼠最大剂量为17.5毫克/公斤;局部浸润给药

布比卡因(Bupivicaine)

?麻醉效力是利多卡因的4倍以上

?0.25%浓度来浸润,0.5%浓度阻塞神经

?用药后经过一小段时间起效

?持续时间长达6小时

?小鼠最大剂量为38毫克/公斤;局部浸润

EMLA

?EMLA乳膏是重量比1:1的利多卡因和丙胺卡因形成的低共熔混合物

?通过包扎法麻醉皮肤时,能麻醉真皮

?镇痛起效时间,深度和持续时间取决于乳膏敷用时间。

?去除该乳膏后,镇痛仍然保持1至2小时

局部麻醉剂的不良反应

?心血管和呼吸抑制和心律失常

?惊厥或抽搐

?小鼠体内静脉注射布比卡因> 55 mg / kg或利多卡因>110 mg/kg 后产生不良反应

?大鼠体内静脉注射布比卡因在22.7±7mg/kg后产生不良反应

第二部分不同实验动物麻醉药物剂量

一、注射用麻醉剂(mg/kg;给药途径;给药剂量)

药物小鼠豚鼠大鼠兔

氯胺酮Ketamine - - - 20-60 IM

氯胺酮(K) +

二甲苯胺噻嗪(X) Xylazine 90-150 K

7.5-16 X

IP

40-75 K

5-10 X

IP

40-75 K

5-10 X

IP, IM

22-50 K

2.5-10 X

IM

氯胺酮(K) +

地西泮(D) Diazepam - - -

60-80 K

5-10 D

IM

氯胺酮+

二甲苯胺噻嗪+

乙酰丙嗪Acepromazine (A) 60-100 K

7-20 X

0.6-3 A

IP

61 K

7 X

0.6 A

IP

30-40 K

5-6 X

1-2 A

IP, IM

-

戊巴比妥Pentobarbital 30-90

IP

(5 mg/kg

新生儿)

30-60

IP

15-40

IP, IV

20-60

IV

戊硫代巴比妥Thiopental - 20-40

IV

- -

异丙酚Propofol - 7.5-10

IV

- -

尿烷Urethane - 1000-1500

IP, SQ

1500

IP, IV

-

三溴乙醇Tribromoethanol 125-250

IP

- - -

注意事项:

1.开始注射异丙酚应采用持续输注方式,以维持该很短效麻醉剂的作用

2.尿烷是致癌物质,仅用在非存活的实验中。

3.三溴乙醇(TBE)暂无医药级别产品。使用化学级是最好选用Sigma等大公司产品,以免

实验动物的麻醉方法

实验动物麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用1%~2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉,也可用0.25%~0.5%溶液作局部浸润麻醉。 (二)常用全身麻醉剂: 1. 乙醚乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加;通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动,并且容易引起窒息,在麻醉过程中要注意。但总起来说乙醚麻醉的优点多,如麻醉深度易于掌握,比较安全,而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉,在麻醉初期出现强烈的兴奋现象,对呼吸道又有较强的刺激作用,因此,需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉),通常在麻醉前20-30分钟,皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重5~10mg)及阿托品(每公斤体重0.1mg)。盐酸吗啡可降低中枢神经系统兴奋性,提高痛阈,还可节省乙醚用量及避免乙醚麻醉过程中的兴奋期。阿托品可对抗乙醚刺激呼吸道分泌粘液的作用,可

避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞,或手术后发生吸入性肺炎。 进行手术或使用过程中,需要继续给予吸入乙醚,以维持麻醉状态。慢性实验预备手术的过程中,仍用麻醉口罩给药,而在一般急性使用,麻醉后可以先进行气管切开术,通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。在继续给药过程中,要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小(如发现角膜反射消失,瞳孔突然放大,应立即停止麻醉。万一呼吸停止,必须立即施行人工呼吸。待恢复自动呼吸后再进行操作。 2. 苯巴比妥钠此药作用持久,应用方便,在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能无多大影响。通常在实验前半至一小时用药。使用剂量及方法为:狗腹腔注射80~100mg/kg 体重,静脉注射70~120mg/kg体重( 一般每公斤体重给70~80mg即可麻醉,但有的动物要100~120mg才能麻醉,具体用量可根据各个动物的敏感性而定)。兔腹腔注射150~200mg/kg 体重。 3. 戊巴比妥钠此药麻醉时间不很长,一次给药的有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般使用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用,药品价格也很便宜。用时配成1~3%生理盐水溶液,必要时可加温溶解,配好的药液在常温下放置1~2月不失药效。静脉或腹腔注射后很快就进入麻醉期,使用剂量及方法为:狗、猫、兔静脉注射30~35mg/kg体重,腹腔注射40~45mg/kg体重。 4. 硫喷妥钠为黄色粉末,有硫臭,易吸水。其水溶液不稳定,故必须现用现配,常用浓度为1~5%。此药作静脉注射时,由于药液迅速进入脑组织,故诱导快,动物很快被麻醉。但苏醒也很快,一

实验动物的麻醉方法

实验动物麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程屮所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验屮服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5 % 1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用 1 %?2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉, 也可用0. 25 %-0. 5 %溶液作局部浸润麻醉。 (二)常用全身麻醉剂: 1. 乙醯乙瞇吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙瞇局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加;通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动,并且容易引起窒息,在麻醉过程屮要注意。但总起来说乙醛麻醉的优点 多,如麻醉深度易于掌握,比较安全,而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉,在麻醉初期岀现强烈的兴奋现象,对呼吸道又有较强的刺激作用,因此,需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉),通常在麻醉前20- 30分钟,皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重5-10mg)及阿托品(每公斤体重0. lmg)。盐酸吗啡可降低屮枢神经系统兴奋性,提高痛阈,还可节省乙醯用量及避免乙醸麻醉过程中的兴奋期。阿托品可对抗乙醸刺激呼吸道分泌粘液的作用,可避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞,或手术后发生吸入性肺炎。 进行手术或使用过程中,需要继续给予吸入乙醯,以维持麻醉状态。慢性实验预备手术的过程屮, 仍用麻醉口罩给药,而在一般急性使用,麻醉后可以先进行气管切开术,通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。在继续给药过程屮,要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小(如发现角膜反射消失,瞳孔 突然放大,应立即停止麻醉。万一呼吸停止,必须立即施行人工呼吸。待恢复自动呼吸后再进行操作。 2. 苯巴比妥钠此药作用持久,应用方便,在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能 无多大影响。通常在实验前半至一小时用药。使用剂量及方法为:狗腹腔注射80-100mg/kg体重,静脉注射70-120mg/kg体重(一般每公斤体重给70-80mg即可麻醉,但有的动物要100-120mg才能麻醉,具体用量可根据各个动物的敏感性而定)。兔腹腔注射150-200mg/kg体重。 3. 戊巴比妥钠此药麻醉时间不很长,一次给药的有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般使 用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用,药品价格也很便宜。用时配成1-3% 生理盐水溶液,必要时可加温溶解,配好的药液在常温下放置1~2月不失药效。静脉或腹腔注 射后很快就进入麻醉期,使用剂量及方法为:狗、猫、兔静脉注射30-35mg/kg体重,腹腔注射 40 ^45mg/kg 体重。 4. 硫喷妥钠为黄色粉末,有硫臭,易吸水。其水溶液不稳定,故必须现用现配,常用浓度为 5%o此药作静脉注射时,由于药液迅速进入脑组织,故诱导快,动物很快被麻醉。但苏醒也很快, 一次给药的麻醉时效仅维持半至一小时。在时间较长的实验过程中,可重复注射,以维持一定的麻醉深度。

实验1实验动物的捉持法和给药法 (1)

实验1 实验动物的捉持法和给药法 一、常用实验动物的捉持法 1.蛙和蟾蜍 通常以左手握持,用食指和中指夹住左前肢,拇指压住右前肢,右手将下肢拉直,左手用无名指及小指夹住(图1)。 图1 蟾蜍捉持法 2.小鼠 (1)双手法:右手提鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉鼠尾,使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤,无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部,便可将小鼠牢固捉持(图2)。 图2 小鼠双手捉持法 (2)单手法:小鼠置于笼盖上,先用左手食指和拇指抓住鼠尾,后手掌尺侧和小指夹住鼠尾,然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤(图3)。 图3 小鼠单手捉持法 3. 大鼠 大鼠容易激怒咬人,捉持时应戴防护手套。先用右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与掌部握住背部和腹部。注意不要捏其颈部,以防用力过大、过久,窒息死亡。 4.家兔 一只手抓住兔颈背部皮肤,将兔轻轻提起,另一只手托住臀部,使兔呈蹲坐姿势(图4)。切不可用手握持双耳提起兔子。 图4 家兔捉持法 5.豚鼠

豚鼠性情温和,不咬人,用手轻轻握住身体即可抓起。 6. 猫 应戴好防护手套。轻声呼唤,慢慢将手伸入猫笼,轻抚猫头、颈和背部,一只手抓住颈背部皮肤,另一只手抓住腰背部。性情凶暴的猫可用布袋或网套捉持,操作中应防其利爪和牙齿伤人。 7. 狗 驯服的狗可戴上特制嘴套,用绳带固定于耳后颈部;凶暴的狗可用长柄捕狗夹钳住狗的颈部,然后套上嘴套。狗嘴也可用绳带固定,操作时先将绳带绕过狗嘴的下颌打结,再绕到颈后部打结,以防绳带滑落。狗麻醉后四肢固定于手术台上,取下嘴套或绳带,将一金属棒经两侧嘴角,穿过口腔压于舌上,再用绳带绕过金属棒绑缚狗嘴,并固定于手术台上。应将狗舌拉出口腔,以防窒息。 二、常用实验动物给药法 1. 经口给药法 此法有口服与灌胃两种方法。适用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等动物。口服法可将药物放入饲料或溶于饮水中令动物自由摄取。若为保证剂量准确,可应用灌胃法。 (1)灌胃法 小鼠:左手捉持小鼠,腹部朝上,右手持灌胃管经口角插入口腔,使灌胃管与食管成一直线,再沿上颚壁缓慢插入食管,稍感有阻力时(大约灌胃管插入1/2),如动物安静,呼吸无异常,即可注入药液。如遇阻力应抽出灌胃管重新插入,若药液误注气管,小鼠可立即死亡。一次灌注药量0.1-0.3ml/10g体重。操作宜轻柔,防止损伤食管(图5)。灌胃管可用粗大的注射针头制作,磨钝针尖制成,管长4-5cm,直径1mm,连接于1-2ml 注射器上即成。 图5 小鼠灌胃法 大鼠:左手捉持大鼠,右手持灌胃器,灌胃方法与小鼠相同。若两人合作时,可由助手协助固定后肢与尾巴。但灌胃管必须长6-8cm,直径1.2mm,尖端呈球状,并安装在5 -10ml的注射器上。注药前应回抽注射器,证明未插入气管(无空气逆流)方可注入药液。一次投药量1—2ml/100g体重。 家兔:需两人合作,一人坐好将兔躯体夹于两腿之间,左手紧握双耳固定头部,右手抓住两前肢固定前身,使兔头稍向后仰;另一人将木或竹制开口器横放于兔口中,将兔舌压住,以8号导尿管经开口器中央小孔,沿上颚壁慢慢插入食管15-18cm。为避免误入气管,可将导尿管外口端放入清水杯中,无气泡逸出方可注入药液,并应再注入少量清

实验动物的给药方法

3.4 实验动物的给药方法 3.4.1 经口投药法 (1) 口服法. 口服法是将能溶于水并且在水溶液中较稳定的药物放入动物饮水中,不溶于水的药物混于动物饲料内,由动物自行摄入。该方法技术简单,给药时动物接近自然状态,不会引起动物应激反应,适用于多数动物慢性药物干预实验,如抗高血压药物的药效、药物毒性测试等。其缺点是动物饮水和进食过程中,总有部分药物损失,药物摄入量计算不准确,而且由于动物本身状态、饮水量和摄食不同,药物摄入量不易保证,影响药物作用分析的准确性。 (2) 灌服法 灌服法是将动物适当固定,强迫动物摄入药物。这种方法能准确把握给药时间和剂量,及时观察动物的反应,适合于急性和慢性动物实验,但经常强制性操作易引起动物不良生理反应,甚至操作不当引起动物死亡。故应熟练掌握该项技术。强制性给药方法主要有两种: ①固体药物口服 一人操作时用左手从背部抓住动物头部,同时以拇、食指压迫动物口角部位使其张口,右手用镊子夹住药片放于动物舌根部位,然后让动物闭口吞咽下药物。 ②液体药物灌服 小白鼠与大白鼠一般由一人操作,左手捏持小白鼠头、颈、背部皮肤,或握住大白鼠以固定动物,使动物腹部朝向术者,右手将连接注射器的硬质胃管由口角处插入口腔,用胃管将动物头部稍向背侧压迫,使口腔与食管成一直线,将胃管沿上颚壁轻轻插入食道,小白鼠一般用3 cm,大白鼠一般用5 cm的胃管(图3.4-1)。插管时应注意动物反应,如插入顺利,动物安静,呼吸正常,可注入药物;如动物剧烈挣扎或插入有阻力,应拔出胃管重插,如将药物灌入气管,可致动物立即死亡。 给家兔灌服时宜用兔固定箱或由两人操作。助手取坐位,用两腿夹住动物腰腹部,左手抓免双耳,右手握持前肢,以固定动物;术者将木制开口器横插入兔口内并压住舌头,将胃管经开口器中央小孔沿上腭壁插入食道约15 cm,将胃管外口置一杯水中,看是否有气泡冒出,检测是否插入气管,确定胃管不在气管后,即可注入药物(图3.4-2)。 3.4.2 注射给药

常见实验动物的捉持和给药方法

常见实验动物的捉持和给药方法 一、小白鼠的捉持和给药方法 1、捉持方法 右手提起鼠尾,放在粗糙物(如鼠笼)上面,轻向后拉其尾;此时小鼠前肢抓住粗糙面不动;用左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤,无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定。腾出右手,可以给药。 此外,也可单手捉持,难度较大,但速度快。先用拇指和食指抓住小鼠尾巴,用小指、无名指和手掌压住尾根部,再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定。 2、给药方法 a.灌胃法 小鼠固定后,使腹部朝上,颈部拉直,右手用带灌胃针头的注射器吸取药液(或事先将药液吸好),将针头从口交插入口腔,再从舌背进沿上腭进入食道。若遇阻力,应退出后再插,切不可用力过猛,防止损伤或误入气管导致动物死亡。灌胃量一般不超过0.25ml/10g。

b.腹腔注射法 抓鼠方法同上,右手持注射器(5~6号针头),从耻骨联合上一侧向头端以30度角刺入腹腔(应避开膀胱)。可先刺入皮下2~3mm,再刺入腹腔,以防药液外漏。针头刺入部位不宜太高太深,以免刺破内脏。注射量一般为0.1~0.25ml/10g。 c.皮下注射法 一般两人合作。一人左手抓住小鼠头部皮肤,右手拉住鼠尾;另一人左手提高背部皮肤,右手持住注射器(针头号同上),将针头刺入提起的皮下。若一人操作,左手小指和手掌夹住鼠尾,拇指和食指提起背部皮肤,右手持注射器给药。一般用量为0.05~0.25ml/10g。 d.肌肉注射法 两人合作时,一人抓鼠方法同上,另一人左手拉直一侧后肢,右手持注射器,注射部位多选后腿上部外

侧(针头号同上)。如一人操作,抓鼠方法类似腹腔注射,只是药液注射在肌肉内。每腿的注射量不宜超过0.1ml。 e.尾静脉注射法 将小鼠置于待置的固定筒内,使鼠尾外露,并用酒精或二甲苯棉球涂擦,或插入40℃~50℃温水中浸泡片刻,使尾部血管扩张。左手拉尾,选择扩张最明显的血管;右手持注射器(4~5号针头),将针头刺入血管,缓慢给药。如推注有阻力而且局部变白,说明针头不在血管内,应重新插入。穿刺时宜从近为尖部1/3处静脉开始,以便重复向上移位注射。一般用药量为0.1~0.2ml/10g,不宜超过0.5ml/10g。 二、家兔的捉持和给药方法 1、捉持方法 一般左手抓住兔颈背部皮肤,将其提起,右手托住臀部称坐位姿态。不要抓两耳,以防兔挣扎。 2、给药方法 a.耳缘静脉注射法 一人操作时,将兔放入固定箱或试验台上,选好耳缘静脉(在耳背的下缘),拔除局部的毛,用酒精棉球涂擦,并用食指轻弹耳壳,使血管扩张。用左手的食指和中指夹住耳根部,拇指和无名指夹住耳尖部拉直;右手将抽好药液的注射器(6~7号针头)刺入血管,用拇指和食指使针头和兔耳固定,将药液推入。如针头在血管内,推注轻松,并可见血液被药液冲走;如不在血管内,则推注有阻力,耳局部变白或肿胀,应立即拔除重新注射。注射完毕,则用手指或棉球压在针眼上,再拔出针头,并继续按压片刻,防止出血。如两人操作,一人夹住兔子,右手暴露血管,压住耳根部使血管充盈,另一人注射给药。

实验动物麻醉

实验动物麻醉 所有可能引起实验动物疼痛或不适的实验方案都必须使用合适的麻醉剂、止痛剂和镇静剂。如麻醉剂、止痛剂或镇静剂可能影响实验数据,该实验方案可不使用麻醉剂、止痛剂或镇静剂,但必须在实验方案中予以详细说明,并在实验动物管理委员会批准后方可开展相关实验。 包括动物品系、使用途径、体重、性别、动物健康状况、温度、其它同时使用的药物在内的多种因素影响麻醉剂、止痛剂或镇静剂的使用剂量和有效时间。因此,在使用麻醉剂时必须时刻监测实验动物的麻醉深度,以防止过度麻醉导致动物死亡或麻醉不足无法缓解动物的疼痛。足底反射、角膜反射、肌肉紧张和对皮肤夹捏的反应是检测动物麻醉深度的有用指标,在条件许可时,推荐测量动物心率、血压、呼吸频率及体温作为检测动物麻醉深度更为精确的指标。 使用麻醉剂时,一定要注意方法的可靠性,根据不同的动物选择合适的方法。1.麻醉剂的用量,除参照一般标准外,还应考虑个体对药物的耐受性不同。一般说,衰弱和过胖的动物,其单位体重所需剂量较小。在使用麻醉剂过程中,特别是使用巴比妥类药物时,一般应首先使用较小剂量,随时检查动物的反应情况,并逐步提高剂量。 2.动物在麻醉期体温容易下降,要采取保温措施。相比清醒的动物,麻醉后的动物反应相对迟钝。因此,推荐使用循环水浴保温垫,不推荐使用照明灯、电加热器等不易控制温度的设备,以免灼伤实验动物。 3.静脉注射麻醉剂发挥作用速度快,静脉注射必须缓慢,同时观察肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显减弱或消失时,应立即停止注射。配制的药液浓度要适中,不可过高,以免麻醉过急;但也不能过低,以减少注入溶液的体积。实验操作涉及腹腔注射时,不应使用腹腔注射麻醉剂。 4.气温较低时,麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。 5.注射麻醉剂前12小时实验动物应禁食,以防止食物回流。注射前3小时应限制饮水。 6.如需使用抗生素以防止术后感染,手术前1小时应肌肉注射抗生素,并于手术过程中静脉注射抗生素。 7.手术过程中如实验动物大量失血,应补充大约3倍失血体积的0.9%生理盐水。 肌肉舒张剂 肌肉舒张剂必须与全身麻醉同时使用。如需使用肌肉舒张剂,必须在实验动物研究方案中予以详细说明,并得到实验动物管理委员会的批准。 止痛剂 不同动物疼痛持续时间不同,因此应密切观察实验动物的行为等指标。对创口较大的手术,至少在术后48小时内应给予实验动物适当的止痛剂,对较小的手术,至少在术后24小时内应给予实验动物适当的止痛剂。如24小时或48小时后实验动物表现出明显的疼痛,应持续给药,并应与兽医讨论实验动物是否存在其它的健康问题。通常同时给予两种以上不同的止痛剂有更好的效果,如鸦片类止痛剂与非类固醇类消炎药共同使用。在手术前提前使用止痛剂也有助于帮助实验动物减轻疼痛感,并可减小麻醉剂和止痛剂的使用剂量。

常用实验动物的给药途径和方法

常用实验动物的给药途径和方法 在动物实验中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态的变化,常需将药物注入动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。 一经口给药法 (一)灌胃法 此法给药剂量准确,是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法。 1、白鼠灌胃法:抓起小鼠,以左手拇指、食指固定头部,小指、无名指和掌心夹注尾巴,使腹部朝上,颈部拉直,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口角插入口腔,从舌背沿上腭插入食道。灌胃量0.2~0.5ml/10g。 胃管可用适宜口径的硬质塑料管或磨去针头的8号注射针头弯成适当的弧度制成。 注意,操作时不要用力猛插,以免插破食道或误插入器官造成动物死亡。 2、白鼠灌胃法:左手戴上棉手套,用左手拇指和食指将大鼠头部固定,将大鼠 灌胃器沿腭后壁慢慢插入食道。灌胃针插入时应无阻力,如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出,重新再插。灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。灌胃量10~20ml/kg 3 兔、犬等:灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之间,然后将灌胃管(常用导尿管代替)从开口器的小孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插入胃中,未误入气管。此时将注射器与灌胃管相连,注入药液。 4、猪的胃内灌注法:给猪下鼻饲管较困难,因猪的鼻翼与上唇联合形成吻突,鼻腔内上下鼻夹与鼻中隔通道极窄,只能通过F10-12号的导尿管,F14号以上的导尿管不能插入,故一般均给猪采用经口入胃的灌胃方法。具体方法是,预先做好一矩形小木块,中间有一洞,让小猪咬住,将其固定,然后再由此洞下胃管。此种操作较为简便。 5、鸟类:包括鸽、鸡等,经口灌胃给药,可由助手将其身体用毛巾裹住固定好。实验者用左手将动物向后拉,使其颈部倾斜,用左拇指和食指将动物嘴撬开,其他三只手指固定好动物头部,右手取带有灌胃针头的注射器,将灌胃针头由动物舌后插入食管。不要象其它动物灌胃时插的太深,如动物不挣扎,插针头又很顺利,即可将药液经口或食管上端罐入胃内。罐入速度要慢。

实验动物的麻醉

八、实验动物的麻醉 在一些动物实验,特别是手术等实验,为减少动物的挣扎和保持其安静,并便于操作,常对动物采用必要的麻醉。由于动物种属间的差异等情况,所采用的麻醉方法和选用的麻醉剂亦有不同。 (一)常用的麻醉剂 动物实验中常用的麻醉剂分为三类,即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。 1.挥发性麻醉剂这类麻药包括乙醚、氯仿等。乙醚吸入麻醉适用于各种动物,其麻醉量和致死量差距大,所发安全度亦大,动物麻醉深度容易掌握,而且麻后苏醒较快。其缺点是对局部刺激作用大,可引起上呼吸道粘膜液体分泌增多,再通过神经反射可影响呼吸、血压和心跳活动,并且容易引起窒息,故在乙醚吸入麻醚时必需有人照看,以防麻醉过深而出现上情况。 2.非挥发性麻醉剂这类麻醉剂种类较多,包括苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物,氨基甲酸乙脂和水合氯醛。这些麻醉剂使用方便,一次给药可维持较长的麻醉时间,麻醉过程较平衡,动物无明显挣扎现象。但缺点是苏醒较慢。 3.中药麻醉剂动物实验时有时也用到象洋金花和氢溴酸东莨菪碱等中药麻醉剂,但由于其作用不够稳定,而且常需加佐剂麻醉效果才能理想,故在使用过程中不能得到普及,因而,多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。 (二)动物的麻醉方法 1.全身麻醉 (1)吸入法用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器,多选用乙醚作麻药。麻醉时用几个棉球,将乙醚倒可其中,迅速转入钟罩或箱内,让其挥发,然后把待麻醉动物投入,约隔4-6分钟即可麻醉,麻醉后应立即取出,并准备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯,在动物麻醚变浅时给套在鼻上使其补吸麻药。本法最适于大、小鼠的短期操作性实验的麻醉,当然也可用于较大的动物只是要求有麻醉口罩或较大的玻璃箱罢了。由于乙醚燃点很低,遇火极易燃烧,所以在使用时,一定要远离炎源。 (2)腹腔和静脉给药麻醉法 非挥发性和中药麻醉剂均可用作腹腔和静脉注射麻醉,操作简便,是实验室最常采用的方法之一。腹腔给药麻醉多用于大小鼠和豚鼠,较大的动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。由于各麻醉剂的作用长短以及毒性的差别。所以在腹腔和静脉麻醉时,一定控制药物的浓度和注射量(见表11-6)。

实验动物的给药途径和方法及药量计算方法

实验动物的给药途径和方法及药量计算方法标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]

一.经口给药法 (一)灌胃法 此法给药剂量准确,是借灌胃器将直接灌到动物胃内的·种常用给药法。1.鼠类:鼠类的灌胃器由特殊的灌胃针构成。左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的右U角中,插入口中,沿咽后壁慢慢插入食道,使其前端到达膈肌位置,灌胃针插入时应无阻力,如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出,以免损伤、穿破食道或误入气管。 2.兔、犬等:灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之间。然后将灌胃管(常用导尿管代替)从开口器的小孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插入胃中,未误入气管。此时将注射器与灌胃管相连,注入药液。 (二)口服法 口服给药是把混入饲料或溶干饮水中让动物自由摄取。此法优点是简单方便,缺点是剂量不能保证准确,且动物个体间服药量差异较大。大动物在给予片剂、丸剂、胶囊剂时,可将用镊子或手指送到舌根部,迅速关闭口腔,将头部稍稍抬高,使其自然吞咽。 二、注射给药法

(一)皮下注射 皮卜注射一般选取皮下组织疏松的部位,大鼠、小鼠和豚鼠可在颈后肩胛问、腹部两侧作皮下注射;家兔可在背部或耳根部作皮卜注射;猫、犬则在大腿外侧作皮下注射。皮下注射用左手拇指和食指轻轻提起动物皮肤,右手持注射器,使针头水平刺入皮下。推送药液时注射部位隆起。拨针时,以手指捏住针刺部位,可防止药液外漏。 (二)肌肉注射 肌肉注射一般选肌肉发达,无大血管通过的部位。大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉;家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射;犬等大型动物选臀部注射。注射时针头宜斜刺迅速人肌肉,回抽针栓如无回血,即可注射。(三)腹腔注射 给大鼠、小鼠进行腹腔注射时,以左手固定动物,使腹部向上,为避免伤及内脏,应尽量使动物头处于低位,使内脏移向上腹,右手持注射器从下腹两侧向头方刺入皮下,针头稍向前,再将注射器沿45角斜向穿过腹肌进入腹腔,此时有落空感,回抽无回血或尿液,即可注入药液。免、犬等动物腹腔注射时,可由助手固定动物,使其腹部朝上,者即可进行操作。注射位置为:家兔下腹部近腹白线左右两侧1cm处,犬脐后腹白线两侧边1—2cm处进行腹腔注射。(四)静脉注射

实验动物的麻醉方法知识

实验动物的麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所致的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成 0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用1%~2%溶液作为大动物 神经干阻滞麻醉,也可用0.25%~0.5%溶液作局部浸润麻醉。 (二)常用全身麻醉剂: 1. 乙醚乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加;通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动,并且容易引起窒息,在麻醉过程中要注意。但总起来说乙醚麻醉的优点多,如麻醉深度易于掌握,比较安全,而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉,在麻醉初期出现强烈的兴奋现象,对呼吸道又有较强的刺激作用。因此,需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉),通常在麻醉前20-30分钟,皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重1~2mg)及阿托品(每公斤体重0.1mg)。 盐酸吗啡可降低中枢神经系统兴奋性,提高痛阈,还可节省乙醚用量及避免乙醚麻醉过程中的兴奋期。阿托品可对抗乙醚刺激呼吸道分泌粘液的作用,可避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞,或手术后发生吸入性肺炎。 进行手术或使用过程中,需要继续给予吸入乙醚,以维持麻醉状态。慢性实验预备手术的过程中,仍用麻醉口罩给药,而在一般急性使用,麻醉后可以先进行气管切开术,通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。在继续给药过程中,要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小(如发现角膜反射消失,瞳孔突然放大,应立即停止麻醉。并施行必要的人工呼吸。待恢复自动呼吸后再进行操作。 2. 苯巴比妥钠此药作用持久,应用方便,在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能无多大影响。通常在实验前半至一小时用药。使用剂量及方法:大鼠腹腔注射40-50mg/kg体重。 3. 戊巴比妥钠此药麻醉时间不很长,一次给药的有效时间可延续2-4小时,所以十分适合一般使用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用,药品价格也很便宜。用时配成1~3%生理盐水溶液,必要时可加温溶解,配好的药液在常温下放置1~2月不失药效。静脉或腹腔注射后很快就进入麻醉期,使用剂量及方法为:狗、猫、兔静脉注射30~35mg/kg体重,腹腔注射40~45mg/kg体重,大鼠腹腔注射40-50mg/kg体重。但动物个体间差异颇大。用于兔、鼠死亡率较高;用于大等较大动物,亦需要辅助呼吸和其他复苏措施,且完全苏醒需要6~8小时。镇痛效果差,恢复时间长,尤其是为延长麻醉额外加量后更易发生。近来使用日趋减少。

药理实验中对动物的给药体积与采血体积控制

药理实验中对动物的给药体积与采血体积控制 本文由wyj摘要翻译 本文是2001年由欧洲制药工业协会联合会 (The European Federation of Pharmaceutical Industries and Associations ,EFPIA)和欧洲替代方法验证中心(European Centre for the Validation of Alternative Methods,ECV AM)联合发布的关于对动物不同途径给药或采血时所能充许的给药体积和采血体积指导原则。动物包括小鼠、大鼠、兔、狗、猴、豚鼠,给药方法包括po、ip、im、sc、一次性iv、缓慢静注、静脉点滴等的一般给药体积、最大充许给药体积、给药速度等,采血包括各种动物的最大充许采血量和恢复时间等。是一部实用、全面而又难得的指导原则,相信对从事药理、毒理研究者及其他动物实验工作者有一定的帮助。 下面的节选由wyj摘要翻译,原文见欧洲联盟欧洲制药工业协会联合会,A Good Practice Guide to the Administration of Substances and Removal of Blood, Including Routes and Volumes(2000). J. Appl. Toxicol. 21, 15–23 (2001) 第一部分:动物实验中的给药体积与给药速度 一、一般给药体积与速度 对于各种给药途径的最大给药体积,取决实验动物种属和制剂性质。一般推荐给药最大容积为见附表((欧洲联盟欧洲制药工业协会联合会,2000)。 特殊给药途径每次的给药体积(英国药业会,1995):每眼0.01 ml;⑥直肠0.5 ml/kg;⑦阴道:大鼠0.2 ml,兔1 ml;⑧吸入2 mg/L;⑨鼻:猴或犬每鼻孔0.1 ml。 表1各种给药途径的给药体积及可能的最大给药体积a (欧洲联盟欧洲制药工业协会联合会,2000) 给药途径与体积 (ml/kg, except b ml/site)d 动物种属 Oral sc ip im iv (单次) iv (缓慢注射) 小鼠10 (50) 10 (40) 20 (80) 0.05b (0.1)b 5 (25) 大鼠10 (40) 5 (10) 10 (20) 0.1b (0.2)b 5 (20) 兔10 (15) 1 (2) 5 (20) 0.25 (0.5) 2 (10) 犬 5 (15) 1 (2) 1 (20) 0.25 (0.5) 2.5 (5) 猴 5 (15) 2 (5) C (10) 0.25 (0.5) 2 c 狨猴10 (15) 2 (5) C (20) 0.25 (0.5) 2.5 (10) 小型猪10 (15) 1 (2) 1 (20) 0.25 (0.5) 2.5 (5) 说明: a:给非水溶液后,确定再次给药时间时应考虑前次药物是否已被吸收。肌肉内注射每天不能 超过2次。皮下注射每天限制在2~3个部位,前述皮下注射部位,不包括弗氏佐剂的使用。

动物实验给药量

动物实验基础知识系列之一:剂量换算 关于剂量换算的问题 最近不少战友询问关于不同实验动物之间或者实验动物与人之间的剂量如何作“等效”换算的问题。 这个问题对学习药理的战友来讲,可能是非常熟悉了。但对于非药理专业但又需做药理实验的战友来说,仍然是令人困扰的问题。 下面我们分以下几点来探讨这个问题。 第一、等效剂量系数折算法换算 第二、体表面积法换算 第三、系数折算法与体表面积法的比较 第四、系数折算法的相对误差 第五、小孩与成人的剂量换算 第六、少常用实验动物剂量间的换算 第七、不同给药途径间的剂量换算 第八、LD50与药效学剂量间的换算 下面我来简单说一下这个问题。 我们在实验中估算一种药物或化合物的使用剂量的时候,差不多是来源于两条途径: 一是查文献,参考别人使用的剂量。有时有现成的,可直接用。有

时没有我们所用动物的剂量,但有其它实验动物的。也有的是有临床用量的,但没有实验动物的。这样,我们就得进行换算。这是我们今天要谈的这种方法。 另一种方法就是根据自己或文献上有关急性毒性的数据来进行估算,以期采用合适的剂量。一般参考数据是LD50。至于该选择LD50的多少分之一来作为参考剂量,众说纷纭。这个我们再另题讨论。 下面我来说一说用第一种方法进行如何换算。 目前我们大多数人用的方法,是参考徐叔云教授主编的《药理实验方法学》。在其附录中有一个表,列出了人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值。这个表,几乎被药理专业的人们奉为经典,一直在科研中沿用。 表如下所示: 请注意最后一行,这个就是我们通常用到的。把人的临床剂量转换为实验动物的剂量。

试着换算一个。 如:人的临床剂量为X mg/kg , 换算成大鼠的剂量: 大鼠的剂量=X mg/kg×70kg×0.018/200g=X mg/kg×70kg×0.018/0.2kg=6.3 X mg/kg. 这也就是说,按单位体重的剂量来算,大鼠的等效剂量相当于人的6.3倍。 在这里,我们要看到每种动物的体重(包括人),在上表中以蓝色显示的。还要注意到折算系数,也就是表中以红色所示的。将人的剂量转换成哪种动物的,就在相应的动物那一列下找到与人的相交的地方的折算系数,将剂量乘以折算系数,再乘上人的体重与那种动物体重的比值。注意体重的单位要化成一致。这个折算系数是以上表中蓝色所示的标准体重计算得来的。 依此类推,我们可以算出小鼠、豚鼠等其它动物剂量与人的比值。小鼠的剂量=X mg/kg×70kg×0.0026/20g=X mg/kg×70kg×0.0026/0.02kg=9.1X mg/kg. 豚鼠的剂量=X mg/kg×70kg×0.031/400g=X mg/kg×70kg×0.031/0.4kg=5.42 X mg/kg. 兔的剂量=X mg/kg×70kg×0.07/1.5kg =3.27 X mg/kg. 猫的剂量=X mg/kg×70kg×0.078/2.0kg=2.73 X mg/kg. 猴的剂量=X mg/kg×70kg×0.06/4.0kg=1.05 X mg/kg. 狗的剂量=X mg/kg×70kg×0.32/12kg =1.87 X mg/kg.

实验动物的麻醉方法

实验动物的麻醉方法 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

实验动物麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成 0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用1%~2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉,也可用0.25%~0.5%溶液作局部浸润麻醉。 (二)常用全身麻醉剂: 1.乙醚乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加;通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动,并且容易引起窒息,在麻醉过程中要注意。但总起来说乙醚麻醉的优点多,如麻醉深度易于掌握,比较安全,而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉,在麻醉初期出现强烈的兴奋现象,对呼吸道又有较强的刺激作用,因此,需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉),通常在麻醉前20-30分钟,皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重5~10mg)及阿托品(每公斤体重0.1mg)。盐酸吗啡可降低中枢神经系统兴奋性,提高痛阈,还可节省乙醚用量及避免乙醚麻醉过程中的兴奋期。阿托品可对抗乙醚刺激呼吸道分泌粘液的作用,可避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞,或手术后发生吸入性肺炎。 进行手术或使用过程中,需要继续给予吸入乙醚,以维持麻醉状态。慢性实验预备手术的过程中,仍用麻醉口罩给药,而在一般急性使用,麻醉后可以先进行气管切开术,通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。在继续给药过程中,要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小(如发现角膜反射消失,瞳孔突然放大,应立即停止麻醉。万一呼吸停止,必须立即施行人工呼吸。待恢复自动呼吸后再进行操作。 2.苯巴比妥钠此药作用持久,应用方便,在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能无多大影响。通常在实验前半至一小时用药。使用剂量及方法为:狗腹腔注射80~100mg/kg体重,静脉注射70~120mg/kg体重(一般每公斤体重给70~80mg即可麻醉,但有的动物要100~120mg才能麻醉,具体用量可根据各个动物的敏感性而定)。兔腹腔注射150~200mg/kg体重。 3.戊巴比妥钠此药麻醉时间不很长,一次给药的有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般使用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显着抑制作用,药品价格也很便宜。用时配成1~3%生理盐水溶液,必要时可加温溶解,配好的药液在常温下放置1~2月不失药效。静脉或腹腔注射后很快就进入麻醉期,使用剂量及方法为:狗、猫、兔静脉注射30~35mg/kg体重,腹腔注射40~45mg/kg体重。 4.硫喷妥钠为黄色粉末,有硫臭,易吸水。其水溶液不稳定,故必须现用现配,常用浓度为1~5%。此药作静脉注射时,由于药液迅速进入脑组织,故诱导快,动物很快被麻醉。但苏醒也很快,一次给药的麻醉时效仅维持半至一小时。在时间较长的实验过程中,可重复注射,以维持一定的麻醉深度。此药对胃肠道无副作用,但对呼吸有一定抑制作用,由于其抑制交感神经较副交感神经为强,常有喉头痉挛,因此注射时速度必须缓慢。实验剂量和方法:狗静脉注射20~ 25mg/kg体重;兔静脉注射7~10mg/kg体重。静脉注射速度以15秒钟注射2ml左右进行。小鼠1%溶液腹腔注射0.1~0.3ml/只;大鼠0.6~0.8ml/只。 5.巴比妥钠使用剂量及方法:狗静脉注射225mg/kg体重;兔腹腔注射200mg/kg体重;鼠皮下注射200mg/kg体重。 6.氨基甲酸乙酯此药是比较温和的麻醉药,安全度大。多数实验动物都可使用,更适合于小动物。一般用作基础麻醉,如使用全部过程都用此麻醉时,动物保温尤为重要。使用时常配成20~25%水溶液,狗、兔静脉、腹腔注射0.75~1g/kg体重。但在作静脉注射时必须溶在生理盐水中,配成5%或10%溶液,及每公斤体重注射10~20ml。鼠1.5~2g/kg体重,由腹腔注射。以上麻醉药种类虽较多,但各种动物使用的种类多有所侧重。如做慢性实验的动物常用乙醚吸入麻醉(用吗啡和阿托品作基础麻醉);急性动物实验对狗、猫和大鼠常用戊巴比妥钠麻醉;对家兔

良好的实验动物给药和采血(包括途径和体积)规范指南

A Good Practice Guide to the Administration of Substances and Removal of Blood,Including Routes and Volumes 良好的实验动物给药和采血(包括途径和体积)规范指南 Karl-Heinz Diehl1, Robin Hull2, David Morton3, Rudolf Pfister4, Yvon Rabemampianina5, David Smith6,*, Jean-Marc Vidal7 and Cor van de Vorstenbosch 8 1Aventis, PO Box 1140, D35001 Marburg, Germany 德国马尔堡市35001区1140信箱安万特公司 2N I B S C, Blanch Lane, South Miimms, Potters Bar, Hertfordshire EN6 3QG 英国赫特福德郡EN6 3QG波特斯巴镇South Miimms布兰奇道英国国家生物制品检定所 3The University of Birmingham, Medical School, Edgbaston, Birmingham B15 2TT 英国伯明翰市B15 2TT艾吉马斯顿伯明翰大学医学院 4Novartis Pharma AG, CH-4002 Basel, Switzerland 瑞士巴塞尔CH-4002诺华制药公司 5Centre de Recherche Pfizer, Etablissement d’Amboise, Z1 Poce′-sur-Cisse-BP 159 37401 Amboise Cedex, France 法国Amboise Cedex Z1 Poce′-sur-Cisse-BP 159 37401 Etablissement d’Amboise 辉瑞研究中心 6AstraZeneca R&D Charnwood, Bakewell Road, Loughborough, Leics LE11 5RH 英国莱斯特郡LE11 5RH拉夫堡市贝克韦尔路Charnwood阿斯利康研究中心 7Aventis, 102 Route de Noisy, 95235 Romainville Ce′dex, France 法国Romainville Ce′dex 95235 Noisy路102号安万特公司 8N V Organon, PO Box 20, 5340 BH Oss, Netherlands 荷兰BH Oss5340 20号信箱欧加农公司 Key words: blood volumes; blood removal; administration substances; laboratory animals; refinement. 关键词:血容量;采血;给药;实验动物;简化 This article is the result of an initiative between the European Federation of Pharmaceutical Industries Associations (EFPIA) and the European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM).Its objectives are to provide the researcher in the safety evaluation laboratory with an up-to-date, easyto-use set of data sheets to aid in the study design process whilst at the same time affording maximum welfare considerations to the experimental animals. 该文章为欧盟制药工业协会(EFPIA)和欧洲替代动物实验方法验证中心(ECVAM)之间的初步结果。其目的在于为安全性评价实验室的研究者提供最新的易于使用的数据库以帮助研究设计过程,同时最大可能地考虑到实验动物的福利。

初学者应该懂的麻醉方法

生理学实验动物的麻醉方法 [ 2006-12-26 10:06:00 | By: mch40911 ] (一)使用挥发性麻醉药 1.乙醚、吗啡合并麻醉方法乙醚麻醉的优点:深度易于掌握,比较安全,麻醉后恢复比较快。缺点:需要专人管理,麻醉初期出现强烈的兴奋现象,对呼吸道有较强的刺激性,需在麻醉前给一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉)。通常在麻醉前20-30分钟,皮下注射盐酸吗啡或硫酸吗啡(每公斤体重5-10毫克)及阿托品(每公斤体重0.1 mg)2.氯仿、乙醚合并麻醉方法氯仿作吸入麻醉药,其麻醉作用比乙醚大,诱导期及兴奋期都极短,吸入气体中含1-2%容量的氯仿即能使动物麻醉,达到外科麻醉期容易,但也易转入延髓麻醉期而危及生命。其麻醉剂量及致死量较为接近,使用时应加以注意。一般与乙醚混合成1:1或1:2比例进行麻醉。麻醉方法基本同乙醚。(二)使用非挥发性麻醉药 1.苯巴比妥钠:该药作用持久,应用方便,在普通麻醉用量下对动物呼吸、血压和其他功能无多大影响。通常在实验前0.5-1h用药。使用剂量和方法为狗、猫腹腔注射80-100mg/kg,静脉注射70-120mg/kg;家兔腹腔注射15 0-200mg/kg。2.戊巴比妥钠:此药麻醉时间不很长,一次给药有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般实验要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用。用时配成1-3%生理盐水溶液,配好的药液的常温下放置1 -2个月不失药效。静脉或腹腔注射后很快进入麻醉期。使用剂量为:狗、猫、兔静脉注射30-35mg/kg,腹腔注射40-45mg/kg,皮下注射40-50mg/kg。大小鼠静脉或腹腔注射35-50mg/kg. 3.氨基甲酸乙酯:此药是比较温和的

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