ZrO2杂化膜的制备及吸附牛血红蛋白的性能

Vol.35高等学校化学学报No.42014年4月 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 784~790 doi:10.7503/cjcu20131265

PVDF /ZrO 2杂化膜的制备及

吸附牛血红蛋白的性能

吴超超,刘　根,徐君莉,张　霞

(东北大学理学院化学系,沈阳110819)

摘要　将3?氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)表面修饰的ZrO 2纳米颗粒添加到聚偏氟乙烯(PVDF)铸膜液中制备了PVDF /ZrO 2杂化膜,应用SEM,TG?DTA 和XRD 对其结构进行了表征.结果表明,ZrO 2纳米颗粒沉积在PVDF 膜孔内和膜表面;ZrO 2的掺杂改变了PVDF 膜孔径的大小,杂化膜的孔径随着ZrO 2粒子负载量的增加而增大.对牛血红蛋白(BHb)的吸附实验结果表明,PVDF /ZrO 2杂化膜对BHb 的吸附量显著高于PVDF 原膜,当BHb 初始浓度为150μg /mL,pH =7,吸附时间为45min 时,PVDF /ZrO 2杂化膜的平衡吸附量为0.181mg /cm 2.其吸附动力学符合一级动力学模型;吸附等温线符合Langmuir 等温方程式.

关键词　有机?无机复合材料;表面吸附;聚偏氟乙烯;二氧化锆;牛血红蛋白

中图分类号　O647 文献标志码　A 收稿日期:2013?12?23.

基金项目:国家自然科学基金(批准号:21103017,51104042)和中央高校基本科研业务费专项资金(批准号:110405007)资助.联系人简介:张　霞,女,博士,教授,主要从事无机?有机复合材料结构与性能研究.Email:xzhang@https://www.wendangku.net/doc/80911615.html,

蛋白质在催化生命体内各种反应二调节代谢二抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用.无论是蛋白质组学研究还是医学临床应用,其先决条件都是以一定纯度并具有生物活性的蛋白质样品为基础.因此,将目标蛋白质组份从复杂基体样品中分离出来是进行后续研究的必要条件[1].固相萃取是从复杂基体样品中分离纯化和富集目标蛋白质的有效方法.为提高萃取分离性能,人们对固相吸附材料进行了大量研究[2~6].随着纳米科技的发展,纳米材料所具有的高表面活性二高表面能和高比表面积使其在制备高性能吸附材料方面表现出巨大的应用前景.例如,碳纳米管[3]和一些金属纳米氧化物[4]在蛋白质的吸附分离过程中表现出优越的性能.纳米二氧化锆(ZrO 2)是目前研究较多的无机纳米材料之一,它具有良好的生物相容性[7],无毒,表面存在的大量羟基( OH)使其表面电性可调节,可利用静电吸附作用及表面键合功能基团实现对蛋白质的吸附分离.Francesca 等[8]在纳米ZrO 2粒子表面共价接枝磷酸(ZrO 2?P)和苯基膦酸磷酸盐(ZrO 2?BP),应用于固定肌红蛋白的研究.实验结果表明,磷酸和苯基膦酸磷酸盐的共价修饰增加了ZrO 2表面的疏水性,提高了对蛋白质的吸附量.

膜分离技术作为一种集浓缩和分离于一体的高效无污染净化技术,已被广泛应用于工业废水和市政污水回收利用及海水淡化等领域.随着膜科学的发展和医学的日益进步,对具有良好生物相容性的医用膜材料的要求越来越高.因此,开发新的膜系统和对现有膜体系进行改性以满足生物医学需求是生命科学和材料科学研究领域的前沿课题[9].聚偏氟乙烯(PVDF)是一种性能优良的膜材料[10,11],由于其突出的化学稳定性二耐辐射特性和生物相容性,PVDF 膜成为一种有着巨大应用前景的新型医用分离材料.将具有良好吸附性能的纳米功能微粒与PVDF 膜技术相结合,构建一类新型的有机?无机杂化膜体系,将结合多孔膜与功能微粒二者的优点,可能实现对蛋白质分子的特异性吸附[12,13].PVDF /ZrO 2复合膜的研究多用于提高PVDF 膜表面的亲水性和抗污染能力[10,14].本文将表面氨基硅烷功能化的ZrO 2纳米粒子与PVDF 膜杂化制备了共混膜,研究了其对牛血红蛋白(BHb)的吸附性能.探讨了不同时间二pH 值二纳米ZrO 2粒子负载量二盐浓度以及BHb 初始浓度等对吸附效率的影响,

并对吸附过程进行了动力学和热力学分析.

1　实验部分

1.1　试 剂

聚偏氟乙烯颗粒(PVDF,M n =3.8×105)购自常熟鸿嘉氟科技有限公司;聚乙二醇600(PEG600)二聚乙烯吡咯烷酮K?30(PVP)和3?氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)购自国药集团化学试剂有限公司;N ,N ?二甲基甲酰胺(DMF)二十二烷基硫酸钠(SDS)二无水乙醇和牛血红蛋白等试剂购自天津市大茂化

学试剂厂.所有试剂使用前均未经过任何处理;实验用水为二次蒸馏水.1.2　PVDF /ZrO 2杂化膜材料的制备

参考文献[15]方法应用水热法制备ZrO 2颗粒:向0.2mol /L 的氧氯化锆水溶液中滴加1.5mol /L 氨水至pH 值为8.将混合液移至聚四氟乙烯水热釜中,于180℃保温2h,沉淀经过滤二洗涤,得ZrO 2粉体.ZrO 2颗粒的表面硅烷化:取2.00g ZrO 2纳米粒子加入三口烧瓶中,加入100mL 体积比为1∶1的乙醇/水溶液,超声30min,加入2mL 3?氨丙基三乙氧基硅烷(APTES),滴加少量的冰乙酸调节至pH =5,于40℃搅拌4h,离心分离,沉淀于60℃真空干燥12h.PVDF /ZrO 2杂化膜的制备:称取一定量上述表面硅烷化的ZrO 2颗粒,超声分散于DMF 中,依次加入PVP 和PVDF 颗粒,于80℃搅拌4h 至其完全分散,室温下静置24h,使用提拉镀膜机在玻璃板上提拉镀膜,提拉速度为100mm /min.将镀有液膜的玻璃板浸入凝固浴中,剥离得到PVDF 膜.具体实验条件如表1所示.

Table 1　Synthetic parameters (mass fraction ,w )of PVDF /ZrO 2hybrid membranes

Sample w (ZrO 2)(%)w (PVDF)(%)w (DMF)(%)w (PVP)(%)PVDF 014842PVDF /ZrO 2?2%214822PVDF /ZrO 2?4%414802PVDF /ZrO 2?6%6147821.3　PVDF /ZrO 2杂化膜的表征

薄膜表面形貌采用日本岛津公司SSX?550扫描电子显微镜(SEM)观察;样品晶体结构测定采用日本理学(Rigaku)D /max?2500PC 型X 射线衍射仪(Cu Kα射线,管电压50kV,管电流100mA,石墨单色器衍射束单色化),扫描速率5°/min,扫描范围10°~90°;TG?DTA 热分析曲线用北京恒久科学仪器厂HCT?1型热分析仪测定,空气气氛,升温速率5℃/min,升温到800℃;BHb 吸光度采用美国Perkin Elmer 公司Lamdba35型紫外?可见分光光度计测定.薄膜的孔隙率(P )通过测量干?湿膜质量及膜厚,应用下式计算[16]:P (%)=m w -m d ρw Aδ×100%(1)式中,m w 为充分润湿膜质量(g);m d 为干膜(80℃干燥24h)质量(g);A 为湿膜面积(cm 2);δ为膜厚

(cm);ρw 为去离子水密度(g /cm 3).

1.4　杂化膜对牛血红蛋白(BHb )的吸附?脱附实验取8mL 150μg /mL BHb 溶液置于离心试管中,加入面积为6cm 2的膜材料.将此溶液置于悬浮振荡器上振荡一定时间后,采用高速离心机离心分离10min(转速9000r /min),取上清液,应用UV?Vis 分光光度计在405nm 处测量吸光度,依据工作曲线确定BHb 的浓度.根据公式(2)计算BHb 的吸附量.改变吸附时间为10~120min,测定吸附量随时间变化曲线;控制BHb 溶液pH 值为3~10,测定吸附量随pH 值变化关系曲线;改变BHb 初始浓度为50~350μg /mL,测定BHb 吸附等温线;改变NaCl 浓度为0.05~0.3mol /L,测定溶液离子强度对于BHb 吸附量的影响.

Q =(c b -c a )×V S (2)587　No.4　吴超超等:PVDF /ZrO 2杂化膜的制备及吸附牛血红蛋白的性能

式中,c b 为吸附前蛋白质浓度(mg /L);c a 为吸附后蛋白质浓度(mg /L);V 为蛋白质吸附液的总体积(mL);S 为杂化膜的面积(cm 2).将吸附BHb 后的膜用pH =5的缓冲溶液洗涤至上清液中不再检测出BHb,然后将膜分别置于质量分数为0.5%的SDS二质量分数为1%的SDS二三羟甲基氨基甲烷(Tris)?HCl(pH =8.8)和0.1mol /L NaCl 的8mL 洗脱液中,于悬浮振荡器上振荡60min,分离,取其上清液,用紫外分光光度计在405nm 处测量吸光度,并根据下式计算洗脱率:r (%)=c c b -c a ×100(3)式中,r 为洗脱液对蛋白质的洗脱率(%);c b 为吸附前蛋白质浓度(mg /L);c a 为吸附后蛋白质浓度(mg /L);c 为洗脱后溶液中蛋白质的浓度(mg /L).2　结果与讨论

2.1　PVDF /ZrO 2杂化膜的结构

图1为经APTES 表面修饰的ZrO 2颗粒的XRD 谱图,可观察到单斜相(PDF No.00?003?0515)和四Fig.1　XRD pattern of ZrO 2surface modified

by APTES

t:Tertragonal phase;m:monoclinic phase.方相(PDF No.00?036?0420)ZrO 2的晶面衍射峰,其中单斜相衍射峰的相对强度较大,为主要存在

相.根据Scherrer 公式:D =Kλ/B 1/2cos θ(D 为晶粒

大小;K 为0.89;λ为入射X 射线的波长,Cu Kα射线波长为0.154nm;B 1/2为衍射峰的半峰宽,单

位为弧度;θ为布拉格衍射角),依据(111)衍射峰

计算得纳米ZrO 2的晶粒尺寸为30nm.

Fig.2　SEM images of PVDF (A )and PVDF /ZrO 2hybrid membranes (B D )with different

ZrO 2loading amounts

(B)2%;(C),(D)4%;(E),(F)6%.

将此ZrO 2微粒共混于PVDF 铸膜液中制得的PVDF /ZrO 2杂化膜的形貌如图2所示.由图2(A)可见,纯PVDF 膜的孔分布较为均匀,平均孔径为

200nm.共混掺杂2%,4%及6%的ZrO 2纳米粒子后[图2(B)~(F)],杂化膜表面及膜孔内沉积大量ZrO 2粒子[图2(D)和(F)标记处显示ZrO 2粒子沉积在膜孔内表面],且随着ZrO 2粒子掺杂量的增加,杂化膜的孔径越来越大,膜孔结构变得不规则,

膜孔分布不均匀.根据图2(B),(C)和(E),测得PVDF 膜的平均孔径分别为270,330和670nm.根据图2(D),测得ZrO 2纳米颗粒的平均粒径约为90nm.687高等学校化学学报 Vol.35　

Fig.3　TG (a )?DTA (b )curves of PVDF /ZrO 2?2%

composite membranes

在PVDF 溶致相转换成膜过程中,掺杂的纳米

颗粒成为形核中心,导致PVDF 由均相成核改变为

多相成核,纳米颗粒的掺杂量影响到成膜过程中形

成的PVDF 晶粒大小以及晶粒间孔洞大小.适量纳

米颗粒的存在可以降低膜的孔径,但是当纳米颗粒

掺杂量增大时,由于纳米颗粒之间的团聚,可能增

加PVDF 膜的粗糙度,致使膜孔径增大.相似结果

如Shi 等[16]报道的PVDF /TiO 2杂化膜的制备,杂

化膜的孔径在TiO 2掺杂量为0.45%(质量分数)时

达到最小,然后随着TiO 2量的增多膜孔径变大.PVDF /ZrO 2?2%杂化膜的TG?DTA 曲线如图3所示,可见在170℃附近出现一个微弱的吸热峰,对应PVDF 的熔点;在410.6和516.7℃处出现明显的放热峰:温度为410.6℃时,PVDF 开始分解生成氟化氢(HF)以及氟碳有机物,释放热量;当温度升至516.7℃时,氟碳化合物继续分解生成HF,CO 2和H 2O 等小分子,释放大量热量.在此温度区间内,TG 曲线出现明显失重.当温度超过570℃后TG 曲线趋于平缓.分别测定负载量不同的杂化膜的TG 曲线,根据其在360~550℃温度区间内的失重率,计算得到杂化膜中ZrO 2的负载量,结果列于表2.所得结果与理论计算值接近,说明加入的ZrO 2粒子完全沉积在PVDF 膜上.

Table 2　Loading amount of ZrO 2and porosity of the hybrid membranes Sample Loading amount of ZrO 2(%)

Porosity(%)Sample Loading amount of ZrO 2(%)Porosity(%)PVDF 090.30PVDF /ZrO 2?4%30.8591.99PVDF /ZrO 2?2%23.6490.85PVDF /ZrO 2?6%42.3592.35 PVDF 以及PVDF /ZrO 2杂化膜的孔隙率测定结果如表2所示.与PVDF 原膜相比,共混杂化ZrO 2

纳米颗粒后,由于膜孔径变大,杂化膜的孔隙率略有增加.2.2　杂化膜对牛血红蛋白(BHb )的吸附性能2.2.1　吸附时间对BHb 吸附量的影响　当BHb 初始浓度为150mg /L,pH =7时,PVDF 原膜和杂化Fig.4　Adsorption capacities of BHb on PVDF (a )and PVDF /ZrO 2?2%(b )with different contact times 膜(PVDF /ZrO 2?2%)对BHb 的吸附量随时间的变化曲线如图4所示.由图4可见,PVDF 原膜及PVDF /ZrO 2杂化膜对BHb 的吸附是一个快速过程,

在吸附开始15min 内,吸附量迅速增加,45min 时

达到吸附平衡.PVDF 原膜的平衡吸附量为0.086mg /cm 2,PVDF /ZrO 2复合膜的平衡吸附量为0.181

mg /cm 2.为了进一步了解BHb 在膜表面的吸附动力学,分别采用一级反应二二级反应和扩散3种动力学模型对实验数据进行拟合分析,动力学方程式如下[17]: 准一级反应:Q t =Q e (1-e -k 1t )(4) 准二级反应:Q t =k 2Q e 2t /(1+k 2Q e t )(5) 扩散模型:Q t =k d t 1/2(6)式中,Q t 为t 时刻的吸附量(mg /cm 2);Q e 为平衡吸附量(mg /cm 2);t 为吸附时间(min);k 1为准一级反应方程系数(min -1);k 2为准二级反应方程系数[cm 2/(mg 四min)];k d 为扩散系数[mg /(cm 2四min 1/2)].对于PVDF 原膜,3种拟合曲线的线性相关系数分别为0.9541,0.9006和0.6505;对于PVDF /ZrO 2杂化膜,3种拟合曲线的线性相关系数分别为0.9655,0.9207和0.7045.说明无论是PVDF 原膜7

87　No.4　吴超超等:PVDF /ZrO 2杂化膜的制备及吸附牛血红蛋白的性能

还是PVDF/ZrO2复合膜,一级反应模型更适合于膜表面吸附过程.吸附过程可以分为2个阶段,第一阶段为快速反应阶段,此阶段为膜表面的物理快速吸附过程;第二阶段为平衡阶段,吸附达到平衡,吸附量基本保持不变.根据一级反应模型,计算得到PVDF原膜和PVDF/ZrO2杂化膜的吸附速率常数(k1)分别为0.0477和0.0473min-1.

2.2.2　溶液pH值对BHb吸附量的影响　当BHb的初始浓度为150mg/L,膜面积为6cm2,吸附时间为60min时,BHb吸附量随pH值的变化曲线如图5所示.由图5可见,当pH<7时,PVDF原膜和PVDF/ZrO2杂化膜对BHb的吸附量随着pH值的增加逐渐增大;当pH=7时,吸附量达到最大,PVDF 和PVDF/ZrO2对BHb的吸附量分别为0.115和0.180mg/cm2;继续增大pH值,BHb的吸附量又逐渐降低.

通常蛋白质在等电点附近表现出最大的吸附容量[18,19],BHb的等电点为6.7~6.9.在等电点附近,蛋白质表面带微弱的电荷,由于布朗运动,蛋白质很容易发生碰撞二凝聚而被吸附.pH值偏离蛋白质等电点时,蛋白质表面带正电荷或负电荷,蛋白质分子之间倾向于远离而不是聚集吸附.pH值过

大或过小对蛋白质的吸附都不利,甚至导致蛋白质变性

.

Fig.5　Adsorption capacities of BHb on PVDF(a)and PVDF/ZrO2?2%(b)hybrid membranes with

different pH

values Fig.6　Adsorption capacity versus initial concentration of BHb on PVDF(a)and PVDF/ZrO2?2%(b)

composite membranes

2.2.3　BHb吸附等温线　当pH=7,膜面积为6cm2,吸附时间为60min时,复合膜吸附量随BHb初始浓度的变化曲线如图6所示.由图6可见,当BHb初始浓度较低时,膜对蛋白质的吸附量随着BHb 初始浓度的增加而增大.对于PVDF原膜,当BHb初始浓度为100mg/L时,吸附基本达到饱和,继续增加BHb浓度,吸附量基本保持不变;对于PVDF/ZrO2复合膜,当BHb初始浓度为200mg/L时,吸附达到饱和状态.

对于单分子层吸附过程,可以分别应用Langmiur和Freundlich等温方程对于等温线进行拟合. Langmiur和Freundlich等温方程式如下[20]:

Q=K a Q m C e/(1+K a c e)(7)

Q=K F c1/n e(8)式中,Q为吸附量(mg/cm2);Q m为静态饱和吸附量(mg/cm2);c e为BHb的平衡浓度(mg/L);K a为Langmiur方程的系数(L/mg);K F为Freundlich方程的系数(mg1-1/n四L1/n四cm-2).拟合数据结果如表3所示.PVDF原膜基本符合Langmiur吸附模型,拟合曲线的线性相关系数为0.9892,其静态饱和吸附量(Q m)为0.1050mg/cm2;与原膜相比,杂化膜的R2值偏小,说明氨基硅烷修饰的ZrO2纳米粒子的加入,对膜表面的性质有一定程度的改变,其静态饱和吸附量(Q m)为0.2056mg/cm2.

Table3　Fitting results of isotherm curves of ZrO2and PVDF/ZrO2membranes

Sample Langmiur equation Freundlich equation

Q e/(mg四cm-2)K a/(L四mg-1)R2K F/(mg1-1/n四L1/n四cm-2)n R2 PVDF0.10500.08260.98920.03985.7570.8186 PVDF/ZrO2?2%0.20560.11330.94640.07174.9940.7188 2.2.4　盐浓度对BHb吸附量的影响　当BHb初始浓度为150μg/mL,膜面积为6cm2,pH=7,吸附887高等学校化学学报 Vol.35　

时间为60min 时,PVDF 以及杂化膜吸附量随着溶液中盐浓度变化的曲线如图7所示.由图7可见,随着NaCl 浓度的增加,BHb 在膜表面的吸附减少.当NaCl 浓度为0.05mol /L 时,PVDF 原膜的吸附量由0.080mg /cm 2降至0.023mg /cm 2,PVDF /ZrO 2杂化膜的吸附量由0.181mg /cm 2降至

0.06mg /cm 2,膜吸附能力整体下降近70%.说明膜与蛋白质之间存在着静电吸附作用力,随着盐浓度的增加,溶液中离子强度增加,蛋白质与膜之间的静电作用被屏蔽,相互作用力减小,导致蛋白质吸附量减少.PVDF /ZrO 2复合膜吸附量减少的幅度比PVDF 原膜大,说明ZrO 2纳米颗粒的杂化使膜表面与蛋白质的静电作用力增强,受NaCl 浓度的影响增强

.Fig.7　Adsorption capacities of BHb on PVDF (a )and

PVDF /ZrO 2?2%(b )under different NaCl con?centrations Fig.8　Adsorption kinetics of BHb on PVDF /ZrO 2with different ZrO 2loading amounts

2.2.5　ZrO 2负载量对BHb 吸附量的影响　在BHb 初始浓度为150μg /mL,膜面积为6cm 2,pH =7的条件下,不同ZrO 2负载量的杂化膜对BHb 的吸附量随时间的变化如图8所示.由图8可见,PVDF /ZrO 2杂化膜的吸附量均高于PVDF 原膜,而且随着ZrO 2负载量的增加,杂化膜对BHb 的平衡吸附量逐渐增加,说明ZrO 2粒子杂化有利于对蛋白质的吸附.纳米ZrO 2粒子表面经氨基硅烷改性后,含有丰富的氨基,可以有效增大膜表面与蛋白质分子间的氢键和静电作用力.同时,随着ZrO 2粒子负载量的增加,膜孔隙率增加,膜孔径逐渐变大,ZrO 2粒子附着在膜孔内部,使蛋白质分子可能进入到膜孔内部而被吸附,增大了膜的结合位点,从而导致吸附量增大.2.2.6　BHb 的洗脱实验　分别采用pH =8.8的Tris?HCl 溶液二0.5%的SDS二1%的SDS 和0.1mol /L 的NaCl 洗脱液对复合膜上吸附的蛋白质进行洗脱.由表4可见,用0.1mol /L 的NaCl 溶液作为洗脱剂效果最好,对BHb 的洗脱率达到7

3.7%;表面活性剂SDS 洗脱效果次之,0.5%SDS 的洗脱率为61.94%;1%SDS 的洗脱率为6

4.39%;Tris?HCl 溶液(pH =8.8)的洗脱效果最差,只有不到20%的BHb 被洗脱下来.Table 4　Elution rates of adsorbed BHb with different eluants

Eluant Tris?HCl solution(pH =8.8)SDS(0.5%)SDS(1%)NaCl(0.1mol /L)Eluant rates(%)19.7661.9464.3973.703　结 论

将表面功能化的ZrO 2纳米粒子与PVDF 铸膜液共混,利用溶致相转化方法制备了PVDF /ZrO 2杂化膜.ZrO 2纳米粒子附着在PVDF 膜表面或穿插在复合膜的膜孔内部.ZrO 2纳米粒子杂化使PVDF 膜孔由分布较均匀的纳米孔变成纤维状结构的微米孔.PVDF 原膜的平均孔径约为200nm;负载2%,4%和6%的ZrO 2后,膜孔径由200nm 增加到670nm.BHb 吸附实验结果表明,ZrO 2杂化PVDF 膜表现出增强的吸附能力,静态饱和吸附量达到0.2056mg /cm 2,高于相同条件下PVDF 原膜的吸附量(0.1050mg /cm 2).此杂化膜对BHb 的吸附动力学模型为准一级反应模型,吸附等温线模型为Lang?miur 单分子层吸附模型.应用0.1mol /L 的NaCl 溶液可对吸附的BHb 进行洗脱,洗脱率为73.7%.

参　考　文　献

[1]　Al?Ghobahy M.A.,Williams M.A.K.,Laible G.,Harding D.R.K.,Talanta ,2013,109,7 12987　No.4　吴超超等:PVDF /ZrO 2杂化膜的制备及吸附牛血红蛋白的性能

[2]　Li Q.,Bi Q.Y.,Lin H.H.,Bian L.X.,Wang X.L.,J.Membrane Sci.,2013,427,155 167

[3]　Hu L.B.,Hecht D.S.,Grüner G.,Chem.Rev.,2010,110,5790 5844

[4]　Simón?Vázquez R.,Lozano?Fernández T.,Peleteiro?Olmedo M.,González?Fernándeá.,Colloids Surf.B,2014,113,198 206

[5]　Peng H.P.,Liang R.P.,Zhang L.,Qiu J.D.,Electrochim.Acta,2011,56,4231 4236

[6]　Tang Y.,Zong E.,Wan H.,Xu Z.,Zheng S.,Zhu D.,Micropor.Mesopor.Mater.,2012,155,192 200

[7]　Zhang Z.Q.,Wang K.Z.,Bai C.Y.,Li X.B.,Damg X.Q.,Zhang C.,Colloids Surf.B,2012,89,40 47

[8]　Francesca B.,Antonio C.,Maria A.Q.,Langmuir,2005,21,11099 11104

[9]　Kumar M.,Ulbricht M.,J.Membrane Sci.,2013,448,62 73

[10]　Liu F.,Hashim N.A.,Liu Y.T.,Abed M.R.M.,Li K.,J.Membrane Sci.,2011,375,1 27

[11]　Zuo X.T.,Shi W.X.,Tian Z.D.,Yu S.L.,Wang S.,He J.J.,Desalination,2013,311,150 155

[12]　Zhang X.,Wang Y.,You Y.T.,Meng H.,Zhang J.H.,Xu X.X.,Appl.Surf.Sci.,2012,263,660 665

[13]　Yu J.,Gan H.Y.,He Y.,Yuan J.,Chen H.L.,Chem.J.Chinese Universities,2003,24(5),935 939(虞骥,甘宏宇,何奕,袁

骏,陈欢林.高等学校化学学报,2003,24(5),935 939)

[14]　Bottino A.,Capannelli G.,Comite A.,Desalination,2002,146,35 40

[15]　Wen L.Z.,Deng S.H.,Huang H.M.,Zhou L.Q.,Rare Metals,2003,27,486 490(温立哲,邓淑华,黄慧民,周立清.稀有

金属,2003,27,486 490)

[16]　Shi F.M.,Ma Y.X.,Ma J.,Wang P.P.,Sun W.X.,J.Membr.Sci.,2012,389,522 531

[17]　Zhao X.D.,Song L.Z.,Fu J.,Tang P.,Liu F.,J.Hazard.Mater.,2011,189,732 740

[18]　Meng H.,Chen X.W.,Wang J.H.,J.Mater.Chem.,2011,21,14857 14863

[19]　Li X.,Yu Q.,Zhang Y.X.,Wu Z.Q.,Chen H.,Acta Polym.Sin.,2011,8,812 816(李鑫,于谦,张燕霞,武照强,陈红.高

分子学报,2011,8,812 816)

[20]　Zhao Z.G.,Application Principle of Adsorption,Chemical Industry Press,Beijing,2005,195 200(赵振国.吸附作用应用原理,北

京:化学工业出版社,2005,195 200)

Synthesis of PVDF/ZrO

2Hybrid Membranes and Its

Adsorption Property Toward Bovine Hemoglobin?

WU Chaochao,LIU Gen,XU Junli,ZHANG Xia*

(Department of Chemistry,College of Sciences,Northeastern University,Shenyang110819,China) Abstract　PVDF/ZrO2hybrid membranes was synthesized by blending the PVDF casting solution and ZrO2 nanoparticles whose surface was modified by3?aminopropyltriethoxysilane.Scanning electron microscopy (SEM),X?ray diffraction(XRD)and thermal analysis were used to character the membranes.The results showed that the functionalized ZrO2nanoparticles were deposited on the surface and entrapped into the inner pores of PVDF.The pore size of PVDF was affected by ZrO2additions,which were enlarged as the ZrO2 loading amounts increased.The adsorption experiments of BHb showed that an enhanced adsorption capacity was observed for PVDF/ZrO2hybrid membranes.When the initial concentration of BHb was150μg/mL,the pH value was7and the contact time was45min,the maximum capacity of hybrid membrane was0.181 mg/cm2.Its adsorption kinetics was in accordance with the first order kinetics model,and the adsorption iso?thermal was fitted to the Langmuir equation.

Keywords　Organic?inorganic hybrid material;Surface adsorption;Polyvinylidenefluoride(PVDF);Zirco?nium oxide;Bovine hemoglobin

(Ed.:N,K)

?Supported by the National Natural Science Foundation of China(Nos.21103017,51104042)and the Fundamental Research Funds for the Central Universities,China(No.110405007).

097高等学校化学学报 Vol.35　

氧化锆陶瓷的制备工艺

氧化锆陶瓷的制备工艺 一氧化锆陶瓷的原料 氧化锆工业原料是由含锆矿石提炼出来的。 斜锆石（ZrO2） 自然界锆矿石 锆英石（ZrO2 ·SiO2） 二氧化锆陶瓷的提炼方法 氯化和热分解 碱金属氧化物分解法 石灰溶解法 等离子弧法 提炼氧化锆的主要方法 沉淀法 胶体法 水解法 喷雾热分解法 ㈠氯化和热分解法 ZrO2?SiO2+4C+4Cl2→ZrCl4+SiCl4+4CO 其中ZrCl4和SiCl4以分馏法加以分离，在150–180℃下冷凝出ZrCl4然后加水水解形成氧氯化锆，冷却后结晶出氧氯化锆晶体，经焙烧就得到氧化锆。 ㈡碱金属氧化物分解法 ZrO2?SiO2+NaOH→Na2ZrO3 +Na2SiO4+H2O

ZrO 2?SiO 2+Na 2CO 3→Na 2ZrSiO 3+CO 2 ZrO 2?SiO 2+Na 2C03→Na 2ZrO 3+Na 2Si03+CO 2 ①反应后用水溶解，滤去Na 2Si03； ②Na 2Zr03→水合氢氧化物→用硫酸进行钝化→Zr 5O 8(SO 4)2·x H 20→ 氧化锆粉 ㈢石灰熔融法 CaO+ZrO 2·SiO 2→ZrO 2+CaSiO 3 焙烧后用盐酸浸出除去CaSiO3 ㈣等离子弧法 锆英石砂（ZrO 2?SiO 2） ㈤沉淀法 沉淀法是在羧基氯化锆等水溶性锆盐与稳定剂盐的混合水溶液中加入氨水等碱性类物质，以获得氢氧化物共沉淀的方法。将共沉淀物干 焙烧 氨 水 调 整 PH 值 用水水解 ZrO2 SiO2 注入高温等离子弧中 熔化并离解 凝固后SiO 2粘在ZrO 2结晶表面 用液体NaOH 煮沸可除SiO 2 ZrO 2和硅酸铀 氧化锆 洗涤

铝材技术要求

附件: 材料及施工要求 1、总体要求 1.1所有材料必须保证为全新及没有缺陷的一级品或优等品，乙方必须负责选购材料，确定的材料必须符合此标书和有关图纸的设计要求，乙方必须提供材料的有关试验报告以确认材料的质量。 1.2所有产品的规格、色彩、图案必须由甲方与设计院确认后方可生产加工。甲方与设计院有权根据设计的要求，更改颜色及图案，产品价格不得因此而引起变化。 1.3所有产品的异型尺寸由乙方根据现场的实际情况，加工生产。 1.4所有产品必须取得国家权威机构相关尚在有效期内的产品检测报告及消防部门颁发的合格证书。根据《建筑内部装修设计防火规范》的要求，航站楼内装修材料燃烧性能等级不低于：顶棚、墙面为A级，地面、隔断、固定家具及其它装饰材料为B1级。 2、铝合金天花 2.1总体要求 1.天花完成后要求平整，无明显的凹凸、下垂。 2.天花板材面漆无明显色差。 3.铝合金天花必须采用容易装卸、检修、耐用及不变形的构造方式，以便吊顶内设 备管线的安装维护。天花龙骨必须符合技术规范要求。 产品1：针孔和无孔蜂窝铝板天花吊顶板 产品技术规格：厚度为:12mm,按图纸要求规格 1、系统说明 针对本项目生产的蜂窝板吊顶，完全符合本项目要求，按国家及行业有关金属天花的生产及检验标准进行加工制作，产品包括下述内容及标准： 1.1、面层铝板 1) 材质：铝板材料的厚度为≥1.0mm，背板厚度≥0.5㎜，的AA3003的优质铝锰合金，基 材符合GB/T3190及GB3880规定。 2) 表面处理：室内蜂窝板正反两面采用聚酯预滚涂处理，选用世界知名品牌美国阿克苏. 诺贝尔公司(AKZO Nobel)或德国Becker涂料或同等档次之涂料；室外蜂窝板涂层采用美国PPG工业公司生产（或同等档次之涂料）的氟碳喷涂，能抵御恶劣气候条件及不同环境，其性能达到或超过YS/T429.2-2000.AAMA605.2-1998的标准。 漆膜：正面三涂三烤，漆膜厚度≥25μm，背面一涂一烤，漆膜厚度≥5μm。漆膜色均无色差，附着力强，质感厚重，光洁美观； 保护膜：涂层加工完毕后在产品表面进行压膜处理，可以保护产品。保护膜在施工结束后全部去除； 漆膜硬度：用H级硬度铅笔对干膜刻划，膜层无划断。 耐冲击性：Kg.cm不脱漆； 抗腐蚀性：按GB/T1771标准，≥500h，膜层无脱落、起皮、失粘或外观变化。 3）穿孔：采用精密数控自动冲床冲，蜂窝铝板正面板开针孔，孔径Ф=5.0mm，孔中心矩12.48㎜，穿孔率25.2%，孔中心夹角60°，内贴黑色进口吸音无纺布，并应提供有关无纺布

超细氧化锆的制备及应用

超细氧化锆的制备及应用 罗振勇，刘志宏 中南大学冶金科学与工程学院，长沙 (410083) E-mail：yi012@https://www.wendangku.net/doc/80911615.html, 摘要：本文介绍了目前国内外超细氧化锆的制备方法和超细氧化锆的应用现状。 关键词：二氧化锆，制备，应用 ZrO2的优良的热稳定性和化学稳定性及其突出的机械性能，使其成为重要的功能材料之一。二氧化锆是一种具有高熔点、高沸点、导热系数小、热膨胀系数大、耐磨性好、抗腐蚀性能优良的无机非金属材料,在许多不同的领域,诸如陶瓷颜料、工程陶瓷、宝石业、压电元件、离子交换器以及固体电解质等方面有着广泛的用途[1]。近年来,郭景坤、冯楚德等还发现了纳米二氧化锆陶瓷的超塑性行为及特异表面行为这些使得二氧化锆的应用十分广泛[2]。有关二氧化锆的研究已成为当今研究界的一大热点[3]。 1. 超细氧化锆的制备技术 超细粉体的制备一般分为物理法和化学法。物理法包括机械研磨、固相法等；化学法包括湿化学法(包括沉淀法、水热法、微乳液法等)、CVD法、溶剂蒸发法等。下面简要介绍国内外制备超细氧化锆的方法[4~9]。 1.1 固相法 固相法是通过在研钵内研磨，使固相的氧氯化锆分别与固相的氢氧化钠或六次甲基四胺或氢氧化钠和碳酸锂的混合研磨物发生发应，生成纳米氧化锆粉体的前驱体-氢氧化锆，然后中温烧结制得纳米二氧化锆粉体[10]。王焕英、宋秀芹等人用这种方法成功制得了粒径约为10nm左右的超细ZrO2[11]。此法的一个显著特点是能在低温下合成通常要求高温加工才能制备的材料，但在球磨过程中易引入杂质，仅适于制备金属材料[12]。 1.2 化学气相法 化学气相法是让一种或数种气体通过热、光、电、磁和化学等作用而发生热分解、还原或其他反应，从气相中析出纳米粒子，此法适合制备金属纳米粉末以及金属和非金属的氧、氮、碳化物的纳米粉末。可分为：激光诱导化学气相沉积法、等离子体诱导化学气相沉积法和热化学气相沉积法三种方法。用颗粒大小为小为1 cm的球状或板状单晶ZrCl4做原料，通入氮气、氧气，于240℃~250℃下ZrCl4升华，加热到600℃，可得0.04-0.08μm的四方晶型ZrO2超细粉末。该法制备的纳米颗粒纯度高，分散性好，粒度分布窄；缺点是设备要求较高，产量相对较低，导致成本较高，不易实现工业化生产[13、14]。 1.3 沉淀法 沉淀法是在包含一种或多种阳离子的可溶性盐溶液中，加入沉淀剂使一种或多种阳离子同时沉淀，或在一定温度下使溶液发生水解、形成不溶性的氢氧化物或盐类从溶液中析出，然后将溶液中的阴离子洗去，最后经热分解即得所需的氧化物粉末。它包括直接沉淀法、均匀沉淀法、共沉淀法和水解沉淀法等。河北师范大学的王焕英、宋秀芹等人，以NH3·H2O 和 ZrOCl2·8H2O为反应原液成功得到纳米ZrO2粉体[15]。沉淀法的共同特点是操作简单,可以

喷塑技术要求及验收规范.doc

喷塑技术要求及验收规范 LC-PSGF-001 需方（甲方）：北京绿创声学工程股份有限公司供方（乙方）： 签订日期：

喷塑技术要求及验收规范 1. 适用范围 本规范适用于绿创公司外协喷塑产品的技术要求和检验验收。 2.供应商一般要求 2.1喷涂设施 2.1.1喷涂车间及喷涂生产线所处环境应保持清洁、避免灰尘、油污等污染。 2.1.2喷涂车间温湿度等环境参数按相关标准规范或喷涂工艺执行。 2.1.3压缩空气应无油无水（操作者可用压缩空气对着白纸吹2-3min检查纸上应无油、水痕迹）2.1.4烘房应保证温度均匀，有效烘烤区域内应能控制在±5°之内。 2.2.喷涂操作要求 2.2.1喷涂生产及检验的仪器量具应在有效的校验期内。 2.2.2喷涂操作者应带干净的手套接触待喷涂零件。 2.2.3喷涂前应对零件进行脱脂、除锈、磷化、水洗等前处理。 2.2.4喷涂操作必须遵守相关涂料的工艺规范或喷涂工艺要求。 2.2.5一般情况下，产品喷涂表面外观在加工时要求100%进行检验（操作者自检）喷涂检验 内容可参照本标准执行。 3.涂层产品质量验收准则 3.1外观项目（目测） 3.1.1喷塑颜色与图纸要求及确认的色卡或样板是否一致。色卡或样板采用经认可的签样。 3.1.2进厂验收采用抽样检验，抽检数量为每批次产品数量的10%，特殊产品根据产品的具体要求检验。 3.1.3应在标准光源对色灯箱CAC-600（无设备条件时则要求在天然散射光线或光照度不低于2×40W光源环境下），以目视方法进行。光照度通常在D65，背景颜色为中灰色。被测品与眼睛的距离为500㎜，检验时在±15°范围内。

血红蛋白电泳

血红蛋白电泳检查（电泳法） 1. 原理 血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。 2. 标本采集 2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。 2.2 标本种类：抗凝血 2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。清洁试管中，充分混匀。 4. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。 5. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。 6. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。 7. 试剂 7.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂 7.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司 7.3 包装规格：150tests 7.4 试剂盒组成 琼脂糖凝胶10块溶血素1瓶 缓冲液条带10包×2条薄滤纸1×10张 氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml 点样模具滤纸10条×1盒

钢结构涂料技术要求

钢结构防腐涂装技术要求 根据JGJ/T 251-2011《建筑钢结构防腐蚀技术规程》; 防腐设计按长效防腐，大于15年设计。 表面处理：需喷砂处理至Sa 2 ?，表面应无可见的油脂和污垢，并且没有氧化皮、铁锈、油漆涂层和异物。粗糙度应满足30-85微米。 钢结构涂装配套：底漆/中间漆/防火涂料（有防火要求部位，并符合有关耐火极限要求）/面漆。 防腐设计 1.室内（外）钢结构：环氧富锌底漆干膜厚度60μm；环氧云铁中间漆干膜厚度 140 μm；脂肪族聚氨酯面漆干膜厚度60 μm； 2.室外钢结构：环氧富锌底漆干膜厚度60μm；环氧云铁中间漆干膜厚度140μm； 厚浆型聚硅氧烷面漆干膜厚度80 μm。 技术要求 1.底漆: 环氧富锌底漆，干膜中锌粉含量大于等于65%，体积固体含量不小于 65%； 2.中间漆: 快干环氧中间漆，体积固体含量不小于80%，快干型且具有-5度低温 固化功能； 3.面漆1：厚浆型聚硅氧烷面漆，不含异氰酸酯，体积固体份含量不小于76%； 4.面漆2：脂肪族聚氨酯面漆，其体积固体份含量不小于60%，低VOC，没有最大 覆涂间隔，不使用含铅、铬的颜料。 注释： 1.标明固体含量和锌粉含量值，此指标是反映防腐性能和高低端产品的重要因素； 漆膜厚度见项目提案。

2.如果预算较好或防腐对此项目比较关键（如沿海城市），室外钢结构可优先面 漆聚硅氧烷，环保，耐候性好，后期使用多年观感好，不含异氰酸酯；如果预算一般，室内外面漆都可用聚氨酯，也是常用的防腐配套。 各涂层的性能指标： A．环氧富锌漆及涂层试件的性能指标 B．快干环氧中间漆涂料及涂层试件的性能指标 C. 脂肪族聚氨酯涂料及涂层试件的性能指标

血红蛋白

血红蛋白是血细胞的重要组成部分，它负责将氧气从肺部输送到身体的其它组织。血红蛋白在任一时刻所含的氧气量被称为血氧饱和度(即SpO2)。 血氧饱和度是反映人体呼吸功能及氧含量是否正常的重要生理参数，它是显示我们人体各组织是否健康的一个重要生理参数。严重缺氧会直接导窒息、休克、死亡等悲剧的发生。 在肺部，氧气附着在受红细胞约束的蛋白质上，称为血色素（符号Hb），血液中的血色素有两种形态：氧合血红蛋白(HbO2)和还原血红蛋白(Hb)，则 血氧饱和度SpO2=(HbO2x100)/(HbO2+Hb)x100% 血氧仪的测试原理是：氧合血红蛋白和还原血红蛋白在可见光和接近红外线的频谱范围内具有不同的吸收特性，还原血红蛋白吸收较多的红色频率光线，吸收较少的红外频率光线；而氧合血红蛋白吸收较少的红色频率光线，吸收较多的红外频率光线。这个区别是SpO2测量系统的最基本依据。 为测量人体对红光和红外光线的吸收。红色和红外线发光二极管位置相互靠得尽可能近，发射的光线可透过人体内的单组织点。先由响应红色和红外光线的单个光电二极管接收光线，然后由互阻放大器产生正比于接收光强的电压。红色和红外LED通常采用时间复用的方式，因此相互间不会干扰。环境光线经估计将从每个红色和红外光线中扣除。测量点包括手指、脚趾和耳垂。 脉搏血氧仪提供了以无创方式测量血氧饱和度或动脉血红蛋白饱和度的方法。脉搏血氧仪的工作原理基于动脉搏动期间光吸收量的变化。分别位于可见红光光谱(660纳米)和红外光谱(940纳米)的两个光源交替照射被测试区(一般为指尖或耳垂)。在这些脉动期间所吸收的光量与血液中的氧含量有关。微处理器计算所吸收的这两种光谱的比率，并将结果与存在存储器里的饱和度数值表进行比较，从而得出血氧饱和度。 典型的血氧仪传感器有一对LED，它们通过病人身体的半透明部位(通常是指尖或耳垂)正对着一个光电二极管。其中一个LED是红光的，波长为660nm；另一个是红外线的，波长是940nm。血氧的百分比是根据测量这两个具有不同吸收率的波长的光通过身体后计算出的。

涂料性能及技术要求

E-26海工钢筋砼防腐专用涂料性能及施工技术要求 宁波大达化学有限公司 二零零八年六月

E-26海工钢筋砼防腐专用涂料性能 组成及用途： E-26海工钢筋砼防腐专用涂料是专门为海洋等恶劣环境下长期连续使用且维修保养困难的钢筋混凝土结构构筑长效重防腐而专业设计的涂料配套系统。由底漆、中间漆和面漆等组成。 主要特性： 1、与混凝土表面具有优良的附着力； 2、底漆、中间漆、面漆具有优异的配套性能，层间附着力良好； 3、底漆对混凝土基材表面具有优异的渗透性能; 4、配套涂层系统具有良好的阻水性和屏蔽性能；优异的抗氯离子渗透 性、耐盐雾性能； 5、具有良好的耐候性、耐冷热变化及干湿交替性能； 6、具有良好的耐磨性、耐冲击性等涂膜物理机械性能； 7、表面涂料具有可装饰性,可根据业主喜欢的颜色选定； 8、本工程配套涂层的总膜厚可达200~310微米，可实现海洋构筑物的长 效重防腐保护（膜厚可根据腐蚀环境按客户需要调整）； 型号及颜色：E-26海工钢筋砼防腐专用底漆，透明 E-26B海工钢筋砼防腐专用中间漆，灰色 E-26B型海工钢筋砼防腐专用面漆，颜色根椐用户要求确定

基本参数： 施工环境： 1．底材温度须高于露点3℃以上，施工现场相对湿度应小于85%； 2．底漆、中间漆和面漆涂装时，若环境温度低于5℃时不宜施工； 3．露天作业，当遇到雨、雾、雪、冰等恶劣气候不能施工。 4．施工现场严禁明火，遵守涂装作业安全操作规程。 贮存期：24个月

海洋钢筋砼结构防腐建议配套方案 （可根据具体情况按需要调整厚度及道数） 本配套根据国家《行业标准JT/T695-2007》设计。 E-26海工钢筋砼防腐专用涂料施工技术要求 砼表面检查与处理： 1．电动砂轮或钢铲刀清除砼构件表面松动砂浆、碎屑及表面附着物。2．用水泥砂浆或涂层涂料相容的填充料修补蜂窝、露石等明显的缺陷。3．如砼表面有油污，应用适当的溶剂抹除油污。 4．最后用清洁淡水冲洗去砼表面，使处理后的混凝土表面无露石、蜂窝、碎屑、油污、灰尘及不牢附着物等。

血红蛋白含量测定

血红蛋白含量测定 发表时间：2011-04-27T15:02:00.683Z 来源：《中外健康文摘》2011年第2期供稿作者：马骅1 刘海虹2 [导读] 血红蛋白测定方法很多，如比色法、比重法、血氧法、血铁法等，国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁血红蛋白为首选测定法。马骅1 刘海虹2 (1黑龙江省临床检验中心 150008)(2中国造血干细胞捐献者资料库黑龙江省管理中心 150008) 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2011)2-0049-02 【关键词】血红蛋白生理检测 血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成的结合蛋白质。每个血红蛋白分子有4条多肽链，每条折叠的多肽链中，包裹1个亚铁血红素。亚铁血红素由原卟啉和1个铁原子组成。血红蛋白分子量为64 458D。 (一)血红蛋白生理 每分子血红蛋白中的4个亚铁血红素含有4个Fe2+原子，可结合4个氧分子。因此，64 458 g血红蛋白，含铁4×55.84，可结合4×22.14 L氧，即每克血红蛋白含铁3.47 mg(即铁占0.347％)，可结合氧1.38 ml。 血红蛋白除能与氧结合形成氧合血红蛋白(HbO2)外，尚能与某些物质作用形成多种血红蛋白衍生物。它们具有特定的色泽和吸收光谱，在临床上，可用以诊断某些变性血红蛋白血症或做血红蛋白的定量测定。 (二)氰化高铁血红蛋白测定法 血红蛋白测定方法很多，如比色法、比重法、血氧法、血铁法等，国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁血红蛋白为首选测定法。现就氰化高铁血红蛋白(HiCN)法介绍如下： 1.原理血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，新生或的高铁血红蛋白再与氰结合成稳定的棕红色的氰化高铁血红蛋白(HiCN)，在规定的波长和液层厚度条件下，具有一定的吸光系数，根据吸光度，可求得血红蛋白浓度。 2.方法取HiCN转化液5ml，加末梢血20μl，混匀后静置5分钟，用光径1.0 cm，波长540 nm的分光光度计测定吸光度OD(以水或稀释液调“0”)，求得每升血液中血红蛋白含量。 (三)血红蛋白测定的质量控制 血红蛋白测定的质量控制除了所用量器必须事先校准外(允许误差，5 ml吸管为2.5％，血红蛋白吸管为1％)，还要进行下面几项质量控制。 1.多仪器的线性校正取50 g／L、100 g／L、150 g／L、200 g／L的HiCN标准参考液，在λ540 nm测出其A值(以HiCN转化液为空白)，标准状态下其值应分别为0.135、0.271、0.407、0.543，如测定值与理论值不符合。 日常工作中测得的A值×367.7×K=Hbg／L或者将一血红蛋白含量较高的样品，分别稀释成1／4、1／2、3／4和原液四个梯度进行线性校正，仪器在200 g／L范围内应有良好线性，重复性试验 CV应≤2％。 2.比色皿的光径和透光度标准比色皿的光径和透光度应符合下述标准：光径1 cm的比色皿误差应<0.005 cm。 3.质控物的应用用来校准仪器和控制实验准确度的制品称为参考品；用于控制实验精密度的制品称为质控品(物)。 4.质控要求手工操作OCV≤3％，RCV≤6％，EQA DI≤2。 (四)红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义 通常情况下，单位容积血液中红细胞数量与血红蛋白量大致呈平行的相对应关系。健康成人的红细胞数与血红蛋白量的比例约为100：3，故两者测定的意义大致相同。但在某些情况下，特别是在红细胞内血红蛋白浓度发生改变的贫血时，两者的减少程度往往不一致。如小细胞低色素性贫血时，血红蛋白的降低程度较红细胞明显，大细胞性贫血时，红细胞数量减少程度比血红蛋白下降程度明显，因此同时对患者的红细胞和血红蛋白量进行比较，对诊断就更有意义。 1.红细胞及血红蛋白增多是指单位容积血液中红细胞数及血红蛋白量高于正常参考值高限。一般来讲，经多次检查，成年男性红细胞>6.0×1012／L，血红蛋白>170 g／L；成年女性红细胞>5.5×1012／L，血红蛋白>160 g／L时即认为红细胞血红蛋白增多。一般分为相对增多和绝对增多两类： (1)相对增多：指因血浆容量减少，造成红细胞数量相对增加。见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进症危象、糖尿病酮症酸中毒等疾病。 (2)绝对增多：临床上称为红细胞增多症，是一种由多种原因引起红细胞增多的症候群。按发病原因可分为继发性和原发性两类。 ①继发性红细胞增多症：是一种非造血系统疾病，发病的主要原因是因为血液中促红细胞生成素增多。 ②原发性红细胞增多症：即真性红细胞增多症，是一种原因未明的以红细胞增多为主的骨髓增殖性疾病，目前认为是多功能造血干细胞受累所致。其特点是红细胞持续性显著增多，甚至可达(7～10)×1012／L，血红蛋白180～240g/L，全身总血容量也增加，白细胞和血小板也有不同程度增多。本病属慢性病和良性增生，但具有潜在恶性趋向，部分可转变为白血病。 2.红细胞及血红蛋白减少指单位容积循环血液中红细胞数、血红蛋白量都低于正常参考值低限，通常称为贫血。临床上根据血红蛋白减低的程度将贫血分为4级：①轻度：血红蛋白<参考值低限至90g/L；②中度，90～60g/L；③重度：60～30g/L；④极重度：<30g/L。参考文献 [1]刘兰廷,黄如衡.高铁血红蛋白简易测定法[J];军事医学科学院院刊;1986年03期. [2]陈耀强,王婧,万家义,谢均.血红蛋白的分子结构及与其载氧功能相关的药物研究进展[J];绵阳师范学院学报;2004年05期. [3]沈高山,谷怀民,闫天秀,魏华江.亚硝酸钠和氧合血红蛋白反应的拉曼光谱[J];中国激光;2008年09期. [4]李清文,高宏,黄昊,王义明,冯军,罗国安.血红蛋白与NO分子间相互作用的电化学表征[J].高等学校化学学报;2001年08期.

(工艺技术)干膜光成像工艺规范

干膜光成像工艺规范 目录 1．目的---------------------------------------------------------------------------------4 2．范围---------------------------------------------------------------------------------4 3．定义---------------------------------------------------------------------------------4 4．操作方法-------------------------------------------------------------------------4-5 5．磨板-------------------------------------------------------------------------------6-9 6．贴膜------------------------------------------------------------------------------9-11 7．曝光-----------------------------------------------------------------------------11-13 8．显影-----------------------------------------------------------------------------13-17 9．检查-----------------------------------------------------------------------------17-18 10.故障与排除---------------------------------------------------------------------18-19 注意：以下所有数据建议参考，与你公司如有相同实属巧合。 1.目的：本文旨在建立干膜光成像工艺之操作规范及工艺控制要求、设备之日常维护方法和 要求。 2.范围: 适用于线路板光成像工艺过程之干膜、曝光、显影工序。 3.定义：光成像——指将底片的线路图像移到覆铜板上，形成一种抗蚀或抗电镀的掩膜图像。 4.操作方法 4.1安全。 4.1.1化学溶液加入槽中时，应戴橡胶手套，必要时戴上安全眼镜，眼睛和皮肤避免与其接 触，如果化学溶液溅到皮肤上，需立即用自来水进行冲洗, 并报告领班。 4.1.2溅到地上的化学药品须立即擦净。 4.1.3操作时不要观看紫外光源。

糖化血红蛋白检测的临床意义

镇康县中医医院检验科新开项目介绍 一、新开项目名称：1.血清果糖胺FMN（即糖化血清蛋白） 正常参考1.40-2.95mmol/L 2.糖化血红蛋白HbA1c（正常参考4-6%） 二、申请方式：糖三联（包括血清葡萄糖、果糖胺、糖化血红蛋白） 三、样本要求（早上空腹）：一管生化管（黄头或红头） 一管血常规管(紫头） 共采集两管血，如同时有其它检验项目可以共用。 四、临床参考建议 a.血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。但血糖测试的结果可以调整日常胰岛素的用量。 b.糖化血红蛋白是指血液中和葡萄糖结合了的那一部分血红蛋白。反映的是在检测前2-3个月内的平均血糖水平。而与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关。是判定糖尿病长期控制的良好指标。但并不主张单独用HbA1c来诊断糖尿病。也不能代替日常的自我血糖监测 C.果糖胺是血浆中的蛋白质与葡萄糖非酶糖化过程中形成的高分子酮胺结构类似果糖胺的物质，由于血清蛋白半衰期较短，本试验可有效反映患者过去2-3周内血糖的水平。可以了解夜间低血糖情况及鉴别应激性高血糖。也有学者认为此项单独升高，是糖尿病的早期信使。

1.糖化血红蛋白的测定结果以百分率表示，指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4-6%；糖化血红蛋白的检测可以指导临床更好地制定糖尿病例患者的诊疗方案。如果某位患者每天仅在早餐前测定空腹血糖，发现这个值为7.2mmol/L处于可接受范围内;但再检测糖化血红蛋白却发现为11%，这意味着该患者在过去的3个月内平均血糖水平已接近15mmol/L。尽管早餐前血糖结果尚满意，但是一天其它时间的血糖水平却严重超标，需要对患者饮食，运动及药物治疗作出重新评估，并作出相应调整,此外患者还需较现在更为频繁地测定血糖。许多研究发现糖尿病患者如查能将糖化血红蛋白水平降低至8%以下，糖尿病的并发症将大大降低，如果糖化血红蛋白>9%，说明患者待续性高血糖，会发生糖尿病性肾病,动脉硬化,白内障等并发症，并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。因此，有关专家建议,如果糖尿病患者血糖控制已达标准，并且血糖控制状态较为了平稳，每年至少应该接受2次糖化血红蛋白检测；对于那些需要改变资料方案，或者血糖控制状态不稳定的患者，及正在进行胰岛素治疗的患者，应该每三个月进行一次糖化血红蛋白测定。患有血红蛋白异常性疾病的患者，糖化红蛋白的检测结果是不可靠的，应以空腹和/或餐后血糖为准。 2.果糖胺是血浆中的蛋白质与葡萄糖非酶糖化过程中形成的高分子酮胺结构类似果糖胺的物质，它的浓度与血糖水平成正相关，并相对保持稳定。它的测定却不受血糖的影响。由于血浆蛋白的半衰期为17～20天，故果糖胺可以反映糖尿病患者检测前2～3周内的平均血糖水平。从一定程度上弥补了糖化血红蛋白不能反映较短时期内血糖浓度变化的不足。是对血糖波动较大的脆性糖尿病及妊娠糖尿病，了解其平均血糖水平有实际意义。但果糖胺不受每次进食的影响，所以不能用来直接指导每日胰岛素及口服降糖药的用量。

涂层标准(中文)最终版

MSC.1/Circ.1198 附件2 所有类型船舶专用海水压载舱和散货船双舷侧处所 保护涂层性能标准 （草案） 1 目的 为实施MSC.［…(82)］通过的SOLAS第II-1/3-2条，本标准规定了对第II-1/3-2条所述日期或以后签订合同、安放龙骨或交船的不小于500总吨的所有类型船舶专用海水压载舱和船长不小于150m的散货船双舷侧处所*内保护涂层的技术要求。 2 定义 下列定义适用于本标准: 2.1 压载舱为A.798 (19) 和A.744(18) 决议所定义的那些压载舱； 2.2 露点为空气被所含潮气饱和时的温度； 2.3 DFT为干膜厚度； 2.4 灰尘为呈现在准备涂漆表面上的松散的颗粒性物质，是由于喷射清理或其他表 面处理工艺产生的，或由于环境作用产生的； 2.5边缘打磨系指二次表面处理前对边缘的处理； 2.6 “良好”状况系指A.744 (18) 决议定义的有少量点锈的状况； 2.7 硬涂层系指在固化过程中发生化学变化的涂层或非化学变化、在空气中干燥的 涂层。硬涂层可用于维护目的，类型可以是无机的也可以是有机的； 2.8 NDFT为名义干膜厚度。90/10规则意指所有测量点的90%测量结果应大于或等 于NDFT，余下10%测量结果均应不小于0.9×NDFT； 2.9 底漆系指车间底漆涂装后在船厂涂装的涂层系统的第一道涂层； 2.10 车间底漆系指预先涂在钢板表面的底漆，通常在自动化车间喷涂（在涂层系统 第一道涂层之前）； 2.11 预涂系指对关键区域边缘、焊缝、不易喷涂区域等位置的预先涂刷，以保证良 好的涂料附着力和恰当的涂层厚度； *本标准仅适用于钢质的所有类型船舶专用压载水舱和散货船双舷侧处所。

钢结构涂料技术要求

钢结构防腐涂装技术要求 ?根据JGJ/T251-2011《建筑钢结构防腐蚀技术规程》;防腐设计按长效防腐，大于15年设计。 ?表面处理：需喷砂处理至Sa2?，表面应无可见的油脂和污垢，并且没有氧化皮、铁锈、油漆涂层和异物。粗糙度应满足30-85微米。 ?钢结构涂装配套：底漆/中间漆/防火涂料（有防火要求部位，并符合有关耐火极限要求）/面漆。 ?防腐设计 1.室内（外）钢结构：环氧富锌底漆干膜厚度60μm；环氧云铁中间漆干膜厚度 140μm；脂肪族聚氨酯面漆干膜厚度60μm； 2.室外钢结构：环氧富锌底漆干膜厚度60μm；环氧云铁中间漆干膜厚度140μm； 厚浆型聚硅氧烷面漆干膜厚度80μm。 ?技术要求 1.底漆:环氧富锌底漆，干膜中锌粉含量大于等于65%，体积固体含量不小于 65%； 2.中间漆:快干环氧中间漆，体积固体含量不小于80%，快干型且具有-5度低温 固化功能； 3.面漆1：厚浆型聚硅氧烷面漆，不含异氰酸酯，体积固体份含量不小于76%； 4.面漆2：脂肪族聚氨酯面漆，其体积固体份含量不小于60%，低VOC，没有最大 覆涂间隔，不使用含铅、铬的颜料。 ?注释： 1.标明固体含量和锌粉含量值，此指标是反映防腐性能和高低端产品的重要因素； 漆膜厚度见项目提案。

2.如果预算较好或防腐对此项目比较关键（如沿海城市），室外钢结构可优先面 漆聚硅氧烷，环保，耐候性好，后期使用多年观感好，不含异氰酸酯；如果预算一般，室内外面漆都可用聚氨酯，也是常用的防腐配套。 ?各涂层的性能指标： A．环氧富锌漆及涂层试件的性能指标 B．快干环氧中间漆涂料及涂层试件的性能指标 C.脂肪族聚氨酯涂料及涂层试件的性能指标

血红蛋白电泳实验报告

实验汇报 实验名称：血红蛋白电泳 项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果 实验时间：2018年9月17日 实验室：龙泉驿区妇幼保健院检验科 实验人员：杨松 报告单位：成都温伦科技有限公司 一、实验目的： 1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法 2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法 3、掌握电泳仪实验的操作 4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同 二、实验原理： 血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术，在临床检验中, 主要用于分离各类蛋白分子。 三、实验方法： 琼脂糖电泳法 四、实验器械： 样品：10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品 试剂：0.9%生理盐水500ml，四氯化碳500ml，界面液250ml，美国Helena Spife3000血红蛋白电泳检测试剂盒 器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA抗凝管10个，玻璃试管10个设备：美国Helena Spife3000 全自动电泳仪 五、实验步骤： 1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个，编号为1，2,3......10。 2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中，编号为 1-1,2-1,3-1,.....10-1。

3、将1-10号10个样品进行生理盐水前处理，处理方法如下： -用0.9%生理盐水混匀，3500 rpm离心10分钟. -吸走弃去清液。 -以上步骤连续进行三次。 -完全吸走弃去上清液。 -20ul制作后的样本+80ul溶血素，混匀。 -取溶血后的样本17ul加入样品孔。 4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下： -用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。 -3000rpm离心5分钟。 -弃去上清液，只留下红细胞。 -加入200ul 蒸馏水溶解红细胞。 -加入300ul 的四氯化碳，混合均匀，3000rpm离心5分钟。 -取上面萃取后的血红蛋白液17ul 加入样品孔。 5、记录下这20个样品的样品孔编号，将样品孔放入样品板，摆放进电泳槽中，放上加样刀锋，添加界面液，放上琼脂板，掀开琼脂板保护膜，吸取多余界面液，放上碳棒，关上电泳槽的盖子，启动设备开始电泳。 6、大约30分钟后，电泳完成，取出碳棒放好，铲掉琼脂板上的盐桥，取出琼脂板，放入染色槽中进行染色脱色干燥。 7、大约30分钟后，染色脱色干燥完成，取出琼脂板，放入扫描仪中进行扫描，用PT软件进行分析数据，记录数据。 六、实验数据： 七、实验结果： 采用前处理方法二（四氯化碳）处理的血红蛋白，相对于前处理方法一（生理盐水）处理的血红蛋白，电泳结果HbA2偏高，HbA1偏低，电泳条带更加聚集。

FPC的技术发展与品质标准

FPC的技术发展与品质标准 ------- 2005-11 FPC培训教材 一.FPC新技术发展 1.FPC概要 1.1 PCB与FPC PCB (Printed Circuit Board ) 印制电路板(简称印制板) 在绝缘基材上,按预定设计形成点间连接及印制元件的印制板. FPC (Flexible Printed Circuit Board ) 挠性印制板 用挠性基材制成的印制板. 是印制板之一. PCB现在是电子设备中不可缺少的元器件,PCB有不同结构与不同用途而有多种种类。 印制板按基板可否弯折的机械性能分为刚性板、挠性板两大类,及介于两者的刚挠结合印制板(R-FPC); 而又按导体层多少分为单面板、双面板、多层板。 挠性印制板(FPC)有常规印制板,也有IC封装载板(COB: Chip on Flex)。同时,FPC也有单面板、双面板、多层板。目前多层板有常规贯通孔互连多层板和积层多层板(HDI板),FPC也有这两类结构与工艺不同的多层板。 1.2 FPC的特点和应用 FPC的两个最主要特点; 可弯折挠曲、轻薄。这可适合三维空间连接安装,节省空间,解决了电子设备许多设计和安装问题,缩小体积,减轻重量,提高可靠性。这是刚性PCB无法达到的优点。 应用范围: 计算机与外部设备–HDD、笔记本电脑、传输线带、打印机、扫描仪、键盘、掌上电脑、计算器、电子笔记本等。 通信与办公设备–手机、多功能电话机、传真机、复印机、光纤开关、激光通信装置等。消费电子设备–照相机、摄录像机、微型收录机、CD机、VCD与DVD机、游戏机、液晶与等离子电视等。 汽车电子–显示仪表、发动机电子控制器、点火与断路开关系统、排气控制器、防抱死制动系统、刹车组件、音响与视像系统、车载移动电话和卫星定位系统等。 工业仪器与装备–传感器、电子仪表、核磁分析仪、X射线仪、激光或红外光控测仪、电子衡器等。 医疗器械–心脏理疗仪、心脏起博器、电震器、内窥镜、数字信号处理助听器、超声波诊疗仪、神经激活装置、诊断设备和程序控制器等。 航空航天与军事–人造卫星、飞船、火箭与导弹控制器、遥感遥测装置、雷达系统、导航装置、陀螺仪、谍报侦察装备、反坦克火箭炮武器等。 集成电路– IC封装载板、IC磁卡芯板等。 1.3 FPC的种类与结构 (1) 单面FPC (2) 双通路单面FPC (3) 双面FPC (4) 多层FPC (5) 刚挠PCB (6) 雕刻FPC 1.4 FPC基本材料

糖化血红蛋白检测的临床意义

如对您有帮助，请购买打赏，谢谢您！ 糖化血红蛋白检测的临床意义 血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。 糖化血红蛋白是指血液中和葡萄糖结合了的那一部分血红蛋白。 当血液中葡萄糖浓度较高时，人体所形成的糖化血红蛋白含量也会相对较高。人体内红细胞的寿命一般为120天，在细胞死亡前，血液中糖化血红蛋白含量也会保持相对不变。因些糖化因红蛋白水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关。是判定糖尿病长期控制的良好指标。 糖化血红蛋白的测定结果以百分率表示，指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4-6%；许多研究发现糖尿病患者如查能将糖化血红蛋白水平降低至8%以下，糖尿病的并发症将大大降低，如果糖化血红蛋白>9%，说明患者待续性高血糖，会发生糖尿病性肾病,动脉硬化,白内障等并发症，并有可能出现酮症酸中毒等急性合并症。因此，有关专家建议,如果糖尿病患者血糖控制已达标准，并且血糖控制状态较为了平稳，每年至少应该接受2次糖化血红蛋白检测；对于那些需要改变资料方案，或者血糖控制状态不稳定的患者，及正在进行胰岛素治疗的患者，应该每三个月进行一次糖化血红蛋白测定。 糖化血红蛋白的检测可以指导临床更好地制定糖尿病例患者的诊疗方案。如果某位患者每天仅在早餐前测定空腹血糖，发现这个值为130mg/ml,处于政党范围内;但再检测糖化血红蛋白却发现为11%，这意味着该患者在过去的3个月内平均血糖水平已接近270mg/ml，暗示其将来发生糖尿病并发症的危险性非常高,。尽管早餐前血糖结果尚满意，但是一天其它时间的血糖水平却严重超标，需要对患者饮食，运动及药物治疗作出重新评估，并作出相应调整,此外患者还需较现在更为频繁地测定血糖。 综上所述，糖化血红蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一项良好的指标，糖尿病患者应定期检测糖化血红蛋白，并据此制定，修正相关治疗方案。 对于糖尿病患者来说，糖化血红蛋白（hba1c）是一个非常重要的检测指标。通过检测糖化血红蛋白可以了解糖尿病患者过去2～3个月内血糖控制的平均水平，它不受患者偶尔一次的血糖升高或降低的影响。英国糖尿病前瞻性研究证实，糖化血红蛋白每下降1%，糖尿病患者发生死亡的几率就会降低21%，发生心肌梗死的几率就会下降14%，发生中风的几率就会下降12%，发生微血管病变的几率就会下降37%，需要做白内障摘除手术的几率就会下降19%，因周围血管疾病而导致截肢或死亡的几率就会下降43%，发生心力衰竭的几率就会下降16%。 1、作为糖尿病患者长期血糖控制的评价指标；糖化血红蛋白（HbA1c）的测定目的在于消除波动的血糖对病情的控制观察的影响，因而对血糖波动较大的Ⅰ型糖尿病患者，测定糖化血红蛋白（HbA1c）是一个有价值的血糖控制指标。对于2型糖尿病患者，血糖和尿糖测定较简单和经济，且能较可靠地反映病情的控制，故测定糖化血红蛋白（HbA1c）的意义低于1型患者，但可作为辅助检查，用于判定口服药是否失效而须用胰岛素治疗。 2、有助于对糖尿病慢性并发症的认识；血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。 3、用于糖尿病的诊断；健康人HbA1c为4.0%-7.7%(6.5±1.5%), 未控制的DM病人HbA1c 可高达10%-20%；随机检测HbA1c，若＜8%，多不考虑糖尿病。HbA1c＞9%，预报糖尿病的标准度约为78%，灵敏度为68%，特异性94%；HbA1c＞10%，则有80%以上为糖尿病，灵敏度43%，特异性99%，有效率86%。所以，目前并不主张单独用HbA1c来诊断糖尿病，原因是精确度不高，有时造成临床解释困难。

实验七血红蛋白

实验七脱辅基血红蛋白的制备和重组 一、实验目的 1.了解生物化学中典型的血红蛋白的性质和结构以及结合在蛋白上的辅基的作用。 2.学习一种生物无机生化科研中常用的为金属酶和蛋白质代换金属离子的方法。 3.学习快速扫描分光光度计的使用及紫外可见吸收光谱的应用。 4.学习柱层析和透析袋脱盐的方法。 二、实验原理 血红蛋白(Hemoglobin)是由二价铁Fe(Ⅱ)血红素作为辅基与多肽链结合组成的一种结合蛋白，它是由四个亚基组成的四聚体，分子量大约为65000。四个亚基中，两个亚基具有相同的氨基酸序列，称为α—亚基，每条链含141个氨基酸，另外两个氨基酸序列相同的亚基，称为β—亚基，各含146个氨基酸。两种亚基有其各自的二级、三级空间结构，亚基之间以非共价键结合在一起。每个亚基中均含有一个血红素辅基，血红素是一个铁原卟啉Ⅳ，它处于一个疏水环境，此疏水环境对血红蛋白的可逆载氧功能起着非常重要的作用。Fe(Ⅱ)在血红蛋白中始终是以+2价还原态存在的，若被氧化成Fe(Ⅲ)，则称为高铁血红蛋白，它就失去了可逆载氧功能。 血红素辅基与血红蛋白均以非共价键相连，其中包括Fe(Ⅱ)与近端组氨酸(F8His)上的Nε上的配位键；卟啉环侧链丙酸阴离子与蛋白氨基酸侧链之间的盐桥；以及卟啉环中乙烯基与蛋白的疏水相互作用。在酸性条件下，由于蛋白的变性而使这些作用变得很弱，以至于高铁血红素可以从血红蛋白的疏水区中游离出来。利用高铁血红素在丁酮中的溶解度大大高于它在水溶液中的溶解度的性质，用多次丁酮萃取的方法将血红素与蛋白分离。分离得到的脱辅基血红蛋白(ApoHb)可以用金属卟啉化合物(例如高铁血红素、钴卟啉、铜卟啉等)进行重组，生成各种不同金属卟啉的血红蛋白。 由于高铁血红蛋白的紫外可见吸收光谱中，在405nm处有很强的特征吸收峰，而脱辅基血红蛋白只在280nm处有蛋白的特征吸收峰，当将高铁血红素加入ApoHb溶液中后，重组成功的高铁血红蛋白又会在405nm处出现它的特征吸收峰，因而血红蛋白的脱辅基与重组试验均可用紫外可见分光光度计进行检测。 三、实验方法 1. 氧合血红蛋白的制备(供全班学生使用) 在市血站购买一袋人血，用高速冷冻离心机4000r/min离心10min，取下层血球加四倍体积的0.9% NaCl洗血球，再用4000r/min离心10min，如此重复2～3次，取下层血球，按1∶1(v/v)体积比加甲苯，振荡2分钟以上，使血球破膜，8000r/min离心20min，弃去上层甲苯和中层脂肪，取下层血球沉淀，加10分之一沉淀体积的9% NaCl，激烈振 209页