Reveal牛奶过敏原免疫层析检测
说明：如同时检测液体样品、环境样品与CIP清洗样品，除了根据样品数量需要准备较多的塑料试剂瓶之外，其他依照环境样品与CIP清洗样品检测要求准备即可。
温馨提醒：有什么问题可直接联系我们！
液体样品检测
一、试剂、器材准备于确认
1、所需器材
（1）水浴锅
（2）1L试剂瓶
（3）量筒（10ml、100ml、1000ml量筒各一个）
（4）洗瓶
（5）250ml塑料试剂瓶（据样品数量定）
（6）去离子水或蒸馏水
（7）100微升移液器
（8）100微升移液器枪头
（9）薄胶皮手套
（10）微孔架
（11）计时器
（12）Reveal AccuScan系统（可选）
2、Reveal ?牛奶过敏原检测包
（1）24 条快速检测卡
（2）24个检测微孔
（3）1瓶样品稀释液
（4）1瓶提取试剂
（5）1g塑料勺
（6）3袋PBS
（7）说明书
二、样品中过敏原的提取
1、配制PBS缓冲液
取一袋PBS加入1L的试剂瓶中，混匀，并于水浴锅中温育到60℃。
2、样品提取
（1）取10ml样品，加入塑料试剂瓶中；
（2）向塑料试剂瓶中加入一平勺粉状的提取试剂；
（3）再加入90ml 配制好的PBS缓冲液；
（4）剧烈摇晃3min，待测。
三、检测
1、取微孔，放到微孔架上；
2、用移液器取100微升样品稀释液，加入微孔中；
3、再向微孔中加入100微升的过敏原提取液，上下吸打三次，混匀；
4、将快速检测卡插入微孔中，计时5min。
5、5min后对结果进行分析：有两条线的为阳性，一条线的为阴性。
环境样品和CIP清洗样品检测
一、试剂、器材准备于确认
1、所需器材
（1）水浴锅
（2）1L试剂瓶
（3）量筒（10ml、100ml、1000ml量筒各一个）
（4）洗瓶
（5）250ml塑料试剂瓶（1）
（6）去离子水或蒸馏水
（7）100微升移液器
（8）100微升移液器枪头
（9）胶皮手套
（10）微孔架
（11）计时器
（12）Reveal AccuScan系统（可选）
2、Reveal ?牛奶过敏原检测包
（1）24 条快速检测卡
（2）24个检测微孔
（3）1瓶样品稀释液
（4）1瓶提取试剂
（5）1g塑料勺
（6）3袋PBS
（7）说明书
3、Neogen环境拭子试剂盒(#8432S)
（1）100个棉签
（2）100个滴管
（3）说明书
二、环境样品或CIP清洗表面过敏原的采集
1、配制PBS缓冲液
取一袋PBS加入1L的试剂瓶中，混匀，并于水浴锅中温育到60℃。
2、工作液配制
取一平勺提取试剂，加入250ml的塑料试剂瓶中，再向试剂瓶中加入125ml PBS缓冲液，60℃水浴。
3、样品采集
(1)拧开盖子，将棉签取出；
（2）选取10x10cm2的面积采样，采样时将棉签与取样平面保持45℃，从左上角开始，以Z字形取样（期间需要不断旋转棉签），到右下角结束；之后从左下角开始，进行同样的取样，到右上角结束。
三、将环境样本制成液体样品
1、左手拿棉签和棉签管，右手量取5ml液体，并倒入棉签管中；
2、将棉签插入棉签管中，拧紧，晃动2分钟或涡旋30秒，待测。
四、检测（与液体样品操作相同）
1、取微孔，放到微孔架上；
2、用移液器取100微升样品稀释液，加入微孔中；
3、再向微孔中加入100微升的过敏原体液体样品，上下吸打三次，混匀；
4、将快速检测卡插入微孔中，计时5min。
5、5min后对结果进行分析：有两条线的为阳性，一条线的为阴性。
各国食品致敏原标识管理要求
食品过敏原标识管理 一、食品过敏原标识管理 1、过敏原：又称为致敏原、变态反应原、变应原，指能够诱发机体发生过敏反应的抗原物质（蛋白质）。 2、食物过敏是人们对某些食物产生的一种不良反应，在医学上属于一种变态反应。 3、食品过敏原是普通食品中正常存在的天然或人工添加物质，被过敏体质人群消耗后能够诱发过敏反应。 4、各个国家食品标识应标明的过敏原成分
5 1）正确的食品标签：对于过敏体质的人群，预包装食品标签上正确、清楚地标识出过敏原成分，是防止他们发生食物过敏反应甚至危及生命最有效的措施。 2）国外多国已发布多项法规对过敏原标识作出规定。 3）我国已实施的标准：GB/T23779-2009预包装食品中的过敏原成分；即将实施的《预包装食品中过敏原成分的标签要求》。
1）婴幼儿患者：在5 -6岁时大约80%对牛乳、鸡蛋、花生、小麦、大豆产生过敏反应，大约20%对鱼、甲壳类动物的过敏会消除、其余的往往是终生过敏。 2）成年人：食物过敏的发病率成快速上升的趋势。 3）食品过敏的临床表现：麻疹、疱疹样皮炎、口腔过敏综合征、肠病综合征、哮喘及过敏性鼻炎、严重时可导致过敏性休克，危及生命。 4）食物过敏至今无特效疗法。 5）过敏原引发过敏反应的最低量无定论。 6）极微量过敏原即可造成造成严重后果。 7）目前预防是防止食物过敏唯一的途径—严防有过敏体质的人接触过敏原。
三、我国出口食品因过敏原被预警召回情况（摘选） 四、过敏原管理 1、食品过敏原管理包括：生产商、监管机构、检测机构、消费者。 2、“可能存在”及预防措施： 1）需考虑对无法控制的、偶然发生的、潜在的危害所采取的最后补救措施； 2）如果上述情况存在，则可以使用“可能存在”这样的描述； 3、已确定三项过敏原管理原则： 1）控制及培训：生产企业内部必须建立行之有效的过敏原成分； 2）原料标识成分：必须准确地反映出食品听过敏成分； 3）警示标签和警示性说明：需在包装上向过敏体质消费者提供相关信息。 4、过敏原控制： 1）有意添加及潜在交叉污染的控制：导致交叉污染的原因 a收购原料前后的交叉接触；b错误的配方；c交叉接触；d存储条件差；e共享生产设备；f原料粉尘的污染；g与反工材料一起进行加工；h人为过失。 2）风险识别：a确认存在过敏原的原料；b确定各个加工环节可能存在的过敏原；c明确存在交叉污染的环节；d明确标签问题。 3）确定12个关键环节： A审核供应商；b原料验收；c确定消费群；d环境卫生；eHACCP计划；f企业员工安全意识；g反工环节； h重新配方；i产品研发；j标识；k工程及维护；l措施计划。 五、过敏原的阀值 1、食物中即使含有很微量的过敏原也可以引发消费者的过敏反应。 2、低于10mg/kg的水平可能会低于过敏反应的阀值。 3、仍需严格确定精准的过敏反应阀值。 4、最低可见有害作用水平（LOAEL）： 已公布的食品过敏原LOAEL值（蛋白水平）
关于食品过敏原的探讨
关于食品过敏原的探讨 摘要：本文讨论的是关于食品过敏原在国内外的关注情况、与之相关的检测、标识和立法，对今后提高食品过敏原控制的研讨。 关键词：食品过敏原、标识 目前，食品安全问题是全球关注的热点问题之一，关于食品过敏原的问题也越来越多的得到各国的注意，相关的立法和研究在不断发展。食品过敏原（Food Allergen）问题属于食品安全性的范畴，又涉及到临床医学等的领域。对食品过敏原问题的在不同国家、不同地区各不相同的理解和关注程度。国外发达国家已经有着诸多的报道和研究，甚至有较具体的立法对食品生产和经销者进行监管，而我国对食品过敏原的研究和关注较少，而消费者对由此引发的过敏反应也没有引起足够的关注。随着国家对食品安全工作的深入开展，食品过敏原的问题将逐渐得到重视。 在过去的几十年中，食品过敏的发病率日益增加，给临床和食品工业造成了的压力，也引起了消费者的一度恐慌，增加了民众对食品的不安全感。调查显示全世界范围内有１％～２％的成年人对食品过敏，而低于三岁的儿童中有８％以上对食品过敏。社会生活的变迁，引导着人们生活习惯不断发生改变，饮食业跨越地区和国家的界限快速发展，转基因食品的大量涌现，过敏症状亦趋于多样复杂和严重化。食品过敏原的安全性问题要求食品的生产者、管理者以及消费者充分认识到这一点，共同把可能存在的任何风险降至最低限。 1 关于食品过敏原的介绍 目前大约有160多种食品含有可以导致过敏反应的食品过敏原，常见的食品有：奶（牛奶、山羊奶等），树果（杏仁、胡桃、山核桃、榛子和腰果等），菜籽（葵花籽、芝麻等），豆类（花生、大豆、豌豆、蚕豆等），蛋类，巧克力，香辛料，鲜果，海产品（虾、贝壳类）等。一般来说，食品过敏原为分子量介于10000～70000之间的蛋白或糖蛋白，占食品总蛋白的极小一部分，分别属于不同的蛋白家族。但是微量的食品过敏原蛋白即可引起严重的过敏反应。据专家报道， 产生的临床症状包括皮肤反应（荨麻疹、血管性水肿、湿疹），呼吸症状（哮喘、鼻炎），肠胃症状（呕吐、腹泻、肠胃痉挛），系统反应（心血管症状），肌肉和骨骼等不同形式的临床症状，有时可能产生过敏性休克（Anaphylactic Shock），甚至危及生命。当摄入了有关的食物，其中的食品过敏原可能导致一系列的过敏反应。过敏反应通常会在一个小时内出现，症状明显，有时表现得会较激烈，包括诸如呕吐，腹泻，呼吸困难，嘴唇、舌头或咽喉肿胀，血压骤降等。而因食品产生的敏感或不适反应却可能在几小时内，甚至几天后才会发生，主要的症状有：湿疹，胃肠不适综合症，偏头痛，麻疹，鼻炎，全身乏力，哮喘，关节炎，疼痛，儿童多动症等。 2 国内外对食品过敏原的标识管理和控制 关注食品过敏原可以先关注食品标签，对于流通领域的食品消费者可以通过仔细阅读产品标签获得产品信息，了解产品的配料、生产过程，控制误食引起的食品过敏情况。目前，欧盟二十国，美国、澳大利亚、日本等发达国家已经对食品过敏原立法。
水牛奶中β-乳球蛋白过敏原表位定位的初步研究
收稿日期：2007-07-27 * 通讯作者 基金项目：国家自然科学基金项目(30560096)；教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT0540)作者简介：李欣(1980-)，女，博士研究生，研究方向为食品生物技术。 水牛奶中β-乳球蛋白过敏原表位定位的 初步研究 李 欣1,2，高金燕3， 陈红兵1,2,* (1.南昌大学 食品科学教育部重点实验室，江西 南昌 330047； 2.南昌大学中德联合研究院，江西 南昌 330047； 3.南昌大学食品系，江西 南昌 330047) 摘 要：为绘制水牛奶中β-乳球蛋白的过敏原表位，本实验以兔抗水牛乳β-乳球蛋白的抗体IgG 为固相筛选分子，免疫筛选噬菌体随机七肽库，采用间接ELISA 和竞争抑制ELISA 鉴定阳性克隆。经四轮富集后，得到16个阳性克隆子，进行测序，得到5个不同的肽段。与已知的表位比对，初步确定了六个I g G 识别表位，分别为：第41～51位(VYVEELKPIPE)、第51～64位(EGDLEILLQKWENDE)、第81～96位(VFKIDALNE NKVLVLD)、第141～56位(KALPMHIRLSFNPTQL)、第127～136位 (LNENKVLVLD)和第145～159 位(MHIRLSFNPTQLEEQ)。关键词：水牛乳；β-乳球蛋白；筛选；表位定位；食物过敏 Primary Epitope Mapping of β-Lactoglobulin from Buffalo Milk LI Xin 1,2，GAO Jin-yan 3，CHEN Hong-bing 1,2,* (1.Key Laboratory of Food Science, Ministry of Education, Nanchang University, Nanchang 330047, China； 2.Sino-German Joint Research Institute, Nanchang University, Nanchang 330047, China； 3.Department of Food Science, Nanchang University, Nanchang 330047, China)Abstract ：To map the mimotopes of β-lactoglobulin from water buffalo milk, the specific rabbit antibody against buffalo β-lactoglobulin were used to pan the specific phage from a heptapeptide phage display library. The positive clones were identified by indirect ELISA and competitive ELISA. After fourth round enrichment , sixteen positive clones were obtained and five different clones peptide sequence were deduced by DNA sequencing. Compared with the known IgG epitopes of β-lactoglobulin,six epitopes have been identified, which are located at fragment 41～51(VYVEELKPIPE), fragment 51～64(EGDLEILLQKWENDE),fragment81～96(VFKIDALNE NKVLVLD), fragment 141～156(KALPMHIRLSFNPTQL), fragment127～136(LNENKVLVLD) and fragment 145～159(MHIRLSFNPTQLEEQ respectively. Key words ：buffalo milk ；β-lactoglobulin ；panning ；epitope mapping ；food allergy 中图分类号： TS201.6 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)10-0360-04 牛乳β-乳球蛋白是乳清中的一种主要蛋白质，由162个氨基酸残基组成，分子量约为18.4kDa，是牛乳中的主要过敏原之一。β-乳球蛋白有五个异构体分别为：A 、B 、C 、D 和D r ，其中A 和B 比较常见。而水牛乳中也含有丰富的β-乳球蛋白，两者除第1和162位的氨基酸不同，其余氨基酸序列一致。水牛乳的β-乳球蛋白只有一个突变体，根据泳动速度和离心情况，与B 型相似。有研究表明，两者的存在着免疫交叉反应[2]。因此，水牛乳中的β-乳球蛋白的过敏问题也值得研究。本实验采用随机肽库筛选水牛乳中β-乳球蛋白 的模拟表位,与已知序列比对，对其IgG 结合表位进行初步定位，可以初步阐明水牛乳中β-乳球蛋白过敏原的物质基础。1材料与方法1.1 材料 噬菌体7肽库(Ph.D-7.TM Phage Display Peptide Library) New England Biolabs公司，库浓度为6.00×1012pfu/ml，受体菌为E.coli 2738，-96g III自动测序引物。主要试剂：H R P 抗M 13单抗(1:5000稀释工作浓
吸入及食物过敏原
吸入性及食物性过敏原特异性IgE 抗体检测试剂盒的标准操作规程 1 目的：保证特异性IgE(sIgE)试验的正确操作，保证检验结果的准确可靠。 2 适用范围：临床免疫实验室 3 项目名称：吸入性及食物性过敏原特异性IgE 抗体检测试剂盒 4 项目方法：欧蒙印迹法 5．原理：采用免疫印迹法原理。 5．1 经缓冲液预处理的检测膜条与患者样本进行温育。如果样本阳性，IgE 类特异性抗体与相应的过敏原结合。 5．2 在洗涤之后，加入酶标单克隆的抗人IgE 抗体（酶结合物）进行第二步温育，以形成复合物。 5．3 在孵育之后，冲洗掉未结合的酶-抗-IgE，然后加入底物液，发生颜色反应。 5．4 终止反应之后，风干判读结果。 6．标本种类及收集、运送要求： 6．1 病人准备：要求患者在安静状态下；晨起的精神、体力、情绪等因素的影响较小，是标本采集的最佳时间；抽取肘部静脉血或毛细血管血。 6．2 标本种类：人血清或者EDTA、肝素或柠檬酸抗凝血浆。 6．3 标本稳定性：待测样本于2-8°C 条件下通常可保存14 天。稀释后的样本应在同一个工作日内检测。 6．4 标本稀释：患者样本不需稀释，直接检测。 6．5 标本容器：一般用真空采血管中的血清促凝管（红色头盖）或抗凝管（紫色或绿色头盖）。 6．6 标本最小用量：血清最小用量 1ml。 6．7 标本运送：标本采集于真空采血管后应尽快送实验室分析，物流系统可加快标本传递速度。若标本不能及时转运到实验室，应将真空采血管内的标本置冰瓶或冷藏箱内，运送过程中应避免剧烈震荡。当天无法运送的标本应分离血清后冷藏。 7．试剂： 7．1 来源：欧蒙公司. 7．2 规格： 16*1人份/盒 7. 3 试剂盒组成和代号：
牛乳酪蛋白检测方法研究进展
牛乳酪蛋白检测方法研究进展 倪小琴，赖卫华* （南昌大学 食品科学与技术国家重点实验室，江西 南昌 330047） 摘?要：牛乳含有丰富的蛋白质，是比较理想的营养物质，但也是常见的过敏原之一。酪蛋白是牛乳中含量最高的蛋白，常作为牛乳过敏检测的主要参考指标之一。其检测方法主要包括基于免疫学的方法、聚合酶链式反应技术（polymerase chain reaction ，PCR ）、毛细管电泳分析、色谱法、质谱法等，本文就其检测方法的原理、特性及实际应用进行综述，并对未来检测的发展方向进行展望。关键词：酪蛋白；过敏原；检测方法 Research Progress in Methods for Detecting Cow ’s Milk Allergen Casein NI Xiao-qin, LAI Wei-hua * (State Key Laboratory of Food Science and Technology, Nanchang University, Nanchang 330047, China) Abstract: Cow ’s milk is rich in proteins, and an ideal nutritional substance, but it is also a common allergen in foods. Casein is the highest content of protein in milk, and is often used as a major index for detecting the allergenicity of cow ’s milk. The currently available detection methods include mainly immunological techniques, polymerase chain reaction (PCR), capillary electrophoresis, chromatography, and mass spectrometry. This article reviews the principles, characteristics and applications of these detection methods, and proposes future trends in the development of new detection methods.Key words: casein; allergen; detection methods 中图分类号：TS207.3 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2014）03-0290-05 doi:10.7506/spkx1002-6630-201403057 收稿日期：2012-12-07 作者简介：倪小琴（1990—），女，硕士研究生，研究方向为食品质量安全。E-mail ：xychun555@https://www.wendangku.net/doc/8c1471727.html, *通信作者：赖卫华（1968—），男，教授，博士，研究方向为食品安全。E-mail ：talktolaiwh@https://www.wendangku.net/doc/8c1471727.html, 牛乳制品是一种营养丰富的蛋白制品，同时也是常见的八大过敏物质之一，其致敏性严重影响了婴幼儿的身体健康。根据修订后的2007/68/EC [1]，欧盟法规规定在食品的生产加工过程中，若原料或产品中的某种成分来自附件Annex Ⅲa 指定的过敏物质时，必须在食品标签上明确标出这些物质的成分。据调查[2]，在发达国家中，牛乳过敏占过敏事件的3%～7.5%，严重影响了婴幼儿的健康，部分甚至导致儿童死亡。而目前，对于食物过敏的最好最直接的办法是严格避免食用含过敏原的食物，但在食品的加工生产过程中，会掺杂着少量潜在的致敏物质，所以，人们亟需研究出能够快速检测食物中致敏物质的方法，达到预防的目的。 牛乳过敏原引起的过敏反应是一种由IgE 介导和非IgE 介导的超敏反应，可引起皮肤、肠胃道、呼吸系统的反应，严重时甚至会导致系统过敏反应或休克。牛乳蛋白常作为一种常见的食品添加剂，应用在食品生产的很多方面，这些残留的成分可能会引起致敏反应。本文通过总结归纳目前国内外常见的检测牛乳酪蛋白的方法，简述各种方法的原理及其应用，并对未来检测的发展方向进行展望。 1 检测酪蛋白的原理 牛乳中含有3%～3.5%的蛋白质，其中酪蛋白占总蛋白的80%[3]，是牛乳中最主要的过敏原之一。由于牛乳中酪蛋白含量较高，实验可通过检测酪蛋白的有无来判断食物中是否含有牛乳成分，以此作为过敏人群判断食品成分的一个依据。基于此，本文主要对目前应用在酪蛋白上的检测方法进行总结归纳。2 牛乳过敏原酪蛋白的检测技术2.1 基于免疫学的分析技术 基于免疫学原理建立的检测方法，是借助酶标记的抗体或抗原进行特异性结合的抗原抗体反应，并根据显色颜色的深浅来进行定量或定性的分析方法。根据标记物的显色物质的类型，将免疫类型可分为酶联免疫吸附技术、免疫荧光技术、火箭电泳免疫技术、时间分辨荧光免疫分析这四类。 在应用免疫学方法检测过敏物质时，考虑到酪蛋白
环境监测原始记录表
环境监测原始记录表 环境保护监测中心站 2012年
目录 1. 地表水采样原始记录表19.离子选择电极原始记录表 2. 大气采样原始记录表20.分光光度法分析原始记录表 3. 降水采样原始记录表21.原子吸收分光光度法分析原始记录表 4. 降尘采样原始记录表22.气相色谱分析原始记录表 5. 土壤采样原始记录表23.离子色谱分析原始记录表 6. 底质（底泥、沉积物）采样原始记录表24.细菌总数测定原始记录表 7. 污染源废水采样原始记录表25.粪大肠菌群测定原始记录表 8. 固定污染源排气中气态污染物采样原始记录表26.区域环境噪声监测原始记录表 9. 固定污染源排气中颗粒物采样原始记录表27.城市交通噪声监测原始记录表 10.烟气烟色监测现场记录表28.污染源噪声监测原始记录表 11.pH值分析原始记录表29.机动车排气路检原始记录表 12.电导率分析原始记录表30.一般试剂配制原始记录表 13.色度分析原始记录表（铂钴比色法）31.校准曲线配制原始记录表 14.色度分析原始记录表（稀释倍数法）32.标准溶液配制与标定原始记录表 15.重量分析原始记录表33.样品交接记录表 16.容量法分析原始记录表34.样品分析任务表 17.五日生化需氧量分析原始记录表35.样品前处理原始记录表 18.一氧化碳分析原始记录表36.大气采样器流量校准原始记录表
xx 省环境监测原始记录表（ 1 ） 地表水采样原始记录表 采样目的： 方法依据：GB12998-91 采样日期： 年 月 日 枯 丰 平 pH 计型号及编号： DO 仪型号及编号： 电导仪型号及编号： 采样： 送样： 接样： .第 页 共 页
食品过敏原的检测与分析
食品过敏原的检测与分析 双击自动滚屏时间：2010-4-26 来源：热带医学杂志作者：浏览：159次【字体：大中小】 食品过敏现已成为一个新兴的公众性健康问题，特别是在发达国家，调查显示全世界范围内有１％～２％的成年人对食品过敏，而低于三岁的儿童中有８％以上对食品过敏。产生的临床症状包括皮肤反应（荨麻疹、血管性水肿、湿疹），呼吸症状（哮喘、鼻炎），肠胃症状（呕吐、腹泻、肠胃痉挛），系统反应（心血管症状包括过敏性休克）等。在过去的几十年中，食品过敏的发病率和流行情况日益增加，给临床变态反应学和食品工业造成了巨大的压力。加上现在人们生活习惯的改变，饮食面的快速拓宽，特别是转基因食品的大量涌现，过敏症状亦趋于多样化、复杂化和严重化。因此，对食品过敏原的检测与分析就是一个极其重要的问题。 一般来说，食品过敏原为分子量介于10000～70000之间的蛋白或糖蛋白，占食品总蛋白的极小一部分，分别属于不同的蛋白家族。但是微量的食品过敏原蛋白即可引起严重的过敏反应。系统全面、精确可靠的食品过敏原检测和分析技术体系正在形成，本文对这一研究领域的研究进展进行了详细的综述性分析。 １.利用人血清特异性lgＥ检测食品过敏原
过敏原与lgＥ结合是过敏原体现其生物活性的中心环节，因此食品过敏原检测过程中特异性lgＥ的血清学检测必不可少。对于能够引起５０％病人产生过敏反应的主要食品过敏原必须测定特异性lgＥ与食品过敏原结合的能力，包括引发过敏反应的频率，热稳定性和水解稳定性等。但是这种方法不能解决食品过敏原的交叉致敏问题，因为它是用单个过敏病人的血清进行检测的。１．１RAST抑制实验和EAST抑制实验 自从lgＥ成功纯化及抗lgＥ抗体的制备后，放射过敏原吸附实验 （ radio allergosorbent test RAST）得以设计应用。之后改进的酶标记过敏原吸附实验（enzyme linked allergosorbent assays,EAST）及荧光和化学发光标记的检测技术也均已建立。这些方法均是检测特异性lgＥ与过敏原相互作用的免疫分析方法。特异性lgＥ抗体与食品过敏原的结合在固相载体表面进行并被检测，是体外食品过敏诊断的一种已标准化的方法，得到广泛使用。在此基础上进一步建立了放射过敏原吸附抑制实验 （radio allergosorbent test RAST 抑制实验）和酶标记过敏原吸附抑制实验技术（ enzyme linked allergosorbent assays,EAST抑制实验）。在体外过敏原检测实验中，这些方法是目前国际上变态反应临床及科研人员使用最广泛、最灵敏的方法，也是评价过敏原总致敏活性的关键技术。其优点是全自
186例慢性荨麻疹患者过敏原检测结果分析
186例慢性荨麻疹患者过敏原检测结果分析 【摘要】目的：研究导致慢性荨麻疹的过敏原种类，减少误诊、漏诊，为预防和治疗提供依据。方法：采用体外定性过敏原检测系统对我院门诊186例慢性荨麻疹患者血清进行特异性IgE定性检测，包括6种吸入性过敏原和7种食入性过敏原及总IgE测定。结果：食物组过敏原阳性率为46.2%，其中以虾、蟹、牛奶、牛肉、羊肉为主要过敏原。吸入组过敏原阳性率63.4%，其中以尘螨、粉螨、猫狗毛皮屑、蟑螂为主要过敏原。结论：尘螨、粉螨、蟑螂、猫狗毛皮屑、虾、蟹、牛奶、牛肉、羊肉为大连市慢性荨麻疹患者的主要致病过敏原。慢性荨麻疹的病因比较复杂，吸入性和（或）食入性过敏原常是大多数慢性荨麻疹患者发病的重要因素，通过对患者血清进行体外过敏原检测，为临床治疗及预防提供依据。 【关键词】荨麻疹/过敏原;IgE/酶联免疫法 荨麻疹是由于皮肤、黏膜小血管反应性扩张及渗透性增加而产生的一种局限性水肿反应。过敏反应是一种特殊的病理性免疫反应，是人体对一种或多种原本无害的物种产生不必要的反应。其主要原因是患者产生相当量的E型免疫球蛋白IgE，它和过敏原结合后，刺激机体产生化学物质触发细胞大量分泌药理活性物质，引起一系列过敏症状。我们通过
检测荨麻疹患者血清的IgE水平以及查到引起机体过敏的物质，从而帮助医生正确的诊断引起患者过敏反应的过敏原，就能很好的预防和治疗过敏反应性疾病。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选择符合慢性荨麻疹诊断标准的186例患者，其中男97例，女89例，年龄8～62岁，平均31.6岁。病程3个月～8年，平均3.3年，均为大连地区常住人口。慢性荨麻疹诊断符合《杨国亮皮肤病学》诊断标准[1]。家族有过敏患者28例，所有患者发病在2周内，检测前未服用糖皮质激素及抗组胺药。 1.2试剂：采用全自动酶免分析系统进行纸片法检测，试剂盒来源于德国领检公司原装进口，严格按照操作说明进行检测。 1.3 方法 1.3.1采用酶联免疫法，用于定性检测患者血清中的总IgE抗体和过敏特异性IgE抗体。患者血清样本先与测试条进行孵育，使得样本中的IgE抗体与测试条上的相应反应区结合。随后去除末结合的抗体，加入酶标抗体于IgE抗体复合物进行孵育。随后的清洗步骤会去掉未结合的酶标抗体，加入酶底物液进行反应，产生可以直接观察的颜色变化。 1.3.2 检测原理当具有过敏抗原固化于表面的载体与
过敏原特异性IgE抗体检测试剂技术审查指导原则
附件2 过敏原特异性IgE抗体检测试剂 技术审查指导原则 本指导原则旨在指导注册申请人对过敏原特异性IgE抗体（Allergen-specific IgE）检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。 本指导原则是对过敏原特异性IgE抗体（Allergen-specific IgE）检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。如申请人认为有必要增加本指导原则不包含的研究内容，可自行补充。 本指导原则是供申请人和审查人员的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 I型过敏反应性疾病相当普遍，人群总发病率高达10%～30%，
是当前世界性的重大卫生学问题，被世界卫生组织（WHO）列为二十一世纪重点防治的三大疾病之一。 过敏性疾病是患者吸入、食入或者注入含有致敏成分的物质（称为过敏原或变应原，Allergen）后触发机体的B细胞产生特异性免疫球蛋白E（Immunoglobulin E, IgE），IgE以其Fc 段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞的表面相应的FcεRI结合，使机体处于对该过敏原的致敏状态。当相同过敏原再次或多次进入致敏机体时，可与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的IgE发生特异性结合，当过敏原与致敏细胞表面的两个或两个以上相邻的IgE结合时，发生FcεRI 交联，使肥大细胞和嗜碱性粒细胞活化，导致细胞脱颗粒并释放储存在细胞浆颗粒里的炎性介质——组胺，并通过花生四烯酸途径合成新介质——白三烯、免疫反应性前列腺素和IL4、IL5等细胞因子及趋化因子，从而引发过敏反应（或称变态反应，Allergy）的疾病及相关症状，如过敏性哮喘、枯草热、荨麻疹、过敏性鼻炎、湿疹、结膜炎及胃肠道I型过敏性疾病及严重过敏反应等。 上述过敏性疾病的发生，IgE抗体起关键作用。I型过敏反应性疾病的特征是患者体内循环血液中的过敏原特异性IgE抗体浓度较正常状况下高，且特异性IgE抗体浓度越高，诊断过敏性疾病的概率越高。 本指导原则适用于过敏原特异性IgE抗体检测试剂，包括总IgE和特异性IgE，同时适用于不同的检测方法（原理）。 本指导原则适用于申请产品注册和相关许可事项变更的产品。 二、基本要求
样品管理规章制度85981
样品管理制度 1 目的： 为规范管理，使产品的检测结果准确可靠、生产过程的可追溯性得以实现，制定本制度。 2 范围： 适用于公司的检测样品、原辅料和产品留样、研发样品的管理。 3 职责： 3.1 品管部实验室负责样品的取样、标识、保存、管理。 3.2 相关部门配合品管部的取样工作。 4 制度 4.1 样品种类： 样品种类分检测样品和留存样品两类，其中留存样品包括研发样品。 4.2 取样， 品管部实验室根据检测对象的类别选择合适的方法进行取样，样品要有代表性。取样时采取必要的措施或合适的操作方法，以避免污染、破坏、改变样品和取样对象的性质。 4.3 标识 取样后立即进行标识，内容至少包括样品名称、批次、检测项目、取样日期等。根据样品的不同，标识内容适当增加。委托检验的样品，按照安全监控计划的编码方法进行标识。 4.4 取样数量 4.3.1 检测样品根据检测对象，检测项目等要求确定其取样数量。 4.3.2 留存样品： 纸箱、标签、空罐每批留存一个样品。 研发样品全部留样。 成品留样，15173号罐和15153号罐每批留1-2个，9121和9116号罐每批留2-3个，1000ml以下玻璃瓶每批留2-3个。 4.4 样品保存： 4.4.1 检测样品 取样后应立即检测或送检。确实需要暂时保存的，应放置于清洁干燥的地方，不应相互污染，也不应受到其他物品的污染。生鲜样品还应保存于冰箱中防止变质。 4.4.2 留存样品 留存样品存放于样品室，并做好样品留存记录，成品做《成品留样记录表》，内容应包括样品名称、批号、收存日期等。 样品室内样品的摆放应便于查找。 样品室内保持清洁干燥，有防虫鼠设施。 留存样品的保存期限应至少延迟的该批产品或包含该批物料的产品的保质期。研发样品的保存期应延长，以便于必要时调整保质期。 对于留存的产品，在其留存期内应经常观察其质量情况，如有不正产的变化，应采取必要的措施对该批产品进行处理或调整产品的保存期。 4.5 样品的传递：
过敏原检测市场概况
过敏原检测市场概况 概要：空气污染加剧，关注过敏原诊断市场随着全球环境污染程度的逐年加剧，以及生活方式和用药方式的改变，过敏性疾病发病率呈逐年增高趋势。过敏原诊断包括体内检测方法和体外检测方法。体内检测方法主要包括皮肤点刺试验（SPT）、真皮内皮肤试验（IST）、过敏原激发试验及斑贴试验。体外检测方法一般检测的是血清中的IgE、特异性IgE（sIgE）和IgG，相较传统的皮肤试验，体外过敏原检测试验具有特异性高，准确度、稳定性好等优点，可以定量，不受药物和皮肤因素的影响，安全、无全身反应危险，且样本可以长期保存。预计全球过敏原诊断将从2015 年的13亿美元翻三倍，增加至2024年的38亿美元。 1.过敏性疾病简介 过敏性疾病是指由变态反应机制引起的疾病，机体受到变应原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤的异常适应性免疫反应。常见的过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、特应性皮炎、荨麻疹、湿疹、过敏性结膜炎等疾病。 随着全球环境污染程度的逐年加剧，以及生活方式和用药方式的改变，过敏性疾病在人们的日常生活中越来越常见，在北美、欧洲、亚太经济发达地区，过敏性疾病发病率呈逐年增高趋势，年幼人群发病、多种过敏原过敏和多器官过敏的情况日益增多。据世界变态反应组织（WAO）统计，全球过敏性疾病总患病率高达22%，其中过敏性鼻炎患病率最高达17%，过敏性疾病被世界卫生组织列为21 世纪需重点防治的四大重要非传染病之一。我国目前还没有非常权威的过敏性疾病的流行病学数据，对于发病率大概的估计在25-30%左右，并呈逐年上升趋势，以过敏性鼻炎和过敏性哮喘为代表的过敏性疾病患者在我国数以亿计，已成为了名副其实的常见病和多发病。 2.引发过敏的因素和症状表现 （1）吸入性过敏：过敏原存在于空气中，通过呼吸道进入人体。过敏原主要包括各种植物花粉、尘螨、真菌孢子和菌丝、动物脱落的上皮羽毛、有毒有害气体等。吸入性过敏最多见的是过敏性鼻炎和过敏性哮喘，也是目前过敏性疾病中最为常见的。主要表现为打喷嚏、鼻痒、流清水鼻涕以及咳嗽、憋气、哮喘等。 （2）接触性过敏：通过皮肤或黏膜与环境中的致敏物质相接触引起的过敏。过敏原主要包括衣被等化纤织物、化妆美容用品、洗衣粉、农药等。主要表现为皮肤起疹、红肿、瘙
如何看检验报告(完全版)
如何看检验报告（完全版） 1。血常规 一般看病最常做的就是3大常规，这也是住院病历里面必须的，特别是小孩子发烧感冒时，建议大家去医院要自己要求验，看看是不是病毒感染，这样可以避免医生滥用抗生素。 血常规化验现在一般取指尖血（过去取耳垂末梢血），内容包括血红蛋白浓度、白细胞计数和分类及血小板计数，均用英文字首缩写表示。 血红蛋白(HGB) 正常值为120-150g/L 白细胞计数(WBC) 正常值为4×109/L-10×109/L 其中中性白细胞（NEUT%）正常时为0.5-0.7 淋巴细胞(LYM%) 正常时为0.2-0.4 嗜酸细胞(MXD%) 正常时为0-0.02 血小板(PLT ) 正常值为100×109/L-300×109/L HCT 红细胞平均体积（MCV）正常值为82-92fL 平均血红蛋白浓度（MCHc）正常值为340-360g/L 临床意义: 如果HGB值低于120g/L，就说明有贫血存在，应该进一步检查是什么性质的贫血，如果HGB值高于160g/L，可能是因为患有血红蛋白增高症或者血液被浓缩的缘故，WBC代表的白细胞是人体的防御系统的重要组成，相当于国家的军队，共总数的增高（超过10×109/L）时，多表明有炎症、感染存在，此时病人多有发热症状，如果白细胞总数太高在（30-50）×109/L以上，病人是于少年儿童或年青人，伴有较严重的不能解释的贫血，请不要掉以轻心，应该进一步做骨髓穿刺检查，排除白血病的可能，白细胞总数低于4×109/L，可由接受放射线，病毒感染药物及化学物质中毒等引起。中性白细胞比例增高多意味着感染（特别是细菌感染）存在，淋巴细胞增高多见于慢性疾病及长期接受放射线照射，嗜酸性白细胞增高时，往往说明体内有过敏原存在引起的过敏，如寄生虫（蛔虫多见），过敏性炎症，过敏反应等。PLT减少时，可能会有出血，如血小板减少性紫癜等，增高时，说明血液呈高凝状态，易发生血栓。 红细胞计数（RBC）和血红蛋白（HGB）减低，即可诊为贫血。按红细胞体积大小可分为巨细胞性贫血，小细胞性贫血和正细胞性贫血。MCV（红细胞平均体积）和MCHC（平均血红蛋白浓度）为主要分型依据。 2.尿常规 蛋白（PRO）正常为阴性 尿糖（GLU）正常阴性 红细胞（RBC）正常0-1/高倍
检测样品管理这几个小细节
检测样品管理这几个小 细节 文件编码（008-TTIG-UTITD-GKBTT-PUUTI-WYTUI-8256）
检测样品管理这几个小细节决不能忽视。。。实验与分析 对检测样品的接收、流转、贮存、处置以及检测样品的识别等各个环节实施有效的质量控制至关重要。管理检测样品可以确保检测样品的代表性、有效性和完整性，从而保证检测结果的准确度。。。 管理检测样品需做到这9个方面。。。 1.样品的采集： 样品应具有代表性。以样品的结果说明总体的情况，对总体作出结论。采样遵循如下原则： a）代表性： 采样时应特别注意克服和消除各种因素的影响，使样品最大限度地接近总体情况，保证样品对总体有充分的代表性。 b）可获性： 某些情况下，样品可能不具备代表性，而是由其可获性所决定。 c）公证性： 采样必须保证公正，由具有资格的人员（接受过采样培训且考核合格的人员）进行。必要时在现场与受检单位陪同人员一起签封，并做好现场采样记录。填写样品采集记录表，双方签字确认。 2.样品的接收 a）填写委托书 无论抽检还是送检样品首先应由委托方填写“样品检验委托书，一般委托书一式二份，一份留检验机构存档，一份交委托方作为领取报告凭证”。
b）审核委托书 接收人员应审核样品检验委托书填写是否规范，是否有空项，手续是否齐备，资料是否完整，标准引用是否正确、适宜。 c）核查样品 样品应与“样品检验委托书”填写内容一致。样品包装应完好，如不完好应有文字记录。送检样品数量应符合检验、复验、仲裁的要求，如送检样品仅为检验样品应有文字说明。 d）正式受理 样品接收人员在“样品检验委托书”上签字并承诺出具报告日期。 3.样品的编号 为保证检验样品溯源，原则上一份样品给予一个唯一性编号（CNAS的要求是避免混淆，并不是要唯一性编号，当然唯一性编号肯定也满足要求）。 对于同一事件的若干样品可视为一份样品给予一个编号。样品编号可由年份、样品类别代码和样品序号组成（或者其他的适合实验室的编号）。为保证样品编号的唯一性，一般由样品接收部门负责统一编制，或者有LIMS的实验室可以由系统生成。 4.样品的识别 样品的识别包括唯一性编号(样品受理编号)和样品不同试验状态(未检、在检、检毕、留样)标识。对检毕样品应有“检毕”、“合格”、“不合格”标识。对于多个包装的同一样品应在样品受理编号后面加横杠和数字加以细分识别，以确保每个包装的唯一性。样品管理员负责将样品的识别标签逐一贴在样品上。 5.样品的流转
过敏患者过敏原检测回顾分析
过敏患者过敏原检测回顾分析 [摘要] 目的分析四川绵阳地区变态反应性疾病患者的过敏原种类，为该地区过敏性疾患的治疗和预防提供参考依据。方法采用欧蒙印迹法体外检测血清中的吸入性及食入性特异性抗体，并对过敏原进行分析。结果绵阳地区以吸入性过敏原为主，分别为屋尘、尘螨组合，狗上皮，蟑螂，其阳性率分别为41.3%、34.6%、26.4%和18.1%。食物组中对淡水鱼组合，蟹，海鱼组合，鸡蛋白过敏原发病率较高，分别为16.9%，14.7%，13.5%，12.2%和10.5%。结论四川绵阳地区吸入性过敏原组发病率更高。 皮过敏性皮肤病是皮肤病中的常见病和多发病，其发病机理复杂。随着城市化进程，空气、水质污染及环境卫生，居住条件，饮食习惯等改变，其发病率有上升趋势。很多患者因找不到过敏原和发病原因而反复发作，为临床治疗和预防带来难度。为了解四川绵阳地区过敏性疾患过敏原的特征，对2010-01/2011-12于绵阳市中心医院门诊及住院患者进行的过敏原检测作回顾性研究，现将结果报道如下。 1 对象与方法 1.1 一般资料选择2010-01/2011-12到绵阳市中心医院住院及门诊的2196例患者，其中男1 190 例，女1 006例，平均年龄25.6岁。疾病种类包括湿疹，荨麻疹，过敏性紫癜，特应性皮炎，神经性皮炎，接触性皮炎，哮喘等。所有患者均按相关诊断标准执行[1]。检测前所有患者1月内均未系统使用糖皮质激素，1周内未服用抗组胺药，且无严重系统性疾病。 1.2 检测方法采用欧蒙医学诊断股份有限公司提供的试剂盒，严格按其说明书操作。采用欧蒙印迹发检测吸入和食入性过敏原。经缓冲液预处理的检测膜条与患者标本进行第一步温育。如果阳性，IgE类特异性抗体与相应的过敏原结合。为检测结合的抗体加入酶标单克隆的抗人IgE抗体（酶结合物）进行第二步温育，然后加入底物，发生颜色反应。使用EUROLineScan软件判断结果，条带颜色的深浅用EAST(Enzyme-Allergen-Sorbent Test) 0～6表示。2级以上被认定为阳性。进行以下20种过敏原检测：1.ts20 树组合2（柳树、杨树、榆树）； 2.w1 普通豚草； 3.w6 艾蒿； 4.ds1 尘螨组合1（屋尘螨、粉尘螨）； 5. h1 屋尘； 6. e1.猫毛； 7. e2 狗上皮； 8.i6 蟑螂； 9.霉菌组合1（点青霉、草本芽枝霉、烟曲霉、交链孢霉）； 10.u80 律草；11.f1 鸡蛋白；12. f2 牛奶；13.f13.花生；14.f14.黄豆；15.f27.牛肉；16.f88.羊肉、羊羔肉；17.fs33.海鱼组合1（鳕鱼、龙虾、扇贝）；18.fs34.淡水鱼组合1（鲑鱼、鲈鱼、鲫鱼）；19.f24.虾、对虾；20.f23.蟹。
过敏原特异性IgE检测
过敏原特异性IgE检测 过敏原特异性IgE检测的目的：分析临床常见吸入性过敏原和重要食物过敏原的种类。 过敏原特异性IgE检测的方法：用ImmunoCAP过敏原检测系统所做的过敏原特异性IgE （specific IgE,sIgE）检测结果，统计每种过敏原的检测量、阳性检出量和阳性率，并对过敏原阳性检出量进行排序分析，血清特异性IgE是确诊过敏性疾病的唯一临床指标，当人体免疫细胞调控能力不足或接触到过敏原如尘螨、花粉或食物等后，使TH2型免疫反应过度活化，导致TH2型免疫细胞激素分泌量过高，就会帮助B细胞制造较多的过敏抗体IgE，因而出现过敏症状。 过敏原特异性IgE检测结果：其中吸入性过敏原介导的过敏性疾病IgE阳性高达76%；食物过敏原介导的过敏性疾病IgE阳性高达22%。常见吸入性过敏原18种分别是：户尘螨、粉尘螨、蒿属花粉、链格孢、白蜡花粉、柏树花粉、豚草花粉、桦树花粉、蟑螂、梧桐花粉、苍耳花粉、屋尘、多主枝孢、狗皮屑、猫皮屑、鹅毛草花粉和烟曲霉等。 重要食物过敏原包括：鸡蛋、牛奶、花粉、大豆、虾、蟹、谷物、坚果和水果等。 过敏原特异性诊断分体内法和体外法，皮肤试验属于体内法，血清特异性IgE检测属于体外法。 结论：不同的过敏性疾病与过敏原IgE检测的阳性率有很大关系，因果关系明显的过敏性疾病检测IgE阳性率高，如季节性过敏性鼻炎，湿疹等，蒿属花粉过敏sIgE检测的阳性率高达64.4%. 有些过敏性疾病的过敏原比较隐匿，加之皮肤试验的假阳性较多，很难通过临床资料确定，特别是食物过敏。 目前特异性IgE免疫疗法是惟一可能通过免疫调节机制改变过敏性鼻炎（季节性过敏性鼻炎）免疫自然进程的方式，过敏其实是人体对环境中无害的物质产生的异常免疫反应，而非一般的细菌或病毒，尤其这些过敏都属于黏膜发炎的反应，因此，只要补充肠道抗过敏益生菌（中文名：福敏康益生菌）改善肠道内的益菌生态，提高游走全身黏膜性突出细胞的能力，就可以达到调节全身免疫功能的效果，缓解过敏症状；福敏康抗过敏益生菌富含多种新型抗过敏的乳酸菌菌株，可增强抗过敏的能力，并通过增进TH1型免疫反应来调控因过敏而反应过度的TH2型免疫反应从而减少过敏性鼻炎患者血清中过高的IgE特异性抗体，缓解过敏症状，调整过敏体质，相比单纯药物抗过敏性鼻炎哮喘或皮肤荨麻疹湿疹等过敏性疾病可产生良好的整体疗效，有效的改善过敏患者的生活质量。
乳品安全中的牛乳过敏
乳品安全中的牛乳过敏 Milk allergy in the dairy safety 罗曾玲陈红兵 LUO Zeng-ling CHEN Hong-bing (南昌大学食品科学教育部重点实验室中德联合研究院,江西南昌330047) (The Key Laboratory of Food Science of MOE,Sino-German Joint Research Institute,Nanchang University,Ministry of Education,Nachang,Jiangxi 330047,China) 摘要:牛乳过敏是婴幼儿中一种常见的食物过敏，严重危害婴幼儿健康。对牛乳过敏的机理、牛乳中的过敏原成分、牛乳过敏原的检测、加工对牛乳过敏原的影响作了详细的介绍。 关键词:牛乳过敏；牛乳过敏原 Abstract:Milk allergy is the most food allergy in early childhood and is harmful for the growth of the children.The mechanism of milk allergy, milk allergens,the detection of milk allergens and effects of processing on milk allergens are introduced in detail. Keywords:Milk allergy；Milk allergen dairy safety 牛乳过敏是儿童中一种常见的食物过敏，严重地影响儿童的身体健康。它在儿童中的发生率为0.5%～7.5%[1，2]，且主要见于婴幼儿，一般是暂时性的，随着年龄的增长，会自动消失[3]。据报道，在北欧的一些国家，牛乳过敏在2岁以下儿童中的发生率为1.9%～2.8%，而在3岁以上儿童中的发生率仅为0.3%左右[4]。在成年人中牛乳过敏也偶有发生，但发生率极低，小于1%[5]。乳及乳制品是儿童重要的食物蛋白来源，而牛乳过敏严重危害儿童健康，已引起了全球的广泛关注，是食品安全领域的主要研究课题之一。 1机理 牛乳过敏是由牛乳中蛋白过敏原所引发的食物不良反应，与非过敏性食物不—————— 基金项目：国家自然科学基金项目（30560096） 作者简介：罗曾玲(1981-)，女，南昌大学中德联合研究院在读研究生。 E-mail:luozling269@https://www.wendangku.net/doc/8c1471727.html, 通讯作者：陈红兵