Fe_3_对紫球藻生长及蛋白质和_胡萝卜素含量的影响_刘丹楹

doi:10.3969/j.issn.1005-8141.2013.05.005

Fe

3+

对紫球藻生长及蛋白质和B -胡萝卜素含量的影响

刘丹楹,陆 波,李玲玉

(山东大学(威海)海洋学院,山东威海264200)

摘要:为了考察Fe 3+对紫球藻的生长及对可溶性蛋白和B -胡萝卜素合成的影响,分别在不同浓度的Fe 3+下培养紫球藻。实验测定了紫球藻细胞的生长曲线,采用超声波破碎法破碎紫球藻细胞提取可溶性蛋白,考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白含量,丙酮溶解提取B -胡萝卜素,分光光度计测定吸光值求B -胡萝卜素含量。实验结果表明,5@10-5mol/L 的Fe 3+对紫球藻的生长及可溶性蛋白的积累有较大作用,5@10-4mol/L 的Fe 3+对B -胡萝卜素的积累有较大作用。

关键词:铁离子;紫球藻;生长曲线;可溶性蛋白;B -胡萝卜素

中图分类号:Q949.29+2.1;Q591.9 文献标志码:A 文章编号:1005-8141(2013)05-0464-03

Effects of Iron on Growth and Content of Soluble Proteins and B -C arothne in Po rphyridium cruentum Cells

LIU Dan-yi ng ,LU Bo,LI L i ng -yu

(Marine College,Shandong Uni versity at Weihai,Weihai 264209,China)

Abstract:The variations in iron concentration was determined the differen t content of soluble proteins and B -carothne from Porphyridium cru -entum .In order to investigate the effect of iron concentration on the content of soluble proteins and B -carothne,the cells of P.cruentum were cultured by di fferent concentration of iron.The growth curve of Porp h yridium cruentum were investigated.Ultrasonic method was used for cell fragmentati on to extract soluble protei ns.Bradford method was used to investigate the concentration of soluble proteins.Acetone was used to di ssolve and extract B -carothne.Spectrophotometer method was used to measure the content of soluble proteins and B -carothne.The results showed that the Porp h yridiu m cruentum ,the maximum cell density and the maximum content of soluble proteins was detected in 5@10-5mol/L iron group,and the maximum con -tent of B -carothne was detected in 5@10-4mol/L iron group.

Key words:iron;Porphyridium cruentum ;growth curve;soluble p roteins;B -carothne

收稿日期:2013-03-13;修订日期:2013-04-21

基金项目:山东大学(威海)科技立项项目(编号:SR TPA12040)。第一作者简介:刘丹楹(1992-),男,云南省玉溪人,本科,研究方向为微生物与生化药。

紫球藻(Porphyridium cruentum )属于红藻门(Rhodophyta)原红藻纲(Protoflorideophyceae )紫球藻目(porphyridiales )紫球藻科(porphyridiaeeae )紫球藻属

(Porphyridiom,Nae geh,1894),是一种原始的单细胞红藻,分布于海水、咸水和潮湿的土壤中,其生长行为与一般微藻相似,温度、光照、pH 、重金属离子等均影响其生长。紫球藻细胞内含有丰富的高不饱和脂肪酸、叶绿素、类胡萝卜素、藻胆蛋白、多糖等多种代谢物

[1]

。

藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是蓝藻、红藻和隐藻光合作用的捕光色素,在食品、化妆品、医药、检测等方面具有重要的应用价值。藻红蛋白是藻胆蛋白家族中最具开发前景的一员。紫球藻细胞内有一个大而呈星状的色素体,内含丰富的藻红蛋白和藻蓝蛋白,其中以藻红蛋白含量最多,含量可达细胞总蛋白含量的50%,其中藻红蛋白占84%。在适宜的培养条件下,藻体细胞中的藻红蛋白含量可达到总细胞生物量的5%)10%,是藻红蛋白的一个重要来源。目前对藻红蛋白的结构性质和光合作用的基础理论方面的研究较多,

而对藻红蛋白的制备技术研究相对较少[2]。由于用于藻红蛋白生产的藻体生物量来源有限,藻胆蛋白分离纯化技术较复杂,尤其是大量制备技术相对滞后,从而

造成其价格十分昂贵,这就限制了藻红蛋白的应用。有研究认为,藻体生长环境的不同会影响藻红蛋白的含量,但未见详细的研究报道[3]。

B -胡萝卜素是一种抗氧化剂,具有解毒作用,是维护人体健康不可缺少的营养素,在抗癌、预防心血管疾病、白内障和抗氧化等方面具有显著的功能,可防治老化和衰老引起的多种退化性疾病。盐生杜氏藻(Dunaliella salina )在人工胁迫条件下能大量积累B -胡萝卜素(占干重的10%)14%),被公认为是生产B -胡萝卜素的理想天然资源[4],紫球藻中也含有一定量的B -胡萝卜素。本文就在不同浓度的Fe 3+培养下,以紫球藻细胞内含有的B -胡萝卜素的量来指导以后的紫球藻培养,也为B -胡萝卜素提供广阔的来源。作者研究了不同浓度的Fe 3+培养下,紫球藻的生长情况以及对细胞内藻红蛋白和B -胡萝卜素含量的影响

[5]

。

1 材料与方法1.1 实验材料与仪器

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紫球藻(Porphyridium cruentum)原种由中国山东大学(威海)海洋学院提供。仪器为电热鼓风干燥箱(杭州汇尔仪器设备有限公司)、分析天平(上海楚柏实验室设备有限公司)、SWB5200型超声清洗机(上海必能信超声有限公司)、高压蒸汽灭菌锅(上海博迅实业有限公司)、超净工作台(上海博迅实业有限公司)。

1.2培养条件

培养基:本实验所用海水培养基配方为:NaNO35.6 g/L、KH2PO40.2g/L、ZnSO42.3@10-5g/L、MnCl21.78 @10-4g/L、Na MoO48@10-6g/L、CoCl21.2@10-5g/L,无菌海水配制,自然pH值,培养温度23)25e,连续光照。

变量的配制:称取FeCl3#6H2O0.1352g加入到100mL去离子水中,配制成5@10-3mol/L的FeCl3母液,封口,在121e下高压蒸汽灭菌锅中灭菌15min;然后分别在培养管0、0.;1、1.;2、2.;3、3.;4、4.中按表1加入适量的变量溶液(培养管终体积为200mL)。

表1各培养瓶中加入的变量溶液量(mL)

管号溶液中FeCl

3

的浓度

(mol/L)

200mL培养基中变量

母液的量(mL)

0、0.00

1、1.5@10-60.2

2、2.1@10-50.4

3、3.5@10-52

4、4.5@10-420

1.3接种

每只培养管中均按10%的量(20mL)接种紫球藻种子液。

1.4测定指标及测定方法

测定生长曲线:血球计数板法计数紫球藻液[6],每个培养管计数一次,两平行管取其平均数,每天计数一次。

B-胡萝卜素含量测定[7,8]:取藻液10mL,4000r/ min离心15min,弃上清,沉淀物加入10mL体积分数为80%的丙酮溶液,在4e冰箱中静置一夜,4000r/min 离心15min,取上清液,按该方法重复提取,合并所有上清液,定容,测定450nm波长处的吸光值。根据以下公式计算B-胡萝卜素含量(mg/L)=OD450@稀释倍数@(10@1000)/2500。式中,10为藻液体积,1000为单位换算值,2500为B-胡萝卜素系数[9]。

蛋白质标准曲线的制作:准确称取100mg的牛血清清蛋白溶于100mL的水中,制成1000L g/mL母液,然后分别制成0、20L g/mL、40L g/mL、80L g/mL、120L g/ mL、160L g/m L、200L g/mL的标准溶液。

20)200L g/mL标准曲线的制作:准确量取0.5mL 含0、40L g/mL、80L g/mL、120L g/mL、160L g/mL、200L g/mL的标准溶液,分别置于10mL具塞试管中,加入5mL 考马斯亮蓝G-250蛋白试剂,将试管倒转混匀,放置2min后用1cm厚的比色皿在595nnL处测定溶液的吸光度,并以吸光度为纵坐标,蛋白质含量为横坐标,作图则得标准曲线(表2)。

表2制作标准曲线

标准液浓度(L g/mL)0204080120160200加入标准液的体积(mL)0.50.50.50.50.50.50.5加入考马斯亮蓝体积(mL)5555555测定可溶性蛋白质的含量:在培养的紫球藻细胞到达稳定期时对紫球藻进行破碎处理,测定紫球藻细胞内的蛋白质的含量;将藻液以5000r/min的转速离心10min得到藻体,分别用蒸馏水和10mmol/L(pH 6.8)的磷酸盐缓冲液各洗涤一次,再次离心(5000r/ min,l0min),然后将藻体重新悬浮于少量10mmol/L (pH6.8)的磷酸盐缓冲液中,采用超声波法[10],在冰浴、占空比为50%、输出功率为150W和时间20min的条件下进行破碎,再将破碎好的藻体离心(5000r/min, 15min),取粉色上清液,即为藻红蛋白粗提物(可溶性蛋白质);采用Bdarofdr法测量其蛋白含量,每组取0.5 mL上清液加入5m L考马斯亮蓝溶液,测定在595nm 波长处的吸光度,以0.5mL磷酸盐缓冲液加5mL考马司亮蓝作为参比,确定样品藻体胞内蛋白质含量。

2结果与讨论

2.1Fe3+对紫球藻生长的影响

由紫球藻的生长曲线(表3)可见,生长情况为2> 1>3>4>0。从图1可见,在试验范围内,5@10-5mol/ L的Fe3+对紫球藻的生长有较大的促进作用,其次是5 @10-4mol/L的Fe3+,第三是1@10-5mol/L的Fe3+,第四是5@10-6mol/L的Fe3+,最弱的不加Fe3+,这说明一定浓度的Fe3+对紫球藻生长有一定的促进作用。

表3血球计数板计数紫球藻生长情况

数量(@105)01234第一天 4.254 3.5 3.75 4.25

第二天8.2514.5218.75 6.5

第三天241935.2524.2515.25

第四天44.2556.256049.541.25

第五天65.58399.57671.5

第六天73125152.58374.5

第七天87.75187.5198.75101.2593

第八天91.25196.25211.25106.2595

第九天95205216.2511098.75

2.2Fe3+对紫球藻B-胡萝卜素含量积累的影响

由测得的分光光度值求得B-胡萝卜素含量(mg/ L),见表4,并制图(图2)。由铁离子对紫球藻中B-胡萝卜素含量的影响的图2可见,不同浓度的Fe3+紫球藻中的B-胡萝卜素的积累均具有一定的作用。在实

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验所涉及的集中浓度下,铁离子浓度越高对紫球藻中B -胡萝卜素的积累越有利。

图1 紫球藻生长曲线表4 各管中B -胡萝卜素含量

管号

12340B -胡萝卜素含量(mg/L)

1.412

0.826

0.38

0.224

0.2

图2 铁离子对紫球藻中B -胡萝卜素含量的影响

2.3 蛋白质标准曲线的制作

蛋白质浓度与吸光度关系见表5,吸光度与蛋白质浓度的标准曲线见图3。

表5 蛋白质浓度与吸光度关系

蛋白质浓度(L g/mL)

20

40

80

120

160

200

吸光度A

0.05430.11240.210.31440.4040.

503

图3 吸光度与蛋白质浓度的标准曲线

2.4 Fe 3+对紫球藻可溶性蛋白质含量积累的影响

蛋白质浓度见表6。由图4可见,Fe

3+

浓度为

5@10-5

mol/L 的紫球藻中蛋白质含量最高,Fe 3+

浓度为5@10-4mol/L 的紫球藻中蛋白质含量次之,Fe 3+浓度为1@10-5

mol/L 的紫球藻中蛋白质含量第三,Fe 3+

浓度为5@10-6mol/L 的紫球藻中蛋白质含量最低,但

均比对照管高。因此,在一定的范围内,Fe 3+

浓度越

高,越有利于藻红蛋白的积累;超过该范围,浓度越高

反而会抑制藻红蛋白的积累。表6 各管中的蛋白质浓度

管号12340吸光度0.34900.36250.17250.10700.1000蛋白质浓度(L g/mL)

135.32

140.72

64.72

38.52

35.72

图4 紫球藻中可溶性蛋白的含量

3 讨论

铁是海洋浮游植物的微量营养元素和催化元素,对浮游植物有效利用C 和N 、叶绿素的生物合成及光合作用都有重要作用。Fe 对藻类生长的影响不仅取决于总Fe 的含量,更重要的是取决于它转化成生物活性形式的速度和藻类的有效吸收。本文主要研究了Fe 3+

对紫球藻生长和蛋白质和B -胡萝卜素含量的影响,作者发现Fe 3+对紫球藻的生长有较强的促进作用。在实验所涉及的浓度中,5@10-5mol/L 的Fe 3+对紫球藻的生长有最大的促进作用,浓度高于此浓度或低于此浓度的作用均不佳,Fe 3+对紫球藻B -胡萝卜素有较强的促进作用。在实验所用浓度范围下,Fe 3+浓度越高,对B -胡萝卜素的积累越有利,Fe 3+对紫球藻中可溶性蛋白质的积累具有很强的促进作用。在实验所涉及的浓度下,5@10-5mol/L 的Fe 3+对紫球藻可溶性蛋白质的积累最有利。

参考文献:

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[2]孙利芹.培养条件对紫球藻B 藻红蛋白含量的影响[J].浙江大学学

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青岛:中国海洋大学硕士学位论文,2004.

[4]王培磊.Fe 对两株盐生杜氏藻生长和B -胡萝卜素积累的影响[J ].

食品研究与开发,2007,28(5)B 39-43.

[5]李丽.铁离子对三株典型微藻生长和脂质积累及相关基因表达的影

响研究[D].长沙:中南大学硕士学位论文,2010.[6]沈萍,陈向东.微生物学实验(第四版)[M ].北京:高等教育出版社,

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胡萝卜粉中类胡萝卜素含量的快速测定

新疆农业科学2004，41（专刊）：103～105 Xinjiang Agricultural Sciences 胡萝卜粉中类胡萝卜素含量的快速测定 陈洁1，解晓霞2，庞咏梅2，丁海燕2，王先云3 （1.乌鲁木齐神内生物制品有限公司，新疆乌鲁木齐830001；2.新疆冠农天府果蔬食品有限责任公司，新疆库尔勒841000；3.乌鲁木齐市绿金啤酒花有限公司，新疆乌鲁木齐830001） 摘要：在GB12291-90的基础上，利用萃取剂（氯仿:甲醇（v/v）=2:1）对胡萝卜粉中的类胡萝卜素进行提取，并以萃取剂作为空白，确定其提取液的λmax为458nm。 关键词：胡萝卜粉；类胡萝卜素；快速测定 生产加工胡萝卜制品的企业多以胡萝卜浓缩汁、胡萝卜原浆及胡萝卜系列饮料为主，还有利用生产浓缩汁排出的废料—胡萝卜渣经烘干、磨粉而制得的胡萝卜粉制品。胡萝卜粉中富含了大量的类胡萝卜素、膳食纤维、果胶等物质，具有很高的经济价值。胡萝卜制品中的类胡萝卜素含量的高低成为评价该产品质量高低的重要指标之一。在检测该指标的众多方法中，多以层析法、色谱法居多，简易快速的方法很少，尤其是胡萝卜粉这类干制品，目前还没有完整的试验方法。实践工作中，依据GB/T12291-90的原理并借此基础，总结出一套快速、简易且较准确的方法以适宜生产检验的需要。 1材料与方法 !.!材料 胡萝卜粉（原料胡萝卜经破碎、榨汁后的湿渣再经烘干、磨粉制得，细度为80目过筛率大于60%）。!."仪器 723分光光度计、AE200电子分析天平、50ml具塞量筒（或具塞比色管）、直径为7.5cm的波纹漏斗、直径为12.5cm的快速滤纸、100ml棕色容量瓶、四孔漏斗架。 2检测方法 类胡萝卜素性状不稳定，见光易氧化分解，故操作时应避光。 ".!萃取 准确称取试样约0.2g（精确至0.1mg）于50ml具塞量筒中，以少量水浸润样品，待粉样被充分浸透、膨胀后，加入20ml萃取剂振摇数次，在振摇过程中注意旋盖放气，勿将样液溅出，于暗处放置2min 左右，取出再振摇1～2min，静置1min，待过滤。 将直径15cm的快速滤纸置于波纹漏斗中（滤纸应高出漏斗边沿1～2mm），先用少量萃取剂润湿滤纸，使之与漏斗紧密贴切，再用少量萃取剂清洗漏斗，弃去滤液。 将前述待过滤的萃取液转入漏斗（转移时，尽量将试样移入漏斗底部），随即用装有萃取剂的洗瓶快速洗涤具塞量筒3～4次至筒壁完全干净，并自上而下快速以螺旋状洗涤漏斗，致使试样全部集中于漏斗底部，盖上滤纸，待滤液完全滤干后，再用洗瓶洗涤样品，反复洗涤过滤数次（每次滤液完全滤净后再进行下一次的洗涤和过滤），直至被萃取的试样呈白色为止，全部滤液收集于棕色容量瓶中，以萃取剂定容至刻度，摇匀待比色。 "."波长 以萃取剂作空白，用1cm比色皿，在430～490nm波长内测定吸光值。以波长为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线，以选择最大吸收峰。可见λ在456～458nm内吸光值达到最大，记录该波长下的吸光值A。图1 3组6个样品的试验结果及每一个样品所对应的标准曲线。表1

胡萝卜含量最高的食物

胡萝卜是α-胡萝卜素含量最高的食物 胡萝卜素可防治智力缺陷。食用富含胡萝卜素的食物可防止记忆衰退及其他神经功能损害。胡萝卜素是抗氧化剂，它还可以防治智力缺陷。富含胡萝卜素的食物有：油菜、荠菜、苋菜、胡萝卜、花椰菜、甘薯、南瓜、黄玉米等。 紫菜、甜瓜、胡萝卜、柑橘、红薯、南瓜、柿子、木瓜、橙子、肝、牛奶、蛋黄、鱼类等。 说到这里，人们肯R*定要问，这个可爱的α-胡萝卜素，它到底来自于哪里呢?我查询了美国农业部食物数据库，发现α-胡萝卜素含量最高的食物，仍然是胡萝卜。 如果比β-胡WP-WbllbZRIxwoxGavsw$IDxKMLZbwsd萝卜素的含量，胡萝卜当然是冠军，但其他深Imu zrj绿色叶菜也相当出色，比如菠菜、苋菜，差距 9%vIZEhZO68e v9u6obfUg并不是太大。但是，若论α-胡萝卜素的含量 4!YBEoXioacTx1t#NUO7bb*pZhu-1e&LY380$Ve@jdXad-h^aYhkr-L，胡萝卜素的数据绝对让其他食物望尘莫及。o&95#up%9clD((C5以下是α-胡萝卜素的主要食物来源： 生胡萝卜：3.48mg/100g;煮胡萝卜(不加盐)：3.77mg/100g;脱水胡萝卜：14.25mg/ 100g;胡萝卜汁(灭菌罐装)：4.34mg/100g牙不齐 南瓜：0.52;豆角：0.13mg;橘子：0.111;黄玉米：0.063;香菜： 0.044;柿子：0.013;橙子：0.3 芒果：0.009;木瓜：0.002 看了这些数据就能明白，胡萝卜还是一种非常优秀的蔬菜。需要提示的是，α-胡萝卜素并不怕蒸煮温度，把胡I9me-萝卜放在肉汤里煮，只要连汤喝掉，并不会引起α-胡萝卜素的明显损失。相反，熟吃才更有利于各种类胡萝卜素的吸收，只要少量的油脂就能达到充分吸收的效果。牙齿排列不整齐 虽然现在很多蔬菜都明显涨价，胡萝卜的价格仍然处于较为低廉的位置。经常把它请进家门，既经济，又健康，无论炖、煮、炒、蒸都相当美味，实在是当今生活中难得的幸事......唯一需要小心的，就是贪吃太多有可能让皮肤染黄，

植物叶绿素类胡萝卜素测定方法

植物叶绿素类胡萝卜素测定方法 叶绿素、类胡萝卜素含量的测定 一、原理 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A,αCL式中:α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。 二、材料、仪器设备及试剂 (一)材料:新鲜(或烘干)的植物叶片。 (二)仪器设备:1)分光光度计;2)电子顶载天平(感量0.01g);3)研钵;4)棕色容量瓶; 5)小漏斗;6)定量滤纸;7)吸水纸; 8)擦境纸;9)滴管。 (三)试剂:1)95%乙醇(或80%丙酮)(v丙酮:v乙醇=2:1的95%水溶液);2)石英砂;3)碳酸钙粉。暗中2h，0.5g，25ml 三、实验步骤 1)取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料，擦净组织表面污物，剪碎(去掉中脉)，混匀。

2)将取好的样品放入25ml容量瓶中，加混合浸提液(无水乙醇:丙酮 =5:5)20ml，放在黑暗条件下，浸泡至叶片发白，用浸提试剂定容至25ml，摇匀备用。 3)把叶绿体色素提取液倒入1cm光径的比色皿内，以浸提试剂为空白测定吸光度。选择波长663 646 和470nm。 四、实验结果计算 叶绿素a的浓度 = 12.21 ， OD– 2.81 ， OD 633 646 叶绿素b的浓度 = 20.13 ， OD– 5.03， OD646663 类胡萝卜素浓度=(1000A-3.27C-104C)?229 单位 mg/L 470ab C(mg/L)*提取液总量(ml) 叶绿体色素含量(mg/g)= ____________________________ 烟叶重量(g)*1000 注意事项:操作避光研磨时间短些

植物类胡萝卜素生物合成及功能

中国生物工程杂志!"#$%&'$()*+#%(,(-. /011 21 11 103 112 收稿日期 /01041/4/0!!修回日期 /0114054/6 国家转基因生物新品种培育科技重大专项资助项目 /00678050029016' /0057805002900: /005780500;9001 /00678050109012' 通讯作者 电子信箱 < $%-<$)<=>,$?*@+(A 植物类胡萝卜素生物合成及功能 霍!培!季!静 !王!罡!关春峰 天津大学农业与生物工程学院!天津!20003/ 摘要!详述了植物类胡萝卜素生物合成途径 并从突破类胡萝卜素合成途径中上游瓶颈限制 类胡萝卜素代谢各分支途径的改造 提高植物细胞对类胡萝卜素物质积累能力三个方面探讨了类胡萝卜素生物合成酶基因在植物基因工程中的研究现状 最后对植物类胡萝卜素代谢的研究前景进行了展望 关键词!类胡萝卜素!生物合成!基因工程 中图分类号!B 51 !!类胡萝卜素是一类天然色素的总称 普遍存在于动物 高等植物 真菌 藻类和细菌中 不同的类胡萝卜素具有不同的生物学功能 在植物中 类胡萝卜素主要存在于植物叶绿体以及许多花和果实的有色体中 其在植物光合作用中发挥两个重要功能 即参与光吸收和防止前体细胞发生光氧化 1 同时 类胡萝卜素也是植物对外界刺激响应的信号分子前体物质 因此 在植物中类胡萝卜素具有促进光形态发生 参与非光化学抑制反应 脂质过氧 化反应及吸引传粉昆虫等作用 /42 近期研究还发现 类胡萝卜素可以参与传统植物激素 如脱落酸 和新型植物激素 如独角金内酯 的生物合成 ;4: 在动物细胞中 类胡萝卜素物质也起着尤为重要的作用 但其自身不能合成类胡萝卜素 只能从日常饮食中摄取 C 类胡萝卜素物质具有抗氧化活性 可以保护人类远离一系列的慢性病 是健康饮食中必须的 重要成分 3 其中 4胡萝卜素广泛的存在于各种橘黄 色水果及深绿色和黄色蔬菜中 如花椰菜 菠菜 甘蓝 胡萝卜 南瓜 番薯和西葫芦等 是人体合成维生素D 的重要前体物质 而维生素D 在人体正常生长和组织修复过程中起着重要作用 对维持人体视觉系统和免 疫系统的正常生理功能尤为重要 5 番茄红素是一种红色素 存在于许多水果和蔬菜中 如番石榴 西瓜 葡萄柚和番茄 可以作为单线态氧的有效猝灭剂 能消除羟自由基 在细胞中和脂类结合而有效抑制脂质的氧化 是非常好的食用抗氧化剂 对降低恶性肿瘤和冠心病发病率起着重要作用 6 叶黄质和玉米黄质存在于绿色 某些黄色和橙色的水果和蔬菜中 如玉米 油桃 橘子 木瓜和南瓜等 是人体视网膜黄斑的主要构成成分 10 可以预防老年人群中由黄斑病变所引起的失明 11 正是由于类胡萝卜素与人类健康的关系密切 以及其他方面的应用价值 有关类胡萝卜素生物合成途径及其相关基因的遗传操作调控得到了广泛的研究 本文主要对类胡萝卜素生物合成途径及类胡萝卜素生物合成酶基因在植物基因工程方面应用的国内外最新研究进展进行了综述 !"类胡萝卜素生物合成途径 类胡萝卜素是含;0个碳的类异戊烯聚合物 即四萜化合物 是含有5个异戊二烯单位的四萜化合物 由两个二萜缩合而成 植物中的萜类化合物有两条合成途径 即甲羟戊酸途径 A *?&,(%&)* E F D 和/4"4甲基4G 4赤藻糖醇4;4磷酸 /4"4A *)#.,4G 4*H .)#H $)(,4;4I#(J I#&)* E K L 途径 7#&%等 1/ 综述了植物帖类化合物的生物合成途径并以图表形式清晰的给出了类胡萝卜素生物合成的前体物质异戊烯二磷酸 $J (I*%)*%.

水果蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定

水果、蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定 1 主题内容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜汁中类胡萝卜素的分离提取方法及提取物中类胡萝卜素总量的测定方法。 本标准适用于水果、蔬菜汁中类胡萝卜素总量的测定。 2 原理 果蔬滤液通过溶剂萃取,分离提取类胡萝卜素,在特定波长下用分光光度法测其吸光度。该吸光度与类胡萝卜素含量成线性关系,通过换算即可得知类胡萝卜素之含量。 3 试剂和溶液 本标准所用试剂除特殊规定外,均使用符合国家标准的分析纯试剂,均采用蒸馏水。 3.1 石英砂(Q/HG 22--467)； 3.2 萃取剂,2/1(v/v)氯仿(GB 682)-甲醇(GB 683)混合。 4 仪器设备 4.1 抽滤器； 4.2 无灰分滤纸； 4.3 分液漏斗：250mL； 4.4 容量瓶,100mL； 4.5 移液管,20mL； 4.6 烧杯,50mL； 4.7 分光光度计,使用的测量波长为440±10nm。 5 分析步骤 注：由于类胡萝卜素本身性状的不稳定性,即见光易氧化分解,建议所有操作应避光进行。 5.1 试样的制备 5.1.1 液体样品：混合均匀后取样。 5.1.2 固体样品：捣碎机捣碎后,纱布挤汁。 5.2 用移液管吸取20mL样液置50mL烧杯中。 5.3 过滤：在烧杯(5.2)中加入3g石英砂,摇动后用布氏漏斗过滤(布氏漏斗预先铺有无灰滤纸,纸上铺有2g石英砂),然后再用5mL水冲洗滤渣3次。 5.4 萃取：在250mL的分液漏斗中倒入滤液(5.3),再加入20mL萃取剂(3.2),振摇后静置,收集下部分有机相,再用20mL萃取剂提取两次,将三次萃取所得有机相合并,用萃取剂定容为100mL。 注：对果胶含量大的果蔬,萃取时,将三次合并的有机相重新倒回原分液漏斗,继续用20mL萃取洗涤一次,然后用萃取剂定容至100mL。 5.5 测定：在440±10nm波长下测定提取液的最大吸光度A。 6 结果的计算和表示 类胡萝卜素总量用mg/L表示,按下式计算： 类胡萝卜素(mg/L)＝A×20 式中：A——测定的最大吸光度； 20——换算系数。 此计算公式是以公认的胡萝卜素分子平均吸收系数250为依据的。

植物叶绿素类胡萝卜素测定方法

植物叶绿素类胡萝卜素 测定方法 The manuscript was revised on the evening of 2021

叶绿素、类胡萝卜素含量的测定 一、原理 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A＝αCL式中：α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。 二、材料、仪器设备及试剂 （一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。 （二）仪器设备：1）分光光度计；2）电子顶载天平（感量）；3）研钵；4）棕色容量瓶； 5）小漏斗；6）定量滤纸；7）吸水纸；8）擦境纸；9）滴管。 （三）试剂：1）95%乙醇（或80%丙酮）（v丙酮：v乙醇=2：1的95%水溶液）；2）石英砂；3）碳酸钙粉。暗中2h，，25ml 三、实验步骤 1）取新鲜植物叶片（或其它绿色组织）或干材料，擦净组织表面污物，剪碎（去掉中脉），混匀。 2)将取好的样品放入25ml容量瓶中，加混合浸提液（无水乙醇:丙酮=5:5）20ml，放在黑暗条件下，浸泡至叶片发白，用浸提试剂定容至25ml，摇匀备用。 3）把叶绿体色素提取液倒入1cm光径的比色皿内，以浸提试剂为空白测定吸光度。选择波长663 646 和470nm。

紫球藻抗菌蛋白的纯化及其部分性质研究

紫球藻抗菌蛋白的纯化及其部分性质研究 摘要:紫球藻提取液经硫酸铵沉淀?HA柱层析后分离纯化出1种抗菌蛋白?经SDS-PAGE测定,2个亚基的相对分子量为21.0 kD与30.0 kD;此抗菌蛋白对热敏感,氨基酸组成分析显示含有17种氨基酸,含量较高的是谷氨酸?甘氨酸和天冬氨酸?纯化的蛋白对产黄青霉有较强抑制作用,其抗真菌活性比抗细菌活性强? 关键词:紫球藻;抗菌蛋白;纯化;性质 Purification and Some Characteristics of Antimicrobial Protein from Porphyridium cruentum Abstract: An antibiotic protein was isolated and purified from Porphyridium cruentum by ammonium sulfate precipitation andchromatography on HA. According to SDS-PAGE determination, the protein appeared two bands with molecular weight of 21kD and 30kD. The protein was sensitive to temperature change. The protein consisted of seventeen kinds of amino acids, among which the content of Glu, Gly and Asp was high respectively. The purified protein had strong antifungal activity against Penicillium chrysogenum. Antifungal activities were stronger than antibacterial activities in the antimicrobial protein of Porphyridium cruentum. Key words: Porphyridium cruentum; antimicrobial protein; purification; characterization 植物含有丰富的抗菌蛋白,有数百种之多,如萝卜[1]?尾穗苋[2]?银杏[3]和葫芦种子[4]中的抗菌蛋白以及几丁质酶?葡聚糖酶?蛋白酶抑制剂?核糖体失活蛋白等[5],它们都有不同程度的抑菌作用?Melo等[6]报道沙菜(红藻类)的粗蛋白具有抗真菌作用及从墨角藻中提取的类凝集素能抑制大肠杆菌和脑膜炎双球菌生长;陈国强等[7]研究发现,3种大型海藻的粗蛋白对6种植物病原真菌的菌丝生长及孢子萌发具有不同程度的抑制效果,但目前对微藻抗菌蛋白的研究报道较少? 紫球藻(Porphyridium cruentum)是一种比较原始的单细胞红藻,具有独特的物理特征,在生长过程中能合成多种有较高经济价值的生物活性物质?前期的研究发现紫球藻的蛋白质提取物具有抗菌活性[8]?本试验对此抗菌蛋白进行了分离纯化,并测定了其部分性质,为进一步开展微藻资源的研究提供参考? 1材料和方法 1.1材料 试验藻种为紫球藻,引自中国科学院水生生物研究所,以KOCH培养基进行振荡培养,培养光照强度为3 000 μmol/(m2·s),光周期为12 h光照/12 h黑暗,培养温度为

安利纽崔莱天然类胡萝卜素胶囊

安利纽崔莱天然类胡萝卜素胶囊 眼睛是心灵之窗。如果眼睛蒙上了阴翳，那么世界就会变得灰暗。叶黄素及其异构体玉米黄质正是两种保护人类心灵之窗长明的重要营养成分。2009年3月，由国际生命科学学会中国办事处与北京市眼科学会主办的“叶黄素与眼睛健康”学术研讨会在京召开，公司作为赞助方为大会特邀叶黄素人体研究的先驱——美国佛罗里达国际大学研究院副院长John Landrum博士，到会进行精彩演讲，为人们深入浅出地讲解叶黄素和玉米黄质对眼睛健康的重要作用。 叶黄素和玉米黄质眼睛的“天然墨镜” 对于白内障的研究显示：美国人群中受白内障影响的比率高达5.8％，每年新增35万个受到白内障困扰的病例；而中国患白内障的人数高达550万，占到人口总数的0.5％，而且每年新增病例为40万。550万是一个非常庞大的数字！假如能将这些人的发病时间推迟半年，就意味着为中国挽回大量的劳动生产力，而这些生产力足以兴建一座新的颐和园！ 叶黄素和玉米黄质有助降低眼病风险 叶黄素是眼睛视网膜和晶状体内不可缺少的类胡萝卜素，玉米黄质则是叶黄素的异构体，它们对维持眼睛健康具有特别重要的作用。 《美国医学会杂志》刊登的一项多中心联合眼疾病研究表明，类胡萝卜素的摄入量较高时，老年性黄斑变性的患病风险较低，而在各种类胡萝卜素中效果最突出的是叶黄素和玉米黄质。相比每天叶黄素和玉米黄质摄入量仅为0.6毫克的人群，每天摄入量达到约6毫克的人群中该疾病的风险下降了接近60％。 膳食中摄入的叶黄素和玉米黄质为什么能降低老年性黄斑变性的风险呢？这与提高了血液和视网膜中叶黄素和玉米黄质的浓度有着紧密联系。 这一系列试验表明：膳食中摄入充足的叶黄素和玉米黄质，可以提高这些营养物质在人体血液及视网膜中的浓度，从而降低老年性黄斑变性的风险。 《美国临床营养杂志》刊登的另两项研究则表明，叶黄素和玉米黄质也有助于降低白内障的风险。其中一项研究对3万多名美国男性医疗专业人士进行了为期8年的追踪监测，结果显示：相比于叶黄素和玉米黄质摄入量仅为1.3毫克/天的男性，摄入量达到6.9毫克/天的男性中白内障的风险降低了19％；另一项研究在5万多名护士中展开，经过12年的追踪监测，研究人员发现：相比摄入量仅为1.2毫克/天的部分女性，摄入量达到11.7毫克/天的部分女性，其白内障的风险降低了22％。 叶黄素和玉米黄质的三重功效 为什么叶黄素和玉米黄质对保护眼睛有如此神奇的功效呢？Landrum博士介绍道，这主要与叶黄素和玉米黄质具有遮蔽蓝光、抗氧化、帮助释放热量等作用相关。 遮蔽蓝光 阳光中能量高的蓝光对视网膜的损伤作用最强，而叶黄素和玉米黄质可以吸收蓝光。当视网膜中叶黄素和玉米黄质这些黄色色素的浓度较高时，蓝光难以穿过色素层，对后方的感光细胞造成损害。因此，富含叶黄素和玉米黄质的视网膜黄斑就像是眼睛的“天然墨镜”，可以保护后方的感光细胞免受伤害。

对β-胡萝卜素测定方法的认识

对 Β - 胡 萝 ` 卜 素 测 定 方 ^ 法 的 认 识 , 姓名：邹俊楠 班级：应用化学122班 ( 学院：化学工程学院

学校：新疆农业大学。 # ! >

{ 对β-胡萝卜素测定方法的认识 摘要：食品中的β-胡萝卜素可以用纸上层析法、薄层色谱法、分光光度法及高效液相色谱法等方法测定。本文简述了这些方法的原理条件及优缺点，并谈了谈自己的认识。 Β-胡萝卜素作为维生素A的前体，是人体重要营养素，也能够影响蛋白质的合成和利用，促进体内软组织的生长发育。同时，β-胡萝卜素还有一定的防癌作用。因此，对β-胡萝卜素的研究倍受广注。 β-胡萝卜素分子中存在多个共轭双键结构，对许多物理、化学、生物等因素都不稳定，例如光辐射、高温、酸、碱、游离卤素、水分等，但氧是影响胡萝卜素稳定的主要因素。它不溶于水、丙二醇、甘油、酸和碱，溶于二硫化碳、苯、氯仿、己烷及植物油等，几乎不溶于甲醇和乙醇。 、 1 测定方法 1·1 天然β-胡萝卜素的提取 取切碎混匀的菜样30g，加入适量水(一般约l：—2)，于捣碎机中捣碎，使匀浆呈稠糊状。 因β-胡萝卜素对弱碱比较稳定，所以选用氨水：乙醇（5:35）作

为稳定剂。稳定剂可以加快沉淀且使沉淀完全，从而减少β-胡萝卜素损失，提高提取率。 加入2%的CaCl2·2H2O其沉淀量最大，且β-胡萝卜素的含量最高。 % 因β-胡萝卜素是脂溶性物质，可以溶解在有机试剂中，根据相似相溶规律和β-胡萝卜素的理化性质，我们选用亲脂性较强的有机溶剂。 为避免β-胡萝卜素的不必要损失，在除去溶剂时应避免高温，故应优先选择低沸点的溶剂。 同时，根据β-胡萝卜素在不同溶剂中的溶解度；可以得出石油醚可以作为很好的β-胡萝卜素的溶剂。 因为蔬菜糊中含有大量的水分，直接选用石油醚很难从其中萃取β-胡萝卜素，选用水溶性的丙酮和石油醚的混合液萃取，这样丙酮会有效地使渣干燥因而在随后的萃取中，色素可以高效地进入萃取液，提高了萃取率。 故在萃取过程中，为了提高萃取率，应加入氨水：乙醇（5:35）作为稳定剂，2%的CaCl2·2H2O作为沉淀剂；用石油醚和丙酮混合物作为提取剂。 < 1·2 测定 1·2·1 纸层析法 食品中的胡萝卜素可用生物学鉴定、溶剂分配和层析技术测定。

植物类胡萝卜素含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

植物类胡萝卜素含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4330 规格:50T/48S 产品简介： 类胡萝卜素(carotenoid)是一类重要的天然色素的总称，普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类的黄色、橙红色或红色的色素之中。类胡萝卜素是体内维生素A的前体，同时还具有抗氧化、免疫调节、抗癌、减轻心血管疾病及着色剂等作用。 植物的类胡萝卜素存在于各种黄色质体或有色质体内；如黄叶，黄色花卉，黄色和红色的果实和黄色块根等组织，样本通过溶剂萃取，分离提取类胡萝卜素，在440±10nm处有特殊吸收峰。 大部分高等植物和藻类微生物的叶绿体内也含有类胡萝卜素，类胡萝卜素主要吸收蓝紫光，而叶绿素a 和叶绿素b既吸收红光又可吸收蓝紫光。所以针对含叶绿体的组织，为排除叶绿素a和叶绿素b对类胡萝卜素的干扰，根据经验公式先计算出叶绿素a和叶绿素b的含量，再进一步得出类胡萝卜素的含量；针对不含叶绿素的组织可以直接根据类胡萝卜素的经验消光系数进行计算 试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计、台式离心机、1mL玻璃比色皿、天平、可调式移液枪、研钵/匀浆器、10mL离心管/试管、蒸馏水和丙酮。 产品内容： 提取液：自备，80%丙酮，即将丙酮:蒸馏水（V:V）=4:1混合待用。 试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。 操作步骤： 一、样本制备： 1、新鲜植物叶片（去掉中脉）或其他组织用蒸馏水洗干净，然后吸干表面水分，称取约0.1g，剪碎放入研钵或匀浆器中。 2、加入1mL蒸馏水，少量试剂一（约10mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入10mL离心管或

常见食物热量及蛋白质含量表全

常见食物热量及蛋白质含量表（全）食物名称（50克）热量（千卡）蛋白质（克） 蛋类： 鹌鹑蛋 80 鸡蛋（红皮） 78 鸡蛋白 30 鸡蛋黄 164 松花蛋（鸡蛋） 89 鸭蛋 90 松花蛋（鸭蛋） 鹅蛋 98 豆类： 豆腐 49 大豆（黄豆） 腐竹 豆腐脑 素鸡 96 绿豆 158 红小豆 豆沙 红豆馅 120

蚕豆 蚕豆（烤） 186 食物名称（50克）热量（千卡）蛋白质（克）谷类： 稻米 173 米饭 58 香大米 173 高粱米 挂面 173 花卷 馒头 烙饼 油饼 油条 193 面条 142 面条（富强粉切面） 面条（富强粉煮） 小米 179 小米面 178 大黄米 玉米（鲜） 53 2

玉米糁 酒类： 啤酒 16 黄酒 33 红葡萄酒 37 低度汉酒（37度） 108 0 曲酒（55度） 165 0 二锅头（58度） 0 特制汉酒（度） 182 0 食物名称（50克）热量（千卡）蛋白质（克）坚果、种子类： 松子仁 349 核桃（干） 葵花子仁 303 榛子（炒） 297 花生仁（炒） 腰果 276 榛子（干） 271 10 芝麻（黑） 银杏（干） 栗子（熟） 106

菌藻类： 蘑菇（干） 126 蘑菇（鲜蘑） 10 黑木耳（干） 黑木耳（水发） 香菇 银耳（干） 100 5榛蘑（干） 榛蘑（水发） 23 海带（干） 海带（浸） 7 紫菜（干） 禽肉类： 鸡 乌骨鸡 肯德鸡（炸鸡） 烤鸡 120 扒鸡 鹌鹑 55 鸽 鸭 120 盐水鸭（熟）

北京烤鸭 218 鹅 烧鹅 乳类： 全脂牛奶粉 239 全脂速溶奶粉 233 炼乳（甜，罐头） 116 4酸奶 36 牛乳 27 鲜羊乳 人乳 蔬菜类： 大葱 15 大蒜（蒜头） 63 韭菜 13 蒜薹 1 小葱 12 洋葱（白皮） 165 洋葱（紫皮） 162 洋葱（葱头） 红萝卜 10 胡萝卜（黄）

类胡萝卜素的检验方法(中国螺旋藻联盟)

类胡萝卜素（以β-胡萝卜素计）的测定 A.1.1 原理 根据在碱性条件下，样品中其它色素及酯类可被皂化，可用水除去。不被皂化的总类胡萝卜素，可溶于乙醚中，通过测定其特征吸光度计算含量。 A.1.2 试剂 所用试剂均为分析纯试剂。 a）混合溶剂：正己烷、丙酮、乙醇、甲苯体积比为10:7:6:7。 b）乙醚 c) 40%KOH甲醇溶液：20克KOH溶于少量水中，用甲醇定容于50ml。 d）无水硫酸钠 A.1.3 仪器 分光光度计、恒温水浴锅。

A.1.4 操作方法 A.1.4.1 样品处理 称取0.03g至0.05g（精确至0.0001g）样品于50ml的比色管中，加35ml混合溶剂（a）和1ml40%KOH溶液（c），35℃恒温水浴并避光超声2小时，将浸泡提取液倒入250ml的分液漏斗中；在浸泡过的样品中加入25ml蒸馏水，轻轻摇荡、静置，合并以上提取液，加入乙醚（b）50ml萃取,并于萃取液中加入100ml蒸馏水，轻轻摇荡、静置，弃去下层溶液，重复洗涤至少两次，萃取液经过10g的无水硫酸钠（d），收集于100ml容量瓶中，用乙醚（b）定容至刻度线。 A.1.4.2 测定 以乙醚（b）作空白，用带塞的1cm玻璃比色皿在453.0nm处测定吸光度。 A.1.5 计算 类胡萝卜素含量（g/kg）＝A453.0×V×10 G×E 式中：A：波长为453.0nm处的吸光度； V：定容萃取溶液的体积，ml； G：样品重量（g）； E：总类胡萝卜素的吸光系数（2500）。 A.1.6 检验结果报告 保留两位有效数字。 本方法来源于《中国螺旋藻战略联盟食用螺旋藻行业标准》。

胡萝卜素的提取

β－胡萝卜素的提取分离研究

β－胡萝卜素的提取 摘要：β－胡萝卜素是安全的、无毒的天然色素，在生物食品等领域均有展应 用。β－胡萝卜素的提取工艺众多，工艺各有特点。简要介绍了溶剂提取法提取胡萝卜素，柱色谱分离β－胡萝卜素，薄层色谱法检验分离效果的方法。学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。掌握从胡萝卜中分离提纯β－胡萝卜素的原理和方法。学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。 关键词：β－胡萝卜素提取分离 引言： 胡萝卜是传统蔬菜和食用天然胡萝卜素的重要来源。β－胡萝卜素是500多种类胡萝卜素的一种。是橘黄色脂溶性化合物，它是一种重要的食用天然色素和营养强化剂，易溶于许多有机溶剂，如：乙酸乙酯、氯仿。几乎不溶于丙二醇、甘油、酸和碱‘不溶于水。β－胡萝卜素是一种非常安全的、无任何毒副作用的营养元素，具有解毒作用。是维护人体健康不可缺少的营养素。在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化方面有显著的功能，可预防因老化引起的多种退化性疾病。另外，β－胡萝卜素在食品工业中的应用也日益广泛。 胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素，是β－胡萝卜素含量最高的蔬菜之一。本文以胡萝卜为原料，采用色谱分离的方法研究了胡萝卜素的提取。 正文 1.1胡萝卜中的成分每100克胡萝卜中，约含蛋白质0.6克，脂肪0.3克，糖7.6～8.3克，铁0.6毫克，维生素A（胡萝卜素）1.35～17.25毫克，维生素B1 0.02～0.04毫克，维生素B2 0.04～0.05毫克，维生素C12毫克，热量150.7千焦，另含果胶、淀粉、无机盐和多种氨基酸。各类品种中尤以深橘红色胡萝卜素含量最高，各种胡萝卜所含能量在79.5千焦～1339.8千焦之间。胡萝卜是一种质脆味美、营养丰富的家常蔬菜，素有“小人参”之称。胡萝卜富含糖类、脂肪、挥发油、胡萝卜素、维生素A、维生素B1、维生素B2、花青素、钙、铁等人体所需的营养成分。

常见食物热量及蛋白质含量表(全)

常见食物热量及蛋白质含量表（全） 食物名称（50克）热量（千卡）蛋白质（克） 蛋类： 鹌鹑蛋80 6.4 鸡蛋（红皮）78 6.35 鸡蛋白30 5.8 鸡蛋黄164 7.6 松花蛋（鸡蛋）89 7.4 鸭蛋90 6.3 松花蛋（鸭蛋）85.5 7.1 鹅蛋98 5.55 豆类： 豆腐49 6.1 大豆（黄豆）179.5 17.5 腐竹229.5 22.3 豆腐脑7.5 0.95 素鸡96 8.25 绿豆158 10.8 红小豆154.5 10.1 豆沙121.5 2.75 红豆馅120 2.4 豌豆156.5 10.15 蚕豆167.5 10.8 蚕豆（烤）186 13.5 食物名称（50克）热量（千卡）蛋白质（克） 谷类： 稻米173 3.7 米饭58 1.3 香大米173 6.35 高粱米175.5 5.2 挂面173 5.15 花卷105.5 3.2 馒头110.5 3.5 烙饼127.5 3.75 油饼199.5 3.95 油条193 3.45 面条142 4.15 面条（富强粉切面）142.5 4.65 面条（富强粉煮）54.5 1.35 小米179 4.5 小米面178 3.6

大黄米174.5 6.8 玉米（鲜）53 2 玉米面170.5 4.05玉米糁173.5 3.95酒类： 啤酒16 0.2 黄酒33 0.8 红葡萄酒37 0.05低度汉酒（37度）108 0 曲酒（55度）165 0 二锅头（58度）175.5 0 特制汉酒（59.9度）182 0 食物名称（50克）热量（千卡）蛋白质（克）坚果、种子类： 松子仁349 6.7 核桃（干）313.5 7.45葵花子仁303 9.55榛子（炒）297 15.25花生仁（炒）290.5 11.95腰果276 8.65榛子（干）271 10 芝麻（黑）265.5 9.55银杏（干）177.5 6.6 栗子（熟）106 2.4 菌藻类： 蘑菇（干）126 10.5 蘑菇（鲜蘑）10 1.35黑木耳（干）102.5 6.05黑木耳（水发）10.5 0.75香菇9.5 1.1 银耳（干）100 5 榛蘑（干）78.5 4.75 榛蘑（水发）23 1.4 海带（干）38.5 0.9海带（浸）7 0.55紫菜（干）103.5 13.35禽肉类： 鸡83.5 9.65乌骨鸡55.5 11.15肯德鸡（炸鸡）139.5 10.15烤鸡120 11.2扒鸡108.5 14.8鹌鹑55 23.0鸽100.5 42.05

天然类胡萝卜素的生物活性及保护作用

天然类胡萝卜素的生物活性及保护作用 威廉?斯塔尔，赫尔穆特·瑟斯 2004年9月1日接收，2004年12月8日修订，2004年12月16日确定， 2004年12月28日可在线 摘要 类胡萝卜素是一类存在于大多数水果和蔬菜的天然脂溶性色素。富含类胡萝卜素的饮食使多种疾病的风险较低。本文研究类胡萝卜素的抗氧化活性及其对信号传导途径的影响，并探讨了其防御基本机制。与β-胡萝卜素预防癌症和心血管疾病的有关干预研究的数据已经提出质疑的概念。然而，有令人信服的证据表明，类胡萝卜素是抗氧化网络的重要组成部分。光氧化损伤被认为是影响皮肤和眼睛的几种疾病的生物化学路径，而类胡萝卜素可以保护光暴露的组织。叶黄素和玉米黄质是视网膜的主要类胡萝卜素，被认为是作为光防护剂，预防视网膜变性。独特的分布，定位和高水平的类胡萝卜素在黄斑以及它们的物理化学特性使其成为防御的恰当选择。β-胡萝卜素作为预防晒伤的保护剂，同时已被证明其单独或与其他类胡萝卜素和抗氧化剂维生素组合均有效。保护作用在番茄红素含量丰富的饮食中也可体现。 关键词：类胡萝卜素；预防；疾病；信号；抗氧化剂 1.简介 充足的营养是一个人健康的生活方式和降低慢性疾病的发生风险的关键因素。水果和蔬菜的消费量（每天五份“五天”）提出了维持最佳健康的食品，特别是有色食品。从流行病学研究的数据一致显示，水果和蔬菜的摄入量和几种疾病如心血管病，眼科发病率，胃肠道或神经退行性疾病和某些类型的癌症之间呈负相关[ 1 ]。目前已有假设不同的水果和蔬菜的膳食成分中，所谓的二次植物成分在疾病预防中发挥重要作用[ 2 ]。这些植物化学物质，使植物具有明亮颜色。在各种天然色素中，类胡萝卜素是由一个混合了[3], [4] 和[5]，并且有600多种不同结构的重要化合物组成。 2.类胡萝卜素 类胡萝卜素属四萜类化合物，合成于植物和其他的光合生物，以及一些非光合细菌，酵母菌，霉菌。大多数的类胡萝卜素是由一个中央的碳链的交替的单键和双键，并进行不同的循环或非循环的末端基团构成的。其主要的生化功能是由共轭双键的扩展系统承担，他们同时也是颜色的来源[ 6 ]。选定了类胡萝卜素在叶绿体光系统的组成，并且在防止对光氧化损伤植物方面扮演了重要角色]。许多水果和鲜花的黄色，橙色和红色，是由含有类胡萝卜素且通常缺乏叶绿素的有色体引起的。大量存在于植物包括叶片的一些叶绿素掩盖了类胡萝卜素的绿色部分。许多动物中也有类胡萝卜素的存在，是鸟类，昆虫，鱼和甲壳动物重要的着色剂。然而，动物和人类不能合成类胡萝卜素更新并且取决于膳食供应。根据其

胡萝卜素含量测定

食物中胡萝卜素的测定方法 Method for determination of carotene in foods 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食物中胡萝卜素的测定方法——纸层析法。 本标准适用于植物性食物和含有植物性食物的混合食物中胡萝卜素的测定，其最小检出限为0.11μg。 2 原理 以丙酮和石油醚提取食物中的胡萝卜素及其他植物色素，以石油醚为展开剂进行纸层析，胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从而与其他色纱分离；剪下含胡萝卜素的区带，洗脱后于450nm波长下定量测定。 3 试剂 3.1 石油醚（沸程30～60℃）：同时是展开剂。 3.2 丙酮：分析纯。 3.3 丙酮-石油醚混合液：3：7（V/V）。 3.4 无水硫酸钠：分析纯。 3.5 5%硫酸钠溶液。 3.6 1：1氢氧化钾溶液：取50g氢氧化钾溶于50mL水。 3.7 无水乙醇：需经脱醛处理。 3.8 β-胡萝卜素标准溶液：取5mgβ-胡萝卜素标准品，溶于10mL三氯甲烷中，浓度约为500μg/mL，准确测其浓度。 取标准溶液10.0μL，加正己烷3.00mL，混匀，测吸光值，比色杯厚度1cm，以正己烷为空白，入射光波长450nm，平行测定三份，取均值。

计算公式： (1) 式中：X1——胡萝卜素标准溶液浓度，mg/mL； A——吸光值； E——β-胡萝卜素在正己烷溶液中，入射光波长450nm，比色杯厚度为1cm，溶液浓度为1ppm的吸光系数，为0.2638； ——将ppm,换算成mg/mL; ——测定过程中稀释倍数的换算。 3.9 β-胡萝卜素标准使用液：将已标定的标准液用石油醚准确稀释后，每毫升溶液相当50μg，避光保存于冰箱中。 4 仪器和设备 4.1 实验室常用设备。 4.2 玻璃层析缸。 4.3 分光光度计。 4.4旋转蒸发器：具150mL球形瓶。 4.5 恒温水浴锅。 4.6 皂化回馏装置。 4.7 点样器或微量注射器。 4.8 新华滤纸：定性，快速或中速，101号。 5 样品的采集和处理 5.1 粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱中烤干，磨粉，储于塑料瓶内，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。

植物叶绿素类胡萝卜素测定方法

叶绿素、类胡萝卜素含量的测定 ??? 一、原理 ??? 根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A 与其中溶质浓度C 和液层厚度L 成正比，即A ＝αCL 式中：α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm 时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a 、b 和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A ，并根据叶绿素a 、b 及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a 、b 时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。 ???? 二、材料、仪器设备及试剂 ??? （一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。 ??? （二）仪器设备：1）分光光度计；2）电子顶载天平（感量0.01g ）；3）研钵；4）棕色容量瓶；? 5）小漏斗；6）定量滤纸；7）吸水纸； 8）擦境纸；9）滴管。 ??? （三）试剂：1）95%乙醇（或80%丙酮）（v 丙酮：v 乙醇=2：1的95%水溶液）；2）石英砂；3）碳酸钙粉。 暗中2h ，0.5g ，25ml ??? 三、实验步骤 ??1）取新鲜植物叶片（或其它绿色组织）或干材料，擦净组织表面污物，剪碎（去掉中脉），混匀。 ??2)将取好的样品放入25ml 容量瓶中，加混合浸提液（无水乙醇:丙酮=5:5）20ml ，放在黑暗条件下，浸泡至叶片发白，用浸提试剂定容至25ml ，摇匀备用。 3）把叶绿体色素提取液倒入1cm 光径的比色皿内，以浸提试剂为空白测定吸光度。选择波长663 646 和470nm 。 ??? 四、实验结果计算 叶绿素a 的浓度 = 12.21 ? OD 633 – 2.81 ? OD 646

类胡萝卜素的测定方法

类胡萝卜素的测定方法（高效液相色谱法） 本方法适用于各类食品中以羟基类胡萝卜素为主的多种类胡萝卜素的测定。 本方法最低检出量为：α-胡萝卜素为5ng/mL，β-胡萝卜素为 4.3ng/mL，γ-胡萝卜素为3.5ng/mL，番茄红素为2.7ng/mL，斑蝥黄素为1.0ng/mL。 1. 方法提要 样品以丙酮-石油醚（1+1体积比）混合溶剂反复萃取使类胡萝卜素与其他成分分离，在450nm 波长条件下进行HPLC分析检测，通过外标法计算各种类胡萝卜素的含量。 2. 仪器 （1）高效液相色谱仪。 （2）冷凝回流皂化装置。 （3）旋转蒸发仪。 （4）离心机（5000r/min）。 3. 试剂 本方法所使用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为重蒸馏水。 （1）丙酮-石油醚（1+1体积比）混合溶剂：取相同体积的丙酮、石油醚混匀。 （2）50% KOH甲醇-水溶液：称取250g氢氧化钾，用50mL适量水溶解后，用甲醇定容至500mL容量瓶，备用。 （3）无水硫酸钠（Na-2SO4）。 （4）二丁基羟基甲苯（BHT）。 （5）无水乙醇（C2H5OH）。 （6）流动相使用液：按乙腈+二氯甲烷+甲醇（85+10+5）比例准确量取各溶剂，并充分混匀，经.45μm微孔膜过滤后使用。 （7）类胡萝卜素标样：α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素、斑蝥黄素。（8）标准溶液：准确称取α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、番茄红素、斑蝥黄素一定量，先分别用少量的乙酸乙酯溶解，再用甲醇配制成60~80ng/L的标准储备液（于-30℃冻箱保存），使用时再配成3.5~16.5mg/L的标准使用液。 4. 测定步骤 （1）样品处理： a. 皂化提取法（如牛奶等脂肪含量较高的样品）：取250L鲜牛奶于2℃、5000r/min冷冻离心30min，取上层油脂于250mL皂化瓶中，加入50mL乙醇、40mL 50% KOH甲醇溶液、0.1g BHT，65~75℃回流皂化30min，用石油醚反复提取皂化液，多次水洗至中性后用无水硫酸钠脱水，定容至25mL容量瓶中，备用。 b. 直接提取法（如番茄等脂肪含量较低的样品）：适量新鲜成熟番茄匀浆后称取5~10mg于小烧杯中，加入0.1g BHT，用丙酮-石油醚（1+1体积比）混合溶剂提取3次，合并、收集