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染色仪中文手册

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目 录

1.序言 5

2. Lab Vision 公司__________________________________________________5

2.1. 法人信息__________________________________________________________5

2.2. Lab Vision公司_____________________________________________________5

2.3. NeoMarkers(有限)公司____________________________________________5

3. 贮藏和操作条件__________________________________________________5

3.1. 试剂______________________________________________________________5

3.2.仪器_____________________________________________________________5

4. 注意事项________________________________________________________5

4.1.试剂________________________________________________________________5

4.2.仪器________________________________________________________________5

4.2.1.概要___________________________________________________________________5

4.2.2.编程设计_______________________________________________________________6

4.2.2.1.分配试剂___________________________________________________________6

4.2.2.2.信息输入___________________________________________________________6

4.2.3.二维码标签_____________________________________________________________6

4.2.3.1.切片标签___________________________________________________________6

4.2.3.2.试剂瓶标签_________________________________________________________6

4.2.4.不使用二维码标签_______________________________________________________6

4.2.4.1.切片_______________________________________________________________6

4.2.4.2.试剂_______________________________________________________________6

5. 安装____________________________________________________________6

5.1.货物检验____________________________________________________________6

5.1.1.拆箱,检查货物配置是否齐全,检查货物是否在运送中损坏___________________6

5.2.安装准备____________________________________________________________6

5.2.1.安装地点和空间_________________________________________________________6

5.2.2.技术要求和工作条件_____________________________________________________7

6. 前操作__________________________________________________________7

6.1.安装,简介及整体描述,安装检测______________________________________7

7.原理及用途___________________________________________________7

8.功能_________________________________________________________8

8.1. 简介,用途,工作原理_______________________________________________8

8.2. 规格_______________________________________________________________8

8.2.1. 型号_________________________________________________________________8

8.2.2. 用电规格_____________________________________________________________8

8.2.4. 试剂滴加量___________________________________________________________8

8.3. 系统自检__________________________________________________________8

8.4.详细操作检测_____________________________________________________8

9.运行准备_____________________________________________________8

9.1.仪器_____________________________________________________________8

9.2.试剂_____________________________________________________________9

9.3.使用染色仪所需特殊器材___________________________________________9

9.4.标本样品的种类,前处理,预处理,保藏_____________________________9

10.操作程序步骤_________________________________________________9

10.1.开启染色仪并登录_________________________________________________9

10.2.典型操作步骤____________________________________________________10

10.3.切片信息________________________________________________________11

10.3.1.仅输入切片数______________________________________________________11

10.3.2.输入切片信息______________________________________________________11

10.3.3.删除切片信息_____________________________________________________12

10.3.3.1.删除切片号____________________________________________________12

10.3.3.2.删除病例号____________________________________________________12

10.3.3.3.删除病理号____________________________________________________12

10.3.3.4.减少切片数____________________________________________________13

10.3.3.5.删除特定切片__________________________________________________13

10.3.4.单片编辑_________________________________________________________13

10.4.标签____________________________________________________________13

10.4.1.打印切片标签____________________________________________________13

10.4.2.打印试剂标签_____________________________________________________14

10.4.3.打印二维码试剂标签_______________________________________________14

10.5.试剂____________________________________________________________14

10.5.1.试剂编辑_________________________________________________________14

10.5.1.1.修改编辑______________________________________________________14

10.5.2.加载试剂_________________________________________________________15

10.5.3.切片间的试剂复制_________________________________________________15

10.5.4.试剂列表编辑_____________________________________________________15

10.5.5.添加试剂列表试剂_________________________________________________16

10.5.6.删除试剂列表试剂_________________________________________________16

10.5.7.试剂记录_________________________________________________________16

10.6.程序编辑(免疫染色)____________________________________________17

10.6.1.创建新的染色程序_________________________________________________17

10.6.2.使用已有染色程序_________________________________________________17

10.6.3.删除已有染色程序_________________________________________________18

10.6.5.紧急停止运行_____________________________________________________19

10.6.6.运行过程中的程序编辑_____________________________________________19

10.6.7.结束完成染色程序_________________________________________________19

10.7.维护____________________________________________________________20

10.7.1.外部清洗_________________________________________________________20

10.7.2.自动清洗_________________________________________________________20

10.7.3.清洗记录_________________________________________________________21

11. “关闭”步骤程序_____________________________________________21

11.1.关闭操作________________________________________________________21

11.2.外出使用________________________________________________________21

12.紧急程序____________________________________________________21

13.内部质量控制________________________________________________21

13.1.测试IVD仪器____________________________________________________21

13.2.结果分析________________________________________________________21

13.3.整个体外检测系统的内部质量控制__________________________________21

13.3.1.阳性组织控制_____________________________________________________21

13.3.2.阳性抗体控制_____________________________________________________22

13.3.3.阴性实验控制_____________________________________________________22

13.3.4.阴性组织控制_____________________________________________________22

13.3.5.阳性实验控制_____________________________________________________22

14.废水处理____________________________________________________22

15.维护________________________________________________________22

15.1.预防性维护______________________________________________________22

15.2.清洗说明________________________________________________________22

15.2.1.外部_____________________________________________________________22

15.2.2.注意_____________________________________________________________22

15.3.杀菌,净化或消毒________________________________________________22

15.4.配件列表,包括相关工作原料和工具________________________________23

15.5.消耗品__________________________________________________________23

15.6.维修____________________________________________________________23

15.7.备件清单________________________________________________________23

16.故障排除____________________________________________________23

16.1.染色效果________________________________________________________23

16.1.1.问题或故障及其解决排除方法:_____________________________________23

16.1.1.1.无染色/弱染色/假阴性___________________________________________23

16.1.1.2.背景__________________________________________________________23

16.1.1.4.干片__________________________________________________________23

16.2.液相操作________________________________________________________24

16.2.1.问题或故障及其解决排除方法:_____________________________________24

16.2.1.1.缓冲液水流不均________________________________________________24

16.2.1.2.试剂滴加前缓冲液没有吹净______________________________________24

16.2.1.3.切片试剂分布不均______________________________________________24

16.2.1.4.冲洗头无水流流出______________________________________________24

16.2.1.5.吸液头末端有液滴悬挂__________________________________________24

16.2.1.6.试剂滴加不均,某些切片试剂过少或没有试剂_______________________25

16.2.1.7.吸液头未伸入试剂瓶或在接触液面前停止___________________________25

16.2.1.8.废水在切片槽内蓄积____________________________________________25

16.3.电路系统________________________________________________________25

16.3.1.问题或故障及其解决排除方法:_____________________________________25

16.3.1.1.右LED(绿光)不亮表明仪器处于断电状态_________________________25

16.4.机械系统________________________________________________________25

16.4.1.问题或故障及其解决排除方法:_____________________________________25

16.4.1.1.吸液头弯曲____________________________________________________25

16.4.1.2.有毒废水和无毒废水排在同一废水容器内___________________________25

16.4.1.3.废水从紧急排水管排出__________________________________________25

16.4.1.4.吸液头或冲洗头位置偏移________________________________________25

16.5.电脑与软件______________________________________________________26

16.5.1.问题或故障及其解决排除方法:_____________________________________26

16.5.1.1.电脑屏幕冻结:鼠标或键盘无反应________________________________26

17.保修期限和范围______________________________________________26

18.定购信息____________________________________________________26

18.1.消耗品和备件列表________________________________________________26

18.2.试剂来源________________________________________________________26

19.补充________________________________________________________26

19.1.培训____________________________________________________________26

19.2.服务请求协议____________________________________________________26

19.3.办公服务点______________________________________________________26

19.4.用户软件升级____________________________________________________26

1.序言

本手册符合欧洲议会98/79/EC决议文件要求以及1998年10月27日体外检测医疗器械委员会1998年10月27日会议, OJ, 1998, No L 331. Annex 1, § 8,制造商提供相关产品信息的规定要求

本手册符合EN 591:2001 对体外检测设备专业使用说明书的要求

2. Lab Vision 公司

2.1. 法人信息

Lab Vision 与 NeoMarkers 两家公司精诚合作,从而为客户提供更好的产品与服务。通过两家公司的共同努力,在高端仪器设备的发展以及创新型组织学试剂的生产上都取得了可喜的成绩。同时,一如既往地提供高品质的前沿抗体产品和专业的技术支持。两家公司有关信息的单独介绍如下:

2.2. Lab Vision公司

2.3. NeoMarkers(有限)公司

3. 贮藏和操作条件

3.1. 试剂

染色仪所使用的试剂包括各种盐类缓冲液,蛋白质溶液(抗体和检测系统),染色剂(DAB,AEC,Fast Red,等)以及组织染料。在开启,稀释和移液过程中必须采取相应的消毒措施,使用已消毒的容器和吸液管防止染菌。所有试剂必须4°C保存,以抑制细菌生长。如溶液出现浑浊,则可能已被污染,不应继续使用。必须严格按照制造商提供的使用说明使用试剂。

3.2.仪器

贮藏温度:10 °C to 43 °C or 50 °F to 109.4 °F

贮藏湿度:8% to 80%

4. 注意事项

4.1.试剂

染色仪所使用的试剂包括各种盐类缓冲液,蛋白质溶液(抗体和检测系统),染色剂(DAB,AEC,Fast Red,等)和组织染料,以及添加在某些试剂中的防腐剂(叠氮化钠,麝香草酚,等)。拥有良好的实验操作习惯并严格遵守说明书要求,上述试剂都不会对人体健康造成危害。操作或清理过程中必须佩戴手套并穿戴实验防护服。可向制造商索取相关化学制剂成分的安全性信息列表。

4.2.仪器

4.2.1.概要

本染色仪只能使用专业授权软件(通过点击染色仪图标进入)。

染色仪运行过程中,请勿使用CD-ROM或运行其他程序

在程序完全关闭前(右前方绿色电脑标志LED熄灭),请勿切断电源

染色仪运行过程中应关闭前盖以保证安全

确认染色仪已结束运行方可开盖

请勿让阳光直射染色仪

缓冲液以及蒸馏水容器必须放置地面上

缓冲液中必须含有表面活性剂以保证试剂在切片上的良好扩散(如0.05%Tween 20)

定期维护保证设备正常运行

4.2.2.编程设计

4.2.2.1.分配试剂

避免切片程序的错误输入,以免造成错误的试剂滴加,导致假阳性或阴性结果

4.2.2.2.信息输入

避免切片信息的错误输入,以免造成识别错误和报告错误

4.2.3.二维码标签

4.2.3.1.切片标签

正确粘贴切片标签。贴错标签将造成错误的试剂滴加,导致假阳性或阴性结果

4.2.3.2.试剂瓶标签

正确粘贴试剂标签。贴错标签将造成错误的试剂滴加,导致假阳性或阴性结果

4.2.4.不使用二维码标签

4.2.4.1.切片

按照程序自动生成的切片布局图,放置切片到切片架的正确位置。否则将造成错误的试剂滴加,导致错误结果

4.2.4.2.试剂

按照程序自动生成的试剂布局图,放置试剂到试剂架的正确位置。否则将造成错误的试剂滴加,导致错误结果

5. 安装

5.1.货物检验

5.1.1.拆箱,检查货物配置是否齐全,检查货物是否在运送中损坏

由厂家专业人员拆箱,检查货物配置是否齐全,检查货物是否在运送中损坏5.2.安装准备

5.2.1.安装地点和空间

染色仪必须放置在坚固,不振动的实验台上,各型号规格尺寸如下:

Autostainer 480,LV1 110cm(长) 60cm(宽) 95cm(高)

Autostainer 360 85cm(长) 60cm(宽) 95cm(高)

Autostainer 720 135cm(长) 60cm(宽) 95cm(高)

染色仪前端需要足够的空间保证机盖能够顺利开启;仪器后部(后端26cm宽范围)高度只需要60cm。

配套电脑尺寸大约60(长)×60(宽)×60(高),最好位于染色仪右侧。

配套打印机尺寸大约50(长)×50(宽)×30(高),可以放置在连线范围内的任何地方。

5.2.2.技术要求和工作条件

工作地点室内

工作温度范围15°C to 30°C, or 59°F to 86°F

最大工作温度范围10°C to 40°C, or 50°F to 104°F

染色仪必须放置在无阳光直射同时避免过冷或过热的地点。

用电规格110/120 V AC (90-132V AC), 4A, 60 Hz (+/-2Hz),

220/240 V AC (198-264V AC), 2A, 50 Hz (+/-2Hz).

电压波动不超过正常电压 +/- 10%

需要稳压保护

仪器必须有效接地

最大相对湿度 80%

(30°C, or 86°F),线性下降至

50% (40°C, or 104°F)。

湿度应保持在一个适宜范围内。湿度过低容易产生静电问题影响电脑工作。如无使用浓缩试剂,则允许较高的湿度。

通风如无特殊要求,本染色仪无需通风

6. 前操作

6.1.安装,简介及整体描述,安装检测

由厂家专业人员进行安装,简介及整体描述,安装检测

7.原理及用途

本染色仪是专为专业从事免疫组化的实验人员所设计的。该染色仪旨在简化免疫组化操作-免疫试剂(抗体)在组织切片,细胞涂片上的应用等。

一般的免疫组化操作过程:一抗与组织目标蛋白质分子上特定抗原决定簇发生特异结合反应,通过一套检测系统显示抗体(显色系统)。通常可用光学显微镜观察(暗背景的荧光显微法或亮背景的普通显微法)。一般一抗可以直接与显色试剂结合反应后检测,但通常更常用的方法是通过二抗和其他各种放大方法增加检测灵敏度。

普通显微观察石蜡包埋组织的典型处理如下:

1.先将组织切片脱蜡和水化

2.使用各种方法对切片进行处理,提高抗体检测度

3.滴加一抗,孵育一段时间

4.冲去未结合的一抗,滴加生物素标记的二抗(抗一抗),孵育一段时间

5.冲去未结合的二抗,滴加链霉菌抗生物素-辣根过氧化物酶溶液,孵育

6.冲去未结合的链霉菌抗生物素,滴加染色剂(如DAB)与链霉菌抗生物素

-辣根过氧化物酶溶液的过氧化物酶反应生成棕色沉淀(一抗所在位置)

7.将切片放置在显微镜下观察,在一抗与组织结合部位可见棕色沉淀

全自动免疫组化染色仪工作组成:

切片架

试剂架

试剂滴加系统

计算机编程界面,编辑分配试剂的滴加顺序,以及各个步骤的时间

8.功能

8.1. 简介,用途,工作原理

Lab Vision 自动染色仪是一部由计算机驱动的自动化液相操作系统,可以兼容目前免疫组化使用的所有试剂。系统通过高度模拟手工实验方法,以达到高度一致的自动化免疫染色结果。使得由手工操作向自动化操作的转变更加简单易行,且无需更换原有的试剂。

8.2. 规格

8.2.1. 型号

型号

尺寸(cm)

长宽高

重量切片试剂

(kg)容量容量

Autostainer LV1 106 67 58 70 48 64 Autostainer LV2D 106 67 58 70 48 49 Autostainer

360 76 67 58 55 36 40 Autostainer 480 106 67 58 70 48 49 Autostainer 720 128 67 58 80 72 84

8.2.2. 用电规格

110/120 V AC (90-132V AC), 4A, 60 Hz (+/-2Hz),

220/240 V AC (198-264V AC), 2A, 50 Hz (+/-2Hz).

8.2.3. 温度

操作温度:15°C to 30°C, or 59°F to 86°F

储藏温度:10°C to 40°C, or 50°F to 104°F

8.2.4. 试剂滴加量

100,150,200,400,600μl

吸液头容量: 1.2ml

试剂残余量:<10-6

滴加精度:总体精度为99%

单片精度>90%

切片滴加位置:上-中-下

8.3. 系统自检

运行开始时,机械臂自动归零定位调整。

8.4.详细操作检测

由专业技术人员进行详细操作检测。

9.运行准备

9.1.仪器

以下准备必须预先完成:

1.确定所有废水桶均已清空

2.确定桶中有足够缓冲液和去离子水

3.将去离子水进水管放入装有去离子水桶内

4.将缓冲液进水管放入装有缓冲液桶内

5.将有毒废水排水管放入有毒废水桶内

6.将无毒废水排水管放入无毒废水桶内

7.确定机械臂无移动障碍

8.加载切片前,切片架必须保持洁净干燥,防止残余污染或稀释新加试剂

9.将带有试剂瓶的试剂架安放平整

10.保证仪器水平

11.确保打印机连接

12.确保标签打印机连接

13.使用二维码识别系统须预先粘贴切片和试剂二维码标签

14.开启染色仪操作软件

9.2.试剂

要得到最佳染色效果,必须预先准备下列试剂:

1.确定试剂瓶中的试剂量无误

2.正确放置试剂瓶位置

3.保证抗体正确稀释

4.缓冲液,组织消化液,染色试剂必须新配

5.某些试剂要求临用前准备

9.3.使用染色仪所需特殊器材

1.染色仪只适用专配试剂瓶,试剂架以及切片架,不可使用其他替代品

2.不能使用过小的水桶,防止实验用水/缓冲液不足或废水溢出

3.使用二维码识别系统须预先粘贴切片和试剂二维码标签

4.所有实验用水,缓冲液以及其余染色所需试剂由用户自行提供

9.4.标本样品的种类,前处理,预处理,保藏

本染色仪是专门设计用于普通显微镜用组织切片和细胞涂片的染色。各种组织标本的前处理,预处理以及保藏条件方法由用户自行决定。

10.操作程序步骤

本染色仪是专门设计用于普通显微镜用组织切片和细胞涂片的染色。各种组织标本的前处理,预处理以及保藏条件方法由用户自行决定。

10.1.开启染色仪并登录

1.打开电脑及显示器电源,进入Windows操作系统界面,找到桌面

染色仪图标

2.双击染色仪图标。进入“登录”界面,光标位于“用户名”框内

3.输入用户名,回车-光标下移至“密码”框

4.输入密码,回车-进入“主菜单”界面

在“主菜单”界面可以进行以下操作:

点击“程序”编辑运行程序

点击“初始化”设置染色仪或编辑各种初始信息(单位信息,科室名称,默认试剂用量,清洗循环周期设置等其它选项)。

点击“清洗”按照清洗操作说明准备清洗工作

点击“注销”退出染色仪程序

点击“试剂记录”查看试剂使用列表

点击“帮助”查看“主菜单”界面相关信息

点击“泵水”保证冲洗功能机制的正常工作

10.2.典型操作步骤

1.回车或点击“主菜单”界面里的“程序”按钮

2.从“切片信息”界面输入切片信息或使用“切片”按钮,在切片计数工具中输

入切片数量后,程序表格才可以激活

3.回车或点击程序表格左下方“切片信息”按钮,进入“切片信息”界面

4.通过“程序模板设计”界面为当前程序选择一个模板或者使用自动加载的默认

模板

5.在“编程表格”界面为切片添加所需试剂

6.要改变所有切片试剂用量,点击首行“滴加情况”项目

中“μl”符号,进入“所有切片初始试剂用量”界面,

选择所需试剂用量。

7.要改变单张切片试剂用量,点击该切片的“μl”符号。

同理,要更改所有或单张切片的试剂滴加位置(假设标

签在右端),点击其中一个滴加位置(黄色显示),或者按住“Ctrl”键选择多个位置

8.注意:切片试剂用量是指切片每个滴加位置的试剂用量。假设试剂用量为

200ml,则两个滴加位置需要400ml(每种试剂每张切片最多滴加800ml)9.点击“下一步”,进入“添加试剂至瓶内”界面,选择试剂架使用模式,然后

点击“确定”。

10.进入“运行时间”界面,提示所需时间。点击“确定”。

11.显示“试剂布局图”,详细标明各种试剂的用量以及位置。

12.点击“下一步”进入“切片布局图”,按图所示加载切片

13.点击“下一步”进入“设置开始时间”界面。根据需要调节开始时间,留意染

色剂添加时间。激活检测试剂量选项,点击“开始运行”。

14.出现“现在运行程序”警告信息,确定机械臂无移动障碍后,点击“是”。

15.出现信息要求准备0.1或0.2L额外的缓冲液,供试剂量检测中清洗探头,点

击“确定”。

16.染色仪开始自动运行

在染色之前,须预先准备下列物品:

一份信息列表,包括切片号、病例号、病理号以及所需抗体和实验方法脱蜡水化后的切片,浸泡在缓冲液或蒸馏水中

(注:染色仪所使用缓冲液须含有表面活性剂,如:0.05%Tween20)

装有染色所需试剂的试剂瓶,在室温条件下放置在试剂架的正确位置

有足够的缓冲液和去离子水或蒸馏水在各自的桶内

有足够容积的废水桶接受染色实验废水(无毒或有毒)

10.3.切片信息

“编程表格”在输入切片信息前无法激活(方格中无法添加试剂),回车进入“切片信息”界面。此外,也可直接在切片计数器中输入切片数,激活编程表格。

10.3.1.仅输入切片数

此功能所激活的“编程表格”无切片号、

病例号或病理号等项目信息

在输入任何切片信息前,按“S”键或点

击“编程表格”界面左上角“切片”选

项,进入“切片计数”对话框。

直接输入或拖动“切片计数”对话框内

的切片数量,回车或点击“确定”。

10.3.2.输入切片信息

1.点击“切片信息”按钮,进入

“切片信息”界面,光标在“切

片号”框内显示。(如该选项

未在“初始化/设置”界面中

激活,则光标将下移至“病例

号”框内)

2.输入病人的姓或其他识别信

息。回车,光标后移到新出现

的“名”框内

3.输入病人的名或其他识别信

息,或者不输入。回车,光标后移到新出现的“中名首字母”框内

4.输入中名首字母或不输入。回车,光标下移至“病例号”框内。

(注:步骤2-4可通过直接在切片号框内输入下列信息来完成:病人的姓,逗号,病人的名,空格,中名首字母。回车-光标将直接下移至“病例号”框内。)

5.输入“病例号”并回车-光标将下移至下一个激活选项

6.如“医生”选项激活,则可直接使用上/下方向键从已有的医生列表中选择,

或直接输入医生姓名。回车至下一个激活选项

7.如“病理号”选项激活,输入病理号并回车。

8.如“组织”选项激活,从已有的组织列表中选择,或直接输入其它组织名

称,然后回车。

9.在“切片数”框中输入上述条件下将运行的切片数后回车-光标将自动上

移至上一个激活选项框内。

(注:每个染色程序最多可以输入36|48|72张切片,如切片数超出范围,将出现警告信息显示超额切片数。在界面下端有一栏关于切片号,病例号,以及切片数的统计信息,可随切片信息的输入而更新。)

10.如上一个选项的信息无变化,则继续回车至有改变的选项,输入新的信息。

11.点击“完成输入”按钮,退出“切片信息”界面,回到“编程表格”界面

(注:除切片数选项外,其余切片信息均可省略。只需单击空格键,然后回车下移光标)

10.3.3.删除切片信息

删除切片信息方法如下:

删除切片号:删除该切片号下所有切片

(注:当某张切片被删除,编程表格里其后续切片将自动上移)

删除病例号:删除该病例号下所有切片

删除病理号:删除该病理号下所有切片

减少某个病理号或病例号下的切片数:此改动必须在切片未添加试剂前,在切片信息界面中进行。否则,只有从“编程表格”中删除切片。

删除特定切片:一次删除一张切片,该操作只能在编程表格界面进行

10.3.3.1.删除切片号

1.点击“编程表格”界面的“切片信息”按钮,进入“切片信息”界面

2.点击向下方向键选择目标“切片号”(高亮显示)

3.回车-所选切片号在框中显示,同时光标下移至“病例号”选项框内

4.点击“删除”按钮-出现提示框询问是否删除该切片号

5.点击“是”-该切片号及其下属所有病例号和相关切片都将从程序中删

除,光标回到“切片号”选项框内

6.点击“完成输入”按钮,退回“编程表格”界面

10.3.3.2.删除病例号

1.点击“编程表格”界面的“切片信息”按钮,进入“切片信息”界面

2.如“切片号”选项被激活,点击向下方向键选择目标“切片号”(高亮

显示),回车-所选切片号在框中显示,同时光标下移至“病例号”选项框内

3.点击向下方向键选择目标“病例号”(高亮显示)

4.点击“删除”按钮-出现提示框询问是否删除该病例号

5.点击“是”-该病例号及其下属所有切片都将从程序中删除,光标回到

“切片号”选项框内

6.点击“完成输入”按钮,退回“编程表格”界面

10.3.3.3.删除病理号

1.点击“编程表格”界面的“切片信息”按钮,进入“切片信息”界面

2.如“切片号”选项被激活,点击向下方向键选择目标“切片号”(高亮

显示),回车-所选切片号在框中显示,同时光标下移至“病例号”选项框内

3.点击向下方向键选择目标“病例号”(高亮显示),回车下移光标至“病

理号”选项框内

4.点击向下方向键选择目标“病理号”(高亮显示)

5.点击“删除”按钮-出现提示框询问是否删除该病理号

6.点击“是”-该病理号及其下属所有切片都将从程序中删除,光标回到

“病例号”选项框内

7.点击“完成输入”按钮,退回“编程表格”界面

10.3.3.4.减少切片数

此改动必须在切片未添加试剂前,在切片信息界面中进行。操作如下:

1.点击“编程表格”界面的“切片信息”按钮,进入“切片信息”界面

2.选择目标切片的切片号,病例号以及病理号

3.在“切片数”选项框内,更改所需数量后回车

10.3.3.5.删除特定切片

1.在“编程表格”中,点击该切

片的编号栏或信息栏,出现一

个信息确认对话框

2.点击“是”,则该行切片的所有

栏目信息都将删除。

(注:该操作一次只能删除一

张切片)

10.3.4.单片编辑

此功能可对当前程序中任意切片的任

意试剂栏进行编辑,而无需对试剂列

表的内容进行改动。试剂种类或孵育

时间的改变,只会在相应试剂栏里体现

1.点击“编程表格”界面某个试剂栏,显示试剂分类表

2.点击试剂列表顶端的[编辑切片]-进入“单片编辑”界面,显示相应试剂

栏试剂信息

3.编辑修改任何激活选项,如:试剂种类或孵育时间

4.完成后点击“确定”,则“编程表格”界面的相应试剂栏将显示新输入信息

(注:此方法所做改动仅对当前程序中相关切片有效。要做永久性改动,可通过“列表编辑”选项进行。)

10.4.标签

连接切片标签打印机,打印切片标签。同时,该打印机也可用于试剂标签的打印。

10.4.1.打印切片标签

1.点击“编程表格”界面上“打印”按钮

-出现“打印选项”对话框

2.点击“切片标签”按钮-如当前程序中

存在切片,则出现“打印切片标签”对

话框

3.点击“全部标签”按钮打印程序中所有切片标签,或输入要打印切片的编

号后点击“确定”。单独不连

续的切片编号用逗号隔开,

连续多张切片编号之间用连

接号隔开,如:“1,3,5-10,

20,25-48”(中间不要带空

格),则打印切片编号为1,3,5,6,7,8,9,10,20,25到48的切片的标签。

4.在打印过程中,可以继续使用染色仪程序-包括打印其它报告(除切片和

试剂标签以外)。点击“打印选项”对话框中的“取消”按钮或退出“编程表格”回到“主菜单”都将停止任何标签的打印。

5.当出现打印错误如标签纸用尽,将出现提示信息。检查解决问题后,打印

机将继续打印,提示信息自动消失。如果无法解决,则点击“取消”放弃打印,待打印机处理好重新打印

10.4.2.打印试剂标签

1.点击“编程表格”界面上“打印”

按钮-出现“打印选项”对话框

2.点击“试剂标签”按钮,则出现“打

印试剂标签”对话框

3.当前程序所添加试剂将在对话框中

列出

4.单击选择需要打印的试剂,然后点击“确定”。或者点击“打印全部”,打

印当前程序中所有试剂标签

5.要打印当前程序外试剂标签,点击“其它试剂”。从出现的所有试剂列表中

单击选择相关试剂,或“打印全部”。

10.4.3.打印二维码试剂标签

1.在“设置”界面中,选择“二维码识别/试剂”选项

2.从“试剂列表编辑”界面中为每种试剂分配独一的二维编码

3.按上述打印试剂标签操作方法打印二维码试剂标签

4.染色运行前,系统将识别标签,并检测试剂量。

10.5.试剂

10.5.1.试剂编辑

在输入切片信息并确定程序模板后,“编程表格”界面被激活。第一个试剂栏开始闪动等待编辑,同时出现相应的试剂列表

1.点击列表中所需试剂-出现询问窗口问是否添加同一试剂到剩余切片

(注:该信息将出现在除一抗以外的所有程序步骤)

2.点击“是”,如果所有或大部分切片该步骤使用相同的试剂。程序将自动“填

充”所选试剂到所有未编辑切片。

如果大多数切片所用试剂各不相同,则点击“否”。

光标自动后移至下一步,出现新步骤相应的试剂列表

3.重复步骤1-2直至所有普通试剂都添加完毕

4.光标下移至下一张切片的一抗试剂栏,直到所有试剂均添加完毕

(注:所有试剂栏将显示所选试剂的简称以及孵育时间)

10.5.1.1.修改编辑

1.更改某个试剂栏中试剂,点击该试剂栏显示该相应步骤的试剂列表

2.输入试剂名称找到相应试剂,点击选择-新信息将替代旧信息在试剂栏

中显示

3.要更改某个试剂栏中试剂的孵育时间,点击该试剂栏显示该相应步骤的

试剂列表。点击试剂列表顶端的[编辑切片]-进入“单片编辑”界面,输入新的孵育时间后回车回到编程表格

10.5.2.加载试剂

1.在“编程表格”界面添加完所有试剂后,点击“下一步”进入“切片布局

图”界面

2.确定试剂滴加位置和试剂滴加量后点击“下一步”选择是否重新使用前一

染色程序的试剂架模式。

3.点击“重新使用一个试剂架”,重新加满/加载试剂瓶至原先的试剂架位置,

4.点击“重新使用两个试剂架”,如需要保持数量超过一个试剂架的试剂位置。

然后程序自动计算并显示运行时间

5.点击“确定”进入“试剂布局图”界面显示试剂加载位置

按图所示放置试剂瓶到试剂架相应位置。试剂图显示了试剂瓶的位置,以及程序所需最少试剂量,包括程序要求的基本量(通常为200μL)。如果选择重新使用一个或两个试剂架,某些闪动的试剂位置表明一种新的、不同的试剂或者不同批号的相同试剂将要加载。试剂加载结束后,可以点击这些试剂位置关闭闪动功能。曾经使用而当前程序中没有的试剂名称将以灰色显示在原先的位置上,但不显示试剂量

(注:确定试剂瓶中有足够的试剂完成程序运行,同时保证试剂架正确平整放置)

点击“试剂布局图”界面中“试剂列表”按钮,查看当前程序使用试剂详细信息列表。点击“确定”退回“试剂布局图”界面

10.5.3.切片间的试剂复制

“复制”命令是一个能够有效提高编程速度的工具。它能够复制单个格或多行/列的信息

1.点击“编程表格”界面顶部的“复制”-“复制”变成“选择”。

2.左键点击复制区域左上角,按住不放

3.拖动鼠标至右下角。注意拖动过程中切勿放开左键。所选区域将高亮显示

4.选中后,放开左键,界面顶部的“选择”变成“粘贴”

5.移动鼠标至粘贴位置,单击,复制内容就被粘贴到相应的区域位置

6.可以反复粘贴,或点击表格以外区域,则复制功能自动关闭。界面顶部的

“粘贴”有变回“复制”

**注:当粘贴位置存在其它信息,则程序将会提示“是否覆盖已编辑步骤”,点击“是”覆盖。

10.5.4.试剂列表编辑

“试剂列表编辑”功能可对试剂文件中所有相关信息如:试剂名称,批号,有效期和孵育时间等进行编辑改动。

1.点击“编程表格”界面菜单栏“列表编辑”选项,显示试剂类型列表下拉

菜单

2.点击试剂类型名称,进入相应“试剂列表编辑”界面

3.移动光标至最上端的“试剂名称”选项框,点击向下方向键或向下翻页键

选择试剂或点击下拉按钮输入试剂名称,回车,则该试剂的相关信息自动出现在各个框内,并可进行编辑。

(注:改动试剂名称将导致重复输入,最好先删除再从重新输入所有信息)4.对所有信息做相应的改动,如果要删除试剂,点击“删除”,出现窗口询问

是否删除试剂,点击“是”。

5.编辑结束,点击“确定”-出现窗口询问是否保存所作更改。

6.点击“是”保存或“否”取消更改,回到“编程表格”界面。如果保存更

改,则所作改动将在后续编程的试剂信息中表现出来,直到下一次改动。

10.5.5.添加试剂列表试剂

1.点击“编程表格”界面菜单栏“列表编辑”选项,显示试剂类型列表下拉

菜单

2.点击试剂类型名称,进入相应“试剂列表编辑”界面。此时光标在“试剂

名称”选项框中

3.输入试剂名称,回车-光标下移至“简称”选项框

4.输入长度不超过10个字符的简称,回车-光标下移至“适用性”选项

5.输入正确的适用性代码,回车-光标下移至“批号”选项

6.输入长度不超过8个字符的批号,回车-光标下移至“有效期”选项

7.输入试剂有效期,回车-光标下移至“孵育时间”选项

8.输入试剂孵育时间,点击“确定”-出现对话框询问是否保存所作更改

9.点击“是”按钮-新试剂详细信息输入完成,直到下次改动。添加到试剂

列表,并在“编程表格”界面中显示

10.5.6.删除试剂列表试剂

1.点击“编程表格”界面菜单栏“列表编辑”选项,显示试剂类型列表下拉

菜单

2.点击试剂类型名称,进入相应“试剂列表编辑”界面。此时光标在“试剂

名称”选项框中

3.点击向下方向键或向下翻页键选择试剂或点击下拉按钮输入试剂名称,回

车,则该试剂的相关信息自动出现在各个框内,并可进行编辑。

4.点击“删除”-出现窗口询问是否删除试剂

5.点击“是”-回到“试剂列表编辑”界面

6.点击“确定”-出现对话框询问是否保存所作更改

7.点击“是”-回到“编程表格”界面

10.5.7.试剂记录

此项功能能够快速查看试剂使用情况。此外,如果试剂有效期和批号已事先输入则将在文件中显示,从中定期了解即将到期的试剂。每次染色程序运行过程中,不论是否完成,程序中各种试剂的用量以及处理的切片数都会被累计记录。所有的统计数据可根据需要进行查看,打印和重置。

10.5.7.1.查看试剂记录

1.点击“主菜单”界面的“试剂记录”按钮,进入“试剂记录”界面

2.试剂数据将在滚动列表中显示

10.5.7.2.打印所有试剂记录

点击“试剂记录”界面中的“打印全部”按钮

10.5.7.3.打印所选试剂记录

1.点击选择“试剂记录”界面中要打印的试剂

2.点击“打印所选试剂”按钮

10.5.7.4.重置所有试剂记录

点击“试剂记录”界面中的“重置全部”按钮

10.5.7.5.重置所选试剂记录

1.点击选择“试剂记录”界面中要打印的试剂

2.点击“重置所选试剂”按钮

10.6.程序编辑(免疫染色)

10.6.1.创建新的染色程序

1.点击“主菜单”界面的“程序”按钮,进入“编程表格”界面

2.点击“切片信息”按钮,进入“切片信息”界面进行步骤3操作。或者按

“S”键或点击“编程表格”界面左上角“切片”选项,进入“切片计数”

对话框。直接输入或拖动“切片计数”对话框内的切片数量,并进行步骤5操作。

3.输入当前染色程序的所有切片信息

4.点击“完成输入”,退回“编程表格”界面

5.点击“程序化模板”按钮-进入“程序模板设计”界面,创建新模板或使

用已有模板

6.点击“使用模板”或“取消”按钮,退回“编程表格”界面

10.6.2.使用已有染色程序

1.点击“主菜单”界面的“程序”按钮,进入“编程表格”界面

2.点击界面顶部的“文件”菜单选项-出现下拉菜单,其中包括“打开”选

项以及最近使用的5个染色程序

3.点击某个程序或选择“打开”进入“加载程序”界面,显示已有程序列表

4.点击选择某个程序-程序在框中高亮显示

5.点击“确定”,进入“编程表格”界面显示已编程表格

6.点击“切片信息”进入“切片信息”界面

7.编辑已有或新增的任何切片信息

8.点击“完成输入”,退回“编程表格”界面

9.点击“程序化模板”按钮-进入“程序模板设计”界面,编辑当前程序模

10.点击“使用模板”或“取消”按钮,退回“编程表格”界面

10.6.3.删除已有染色程序

1.点击“主菜单”界面的“程序”按钮,进入“编程表格”界面

2.点击界面顶部的“文件”选项-出现下拉菜单,显示“打开”选项

3.选择“打开”进入“加载程序”界面,显示已有程序列表

4.点击选择某个程序-程序在框中高亮显示

5.点击“删除”-出现对话框询问是否删除所选程序

6.点击“是”,则所选程序将被永久删除并回到“加载程序”界面

7.点击“加载程序”界面中的“取消”,退回“编程表格”界面

10.6.4.运行染色程序

点击“试剂布局图”界面“下一步”-进入“切片布局图”界面加载切片

切片可以在染色仪上或其它比较方便的位置加载。如在染色仪上加载,可先将切片架斜插在切片槽。每加载一架12张切片,用装有缓冲液的洗瓶冲洗,防止干片。

加载切片时,用拇指和食指从两侧捏住切片末端,将磨砂端水平插入切片架的下托片与两定位片之间

重复上述操作,加载所有切片。对照切片布局图确认正确的加载位置

建议染色前作下列检查:

试剂

室温条件

在试剂瓶中加入足够的量,保证完成染色程序

放置在试剂架正确的位置上,同时正确放置试剂架

缓冲液

缓冲液桶内装有足够的缓冲液,保证完成染色程序

预先泵水,保证水流正常

切片

加载切片到切片架正确位置

切片架必须平整放置在切片槽的定位栓上

点击“下一步”进入“开始时间设置”对话框。最多可以延时24小时(包括实验时间),时间越长,防干片冲水所需的水量越大。换水或缓冲液后,建议点击“泵水”。染色仪启动并初始化,泵开始工作,十秒钟后停止。如有需要,可再次点击“泵水”。

确定试剂瓶内有足够的试剂,点击“检测试剂量”选项,允许染色仪对每个试剂瓶液面检测。到达染色时间后,系统将发出警报,待添加染色试剂后“确定”,

仪器自动检测液面。使用检测功能可以保证实验有足够试剂。如无开启检测功能,则当试剂不足时将出现提示信息说明试剂名称,位置以及所需的量。点击对话框的“忽略”按钮,可以立即继续进行实验

点击“开始运行”,出现“现在运行程序”信息,提示检查机械臂是否有移动障碍。注意试剂瓶,试剂架,切片架的放置。回车开始染色,染色仪自动初始化,机械臂归零(右后角),出现“运行记录”界面。当前染色程序的“已用时间”,“剩余时间”和“总时间”显示在“运行记录”界面的右上角。“开始时间”,“当前时间”和“完成时间”显示在下方。

(注:切勿在运行过程中更改系统时间)

(注:运行记录将如实详细记录和显示染色仪的每个步骤)

警告:

运行过程,切勿使用鼠标拖动查看运行记录。使用翻页键或方向键查看。

染色结束时,可以存储并打印实验运行记录

10.6.5.紧急停止运行

“运行记录”界面的“紧急停止”按钮,用于染色仪运作过程随时停止程序运行。中途停止后无法再继续进行。

1.点击“紧急停止”按钮-出现对话框询问是否停止程序

2.点击“是”,停止程序。染色仪放弃运行,同时出现对话框询问是否保存运

行记录。如果不想放弃程序,则点击“否”染色仪将继续运行

(注:当程序中断时,染色仪不会立即停止。如果正处于某个操作阶段,它将继续完成该操作,然后才停止)

如果吸液头在停止前未清洗,则出现信息询问是否清洗吸液头。点击“是”,染色仪重新初始化然后清洗吸液头

如果认为有严重故障产生,则不要清洗吸液头

10.6.6.运行过程中的程序编辑

“运行记录”界面包含三个按钮,“紧急停止”,“新建程序”和“回看程序”。点击“新建程序”,打开“编程表格”,编辑新程序或加载并修改旧程序直到“试剂布局图”。点击“下一步”或点击“编程表格”的“退出”按钮,则又回到“运行记录”界面。在清洗程序过程也有相同功能。

点击“回看程序”按钮,可以对但前程序的“编程表格”,但不能修改

10.6.7.结束完成染色程序

染色结束,“运行记录”界面显示“结束程序运行”同时开始报警。

1.点击“运行记录”界面的“确定”。出现窗口询问是否保存运行记录

2.点击“是”进行记录保存,出现保存窗口。系统自动使用程序名为运行记

录命名,点击“确定”保存运行记录并结束程序。或点击“否”不保存退

回“主菜单”界面

3.点击“注销”-出现“退出”界面

4.点击“是”-退回Windows界面

5.点击任务栏“开始”菜单

6.点击“关闭”,出现关闭Windows对话框

7.点击“是”关闭电脑

(注:染色仪无需关闭电源,可以让绿色“power”LED亮者)

10.7.维护

10.7.1.外部清洗

外部清洗必须在染色仪无工作状态下进行,一般使用软布,温水或中性清洁剂。

只有金属部件可用酒精清洗

切勿将过滤网取出。如网上有残留碎片,可用湿纸巾捡出。

注意:

可能有切片的玻璃碎片聚集在排水口

聚丙烯树脂机盖必须使用软布,温水或中性清洁剂清洗

注:

染色仪顶部的聚丙烯部分可用水或无酒精的清洁剂清洗。不能使用酒精溶剂的溶液否则将造成表面损坏

切片架和试剂架,以及排水槽可用水和中性清洁剂清洗。

10.7.2.自动清洗

在“主菜单”界面,染色仪记录已染色切片数。该数据可以提醒用户何时会达到“初始化”界面中“运行/清洗”选项所预设的切片数。即“维护信息”显示从上次清洗循环后染色仪所处理的切片数

染色仪最好每处理240张切片清洗一次。当切片数少于240张时,至少每周清洗一次。

1.点击“主菜单”界面的“清洗”按钮-进入“维护”界面

2.点击“维护”界面的“清洗”按钮,出现“清洗说明”对话框,详细介绍

清洗程序的准备及操作

(注:清洗前需要准备以下试剂:

去离子水

DAB-Away 1 溶液DAB Away kit Code:TA-125-DA

DAB-Away 2 溶液

脱色液)

一、流式细胞仪技术参数

一、流式细胞仪技术参数 1 工作条件: 1.1 电源要求: 220V (±10%)、50-60HZ 1.2 环境温度:16-30℃ 1.3 湿度:20-80% 2 用途:免疫分析、淋巴细胞亚群分析;细胞周期分析、凋亡分析;感染分析、肿瘤细胞分析;多重细胞因子分析等。 3 技术规格和参数 3.1 激发系统: 3.1.1 激发光源:405nm紫色固态激光器、488nm蓝色固态激光器和640nm红色固态激光器,固定光路,空间立体激发。 3.1.2 激光塑形:自动的多棱镜塑形系统,光斑大小:9x65um椭圆形光斑 3.1.3 流动室规格:180x430μm 3.2 荧光收集和检测 3.2.1 光胶耦合物镜,数值孔径1.2,大面积收集发射荧光。 3.2.2 每一激发激光对应一个独立检测单元,光胶耦合物镜自动分开汇集每一激光激发的发射荧光进入相对应检测单元,避免光谱交叉。 *3.2.3 配备1个独立八角型全反射检测系统、2个独立三角型全反射检测系统 3.2.4 光学检测系统内部采用全反射检测光路系统,荧光信号到达检测器只经过一个长通滤光片,信号能量损失最小。 3.2.5 检测系统依次优先检测易衰减的长波长信号,保证弱信号灵敏度。 *3.2.6 共计12个信号检测器,包括10个光电倍增和和2个散射光探测器。 3.2.7 荧光通道组合:405nm紫色激光器对应3个检测通道,滤光片包

括450/50nm、 525/50nm、 605/40 nm;488nm蓝色激光器对应4个检测通道滤光片包括530/30nm、 575/25nm、695/40nm、780/60 nm; 640nm 红色激光器对应3个检测通道,检测滤光片包括:670/30nm、712/21nm、780/60 nm。通道之间最低光谱交叉,滤光片带有智能芯片,直接插拔,自动识别。 *3.2.8 荧光检测灵敏: FITC<100MESF,PE<50MESF(提供英文原版参数);CFDA检测结果FITC<5MESF,PE<5MESF(提供检测报告)。 *3.3 样本分析速率:>32,000个细胞/秒(提供英文原版参数)。 3.4 变异系数:全峰宽CV<3% *3.5 采用正压上样系统,非注射泵或蠕动泵。样本残留量<0.2%。 3.6 最小样本量:≤30ul 3.7 检测颗粒大小:0.5-50μm 3.8 数字信号处理:18bit动态范围,符合IEEE 32bit浮点分辨率。3.9 脉冲处理系统:能同时分析脉冲信号峰值、脉冲积分(面积)及脉冲宽度,可区分多倍体细胞、粘连细胞。 3.10 可溶性蛋白分析:具备多重可溶性蛋白分析功能,包括:细胞因子、炎症因子、趋化因子等;可达单管数十重分析,包括:多重定量及动力学分析。 *3.11 液流车:独立液流车,避免振动影响仪器主机光路和液流;自动控制所有压力、鞘液、清洗液等,大体积液体储备保证长时间、稳定工作;鞘液桶20L,废液桶10L,清洗液桶5L,关机液桶5L。开关机自动清洗液路,正常状态鞘液消耗<1.10 L/h,待机状态鞘液消耗<1 mL/h。 3.12 配置淋巴细胞亚群自动分析软件,无需手动设置,实现淋巴细胞亚群分型的全自动化。 3.13 主软件:Windows系统,原版专业化流式数据收集及处理软件, 可按用户需求设置条件进行数据分析和报告。 3.14 临床自动软件:标配临床自动软件,拥有具CFDA认证的4色及6

流式细胞仪论文:流式细胞仪的使用与维护

流式细胞仪论文:流式细胞仪的使用与维护摘要:介绍了流式细胞仪的结构、工作原理及软件的主要功能,在仪器的维护保养方面进行了详细地叙述。结合笔者工作实际,介绍了用流式细胞仪对鸡外周血淋巴细胞亚群分析结果。 关键词:流式细胞仪;流动室;细胞分选系统;淋巴细胞 use and maintenance of flow cytometry wang shujing, hao jianmin, bi jianjie, chang zhongle, cui yanshun shandong agricultural university, tai'an, 271018, china abstract: this article describes the structure of flow cytometry, how it works and the main functionality of the software, in the area of maintenance of the instrument are described in detail. in conjunction with our own actual work, the author analyzed the results by flow cytometric peripheral blood lymphocyte subsets in chicken. key words: flow cytometry; mobile office; cell sorting system; lymphocyte

easycyte mini guava流式细胞仪,适用于各种流式细胞学检测分析,如动物、昆虫、酵母、原代培养、转化细胞、悬浮和贴壁细胞以及荧光微球等。采用固态蓝色或绿色激光,四色、三色或两色荧光检测,前向散射检测,可选配侧向散射;有自冲洗系统,保证流动通路畅通。easycyte mini guava 流式细胞仪采用微毛细管流动技术,无需鞘液,特别适合于 传染性危险生物样品的分析,山东农业大学动物疫病防治重点实验室主要用于细胞绝对计数,cd4/cd8细胞计数,免疫细胞分析,细胞标记蛋白表达检测如gfp等。结合笔者多年使用该仪器的工作经验,对流式细胞仪的工作原理、使用与维护介绍如下: 1流式细胞仪的主要构造和工作原理 流式细胞术(flow cytometry,fcm)是20世纪70年代发展起来的高科技,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体,同时具有分析和分选细胞的功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内dna和rna含量等,可对群体细胞在单细胞水平上进行分析,在短时间内检测分析大量细胞,并收集、储存和处理数据,进行多参数定量分析;能够分类收集(分选)某一亚群细胞,在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。

【基础科学】BD FACSCALIBUR流式细胞仪操作手册(共27页)

BD FACSCalibur流式细胞仪 FACS101 Handbook 本课程介绍「表面抗原流式分析」有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用,请至本公司网站订阅FACSinformation电子报。 如需要本课程手册,欢迎至本公司网站下载。 如需要免疫荧光染色方法,请至本公司网站下载。 一、BD FACSCalibur基本结构 1.1仪器本体: 1. 电源开关:在BD FACSCalibur仪器右侧下方,先启动仪器本体,再打开计算机。 2. 光学系统:BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射 以BD FACSCalibur 基本型为例 ?FSC Diode 只收488 nm波长散射光 ?SSC PMT 只收488 nm波长散射光 ?FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围(波长515-545 nm) ?FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围(波长564-606 nm) ?FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围(波长 >650 nm)

3. 仪器面板: 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制: LO:样品流速:12 μl /min MED:样品流速:35 μl /min HI: 样品流速:60 μl /min 功能控制: ?RUN:此时上样管加压,使细胞悬液从进样针进入流动室。(正常显示绿色;黄色时表示仪器不正常,请检查是否失压。) ?STANDBY:无样品或暖机时之正常位置,此时鞘液停止流动,雷射功率自动降低。 ?PRIME:去除流动室中的气泡,流动室施以反向压力,将液流从流动室冲入样品管,持续一定时间后,以鞘液回注满流动室。PRIME 结束,仪器 恢复STANDBY状态。 4. 储液箱抽屉: 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开,内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器Sheath Filter,及空气滤网 Air filter。请注意气路减压阀VENT TOGGLE之位置。

流式细胞术原理及功能介绍

流式细胞术详解 一. 流式细胞术概述 流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术 ,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,可对群体细胞在单细胞水平上进行分析, 在短时间内检测分析大量细胞,并收集、储存和处理数据,进行多参数定量分析; 能够分类收集(分选)某一亚群细胞,分选纯度>95%。在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科广泛应用。 国内使用的流式细胞仪主要由美国的两个厂家生产:BECKMAN- COULTER公司和Becton-Dickinson公司(简称B-D公司)。流式细胞仪主要有两型:临床型(又称小型机、台式机)和综合型(又称大型机、分析型)。BECKMAN-COULTER公司最新产品为EPICS ALTRA和EPICS XL/XL-MCL, B- D公司最新产品为FACS Vantage和FACS Calibur。EPICS XL/XL-MCL和FACS Calibur是临床型;EPICS ALTRA和 FACS Vantage是综合型,除具备检测分析功能外,还具有细胞分选功能 ,多用于科学研究。 二.流式细胞仪主要技术指标 1.流式细胞仪的分析速度: 一般流式细胞仪每秒检测1000~ 5000个细胞,大型机可达每秒上万个细胞。 2.流式细胞仪的荧光检测灵敏度:一般能测出单个细胞上<600个荧光分子,两个细胞间的荧光差>5%即可区分。 3.前向角散射(FSC)光检测灵敏度:前向角散射(FSC)反映被测细胞的大小,一般流式细胞仪能够测量到0.2μm~0.5μm。 4.流式细胞仪的分辨率:通常用变异系数CV值来表示,,一般流式细胞仪能够达到<2.0%,这也是测量标本前用荧光微球调整仪器时要求必须达到的。 5.流式细胞仪的分选速度:一般流式细胞仪分选速度>1000个/秒,分选细胞纯度可达99%以上。 三.流式细胞仪主要构造和工作原理 流动室及液流驱动系统 流式细胞仪主要由以下五部分构成:①流动室及液流驱动系统②激光光源及光束形成系统③光学系统④信 号检测与存储、显示、分析系统⑤细胞分选系统。 流动室(Flow Cell或Flow Chamber)是流式细胞仪的核心部件,流动室由石英玻璃制成,单细胞悬液在细胞流动室里被鞘流液包绕通过流动室内的一定孔径的孔,检测区在该孔的中心,细胞在此与激光垂直相交,在鞘流液约束下细胞成单行排列依次通过激光检测区。流动室里的鞘液流是一种稳定流动,控制鞘液流的装置是在流体力学理论的指导下由一系列压力系统、压力感受器组成,只要调整好鞘液压力和标本管压力, 鞘液流包绕样品流并使样品流保持在液流的轴线方向,能够保证每个细胞通过激光照射区的时间相等,从而使激光激发的荧光信息准确无误。见图12.1流动室示意图。流动室孔径有60μm、100μm、150μm 、250μm等多种,供研究者选择。小型仪器一般固定装置了一定孔径的流动室。 图12.1流动室示意图(采自Coulter Training Guide) 四. 流式细胞仪主要构造和工作原理 激光光源及光束形成系统

ilentEB网络分析仪使用方法精编版

i l e n t E B网络分析仪使 用方法 公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

前面板:部件的名称和功能 按键 工作通道/迹线区 用于选择工作通道和迹线的一组按键。 输入区 E5061B 的前面板上提供了用于输入数字数据的一组按键。

仪器状态区 与宏程序功能、存储和调用功能、控制/管理功能以及预设 E5061B(将其返回到预设状态)相关的一组按键。

标记/分析区 用于通过使用标记等来分析测量结果的一组按键。

最小值、峰值和带有目标值的点)。还可以查找带宽参数(最多六个)并显示它们。 Marker Fctn 在中显示“Marker Fctn”菜单。通过操纵“Marker Function”菜单,不仅可以指定通道中的标记扫描范围和标记耦合,还可以显示迹线上的统计数据。 Analysis在中显示“Analysis”菜单。通过操纵“Analysis”菜单,可以使用故障定位、SRL 和每个极限测试的分析功能。 浏览区(前面板上没有标签) 浏览区中的按键和旋钮用于在功能键菜单、表格(极限表、分段表等)或对话框中的选定(高亮显示的)区域中进行浏览,以及通过增加或减少来更改数据输入区域中的数值。当使用屏幕上显示的浏览区按键,从两个或多个对象(功能键菜单、数据输入区域等)中选择一个要操纵对象的时,首先按中的 Foc(聚焦)键,以选择要操纵的对象(将焦点置于该对象上),然后操纵浏览区按键(旋钮),在选定(高亮显示)的对象之间移动或更改数值。 下面的描述说明了当焦点在功能键菜单上时和当焦点在数据输入区域中时浏览区按键的作用。有关操纵表和对话框的更多信息,请参考所有这些功能的操纵步骤。 按键名称说明 旋钮 (顺时针旋转 或逆时针转 上下移动对功能键的选择(高亮显示)。

流式细胞仪上机培训手册(仅供参照)

流式细胞仪上机操作培训手册 一、样本处理 以PBMC表面抗原的流式检测步骤为例 1)取样。取新鲜提取或冻存后复苏的PBMC; 2)编号。根据实验设计,标记好流式管,如每份PBMC设两管: a)1号管:相应同型对照; b)2号管:CD3,CD4,CD8,CD56四标管; 3)加样。用移液器取100ul细胞/管(约1×106个细胞/管),分别加到已经标记 好的流式管底部; 4)洗涤。加入1ml PBS/管,涡旋1600rpm/min,离心6min; 5)染色。弃上清,加入100 μl PBS/管涡旋混匀细胞,并根据实验设计,向各流 式管中加入相应的荧光素标记抗体,混匀,室温避光孵育30min(操作尽量保持在避光条件下进行。) 6)洗涤。加入1ml PBS/管,涡旋1600rpm/min,离心6min; 7)重悬。弃上清,加入0.5ml PBS/管,混匀,上机检测(可选择BD FACSCanto II或BD Accuri C6)。 (注:若不能及时上机,应加入4%多聚甲醛固定,并于4℃避光保存。)8)试验结果分析。(注:实验过程中如果进行多色标记,需要调节荧光补偿)。参考值:

二、上机检测 BD FACSCanto II简要操作流程启动流式细胞仪 1 打开流式细胞仪电源 2 启动计算机,打开软件登录 3 确保软件连接到流式细胞仪 必要时,点击Cytometer > connect 检查液体水平 1 启动流式细胞仪后,检查液体水平 低液面水平或者废液桶满都用红色指示。

2 如果液流车未自动开启,选择Cytometer > Fluidics Startup。 3 当液流启动完成后,点击OK关闭对话框。 检查气泡 1 在检查完液体水平后,开启流动室门,检查流动室中是否有气泡。

流式细胞仪的基本结构

流式细胞仪主要由以下五部分构成:流动室及液流驱动系统;激光光源及光束形成系统:光学系统;信号检测与存储、显示、分析系统;细胞分选系统(图4-3)。 1.流动室和液流系统是流式细胞仪的核心部件。流动室由样品管、鞘液管和喷孔等组成。常用石英等透明、稳定的材料制作。样品管储放样品,单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出;鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,单细胞悬液在细胞流动室里被鞘液包绕通过流动室内的一定孔径的孔。由于鞘液的作用,被检测细胞被限制在液流的轴线上。检测区在该孔的中心,细胞在此与激光垂直相交,在鞘流液约束下细胞啦单行排列依次通过激光检测区。为了保证液流速度稳定。一般限制液流速度小于10 m/s。流动室孔径有60 μm、100μm、150μm、250 μm等多种。 2.激光源和光学系统经特异荧光染色的细胞需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的激光管是氩离子气体激光管,它的发射光波长488nm,此外可配备氦氖离子气体激光管(波长633nm)和(或)紫外激光管。光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。氩离子激光器的发射光谱中,绿光 514nm和蓝光488nm的谱线最强,约占总光强的80%;氪离子激光器光谱多集中在可见光部分,以647nm较强。免疫学上使用的一些荧光染料激发光波长在550nm以上,可使用染料激光器。将有机染料作为激光器泵浦的一种成分,可使原激光器的光谱发生改变以适应需要即构成染料激光器。例如用氩离子激光器的绿光泵浦含有Rhodanline 6G水溶液的染料激光器,则可得到550~650nm连续可调的激光,尤在590nm处转换效率最高,约可占到一半。 为使细胞得到均匀照射,并提高分辨率,照射到细胞上的激光光斑直径应和细胞直径相近。因此需将激光光束经透镜会聚。流式细胞仪的光学系统由若干组透镜、小孔、滤光片组成,大致可分为流动室前和流动室后两组。流动室前的光学系统由透镜和小孔组成,透镜和小孔的将激光光源发出的横截面为圆形的激光光束聚

Agilent E5061B网络分析仪使用方法

前面板:部件的名称和功能

按键 工作通道/迹线区 用于选择工作通道和迹线的一组按键。 输入区 E5061B 的前面板上提供了用于输入数字数据的一组按键。

仪器状态区 与宏程序功能、存储和调用功能、控制/管理功能以及预设 E5061B(将其返回到预设状态)相关的一组按键。

标记/分析区 用于通过使用标记等来分析测量结果的一组按键。 浏览区(前面板上没有标签) 浏览区中的按键和旋钮用于在功能键菜单、表格(极限表、分段表等)或对话框中的选定(高亮显示的)区域中进行浏览,以及通过增加或减少来更改数据输入区域中的数值。当使用屏幕上显示的浏览区按键,从两个或多个对象(功能键菜单、数据输入区域等)中选择一个要操纵对象的时,首先按输入区中的 Foc(聚焦)键,以选择要操纵的对象(将焦点置于该对象上),然后操纵浏览区按键(旋钮),在选定(高亮显示)的对象之间移动或更改数值。

下面的描述说明了当焦点在功能键菜单上时和当焦点在数据输入区域中时浏览区按键的作用。有关操纵表和对话框的更多信息,请参考所有这些功能的操纵步骤。 ?焦点位于功能键菜单上时(已选择功能键菜单) 旋钮 (顺时针旋转或 逆时针转动) 上下移动对功能键的选择(高亮显示)。 上/下 箭头键 上下移动对功能键的选择(高亮显示)。 右箭头键 显示上一层功能键菜单。 左箭头键 显示下一层功能键菜单。 Enter或 旋钮(按下) 执行选定功能键的功能。 ?焦点位于数据输入区域中时(已选择数据输入区域) 旋钮 (顺时针旋 转或逆时针 转动) 以小步长增加或减少数据输入区域中的数值。 上/ 下箭头键 以大步长增加或减少数据输入区域中的数值。 左/右箭在数据输入区域来回横向移动光标 键一起使用,以一次更改一个字符的方式更改数据。

流式细胞仪操作规程

FACSCalibur流式细胞仪操作规程 一、编号:YQ0606 二、标题:FACSCalibur流式细胞仪操作规程 三、关键词:流式细胞仪操作规程 四、目的:保证流式细胞仪的安全及有效操作 五、背景知识:流式细胞术(Flow CytoMeter,FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。 六、原理 待测细胞染色后制成单细胞悬液,用一定压力将待测样品压入流动室,不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。 流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。 这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过A/D转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理,将分析结果显示在计算机屏幕上,液可以打印出来,还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。 检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达,其X轴为测量强度,Y轴为细胞数目。一般来说,流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数,这视其模数转换器的分辨率而定。对于双

流式细胞仪入门手册

流式细胞仪入门 -----导航篇 二OOO年四月

目录 前言 第1章综述 第2章液流系统 第3章散射光信号及荧光信号 3.1 散射光信号 3.2 荧光信号 第4章光电系统 4.1 光平台 4.2 光学滤片 4.3 信号探测器 4.4 阀值 第5章数据分析 5.1 数据采集及显示 5.2 设门 5.3 细胞亚群的数据分析 5.4 流式细胞仪其它应用的数据分析第6章分选 6.1 分选 第7章激光器及光路校正 7.1 激光器的工作原理 7.2 光路校正 第8章答案

序论 学习仪器的最好方法是操作仪器,然而在理解原理的基础上进行仪器操作无疑会起到事半功倍的作用。 本书介绍了流式细胞仪的基本知识,并从不同角度详尽阐述了各种台式机(FACScan TM,FACSort TM,FACSCalibur TM,和BD LSR)与大型机(FACS Vantage TM,FACSVantage TM SE,和FACStar PLUSTM)之间的不同。阅读本书有助于增强读者操作仪器的动手能力和经验。

第一章综述 流式细胞术是一项快速检测分析单个粒子多物理特性的高技术,通常指细胞通过激光束时在液流中的特性,即粒子的大小,密度或是内部结构,以及相对的荧光强度。通过光电系统记录细胞的散射光信号和荧光信号可得知细胞特性。 流式细胞仪主要由三部分组成:流动室和液流系统;光路系统以及电系统。其作用如下: 液流系统:依次传送待测样本中的细胞到激光照射区。 光路系统:细胞由激光激发,通过光学滤片产生光信号,并传送到相应的探测器。 电系统:把光信号转换为电信号。对于有分选装置的仪器,电系统可初始化分选条件。 在流式细胞仪中,细胞被传送到液流中的激光照射区。任何存在于悬液中的直径为0.2-150微米的粒子或细胞都适用于流式分析。在实际工作中,用实体组织进行流式细胞分析往往是不可能的,分析之前必须对其进行分解。被液滴包绕的粒子称为细胞液柱,当粒子经过激光照射区时,通过激光激发产生散射光。含有荧光的粒子就会表现出其荧光特性。散射光和荧光由光路系统(相应的透镜,滤片和探测器)收集。分光器和滤光片引导散射光和荧光至相应的探测器,把光信号转换为电信号。 单个粒子通过其表现出的光散射和荧光属性,通过列表模式(List mode)完成数据采集,并对样本中的细胞亚群进行分析。

流式细胞仪临床应用手册

流式细胞仪临床应用手册 案场各岗位服务流程 销售大厅服务岗: 1、销售大厅服务岗岗位职责: 1)为来访客户提供全程的休息区域及饮品; 2)保持销售区域台面整洁; 3)及时补足销售大厅物资,如糖果或杂志等; 4)收集客户意见、建议及现场问题点; 2、销售大厅服务岗工作及服务流程 阶段工作及服务流程 班前阶段1)自检仪容仪表以饱满的精神面貌进入工作区域 2)检查使用工具及销售大厅物资情况,异常情况及时登记并报告上级。 班中工作程序服务 流程 行为 规范 迎接 指引 递阅 资料 上饮品 (糕点) 添加茶水工作1)眼神关注客人,当客人距3米距离侯客迎询问客户送客户

注意事项 15度鞠躬微笑问候:“您好!欢迎光临!”2)在客人前方1-2米距离领位,指引请客人向休息区,在客人入座后问客人对座位是否满意:“您好!请问坐这儿可以吗?”得到同意后为客人拉椅入座“好的,请入座!” 3)若客人无置业顾问陪同,可询问:请问您有专属的置业顾问吗?,为客人取阅项目资料,并礼貌的告知请客人稍等,置业顾问会很快过来介绍,同时请置业顾问关注该客人; 4)问候的起始语应为“先生-小姐-女士早上好,这里是XX销售中心,这边请”5)问候时间段为8:30-11:30 早上好11:30-14:30 中午好 14:30-18:00下午好 6)关注客人物品,如物品较多,则主动询问是否需要帮助(如拾到物品须两名人员在场方能打开,提示客人注意贵重物品); 7)在满座位的情况下,须先向客人致

待; 阶段工作及服务流程 班中工作程序工作 要求 注意 事项 饮料(糕点服务) 1)在所有饮料(糕点)服务中必须使用 托盘; 2)所有饮料服务均已“对不起,打扰一 下,请问您需要什么饮品”为起始; 3)服务方向:从客人的右面服务; 4)当客人的饮料杯中只剩三分之一时, 必须询问客人是否需要再添一杯,在二 次服务中特别注意瓶口绝对不可以与 客人使用的杯子接触; 5)在客人再次需要饮料时必须更换杯 子; 下班程 序1)检查使用的工具及销售案场物资情况,异常情况及时记录并报告上级领导; 2)填写物资领用申请表并整理客户意见;3)参加班后总结会; 4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班

流式细胞仪临床应用手册

目录

第一部分流式细胞术简介 1流式细胞术定义 流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,为生物医学与临床检验学发展提供了最强有力的工具。 流式细胞分析技术(flowcytometry,FCM)又称流式细胞术,是20世纪70年代发展起来的一种快速、准确、客观的检测技术,它能够同时检测快速直线流动状态中的单个细胞或微球的多项物理及生物学特性--在极短的时间内高速分析上万个甚至是几十万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,对其加以定性定量分析,还可以对特定群体加以分选。目前,流式细胞术已经广泛用于临床应用与基础研究,在免疫学、遗传学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等医学与生命科学所有领域内发挥着重要的作用。 2流式细胞仪工作原理 制备成单细胞悬液的标本或单个微粒在上样前进行荧光染色。流式细胞仪检测到上样管后,产生一定的气体压力将待测样本压入流动池。同时鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液)在仪器产生的高压作用下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与样本流形成一定的角度,形成一个圆形的鞘液流,包围着细胞或微粒高速流动,使待测细胞在鞘液的包裹下单行排列,逐个地通过流式细胞仪的激光聚焦区(流动池),从而被检测到,并发出散射光及荧光等多种光学信号。光学信号通过光电信号转换器及电子信号处理系统采集及分析后,最后以图形的形式将数据结果显示在电脑屏幕上。 3流式细胞仪的主要结构 光学系统,液流系统,信号处理及放大系统,计算机系统。

4流式细胞仪检测信号 散射光信号:FSSS 荧光信号:FL1FL2FL3FL4… 5流式结果数据分析 6流式细胞仪检测样品 可用于流式细胞仪检测的样本种类多样,包括各种细胞(如外周血、骨髓、细针穿刺、灌洗液、实体组织、悬浮或贴壁培养的细胞),微生物,人工合成微球等;血清、血浆、培养上清、细胞裂解液等。 如果检测样本为实体组织时,我们可以用物理化学(天然,机械研磨/消化)等方法将其制备成单细胞悬液5×105-1×107cells/ml ,并在上机前用300目筛网过滤。 7流式细胞仪检测范围 细胞结构 细胞功能 单参数直方图分析 双参数点图分析 双参数点图分析 双参数等高图分析 双参数密度图分析 三维图分析

8. Attune NxT流式细胞仪标准操作规程

Attune NxT流式细胞仪标准操作规程 一、启动Attune NxT流式细胞仪 1、依次打开电脑主机电源、显示器及仪器电源。电脑用户名为INSTR-ADMIN, 密码为INSTR-ADMIN(全部大写)。 2、双击Attune软件图标,用户名为admin,密码为password1(全部小写)。 3、检查仪器内四个液体容器,清空“waste”桶中的废液,确认“Focusing fluid”、 “Wash solution”和“Shutdown solution”三个桶中的液体量是否满足实验要求(液面较高)。 4、点击startup,等待机器启动,整个过程大约需要3分钟。仪器指示灯显示为 绿色,软件左下角出现绿色对勾即为启动完成。 5、点击performance test,在2mL鞘液中滴入3滴performance tracking beads, 混匀后上机,点击Run Performance test。Performance test每天运行1次。这个过程大约耗时3分钟。 二、检测样品 1、点击new experiment新建一个实验,选择tube或plate实验,输入实验名称, 采用默认的Workspace和仪器设置参数,输入Tube Groups和Tube Samples 的数量,点击OK。 2、双击软件右侧Experiment下的Compensation,在弹出的对话框中选择相应的 荧光通道,点击OK。 3、双击UC后上样,点击Run,并调节电压,电压调好后点击Record,依次将 每个单染色的样本上样,并点击Record记录其荧光信号。 4、荧光补偿调好之后双击sample,上样后点击Run即可得到样本的荧光信号。 根据需要建立散点图并建门。 三、关闭Attune NxT流式细胞仪 1、确认”wash solution”和”shutdown solution”桶中液面高度至少在桶高的一半以 上,清空“waste”桶。 2、点击shutdown,选择Quick、Standard或Full,样品管内加入3ml 10% bleach 液,点击next启动关机程序,此时请勿关闭软件或者终止shutdown过程,关

网络分析仪8712ET的使用方法

8712ET简介 8712E是Agilent公司生产的系列经济型射频网络分析仪,其中ET型是传输/反射分析仪。 1.18712ET基本原理 8712ET是在一台射频网络分析仪的基础上增加了若干硬件、软件构成。图1是射频网络分析仪的原理方框图,它由扫频信号发生器(通常内置)、用于分离前向和后向测试信号的测试部分、一个多波段相位相干高灵敏度的接收器、信号处理和显示等部分组成。 图1原理方框图 在进行测量时,仪器发出扫频信号,信号通过输出口送到待测设备,信号通过设备后送回网络分析仪。由于待测设备接口的输入阻抗与网络分析仪输出阻抗不可能理想匹配,必然会反射一部分信号。网络分析仪对输出和输入信号进行比较可得出待测设备的传输指标,如增益、插入损失、分配损失等;对输出和反射信号进行比较可得出待测设备的反射指标,如反射损耗等。 1.28712ET主要参数和特点 8712ET的频率范围是300kHz~1.3GHz,频率分辨率是1Hz,频率精度<5×10-6;不配置衰减器输出功率范围为0~+16dBm,配置衰减器后可达-60~+15dBm;系统阻抗有50Ω和75Ω两种,在CATV系统中使用阻抗为75Ω的;既可进行窄带检测,又可进行宽带检测,100dB的动态范围,扫描速度快(50ms完成一次扫描);具有各种接口,通过标准LAN(局域网)接口数据能直接通过网络共享,用PC应用软件分析、处理或发送到联网打印机上。 1.38712ET仪器面板 8712ET的面板左边是显示屏,其用于显示测量图形和数值。屏幕右边有8个软键,分别对应屏幕右边排列的菜单。右上是软盘驱动器,它下面左下框的数字键、旋钮、上下键等用于数字输入和修改。软盘驱动器右下框的4个按键是系统键,用于存储、调用系统配置或测量数据等操作。再下面的3个框分别是测量曲线选择部分(对曲线1和2进行选择)、信号源设置部分(包括频率特性、扫频特性、输出功率和菜单,用于对选择信号源各种参数进行设置)、配置部分(包括刻度键、显示键、校正键、光标键、格式键和平均键,用于选择各种配置进行设置)。右下是两个N型接头,左边的是输出接口,右边的是输入接口。 28712ET的基本操作 2.1测量前的工作 (1)仪器的各种软、硬件是在购买时确定的,需要根据有线电视系统测量的特点正确配置。如系统阻抗必须是75Ω,输出功率范围、动态范围等都要满足系统要求。 (2)设备加电前注意电源输入选择是否正确,特别是第一次开机时。和许多进口仪器相同,8712ET的电源输入可以是交流110V或220V,使用前必须确保输入选择拨到220V位置,否则会烧毁仪器电源模块。 (3)仪器校正8712ET在第一次使用、经过一段时间使用或更换了测试线缆后,需要进行校正,其步骤为:开机预热30min,按下面板上校正键(CAL),按软键选择屏幕上选项进入自动校正,按照屏幕上的提示,依次将开路接头、短路接头接到输出口,再按提示将输出口和输入口直通,依次操作并确认后校正就完成了。注意在校正时最好使用测量时使用的电缆,否则在后面测量的结果中将包括与原用电缆不同的测试电缆的相关因素,造成测试结果的误差。

网络分析仪操作规范

操作规范 变更记录表

操作规范 1.目的: 明确网络分析仪的操作方法及注意事项确保产品测量的准确性及有效性。 2.范围: 适用于本公司所有产品的导电性能测量与分析。 3.职责: .本文制订/修改权责部门属品质部。 .使用部门负责设备的一级保养工作和日常维护工作。 4.内容: 仪器结构与各配套设备名称: 待系统跳到指定界面后选择“Calibrate”键一次如下图所示:

待系统跳到指定界面后选择“1+port cal ”键一次如下图所示: 操作规范 然后将校正接口 3个连接端分别从“ Open ” 、“Short ”、“Load ”连接于仪器 PORT1接口进行校正(在按装时注意用力均匀确保顺畅)如图:先选择校正接口“O ”接在测试端口后,按“Open ”键,如下图:依次校正“S ”及“L ”接口接在测试端口。 上述校正完成后选择“Done ”键一次系统跳到以下界面: 100K ”修改: 操作规范 4. 输入数据“1800MHZ ”后,界面如下图所示: 设置终值,按“Stop ”键一次系统跳到以下界面,输入数据“2500MHZ ”。终值设置完毕如图: 操作规范 设置迹线刻度,按输入数据 “5dB ”后再按“Divisions ” 键一次将其值修改为15,页面显示为:

设置测量端口,按“Meas”键,系统进入界面如图,将Measurenment菜单选择“S11”: 操作规范 设置迹线格式,按“Format”键,系统进入界面如图,将菜单选择“Log Mag”: 网络分析仪天线的设置 将天线连接在端口port1,设置Mark值;按“MARK”键,系统进入界面如图,将菜单选择“Mark1”: 操作规范 将上图中MARK1的值定在Log Mag迹线最低峰值;即将“光标1”移到低峰如图所示,屏幕上端会显示低峰值,如:“”;再按“Mark1”确定。 然后选择“Marker2”键一次并将光标‘2’移到距离光标1相差200MHZ的位置系统显视以下界面: 操作规范 保存天线设置值,按“Save/Recall”键,选择“Save State”键将其保存为“State1”保存设置系统如图所示: 操作规范 产品测量: 先将上述天线的设置保存值呼出后进行产品测量:按“Save/Recall”键,选择“Recall State”

流式细胞仪操作规程

流式细胞仪的使用程序 分子病毒实验室 一.开机程序 1.检查稳压器电源,打开电源,稳定 5 分钟。 2.打开储液箱,倒掉废液,并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀, 取出鞘液桶,将鞘液桶加至 4/5 满(一般可用三蒸水,做分选必须用PBS或FACSFIow),合上压力阀。确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。 3.将 FACSCalibur 开关打开,此时仪器功能控制钮的显示应是 STANDBY,预热5- 10分钟。排出过滤器内的气泡。 4.如果需要打印,打开打印机电源。 5.打开电脑 , 等待屏幕显示出标准的苹果标志。 6.执行仪器 PRIME 功能一次,以排除 Flow cell 中的气泡。 7.分析样品时,先用 FACAFIow或PBS进行HIGH RUN约2分钟。 。做过分选后,每次开机后需冲洗管道:向分选装置上装上两个 50ml 离心管,不接通浓缩系统,摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置,同上法冲洗一次。 预设获取模式文件(Acquisition Template Files) 从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗,可利用此视窗编辑一个 1.

获取模式文件。 2.选取屏幕左列绘图工具中的Dot plot,绘出一个或多个Dot Plots(点图)。从 Dot Plot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源,并确定适当的 x 轴和y 轴参数。 3.选取屏幕左列绘图工具中的 Histogram,同上法可绘出 Histogram (直方 图)。 4.将此视窗命名后储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest Folder \EXP文件夹中,下次进行相同实验时可直接调用。 . 本计算机中已设定两个模式文件:ACQ和EXP,储存于FACStation G3\BD Applications \CELLQuest \EXP 文件夹中,ACQ 用于细胞 DNA 检测, EXP 用于细胞表面标志分析。 三.用CELLQuest进行仪器的设定和调整 1.从苹果画面中选取 CELLQuest,进入CELLQuest后在File指令栏中打开合适的 获取模式文件。 2.从屏幕上方 Acquire指令栏中,选取Connect to Cytomete((快捷键: + B)进行电脑和仪器的连机。将出现的 Acquisiton Control对话框移至合适位置。 3.从 Cytometer指令栏中,开启 Detectors/Amps、Threshold、Compensation Status等四个对话框,并将它们移至屏幕右方,以便获取数据时随时调整 获取条件。也可以用+1,2, 3, 4获得此四个对话框。 4.在Detectors/Amps对话框中,先为每个参数选择适当的倍增模式(amplifier mode):线性模式Lin或对数模式Log。一般进行细胞表面抗原分析如分析外周血的淋巴细胞亚群时,FSC和SSC多以线性模式Lin测量,且DDM Param选择FL2,而FL1, FL2与FL3则以对数模式Log测量;分析细胞DNA含量时,FSC, SSC, FL1,FL2,FL3皆以Lin进行测量,且 DDM Param选择 FL2;分析血小板表

Beckman流式细胞仪-GALLIOS使用说明书

Gallios TM Quick Reference Purpose: The purpose of this Quick Reference is to provide a simple step by step outline of the information needed to perform various tasks on the system. We begin with basic tasks like starting up or shutting down the system and then proceed to more involved software tasks. It is organized according to the modules in the Gallios Flow Cytometer Training Modules. Major Headings (in blue) are the major groups of tasks. These headings may be further subdivided into subsections of the major task and appear in a logical sequence. For example, the Major task of creating a protocol is subdivided into the subsections: Select Parameters, Create Plots, Instrument Settings, Create Regions, Gate, Analyze, and Save Protocol. A list of the major tasks appears below in the Table of Contents. Table of Contents Startups P. 3 Shutdown P. 4 Creating a Protocol P. 5 Create a FlowPAGE P. 7 AutoSetup P. 8 Acquisition Manager (Panels) P. 9 Database P. 11 Offline Analysis P. 15 System S etup P. 19

GQ131 E5071C网络分析仪操作规程[1]

1.0 目的 对网络分析仪的正确使用做出详细规范。 2.0 适用范围 E5071C适用于测量75Ω和50Ω射频电缆。允许在100kHz~8.5GHz 120dB的动态范围内进行衰减、回波损耗/驻波比、阻抗的测量。 3.0 工作程序 3.1 测量前校准 3.1.1 校准前首先设置频率范围(按start和stop或center和Span),扫描点阵(按Menu,NUMBER OF POINTS,401,?1),扫描时间(按Menu,SWEEP TIME)根据电缆的频率范围和电缆的损耗值设置适当的扫描时间,中频带宽(按Avg, IF BW,10Hz)根据电缆的频率范围和电缆的损耗值设置适当的中频带宽。如:100m的RG6电缆,频率范围0.1MHz~1GHz,中频带宽设置100Hz,扫描时间设置15s;200m 以上的5D-FB 、12C-FT 频率范围1MHz~2GHz,中频带宽设置10Hz,扫描时间设置42s。采用中频带宽越窄,测量噪声的影响可以减至最小。 3.1.2 校准匹配设置。按CAL,CAL KIT,SELECT CAL KIT,N 50Ω(测量50Ω电缆时)或N 75Ω(测量75Ω电缆时),进行50Ω端口校准时用HP85032B标准校准件校准,进行75Ω端口校准时用HP85036B 标准校准件校准。 3.1.3 校准 3.1.3.1 单口校准:消除相应的三个误差,方向性、源失配和频响,按CAL,CALIBRATE MENU,S11 1-PORT 或S22 1-PORT,按仪器提示操作。 3.1.3.2 二口校准:消除相应的十二项误差,电缆测量前采用这种校准方法。按CAL,CALIBRATE MENU,FULL 2-PORT,按仪器提示操作,当选择OPENS或SHORTS后,下一级菜单是选择实际被测量的器件。对于OPENS选择的列表是OPENS(M)和OPENS(F)。此M和F表示测试端口连接器的极性。若测试端口是阳性时,则连接的短路器应与阳性测试端口相配,并按OPENT(M)键。这是因为M(阳性)和F (阴性)标准件的偏移长度不同。 3.1.3.3 单通路二口校准:用于测试衰减和回波损耗,但对于自动反向测试无效。按CAL,CALIBRATE,ONE-PATH 2-PORT,Response(Thru),Thru按仪器提示操作。 3.2 保存和调用 3.2.1 把校准后的数据和状态进行保存,按Save/Recall,save state, File Dialo…,save. 按仪器菜单指引操作。 3.2.2 需要调用校准后的数据时,按Save/Recall、 Recall state, File Dialog把光标移至需调用

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