α-淀粉酶抑制剂的研究进展剖析
目录
摘要 (1)
关键词 (1)
Abstract (1)
Key words (1)
引言 (2)
1 α-淀粉酶抑制剂的介绍 (2)
1.1 α-淀粉酶抑制剂的来源 (2)
1.2 α-淀粉酶抑制剂的特性研究 (3)
2 α-淀粉酶抑制剂的制备 (4)
2.1 来源于天然植物的α-淀粉酶抑制剂 (4)
2.11 豆类植物 (5)
2.12 麦类植物 (5)
2.13 齿苋类植物 (6)
2.14 其他植物 (7)
2.2 来源于微生物的α-淀粉酶抑制剂 (7)
3 α-淀粉酶抑制剂的分离纯化 (8)
4 α-淀粉酶抑制剂的检测方法 (9)
4.1 碘比色法 (9)
4.2 3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法 (9)
5 α-淀粉酶抑制剂的筛选方法 (10)
6 α-淀粉酶抑制剂的研究进展 (11)
6.1 国内外研究概况 (11)
α淀粉酶抑制剂的研究进展
摘要：α-淀粉酶抑制剂是一种糖苷水解酶抑制剂。抑制糖类消化吸收药物，减少糖分的摄取，降低血糖和血脂含量，还可作为抗虫基因。目前在医学和农业上具有广泛的用途。本文对α-淀粉酶抑制剂的制备、检测、筛选方法、特性以及发展进行了综述，并对其前景作了展望。
关键词：α-淀粉酶抑制剂，制备，检测，筛选方法，特性Research progress of α-amylase inhibitor Abstract:α-amylase inhibitor is a kind of glycoside hydrolase inhibitor, It can be potentially use as medicines of diabetes owing to inhibiting glucose from being absorbed in the digestive tracts. Which can reduce ingestion of sugar and blood fat contet and has hypoglycemic activity, and its gene can be used as insect-resistant genes in crops breeding. There is comprehensive, application in agriculture and medicine . The preparation、detection、screening methods、characteristics and development of the α-amylase inhibitors were reviwed in this paper, and the prospects were forecasted. Key words:α-amylase inhibitor, preparation, detection, screening methods, characteristics .
引言
α-淀粉酶抑制剂属于糖苷酶抑制剂的一种，是一种纯天然生物活性物质，主要存在于植物种子、胚乳和微生物代谢产物中，目前在医药和农业上具有广泛的用途。
α-淀粉酶抑制剂能够有效的抑制肠道内唾液及胰淀粉酶的活性，阻碍食物中碳水化合物的水解和消化，减少糖分的摄取，降低血糖的血脂含量水平。食用后不产生高血糖，从而胰岛素分泌减少，脂肪合成降低，体重减轻。临床医学上用于防治糖尿病、高血糖、高血脂等病症；农业上α-淀粉酶抑制剂基因可以作为抗虫基因，减少杀虫剂的使用。另外，在酶学研究方面，可作为探究α-淀粉酶活性部位的分析工具，作为通过选择作用测定α-淀粉酶同工酶的反应物，作为蛋白质与蛋白质之间识别和相互作用的模林体系等方面具有内在效应。α-淀粉酶抑制剂应用已被广泛深入研究，本文对α-淀粉酶抑制剂研究进展作一概述。
1 α-淀粉酶抑制剂的介绍
1.1 α-淀粉酶抑制剂的来源
大多数α-淀粉酶抑制剂已从微生物源（主要集中在链霉菌属）、植物源（植物中普遍存在，尤其是禾谷作物和豆类作物的种子）获得，
少数从哺乳动物中获得，而且也在合成物质中发现过。天然存在的α-淀粉酶抑制剂有三种类型[1]分别为：（1）微生物产带一个寡生物胺单位的含氮碳水化合物；（2）微生物产多肽，如paim（来自微生物的猪胰腺α-淀粉酶抑制剂）和Haim（微生物起源人α-淀粉酶抑制剂）；（3）在谷类、豆类以及其它较高等植物中发现的大分子蛋白质抑制剂。
1.2 α-淀粉酶抑制剂的特性研究
通常的α-淀粉酶抑制剂都是些有机化合物，它们与酶形
成酶抑制剂复合物而使酶失活。在化学结构上，它们可以是蛋
白质、多肽和碳水化合物[2]。根据它们的化学性质，因来源不同
其化学物理特性而不同。
由多种不同的链霉菌属种产生的淀粉酶抑制剂具有低的分子量，大约在500~2000Da（道尔）之间，而且是α-淀粉酶中非常有效的抑制剂，它们有三种类型（1）oligostatins寡糖制菌素：（2）amylosatins制淀粉酶素：（3）tresatins。它们共用有拟双糖单元工寡生物胺或脱氢寡生物胺，不同数目α-D-葡萄糖基团以α-1，4糖苷键连接，而在tresatins中与一个α-1，1-糖苷键葡萄糖连接。这个含N个碳水化合物对几个葡萄苷酶包括α-淀粉酶有抑制作用。
Tajiri等报道从链霉菌属中产生α-淀粉酶抑制剂具有14种肽，一些是如上所述的含N个碳水化合物，另一些是分子量为3936-8500Da之间的聚合肽，它们是由单个多肽链组成，且不含碳
水化合物，具有质序列同源性，特别重要的是位于18~20的WRY 序列和位于59~70的氨基酸，它们被认为和α-淀粉酶的结合有关。X射线衍射晶体分析法显示的三级结构，表明WRY序列在分子表面显著呈现，而位于59~70氨基酸残基邻近DEF序列。
具有活性的蛋白质从小麦、大麦、小米、高粱、谷物、花生、大豆、芋头根和一些其它植物中分离。抑制剂分子量范围为9KD~63KD。另外复合抑制剂因其抑制的特异性不同一般可能为同工酶，已有一些复合抑制剂从小麦、大麦及小米中被分离。
2 α-淀粉酶抑制剂的制备
目前，国内外对于α-淀粉酶抑制剂的研制大都经历以下程序：原料→粉碎→水浸→离心分离→上清液→盐析（沉淀再溶解）→加热灭酶→离心分离α-淀粉酶抑制→上清液→透析→浓缩→干燥→成品但是根据原料的不同，α-淀粉酶抑制剂的生产过程又存在着较大的差别，下面就从天然植物和微生物两个方面介绍α-淀粉酶抑制剂的加工工艺。
2.1 来源于天然植物的α-淀粉酶抑制剂
天然的α-淀粉酶抑制剂主要存在于植物种子的胚乳中,目前已经从小麦、豆类、薯蓣、野生苋属等植物种子中分离得到α- 淀粉酶抑制剂。
2.11 豆类植物
从白豆中提取的α- 淀粉酶抑制剂活性较高, 对哺乳动物胰α- 淀粉酶有很强的抑制作用。杨明琰等采用乙醇分级沉淀、CMⅡ纤维素离子交换柱层析及凝胶柱层析, 从白豆中分离纯化得到相对分子量为3ku的白豆α- 淀粉酶抑制剂,其对淀粉酶的抑制类型属于非竞争性抑制剂[3]。杨秀芳等将白豆在20℃水中浸泡24h ,向浸透的白豆中加入0. 1mo l /L 的磷酸钠缓冲溶液,研磨, 匀浆[4]。浆液离心,上清液用0.1mo l /L的HC l 酸化至p H 5. 0, 再用冷冻离心机4℃离心10mi n , 在该酸化液中加入硫酸铵使饱和度达到50%,静置20h ,离心沉淀蛋白, 溶于0. 05mo l /L的磷酸二氢钠- 柠檬酸缓冲溶液中, 放入透析袋, 在相同缓冲溶液中透析1d , 得酶液。
Dayler 等利用酸性缓冲液从一种名为P . Vulgar is的豆中提取出α-淀粉酶抑制剂,用DEAE-Cellulose和反相高效液相特殊设备,经梯度洗脱得到α-淀粉酶抑制剂的异构体α-淀粉酶抑制剂Ⅰ。Yamada 等从宽叶菜豆中提取分离出2种α-淀粉酶抑制剂,这两种抑制剂对害虫体内α- 淀粉酶均有抑制作用,但表现不同的特异性。米切尔·什科普等利用超临界CO 2提取技术, 从豆类物质中提取和纯化了α- 淀粉酶抑制剂[5]。
2.12 麦类植物
王转花等研究了甜荞和苦荞这2 种荞麦中的α- 淀粉酶抑制剂。先用水浸泡荞麦3h , 再用丙酮脱脂,对脱脂后的荞麦粉用p H
6. 8的磷酸盐缓冲液水浴提取3h , 离心分离, 上清液在磷酸盐缓冲液中透析,得到活性大于0. 037u/mg 的α- 淀粉酶抑制剂[6]。张万山等将小麦和水以1∶4的比例混合浸提,离心分离出上清液, 经过硫酸铵盐析、水浴加热灭酶、离心分离和醋酸钠溶液透析制得粗品, 经过柱层析纯化,获得比活为921.7u/mg 的高纯度α- 淀粉酶抑制剂[7]。Franco等将BR35小麦磨碎后, 用固液比为1∶5的Na C l 溶液提取小麦粉, 并经高速离心、硫酸铵沉淀、反相高效液相洗脱层析, 得到α- 淀粉酶抑制剂的成品[8]。Miyazaki等提出了用弱酸弱碱、水和醇溶液对小麦粉和蛋白粉进行处理, 提取α- 淀粉酶抑制剂的工艺[8]。加工过程中用多聚糖对初提上清液进行沉淀,随后用金属离子除去多聚糖,再用离子交换柱脱除金属离子,得到高抑制活性的α- 淀粉酶抑制剂。
2.13 齿苋类植物
王琳等从野生苋属植物（Amaranthus paniculatus）籽实中分离纯化出α-淀粉酶的一种新型蛋白质类抑制剂，是目前报道的α- 淀粉酶的蛋白质类抑制剂中相对分子质量最小的。初步分析结果表明，这种抑制剂由9个氨基酸残基组成，其N 端为焦谷氨酸。在弱酸性条件，下它能以非竞争性抑制作用方式有效抑制美洲蜚蠊消化道α-淀粉酶的活性，但对人唾液淀粉酶活性无影响。
2.14 其他植物
高小平等对126种经水煮、醇沉提取的常用中药进行α- 葡萄糖苷酶抑制剂活性筛选,在0. 1mg /mL反应体系下,5种中药提取物抑制α- 淀粉酶活性[9]。张冬英等对普洱茶中α- 淀粉酶抑制剂的提取工艺进行了研究。通过正交实验方法确定普洱茶中α-淀粉酶抑制剂的最佳提取工艺条件为:浸提时间为3h, 固液比为1:5, 乙醇浓度为90%[10]。王琳等从野生苋属植物籽实中分离纯化出了α- 淀粉酶的一种新型蛋白质类抑制剂,初步分析结果表明,这种抑制剂有9 个氨基酸残基组成,其N端为焦谷氨酸。
2.2 来源于微生物的α-淀粉酶抑制剂
国外对于微生物α-淀粉酶抑制剂的研究开展得较早1970年Niw a 等报道在一种链霉菌培养液中发现了可以抑制α- 淀粉酶抑制剂诺吉利霉素。日本Narimasa 报道了由真菌Cladosporium herbarum F-28产生的蛋白类抑制剂,打破了传统认为只有放线菌才能产生抑制剂的观点[8], 并且此种酶抑制剂对哺乳动物α-淀粉酶有极高的特异性。Namik i等报道从一株链霉菌发酵液中分离出一种新的寡糖类α-糖苷类水解酶抑制剂Adiposin [11], 体内实验对胰腺或唾液的α- 淀粉酶有很强的抑制作用,并能降低血糖和血脂的浓度。Tajiri 等报道从链霉菌属中产生的α-淀粉酶抑制剂具有14种肽, 一些是含N碳水化合物, 另一些是由单个多肽链组成的分子量为3926～8500Da之间的聚合肽[11]。
国内酶抑制剂方面的研究始于70年代末。福建省微生物研究所从土壤中筛选出产生酶抑制剂的产生菌S-2-35菌株,并对其代谢产物的分离及其理化性质进行深入研究,成果显著。上海医药工业研究所也与日本和美国的多家公司及研究机构共同研究,建立了淀粉酶抑制剂等筛选模型[8]。河北省科学院生物研究所从链霉菌中获得产生α-淀粉酶抑制剂的菌种S-19-1, 系国内首先从淡紫灰类群中筛选出该抑制剂菌株,建立了适合S-19-1菌株的发酵工艺。王欣荣等采用α-淀粉酶及蔗糖酶抑制实验, 从2000株放线菌发酵液中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂,结果从淡紫灰链霉菌HW110(Streptomyces lavedulae HW110) 发酵液中分离到HW110, 其抑酶活性与阿卡波糖(Acarbose ) 相当[12]。
3 α-淀粉酶抑制剂的分离纯化
α-淀粉酶抑制剂的来源不同，其分离纯化的方法也有所
不同。
从植物源获得的α-淀粉酶掏剂分离纯化方法，据Ho等报道，主要步骤包括磨碎、热处理或用水浸提、用硫酸铵沉淀或乙醇分离、过EDTA-cellulose柱层析、Sephadex G-75柱凝胶层析以及CM-cellulose柱层析后分离，冻干得白色粉末状酶。
从微生物来源获得的α-淀粉酶制剂的分离纯化方法，据Jajiki 报道，主要步骤是将发酵液过滤除去不溶物，清液中加活性炭，活性炭吸附后，用乙醇洗脱，经多次柱层柱和纸层柱，再经Sephadex
G-15柱凝胶过滤，再经HPCL得单个活力峰，收集活力峰，冻干得白色粉末状酶。
4 α-淀粉酶抑制剂的检测方法
目前，对于α-淀粉酶抑制剂的检测项目主要包括活性、含量纯度及相对分子质量文。献显示，α- 淀粉酶抑制剂一般都为蛋白质类物质，其含量、纯度和相对分子质量都可依照蛋白质的测定方法进行。而抑制活性的测定方法主要包括碘比色法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法(Bernfeld法)2种[11]。
4.1 碘比色法
测定过程在试管中进行。取0.25mL浓度为1mg/mL用磷酸盐缓冲液配制的α-淀粉酶，加入0.25 mL待测液，37 ℃结合30 min。加入1％可溶性淀粉溶液1 mL、37 ℃恒温反应15 min后加碘显色，于660 nm 处测定吸光度值。空白管不加淀粉酶和抑制剂，对照管不加抑制剂。根据吸光度的差异计算抑制剂的相对活度。
4.2 3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法
取适量用0.12 mol/L磷酸盐缓冲液（pH 6.10）制备的α-淀粉酶储备液，加入100 μL浓度为10 g/L 的可溶性淀粉，37 ℃反应5min。反应完成后加入500 μL 3,5-DNS，沸水浴10 min，取出反应液
室温冷却15 min，在546 nm 处测定吸光度值。调整抑制剂溶液及α- 淀粉酶溶液的浓度或用量，使A546nm的值在0.4～0.7范围内为宜。
程秀丽[13]根据α-淀粉酶活性的测定方法，将淀粉降解产物还原糖在特定条件（添加DNS）下比色，测定其含量，通过标准曲线计算出酶活性，求出α-淀粉酶抑制剂的活性。此种方法可作为高通量筛选抗糖尿病药物的有效方法。
α-淀粉酶抑制剂是目前治疗糖尿病和减肥领域较为安全的一类药物。它广泛分布在许多天然植物中，尤其在麦类和豆类这些大宗粮食作物中含量较高。开发α-淀粉酶抑制剂等产品，有利于激发农民种粮积极性，对增加农民收入有意义。
5 α-淀粉酶抑制剂的筛选方法
目前在α-淀粉酶抑制剂的体外筛选实验中，α-淀粉酶的主要来源多为胰α-淀粉酶，胰α-淀粉有着来源不易、成本高等缺点。α-淀粉酶抑制剂测定方法多采用3，5-二硝基水杨酸法，其测定原理：α-淀粉酶抑制剂特异性地抑制α-淀粉酶，减少α-淀粉酶对淀粉水解，使得淀粉降解产物减少，3，5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原的棕红色氨基化合物减少，在一定波长下吸光度值降低。通过对添加抑制剂前后生产还原糖的量进行定量测定，可从前后变化测得α-淀粉酶抑制剂的活性。在Bemfeld法测定α-淀粉酶活性中，要求调整抑制剂及α-淀粉酶液浓度使得A值在0.4～0.7之间，范围较窄，不利于比
较不同抑制剂活性及量效关系。
6 α-淀粉酶抑制剂的研究进展
6.1 国内外研究概况
国外α-淀粉酶抑制剂研究起步较早，早在上世纪四十年代就有小麦种子中α-淀粉酶抑制剂的报道。它是一种电迁移率为0.2，分子量为21000的蛋白质。但在随后的25年间很少有这方面的报道[8]。之后Shainkin和Birk[9]提出小麦粉中存在两种α-淀粉酶抑制剂，并阐述了它们的分离和性质。它们的电迁移率不同，对不同来源的α-淀粉酶专一性不同。从后来的研究知道：它们在小麦种子中是多分子形式的蛋白质，能不同程度的抑制昆虫和哺乳动物的淀粉酶。
1945又在普通大豆上有过报道，1972年α-淀粉酶抑制剂曾经在微生物上有过报道，因其在医药上的价值而被广泛研究。α-淀粉酶抑制剂在20世纪70年代被深入研究，在20世纪80年代和90年代，由于发现其在医学上的重要性，尤其在抑制糖尿病和高血糖以及对昆虫选择性控制等方面具有重要作用而加速研究。
70年代以来，已研究发现100多种来自植物和微生物的抑制α-淀粉酶的活性物质，有的已经进入临床实验。微生物来源的糖苷水解酶抑制剂的筛选研究在近些年来已成为比较活跃的领域之一，尤其在联邦德国和日本。现已报道的这类酶抑制剂20~30种。Namiki等报道从一株链霉菌发酵液中分理出一种新的寡糖类α-糖苷水解酶抑
制剂Adiposin。体内实验Trestatins对胰腺或唾液的α-淀粉酶有很强的抑制作用，并能降低血糖和血脂的浓度，是一种新的α-淀粉酶抑制剂[2]。
国内酶抑制剂方面的研究始于70年代末，福建省微生物所从土壤中筛选到产生的淀粉酶抑制剂的产生菌S-2-35菌株，并对其代谢产物的分离及其理化性质进行深入研究，研究成果显著[1]，上海医药工业研究所在80年代初就开始与日本东京微生物化学研究所，日本麒麟啤酒和美国辉瑞公司等合作从土壤中寻找新的有为生物产生的生理物质的研究，建立淀粉酶抑制剂等的筛选模型[2]。国内研究突出得是河北科学院生物研究所从链霉菌中获得产生α-淀粉酶抑制剂的菌种S-19-1，是国内首次从淡紫灰类群中筛选出该抑制剂菌株，建立适合S-19-1菌株的发酵工艺，并对其化学性质进行研究。发酵滤液中的α-淀粉酶抑制剂活性超过70%。经BALB小鼠试验，无任何毒副作用。该研究已获得中国科技成果奖。江西省中医药研究所从小麦中提取一种α-淀粉酶抑制剂，并对其理化性质及结构组成作了进一步研究。
目前，建立在分子生物学基础上的植物基因工程技术，研究得较多的抗虫基因是α-淀粉酶抑制剂基因，α-淀粉酶抑制剂在禾谷类和豆科作物的种子中含量较为丰富。它的杀虫机理就在于其能抑制昆虫消化道内淀粉酶的活性，使食入的淀粉不能消化水解，阻断了主要能量来源，同时，α-AI和淀粉消化酶结合形成EI复合物，也会刺激昆虫的消化腺过量分泌消化酶，使昆虫产生厌食反应，导致发育不良或
死亡。在小麦或大麦中已克隆出多个淀粉酶抑制剂基因。转化烟草地实验证实，该基因在体内可正确表达，中科院从事菜豆淀粉酶抑制剂基因地研究正处于实验阶段。
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小麦α淀粉酶抑制剂的药理药效研究
南京工业大学 硕士学位论文 小麦α-淀粉酶抑制剂的药理药效研究 姓名：陈宁 申请学位级别：硕士 专业：生物化工 指导教师：陈国广;张琪 20060601
摘要 目的：为了进一步的研究和了解由我校生化中心采用专利技术从小麦粉中分离纯化的α-淀粉酶抑制剂的化学成分和作用机理，以便更全面的开发和利用这种资源，本课题进行了小麦α-淀粉酶抑制剂的降糖﹑调脂和减肥功能的作用研究，并且系统研究了α-淀粉酶抑制剂的作用机理，从而为今后把α-淀粉酶抑制剂开发成保健品或药品提供依据和参考。 方法： （1）α-淀粉酶抑制剂降血糖作用的实验研究：四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃给予α-淀粉酶抑制剂45 mg·kg-1，测定其淀粉耐量和糖耐量；四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃给予α-淀粉酶抑制剂（5、15、45 mg·kg-1），连续21d后，测定血糖值和小肠内二糖酶活性。 （2）α-淀粉酶抑制剂的调脂作用：采用不同剂量α-淀粉酶抑制剂（5、15、45 mg·kg-1）分别对高脂血症大鼠进行预防性给药和治疗性给药，给药结束后测定其血液中的TC﹑TG﹑HDL－C和LDL－C含量，称取大鼠肝脏并称肝重，并测定肝脏TC、TG含量，同时对肝脏进行常规切片、HE染色后在光镜下观察组织形态改变。 （3）α-淀粉酶抑制剂的减肥作用：以肥胖模型大鼠为研究对象，通过对肥胖大鼠灌胃不同剂量的α-淀粉酶抑制剂（5、15、45 mg·kg-1），连续28d，动态监测大鼠体重变化，并测定lee指数和脂肪湿重。 结果： （1）α-淀粉酶抑制剂能够增加小鼠的淀粉耐量而对其葡萄糖耐量没有影响；糖尿病小鼠灌服α-淀粉酶抑制剂45 mg·kg-1和15 mg·kg-1后，血糖值均明显低于模型对照组，结果有显著性差异；α-淀粉酶抑制剂能有效抑制小鼠小肠内各部分的麦芽糖酶和蔗糖酶活性，尤其是对前段小肠内二糖酶的活性抑制较强。 （2）α-淀粉酶抑制剂在对高脂血症大鼠进行预防性给药时可以明显抑制TC、TG、LDL-C及AI的升高，抑制HDL-C的降低，特别是高剂量组，而且可以降低肝脂含量，减轻肝脏脂肪病变。治疗性给药时α-淀粉酶抑制剂高剂量组和阳性药组的数据与模型组相比有显著性差异，而其他剂量组数据与模型组相比没有显著性差异。
亚健康概念及其研究进展
万方数据
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亚健康概念及其研究进展 作者：袁云娥， 吴小苏， 谭燕 作者单位：解放军总医院基础医学研究所,100853,北京市海淀区复兴路28号 刊名： 中国医院 英文刊名：CHINESE HOSPITALS 年，卷(期)：2004,8(4) 被引用次数：38次 参考文献(14条) 1.刘增垣;李美华第三状态与心身医学研究[期刊论文]-医学与哲学 2001(01) 2.傅善来21世纪健康新视角 2000 3.刘燕敏健康及其测量指标的多方位认识[期刊论文]-中国公共卫生 2001(05) 4.Camey RM;Freed L;Sheline YI Depression and coronary heart disease 1997 5.Antonovsky A The salwto-genic model a theory to guide bealth promotion 1996(11) 6.Ormel J Depressim,anxiety and disalility Ahow synchrony of change 1996 7.王兮;侯安继亚健康与现代都市病 2002 8.谢华真健商HQ 2002 9.董玉整"亚健康"初探 1998(03) 10.董莉;董玉整"亚健康"的表现、原因和对策 2001(12) 11.杨菊贤现代生活方式与亚健康[期刊论文]-中国全科医学 2001(07) 12.祝恒琛;谢成亚健康 2002 13.王育学亚健康21世纪健康新概念 2002 14.赵瑞芹;宋振峰亚健康问题研究进展[期刊论文]-国外医学(社会医学分册) 2002(01) 引证文献(38条) 1.王立国.部爱贤对亚健康含义的思考[期刊论文]-中医临床研究 2011(3) 2.冯丽仪.许军.罗仁.丘金彩.张金华亚健康评价指标体系的研究与建立[期刊论文]-中国全科医学 2011(1) 3.斯日古楞.瑞图雅亚健康状态的蒙医辨证论治探讨[期刊论文]-中国民族医药杂志 2010(2) 4.周雅芳.何剪太.张阳德.刘蔚东.孙维佳.曾强.谭家驹基于数学模型的中国亚健康特征评价方法与危险因素分析[期刊论文]-中国组织工程研究与临床康复 2010(30) 5.姜新春.许成平补益肝气治疗HBV携带者亚健康状态的心得体会[期刊论文]-中国医学创新 2010(28) 6.李国强.李米环.李宏印中国汉族大学生体质发展趋势与健康促进干预[期刊论文]-中国组织工程研究与临床康复 2010(41) 7.韦文英.李明子.阎丽不同护龄护士工作压力与自测健康状况调查[期刊论文]-中华现代护理杂志 2010(26) 8.徐先伟.孙忠人.张淑岩针刺辨证分型调治亚健康状态40例临床观察[期刊论文]-中医药学报 2009(5) 9.蔡文智.邓凌.陈美伦.鱼敏医务人员亚健康状态及相关因素的调查研究[期刊论文]-中华护理杂志 2009(10) 10.张金华.许军.黄季萌.冯丽仪.罗仁亚健康测量的定量化研究[期刊论文]-广东医学 2009(11) 11.杨志敏.周雯亚健康疲劳状态的研究现状[期刊论文]-江西中医学院学报 2009(3) 12.黄海超.黄永珍亚健康状态的中西医结合护理[期刊论文]-天津护理 2009(1) 13.张雯.沈汝(木冈)孕产妇亚健康状态的研究进展[期刊论文]-实用预防医学 2009(3)
(整理)α-淀粉酶综述
α-淀粉酶综述 佚名2013-10-06 摘要：α-淀粉酶分布十分广泛，遍及微生物至高等植物。α-淀粉酶是一种十分重要的酶制剂，大量应用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业等，是应用最为广泛的酶制剂之一。本文概述了α-淀粉酶的发现和应用发展史、分离纯化及结构的研究史、催化机制及其研究史、工业化生产和应用现状与发展趋势等。 关键词：α-淀粉酶发现应用分离纯化结构催化机制研究史发展趋势 α- 淀粉酶( α- 1,4- D- 葡萄糖- 葡萄糖苷水解酶) 普遍分布在动物、植物和微生物中, 是一种重要的淀粉水解酶。其作用于淀粉时从淀粉分子的内部随机切开α-1，4糖苷键，生成糊精和还原糖。由于产物的末端残基碳原子构型为α构型，故称α-淀粉酶。现在α-淀粉酶泛指能够从淀粉分子内部随机切开α-1，4糖苷键，起液化作用的一类酶。 1 α-淀粉酶的发现和应用史 1.1 α-淀粉酶的发现 啤酒是最古老的酒精饮料，发酵是其关键步骤，其中所包含的糖化过程就是把淀粉转化为糖。这个转化过程的机理一直都没有被弄清楚，直到淀粉的发现。 在19世纪早期，许多科学家都在研究谷物提取物中淀粉的消化机理。Nasse（1811年）发现，从生物体中提取的淀粉能过被转化为糖，而从被沸水杀死的植物细胞中提取的淀粉不能被转化为糖。Kirchhoff（1815年）做了一个巧妙的实验。他将4份的冷水加入到2份的淀粉中，并边加边搅拌。之后加入20份的沸水使其形成一层厚厚的淀粉糊。在淀粉糊还是余温的时候，加入被粉碎的麸质（或麦芽），然后在40－60°列式温度下水浴。1－2小时后发现，淀粉糊开始缓慢液化。8－10小时后，淀粉糊被转化为一种甜的溶液。之后，他将其通过过滤和蒸发浓缩得到了糖浆，品尝后发现，其和发酵液一样甜。在操作的过程中，他注明了实验过程中仅添加了非常少的麸质，并且得到的糖浆与淀粉的量成正比。此外，如果在加入麸质前加入几滴高浓度的硫磺酸，最终就没有糖生成。从这个实验中他得到结论1）麸质是一种能够使温水中的淀粉粉末转化为糖的物质。2）作为种子发芽的结果，相比种子内的物质而言，麸质能过将更多的淀粉转化为糖。至此,Kirchhoff奠定了发现谷物中一种能够将淀粉转化为糖的蛋白质的基础。
亚健康研究进展综述
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 亚健康研究进展综述 510650 通过对亚健康现状及研究进展的分析，旨在提高人们对亚健康状态的认识，为人们的健康人生指明一条健康生活之路。 本文从亚健康概念、发病因素、流行病学、评价标准等几个方面进行综述，对亚健康研究发展趋势做了总结，为亚健康研究者提供一些理论依据。 亚健康状态流行病学发病因素诊断标准 The Research progress of sub-health Abstract: To improve human cognition of sub-health condition and point out a healthy road to human healthy life this article analyzed the condition and progress of sub-health. The article sum up the concept of sub-health, etiological factor, epidemiology, diagnostic code and other sides, summarize the tendency of sub-health and provide theoretically foundation for researchers. Keywords: sub-health condition, epidemiology, etiological factor, diagnostic code 亚健康一词自从 20 世纪 80 年代中期提出之后，很多学者致力于它的研究。 亚健康状态在经济发达、社会竞争激烈的国家和地区普遍存在，而且亚健康人群有逐年增加的趋势，在全世界已经成为热点话题之一。 随着经济的发展，人们的健康意识逐渐提高，在问卷调查和体 1 / 3
小麦中的淀粉酶及其研究进展
小麦中的淀粉酶及其研究进展 摘要：从各个方面来研究了小麦中淀粉酶的功能作用以及它的作用机理，通过研究可知，小麦中的а-淀粉酶和β-淀粉酶对食品的品质的影响起着重要的作用。并通过国内外的研究进展来进一步说明小麦中淀粉酶的研究是很有必要的。最后提到了淀粉酶的添加来弥补某些淀粉酶不足以满足食品加工的小麦。本文主要从小麦中的淀粉酶研究意义，国内外小麦中的淀粉酶的研究近况以及未来的发展方向进行了较为全面的综述。 关键词：小麦；淀粉酶；研究进展 在活细胞中进行着大量的化学反应的特点是速度很快，且能有秩序的进行，从而使得细胞同时能进行各种降解代谢及合成代谢，以满足生命活动的需要。生物细胞之所以能够在常温常压下以极高的速度和很大的专一性进行化学反应是由于其中存在一种称为“酶”的生物催化剂。而在小麦的生长，储存，加工等环节中，其中存在的酶就具有非常重要的作用，小麦中的酶会影响着小麦的储存，加工等品质。小麦粉中的淀粉酶主要有3类，即а-淀粉酶，β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶。其中与面包烘焙有关的主要是а-淀粉酶和β-淀粉酶，而且а-淀粉酶与小麦的储藏品质也有着极其密切的关系。所以对小麦中的淀粉酶进行研究是十分有必要的。 1.研究小麦中的淀粉酶的意义 小麦中的淀粉酶主要有а-淀粉酶，β-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶这三类。面粉有很多用途，可以制成各种不同的成品食品。而面粉大多数都是小麦面粉，可见要研究面粉就的研究小麦，并且小麦中的а-淀粉酶，β-淀粉酶与面包烘焙有关，而且а-淀粉酶与小麦的储藏品质也有着极其密切的关系。所以研究小麦中的淀粉酶是非常有意义的。通过研究可以更好地把握不同小麦品种的淀粉酶的性质，来改善淀粉酶，从而来改进食品品质。 1.1小麦中的а-淀粉酶对面包品质的影响 大量的研究已证实，由于淀粉酶在发酵过程中对淀粉分子进行了有益的修饰，进而改善了面包的质地、体积、颜色、货架寿命等方面的性质,具体影响如下[1,2]： 1.1.1 а-淀粉酶对面包品质的影响 ○1а-淀粉酶能增大面包体积。а-淀粉酶是通过适当阻止面筋的形成来使面包体积增加的，
CDE公布的药用辅料清单
DL-酒石酸133-37-9；87-69-4；526-83-0 4J4Z8788N8 DL-苹果酸6915-15-7；617-48-1 817L1N4CKP L-苹果酸97-67-6 J3TZF807X5 α-维生素E乙酯7695-91-2 9E8X80D2L0 阿法环糊精10016-20-3 Z1LH97KTRM 阿拉伯胶9000-01-05 5C5403N26O 阿司帕坦22839-47-0 Z0H242BBR1 巴西棕榈蜡8015-86-9 R12CBM0EIZ 白凡士林8009-03-8 4T6H12BN9U 白蜂蜡8012-89-3 7G1J5DA97F 白陶土68515-07-1；1332-58-7 24H4NWX5CO 半胱氨酸盐酸盐7048-04-6 ZT934N0X4W 薄荷脑15356-70-4；1490-04-6；89-78-1BZ1R15MTK7 薄荷油8006-90-4 AV092KU4JH 倍半油酸山梨坦8007-43-0 0W8RRI5W5A 倍他环糊精7585-39-9 JV039JZZ3A 苯甲醇100-51-6 LKG8494WBH 苯甲酸65-85-0 8SKN0B0MIM 苯甲酸钠532-32-1 OJ245FE5EU 苯甲酸苄酯120-51-4
苯氧乙醇122-99-6 HIE492ZZ3T 苯乙醇60-12-8 ML9LGA7468 苯扎氯铵8001-54-5 F5UM2KM3W7 苯扎溴铵7281-04-1 IRY12B2TQ6 蓖麻油8001-79-4 D5340Y2I9G 冰醋酸64-19-7 Q40Q9N063P 冰片507700 丙二醇57-55-6 6DC9Q167V3 丙二醇单月桂酸酯27194-74-7 M4AW13H75T 丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯68583-51-7 丙二醇二乙酯623-84-7 5Z492UNF9O 丙二醇二月桂酸酯22788-19-8 丙二酸二乙酯105-53-3 丙酸79-09-4 丙酸钠137-40-6 DK6Y9P42IN 丙酸乙酯105-37-3 丙酸异戊酯105-68-0 丙酸苄酯122-63-4 丙酮67-64-1 1364PS73AF 丙烯酸树脂包衣液[24938-16-7]；[9010-88-2]；[25806-15-1]；[25212-88-8]；
淀粉酶活性研究
淀粉酶活性研究 宁加彬1，王文移2 （青岛科技大学） 摘要：淀粉酶主要用作果汁加工中的淀粉分解和提高过滤速度以及蔬菜加工、糖浆制造、葡萄糖等加工制造。淀粉酶活性的研究在淀粉催化分解工程中占有 重要地位。文中综述了淀粉酶活性及其热稳定性，电场对淀粉酶活性的影响。 pH值、温度、淀粉浓度和钙的添加量以及瞬时高压处理对α-淀粉酶的热稳定 性和活性的影响 关键词：淀粉酶酶活性热稳定性 淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，通常通过淀粉酶催化水解织物上的 淀粉浆料，由于淀粉酶的高效性及专一性，酶退浆的退浆率高，退浆快，污染少，产品比酸法、碱法更柔软，且不损伤纤维。对淀粉酶的研究，有利于我们 更好的理解其催化机理。淀粉是植物种子的主要贮存物质，淀粉酶的主要作用是催化淀粉的水解，淀粉被水解成简单有机化合物并提供细胞生长所需的能量。 1、淀粉酶的研究概况 淀粉酶研究经历了一个较长的奠定和发展时期。在中国知网依据主题—— 淀粉酶进行检索，结果显示在1979-2013年共涉及15840篇文献。其中，2005 年以前的总计5256篇，2005-2010年5256篇，也就是说2005年之前的研究篇 数仅占目前土壤酶研究总数的1／3。而从2005年开始我国对土壤酶活性研究 的论文以超百篇的速度增加，且增加趋势较为明显，仅2012年就有724篇。 针对我国淀粉酶活性研究的快速发展，该文就我国淀粉酶研究种类及研究 方法的资料进行归纳总结，旨在进一步扩宽我国淀粉酶活性研究的范围，为今 后淀粉酶的研究提供一些新的思路，同时也可促进我国淀粉酶研究方法的发展。 2、淀粉酶的分类 淀粉酶是水解淀粉和糖原酶类的统称。按水解淀粉方式不同，把淀粉酶分 为α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和异淀粉酶四类。目前淀粉酶已广泛 地应用于食品、发酵、畜牧业生产、谷物加工、纺织、造纸、轻化工业、医药 和临床分析等领域 (Ashok et al．，2000；Lili，2000；柳辉等，2007；张剑等，2009)。其中，中温淀粉酶主要应用于饴糖、啤酒、黄酒、葡萄糖、味精以及抗生素等行业，也可以用于高质量的丝绸人造棉、化学纤维的退浆。淀粉 酶广泛存在于微生物、植物和动物体中。现已有大量有关土壤微生物产淀粉酶 及酶学性质的文献报道(卢涛等，2002，四川大学学报(自然科学版)，39(6)：1131—1133；张应玖等。2002)。
HIV整合酶抑制剂的研究进展
2010年第30卷 有 机 化 学 V ol. 30, 2010 * E-mail: hliu@https://www.wendangku.net/doc/884286959.html, Received April 16, 2009; revised August 6, 2009; accepted September 7, 2009. 国家高技术研究发展计划(“863”计划)(No. Grant 2006AA020602)资助项目. ·综述与进展· HIV 整合酶抑制剂的研究进展 郭涤亮a ,b 刘冠男a 周 宇a 李 建a 徐进宜b 蒋华良a 陈凯先a 柳 红*,a ,b (a 中国科学院上海药物研究所 新药研究国家重点实验室药物设计和发现中心 上海 201203) (b 中国药科大学药学院 南京210009) 摘要 HIV 整合酶是病毒DNA 复制所必需的3个基本酶之一, 是新批准上市的抗艾滋病药物Raltegravir (MK-0518, Isentress)的分子靶标. HIV 整合酶抑制剂已经成为新一类治疗获得性免疫缺陷综合症的药物. 对HIV 整合酶抑制剂的研究进展进行了综述, 为研究新型人类免疫缺陷病毒整合酶抑制剂提供参考. 关键词 人类免疫缺陷病毒; 整合酶抑制剂; 二酮酸类; Raltegravir Research Progress in HIV Integrase Inhibitors Guo, Diliang a ,b Liu, Guannan a Zhou, Yu a Li, Jian a Xu, Jinyi b Jiang, Hualiang a Chen, Kaixian a Liu, Hong *,a ,b (a Drug Discovery and Design Centre , State Key Laboratory of Drug Research , Shanghai Institute of Materia Medica , Chinese Academy of Sciences , Shanghai 201203) (b School of Pharmacy , China Pharmaceutical University , Nanjing 210009) Abstract HIV integrase is one of the three essential enzymes for viral DNA replication and the molecular target of the newly approved anti-AIDS drug raltegravir (MK-0518, Isentress). HIV integrase inhibitors have emerged as a new class of drugs for the treatment of AIDS. In this article, the recent progress of HIV inte-grase inhibitors is reviewed to provide some useful information for the further research and development of HIV integrase inhibitors. Keywords HIV; integrase inhibitor; diketoacid; Raltegravir 人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的艾滋病(AIDS)是目前人类所经历的最严重的疾病之一, 截止2004年底, 全球已有4000万艾滋病毒携带者和艾滋病患者, 已有310万人死于艾滋病, 新感染艾滋病病毒的人数约为490万, 艾滋病在全球范围内的传播速度惊人. 鉴于此, 研究和开发抗艾滋病的新药显得日益紧迫和重要. 随着人类对HIV 病毒及其感染过程的研究不断深入, 以及各国药物研发人员的不断努力, 抗HIV 药物有了突飞猛进的发展, 尤其是全新作用机制的HIV 进入抑制剂和HIV 整合酶抑制剂的出现, 为抗HIV 药物的研制带来了新的 发展方向, 也为艾滋病治疗带来了新的希望. 1 抗艾滋病药物的作用机制和分类 抗艾滋病药物的作用机制是通过影响HIV 复制周期的某个环节, 从而抑制病毒的复制和感染. 根据HIV-1的生命周期, 目前抗艾滋病药物主要针对病毒复制过程的8个重要环节, 即HIV 对宿主细胞的依附(viral attachment)-进入抑制剂(entry inhibitor); 辅受体相互作用(coreceptor interaction)-进入抑制剂; HIV 与
白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的提取纯化研究计划
全日制专业学位硕士 研究生课程考试试卷 （课程名称：植物生物技术概论） 学位课 选修课□ 研究生年级：2013级 姓名、学号：侯夏乐 2013050125 学院（系、部）：农学院 专业学科：作物学 任课教师：韩德俊 考试日期：2013年 12 月 考试成绩： 教师签字：
白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的提取纯化 研究计划 研究背景 α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor，简称a-AI)是一种天然生物活性物质，属于糖苷水解酶的一种，国外称之为“starchblocker”。a-AI能抑制肠胃道内唾液、胰淀粉酶的活性，阻碍或延缓人体对食物中主要的碳水化合物的水解和消化，降低食物中淀粉糖类物质的分解吸收，从而起到降低血糖、血脂的作用，抑制血糖浓度的升高，从而有利于糖尿病患者的饮食治疗。对于肥胖患者，可减少糖向脂肪转化，延缓肠道排空，增加脂肪消耗以减轻体重。因此，可以用a-AI来防止和治疗肥胖症、脂肪过多症、动脉硬化症、高血脂及糖尿病等。 天然存在的a-AI主要有3种类型，分别为[1](1)微生物产带一个寡生物胺单位的含氮碳水化合物；(2)微生物产多肽，如paim(来自微生物的猪胰a-AI淀粉酶抑制剂)和Haim(微生物起源人a-淀粉酶抑制剂)；(3)在豆类、谷类及其他较高等植物中发现的大分子蛋白质抑制剂。 Bowman(1945年)首次报道从芸豆中获得a-A1[2]。白芸豆中提取的a，AI是一种具有N端糖基化的糖蛋白[2]。作为一种热稳定的糖蛋白，a-AI 是在内质网上合成，储存在液泡内，要经过蛋白水解酶水解去抑制作用才能成为有活性的a-AI。 芸豆中发现的a-A1[3]已有3种，分别是aAI-1、aAI-2和aAI-3。其中从芸豆中分离纠的aAI-1，是由两个糖肽亚基α(7．8 kD)和β(14 kD)组成。
蛋白酶抑制剂的研究进展
蛋白酶抑制剂的研究进展 郭川 微生物专业，200326031 摘要：自然界共发现四大类蛋白酶抑制剂:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂，本文就各大类蛋白酶抑制剂的结构特点，活性部位的研究概况及其在各领域应用的原理及进展。 关键词：蛋白酶抑制剂；结构；应用 天然的蛋白酶抑制剂(ＰＩ)是对蛋白水解酶有抑制活性的一种小分子蛋白质,由于其分子量较小,所以在生物中普遍存在。它能与蛋白酶的活性部位和变构部位结合,抑制酶的催化活性或阻止酶原转化有活性的酶。在一系列重要的生理、病理过程中:如凝血、纤溶、补体活化、感染、细胞迁移等，PI发挥着关键性的调控作用,是生物体内免疫系统的重要组成部分。从Ｋｕｎｉｔｚ等最早分离纯化出一种ＰＩ至今,已有多种ＰＩ被发现,根据其作用的蛋白酶主要分以下几类:抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等的巯基蛋白酶抑制剂,抑制胃蛋白酶、组织蛋白酶Ｄ等的羧基蛋白酶抑制剂、抑制胶原酶、氨肽酶等的金属蛋白酶抑制剂等。而根据作用于酶的活性基团不同及其氨基酸序列的同源性,可将自然界发现的PI分为四大类:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂(半胱氨酸蛋白酶抑制剂)、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂[1]。 1 结构与功能 1.1丝氨酸蛋白酶抑制剂（Serine Protease Inhibitor,Serpin） 丝氨酸蛋白酶抑制剂是一族由古代抑制剂趋异进化5亿年演变而来的结构序列同源的蛋白酶抑制剂。Sepin为单一肽链蛋白质。各种serpin大约有30％的同源序列，疏水区同源性高达70％。血浆中的serpin多被糖基化，糖链经天东酰胺的酰胺基与主链相连。位于抑制性serpin表面、距C端30～40个氨基酸处的环状结构区RSL（reactive site loop）中，存在能被靶酶的底物识别位点识别的氨基酸P1[2]；近C端与P1相邻的氨基酸为P1’，依此类推，即肽链结构表示为N端-P15～P9～P1-P1’～P9’～P15’-C端。在对靶酶的抑制中。Serpin 以RSL中的类底物反应活性位点与靶酶形成紧密的不易解离的酶-抑制剂复合物，同时P1-P1’间的反应活性位点断裂。几种perpin氨基酸序列比较发现，serpins各成员的抑制专一性是由P1决定的，且被抑制的酶特异性切点一致。如抗凝血酶，抑制以Arg羧基端为敏感部位的丝氨酸蛋白酶，其中P1为Arg[2]。 1.2巯基蛋白酶抑制剂（Cytsteine Proteinase Inhiitor，CPI） 对于丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)已有大量研究,巯基蛋白酶抑制剂(CPI)的研究则相对要晚一些。而动物和微生物来源的CPI已有一些研究,发现它们在结构上具有同源性,Barrett等将CPI统称为胱蛋白超家族,并按分子内二硫键的有无与数量,分子量大小等将此家族分为3个成员(F1、F2、F3)。在3个家族中,大多数F1和F3的CPI中都有Glu53-Val54-Val55-Ala56-Gly57保守序列,其同源序列在其它CPI中也被发现,如Ｆ2中的Gln-Ｘ-Val-Ｙ-Gly和CHα-ras基因产物中的Gln-Val-Val肽段。人工合成的Glu-Val-Val-Ala-Gly 短肽也显示对木瓜蛋白酶有抑制活性,因此可以认为这一保守区段在抑制活性中起着全部或部分的关键作用[3]。对植物来源的ＣＰＩ研究的不多,已有报道的有水稻、鳄梨和大豆。水稻巯基蛋白酶抑制剂(Oryzacystatin,OC) 具有102个氨基酸残基,有典型的Glu-Val-Val-Ala-Gly保守序列,应与动物CPI同源进化而来。从OCI没有二硫键来看,它应归为F1成员,但从序列比较看,则更接近F3。对OCIGlu---Gly保守序列进行点突变试验表明,突变使其抑制活性大幅度下降,其中当Glu被Pro替代时则活性全无,由此说明,这一段保守序列在OCI的抑制活性中,同动物CPI一样必不可少。除Glu---Gly保守区域外,OCI序列中其
α-淀粉酶抑制剂的研究进展
目录 摘要 (1) 关键词 (1) Abstract (1) Key words (1) 引言 (2) 1 α-淀粉酶抑制剂的介绍 (2) 1.1 α-淀粉酶抑制剂的来源 (2) 1.2 α-淀粉酶抑制剂的特性研究 (3) 2 α-淀粉酶抑制剂的制备 (4) 2.1 来源于天然植物的α-淀粉酶抑制剂 (4) 2.11 豆类植物 (5) 2.12 麦类植物 (5) 2.13 齿苋类植物 (6) 2.14 其他植物 (7) 2.2 来源于微生物的α-淀粉酶抑制剂 (7) 3 α-淀粉酶抑制剂的分离纯化 (8) 4 α-淀粉酶抑制剂的检测方法 (9) 4.1 碘比色法 (9) 4.2 3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法 (9) 5 α-淀粉酶抑制剂的筛选方法 (10) 6 α-淀粉酶抑制剂的研究进展 (11) 6.1 国内外研究概况 (11)
α淀粉酶抑制剂的研究进展 摘要：α-淀粉酶抑制剂是一种糖苷水解酶抑制剂。抑制糖类消化吸收药物，减少糖分的摄取，降低血糖和血脂含量，还可作为抗虫基因。目前在医学和农业上具有广泛的用途。本文对α-淀粉酶抑制剂的制备、检测、筛选方法、特性以及发展进行了综述，并对其前景作了展望。 关键词：α-淀粉酶抑制剂，制备，检测，筛选方法，特性Research progress of α-amylase inhibitor Abstract:α-amylase inhibitor is a kind of glycoside hydrolase inhibitor, It can be potentially use as medicines of diabetes owing to inhibiting glucose from being absorbed in the digestive tracts. Which can reduce ingestion of sugar and blood fat contet and has hypoglycemic activity, and its gene can be used as insect-resistant genes in crops breeding. There is comprehensive, application in agriculture and medicine . The preparation、detection、screening methods、characteristics and development of the α-amylase inhibitors were reviwed in this paper, and the prospects were forecasted. Key words:α-amylase inhibitor, preparation, detection, screening methods, characteristics .
固定化酶的研究进展
固定化酶的研究进展 固定化酶是20世纪60年代发展起来的一项新技术。最初主要是将水溶性酶与不溶性体结合起来，成为不溶于水的酶衍生物，所以曾叫过“水不溶酶”和“固相酶”。但是，后来发现，也可以将酶包埋在凝胶内或置于超滤装置中，高分子底物与酶在超滤膜一边，而反应产物可以透过膜逸出。在这种情况下，酶本身仍是可溶的，只不过被固定在一个有限的空间内不能再自由流动。因此，用水不溶酶或固相酶的名称就不再恰当。在1971年第一届国际酶工程会议上，正式建议采用“固定化酶”的名称[1]。 一固定化酶的发展历程[1] 酶参与体内各种代谢反应，而且反应后其数量和性质不发生变换。作为一种生物催化剂，酶可以在常温常压等温和条件下高效地催化反应，一些难以进行的化学反应在酶的催化作用下也可顺利地进行反应，而且反应底物专一性强、副反应少等优点大大促进了人们对酶的应用和酶技术的研究。近年来，酶被人们广泛应用于食品生产与检测、生物传感器、医药工程、环保技术、生物技术等领域。 1916年美国科学家NELSON和GRIFFIN最先发现了酶的固定化现象；直到20世纪50年代，酶固定化技术的研究才真正有效地开展；1953年，德国科学家GRUB-HOFER 和SCHLEITH首先将聚氨基苯乙烯树脂重氮化，然后将淀粉酶、胃蛋白酶、羧肽酶和核糖核酸酶等与上述载体结合制备固定化酶；到20世纪60年代，固定化技术迅速发展；1969年日本千畑一郎利用固定化氨基酰胺酶从DL-氨基酸生产L-氨基酸，是世界上固定化酶大规模应用的首例；在1971年的第一届国际酶工程会议上，正式建议使用固定化酶(mimobilizedenzyme)这个名称。我国的固定化酶研究开始于1970年，首先是中国科学院微生物所和上海生化所的酶学工作者同时开始了固定化酶的研究工作 二固定化酶的特点[2] [3] 固定化酶具有许多优点：极易将固定化酶与底物、产物分开；可以在较长时间内进行分批反应和装柱连续反应；在大多数情况下，可以提高酶的稳定性；酶反应过程能够加以严格控制；产物溶液中没有酶的残留，简化了提取工艺；较水溶性酶更适合于多酶反应；可以增加产物的收率,提高产物的质量；酶的使用效率提高，成本降低。但是，固定化酶也有其不足之处，如固定化时，酶活力有损失；增加了固定化的成本，工厂开始投资大；只能用于水溶性底物，而且较适用于小分子。 三固定化酶固定化方法[3] [4] 由于所固定的酶或细胞的不同，或者固定的目的及固定用的载体的不同，使固定化方法大相径庭。根据固定的一般机理，可将之分为如下几种方法。酶的固定化方法有：
神经氨酸酶抑制剂的研究进展解析
上海应用技术学院 研究生课程（论文类）试卷 2 014 / 2 015学年第二学期 课程名称：新药研发与申报 课程代码：NX0702016 论文题目：神经氨酸酶抑制剂的研究进展 学生姓名：王震 专业﹑学号：化工1班，146061114 学院：化学与环境工程学院 课程（论文）成绩： 课程（论文）评分依据（必填）： 1.论文结构规范，检索的文献资料经认真的综合分析整理，选材精简得当，条理清晰，语言流畅， 版面整洁美观。得分为90-100分。 2.论文结构较规范，检索的文献资料经分析整理，材料组织得当，条理清晰，语言流畅。得分为 80-89分。 3.论文结构基本规范，内容有小问题，检索的文献资料经一般性分类整理，条理较清晰，得分为 70-79分。 4.论文结构基本规范，内容未经认真整理，一般性罗列所检索的文献资料。得分为60-69分。 5.达不到上述第4点要求的论文，得分为0-59分。 任课教师签字： 日期：年月日
神经氨酸酶抑制剂的研究进展 摘要：2009年高致病性的H1N1流感大爆发，再次向人们敲响了警钟：随着毒株变异性的加强，流感疫苗已无力完全遏制疫情的传播[1]。我们知道，流感病毒在感染和传播过程中，作为其四大活性位点之一（其他三个是血凝素、M2离子通道和部分RNA聚合酶）的神经氨酸酶（NA）起到了重要作用。因此，抗流感病毒神经氨酸酶抑制剂的设计与合成势在必行。本文综述了抗流感病毒神经氨酸酶抑制剂（NAIs）的研究进展。 关键词：神经氨酸酶；变异；抑制剂；合成
The development of neuraminidase inhibitors Abstract: The pandemic of influenza virus in 2009 to human beings sounded the alarm: the influenza vaccine was feeling powerless to suppress the transmission of epidemic with the strengthening of strain’s variability. As we know, in the process of influenza virus’ infection and propagation, the neuraminidase, one of four neuraminiric active site (another active site,ie,Hemagglutinin,M2 ion channels and RNA polymerase), played a important role. Therefore, the designing and synthesis of anti-influenza virus neuramnidase inhibitors are imperative. And this paper reviewed the development of influenza-resistant virus neuraminidase inhibitors. Keywords: neuraminidase; variation; inhibitors; synthesis
α-淀粉酶
根据淀粉酶对淀粉的水解方式不同，可将其分为α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和异淀粉酶等。其中，α-淀粉酶（α-1，4-葡聚糖-4-葡聚糖苷酶)多是胞外酶，其作用于淀粉时可从分子内部随机地切开淀粉链的α-1，4糖苷键，而生成糊精和还原糖，产物的末端残基碳原子构型为α-构型，故称α-淀粉酶。 α-淀粉酶来源广泛，主要存在发芽谷物的糊粉细胞中，当然，从微生物到高等动、植物均可分离到，是一种重要的淀粉水解酶，也是工业生产中应用最为广泛的酶制剂之一。它可以由微生物发酵制备，也可以从动植物中提取。不同来源的α-淀粉酶的性质有一定的区别，工业中主要应用的是真菌和细菌α-淀粉酶。 目前，α-淀粉酶已广泛应用于变性淀粉及淀粉糖、焙烤工业、啤酒酿造、酒精工业、发酵以及纺织等许多行业，是一种重要工业用酶。如在淀粉加工业中，微生物α-淀粉酶已成功取代了化学降解法；在酒精工业中能显著提高出酒率。其应用于各种工业中对缩短生产周期，提高产品得率和原料的利用率，提高产品质量和节约粮食资源，都有着极其重要的作用。相对地，关于α-淀粉酶抑制剂国内外也有很多研究报道，α-淀粉酶抑制剂是糖苷水解酶的一种。它能有效地抑制肠道内唾液及胰淀粉酶的活性，阻碍食物中碳水化合物的水解和消化，降低人体糖份吸收、降低血糖和血脂的含量，减少脂肪合成，减轻体重。有报道表明，α-淀粉酶可以帮助改善糖尿病患者的耐糖量。 α-淀粉酶是淀粉及以淀粉为材料的工业生产中最重要的一种水解酶，其最早的商业化应用在1984年，作为治疗消化紊乱的药物辅助剂。现在，α-淀粉酶已广泛应用于食品、清洁剂、啤酒酿造、酒精工业和造纸工业。 在焙烤工业中的应用： α-淀粉酶用于面包加工中可以使面包体积增大，纹理疏松；提高面团的发酵速度；改善面包心的组织结构，增加内部组织的柔软度；产生良好而稳定的面包外表色泽；提高入炉的急胀性；抗老化，改善面包心的弹性和口感；延长面包心储存过程中的保鲜期 在啤酒酿造中的应用： 啤洒是最早用酶的酿造产品之一，在啤洒酿造中添加α-淀粉酶使其较快液化以取代一部分麦芽，使辅料增加，成本降低，特别在麦芽糖化力低，辅助原料使用比例较大的场合，使用α-淀粉酶和β-淀粉酶协同麦芽糖化，可以弥补麦芽酶系不足，增加可发酵糖含量，提高麦汁率，麦汁色泽降低，过滤速度加快，提高了浸出物得率，同时又缩短了整体糊化时间。在酒精工业中的应用： 在玉米为原料生产酒精中添加α-淀粉酶低温蒸煮的新工艺，每生产1t酒精可节煤 224.42kg。又可减少冷却用水，提高出酒率8.8％，酒精成品质量也有显著提高。酒精生产应用耐高温α-淀粉酶。采用中温95℃～105℃蒸煮，既可有效地杀死原料中带来的杂菌，降低入池酸度和染菌机率，又可保护原材料中的淀粉组织不被破坏，形成焦糖或其它物质而损失，从而提高原料利用率 在造纸工业中的应用： 当代造纸工业中，造纸用化学品在提高纸品质量、增加纸品功能、提高生产效率和降低生产成本等方面发挥着极为重要的作用。由于淀粉与造纸用植物纤维素结构相近，相互间有良好的亲和作用，资源广泛，廉价易得，尤其是经变性处理的淀粉，能赋予纸张优异的性能，因此各类变性淀粉在造纸中广泛用于湿部添加、层间喷雾、表面施胶和涂布粘合。α-淀粉酶可以生产涂布粘合用变性淀粉
α淀粉酶产生菌的研究进展综述
α-淀粉酶产生菌的研究进展综述 1309030202 刘铭迪 【摘要】：α-淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中,能水解淀粉产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等,是工业生产中应用最为广泛的酶制剂之一。目前,α-淀粉酶已广泛应用于变性淀粉及淀粉糖、焙烤工业、啤酒酿造、酒精工业、发酵以及纺织等许多行业。本文对α-淀粉酶产生菌的研究进展进行了相关综述。 【关键词】：α淀粉酶产生菌；耐受；性质；应用 【正文】：α一淀粉酶(α一1，4一D一葡萄糖一葡萄糖苷水解酶)普遍分布在动物、植物和微生物中，是一种重要的淀粉水解酶。它以随机作用方式切断淀粉、糖原、寡聚或多聚糖分子内的α一1，4葡萄糖苷键，产生麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等，是工业生产中应用最为广的酶制剂之一。它可以由微生物发酵制备，也可以从动植物中提取。不同来源的α淀粉酶的性质有一定的区别，工业中主要应用的是真菌和细菌α一淀粉酶。目前，α一淀粉酶已广泛应用于变性淀粉及淀粉糖、焙烤工业、啤酒酿造、酒精工业、发酵以及纺织等许多行业，是一种重要工业用酶。如在淀粉加工业中，微生物α一淀粉酶已成功取代了化学降解法；在酒精工业中能显著提高出酒率。其应用于各种工业中对缩短生产周期，提高产品得率和原料的利用率，提高产品质量和节约粮食资源，都有着极其重要的作用。 1、α一淀粉酶的性质 不同来源的α一淀粉酶的酶学和理化性质有一定的区别，它们的性质对在其工业应用中的应用影响也较大，在工业生产中要根据需要使用合适来源的酶，因此对淀粉酶性质的研究也显得比较重要。目前关于不同来源仅一淀粉酶性质的研究已经很多，但将它们进行完整归纳的比较少，本文将其性质进行总结，为以后α一淀粉酶的应用提高相关依据。 1．1 底物特异性 α一淀粉酶和其它酶类一样，具有反应底物特异性，不同来源的淀粉酶反应底物也各不相同，通常α一淀粉酶显示出对淀粉及其衍生物有最高的特异性，这些淀粉及衍生物包括支链淀粉、直链淀粉、环糊精、糖原质和麦芽三糖等。 1．2 最适pH和最适温度 反应温度和pH对酶活力影响较大，不同来源的α一淀粉酶有各自的最适作用pH和最适作用温度，通常在最适作用pH和最适作用温度条件下酶相对比较稳定，在此条件下进行反应能最大程度地发挥酶活力，提高酶反应效率。因此，在工业应用中应了解不同的酶最适pH和最适温度，确定反应的最佳条件，最大限度地提高酶的使用效率是很重要的。 通常情况下α一淀粉酶的最适作用pH一般在2到12之间变化。真菌和细菌类α一淀粉酶的最适pH在酸性和中性范围内，如芽孢杆菌仅一淀粉酶的最适pH为3，碱性α一淀粉酶的最适pH在9～12。另外，温度和钙离子对一些α一淀粉酶的最适pH有一定的影响，会改变其最适作用范围。不同微生物来源的α一淀粉酶的最适作用温度存在着较大差异，其中最适作用温度最低的只有25c～30℃，而最高的能达到100c～130c。另外，钙离子和钠离子对一些酶的最适作用温度也有一定的影响。 1. 3 金属离子对酶稳定性的影响 α一淀粉酶是金属酶，很多金属离子，特别是重金属离子对其有抑制作用；另外，巯基，N一溴琥珀酸亚胺，p一羟基汞苯甲酸，碘乙酸，BSA，EDTA和EGTA等对α一淀粉酶也有抑制作用。 2、α-淀粉酶的生产
药用辅料生产工艺
药用玉米淀粉生产工艺（改进） 工艺操作：取原料玉米，加入各种浸泡液，浸泡72h ，连同浸泡液一起送入砂轮粉碎，过40目除渣，以2000r/min 离心10min 。弃上清液以及黄色沉淀，余下下半部分为淀粉。淀粉再水洗，干燥至恒重，测定，包装。 工艺优点:在玉米淀粉的湿法加工中，长期沿用亚硫酸浸泡玉米，此种方法虽然可以实现淀粉于蛋白质或其他组分的分离，但是单纯以亚硫酸浸泡，常出现淀粉的蛋白质含量偏高或超标。通过研究表明使用少量安全性能高的表面活性剂（比如：十二烷基硫酸钠或十二烷基磺酸钠）于亚硫酸混合使用，可以有效的降低药用淀粉中蛋白质的含量。 洗涤，离心 原料（玉米） 浸泡72h 粉碎 （玉米）浆液 40目过滤,离心 去上清液和黄色沉淀 粗制淀粉 产品（淀粉） 干燥，检测 包装
半干法制备羧甲基淀粉钠 工艺操作： 将原淀粉10份、氯乙酸钠 50 份、乙醇10 份、氢 氧化钠 12 份、助剂5份,经高速混合后,进人带干机进行反应,冷却后处理,综合多方面因素,我们选定反应温度10 ℃,反应时间2小时。该工艺生产 出来的淀粉粘度800mPa.s 左右,颜色洁白。如调整物料配比及反应温度可生产出各种粘度的羧甲基淀粉。 工艺优点：溶剂法是CMS 制备中最常用的方法,溶剂法一般以与水混溶的有机溶剂为介质,在少量水分存在的条件下进行醚化,以提高取代度和反应效率,使产品保持颗粒状态。溶剂法优点反应效率高,产品质量好,操作方便。缺点是溶剂回收有一定困难,生产成本高且易污染环境。此方法结合干法、溶剂法的优点,采取带干机半干法连续生成羧甲基淀粉,所生产的羧甲基淀粉取代度较高,粘度较大。 原料（玉米淀粉，氯乙酸 钠，乙醇，氢氧化钠，助剂） 高速混合 带干机 200℃，反应2h 初产品 冷 却，筛分 产品 包装 检测（粘度，取代度）