对二甲苯的辛醇水分配系数Kow的测定

实验一对二甲苯的辛醇—水分配系数Kow的测定

一、目的和要求

1．了解测定有机化合物的辛醇—水分配系数Kow的意义和方法。

2．掌握紫外分光光度法测定分配系数的操作技术。

二、实验原理

正辛醇是一种长链烷烃醇，在结构上与生物体内的碳水化合物和脂肪类似。因此，可用正辛醇―水分配体系来模拟研究生物―水体系。有机物的辛醇―水分配系数是衡量其脂溶性大小的重要理化性质。研究表明，有机物的分配系数与水溶解度，生物富集系数及土壤，沉积物吸附系数均有很好的相关性。因此，有机物在环境中的迁移在很大程度上与它的分配系数有关。此外，有机药物和毒物的生物活性亦与其分配系数密切相关。所以，在有机物的危险性评价方面，分配系数的研究是不可缺少的。

化合物在辛醇相中的平衡浓度与水相中该化合物非离解形式的平衡浓度的比值，即为该化合物的辛醇―水分配系数。

Kow ＝ Co／Cw

式中：

Co——该化合物在辛醇相的平衡浓度；

Cw——水相中的平衡浓度；

Kow——分配系数。

本实验通过测定水相中有机物浓度，然后再根据分配前化合物在辛醇相的浓度以及分配后化合物在水相的浓度，计算得到分配系数。

三、仪器和试剂

仪器：

1．UNICO UV2000型紫外可见分光光度计

2．80-2离心机

3．HY-2调速多用振荡器

4．SZ-1快速混匀器

5．微量注射器100μL

6．玻璃容量瓶：10ml，25ml

7．玻璃移液管：0.5ml，1ml，5ml

8．10ml玻璃离心管

9．玻璃滴管

试剂：

1．对二甲苯分析纯

2．无水乙醇分析纯

3．正辛醇分析纯

四、实验步骤

1．标准曲线的绘制（已完成）。

（1）移液管移取1.00ml对二甲苯于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。

（2）微量注射器取该溶液0.10ml于25ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。此时该溶液浓度为400μL/L。

（3）分别移取该溶液1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于5只25ml容量瓶中，用水定容，摇匀。

（4）在紫外分光光度计上，选择波长为227nm，以水为参比，测定标准系列的吸光度A。以A对浓度C作图，即得标准曲线。

2．分配系数的测定

（1）移取0.40ml对二甲苯于10ml容量瓶中，用正辛醇稀释至刻度。

（2）移液管取此溶液1ml于10ml离心管中，准确加入9ml水，塞上塞子，平放并固定在振荡器上振荡2小时。

（3）2000转离心10分钟分离，用滴管小心吸去离心管上层辛醇，在227nm下测定水相吸光度，由标准曲线查出其浓度。平行做三份，每次均作试剂空白试验。

五、数据处理

测定分配系数的计算公式：

Kow ＝（Co × V o － Ca × Va）/（Ca × V0）

式中：

Co为辛醇相初始浓度

Ca为平衡后水相中的浓度

V o和Va分别为辛醇相和水相的体积

六、思考和讨论

1．空白实验如何做？

2．如果以环己烷代替正辛醇，试比较对二甲苯的环己烷—水分配系数的大小。

3．试查阅其他估算分配系数的方法。

七、注意事项

1．正辛醇的气味比较大，因此实验时动作要迅速，防止太多的气味溢出。

2．滴管吸取上层辛醇的时候，注意要将辛醇吸干净，以防干扰测定。

3．测定水相吸光度时，用长滴管将水相吸出，注意不要将辛醇吸出。

4．混匀时，注意30秒后放气。

实验一有机物(对二甲苯)的正辛醇-水分配系数

实验一 有机物（对二甲苯）的正辛醇-水分配系数 有机化合物的正辛醇-水分配系数（K ow ）是指平衡状态下化合物在正辛醇和水相中浓度的比值。它反映了化合物在水相和有机相之间的迁移能力，是描述有机化合物在环境中行为的重要物理化学参数，它与化合物的水溶性、土壤吸附常数和生物浓缩因子密切相关。通过对某一化合物分配系数的测定，可提供该化合物在环境行为方面许多重要的信息，特别是对于评价有机物在环境中的危险性起着重要作用。测定分配系数的方法有振荡法、产生柱法和高效液相色谱法。本实验采用振荡法测定对二甲苯的正辛醇-水分配系数. 一、实验目的 1. 掌握有机物正辛醇-水分配系数的测定方法。 2. 学习使用紫外分光光度计。 二、实验原理 正辛醇-水分配系数是平衡状态下有机化合物在正辛醇相和水相中浓度的比值。即： w o ow c c K = 式中：K ow —— 分配系数； c o —— 平衡时有机化合物在正辛醇相中的浓度； c w —— 平衡时有机化合物在水相中的浓度。 本实验采用振荡法使对二甲苯在正辛醇相和水相中达到平衡后进行离心，测定水相中对二甲苯的浓度，由此求得分配系数。 Vo c V c V c K w w w ow -=00 式中： c 0、c w —— 分别为平衡时有机化合物在正辛醇相和水相中的浓度； V 0、V w —— 分别为正辛醇相和水相中的体积。 三、仪器和试剂 1. 仪器 (1) 紫外分光光度计。

(2) 恒温振荡器。 (3) 离心机。 (4) 具塞比色管：1OmL。 (5) 微量注射器：5mL。 (6) 容量瓶：25mL、1OmL。 （7）离心管：10ml (8)移液管：1、 2、 5ml 2. 试剂 (1) 正辛醇：分析纯。 (2) 乙醇：95%，分析纯。 (3) 对二甲苯：分析纯。 四、实验步骤 1. 标准曲线的绘制 移取1.00mL对二甲苯于10mL容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。取该溶液0.10mL于25mL容量瓶中，再用乙醇稀释至刻度，摇匀，此时浓度为400μL/L。在5只25 mL容量瓶中各加入该溶液1.00、2.00、3.00、4.00和5.00mL，用水稀释至刻度，摇匀。在紫外分光光度计上于波长273.5nm处，以蒸馏水为参比，测定吸光度值。利用所测得的标准系列的吸光度值对浓度作图，绘制标准曲线。 2. 溶剂的预饱和 将20mL正辛醇与200mL二次蒸馏水在振荡器上振荡24 h，使二者相互饱和，静止分层后，两相分离，分别保存备用。 3.分配系数的测定 (1) 移取0.40mL对二甲苯于10mL容量瓶中，用上述处理过的被水饱和的正辛醇稀释至刻度，该溶液浓度为4×104μL/L。 （2）分别移取上述溶液浓度为（4×104μL/L）1.00mL于3个10ml具塞比色管中，用正辛醇饱和的二次水稀释至刻度。盖紧塞子，置于恒温振荡器上，振荡1h，转移到10ml离心管中，离心分离（2000转/分，10分钟），用紫外分光光度计测定水相吸光度。取水样时，为避免正辛醇的污染，可利用带针头的注射器移取水样。首先在注射器内吸人部分空气，当注射器通过正辛醇相时，轻轻排

实验四 有机物的正辛醇-水分配系数

实验四有机物的正辛醇-水分配系数 有机化合物的正辛醇-水分配系数（Kow）是指平衡状态下化合物在正辛醇和水相中浓度的比值。它反映了化合物在水相和有机相之间的迁移能力，是描述有机化合物在环境中行为的重要物理化学参数，它与化合物的水溶性、土壤吸附常数和生物浓缩因子密切相关。通过对某一化合物分配系数的测定，可提供该化合物在环境行为方面许多重要的信息，特别是对于评价有机物在环境中的危险性起着重要作用。测定分配系数的方法有振荡法、产生柱法和高效液相色谱法。 一、实验目的 1. 掌握有机物正辛醇-水分配系数的测定方法。 2. 学习使用紫外分光光度计。 二、实验原理 正辛醇-水分配系数是平衡状态下有机化合物在正辛醇相和水相中浓度的比值。即：EMBED Equation.3 式中：Kow ——分配系数； co ——平衡时有机化合物在正辛醇相中的浓度； cw ——平衡时有机化合物在水相中的浓度。 本实验采用振荡法使对二甲苯在正辛醇相和水相中达到平衡后进行离心，测定水相中对二甲苯的浓度，由此求得分配系数。 EMBED Equation.3 式中： c0、cw ——分别为平衡时有机化合物在正辛醇相和水相中的浓度； V0、Vw ——分别为正辛醇相和水相中的体积。 三、仪器和试剂 1. 仪器 (1) 紫外分光光度计。 (2) 恒温振荡器。 (3) 离心机。 (4) 具塞比色管：1OmL。 (5) 微量注射器：5mL。 (6) 容量瓶：25mL、1OmL。 2. 试剂 (1) 正辛醇：分析纯。 (2) 乙醇：95%，分析纯。 (3) 对二甲苯：分析纯。 四、实验步骤 1. 标准曲线的绘制 移取1.00mL对二甲苯于10mL容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。取该溶液0.10mL于25mL 容量瓶中，再用乙醇稀释至刻度，摇匀，此时浓度为400μL/L。在5只25 mL容量瓶中各加入该溶液1.00、2.00、3.00、4.00和5.00mL，用水稀释至刻度，摇匀。在紫外分光光度计上于波长227nm处，以水为参比，测定吸光度值。利用所测得的标准系列的吸光度值对浓度作图，绘制标准曲线。 2. 溶剂的预饱和

对二甲苯的辛醇水分配系数Kow的测定

实验一对二甲苯的辛醇—水分配系数Kow的测定 一、目的和要求 1．了解测定有机化合物的辛醇—水分配系数Kow的意义和方法。 2．掌握紫外分光光度法测定分配系数的操作技术。 二、实验原理 正辛醇是一种长链烷烃醇，在结构上与生物体内的碳水化合物和脂肪类似。因此，可用正辛醇―水分配体系来模拟研究生物―水体系。有机物的辛醇―水分配系数是衡量其脂溶性大小的重要理化性质。研究表明，有机物的分配系数与水溶解度，生物富集系数及土壤，沉积物吸附系数均有很好的相关性。因此，有机物在环境中的迁移在很大程度上与它的分配系数有关。此外，有机药物和毒物的生物活性亦与其分配系数密切相关。所以，在有机物的危险性评价方面，分配系数的研究是不可缺少的。 化合物在辛醇相中的平衡浓度与水相中该化合物非离解形式的平衡浓度的比值，即为该化合物的辛醇―水分配系数。 Kow ＝ Co／Cw 式中： Co——该化合物在辛醇相的平衡浓度； Cw——水相中的平衡浓度； Kow——分配系数。 本实验通过测定水相中有机物浓度，然后再根据分配前化合物在辛醇相的浓度以及分配后化合物在水相的浓度，计算得到分配系数。 三、仪器和试剂 仪器： 1．UNICO UV2000型紫外可见分光光度计 2．80-2离心机 3．HY-2调速多用振荡器 4．SZ-1快速混匀器 5．微量注射器100μL 6．玻璃容量瓶：10ml，25ml 7．玻璃移液管：0.5ml，1ml，5ml 8．10ml玻璃离心管 9．玻璃滴管 试剂： 1．对二甲苯分析纯 2．无水乙醇分析纯 3．正辛醇分析纯 四、实验步骤 1．标准曲线的绘制（已完成）。 （1）移液管移取1.00ml对二甲苯于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。

有机物的正辛醇-水分配系数

实验一 有机物的正辛醇-水分配系数 有机化合物的正辛醇-水分配系数（K ow ）是指平衡状态下化合物在正辛醇和水相中浓度的比值。它反映了化合物在水相和有机相之间的迁移能力，是描述有机化合物在环境中行为的重要物理化学参数，它与化合物的水溶性、土壤吸附常数和生物浓缩因子密切相关。通过对某一化合物分配系数的测定，可提供该化合物在环境行为方面许多重要的信息，特别是对于评价有机物在环境中的危险性起着重要作用。测定分配系数的方法有振荡法、产生柱法和高效液相色谱法。 一、实验目的和要求 1、掌握有机物正辛醇-水分配系数的测定方法。 2、学习使用紫外分光光度计。 二、实验原理和方法 正辛醇-水分配系数是平衡状态下有机化合物在正辛醇相和水相中浓度的比值。即： w o ow c c K = 式中：K ow —— 分配系数； C o —— 平衡时有机化合物在正辛醇相中的浓度； C w —— 平衡时有机化合物在水相中的浓度。 本实验采用振荡法使邻甲酚在正辛醇相和水相中达到平衡后进行离心，测定水相中邻甲酚的浓度，由此求得分配系数。 000V C V C V C K w w w ow -= 式中： C 0、C w —— 分别为有机化合物在正辛醇相初始浓度和平衡时水相中的浓度； V 0、V w —— 分别为正辛醇相和水相中的体积。 三、仪器和试剂 1. 仪器 (1) 紫外分光光度计。(2) 恒温振荡器。(3) 具塞比色管：1OmL 。 (5) 容量瓶：25mL 、1OmL 。(6) 微量注射器：5mL 。 2. 试剂 (1) 正辛醇：分析纯。(2) 乙醇：95%，分析纯。 (3) 邻甲酚：分析纯。 四、实验步骤 1. 最大吸收峰的测定200-300nm (270nm)。 2 标准曲线的绘制

油水分配系数知识

楼主可以借助ACDLABS软件对你的药物进行分析。 可以求得该药物的分子量，氢键供体数量，氢键受体数量，PSA，油水分配系数等等信息。 然后上网去查询以上信息相关的文章，就可以不做试验也能估算一下药物在胃肠道的吸收。 logP值指某物质在正辛醇（油）和水中的分配系数比值的对数值。反映了物质在油水两相中的分配情况。logP值越大，说明该物质越亲油，反之，越小，则越亲水，即水溶性越好！[1]? 测定药物油水分配系数的时候,可以选择油相和水相互不相溶的有机溶剂.一般选择正丁醇,因为它与生物膜整体的溶解度参数接近.油水分配系数的计算就是求平衡状态下正丁醇与水相中浓度的比值.若药物脂溶性大,则药物大部分进入油相,水相中浓度很小,分析误差会变大.为了减小测定误差,可以改变油相和水相的比例,例如从1:1降至1:4或者1:9,从而提高药物在水相中的溶解量. 油水分配系数和正辛醇分配系数都是分配系数，唯一的区别就是有机相的不同，从文献上看，油水分配系数是个总的概念，包括正辛醇分配系数。早期的油相一般多用橄榄油。 在测定油/水分配系数时，虽然可选作油相的溶剂很多，但在处方设计中应用最多的是正辛醇。其主要原因是：大多数药物的溶解度参数(δ)为8～12，正辛醇的溶解度参数δ=10.24，与细胞类脂膜的溶解度参数(δ=10.3)相似，并且正辛醇溶解度参数正好位于一般药物的溶解度范围的中值附近，所以可以认为药物在正辛醇中形成近似理想溶液。 正辛醇与其它油相或有机相的差别在于介电常数（或电解质强度）不同，正辛醇是中等强度，油相是低强度。 从理论上分析：正辛醇为各向同性的溶剂，且不带电荷中心，因此无法模拟所有类型药物，特别是解离型药物的分配系数，因此，对于解离型药物来说，可能油水分配系数不等同于正辛醇水分配系数吧。 大家继续讨论，我的试验涉及这个主题，体外正辛醇水分配系数与大鼠体内的肠吸收情况相悖，令我百思不得其解，请各位站友解惑献策！ 我试验的单体的正辛醇水（pH为1-9的各种磷酸盐缓冲液）分配系数均小于0，按道理来说预示肠内吸收很差；但是我进行的体内试验表明该单体在大鼠体内的小肠吸收很强，而且已经有人用caco-2模型证明该单体确实有很强的渗透性。 此矛盾如何解决？或者如何解释呢？？？ 如果正辛醇/水分配系数均小于0，说明药物的水溶性较强，而脂溶性较差，如果以被动扩散机制透过细胞膜，用Caco-2模型求得的表观透过常数因该较低，如在实验得到相反的结论，个人认为有两种可能： 1. 药物为某种受体的底物，存在主动过程； 2. 药物本身能够改变肠粘膜的通透性，起到吸收促进剂的作用，如EDTA能够打开细胞间的紧密连接(tight junction），加速药物细胞间(paracellular route)的渗透, 如果是这样要注意药物潜在的毒性以及刺激性。可否这样理解： 1.油水分配系数就是我们最常说的LogP (Partition Coefficient), 其计算方法是中性药物在油相与水相浓度的比值，在取对数。对于一些在水相部分电离的弱酸或弱碱，应先根据Henderson-hasselbach方程计算该pH值下中性药物分子的浓度。可以证明，LogP不受溶液pH值的影响。