益生菌细菌素的抑菌活性研究
Medical Diagnosis 医学诊断, 2015, 5, 6-11
Published Online March 2015 in Hans. https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,/journal/md
https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,/10.12677/md.2015.51002
A Study on Bacteriostatic Activity of
Bacteriocins Produced by Probiotic Bacteria
Lan Wang1, Yan Zhou2, Biting Wu1, Haiyan Li1, Jimei Du1*
1School of Laboratory Medicine, Wenzhou Medical University, Wenzhou Zhejiang
2Demonstration Center of Biological Experimental Teaching, Wenzhou Medical University, Wenzhou Zhejiang Email: hanazhou@https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,, *djm@https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,
Received: Mar. 17th, 2015; accepted: Mar. 20th, 2015; published: Mar. 26th, 2015
Copyright ? 2015 by authors and Hans Publishers Inc.
This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY).
https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,/licenses/by/4.0/
Abstract
Object: To reveal the bacteriostatic activity of bacteriocins produced by human intestinal probio-tics. Methods: Intestinal probiotics were separated from excrement of healthy people and identi-fied by routine method and PCR. Bacteriocins were refined as Yang’s way and strains that could produce broad-spectrum efficient bacteriocins were selected by using 96-well plate method. Bac-teriostatic activity of every selected bacteriocin was detected on S. aureus, S. pneumoniae, E. coli, K.
pneumonia, P. vulgaris, S. typhi, S. flexneri, P. aeruginosa, A. baumanni and C. albicans by 96-well plate method respectively. Results: 32 strains of intestinal probiotics were separated, including 4 bifidobacteria (B), 6 lactobacillus (L), and 22 enterococcus (E). B3, B4, L5, E12, E15, E18 were broad-spectrum efficient bacteriocin producing strains. Bacteriocin of B3, L5, E15 has bacterios-tatic action on gram positive and negative bacteria. Both B3 and L5 bacteriocin has strong inhibi-tory action on S. typhi and S. pneumoniae, while E15’ shows higher inhibitory effects on C. albicans and S. pneumoniae than other bacteria used in this study. Conclusion: Bacteriocins produced by intestinal probiotic bacteria have broad bacteriostatic activity, and some of them are high effi-cient.
Keywords
Probiotics, Bacteriocins, Bacteriostatic Activity
益生菌细菌素的抑菌活性研究
王澜1，周燕2，吴碧婷1，李海燕1，杜季梅1*
*通讯作者。
益生菌细菌素的抑菌活性研究
1温州医科大学检验医学院，浙江温州
2温州医科大学生物学实验教学中心，浙江温州
Email: hanazhou@https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,, *djm@https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,
收稿日期：2015年3月17日；录用日期：2015年3月20日；发布日期：2015年3月26日
摘要
目的：了解人体肠道益生菌细菌素的抑菌活性。方法：从健康人粪便中分离肠道益生菌，用传统方法和PCR法鉴定菌株；Yang法提取细菌素，96微孔板法筛选产广谱、高效抑菌作用细菌素菌株；96孔板显色法测定细菌素对金黄色葡萄球菌(S. aureus)，肺炎链球菌(S. pneumoniae)，大肠埃希菌(E. coli)，肺炎克雷伯菌(K. pneumoniae)，普通变形杆菌(P. vulgaris)，伤寒沙门菌(S. typhi)，福氏志贺菌(S. flexneri)，铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)，鲍曼不动杆菌(A. baumannii)，白色念珠菌(C. albicans)抑菌效果。结果：分离出32株肠道益生菌，包括4株双歧杆菌(B)、6株乳杆菌(L)和22株肠球菌(E)；B3、B4、L5、E12、E15、E18为产广谱高效细菌素菌株；B3、L5、E15菌株所产细菌素对革兰阳性菌和阴性菌均有抑制作用；其中B3、L5细菌素对伤寒沙门菌和肺炎链球菌具有较强的抑制作用；E15细菌素对肺炎链球菌和白色念珠菌有较强的抑制作用。结论：人体肠道益生菌产生的细菌素抑菌谱较广且活性较高，具有一定的开发潜力。
关键词
益生菌，细菌素，抑菌活性
1. 引言
随着现代医学技术的发展，抗生素品种和数量不断增加并为人类抵抗疾病做出卓越贡献的同时，抗生素滥用使用也给人类健康造成了一系列严重后果：如细菌耐药性增加、医药资源浪费、环境污染等等[1]。此外，抗生素过量或不当使用还会引起人和动物的胃肠功能紊乱，肠道菌群失调[2]。细菌素(Bacteriocin)是某些细菌在代谢过程中，通过核糖体合成机制产生的一类具有抑菌活性的多肽或前体多肽，抑菌范围不局限于同源的细菌，产生菌对其细菌素有自身免疫性[3]。细菌素是微生物代谢产物，可以被肠道的水解蛋白酶分解，对肠道菌群没有不利影响，且无毒副作用、无残留和抗药性，同时对环境也不会产生污染[2]。本研究从人新鲜粪便标本中分离肠道益生菌，筛选产广谱高效细菌素菌株，通过Yang法粗提细菌素并测定不同细菌素的抑菌活性。结果报告如下：
2. 材料与方法
2.1. 材料
2.1.1. 粪便标本
采集两周内未服用任何抗菌药物健康个体的新鲜粪便28份分离培养肠道益生菌。
2.1.2. 试剂和仪器
TPY培养基(青岛海博)；肠球菌琼脂(青岛海博)；改良番茄汁琼脂培养基(杭州天和)；MRS培养基(杭州天和)；LB肉汤(北京奥博星)；厌氧产气袋(日本三菱)；溶菌酶(大连宝生物)；RNA酶(大连宝生物)；Nisin (Oxiod)；酶标仪(Thermo)。
益生菌细菌素的抑菌活性研究
2.1.
3. 测试菌株
金黄色葡萄球菌(S. aureus) ATCC 25923、肺炎链球菌(S. pneumoniae) ATCC 49619、大肠埃希菌(E.
coli) ATCC 25922、伤寒沙门菌(S. typhi) CMCC(B) 50071、福氏志贺菌(S. flexneri) CMCC 51572、肺炎克雷伯菌(K. pneumoniae) ATCC 4352、普通变形杆菌(P. vulgaris) CMCC(B) 49027、铜绿假单胞菌(P. aeru-ginosa) ATCC 27853、鲍曼不动杆菌(A. baumannii) ATCC 17978、白色念珠菌(C. albicans) ATCC 90028。
2.2. 方法
2.2.1. 益生菌分离
粪便标本用PBS均质化处理，500 rpm离心5 min后取上清，10倍倍比稀释。分别吸取100 μL的10?3，10?4，10?5的稀释液涂布改良番茄汁培养基分离乳杆菌，涂布肠球菌培养基分离肠球菌，烛缸培养24 h。
吸取100 μL的10?1，10?2，10?3的稀释液涂布TPY培养基分离双歧杆菌，厌氧培养48 h。依据《临床微生物学和微生物检验》[4]、《厌氧菌和微需氧菌感染与实验诊断》[5]进行传统方法鉴定；参照文献[6]扩增细菌16S rRNA，PCR产物送SUNNY公司测序鉴定。
2.2.2. 筛选菌株
按Rajaram G筛选菌株方法[7]，分别制备各分离菌发酵液；以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为指示菌，100 IU/mL Nisin和1 μg/mL环丙沙星为阳性对照，按公式：抑菌率(%) = 100 × (生长对照OD590值? 试验OD590值)/生长对照OD590值，96孔板法筛选产抑菌活性物质菌株。
2.2.
3. Yang法粗提细菌素
参考文献[8] [9]粗提细菌素。发酵液调pH至6.0，4℃静置2 h，细菌素吸附于菌体；4℃，8000 rpm/min 离心15 min，去上清，磷酸缓冲液(pH = 6.0)洗涤；离心，4℃，8000 rpm/min离心15 min；将沉淀悬浮在pH为2.0的100 mmol/L NaCl溶液中，4℃振荡5 h，细菌素从菌体解离；4℃，8000 rpm/min离心15 min，上清液为细菌素粗提液。
2.2.4. 细菌素抑菌活性测定
以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、福氏志贺菌、伤寒沙门菌、肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、普通变形杆菌为指示菌，取96微孔板分别加入50 μL的细菌素粗提液、50 μL的105cfu/mL指示菌液和100 μL 5%溴甲酚紫LB液体培养基，以50 μL生理盐水、50 μL 指示菌液和100 μL显色液体培养基为空白和生长对照，同时以100 IU/mLNisin和1 μg/mL环丙沙星为阳性对照，37℃培养12 h，酶标仪测定426 nm OD值。重复三次。按以下公式计算抑菌率。
抑菌率(%) = 100 × (生长对照OD426 ? 试验OD426)/生长对照OD426。
3. 结果与分析
3.1. 肠道益生菌分离筛选结果
共培养出双歧杆菌属4株，乳杆菌属6株，肠球菌属22株。具体见表1。
3.2. 益生菌细菌素的抑菌活性
32株细菌分别发酵，将发酵液调节pH及过氧化氢酶处理后测定抑菌活性，结果其中11株菌的发酵液具有抑菌活性。11株菌的发酵液经胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K处理后测定抑菌活性，发现抑菌活性均完全消失。
益生菌细菌素的抑菌活性研究Table 1. The result of the separation of intestinal probiotics
表1. 肠道分离菌筛选结果
属名种名数量(株)
双歧杆菌属
短双歧杆菌 1 假小链双歧杆菌 2 青春双歧杆菌 1
乳杆菌属鼠李糖乳杆菌 2 植物乳杆菌 2 嗜酸乳杆菌 1 卷曲乳杆菌 1
肠球菌属
屎肠球菌13 粪肠球菌 6 鸟肠球菌 2 铅黄肠球菌 1
合计32
提取11株菌的细菌素并分别测定抑菌活性，结果见表2。所有菌株产生的细菌素对金黄色葡萄球菌均有抑制作用，其中B3为高效菌株；除L1株外，其余菌株产生的细菌素对大肠埃希菌均有抑制作用，其中B3、B4、L5为高效菌株；B3、B4、L5、E12、E15、E18、E19共7株菌产生的细菌素对白色念珠菌有抑制作用，但无高效菌株。
3.3. 高效菌株细菌素对致病菌的抑制作用
高效菌株B3、L5、E15的细菌素对金黄色葡萄球菌，肺炎链球菌，大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，普通变形杆菌，伤寒沙门菌，福氏志贺菌，铜绿假单胞菌，鲍曼不动杆菌，白色念珠菌均有抑制作用；其中B3、L5对伤寒沙门菌和肺炎链球菌具有较强的抑菌作用，优于100 IU/mL Nisin所产生的抑菌效果(P < 0.05)；E15细菌素对肺炎链球菌和白色念珠菌有较强的抑制作用，对肺炎链球菌的抑菌效果高达94.46%并优于100 IU/mL Nisin (P < 0.05) (见表3)。
4. 讨论
随着现代医学的发展，制药工业在迅速有效地开发出新型有效抗生素上已受到了制约，长期滥用抗生素会危害人类健康，并导致耐药性病原菌的产生，限制抗生素的使用或者选择其他可以克服这个难题的替代方式是目前研究的重点[3]。细菌素是一类蛋白类物质，可以被蛋白酶所降解，因此具有较高的安全性，且病原菌对细菌素不产生耐药性。益生菌细菌素，尤其是一些对食品中致病菌有抑制作用的细菌素，如Nisin。新的研究证实，Nisin作用的靶位点与万古霉素相同，而且以Nisin为主要形式的羊毛硫细菌素可治疗老鼠葡萄球菌引起的传染性疾病和人类的粉刺、痤疮，有效地抑制引起口腔疾病的乳酸菌，可用来治疗病原菌为幽门螺杆菌的胃溃疡[10]。但目前为止一直没有进一步应用于临床的研究报道。
本研究共分离培养出32株肠道益生菌，包括双歧杆菌属4株，乳杆菌属6株，肠球菌属22株；其中青春双歧杆菌B3、假小链双歧杆菌B4、植物乳杆菌L5、粪肠球菌E12、屎肠球菌E15、屎肠球菌E18所产细菌素对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌均有较强的抑制作用。抑菌试验是结果表明B3、L5、E15所产细菌素不仅对革兰阳性菌如金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等有抑菌作用，而且对革兰阴性菌如大肠埃希菌、伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌等也有较强的抑菌作用，与Carraturo A.等[11]进行体外试
益生菌细菌素的抑菌活性研究
Table 2. Bacteriostasis rate of the 11 probiotics
表2. 11株益生菌细菌素的抑菌率
肠道益生菌Intestinal probiotics
抑菌率Bacteriostatic rate (%)
金黄色葡萄球菌
S. aureus
大肠埃希菌
E. coli
白色念珠菌
C. albicans
B3 (青春双歧杆菌) 49.23 77.82 15.97 B4 (假小链双歧杆菌) 30.88 68.75 30.45 L1 (鼠李糖乳杆菌) 30.21 — — L5 (植物乳杆菌) 36.96 68.24 30.36 E1 (屎肠球菌) 45.88 42.69 — E10 (屎肠球菌) 7.85 46.22 — E12 (粪肠球菌) 16.57 59.39 10.19 E13 (屎肠球菌) 10.68 47.87 — E15 (屎肠球菌) 31.23 57.90 5.17 E16 (粪肠球菌) 25.56 42.12 — E18 (屎肠球菌) 23.89 57.75 20.23 注：“—”表示抑菌率< 0.1%；N = 5。
Table 3. Bacteriostasis rate of B3, L5 and E15 Bacteriocin on pathogenic bacteria
表3. B3、L5、E15细菌素对致病菌的抑菌率
指示菌Indicator
抑菌率Bacteriostatic rate (%)
100 IU/mL Nisin B3细菌素
B3 Bacteriocin
L5细菌素
L5 Bacteriocin
E15细菌素
E15 Bacteriocin
金黄色葡萄球菌94.16% 12.43% 24.74% 5.39%
肺炎链球菌17.24% 92.13% 95.66% 94.46%
大肠埃希菌50.25% 41.50% 35.12% 1.42%
伤寒沙门菌32.68% 74.37% 70.14% 2.94%
福氏志贺菌44.64% 44.09% 14.00% 47.93%
肺炎克雷伯菌9.97% 34.34% 24.50% 1.65%
普通变形杆菌20.50% 45.55% 45.49% 11.95%
铜绿假单胞菌16.31% 13.78% 26.53% 13.62%
鲍曼不动杆菌27.27% 16.81% 31.91% 48.65%
白色念珠菌32.16% 31.25% 35.38% 89.21%
注：N = 5。
验结果：某些细菌素能够对具有多重抗性的金黄色葡萄球菌、肠道杆菌以及链状球菌具有较好的杀死作用相一致。并且B3、L5对伤寒沙门菌和肺炎链球菌的抑菌作用，优于100 IU/mL Nisin所产生的抑菌效果(P < 0.05)；E15细菌素对对肺炎链球菌的抑菌效果高达94.46%且优于100 IU/mL Nisin，有望应用于临床。张红星等[12]对植物乳杆菌LH-09细菌素抑菌谱相关性研究中，也有类似的结果，此外Martinez等[13]人对双歧杆菌细菌素相关研究也表明细菌素对革兰阴性菌如大肠埃希菌等均有一定的抑制作用，提示B3、L5、E15细菌素应用于医疗等领域有着广泛的开发潜力。
本研究提纯的细菌素对细菌抑制作用研究较多但并未对病毒的抑制作用有所探究，考虑到肠道病毒
益生菌细菌素的抑菌活性研究
的多样性、传播的广泛性及在肠道的静默复制[14]，较难在短时间内探究出细菌素对病毒的抑制作用，将在后续试验进一步研究。
基金项目
2012年浙江省教育厅项目(Y201223986)；温州医科大学本专科学生科研项目(wyx201401031)。
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益生菌对人体健康的影响
益生菌对人体健康的影响 益生菌可以被称作是一个“古老而新兴”的概念。人类早在上百年前就开始食用酸乳、奶酪等含益生菌的食品,但益生菌及其产生的益生元成分的功能却一直未引起人们的注意。在近30年来，人们才逐渐认识到益生菌、益生元及含有这类物质的产品对人们的保健功能，随之而来的是对益生菌的广泛研究，和其在各种产品中的广泛使用。益生菌作为促进人类健康的物质,其功能是多方面的。它不仅直接体现在对产道微生态的改善，也能有效降低血脂、血糖，预防“三高”，还可综合调节人体免疫功能，间接地起到预防癌症的作用。以下我们就来看一下益生菌在不同方面的作用。 1、益生菌维护肠道健康的作用 益生菌对人体健康最直接，也是最突出的作用表现在其对人体肠道微生态的改善。益生菌主要通过以下几个方面的作用维护者人体肠道的健康。 .益生菌的定植拮抗作用 益生菌能与致病菌竞争消化道上皮的附着位点。抑制致病菌在肠道内的定植或增殖。例如双歧杆菌通过脂壁磷酸粘附于肠上皮细胞表面，竞争性抑制肠道内源性及外源性潜在致病菌对肠上皮细胞的粘附、定植，从而起到定植拮抗作用。 益生菌还能与有害菌竞争营养物质，在营养物质有限的情况下，通过竞争性地消耗潜在致病菌的营养素，限制有害菌的生长。 .益生菌产生抗菌物质 乳酸菌在体内发酵乳糖，产生大量的乳酸乙酸，可降低肠道局部pH 值，改善微生态环境，抑菌或杀死肠道内的大肠菌、沙门菌、链球菌等；同时，低pH 值有利于肠道蠕动，维持正常生理功能，阻止致病菌的定植。乳酸菌产生的组织酸对革兰氏阴性菌作用更明显；乳酸菌本身还有抑制病原体复制的作用； 还有一些益生菌可产生具有广谱抗菌作用的物质，如：细菌素、过氧化氢、亲脂分子、二乙酰、二氧化碳和乙醛等，这些物质对肠道内的大肠杆菌、沙门菌和链球菌等均有抑菌或杀菌作用。 净化肠道微环境 枯草芽孢杆菌可在大肠中产生氨基氧化酶、氨基转移酶及分解硫化物的酶，可将臭源吲哚化合物完全氧化，将硫化物氧化成无臭无毒物质，从而降低血液及粪便中有害气体的浓度。 另外，需氧型益生菌进入消化道后，生长繁殖消耗肠道内大量氧气，使局部环境的氧分子质量浓度降低，氧化还原电势下降，使需氧型致病菌得不到足够氧气而大幅度下降，起到防止人患病的作用。 2、益生菌对“三高”的预防 益生菌和由益生菌产生的益生元类物质能够通过调整肠胃功能，调节人体对食物中糖分、脂质等物质的吸收，进而调节人体血糖、血脂，预防高血压、高血糖和高血脂等疾病的发生。 .益生菌对高血压的预防 近来很多研究表明: 益生菌食品确实能起到一定程度上控制血压升高的效果。从啤酒酵母和瑞士乳杆菌发酵乳中分离出来的肽类物质具有抑制血管紧张素转移酶I（ACE）活性的作用。这种物质可以干扰肾素的作用，一定程度上抑制ACE的活性，以起到降血压的作用。 .益生菌对高血脂的预防 当前诸多研究表明，益生菌可以有效降低体内胆固醇的含量。 肠胃中胆固醇的溶解度取决于胆盐的溶解度，胆盐经水解后溶解度下降，从而致使胆固醇也一同沉淀下来，增加了胆酸和胆固醇的排出量，减少小肠对胆酸的重吸收进而减少血清
益生菌与人体健康研究
龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html, 益生菌与人体健康研究 作者：孙小华付英 来源：《中国卫生产业》2015年第21期 [摘要] 益生菌是活的微生物，对人体健康有着重要的作用。它对人体的健康作用逐步被人们验证，功效包括：调节肠道菌群、延缓衰老、减低胆固醇、抑制有害细菌、抗过敏、提高机体免疫力等，此外益生菌安全问题也应引起关注。该研究主要综述了益生菌对人体的健康作用。 [关键词] 益生菌；人体健康；功效 [中图分类号] R15 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2015）07（c）-0162-03 1 益生菌概述 1.1 益生菌定义 益生菌包括各种友好的微生物。从原始社会起，它们就在帮助人类维持生命。但是，直到20世纪初人们才真正认识到它们保护健康的作用。 1908年的诺贝尔医学奖得主俄国科学家EleiMetchn- kioff发现住在里海山脉的保加利亚人寿命都非常长。在研究这些保加利亚人的文化之后，发现了这些人都喝乳酸酒的发酵奶制品，并完成了著作《永不衰老的长寿理论》，为人类认识益生菌的健康功效起到了巨大推动作 用。在他的著作中：他认为摄入大量的益生菌能够减弱有害细菌的危害，甚至可以消除有害细菌，促进健康。WHO给益生菌下的定义是：益生菌是活的微生物，当摄入足够数量时，对宿主起有益健康的作用。 1.2 益生菌种类 目前研究的益生菌包括：乳酸菌、双歧杆菌、酵母菌等。其中研究最多的益生菌是双歧杆菌和乳酸菌。常见双歧杆菌有长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、短双歧杆菌等。乳酸菌包括干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、卷曲乳杆菌、格氏乳杆菌等[1]。与此同时，益生菌对人体健康的功效、作用机理也成为了研究热点。 2 益生菌与人体健康 2.1 改善肠道功能 肠道微生物和肠道屏障可以保证肠道健康。肠上皮由肠上皮细胞吸收，可作为保护人体的屏障，防止有害物质和微生物的侵袭。肠道出现紊乱轻者会引起腹泻、肚疼、甚至危及生命。
益生菌的筛选及安全性研究进展.
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益生菌分类
益生菌的种类： 地衣芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌细胞形态和排列呈杆状、单生，可调整菌群失调达到治疗目的，可促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌。能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖。 1、生物夺氧 枯草芽孢杆菌为需氧菌，在生长过程中需要大量的氧气，进入动物肠道内，消耗大量的游离氧，降低肠道内氧浓度和氧化还原电势，改善了乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长环境，保持肠道微生态系统的稳衡，提高动物机体抗病能力，减少胃肠道疾病发生几率。 2、拮抗致病微生物，改善体内外生态环境 动物饲喂芽孢杆菌后，能显著降低肠道大肠杆菌、产气荚膜梭菌、沙门氏菌的数量，使机体内的有益菌增加而潜在的致病菌减少，因而排泄物、分泌物中的有益菌数量增多，致病性微生物减少，从而净化体内外环境，减少疾病的发生。 3、增强动物体的免疫功能 地衣芽孢杆菌能促进动物肠道相关淋巴组织处于高度的“免疫准备状态”，同时使免疫器官发育加快，免疫系统成熟快而早，T、B淋巴细胞数量增多，动物体液和细胞免疫水平提高。 4、产生营养物质 地衣芽孢杆菌在动物肠道内生长繁殖，能产生多种营养物质如维生素、氨基酸、有机酸、促生长因子等，参与动物机体新陈代谢。 5、产生多种消化酶 地衣芽孢杆菌能提高动物生产性能是其产生多种消化酶的一个重要体现。研究表明，地衣芽孢杆菌能产生多种消化酶，帮助动物对营养物质的消化吸收。芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶，如果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等，这些酶能够破坏植物饲料细胞的细胞壁，促使细胞的营养物质释放出来,并能消除饲料中的抗营养物质。 枯草芽孢杆菌： 枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；枯草芽孢杆菌能迅速消耗消化道内环境中的游离氧，形成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌的生长；枯草芽孢杆菌能刺激动物免疫器官的生长发育，激活淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力；枯草芽孢杆菌菌体能自身合成消化性酶类，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等，在消化道中与内源酶共同发挥作用，提高饲料消化率；枯草芽孢杆菌能合成多种维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。 产品特点富含多种消化性酶类，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等；富含多
益生菌及其制剂的应用及研究进展
本科生学年论文 题目：益生菌及其制剂的应用及研究进展 院 （系） 农学与生命科学学院 专 业 班 级 生物科学12级 学 生 姓 名 陆金苗 指导教师（职称）王健（副教授） 提 交 时 间 二〇一四年十二月
益生菌及其制剂的应用及研究进展 陆金苗 （安康学院农学与生命科学学院2012090095） 摘要:目前已经对益生菌的作用机理进行了深入和广泛的研究, 获得了许多 使用益生菌的经验。近些年来, 分子生物学特别是基因工程技术的发展将益生菌的理论和应用研究推向了一个新的高度。从益生菌菌株的鉴定、菌株的遗传学修饰、益生菌功能基因组学和安全性等几个方面, 综述了近年来国际上在分子水平上研究益生菌的技术方法、获得的主要研究成果和面临的挑战, 并提出了益生菌 研究的发展方向。 关键词:益生菌；益生菌制剂；益生菌的研发 1.益生菌 1.1什么是益生菌 益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称，如常益生益生菌。人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域。 1.2益生菌与乳酸菌的区别 1）益生菌是从有益宿主健康出发给出的定义，目前研究较热的益生菌有：双歧杆菌、乳杆菌、芽孢杆菌、丁酸梭菌等，其中双歧杆菌、乳杆菌和芽孢杆菌都属于乳酸菌类，因此益生菌包括了部分乳酸菌，而乳酸菌不全是益生菌。益生菌的四种菌种：目前常用的益生菌种类主要有乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌、光合细菌等几大类。 2）乳酸菌一般是指能发酵糖，主要生成乳酸的细菌的总称。乳酸菌是从发酵糖产生乳酸的机理方面考虑给出的概念，对人类生活有益的乳酸菌有：双歧杆菌、乳杆菌、链球菌、明串珠菌等。并不是所有的乳酸菌都有益于人类健康，也有一些乳酸菌对人体是有害的，如有害的利斯特氏菌。在谈论乳酸菌时应该注意
益生菌对人体的作用
益生菌对人体的作用 益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。益生菌是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。 1、益生菌有缓解乳糖不耐症状，促进机体营养吸收的作用：益生菌有助于营养物质在肠道内的消化。它能分解乳糖成为乳酸，减轻乳糖不耐症。双歧杆菌和乳酸杆菌不仅可以产生各种维生素如维生素B1、B 2、B6、B12、烟酸和叶酸等以供机体所需，还能通过抑制某些维生素分解菌来保障维生素的供应。另外，双岐杆菌还可以降低血氨改善肝脏功能。 2、益生菌有整肠作用，调整微生态失调，防治腹泻：益生菌活着进入人体肠道内，通过其生长及各种代谢作用促进肠内细菌群的正常化，抑制肠内腐败物质产生，保持肠道机能的正常。对病毒和细菌性急性肠炎及痢疾，便秘等都有治疗及预防作用。益生菌和很多慢性胃炎，消化道溃疡等消化道疾病有密切的关系。一部分的益生菌能抗胃酸，粘附在胃壁上皮细胞表面，通过其代谢活动抑制幽门螺旋杆菌的生长，预防胃溃疡的发生。 3、益生菌能代谢产物产生生物拮抗，增强人体免疫力：益生菌可产生有机酸、游离脂肪酸、过氧化氢、细菌素抑制其它有害菌的生长；通过“生物夺氧”使需氧型致病菌大幅度下降，益生菌能够定殖于粘膜、皮肤等表面或细胞之间形成生物屏障，这些屏障可以阻止病原微生物的定殖，起着占位、争夺营养、互利共生或拮抗作用。并可以刺激机体的非特异性免疫功能，提高自然杀伤（NK）细胞的活性，增强肠道免疫球蛋白IgA的分泌，改善肠道的屏障功能。 4、益生菌对高血压的效果：乳酸菌产生的某些物质如γ-氨基丁酸（GABA）具有降低血压的功效。还有一部分的益生菌能特异分解乳蛋白（酪蛋白），产生具有抑制引起血压上升的酶（血管紧张素转化酶，ACE）活性的多肽（如VPP和LPP）。常期饮用含有这种活性多肽的酸奶有防止高血压的效果。 5、益生菌有预防阴道感染的作用：不少益生菌有酸化泌尿生殖道的作用。它可以通过降低pH值来抑制有害细菌的生长。还可以通过与有害细菌竞争空间和资源而遏制它们。 6、益生菌有缓解过敏作用：过敏是一种免疫疾病，是人体内免疫功能失调出现不平衡的状况。有过敏体质的人当外来物质或生物体刺激免疫系统产生免疫球蛋白（IgE）数量过多，使其释放出一种叫组织胺的物质从而引发过敏症状。益生菌疗法是目前国内外流行辅助治疗
益生菌开题报告
本科生毕业论文 开题报告 题目：益生菌奶片的研究 学生： 学号： 院（系）： 专业： 指导教师：
毕业设计开题报告 1.实验目的及意义 益生菌定义为“一种通过改善肠道微生物平衡从而对宿主施加有益影响的微生物添加物”。常应用的益生菌是产生乳酸的细菌，如嗜酸乳杆菌和双歧杆菌等，它们是人类肠道重要的生理菌，对机体有多种其它正常生理菌群无法比拟的生理作用。其生理作用包括：调整肠道菌群；提高蛋白质和维生素的代谢；防止便秘；产生抗菌素；缓解乳糖不耐症；治疗肝损伤；降低结肠癌的发病率；抗肿瘤；增强免疫系统；降低胆固醇；治疗泌尿系统感染等。肠道菌群的组成对人体营养、免疫、癌症、衰老等有着密切的关系，促进肠道中有益菌的增殖，抑制有害细菌的生长，对于高血压、高血脂、心脏病、糖尿病和癌症等生活习惯病防治方面的主要意义，已经引起各国的重视。因此，目前益生菌及其制品成为国内外研究热点，在食品、保健品、药品等领域已有多种益生菌制剂问世，并普遍受到广大消费者的欢迎。 而奶片的主要营养成分主要包括蛋白质、脂肪、碳水化合物等，由于其营养丰富、可直接食用、携带方便、保质期长等优点，与鲜奶相比，奶片无需冷藏、无需加热食用，已成为乳制品中的亮点。食用奶片可享受到牛奶的风味和质地，独有的加工工艺，保留了牛奶中多种营养成分。将益生菌加入奶片中，制成益生菌咀嚼奶片．这样在保留了牛奶的营养的同时又达到了上述的益生菌的生理保健目的。此产品成本中等，附加值高，可成为市场上新星的产品，有很好的市场前景。 2.产品研发现状 目前，奶片食品还没有国家标准，生产工艺较为简单，配方也无固定的模式，其硬度、粘度或营养辅料的比例视消费者的爱好或需要而定。各种配方的奶片执行各自企业制定的企业标准，营养成分含量的差别是比较大的。奶片的配方不统一，又随意性。尽管各种品牌奶片的配方不同，营养成分的含量也不尽相同，但是奶片中的蛋白质和脂肪含量应该，也大多是在70%左右，每天用量可折合鲜奶250毫升或奶粉30克。而且有关奶片的相关指标和规定尚未出台，从营养价值和卫生角度衡量，也没有一个统一的规范。在研究开发奶片产品时，必须要做到营养均衡，同时奶片产品应该有自身的特点，必须有良好的风味及口感，食用及携带方便，所以在研究开发奶片产品时，主要是从奶片产品的营养、风味及口感方面进行研究。
益生菌的生理功能及研究进展.
漯河职业技术学院 毕业论文 题目:益生菌的生理功能及研究进展 系别食品工程系 专业生物技术及应用 班级生物技术及应用二班 学生姓名白晓静 学号 2009040302014 指导教师姓名徐启红 指导教师职称教授 河南漯河 2011年11月2日 漯河职业技术学院食品工程系毕业论文目录 摘要 (1 1 益生菌的生物学特征 (1 2 益生菌的生理功能 (1 2.1 促进营养物质的吸收 (1 2.2 提高乳糖利用率 (1
2.3 降低胆固醇含 (2 2.4 调节免疫系统的功能 (2 2.5 其他生理功能 (2 3 益生菌在食品中的应用 (3 3.1 益生菌在酸奶中的应用 (3 3.2 益生菌在啤酒中的应用 (3 3.3 益生菌在酸酪中的应用 (3 4 益生菌的安全性 (3 5 展望 (4 参考文献 (5 致谢 (6 益生菌的生理功能及研究进展 益生菌的生理功能及研究进展 白晓静 摘要:益生菌是添加到食品中的活菌。益生菌包括了乳杆菌类(如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、詹氏乳杆菌、拉曼乳杆菌等;双歧杆菌类(如长双歧杆菌、短双歧杆菌、卵形双歧杆菌、嗜热双歧杆菌等;革兰氏阳性球菌(如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等此外,还有一些酵母菌与酶也可归入益生菌的范畴。益生菌对人类的营养和健康有着非常重要的意义,双歧杆菌在肠道中的数量已成为婴幼儿和成年人健康状况的标志。益生菌在医药食品和饲料工业中也都有广泛的应用。本文介绍了益生菌的生物学特征,生理功能,在食品中的应用及其安全性。
关键词:益生菌生物学特征生理功能安全性 漯河职业技术学院食品工程系毕业论文 1 益生菌的生物学特征 益生菌在肠道存在的机制是定植与粘附。定植是正常肠菌群在宿主的特异性定位定居与繁殖的微生态学现象。是正常菌群对宿主产生生态效应和发挥生理作用的前提条件。而它的粘附特性是指益生菌通过粘附多糖体与肠上皮细胞壁通过生物化学作用产生的特异性粘附形成亚优势菌群而定居下来,并且形成与肠壁密切联系的细菌生物膜。而它粘附在肠壁上这一特性被认为是益生菌发挥作用的重要条件[1]。 粘附的益生菌可在肠道停留更多的时间,这样可以有更好的代谢和免疫调节作,用粘附的益生菌与粘膜表面发生相互作用可以有效地刺激免疫反应,粘附也可以起竞争排斥作用,把病原菌从肠道上皮排除出去,体外实验证明粘附的嗜酸乳酸杆菌可以有效的抑制病原菌在肠道的粘附和生长体外实验表明不同的益生菌菌株有不同的粘附能力。另外从不同年龄组分离出的益生菌其粘附能力也是不同的,如从老年人肠道中分离出的双歧杆菌其粘附能力明显差于从儿童的肠道中分离出来的双歧杆菌。关于益生菌的粘附特性人们做了大量的研究工作,但是益生菌的粘附作用仍然受到很大争论。如有些人认为强的粘附能力可能会增加在宿主中感染的机会;另外一些认为益生菌在体内和体外有很差的粘附能力,但是它们在宿主细胞中有很好的益生作用。 2 益生菌的生理功能 2.1 促进营养物质的吸收 人的大肠内定居着种类繁多、代谢途径迥异的各种微生物,其主要功能是从消化道上部未消化的碳水化合物中捞取能量、他们主要是通过发酵来吸收和利用糖类在小肠中的主要产物短链脂肪酸。益生菌可参与多种维生素代谢,产生维生素B、
益生菌的研究与应用
益生菌的研究与应用自1929年英国的Fleming发现了抗生素以来，给人类的生产、生活带来了巨大变化。但从本世纪40年代，随着抗生素作为饲料添加剂的广泛应用，其种种弊端也逐渐被人 们所认识。比如导致动物胃肠道正常菌群失调，产生耐药性和药物残留等副作用，给动 物和作为动物产品消费者的人类的健康都带来了危害。有些国家因此已从立法上限制了 抗生素的使用。于是，国内外许多学者日趋关注和寻找能够克服上述弊端的抗生素替代物。益生素的研究开发便随之引起各国的重视，其应用于动物生产的良好效果已被大量 的试验和生产实践所证实。 一、益生素的发展历史及应用现状 1、发展历史 益生素(Probiotics)是可以直接饲喂动物的有益活体微生物制剂，也叫活菌制剂(Biogen)或生菌剂。 益生素真正被重视起来并应用于动物饲养业中是从六、七十年代人类发现了抗生素的 种种弊端之后才开始的。Redmend(1968)就报道了乳酸杆菌经口饲喂仔猪，减少下 痢、改善发育的效果。日本真田等曾提出给仔猪饲喂酪酸菌减轻了仔猪下痢，继之星野 等报道了东洋菌的芽孢制剂经口饲喂或添加在饲料中，预防治疗仔猪及犊牛的下痢以及 提高仔猪、犊牛、肉鸡的增重率，改善饲料效率等效果。 2、应用现状 据报道，美国准许直接饲喂的微生物已有40多种，年使用量约8000吨以上，在欧洲 仅法国1991年市场上销售的益生素品种就不低于50个；日本1989年估计使用量在1000 吨以上；我国对于益生素的开发利用虽然起步较晚，但起点较高，发展较快。目前年使 用量也在1000吨左右。 各国选用的益生素菌种不同。我国正式批准生产使用的菌株，主要有蜡样芽孢杆菌、
益生菌种类及制品
益生菌种类与制品 益生菌是指改善宿主微生态平衡而发挥有益作用，达到提高宿主健康水平和健康状态的活菌制剂及其代谢产物。 益生菌存在于地球上的各各角落里面，动物体内有益的细菌或真菌主要有：乳酸菌、双歧杆菌、放线菌、酵母菌等。目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌。益生菌系一种对动物有益的细菌，它们可直接作为食品添加剂服用，以维持肠道菌丛的平衡。 在国外已开发出数以百计的益生菌保健产品，其中包括：含益生菌的酸牛奶、酸乳酪、酸豆奶以及含多种益生菌的口服液、片剂、胶囊、粉末剂等等。 迄今为止，科学家已发现的益生菌大体上可分成三大类，其中包括： ①乳杆菌类（如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、詹氏乳杆菌、拉曼乳杆菌等）； ②双歧杆菌类（如长双歧杆菌、短双歧杆菌、卵形双歧杆菌、嗜热双歧 杆菌等）； ③革兰氏阳性球菌（如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等）。此外，还 有一些酵母菌与酶亦可归入益生菌的范畴。 益生菌对人体到底有哪些保健和抗病作用？ 国外一些学者认为，其作用可以概括为：①防治腹泻；②缓解不耐乳糖症状；③预防阴道感染；④增强人体免疫力；⑤缓解过敏作用；⑥降低血清胆固醇；⑦预防癌症和抑制肿瘤生长。 预防或改善腹泻：饮食习惯不良或服用抗生素均会打破肠道菌群平衡，从而导致腹泻。补充益生菌有助于平衡肠道菌群及恢复正常的肠道pH值，
缓解腹泻症状。 缓解不耐乳糖症状：乳杆菌可帮助人体分解乳糖，缓解腹泻、胀气等不适症状，可与牛奶同食。 ③预防阴道感染：酸牛奶中的嗜酸乳杆菌可抑制阴道内白色念珠菌的繁殖。欧洲所做的双盲对照试验证实了这一点。女病人每人每日口服150毫升含大量益生菌的酸牛奶，结果阴道感染发生率大大低于安慰剂组妇女。 ④增强人体免疫力：在肠道内存在着非常发达的免疫系统。益生菌可以通过刺激肠道内的免疫机能，将过低或过高的免疫活性调节至正常状态。益生菌这种免疫调节的作用也被认为有助于抗癌与抑制过敏性疾病。 ⑤促进肠道消化系统健康：益生菌可以抑制有害菌在肠内的繁殖，减少毒素，促进肠道蠕动，从而提高肠道机能，改善排便状况。 ⑥降低血清胆固醇：欧洲的高加索山区、地中海沿岸是著名的长寿之乡，当地人常饮自制的酸牛奶，极少患糖尿病、心血管病及肥胖症，大量科学研究证实这与酸牛奶中富含益生菌有关。这些益生菌可降低血清胆固醇水平。 此外，长期补充益生菌的还有助于防止骨质丢失，预防骨质疏松症。病人经常服用含益生菌的保健食品，可预防与治疗腹泻症。 正常人体肠道内栖息着500多种、数十万亿个不同的细菌，它们在绝大多数情况下是互相制约、共存共荣的。一旦肠道菌丛平衡被打破，就会引起腹泻。其次，滥用抗生素也会引起腹泻。欧洲一些医疗中心试用以乳杆菌、双歧杆菌与菊糖为主要成分的口服液治疗旅行者腹泻，也取得良好效果。益生菌的另一作用是，可预防阴道感染症。欧洲所做的双盲对照试验（46名有阴道霉菌感染史的妇女参加了试验）证实了这一点。女病人每人每日口服150毫升含大量益生菌的酸牛奶，结果阴道感染发生率大大低于安慰剂组妇女。这是因为酸牛奶中的嗜酸乳杆菌可抑制阴道内白色念珠菌的繁殖。科学家认
多种益生菌功效
多种益生菌功效 益生菌是目前比较常见的一种活性物质，不仅仅可以帮助我们的身体生殖器肠道功能进行改善，还可以对调节菌群有帮助，益生菌可以给身体带来充分的功效，但是要注意的是益生菌还能改善肠道，预防腹泻的问题，所以多种益生菌的功效都是不一样的，需要仔细的去了解一下。 益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。 目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域。 益生菌对人的身体有哪些作用？ 乳杆菌类（如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、詹氏乳杆菌、拉曼乳杆菌等）； 双歧杆菌类（如长双歧杆菌、短双歧杆菌、卵形双歧杆菌、嗜热双歧杆菌等） 革兰氏阳性球菌（如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等）
益生菌作用 预防或改善腹泻：饮食习惯不良或服用抗生素均会打破肠道菌群平衡，从而导致腹泻。补充益生菌有助于平衡肠道菌群及恢复正常的肠道pH值，缓解腹泻症状。 缓解不耐乳糖症状：乳杆菌可帮助人体分解乳糖，缓解腹泻、胀气等不适症状，可与牛奶同食。 增强人体免疫力：在肠道内存在着非常发达的免疫系统。益生菌可以通过刺激肠道内的免疫机能，将过低或过高的免疫活性调节至正常状态。益生菌这种免疫调节的作用也被认为有助于抗癌与抑制过敏性疾病。 促进肠道消化系统健康：益生菌可以抑制有害菌在肠内的繁殖，减少毒素，促进肠道蠕动，从而提高肠道机能，改善排便状况。 病人经常服用含益生菌的保健食品，可预防与治疗腹泻症。正常人体肠道内栖息着500多种、数十万亿个不同的细菌，它们在绝大多数情况下是互相制约、共存共荣的。一旦肠道菌丛平衡被打破，就会引起腹泻。
益生菌四大功能
益生菌四大功能 益生菌（Probiotics）是一类对人体有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善人体微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。益生菌分类 ①乳杆菌类（如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、詹氏乳杆菌、拉曼乳杆菌等）； ②双歧杆菌类（如长双歧杆菌、短双歧杆菌、卵形双歧杆菌、嗜热双歧杆菌等）； ③革兰氏阳性球菌（如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等）。 此外，还有一些酵母菌与酶亦可归入益生菌的范畴。当人体住满足够的益生菌时，人就会处于健康的状态，但是一旦体内菌群失去平衡，比如菌种间比例发生大幅变化或者超出正常数值时，那么腹泻、过敏、胃口不佳、疲倦、免疫力低等一系列病症就会随之而来，人体的健康就会亮红灯，而这时适当添加益生菌，协助体内菌群平衡，才能让人重现健康状态。2011年10月24日，国家卫生部针对国内婴幼儿益生菌市场，公布了《关于公布可用于婴幼儿食品的菌种名单的公告》（卫生部公告2011年第25号） 用于婴幼儿食品的菌种名单
菌种名称拉丁学名菌株号 嗜酸乳杆菌* （只限于1 岁以上的幼儿食用） Lactobacillus acidophilus NCFM 动物双歧杆菌Bifidobacterium animalis Bb-12 乳双歧杆菌Bifidobacterium lactis HN019 Bi-07 鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus LGG HN001 注释：卫生部公告中规定的这6个益生菌菌株是经过了大量的临床实验，对于婴幼儿的安全性和功效性是有保证的。其中，* 嗜酸乳杆菌NCFM只限于1岁以上的幼儿食用。这6种益生菌菌株中，动物双歧杆菌Bb-12和鼠李糖乳杆菌LGG是由丹麦科汉森公司生产，而另外4株菌-嗜酸乳杆菌NCFM、乳双歧杆菌HN019、乳双歧杆菌Bi-07、鼠李糖乳杆菌HN001全部是由杜邦丹尼斯克公司生产。 许多益生菌株在胃肠道内可产生消化酶，这些酶可帮助人体更好地消化所摄入的食品及吸收食品中的营养成分。益生菌还可竞争性抑制有害微生物吸收营养物质及进入血液循环系统。嗜酸乳杆菌是这方面的代表菌株，可分泌消化乳糖的乳糖酶，从而缓解乳糖不耐症。 1.帮助营养物质的消化吸收 2.产生重要的营养物质 益生菌能产生维生素，包括泛酸、尼克酸、B1,B2,B6及维生素K等，同时能产生短链脂肪酸、抗氧化剂、氨基酸等等，对骨骼成长和心脏健康有重要作用。 3.抵抗细菌病毒的感染，提升免疫通过三大步骤，益生菌可清除有害菌对身体的伤害：
益生菌研究进展
万方数据
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益生菌研究进展 作者：金鹏 作者单位：天津开发区职业技术学院,天津,300457 刊名： 农产品加工·创新版 英文刊名：AEM RODUCTS ROCESSING 年，卷(期)：2009(11) 参考文献(13条) 1.潘宝海.李德发.谯仕彦益生菌、益生素及合生剂的作用机理和相互关系 2000(15) 2.赵红霞.詹勇.许梓荣乳酸菌的研究及其应用[期刊论文]-江西饲料 2003(1) 3.栾金水乳酸菌的研究应用进展[期刊论文]-江苏调味副食品 2004(1) 4.沈通一.秦环龙益生菌对肠微生物生态学影响的研究进展[期刊论文]-肠外与肠内营养 2004(4) 5.M T Hamilton-Miller.S Shah Deficiencies in microbiological quality and labeling of probiotic supplements 2002(1-2) 6.T Mattila-Sandholm.P Myllarinen.R Crittenden Technological challenges for future probiotic foods 2002(2-3) 7.杨隽.潘喜华.郑勇英益生菌制剂的保健功能评价 2000(2) 8.金立明.刘忠军益生素研究进展[期刊论文]-经济动物学报 2004(3) 9.王旭明.陈宗泽.袁毅益生菌作用机理的研究进展[期刊论文]-吉林农业科学 2002(1) 10.敬思群优质乳酸菌的应用[期刊论文]-中国乳业 2002(6) 11.赵玲艳.邓放明.杨抚林乳酸菌的生理功能及其在发酵果蔬中的应用[期刊论文]-中国食品添加剂 2004(5) 12.周长玉.王江滨益生菌治疗炎症性肠病的研究进展 2004(3) 13.Femandez MF.Boris S.Barbes C Probiotic proper ties of human lactobacilli srtains to be used in the gastrointestinal tract 2003(3) 本文链接：https://www.wendangku.net/doc/8a7919176.html,/Periodical_ncpjg-cxb200911026.aspx
益生菌使用手册
第一部分：益生菌相关介绍 索引 一、什么是益生菌 二、益生菌的种类 三、益生菌的作用 四、人体中的益生菌 五、如何补充益生菌 六、哪一些需要补充益生菌 七、补充益生菌的注意事项 八、如何正确冲服益生菌 一、什么是益生菌 益生菌（Probiotics）是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内、口腔、食道等处，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域。 二、益生菌的种类 （1）乳杆菌类 （如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、詹氏乳杆菌、拉曼乳杆菌等） （2）双歧杆菌类
（如长双歧杆菌、短双歧杆菌、卵形双歧杆菌、嗜热双歧杆菌等） （3）革兰氏阳性球菌 （如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等）。 三、益生菌的作用 益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。益生菌是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。 1、益生菌有缓解乳糖不耐症状，促进机体营养吸收的作用：益生菌有助于营养物质在肠道内的消化。它能分解乳糖成为乳酸，减轻乳糖不耐症。双歧杆菌和乳酸杆菌不仅可以产生各种维生素如维生素B1、B 2、B6、B12、烟酸和叶酸等以供机体所需，还能通过抑制某些维生素分解菌来保障维生素的供应。另外，双岐杆菌还可以降低血氨改善肝脏功能。 2、益生菌有整肠作用，调整微生态失调，防治腹泻：益生菌活着进入人体肠道内，通过其生长及各种代谢作用促进肠内细菌群的正常化，抑制肠内腐败物质产生，保持肠道机能的正常。对病毒和细菌性急性肠炎及痢疾，便秘等都有治疗及预防作用。益生菌和很多慢性胃炎，消化道溃疡等消化道疾病有密切的关系。一部分的益生菌能抗胃酸，粘附在胃壁上皮细胞表面，通过其代谢活动抑制幽门螺旋杆菌的生长，预防胃溃疡的发生。 3、益生菌能代谢产物产生生物拮抗，增强人体免疫力：肠道决定人体70%的免疫力，益生菌可以修复肠道黏膜、提升机体免疫力。益生菌可产生有机酸、游离脂肪酸、过氧化氢、细菌素抑制其它有害菌的生长；通过“生物夺氧”使需氧型致病菌大幅度下降，益生菌能够定殖于粘膜、皮肤等表面或细胞之间形成生物屏障，这些屏障可以阻止病原微生物的定殖，起着占
益生菌的探索历史
益生菌的探索历史 ?1857年，法国微生物学家巴斯德研究了牛奶的变酸过程。他把鲜牛奶和酸牛奶分别放在显微镜下观察，发现它们都含有同样的一些极小的生物——乳酸菌，而酸牛奶中的乳酸菌的数量远比鲜牛奶中的多。这一发现说明，牛奶变酸与这些乳酸菌的活动密切相关。 ?1878年，李斯特(Lister)首次从酸败的牛奶中分离出乳酸乳球菌。 ?1892年，德国妇产科医生Doderlein在研究阴道时提出产乳酸的微生物对宿主--人有益。 ?1899年，法国巴黎儿童医院的蒂赛(Henry Tissier）,蒂赛率先从健康母乳喂养的婴儿粪便中分离了第一株菌种双歧杆菌（当时称为分叉杆菌），他发现双岐杆菌与婴儿患腹泻的频率及营养都有关系。 ?1900-1901年，Moro，Beijerinck和Cahn各自研究了肠道中的乳酸菌。丹麦人奥拉一严森(OrIa—JerlSerl)首次对乳酸菌进行了分类。 ?1905年，保加利亚科学家斯塔门·戈里戈罗夫第一次发现并从酸奶中分离了“保加利亚乳酸杆菌”，同时向世界宣传保加利亚酸奶。 ?1908年，俄国科学家诺贝尔奖获得者伊力亚.梅契尼科夫（Elie Metchnikoff）正式提出了“酸奶长寿”理论。通过对保加利亚人的饮食习惯进行研究、他发现长寿人群有着经常饮用含有益生菌的发酵牛奶的传统。他在其著作「延年益寿」(Prolongation of Life)中系统的阐述了自己的观点和发现。 ?1915年，Daviel Newman首次利用乳酸菌临床治疗膀胱感染。 ?1917年，德国Alfred Nissle教授从第一次世界大战士兵的粪便中一株大肠杆菌。这名士兵在一次严重的志贺氏菌大爆发中没有发生小肠炎。在抗生素还没有被发现的那个时代，Nissle利用这株菌在治疗肠道感染疾病（由沙门氏菌和志贺氏菌）取得可观成果。 这株大肠杆菌现仍然在使用，它是为数不多的非乳酸菌益生菌。 ?1919年，怀着对巴尔干半岛有益酸奶和巴斯德研究所微生物研究成果的极大兴趣，伊萨克·卡拉索在西班牙巴塞罗那创立了公司(达能前身)。而且他常常召集许多博士医生到工厂讨论酸奶的益处。 ?1920年，Rettger证明梅契尼科夫所说的保加利亚细菌（保加利亚乳杆菌）不能在人体的肠道中存活。发酵食品和梅契尼科夫的学说受到怀疑（在那时）。 ?1922年，Rettger和Cheplin报道了嗜酸乳杆菌酸奶所具有的临床功效，特别是对消化的功能性。 ?1930年，医学博士代田稔博士在日本京都帝国大学（现在的京都大学）医学部的微生物学研究室首次成功地分离出来自人体肠道的乳酸杆菌，并经过强化培养，使它能活着到达肠内。这种菌后来引用代田博士的名字，取名为Lactobacillus casei strain shirota。 这就是后来被称为养乐多菌的益生菌。 ?1935年，乳酸菌饮料[养乐多]问世，益生菌开始走向产业化。 ?1945年，无菌动物模型和悉生动物模型建立。 ?1954年，Vergio引入与抗生素或其它抗菌剂相对的术语“Probiot-ika”，提出抗生素和其它抗菌剂对肠道菌群有害而“Probiotika”对肠道菌群有利。 ?1957年，Gordon等人在《柳叶刀(The Lancet)》提出了有效的乳杆菌疗法标准：乳杆菌应该没有致病性，能够在肠道中生长，当活菌数量达到107-109时，明显具有有益菌群的作用。同时德国柏林自由大学的Haenel教授研究了厌氧菌的培养方法，提出“肠道厌
关于益生菌
『益生菌小贴士』 1、益生菌有缓解乳糖不耐症状，促进机体营养吸收的作用： 益生菌有助于营养物质在肠道内的消化。它能分解乳糖成为乳酸，减轻乳糖不耐症。双歧杆菌和乳酸杆菌不仅可以产生各种维生素如维生素B1、B2、B6、B12、烟酸和叶酸等以供机体所需，还能通过抑制某些维生素分解菌来保障维生素的供应。另外，双岐杆菌还可以降低血氨改善肝脏功能。 2、益生菌有整肠作用，调整微生态失调，防治腹泻： 益生菌活着进入人体肠道内，通过其生长及各种代谢作用促进肠内细菌群的正常化，抑制肠内腐败物质产生，保持肠道机能的正常。对病毒和细菌性急性肠炎及痢疾，便秘等都有治疗及预防作用。益生菌和很多慢性胃炎，消化道溃疡等消化道疾病有密切的关系。一部分的益生菌能抗胃酸，粘附在胃壁上皮细胞表面，通过其代谢活动抑制幽门螺旋杆菌的生长，预防胃溃疡的发生。 3、益生菌能增强人体免疫力： 益生菌可产生有机酸、游离脂肪酸、过氧化氢、细菌素抑制其它有害菌的生长；通过“生物夺氧”使需氧型致病菌大幅度下降，益生菌能够定殖于粘膜、皮肤等表面或细胞之间形成生物屏障，这些屏障可以阻止病原微生物的定殖，起着占位、争夺营养、互利共生或拮抗作用。并可以刺激机体的非特异性免疫功能，提高自然杀伤（NK）细胞的活性，增强肠道免疫球蛋白IgA的分泌，改善肠道的屏障功能。
4、益生菌有预防阴道感染的作用： 不少益生菌有酸化泌尿生殖道的作用。它可以通过降低pH值来抑制有害细菌的生长。还可以通过与有害细菌竞争空间和资源而遏制它们。 5、益生菌有缓解过敏作用： 过敏是一种免疫疾病，是人体内免疫功能失调出现不平衡的状况。有过敏体质的人当外来物质或生物体刺激免疫系统产生免疫球蛋白（IgE）数量过多，使其释放出一种叫组织胺的物质从而引发过敏症状。益生菌疗法是目前国内外流行辅助治疗过敏的有效方法之一。能利用益生菌调节体内免疫球蛋白（IgE）抗体，达到缓解过敏的免疫疗法。 6、益生菌能降低血清胆固醇： 可能与其调节和利用内源性代谢产物并且加速短链脂肪酸代谢有关。双歧杆菌、乳杆菌的微生态制剂，服后可使胆固醇转化为人体不吸收的粪甾醇类物质。从而降低胆固醇水平。 7、益生菌能预防癌症和抑制肿瘤生长等： 乳酸杆菌能提高巨噬细胞的活性，并能防止肿瘤的生长。益生菌可抑制肠道内某些酶的活性，如β-葡糖乙酸酶、β-葡糖醛酸酶、尿素、酶、硝基还原酶、偶氮还原酶等。这些酶可能参与肠道内致癌物的形成。胆盐经肠道碰到有害菌可能发生解离，就会产生致癌物质，容易引起肠癌。但益生菌可以抑制有害菌，即使有胆盐的存在，致癌率也大大降低。
功能性食品论文-益生菌调节肠道菌群的研究现状
天津科技大学 《功能性食品学》研究生课程论文益生菌调节肠道菌群的研究现状 学生姓名：······ 学号：······ 专业：营养与食品卫生学 学院：食品学院
摘要 常见益生菌主要指两大类乳酸菌群：一类为双歧杆菌，常见的有婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌等；另一类为乳杆菌，如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌和罗伊氏乳杆菌等。应用于人体的益生菌有双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、丁酸梭菌和酵母菌等。从安全性角度考虑，目前工业用益生菌主要来源于健康人体、动物和传统食物（发酵乳制品、泡菜、纳豆等发酵食品）。国内外学者对益生菌进行了很多研究和介绍，但多数只局限于它的使用效果上，对其作用机理缺少系统而深入的总结。本文主要以乳酸菌、双歧杆菌和芽孢杆菌为对象，综述了其在调节肠道菌群和促进机体免疫的作用机理及相关研究进展。 关键词：肠道菌群；益生菌；研究现状 1.肠道菌群概况 1.1胃肠道正常菌群 人的胃肠道栖息着大约30个属500多种细菌，主要由厌氧菌、兼性厌氧菌和需氧菌组成。其中专性厌氧菌占99％以上[ 1 ]，而仅类杆菌及双歧杆菌就占细菌总数的90％以上。胃、十二指肠、空肠细菌的种类及数量极少，主要由于胃酸、胆汁作用及小肠液流量大，蠕动节奏快，细菌在繁殖前即被冲洗到远端回肠及结肠，细菌浓度<103 个/mL，主要为革兰氏阳性需氧菌，如链球菌、葡萄球菌和乳酸杆菌。而回肠末端由于肠液流量少，蠕动减慢，细菌数逐渐增加到105 ~108 个/mL，主要含乳酸杆菌、大肠杆菌、类杆菌和梭状芽孢杆菌等[ 2 ]。至结肠,细菌数明显增加，浓度为109~1012 个/mL，主要为厌氧菌，双歧杆菌、类杆菌和乳酸杆菌，而有潜在致病性的梭状芽孢杆菌和葡萄球菌仅有少量。肠内菌群保持共生或拮抗关系，维持微生态平衡，与宿主健康及疾病有密切关系。 1.2 菌群失调 在某些因素的影响下，肠道微生态系统被破坏，肠道正常菌群的种类、数量和比例发生异常变化，偏离正常的生理组合，转变为病理性组合状态，这称为菌群失调。临床上以腹泻为最明显症状，其它如肠道菌群中潜在致病菌引起的内源性感染和一些过敏性疾病。 “益生菌”这个词起源于希腊，当时的意思为“prolife”。Lilly等(1965)把它定义为微生物体所产生的能够促进生长的物质。Parker(1974)认为“益生菌”是能够影响肠道微生物并且对动物产生有益作用的微生物[ 3 ]。Fuller(1989)把