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测甲胎蛋白变异体方法的建立及应用[1]

测甲胎蛋白变异体方法的建立及应用[1]
测甲胎蛋白变异体方法的建立及应用[1]

万方数据

。基本医疗

样孔中,在O.05mmol,pH8.6巴比妥纳一盐酸缓冲液中进行一相电泳2h(电压100V。电流30mA)。将凝胶切割转移至第二块玻璃板上(靠近玻璃板的边缘),在含1%AFP抗血清的琼脂糖凝胶中立即进行第二相电泳3h。80℃干胶后包X线片放射自显影。测量沉淀峰高,计算出各峰的百分比。I足A结合峰/LCA非结合峰>10%时为阳性。

1.3.3统计

采用软件SPSS12.o进行统计学分析。2结果

2.1亲和吸附胶体金方法检测AFP变异体的灵敏度、稳定性和重复性

本研究所采用的两种金标试剂条,最低分别可检测出2ng/ml和20ng/ml的标准AFP。敏感性为20ng/ml的试剂条含有标准浓度的阳性对照条,显色深度强于该条带的标本其AFP浓度大于

400

ng/ml(图1)。

样品中,前一种方法的AFP—L3阳性检出率为15.7%,后一种方法的阳性检测率为17.6%,阴性符合率为100%,阳性符合率为89.5%,总体符合率为98.1%,经卡方检验推断两种方法的差异无显著性(尸>o.05);在AFP>400ng/ml的199份样品中前一种方法的AFpI鼻阳性检出率为76.9%,后一种方法的阳性检测率为76.4%,阳性符合率为100%,阴性性符合率为97.8,总体符合率为99.5%,经卡方检验两种方法的差异也无显著性(P>O.05)(表1)。

表l

亲和吸附胶体金法与双向放免电泳法

检测AFP—L3结果比较

2.3亲和吸附胶体金方法的临床应用

利用火箭电泳放射免疫法,我们对110例正常体检人员人、550例慢性乙肝、350例肝硬化、320例肝细胞肝癌和20例脐带血进行了检测,结果慢性肝炎、肝硬化、肝癌中分别有ll例(2.0%)、87例(24.9%)和189例(59.o%)患者AFP>20ng/ml。正常人中未见AFP阳性人员。20份脐带血均为阳性。应用亲和吸附胶体金方法对上述AFP

图1金标试剂检测AFP结果

增高的血清进行了变异体的检测,结果脐带血样本在AFP<1

280

ng/ml的范围内,条带显色程中虽然AFP的浓度均>10

Ooo

ng/ml,但无一例

度与抗原含量成正比。以此两种规格的金标试剂,AFP变异体为阴性。11例AFP升高的慢性肝炎对经微离心柱亲和吸附后的洗脱液进行检测,前者患者也为阴性。189例AFP升高的肝癌患者中,最低町测及血清中含20ng/ml的AFP变异体,后153例(81.o%)为阳性,其中AFP<400ng/ml的者最低可检测100ng/m1的AFP变异体。所有试患者中变异体检出率为34.2%(13/38),>400ng/剂于4C存放半年后检测同一份样品(行=20)结果ml患者中变异体检出率为92.7%(140/151)。经未见改变。用同一批不同试纸条测定同一样品(行卡方检验,肝癌的阳性率显著高于慢性肝病(P>=10),以及用3个不同批号试纸条和测定同一样O.05)。在87例AFP增高的肝硬化患者中,有18品(行一lo)时,其质控线、测试线的显色时间、颜色例AFP变异体为阳性,在1~24个月的随访中,共深浅和最终结果判断基本相同。

有15人被确诊为肝癌(表2)。

2.2亲和吸附胶体金方法与交叉亲和放射免3讨论

疫电泳分析法比较

AFP变异体是较为公认的肝癌标志物,已被以交叉亲和放射免疫电泳分析法和亲和吸附列为我国肝癌诊断的实验室指标之一。但AFP变胶体金方法对307例AFP阳性标本进行了检测,异体检测的经典方法为凝集素双向电泳,由于技术结果AFP位于20~400ng/ml区间的108例血清

繁琐,又涉及同位素标记,因此始终停留在实验室

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上海医药2010年第31卷增刊一1

万方数据

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初中体育《坐位体前屈练习方法》教案

湖北省麻城市集美学校初中体育《坐位体前屈练习方法》教案 坐位体前屈的动作方法:慢慢练平坐在地上,伸直双腿,脚板崩直,然后,弯曲腰部,双手放在头的两侧,尽力向前伸慢慢用力,不要晃。 一、立位练习法: 1、双脚开立体前屈练习法 动作方法:双脚开立同肩宽,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体 前屈练习。 2、单脚支撑练习法 动作方法:(有左脚为例)左脚向左前方迈一小步,脚跟着地成支撑,脚尖勾回,膝关节伸直,身体中心落在右腿上,右腿膝关节弯曲;左手压在左脚膝关节上,加振动用右手摸(抓) 左脚脚尖; 3、双脚并拢体前屈练习法 动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体前屈练习。 二、坐位练习法: 1、单脚练习法 动作方法:(有左脚为例)左脚膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用右手抓左脚脚尖或前脚掌; 2、双脚分开练习法 动作方法:双脚分开同肩宽,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚 尖或者双脚前脚掌; 3、双脚并拢练习法 动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚尖或者双脚前脚掌; 三、利用台阶练习法 动作方法:学生站在上一级台阶上,成立位体前屈姿势,加振动,用手指指尖或手掌去触 摸下一级台阶的台面。 根据学生的实际情况可以有针对性的进行训练,手段如下: ⑴坐压腿:双腿分开坐在地面上,一条腿屈膝,脚跟接触伸展腿的内侧。呼气,上体前倾 贴近伸展腿大腿的上部。伸展腿膝部保持伸直,动作幅度尽量大。 (2)压腿:在高台前站立,一条腿伸直放在台上,另一条腿支撑地面。呼气,双腿膝关节伸 直,髋关节正对台子。上体前倾,贴近台上大腿上部,双手扶踝关节前部。伸展腿膝部和背部保持伸直。动作幅度尽量大。此文转自斐?斐课件?园https://www.wendangku.net/doc/887940582.html, (3)站立拉伸:背贴墙站立,呼气,直膝抬起一条腿。同伴用双手抓住踝关节上部,帮助腿 上举。同伴帮助上举腿时练习者呼气,动作幅度尽量大。 2?拉伸大腿内侧 (1)直膝分腿坐压腿:双腿尽量左右分开,坐在地面上,双手体前扶地。呼气,转体,上体前倾贴在一条腿上,双手扶在身体前倾一侧腿的踝关节前部。充分伸展双腿和腰部。 ⑵弓箭步拉伸:弓箭步站立,双脚间距离约60厘米,后脚左转90度,双手叉腰。呼气,前脚继续前移,髋部下压后面腿,换腿重复练习。动作幅度尽量大。 3?腰腹部 (1)跪立背弓:在垫上跪立,脚尖向后。双手扶在背上部,上体后仰,背部肌肉收缩送髋。 呼气,加大动作幅度,逐渐把双手滑向脚跟。动作幅度尽量大。拉伸25秒,3至5组。 (2)体前屈蹲起:双脚并拢俯身下蹲,逐渐下降双手放在脚两侧,手指向前。躯干贴在大腿上部。伸膝至最大限度。动作幅度尽量大,手不能离地。 ⑶跨栏坐:双腿尽量左右分开,坐在地面上,成跨栏坐姿势,呼气,转体,上体前倾贴在一条腿上,

坐位体前屈的动作方法

坐位体前屈的动作方法:慢慢练平坐在地上,伸直双腿,脚板崩直,然后,弯曲腰部,双手放在头的两侧,尽力向前伸慢慢用力,不要晃。 一、立位练习法: 1、双脚开立体前屈练习法 动作方法:双脚开立同肩宽,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体前屈练习。 2、单脚支撑练习法 动作方法:(有左脚为例)左脚向左前方迈一小步,脚跟着地成支撑,脚尖勾回,膝关节伸直,身体中心落在右腿上,右腿膝关节弯曲;左手压在左脚膝关节上,加振动用右手摸(抓)左脚脚尖; 3、双脚并拢体前屈练习法 动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体前屈练习。 二、坐位练习法: 1、单脚练习法 动作方法:(有左脚为例)左脚膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用右手抓左脚脚尖或前脚掌; 2、双脚分开练习法 动作方法:双脚分开同肩宽,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚尖或者双脚前脚掌; 3、双脚并拢练习法 动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚尖或者双脚前脚掌; 三、利用台阶练习法 动作方法:学生站在上一级台阶上,成立位体前屈姿势,加振动,用手指指尖或手掌去触摸下一级台阶的台面。 根据学生的实际情况可以有针对性的进行训练,手段如下: (1)坐压腿:双腿分开坐在地面上,一条腿屈膝,脚跟接触伸展腿的内侧。呼气,上体前倾贴近伸展腿大腿的上部。伸展腿膝部保持伸直,动作幅度尽量大。 (2)压腿:在高台前站立,一条腿伸直放在台上,另一条腿支撑地面。呼气,双腿膝关节伸直,髋关节正对台子。上体前倾,贴近台上大腿上部,双手扶踝关节前部。伸展腿膝部和背部保持伸直。动作幅度尽量大。此文转自斐.斐课件.园https://www.wendangku.net/doc/887940582.html, (3) 站立拉伸:背贴墙站立,呼气,直膝抬起一条腿。同伴用双手抓住踝关节上部,帮助腿上举。同伴帮助上举腿时练习者呼气,动作幅度尽量大。 2.拉伸大腿内侧 (1)直膝分腿坐压腿:双腿尽量左右分开,坐在地面上,双手体前扶地。呼气,转体,上体前倾贴在一条腿上,双手扶在身体前倾一侧腿的踝关节前部。充分伸展双腿和腰部。(2)弓箭步拉伸:弓箭步站立,双脚间距离约60厘米,后脚左转90度,双手叉腰。呼气,前脚继续前移,髋部下压后面腿,换腿重复练习。动作幅度尽量大。 3.腰腹部 (1)跪立背弓:在垫上跪立,脚尖向后。双手扶在背上部,上体后仰,背部肌肉收缩送髋。呼气,加大动作幅度,逐渐把双手滑向脚跟。动作幅度尽量大。拉伸25秒,3至5组。(2)体前屈蹲起:双脚并拢俯身下蹲,逐渐下降双手放在脚两侧,手指向前。躯干贴在大腿上部。伸膝至最大限度。动作幅度尽量大,手不能离地。 (3)跨栏坐:双腿尽量左右分开,坐在地面上,成跨栏坐姿势,呼气,转体,上体前倾贴

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度Word版

实验报告 学院:第二临床医学院专业:临床医学年级:2013级班级:1班姓名:学号:日期:2014,3,8 得分:实验课程:生物化学实验 实验名称:蛋白质的定量测定(五)——考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 【实验目的】 掌握考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量的原理和方法。 【实验原理】 考马斯亮蓝G-250(Coomassie G-250)是一种甲基取代的三苯基甲烷,分子中磺酸基的蓝色染料,在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液,引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移,在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595n处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收,因此可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质—考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定,适合于蛋白质类的定量分析尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。考马斯亮蓝G-250试剂呈色反应颜色稳定、灵敏度高,最低测试蛋白质量在1ug左右。 【试剂与器材】 试剂: 考马斯亮蓝试剂:考马斯亮蓝G-250溶于50ml95%乙醇,加入100ml质量浓度为0.85g/ml 的磷酸,用蒸馏水稀释到1000ml。 标准蛋白质溶液:结晶牛血清清蛋白,预先经微量凯氏定氮法标定该蛋白质的百分含量,然后根据该蛋白的纯度用0.15mol/LNacl配制成1.0mg/ml蛋白溶液。

器材: 试管和试管架 722型分光光度计 吸量管 移液枪 【实验步骤】 一、制作标准曲线 各管混匀后,静置3min,以0号管为空白管调零,在595nm波长下分别测定各管溶液的吸光度值(A595). 以A595值为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标,绘制标准曲线。 二、待测蛋白质浓度测定 测定方法同上,1ml待测蛋白质家5ml考马斯亮蓝试剂,。用上述0号管调零,测出血清的A595值。 【实验结果】

坐位体前屈训练方法与技巧

坐位体前屈训练方法与技巧 坐位体前屈测试方法:这一项目的场地是在室内,使用电动测试仪进行测试。考试时,考生直角坐,两腿伸直,两脚脱鞋平蹬测试纵板坐在平地上,两脚分开约10—15 厘米,上体前屈,两臂伸直向前,用两手中指尖逐渐向前推动游标,直到不能前推为止。测试计的脚蹬纵板内沿平面为0 点,向内为负值,向前为正值。记录以厘米为单位,保留一位小数。 注意事项及技巧: 1、考试前,考生要进行体前屈准备活动练习,让腿部韧带拉开,然后, 身体前屈,两臂向前 推游标时两腿不能弯曲; 受试者应匀速向前推动游标,不得突然发力; 向前推动游标时,中途不可停顿,一旦停止,电动测试仪就记录下成绩。 2、将腹部慢慢靠近大腿(不要拱背)。 3、在屈之前把腰挺直,尽量收腹,拉伸腰,然后双腿挺直的情况下身体前倾同时伸展手臂。 坐位体前屈的训练方法 一、立位练习法: 1、双脚开立体前屈练习法动作方法:双脚开立同肩宽,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体前屈练习。 2、单脚支撑练习法动作方法:(有左脚为例)左脚向左前方迈一小步,脚跟着地成支撑,脚尖勾回,膝关节伸直,身体中心落在右腿上,右腿膝关节弯曲;左手压在左脚膝关节上,加振动用右手摸(抓)左脚脚尖; 3、双脚并拢体前屈练习法动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自 然下垂,加振动做体前屈 练习。二、坐位练习法: 1、单脚练习法动作方法:(有左脚为例)左脚膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振 动用右手抓左脚 脚尖或前脚掌; 2、双脚分开练习法动作方法:双脚分开同肩宽,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚尖或者双脚前脚掌; 3、双脚并拢练习法动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用 双手去抓双脚脚尖 或者双脚前脚掌; 三、利用台阶练习法动作方法:学生站在上一级台阶上,成立位体前屈姿势,加振动,用手指指尖或手掌去触摸下一级台阶的台面。 二、坐位练习法:1、先坐在地上,双腿并拢伸直,两臂向前用力伸。可以有节奏的进行,目的就是静力练习前的拉伸准备和热身活动。也可 2 、同伴或教练员可利用用手反复按压练习者肩背部的办法,助其用力,达到伸拉的目的。这里有个关键,就是练习者的肩部和后背易上弓的位置是重点施力部位。并且,用力方向不宜往正下方,以前下方为最佳。按压时间长度 1 2 两分钟。 以上1、2 也可这样:一人坐垫上,双脚并拢,帮助的人站在练习者身后,有节奏的推压练习者的双肩,做 4 个8 拍,推压由轻到重,练习者配合主动向前身体前屈下压, 4 个

坐位体前屈技巧

慢慢练平坐在地上,伸直双腿, 脚板崩直, 然后,弯曲腰部, 双手放在头的两侧,尽力向前伸 慢慢用力,不要晃。 还有一种,立位体前屈 平时练习的话,这个比较合适,方便。 站直,双腿并拢,崩直, (注意弯下去的时候,膝盖一定不要弯曲) 弯腰,用手去触地, 如果手指可以触得到,那么,试着用手掌去接触地面。 如果你可以手掌接触地面,而保持膝盖不弯曲的话,那你就很厉害了! 当然,还有更高的要求, 手掌触地面,不够难度? 那就试下,站在一级台阶上, 用手掌去触台阶下面的地面。 我上初二现在可以做后一种了! 可能女生会好一点!! 座位体前屈拉的是腿后面的韧带,将一条腿放在栏杆上,做正压腿就可以了,幅度自己掌握,有点疼就行,每条腿练十几分钟。 腰部柔韧性的练习方法 (1)前俯腰:主要用来练习腰部向前运动的能力和柔韧性具体方法:并步站立两腿挺膝夹紧两手十指交叉两臀伸直上举手心向上。然后上体亢腰前俯两手心尽量向下贴紧地面两膝挺直,髋关节屈紧,腰背部充分伸展。两手松引用双手从脚两侧屈肘抱紧脚后跟,使胸部贴紧双腿,充分伸展腰背部。持续一定时间后再放松起立。还可以在双手触地时向左右侧转腰,用两手心触及两脚外侧的地面,增大腰部伸展时左右转动的柔韧性。 动作要点:两腿挺膝直立,挺胸塌腰,充分伸展腰背部,胸部与双腿贴紧。 (2)后甩腰:主要用来练习腰部向后运动的柔韧性。具体方法:并步站立,练习时一腿支撑,另一腿向后上直腿 摆动,同时,两臂伸直,随l体向后屈做向后的摆振动作,使腰背部被充分压紧,腰椎前面充分伸展: 动作要点:后摆腿和上体后屈振摆同时进行;支撑腿,膝伸直.头部和双臂体后屈做协调性后摆助力动作, (3)腰旋转:主要用来练习腰部的左右旋转幅度。具体打法;两脚左右开立略宽于肩,两臂自然垂于休侧以髋关节为 轴体前俯,然后以腰为轴,使上体自前向右、向上再向左,回到的做顺时针或逆时针旋转;同时,双臂随上体做顺 时针或逆时针的环绕动作,以增加腰部旋转的幅度和力度、 动作要点:尽量增大绕环幅度,速度由慢到快,使腰椎关节完全得到活动、伸展。 -------------------------------------------------------------------------- 3.被动形式的训练方法 (1)腿部和髋部的主要练习方法多采用各种形式的搬腿同伴握紧自己的脚,做正搬、侧搬、后搬等助力拉伸动作, 也可采 用各种形式的按和踩的方法。如进行横叉或竖叉练习时,同伴或教练员可利用脚踩或手按练习者肩背部的办法,助其用力,达到伸拉的目的。 (2)腰部的被动练习法主要是利用压桥法。同伴或教练用自己的双脚顶住或踩住练习者的双脚,用双手拉住练习者双臂 或双肩,用力使练习者的双肩后部尽量靠近两脚跟,使练习者的腰椎关节得到完全伸展和收缩,增强腰部的柔韧性。 熟能生巧!坚持就是胜利! 平坐在地上,伸直双腿, 脚板崩直, 然后,弯曲腰部, 双手放在头的两侧,尽力向前伸

考马斯亮蓝法测蛋白质

考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、原理 考马斯亮蓝G-25(Coomassie G-250是一种甲基取代的三苯基甲烷,分子中磺酸基的蓝色染料,在 465nm 处有最大吸收值。考马斯亮蓝 G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质一考马斯亮蓝复合物蓝色溶液,引起该染料的最大吸收入max的位置发生红移,在 595nm 处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在 595nm 处的光吸收远高于考马斯亮蓝在 465nm 处的光吸收,因此,可大大地提高蛋白质的测定灵敏度。蛋白质—考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。利用溶液颜色的差异进行比色测定,适合于蛋白质类的定量分析,尤其适合于稀有蛋白质的微量分析。考马斯亮蓝G-250试剂呈色反应颜色稳定、灵敏度高,最低测试蛋白质量在 1ug 左右。 二、操作步骤 1. 标准曲线测定法 分别取六只试管,其中一只加入 1.0ml蒸馏水做空白,5只分别加入不同体积的浓度为 100ug/ml 牛血清清蛋白标准液,补充水到 1.0ml。然后每只试管加入5.0ml考马斯亮蓝G-250试剂,摇匀放置5min,在紫外 -可见分光光度计 595nm 处测定吸光值。以 A595 吸光值为纵坐标,牛血清清蛋白的 ug 数量为横坐标绘制标准曲线。具体操作见下表。

蛋白质标准曲线测定加样 在标准蛋白质测定时,为了减小误差,每一个浓度的蛋白质做3支平 行管。 3?试剂配置 a. 牛血清清蛋白标准液结晶牛血清清蛋白或酪蛋白,预先经微量凯氏定氮法标定该蛋白质的百分含量或者根据牛血清清蛋白的消光系数 是6.6来计算其百分含量。然后根据该蛋白的纯度配置成浓度为 100 ug/ml的蛋白溶液。 b. 考马斯亮兰G— 250染料试剂:称100mg考马斯亮兰G—250,溶于 50ml 95%的乙醇后,再加入100ml 85%的磷酸,用水稀释至1升

坐位体前屈训练方法与技巧

体育中考---坐位体前屈训练方法与技巧 坐位体前屈测试方法: 这一项目的场地是在室内,使用电动测试仪进行测试。考试时,考生直角坐,两腿伸直,两脚脱鞋平蹬测试纵板坐在平地上,两脚分开约10—15厘米,上体前屈,两臂伸直向前,用两手中指尖逐渐向前推动游标,直到不能前推为止。测试计的脚蹬纵板内沿平面为0点,向内为负值,向前为正值。记录以厘米为单位,保留一位小数。 注意事项及技巧: 1、考试前,考生要进行体前屈准备活动练习,让腿部韧带拉开,然后,身体前屈,两臂向前推游标时两腿不能弯曲;受试者应匀速向前推动游标,不得突然发力;向前推动游标时,中途不可停顿,一旦停止,电动测试仪就记录下成绩。 2、将腹部慢慢靠近大腿(不要拱背)。 3、在屈之前把腰挺直,尽量收腹,拉伸腰,然后双腿挺直的情况下身体前倾同时伸展手臂。 坐位体前屈的训练方法 一、立位练习法: 1、双脚开立体前屈练习法 动作方法:双脚开立同肩宽,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体前屈练习。 2、单脚支撑练习法 动作方法:(有左脚为例)左脚向左前方迈一小步,脚跟着地成支撑,脚尖勾回,膝关节伸直,身体中心落在右腿上,右腿膝关节弯曲;左手压在左脚膝关节上,加振动用右手摸(抓)左脚脚尖; 3、双脚并拢体前屈练习法 动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,腰部、背部放松,双手自然下垂,加振动做体前屈练习。二、坐位练习法: 1、单脚练习法 动作方法:(有左脚为例)左脚膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用右手抓左脚脚尖或前脚掌; 2、双脚分开练习法 动作方法:双脚分开同肩宽,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚尖或者双脚前脚掌; 3、双脚并拢练习法 动作方法:双脚并拢,膝关节伸直,脚尖勾回,身体前扑,加振动用双手去抓双脚脚尖或者双脚前脚掌; 三、利用台阶练习法 动作方法:学生站在上一级台阶上,成立位体前屈姿势,加振动,用手指指尖或手掌去触摸下一级台阶的台面。 二、坐位练习法: 1、先坐在地上,双腿并拢伸直,两臂向前用力伸。可以有节奏的进行,目的就是静力练习前的拉伸准备和热身活动。也可

考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白

考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白质含量 原理: 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465nm,后者在595nm在一定蛋白质浓度范围内(1-1000μg),蛋白质与色素结合物在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝G-250于蛋白质结合反应十分迅速,2min左右即达到平衡。其结合物在室温下1h内保持稳定。此法灵敏度高,易于操作,干扰物质少,是一种比较好的定量法。其缺点是在蛋白质含量很高时线性偏低,且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异。 材料、仪器设备及试剂 1、材料 小麦叶片、马铃薯块茎、或其他植物材料 2、仪器设备 分光光度计、研钵、烧杯、移液管 3、试剂 (1)标准蛋白质溶液:100μg·Ml-1牛血清白蛋白:称取牛血清白蛋白25mg,加水溶解并定容至100ml,吸取上述溶液40ml,用蒸馏水稀释至100ml即可。(2)考马斯亮蓝G-250溶液:称取100mg考马斯亮蓝G-250,溶于50ml90%乙醇中,加入100ml85%(W/V)的磷酸,再用蒸馏水定容到1L,贮于棕色瓶中,常温下可保存一个月。 方法: 1、标准曲线的绘制 取6支具塞试管,按表加入试剂。混合均匀后,向各管中加入5ml考马斯亮蓝 G-250溶液,摇匀,并放置5min左右,在595nm下比色测定吸光度。以蛋白质浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 管号 1 2 3 4 5 6 标准蛋白质(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸馏水量(ml) 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 蛋白质含量(μg) 0 20 40 60 80 100 2、样品测定 (1)样品提取:取鲜样0.5g,加入2ml蒸馏水研磨,磨成匀浆后用6ml蒸馏水冲洗研钵,洗涤液收集在同一离心管中,在4000r/min下离心10min,弃去沉淀,上清液转入容量瓶,以蒸馏水定容至10ml,摇匀后待测。 (2)吸取样品提取液0.1ml,放入具塞试管中(每个样品重复2次),加入5ml 考马斯亮蓝G-250溶液,充分混合,放置2min后在595nm下比色,测定吸光度,并通过标准曲线查得蛋白质含量。 (3)结果计算(单位mg/g)样品中蛋白质含量=(C·VT)/(1000 VS·WF) 式中:C—查的标准曲线值(μg)

蛋白质含量测定法考马斯亮蓝法

蛋白质含量测定法——考马斯亮蓝法 [实验目的] 学习、掌握考马斯亮蓝法(Bradford 法)测定蛋白质含量的方法 [实验原理] (蓝色)变为氨基酸芳香族 碱性 染料考马斯亮蓝磷酸nm G 595250max λ??→?+ - [器材与试剂] 器材 722型可见光分光光度计、漩涡混合器、试管16支 试剂 1.标准蛋白质溶液,用牛血清清蛋白(BSA ),配制成1.00mg/ml 。 2.考马斯亮蓝G-250染料试剂:称100mg 考马斯亮蓝,溶于50ml 95%的乙醇后,再加入120ml 85% 的磷酸,用水稀释至1升。 [实验方法] 标准方法 1.取10支试管,分别编号后按 表1 剂量依次加入标准蛋白(或未知蛋白)、去离子水和考马斯亮蓝染料。每支试管加完后,立即在漩涡混合器上混合。 2.加完染料20min 后,使用722分光光度计,塑料比色皿,在595nm 处测量吸光度A 595。 3.用标准蛋白浓度(mg/ml )为横坐标,用A 595为纵坐标,进行直线拟合,得到标准曲线。根据测得的未知样品的A 595,代入公式即可求得未知样品的蛋白质含量。根据所测样品的吸光度,在标准曲线上查得相应的蛋白质含量,按下式计算: 样品蛋白质含量(μg/g 鲜重) = ) 测定时提取液体积()样品重() 提取液总体积()查得的蛋白质(ml g ml g g ??/μ SDS 干扰实验 1.取5支试管,分别编号后按表2剂量依次加入标准蛋白、SDS 、去离子水和考马斯亮蓝染料。每支试管加完后,立即在漩涡混合器上混合。 2.加完染料20min 后,使用753分光光度计,塑料比色皿,在595nm 处测量吸光度A 595。 [实验数据与结果分析] (一)标准方法的数据和图 表1 考马斯亮蓝标准法实验表格

标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量(精)

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。 二、蛋白质含量测定方法 1、凯氏定氮法 2、双缩脲法 3、Folin-酚试剂法 4、紫外吸收法 5、考马斯亮蓝法 三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 (一)、试剂: 1、考马斯亮蓝试剂: 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。 2、标准蛋白质溶液: 纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 (二)、器材: 1、722S型分光光度计使用及原理()。 2、移液管使用()。 (三)、标准曲线制作: 1、 2、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、

40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。 1)、利用标准曲线查出回归方程。 2)、用公式计算回归方程。 3)、或用origin作图,测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6 一般相关系数应过0.999以上,至少2个9以上。 4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。 (四)、蛋白质含量的测定: 样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作,测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。 一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太大,可以稀释后再测A595nm值,然后再计算。 (五)、注意事项: 1、玻璃仪器要洗涤干净。 2、取量要准确。 3、玻璃仪器要干燥,避免温度变化。 4、对照:用被测物质以外的物质作空白对照。

中考体育之坐位体前屈训练技巧

中考体育之坐位体前 屈训练技巧 Revised on November 25, 2020

中考体育之坐位体前屈训练技巧 串丝中学:魏强我们都知道,坐位体前屈,是近几年中考的测试项目,坐位体前屈主要测量学生在静止状态下的躯干、腰、髋等关节可能达到的活动幅度,主要反映这些部位的关节、韧带和肌肉的伸展性和弹性及学生身体柔韧素质的发展水平。坐位体前屈动作的练习,对全身的关节、韧带、肌肉的灵活性,柔韧性,协调性。以及培养顽强的意志品质等方面都有良好的促进作用。坐位体前屈成绩的提高既是考试的需要,也是对中学生身体素质的检测。所以应加强对坐位体前屈动作的教学和锻炼。 初始练习柔韧时,有些学生会很害怕,因为练习柔韧性会有疼痛感。为了加强学生对坐位体前屈学习的兴趣,经过近几年来的教学探索,我在教学中寻找到一些方法和技巧。下面就提高学生的练习兴趣和发展学生的全身柔韧性谈谈方法和技巧: 坐位体前屈练习时,必须做好准备活动,并在教学中采用形式多样的教学方法和练习方法去吸引学生,提高学生的学习兴趣,使他们在热烈的氛围和情景中感到快乐,积极主动地投入到练习中,由原来的“要我学”变为现在的“我要学”。 1、游戏法教学 游戏是学生最喜爱的运动形式,学生有了兴趣,才会有克服困难、积极主动认真学习的热情,将坐位体前屈动作的练习,从单个的手臂练习、腰部练习、腿部练习、全身各个关节、肌肉、韧带的练习,编成游戏的形式。例如:通过玩“高人、矮人、超人游戏”可练习学生的四肢及腰部;通过玩“跟我学游戏”可练习学生的全身各个关节、肌肉、韧带的练习。 2、竞赛法教学

根据生理学发展规律,中学生正处于青春发育的高峰期,有着活泼、好动、好胜的天性。针对此情况,在教学中适时地将坐位体前屈动作的练习,采用竞赛的形式予以激励练习。例如:看谁最高,让学生前脚掌着地支撑,双臂上举,充分伸展四肢;看谁伸得最远,让学生十指交叉,双脚左右分开略比肩宽,用交叉的手臂分别往前后左右四个方向远伸;看谁最勇敢,让学生并步站立两腿挺膝夹紧两手十指交叉两臀伸直上举手心向上,然后上体亢腰前俯两手心尽量向下贴紧地面两膝挺直,髋关节屈紧,腰背部充分伸展,两手松引用双手从脚两侧屈肘抱紧脚后跟,使胸部贴紧双腿,充分伸展腰背部,持续一定时间后再放松起立;看谁能达桥以及看谁劈叉最直等等。 3、音乐法教学 坐位体前屈练习是比较枯燥无味的练习,在各种柔韧练习中,播放一些舒畅、柔和、缓慢、动听的轻音乐,让学生在练习中心情放松、忘记疼痛、忘记疲劳。 总之,在练习坐位体前屈时,一定要由易到难,由简到繁,有的放矢,循序渐进,切忌操之过急!伤害学生! 简单的训练方法! 先坐在地上,双腿并拢伸直,两臂向前用力伸。 同伴或教练员可利用用手反复按练习者肩背部的办法,助其用力,达到伸拉的目的。 腰部柔韧性的练习方法 (1)前俯腰:主要用来练习腰部向前运动的能力和柔韧性具体方法:并步站立两腿挺膝夹紧两手十指交叉两臀伸直上举手心向上。然后上体亢腰前俯两手心尽量向下贴紧地面两膝挺直,髋关节屈紧,腰背部充分伸展。两手松引用双手

血红蛋白的生成、调节及相关的疾病

血红蛋白的生成、调节及相关的疾病 血红蛋白合成 血红蛋白结构:珠蛋白+血红素(Fe2+ +卟啉) 血红素属于铁卟啉化合物,由Fe2+与卟啉环螯合而成。根据同位素示踪法,其合成的基本原料是琥珀酰辅酶A、甘氨酸和Fe2+ 。其合成过程包括: 1.δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)的生成。 在线粒体内,琥珀酰CoA与甘氨酸在ALA合酶作用下合成ALA。 2.胆色素原的生成 ALA进入胞质,在ALA脱水酶作用下,2分子ALA脱水合成胆色素原 3.尿卟啉原与粪卟啉原合成 胞质中胆色素原脱氨酶催化四分子胆色素原合成为一分子现状吡咯再由尿卟啉原Ⅲ同合酶转化为尿卟啉原Ⅲ,之后进一步脱羧变为粪卟啉原Ⅲ。4.血红素合成 粪卟啉原Ⅲ进入线粒体脱羧生成原卟啉原Ⅸ,经氧化得到卟啉原Ⅸ,此为血红素的直接前体。之后Fe2+ 螯合形成血红素

此为整体反映。 血红蛋白的另一部分珠蛋白按照中心法则,由基因转录出RNA再翻译成为蛋白质。珠蛋白与血红素结合成为血红蛋白,而单个珠蛋白是利用它们的互补面和在红细胞中的高浓度自动结合到血红蛋白四聚体中的。血红素对于血红蛋白的合成具有重要作用,它不仅为血红蛋白合成的底物,还可促进珠蛋白mRNA的合成聚集,对血红蛋白的合成起到调节作用。 血红蛋白合成调节: 1.血红素的反馈调节 当血红素的合成速度远大于珠蛋白的合成速度时,过多游离的血红素可以对ALA合酶具有别构抑制作用。不仅如此,过多的血红素被氧化为高铁血红素对ALA酶也有很强的抑制作用。 2.促红细胞生成素促进血红蛋白合成 EPO主要与晚期红系祖细胞上的EPO受体结合。当机体缺氧或者红细胞减少时,肾红细胞生成素激活表达,释放入血到达骨髓,诱导ALA合酶合成,促进血红蛋白合成。另外血红素可促进骨髓原始红细胞的增值与分化,加速有核红细胞成熟。此外促红细胞生成素还可以减少红细胞的凋亡。 3.体内的类固醇激素(睾酮等)水平升高,诱导ALA酶合成,促进血红蛋白合 成。 与血红蛋白相关的疾病 血红蛋白病:由于血红蛋白分子结构异常或珠蛋白肽链合成速率异常所引起的一组遗传病。临床上分为:血红蛋白变异体和珠蛋白再生障碍性贫血两大类。 1.镰状细胞贫血症:常染色体隐性遗传。β珠蛋白基因碱基替换,编码第6 位谷氨酸的密码子被缬氨酸取代,产生Hb S血红蛋白,纯合子患者90%以上为异常血红蛋白。氧分压低时,,红细胞发生镰状变,引起严重溶血、脾肿大和血管阻塞。 2.Hb C病:常染色体隐性遗传。β链第6位谷氨酸被赖氨酸取代。纯合子患 者可有轻度溶血,肝脾肿大。 3.Hb M遗传性高铁血红蛋白:常染色体显性遗传,α链58位组氨酸被酪氨

实验七 考马斯亮蓝G250法测定的蛋白质含量

实验七考马斯亮蓝G250法测定的蛋白质含量 一、试验目的 1. 学习分光光度计的原理及操作 2.学习利用染色方法提高蛋白质消光系数,以提高分光光度法检测灵敏度 二、基本原理 1. 根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收光谱法或分光 光度法。该法所用的仪器称为分光光度计或吸收光谱仪。该法所使用的光谱范围包括可见光和紫外光,即包括波长在200 - 800 nm之间的光。 2.分光光度计灵敏度高,测定速度快,应用范围广,其中的紫外/可见分光 光度技术更是生物化学研究工作中必不可少的基本手段之一。 3.紫外区可分为紫外(近紫外)和真空紫外(远紫外)。由于吸收池(又称样 品池、比色杯等)和光学元件以及氧气能吸收小于190nm波长的光,因此常规紫外测定集中在近紫外区,即200nm-400nm。可见光区为400nm -800nm。 4.考马斯亮蓝G250法 原理:考马斯亮蓝G250与蛋白质结合后,其最大吸收波长从465nm改变为595nm,该蛋白-染料复合物吸光系数很高,所以检测灵敏度很高,可以测定1μg /mL的蛋白质,染料和蛋白结合只需要2分钟,颜色在1小时内稳定。 操作简便,快速,是常用的蛋白含量测定方法之一。去污剂,粘多糖等严重干扰该方法的测定 三、试剂 1. 标准蛋白质溶液:0.5mg/ml牛血清白蛋白溶液 2. 考马斯亮蓝G250蛋白染色剂: 四、操作步骤 1.标准曲线的绘制: 取6只试管,分别加入浓度为0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5mg/ml的标准蛋白质溶液0.1ml,然后加入5ml考马斯亮蓝试剂,震荡混匀,2分钟后于595nm 测定吸光值,以蛋白质浓度为横坐标,光吸收值为纵坐标绘制标准曲线。 2.样品测定: 样品液0.1mL , 然后加入5ml考马斯亮蓝试剂,震荡混匀,2分钟后于595nm 测定吸光值。从标准曲线中查出相应的浓度。 五、试验结果

影响糖化血红蛋白检测的因素

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/887940582.html, 影响糖化血红蛋白检测的因素 作者:李桂英 来源:《医学信息》2015年第06期 近年来由于全球糖尿病患病率在逐年增高,每年约有1/3的糖尿病患者被漏诊,超过25%的新诊断糖尿病患者,已经患有糖尿病的视网膜病或微量白蛋白尿症,还有很多患者是因为并发症出现后才发现糖尿病的,许多糖尿病患者因不能得到及时诊断而延误对疾病的控制,糖尿病已成为世界性的公共卫生问题。因此早期诊断糖尿病及其高风险者,并对他们进行及时的干预和规范治疗,可减少糖尿病发患者数,延缓糖尿病并发症的发生和发展,已成为当务之急。 对糖化血红蛋白(HbA1c)检测来说,室内质控、室间质评都是取得稳定结果的前提、日常维护是保证仪器处于正常的必要措施;我们要认识到糖化血红蛋白(HbA1c)的检测项目、方法学的局限性,了解其影响因素,才能在日常检测中时刻把握住检测结果的质量。 在糖化血红蛋白(HbA1c)检测中有多种因素均可造成糖化血红蛋白(HbA1c)检测值的假性升高或降低,这不仅与实验室的检测方法有关,也与患者状况和标本处理方式等有关。因此,实验室应建立标准操作规程并要求操作人员严格遵守,提高工作人员的质量意识,加强质量控制,增强责任心,对工作人员进行培训指导,减少不必要的影响因素,把检测误差减少到最小。下面笔者将糖化血红蛋白(HbA1c)检测的影响因素总结了一下。 1标本处理方式的影响 1.1抗凝剂的种类临床上以EDTA-K2作为测定糖化血红蛋白(HbA1c)的标准用管。肝 素锂抗凝的全血使检测结果略有偏高。 1.2标本储存条件若全血标本不能及时测定,应需将标本于 4℃~8℃保存并最好在7 d内进行测定。此时,糖化血红蛋白(HbA1c)的检测结果变异率 2患者自身因素的影响 2.1贫血患者,影响红细胞寿命的疾病均可对糖化血红蛋白(HbA1c)的测定结果产生影响。如溶血性贫血、缺铁性贫血、大量失血等。溶血性贫血患者的标本因其红细胞寿命缩短使其糖化血红蛋白(HbA1c)的测定值会"降低",这将取决于溶血的程度。镰刀红细胞症和脾切除后患者的标本因其红细胞生存时间较长其糖化血红蛋白(HbA1c)的测定值可能会"过高"。 2.2部分进展迅速的1型糖尿病患者,糖化血红蛋白(HbA1c)的水平往往正常或轻度升高,因此,糖化血红蛋白(HbA1c)的测定值并不能完全反应急速增高的血糖水平。

(完整word版)坐位体前屈的训练方法

1.拉伸大腿后部(1)坐压腿:双腿分开坐在地面上,一条腿屈膝,脚跟接触伸展腿的内侧。呼气,上体前倾贴近伸展腿大腿的上部。伸展腿膝部保持伸直,动作幅度尽量大。(2)压腿:在高台前站立,一条腿伸直放在台上,另一条腿支撑地面。呼气,双腿膝关节伸直,髋关节正对台子。上体前倾,贴近台上大腿上部,双手扶踝关节前部。伸展腿膝部和背部保持伸直。动作幅度尽量大。(3) 站立拉伸:背贴墙站立,呼气,直膝抬起一条腿。同伴用双手抓住踝关节上部,帮助腿上举。同伴帮助上举腿时练习者呼气,动作幅度尽量大。2.拉伸大腿内侧(1)直膝分腿坐压腿:双腿尽量左右分开,坐在地面上,双手体前扶地。呼气,转体,上体前倾贴在一条腿上,双手扶在身体前倾一侧腿的踝关节前部。充分伸展双腿和腰部。(2)弓箭步拉伸:弓箭步站立,双脚间距离约60厘米,后脚左转90度,双手叉腰。呼气,前脚继续前移,髋部下压后面腿,换腿重复练习。动作幅度尽量大。3.腰腹部(1)跪立背弓:在垫上跪立,脚尖向后。双手扶在背上部,上体后仰,背部肌肉收缩送髋。呼气,加大动作幅度,逐渐把双手滑向脚跟。动作幅度尽量大。拉伸25秒,3至5组。 (2)体前屈蹲起:双脚并拢俯身下蹲,逐渐下降双手放在脚两侧,手指向前。躯干贴在大腿上部。伸膝至最大限度。动作幅度尽量大,手不能离地。(3)跨栏坐:双腿尽量左右分开,坐在地面上,成跨栏坐姿势,呼气,转体,上体前倾贴在一条腿上,双手扶在身体前倾一侧腿的踝关节前部。充分伸展双腿和腰部。4.背部、肩部(1)站立伸背:双脚左右开立,双手扶在栏杆上,略高于头,上体前倾至与地面平行。四肢保持伸直,屈髋。呼气,上体下压,使背部下凹形成背弓。动作幅度尽量大。采用动静拉伸训练,动力拉伸15个,静力拉伸25秒,共3至5组。(2)坐立拉背:坐立,双膝微屈,胸贴在大腿上部,双手抱腿,肘关节在膝关节下面。呼气,上体前倾,双臂固定在大腿上向前下拉背,双脚保持与地面接触。动作幅度尽量大。(3)背向压肩:背对墙站立,双臂向后抬起,尽量与肩同高,直臂扶墙,手指向上。呼气,屈膝降低肩部高度,动作幅度尽量大。坐位体前屈训练的方法和手段相互间都有一定的联系,应根据个人实际情况每种方法有重点地选择某一两种进行强化练习,以便于创造优异成绩。 1、正压腿: 一腿直立,另一腿举起放于高度适当的高物上,身体正对高腿,上体向前尽量用胸部贴腿,双膝不得弯屈,复原姿势后连续再做。 2、侧压腿: 一腿直立,另一腿举起放于高度适当的高物上,身体侧对高腿,上体尽量侧屈,用头的一侧贴腿。不要前倾或后仰,复原姿势后连续再做。 3、正踢腿: 直立,两臂平举,左脚向前迈出一小步,右腿绷脚面伸直,急速有力地向上踢腿,落下

坐位体前屈的训练方法

坐位体前屈的训练方法 先坐在地上,双腿并拢伸直,两臂向前用力伸。 同伴或教练员可利用用手反复按练习者肩背部的办法,助其用力,达到伸拉的目的。 腰部柔韧性的练习方法 (1)前俯腰:主要用来练习腰部向前运动的能力和柔韧性具体方法:并步站立两腿挺膝夹紧两手十指交叉两臀伸直上举手心向上。然后上体亢腰前俯两手心尽量向下贴紧地面两膝挺直,髋关节屈紧,腰背部充分伸展。两手松引用双手从脚两侧屈肘抱紧脚后跟,使胸部贴紧双腿,充分伸展腰背部。持续一定时间后再放松起立。还可以在双手触地时向左右侧转腰,用两手心触及两脚外侧的地面,增大腰部伸展时左右转动的柔韧性。 动作要点:两腿挺膝直立,挺胸塌腰,充分伸展腰背部,胸部与双腿贴紧。 (2)后甩腰:主要用来练习腰部向后运动的柔韧性。具体方法:并步站立,练习时一腿支撑,另一腿向后上直腿摆动,同时,两臂伸直,随l体向后屈做向后的摆振动作,使腰背部被充分压紧,腰椎前面充分伸展:动作要点:后摆腿和上体后屈振摆同时进行;支撑腿,膝伸直.头部和双臂体后屈做协调性后摆助力动作, (3)腰旋转:主要用来练习腰部的左右旋转幅度。具体打法;两脚左右开立略宽于肩,两臂自然垂于休侧以髋关节为轴体前俯,然后以腰为轴,使上体自前向右、向上再向左,回到的做顺时针或逆时针旋转;同时,双臂随上体做顺时针或逆时针的环绕动作,以增加腰部旋转的幅度和力度、 动作要点:尽量增大绕环幅度,速度由慢到快,使腰椎关节完全得到活动、伸 3.被动形式的训练方法 (1)腿部和髋部的主要练习方法多采用各种形式的搬腿同伴握紧自己的脚,做正搬、侧搬、后搬等助力拉伸动作, 也可采用各种形式的按和踩的方法。如进行横叉或竖叉练习时,同伴或教练员可利用脚踩或手按练习者肩背部的办法,助其用力,达到伸拉的目的。 ( 2)腰部的被动练习法主要是利用压桥法。同伴或教练用自己的双脚顶住或踩住练习者的双脚,用双手拉住练习者双臂或双肩,用力使练习者的双肩后部尽量靠近两脚跟,使练习者的腰椎关节得到完全伸展和收缩,增强腰部的柔韧性。

考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量

考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 一、实验目的 掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理和方法。学习分光光度计的原理及使用方法。 二、实验原理 三、实验步骤 试剂 试管编号 0 1 2 3 4 5 6 7 标准蛋 白质溶 液/ml 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 样品0.1 样品0.1 相当于 蛋白质 含量/微 克0.00 20 40 60 80 100 未知未知 蒸馏水 /ml 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0 0 考马斯 亮蓝染 液/ml 3 3 3 3 3 3 3 3 1、打开分光光度计,预热30min。 2、取8支洁净的干燥试管,按上表进行编号,0~5号用于标准曲线的绘制,6号、7号用于 样品溶液的测定。 3、取微量注射器,用蒸馏水清洗3次,再用标准蛋白质溶液润洗2次。按上表在0~5号试 管中加入标准蛋白质溶液,然后用蒸馏水洗3次,再按上表在0~5号试管中加入相应含量的蒸馏水。 4、微量注射器用样品润洗2次,抽取100微克的样品加入到6号试管,再抽取100微克加 到7号试管。用蒸馏水清洗微量注射器。 5、取5ml的移液管,用蒸馏水清洗3次,用考马斯亮蓝染液润洗2次。在0~7号试管中各 加入3.0ml的考马斯亮蓝染液。振荡试管,混合均匀。 6、待其充分反应(约2分钟)后,用分光光度计分别测它的吸光值。 7、用0~5号的数据。以蛋白质浓度为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。 8、由样品液的吸光值查标准曲线求出蛋白质含量。 四、实验结果与分析 试管编号0 1 2 3 4 5 6 7 A595 0 0.383 0.603 0.871 1.093 1.189 0.876 0.83 6 样品溶液吸光值=(0.876+0.836)/2=0.856 查标准曲线得样品液的蛋白质含量为66.0微克

坐位体前屈测试的方法

坐位体前屈测试的方法/步骤 坐位体前屈是测试学生在静止状态下的身干、腰、髋等关节可能达到的活动幅度,主要反映这些部位关节、韧带和肌肉的伸展性和弹性及学生身体柔韧素质的发展水平。 方法/步骤 1、将仪器放置在平坦地面上。测试前,用尺进行校正,即将直尺放在平台上,使游标的上平面与平台呈水平,将游标的刻度调到0位。 2、测试前,受试者应在平地上做好准备活动,以防拉伤。3 3、受试者坐在连接于箱体的软垫上,两腿伸直,不可弯曲,脚跟并拢,脚尖分开约10—1 5厘米,踩在测量计垂直平板上,两手并拢。 4、两臂和手伸直,渐渐使上体前屈,用两手中指尖轻轻推动标尺上的游标前滑(不得有突然前伸动作),直到不能继续前伸时为止。 5、测试计的脚蹬纵板内沿平面为0点,向内为负值,向前为正值。记录以厘米为单位,取小数点后一位。如为正值则在数值前加“+”符号,负值则加“—”符号。 肺活量测试方法 首先告知被测者不必紧张,并且要尽全力;以中等速度和力度吹气效果最好。令被测者面对仪器站立,手持吹气口嘴;面对肺活量计站立试吹1至2次,首先看仪表有无反应,还要试口嘴或鼻处是否漏气,调整口嘴和用鼻夹(或自己捏鼻孔);学会深吸气(避免耸肩提气,应该象闻花式的慢吸气);学会吸气后屏住气再对准口嘴吹气,防止此时从口嘴处吸气;测试中不得二次吸气。 被测试者进行一两次较平日深一些的呼吸动作后,更深的吸一口气,向口嘴处慢慢呼出至不能再呼为止;吹气完毕后,液晶屏上最终显示的数字即为肺活量毫升值。每位受试者测三次,每次间隔15秒,记录三次数值,选取最大值作为测试结果。以毫升为单位,精确到个位数。

身高体重测试方法: 身高测试方法: 受试者赤足,立正姿势站在身高计的底板上(上肢自然下垂,足跟并拢,足尖分开成60 度角)。足跟、骶骨部及两肩胛区与立柱相接触,躯干自然挺直,头部正直,耳屏上缘与眼眶下缘呈水平位(图3-1)。测试人员站在受试者右侧,将水平压板轻 轻沿立柱下滑,轻压于受试者头顶。测试人员读数时双眼应与压板水平面等高进行读数,记录员复述后进行记录。以厘米为单位,精确到小数点后一位。测试误差不 得超过0.5厘米。 体重测试方法: 测试时,杠杆秤应放在平坦地面上,调整0点至刻度尺水平位。受试者赤足,男性受试者身着短裤;女性受试者身着短裤、短袖衫,站在秤台中央(图3-2)。测试人员放置适当砝码并移动游标至刻度尺平衡。读数以千克为单位,精确到小数点后一位。记录员复诵后将读数记录。测试误差不超过0.1千克

糖化血红蛋白的检测

糖化血红蛋白的检测 (一)糖化血红蛋白检测技术的分类及评价 HbA1c检测技术繁多,目前临床常用的检测方法可分为两大类。一类利用糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白电荷差异进行分离,包括:离子交换HPLC、毛细管电泳法、等电聚焦电泳法等;另一类则利用血红蛋白糖基化基团与非糖基化基团结构的不同开展检测,包括:硼酸盐亲和层析法、免疫法和酶法。 离子交换HPLC作为DCCT(美国糖尿病控制与并发症研究)和IKPDS (英国糖尿病前瞻性研究)的推荐方法,具有精密度和准确性良好、方便快捷、干扰因素较小等优点。其缺点在于成本较高,部分产品受血红蛋白浓度和血红蛋白变异体的影响。卫生部临检中心室间质评结果显示,采用该方法的实验室从2013年的278家上升到2018年的1284家,显示近年来离子交换HPLC早我国临床实验室得到广泛应用。 毛细管电泳法是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的液相分离分析技术,可分离HbA2、血红蛋白C(HbC)、血红蛋白E(HbE)、血红蛋白S(HbS)、血红蛋白D(HbD)、胎儿血红蛋白(HbF)、HbA0,以及其他血红蛋白和HbA1a、HbA1b、HbA1c。该方法具有所需样本量少、可自动化、重复性好、可用于β-地中海贫血以及其他血红蛋白合成障碍性疾病的筛查等优点,但存在检测成本较高、检测速度慢等缺点。 硼酸盐亲和层析法则利用m-氨基苯硼酸与结合于血红蛋白的葡萄糖顺位二醇基发生特异性反应,该方法检测总的糖化血红蛋白,包括HbA1c和其他位点的糖化血红蛋白。其优点在于所需标本量少、检测速度快、可用于POCT、受血红蛋白变异体影响最小。其缺点在于受HbF影响,无法发现Hb变异体。 大多数免疫测定法能特异地识别血红蛋白β链N端糖基化的氨基酸(通常是开始的4~10个氨基酸),免疫法又可分为免疫化学发光法、免疫比浊法、乳胶凝集法和免疫层析法。该方法优点包括:特异性高、可自动化、成本低廉、无Hb变异的干扰。缺点在于:受乳糜血和胆红素影响,无法发现Hb变异体。 酶法则使用一种特异性酶酶切N端缬氨酸来测定HbA1c。由于采用比色法,该方法不需要昂贵、精密的检验仪器,实验室常用的全自动生化分析仪即可完成检测。其优点在于:方便快速、成本低廉。但目前国内不同厂家生产的试剂质量良莠不齐,不同检测系统间的精密度和准确性差异明显。建议临床实验室在引入该方法前严格开展性能验证工作,验证能否满足临床要求。 鉴于离子交换HPLC为每个患者样品提供了一张便于判断的层析图,很多临床实验室将其作为HbA1c的首选方法。但该方法受血红蛋白变异体的影响,会掩盖HbA1c而导致结果错误。因此,有专家提出,实验室采用离子交换HPLC 检测HbA1c时,应选用两种检测方法。审核离子交换HPLC结果前,首先筛查层析图是否存在异常血红蛋白,如果存在,则可以选择免疫法或毛细管电泳法进行复查,确保HbA1c检测结果准确。 (二)糖化血红蛋白检测中的干扰问题 在糖化血红蛋白检测过程中,多种因素均会引起血红蛋白数量与质量变化,最终干扰HbA1c的检测结果。 1、生理因素:如种族差异、年龄差异、性别差异,地区差异(高原与平原地区)和妊娠(妊娠中期女性HbA1c水平略降低,而妊娠晚期略升高)。

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