实验性蛛网膜下腔出血凋亡机制及干预治疗研究

?综述?

实验性蛛网膜下腔出血凋亡机制及干预治疗研究

赵炜疆　秘勇建

ＤＯＩ：１０．３８７７／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４唱０７８５．２０１１．２３．０７９作者单位：５１５０４１　广东省，汕头大学医学院神经科学中心

通讯作者：赵炜疆，Ｅｍａｉｌ：ｎｅｕｒｏｍａｎｃｎ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ

大量临床及实验证据表明，急性蛛网膜下腔出血（ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ，ＳＡＨ）可引起局灶或广泛脑功能破坏，包括脑水肿和脑肿胀、颅内压增高、脑血流和灌注压下降以及脑代谢破坏，与超氧化现象有关的自由基生成，大血管和血脑屏障微血管的改变，并伴有提示神经症状和意识损害的行为学改变［１唱３］。尽管如此，继发性脑损害和迟发性脑血管痉挛（ｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏ唱ｓｐａｓｍ，ＣＶＳ）的确切分子学机制仍有待深入探讨。Ｚｕｂｋｏｖ等

［４］首次在死于动脉瘤破裂后严重ＣＶＳ的患者动脉观察到内皮细胞中以核染色体聚集和基底膜分离为特征的凋亡性改变，拉开了从凋亡角度认识和实验性治疗ＳＡＨ的序幕。一、ＳＡＨ时凋亡的形态学和生物化学表现

ＣＶＳ是指ＳＡＨ后大脑底部大容量动脉的迟发性缩窄，作为ＳＡＨ最严重的并发症，可引起弥漫性脑水肿和迟发性缺血性

神经损伤，是ＳＡＨ致死、致残的首要原因［５］。犬二次注血ＳＡＨ模型研究表明，从ＳＡＨ的３ｄ开始，内皮细胞出现凋亡样改变，表现为核周边染色质凝集、细胞膜发泡及细胞质固缩，这一变化随时间进展，并于ＳＡＨ的７ｄ达到高峰，首次揭示痉挛基底动脉中内皮细胞凋亡样改变的时相规律，提示凋亡可能在ＣＶＳ的病理发生中发挥重要作用

［６］。ＳＡＨ后ＣＶＳ是一个长期的血管收缩过程，可引起脑缺血或脑梗死。血管痉挛期间的形态学研究表明平滑肌细胞广泛坏死，内皮细胞脱落及营养不良。Ｏｇｉｈａｒａ等［７］以浓度和时间依赖的方式用氧合血红蛋白（ＯｘｙＨｂ）处理牛主动脉内皮细胞，发现ＯｘｙＨｂ能以浓度及时间依赖的方式降低细胞密度。ＤＮＡ分析显示以凋亡为特征的核小体间的剪切变化（ＤＮＡ梯带）。透射电镜显示ＯｘｙＨｂ处理的内皮细胞中核凝集以及凋亡体的形成，免疫印迹表明１１６ｋＤ的ＰＡＲＰ被剪切成８５ｋＤ的凋亡相关片断。电压依赖性钙离子通道阻断剂（尼卡地平），非电压依赖性钙离子通道阻断剂Ｅｃｏｎａｚｏｌｅ以及无机的Ｃａ

２＋通道阻断剂镧（ｌａｎｔｈａｎｕｍ）均未能阻止ＯｘｙＨｂ引起的细胞分离或ＤＮＡ梯带形成

［８］，提示这种凋亡性改变具有非Ｃａ２＋依赖性。Ｍａｔｚ等［９］经ＣＤ唱１小鼠右顶叶皮层注射５０μｌ自体血液溶解物，２４ｈ发现皮层组织ＴＵＮＥＬ染色阳性，以靠近ＳＡＨ部位最

为丰富，注射了血液溶解物的小鼠脑组织电泳表现ＤＮＡ梯带提示凋亡，这表明蛛网膜下腔血液与ＤＮＡ片段化和凋亡性细胞死亡有关。Ｎａｕ等［１０］在ＳＡＨ病例中，齿状回可观察到４畅０／ｍｍ２

的凋亡神经元，于发病２４ｈ～１１ｄ齿状回神经元凋亡最多。二、ＳＡＨ后继发性脑损伤和ＣＶＳ的主要凋亡通路Ｆａｓ和ＴＮＦ唱α受体１（ＴＮＦＲ１）是与凋亡关系密切的两种死亡结构域受体，在胞外它们分别与死亡诱导配体（ＤＩＬｓ）中的Ｆａｓ唱Ｌ（ＣＤ９５唱Ｌ）及ＴＲＡＩＬ（ＴＮＦ唱ｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ唱ｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ）结合而活化，在胞内两者又与各自不同形式的丝氨酸磷酸化的适配蛋白ＦＡＤＤ及ｃａｓｐａｓｅ唱８前体共同组成死亡诱导信号复合体（ＤＩＳＣ），使ｃａｓｐａｓｅ唱８前体发生自身催化，成为有活性的ｃａｓｐａｓｅ唱８。ｃａｓｐａｓｅ唱８随后激活ｃａｓｐａｓｅ唱３和ｃａｓｐａｓｅ唱７，两者都能参与ＰＡＲＰ（ｐｏｌｙＡＤＰ唱ｒｉｂｏｓｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ）的剪切。在该途径中ｃａｓｐａｓｅ唱８借助死亡受体将细胞外事件转化为细胞质事件，活化ｃａｓｐａｓｅ唱３还可通过切割ｃａｓｐａｓｅ唱８前体将死亡信号放大。Ｋｉｍｕｒａ等［１１］用ＴＮＦ唱α、ＩＬ唱β处理培养的脑微血管内皮细胞，结果ＴＮＦ唱α和ＩＬ唱１β可引起细胞以剂量依赖的方式出现分离，并于ＳＡＨ２４～７２ｈ产生ＤＮＡ梯带形成。ＴＮＦ唱α还可将１１６ｋＤ的ＰＡＲＰ剪切成８５ｋＤ的片段，并于孵育２４～７２ｈ后增强内皮细胞ｃａｓｐａｓｅ唱３活性，诱导脑血管内皮细胞凋亡。ＩＬ唱１β减少贴附细胞数，产生ＤＮＡ梯带，但不能剪切ＰＡＲＰ或增加ｃａｓｐａｓｅ唱３的活性，表明ＩＬ唱１β可通过与ＴＮＦ唱α不同的通路来诱导内皮细胞凋亡。有研究表明血流持续保持在基线３０％水平与炎症反应明显相关，且ＴＵＮＥＬ阳性区域与炎症反应高度吻合，Ｎｅｓｔｉｎ、ＥＤ１、ＯＸ６以及细胞间黏附因子和肿瘤坏死因子呈免疫强阳性，以靠近外溢血液的脑组织反应为著［１２］。

以ＯｘｙＨｂ处理培养的牛脑血管内皮细胞，可以时间依赖的方式产生细胞分离并增加细胞中ｃａｓｐａｓｅ唱８和ｃａｓｐａｓｅ唱９的活性。ｚ唱ＩＥＴＤ唱ｆｍｋ和ｚ唱ＬＥＨＤ唱ｆｍｋ（１００ｍｉｃｒｏＭ）可削弱ＯｘｙＨｂ诱导的细胞缺失，ＤＮＡ梯带以及ＰＡＲＰ水解剪切，这些结果提示

ｃａｓｐａｓｅ级联反应参与了ＯｘｙＨｂ诱导的细胞凋亡［１３］

。ＳＡＨ７ｄ后，痉挛基底动脉内皮细胞呈现ＴＵＮＥＬ、ＰＡＲＰ和ｃａｓｐａｓｅ唱３及ｃａｓｐａｓｅ唱８染色阳性，荧光双标提示ＴＵＮＥＬ与ｃａｓｐａｓｅ唱３和ＴＮＦＲ１共存。Ａｃ唱ＤＥＶＤ唱ＣＨＯ和Ｚ唱ＶＡＤ唱ＦＭＫ可防止内皮细胞的凋亡，减少血管造影性ＣＶＳ，进一步提示内皮细胞凋亡过程中有ＴＮＦＲ１、ｃａｓｐａｓｅ唱３和ｃａｓｐａｓｅ唱８通路的卷入［１４］。大多数情况下凋亡出现于大脑内皮细胞，部分出现于海马神经元，还有较少量出现于大脑皮质。相应地也可观察到血脑屏障（ｂｌｏｏｄ唱ｂｒａｉｎｂａｒ唱ｒｉｅｒ，ＢＢＢ）通透性和脑水含量增加，同时伴有神经损伤及高死亡率。ｚ唱ＶＡＤ唱ＦＭＫ可抑制内皮细胞ＴＵＮＥＬ和内皮细胞ｃａｓｐａｓｅ唱３染色，降低ｃａｓｐａｓｅ唱３活性、ＢＢＢ通透性，缓解血管痉挛，抑制脑水肿和改善神经系统症状

［１５］，提示ｚ唱ＶＡＤ唱ＦＭＫ对ＳＡＨ后早期脑损伤的主要作用与其对大脑内皮细胞的神经保护作用、减少ＢＢＢ损伤有关。

三、ＳＡＨ后其他凋亡通路

Ｏｓｔｒｏｗｓｋｉ等［１６］使用ＥＶＰ大鼠模型也观察到ＨＩＦ唱１α和其靶蛋白ＶＥＧＦ和ＢＮＩＰ３表达变化，与凋亡性细胞死亡和ＢＢＢ通透性增加有关，并指出组织学上脑损伤的早期变化与ＨＩＦ唱１α与ＢＮＩＰ３及ＶＥＧＦ的蛋白质表达有关。ＨＩＦ唱１α阳性染色亦提示ＨＩＦ唱α可能通过ｃａｓｐａｓｅ唱８和ｐ５３相关机制触发凋亡性级联反应。免疫组化显示受损ＣＡ１细胞出现ＨＩＦ唱１α强染色，然而，在其他区域许多细胞尽管ＨＩＦ唱１α染色阳性，但其形态结构保持不变，表明ＨＩＦ唱１α诱导的细胞死亡具有时段性。

研究显示ＳＡＨ后海马小血管内皮细胞ｐ５３凋亡上调调节因子（ｐ５３ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｍｏｄｕｌａｔｏｒｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ＰＵＭＡ）、ＢＡＸ、ＢＡＫ、ＧＲＰ７８表达增高，同时伴有内皮细胞凋亡，提示ＰＵＭＡ可能借助内质网诱导内皮细胞凋亡，在ＳＡＨ后ＢＢＢ破坏中发挥重要作用。使用ｓｉＲＮＡ阻断ＰＵＭＡ活性有助于减轻ＢＢＢ破坏后脑水肿加重，保护脑功能完整性、降低死亡率［１７］。

四、凋亡调控与ＳＡＨ

１．Ｂｃｌ唱２蛋白家族：Ｂｃｌ唱２家族两组功能相互对抗的蛋白组成，主要通过调节细胞色素Ｃ的释放而间接影响ｃａｓｐａｓｅ唱３的激活。Ｂｃｌ唱２、Ｂｃｌ唱ＸＬ、Ｂｃｌ唱ｗ具有抑制凋亡的作用，而Ｂａｘ、Ｂａｄ、Ｂｉｄ和Ｂｉｍ具有促凋亡的作用，其中Ｂｃｌ唱２、Ｂｃｌ唱ＸＬ和Ｂａｘ与ｃａｓｐａｓｅ唱３的关系较为密切。

生理状态下，哺乳动物细胞中的Ｂｃｌ唱ＸＬ与ｃａｓｐａｓｅ唱９共同竞争Ａｐａｆ唱１的结合位点，抑制Ａｐａｆ唱１与ｃａｓｐａｓｅ唱９前体结合，从而抑制ｃａｓｐａｓｅ唱３的激活［１８］。ＯｘｙＨｂ可在体外以时间和浓度依赖的方式诱导牛动脉内皮细胞Ｂａｘ表达明显提高，Ｂｃｌ唱２表达明显下降，以７２ｈ为著［８］。

２．Ｃａｌｐａｉｎ与ｃａｓｐａｓｅ唱３：Ｙａｍａｕｒａ等［１９］使用犬二次注血法制备犬基底动脉痉挛模型发现μ唱ｃａｌｐａｉｎ通常在痉挛早期被显著激活并处于适度激活状态，诱导更多蛋白质水解。Ｍｉｎａｍｉ等［２０］采用成年蒙古犬两次出血制备ＣＶＳ，于出血第７天经斜坡入路暴露痉挛的基底动脉，给予选择性ｃａｌｐａｉｎ抑制剂ｃａｌｐｅｐｔｉｎ可扩张痉挛动脉。大鼠枕大池注血４００μｌ致ＳＡＨ５ｍｉｎ连续给予ｃａｌｐａｉｎ抑制剂Ⅱ２ｄ可明显改善行为障碍，缓解体重降低，减轻ＢＢＢ通透性［３，２１］，提示ｃａｌｐａｉｎｓ与ｃａｓｐａｓｅｓ之间的相互作用和调控在ＳＡＨ中发挥作用。

核因子网织红细胞２相关因子２（ｔｈｅｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｅｒｙｔｈｒｏｉｄ２唱ｒｅｌａｔｅｄｆａｃｔｏｒ２）和抗氧化剂反应原件（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ唱ｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌ唱ｅｍｅｎｔ）通路（Ｎｒｆ２唱ＡＲＥ）是炎症和氧化损伤的重要调节物。ＳＡＨ后Ｎｒｆ２及其靶基因产物血红素加氧酶１表达上调并于ＳＡＨ２４ｈ后达到高峰，在早期脑损伤发生中发挥有益作用，可能系通过诱导抗氧化和净化酶来抑制氧化应激［２２］。

五、凋亡抑制在ＳＡＨ中的作用

ｚ唱ＩＥＴＤ唱ｆｍｋ和ｚ唱ＬＥＨＤ唱ｆｍｋ可抑制ＯｘｙＨｂ诱导的血管内皮细胞ｃａｓｐａｓｅ唱８和ｃａｓｐａｓｅ唱９激活［１３］。体外研究表明１０μｍｏｌ／Ｌ的ｃａｓｐａｓｅ唱３抑制剂可明显预防ＴＮＦ唱α诱导的ｃａｓｐａｓｅ唱３活性增加［１１］。在犬二次注血模型中，ＳＡＨ２～６ｄ分别经皮下注射ｃａｓｐａｓｅ唱２抑制剂ｚ唱ＶＤＶＡＤ唱ｆｍｋ，均可阻断内皮细胞凋亡，且ｃａｓｐａｓｅ唱３抑制剂对造影下ＣＶＳ的抑制作用接近显著性，达１３畅３％［２３］。另有研究发现ｃａｓｐａｓｅ唱８和ｃａｓｐａｓｅ唱９抑制剂不能保护ＢＢＢ，表明需及早应用多抑制剂以便更有效抑制凋亡［２４］。

此外，实验性ＳＡＨ研究表明Ｅｐｏｅｔｉｎ唱α可防止脑血流自主调节丧失，其神经元保护机制与预防谷氨酸诱导的兴奋性毒性抑制凋亡有关［２５］。ｐ５３抑制物ＰＥＴ唱Α可通过抑制凋亡诱导脑血管内皮细胞ｐ５３表达，从而抑制ＣＶＳ发生，改善临床症状，从而降低死亡率［２６］。特异性Ｎｒｆ２激动剂莱菔硫烷及重组人促红细胞生成素（ｒｈＥＰＯ）可上调皮质Ｎｒｆ２唱ＡＲＥ相关因子如Ｎｒｆ２，亚铁血红素氧化酶唱１（ＨＯ唱１）表达，进而减轻ＳＡＨ早期脑损伤，如脑水肿、血脑屏障损伤，皮质凋亡以及运动缺损［２２，２７］。自由基清除剂依达拉奉（Ｅｄａｒａｖｏｎｅ，ＭＣＩ唱１８６）可明显降低ＳＡＨ大鼠中丙二醛（ＭＤＡ）水平和ｃａｓｐａｓｅ唱３表达，增加脑组织中ＳＯＤ活性，有效减少神经元凋亡，改善神经症状评分［２８］。１７β唱雌二醇（Ｅ２）可通过激活腺苷受体ＡＲ唱Ａ（２Ａ）和细胞外信号调节激酶１和２（Ｅｒｋ１／２），并通过调节抗凋亡和促凋亡蛋白（Ｂｃｌ唱２和Ｂａｘ）表达来减轻ＳＡＨ诱导的血管痉挛和凋亡。甲氧雌醇（２唱Ｍｅ唱ｔｈｏｘｙｅｓｔｒａｄｉｏｌ，２ＭＥ２）可通过抑制ＨＩＦ唱α活性和ＶＥＧＦ表达及其下游通路来降低ＣＶＳ，抑制内皮细胞和血管平滑肌细胞经ＢＮＩＰ３通路发生凋亡，并减轻血管增生［２９唱３０］。ＳＡＨ后，移植基质干细胞，可分化成为胶质细胞、神经元和内皮细胞，可改善功能复，减少凋亡并增强ＳＡＨ后神经可塑性。是治疗ＳＡＨ中枢神经系统损伤修复有前景的新方法，是诱导损伤脑细胞可塑性的新途径［３１］。枸橼酸西地那非可减轻ＳＡＨ诱导的ＣＶＳ，但不影响凋亡水平。说明凋亡机制部分参与了ＳＡＨ后ＣＶＳ和神经元损伤，而同时抑制凋亡和非凋亡机制有助于更好治疗ＳＡＨ［３２］。

六、展望

综上所述，凋亡作为病理条件下细胞死亡方式之一，广泛地参与了ＳＡＨ从ＣＶＳ到继发性脑损伤的整个病理生理过程。明确以ｃａｓｐａｓｅ唱３激活为核心的死亡信号传导通路在上述病理过程中的作用，有助于开发新的更有针对性的抗凋亡药物，为ＳＡＨ后ＣＶＳ和继发性脑损伤的预防和治疗开辟新途径。

参　考　文　献

［１］　ＺａｕｓｉｎｇｅｒＳ，ＴｈａｌＳＣ，ＫｒｅｉｍｅｉｅｒＵ，ｅｔａｌ．Ｈｙｐｅｒｔｏｎｉｃｆｌｕｉｄｒｅｓｕｓｃｉｔａｔｉｏｎｆｒｏｍｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｒａｔｓ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，２００４，５５：６７９唱６８７．［２］　ＣｒｉｔｃｈｌｅｙＧＲ，ＢｅｌｌＢＡ．Ａｃｕｔｅｃｅｒｅｂｒａｌｔｉｓｓｕｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎｃｈａｎｇｅｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＮｅｕｒｏｌＲｅｓ，２００３，２５：４５１唱４５６．

［３］　ＧｅｒｍａｎòＡ，ＣｏｓｔａＣ，ＤｅＦｏｒｄＳＭ，ｅｔａｌ．Ｓｙｓｔｅｍｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆａｃａｌｐａｉｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒｅｄｕｃｅｓｂｅｈａｖｉｏｒａｌｄｅｆｉｃｉｔｓａｎｄｂｌｏｏｄ唱ｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒｐｅｒｍｅａｂｉｌｉ唱ｔｙｃｈａｎｇｅｓａｆｔｅｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｔｈｅｒａｔ．ＪＮｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，２００２，１９：８８７唱８９６．

［４］　ＺｕｂｋｏｖＡＹ，ＡｏｋｉＫ，ＰａｒｅｎｔＡＤ，ｅｔａｌ．Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃａｓｐａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｎｖａｓｏｓｐａｓｍｉｎｄｏｇｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇａｒｔｅｒｉｅｓ．ＬｉｆｅＳｃｉ，

２００２，７０：３００７唱３０１８．

［５］　ＪａｎｊｕａＮ，ＭａｙｅｒＳＡ．Ｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍａｆｔｅｒｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＣｕｒｒＯｐｉｎＣｒｉｔＣａｒｅ，２００３，９：１１３唱１１９．

［６］　ＺｕｂｋｏｖＡＹ，ＴｉｂｂｓＲＥ，ＣｌｏｗｅｒＢ，ｅｔａｌ．Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｉｅｓｉｎａｃａｎｉｎｅｄｏｕｂｌｅｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｍｏｄｅｌ．ＮｅｕｒｏｓｃｉＬｅｔｔ，２００２，３２６：１３７唱１４１．

［７］　ＯｇｉｈａｒａＫ，ＺｕｂｋｏｖＡＹ，ＢｅｒｎａｎｋｅＤＨ，ｅｔａｌ．Ｏｘｙｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ唱ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ，１９９９，９１：４５９唱４６５．［８］　ＭｅｇｕｒｏＴ，ＫｌｅｔｔＣＰ，ＣｈｅｎＢ，ｅｔａｌ．Ｒｏｌｅｏｆｃａｌｃｉｕｍｃｈａｎｎｅｌｓｉｎｏｘｙｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ唱ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ，２０００，９３：６４０唱６４６．

［９］　ＭａｔｚＰＧ，ＦｕｊｉｍｕｒａＭ，ＣｈａｎＰＨ．ＳｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｌｙｓａｔｅｐｒｏｄｕｃｅｓＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎａｐａｔｔｅｒｎｓｉｍｉｌａｒｔｏａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｍｏｕｓｅｂｒａｉｎ．ＢｒａｉｎＲｅｓ，２０００，８５８：３１２唱３１９．

［１０］　ＮａｕＲ，ＨａａｓｅＳ，ＢｕｎｋｏｗｓｋｉＳ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｎａｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｔｈｅｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓｉｎｈｕｍａｎｓｗｉｔｈｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅａｎｄｃｅｒｅｂｒａｌｈｙｐｏｘｉａ．ＢｒａｉｎＰａｔｈｏｌ，２００２，１２：３２９唱３３６．

［１１］　ＫｉｍｕｒａＨ，ＧｕｌｅｓＩ，ＭｅｇｕｒｏＴ，ｅｔａｌ．Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｃｙｔｏｋｉｎｅｓｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ．ＢｒａｉｎＲｅｓ，２００３，９９０：１４８唱１５６．

［１２］　ＰｒｕｎｅｌｌＧＦ，ＳｖｅｎｄｇａａｒｄＮＡ，ＡｌｋａｓｓＫ，ｅｔａｌ．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｂｒａｉｎａｆｔｅｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，２００５，５６：１０８２唱１０９２．

［１３］　ＭｅｇｕｒｏＴ，ＣｈｅｎＢ，ＬａｎｃｏｎＪ，ｅｔａｌ．Ｏｘｙｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎｉｎｄｕｃｅｓｃａｓｐａｓｅ唱ｍｅｄｉａｔｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈｉｎｃｅｒｅｂｒａｌｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．ＪＮｅｕｒｏｃｈｅｍ，２００１，７７：１１２８唱１１３５．

［１４］　ＺｈｏｕＣ，ＹａｍａｇｕｃｈｉＭ，ＫｕｓａｋａＧ，ｅｔａｌ．Ｃａｓｐａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｐｒｅｖｅｎｔｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍｉｎｄｏｇｍｏｄｅｌｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂ唱ａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＪＣｅｒｅｂＢｌｏｏｄＦｌｏｗＭｅｔａｂ，２００４，２４：４１９唱４３１．

［１５］　ＰａｒｋＳ，ＹａｍａｇｕｃｈｉＭ，ＺｈｏｕＣ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｂａｓｃｕｌａｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｒｅｄｕｃｅｒｓｅａｒｌｙｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙａｆｔｅｒｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．Ｓｔｒｏｋｅ，２００４，３５：２４１２唱２４１７．

［１６］　ＯｓｔｒｏｗｓｋｉＲＰ，ＣｏｌｏｈａｎＡＲ，ＺｈａｎｇＪＨ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｈｙｐｅｒｂａｒｉｃｏｘｙｇｅｎ唱ｉｎｄｕｃｅｄｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｉｎａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＪＣｅｒｅｂＢｌｏｏｄＦｌｏｗＭｅｔａｂ，２００５，２５：５５４唱５７１．

［１７］　ＹａｎＪ，ＬｉＬ，ＫｈａｔｉｂｉＮＨ，ｅｔａｌ．Ｂｌｏｏｄ唱ｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎｆｏｌｌｏｗｉｎｇｓｕｂａｒｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｍａｙｂｅｆａｃｉｌｉａｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈＰＵＭＡｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｅｎ唱ｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｆｒｏｍｔｈｅｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍ．ＥｘｐＮｅｕｒｏｌ，２０１１，２３０：２４０唱２４７．

［１８］　ＨｕＹ，ＢｅｎｅｄｉｃｔＭＡ，ＷｕＤ，ｅｔａｌ．Ｂｃｌ唱ＸＬｉｎｔｅｒａｃｔｓｗｉｔｈＡｐａｆ唱１ａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｓＡｐａｆ唱１唱ｄｅｐｅｄｅｎｔｃａｓｐａｓｅ唱９ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１９９８，９５：４３８６唱４３９１．

［１９］　ＹａｍａｕｒａＩ，ＴａｎｉＥ，ＳａｉｄｏＴＣ，ｅｔａｌ．Ｃａｌｐａｉｎ唱ｃａｌｐａｓｔａｔｉｎｓｙｓｔｅｍｏｆｃａｎｉｎｅｂａｓｉｌａｒａｒｔｅｒｙｉｎｖａｓｏｓｐａｓｍ．ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ，１９９３，７９：５３７唱５４３．

［２０］　ＭｉｎａｍｉＮ，ＴａｎｉＥ，ＭａｅｄａＹ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣａｎｄｃａｌｐａｉｎｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｌａｙｅｄｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍ．ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇ，１９９２，７６：１１１唱１１８．

［２１］　ＧｅｒｍａｎòＡ，ＣａｆｆｏＭ，ＡｎｇｉｌｅｒｉＦＦ，ｅｔａｌ．ＮＭＤＡｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｆｅｌｂａｍａｔｅｒｅｄｕｃｅｓｂｅｈａｖｉｏｒａｌｄｅｆｉｃｉｔｓａｎｄｂｌｏｏｄ唱ｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｃｈａｎ唱ｇｅｓａｆｔｅｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｔｈｅｒａｔ．ＪＮｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，２００７，２４：７３２唱７４４．

［２２］　ＣｈｅｎＧ，ＦａｎｇＱ，ＺｈａｎｇＪ，ｅｔａｌ．ＲｏｌｅｏｆｔｈｅＮｒｆ２唱ＡＲＥｐａｔｈｗａｙｉｎｅａｒｌｙｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙａｆｔｅｒｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＪＮｅｕｒｏｓｃｉＲｅｓ，２０１１，８９：５１５唱５２３．

［２３］　ＡｏｋｉＫ，ＺｕｂｋｏｖＡＹ，ＲｏｓｓＩＢ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆｃａｓｐａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｉｎｔｈｅｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｒｅｖｅｒｓａｌｏｆｃｈｒｏｎｉｃｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏ唱ｓｐａｓｍ．ＪＣｌｉｎＮｅｕｒｏｓｃｉ，２００２，９：６７２唱６７７．

［２４］　ＧｕｌｅｓＩ，ＳａｔｏｈＭ，ＮａｎｄａＡ，ｅｔａｌ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｂｌｏｏｄ唱ｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒ，ａｎｄｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＡｃｔａＮｅｕｒｏｃｈｉｒＳｕｐｐｌ，２００３，８６：４８３唱４８７．

［２５］　ＯｌｓｅｎＮＶ．Ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍｆｒｏｎｔｉｅｒｓｆｏｒｔｈｅｕｓｅｏｆｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ．ＣｌｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ，２００３，３７Ｓｕｐｐｌ４：３２３唱３３０．

［２６］　ＹａｎＪＨ，ＹａｎｇＸＭ，ＣｈｅｎＣＨ，ｅｔａｌ．Ｐｉｆｉｔｈｒｉｎ唱ａｌｐｈａｒｅｄｕｃｅｓｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍｂｙａｔｔｅｎｕａｔｉｎｇａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｎａｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈａｅｍｏｒｒｈａｇｅｍｏｄｅｌｏｆｒａｔ．ＣｈｉｎＭｅｄＪ（Ｅｎｇｌ），２００８，１２１：４１４唱４１９．

［２７］　ＺｈａｎｇＪ，ＺｈｕＹ，ＺｈｏｕＤ，ｅｔａｌ．Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ（ｒｈＥＰＯ）ａｌｌｅｖｉａｔｅｓｅａｒｌｙｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙｆｏｌｌｏｗｉｎｇｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｒａｔｓ：ｐｏｓｓｉｂｌｅｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆＮｒｆ２唱ＡＲＥｐａｔｈｗａｙ．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ，２０１０，５２：２５２唱２５７．

［２８］　ＧａｏＹ，ＤｉｎｇＸＳ，ＸｕＳ，ｅｔａｌ．Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｄａｒａｖｏｎｅｏｎｅａｒｌｙｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙｉｎｒａｔｓａｆｔｅｒｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＣｈｉｎＭｅｄＪ（Ｅｎ唱ｇｌ），２００９，１２２：１９３５唱１９４０．

［２９］　ＬｉｎＣＬ，ＤｕｍｏｎｔＡＳ，ＴｓａｉＹＪ，ｅｔａｌ．１７Ｂｅｔａ唱ｅｓｔｒａｄｉｏｌａｃｔｉｖａｔｅｓａｄｅｎｏｓｉｎｅＡ（２ａ）ｒｅｃｅｐｔｏｒａｆｔｅｒｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ．ＪＳｕｒｇＲｅｓ，２００９，１５７：２０８唱２１５．

［３０］　ＹａｎＪ，ＣｈｅｎＣ，ＬｅｉＪ，ｅｔａｌ．２唱ｍｅｔｈｏｘｙｅｓｔｒａｄｉｏｌｒｅｄｕｃｅｓｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍａｆｔｅｒ４８ｈｏｕｒｓｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｒａｔｓ．ＥｘｐＮｅｕｒｏｌ，２００６，２０２：３４８唱３５６．

［３１］　ＡｌｉＫｈａｌｉｌｉＭ，ＡｎｖａｒｉＭ，Ｈｅｋｍａｔｉ唱ＭｏｇｈａｄａｍＳＨ，ｅｔａｌ．ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＢｅｎｅｆｉｔｏｆＩｎｔｒａｖｅｎｏｕｓＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓＡｆｔｅｒＥｘｐｅｒ唱ｉｍｅｎｔａｌＳｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄＨｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎＲａｔｓ．ＪＳｔｒｏｋｅＣｅｒｅｂｒｏｖａｓｃＤｉｓ，２０１１．

［３２］　ＧｏｋｃｅＣ，ＧｕｌｓｅｎＳ，ＹｉｌｍａｚＣ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｓｉｌｄｅｎａｆｉｌｃｉｔｒａｔｅｏｎｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｏｓｐａｓｍａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｉｎｒａｔｓ．ＪＮｅｕｒｏｓｕｒｇＳｃｉ，２０１０，５４：２９唱３７．

（收稿日期：２０１１唱０９唱０５）

（本文编辑：戚红丹）

赵炜疆，秘勇建．实验性蛛网膜下腔出血凋亡机制及干预治疗研究［Ｊ／ＣＤ］．中华临床医师杂志：电子版，２０１１，５（２３）：７０６７唱７０６９．