硒蛋氨酸对人前列腺癌DU145细胞增殖与凋亡的影响

第９卷帮６斓２００８年１２月

北‘芦大学学撮（魏然科学版）

ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＢＥＩｌＩＵＡＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ）

Ｖ０１．９Ｎｏ．６

Ｄｅｃ．２（的８

交章缡号：ｔ００９－４８２２（２００８）０６－０５１３－０５

硒蛋氨酸对人前列腺癌

ＤＵ１４５细胞增殖与凋亡的影响

刘艳波１，一，芦丽莉１，葛贺１，越丽娟２，董妍３，赵雪俭２

（１，建华大学基础暇学茨，吉辣蠢林１３２０１３；２．密林大学基础医攀院，吉毒ｌ￡长春１３００２１；

３。美蕊柱兰大学ＲｏｓｗｅｌｌＰａｒｋ瘗诧擎藏治教磷室，美露窜法罗１０００２９）

摘要：网的观察硒蛋氮酸（ｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅ）对ＤＵｌ４５前列腺癌细胞增殖殿凋亡的影响，并初步探讨其作用机制．方法采用ＭＴＴ比色法观察１．２５，２．５０，５．００Ｉ且ｍｏｌ?Ｌ“硒蛋氨酸对ＤＵｌ４５细胞增殖活力的抑制作用；吖蓰橙染色烧察硒蛋氨酸诱蛰缨魏臻亡精魏；漉式缨缒零分析缨悠餍麓及凋亡，并诗葬缨麓孚均鹅亡指数；免疫缨羟霓攀按术麓察缨藤蠹激滔酶ｃａｓｐａｓｅ３戆表达情嚣．缕栗经１．筋，２。筠，５。００蝤ｍ蘸?Ｌ‘硒蛋氮酸处理舔ｈ看，ＤＵｌ４５细胞生长抑制率分别为ｔ６．３５％，３８．１０％和７３．５４％，３组闯比较差弊肖避著性（Ｐ《０。０１）；随硒蛋氨酸浓度升粥细胞生长抑制率增加，呈明显的剂赞依赖性．吖啶擞荧光染色可见缎１．２５，２．５０，５．００Ｉｘｍｏｌ?Ｌ。１硒蛋氨酸处理后的细胞呈明显凋亡形态，并随药物剂量增加凋亡细胞数增多；流式细胞术结果显示，经１．２５，２．５０，５。００ｐ。ｍｏｌ?Ｌ。硒蛋氢酸处瑾４８ｈ磊，英缎髓麓凋亡率分裂为５．３４％，８。７ｔ％秘ｔ３．６％，３组瓣毙较差舅毒显著性（Ｐ《０。０５），隧硒蛋氨酸浓度秀赢缨魏魏亡率舞裹，呈裁登依赖关系；受疫翅稔化学染色结聚显示，蘧善磋蘩氨酸剂避增加，细胞内激活的ｅａｓｐａｓｅ３表达上调．结论硒鬣氨酸对ＤＵｌ４５细胞具有明显的抑制作用，其机制可能与激满的ｃａｓｐａｓｅ途襁诱导细胞凋亡有关＋

关键词：细胞凋亡；硒蛋氨酸；前列腺肿瘤；缨胞周期

孛瑟分类警：Ｒ７３７，２５文豢拣识碣：Ａ

ＥｆｆｅｃｔｏｆＳｅｌｅｎｏｍｅ－ｔｈｉｏｎｉｎｅｏｎＡｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆ

ＰｒｏｓｔａｔｉｃＣａｎｃｅｒＣｅｌｌｓＤＵｌ４５

ＬＩＵＹａｈ．ｂ０１”，ＬＵＬｉ—ｌｉ，ＧＥＨｅｌ，ＺＨＡＯＬｉ－ｊｕａｎ２，ＤＯＮＧＹａｎ３，ＺＨＡＯＸｕｅ－ｊｉａｎ２

（Ｊ．ＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｅｉｈｕａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｌｉｎ１３２０１３，Ｃｈｉｎａ；

２．ＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００２１，Ｃｈｉｎａ；

３。ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，ＲｏｓｗｅＨＰａｒｋＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅＴｕｌａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｕｆｆａｌｏ１０００２９，ＵＳＡ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｐｒｏｓｔａｔｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＤＵｌ４５ａｎｄａｐｐｒｏａｃｈｔｈｅ

ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｉｅｒＤＵｌ４５ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＩ．２５．２．５０ａｎｄ５。００Ｉｘｍｏｌ?Ｌ—ｓｅｌｅｎｏｍｅ．ｔｈｉｏｎｉｎｅ．ｔｈｅｃｅｌｌｖｉａｂｉｌｉｔｙｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄｂｙＭＴＴｔｅｓｔ。Ｔｈｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｏｆ

ａｃｒｉｄｉｎｅ

ｏｒａｎｇｅｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅａｐｏｐｔｏｔｉｃｃｙｃｌｅａｎｄｃａｌｃｕｌａｔｅｔｈｅａｐｏｐｔｏｔｉｅｉｎｄｅｘ。Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｃｔｉｖｅｃａｓｐａｓｅ３ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＲｅｓｕｌｔｓＤＵｌ４５ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ１．２５。２，５０ａｎｄ５．００ｔＬｍｏｌ?Ｌ～ｓｅｌｅｎｏｍｅ．ｔｈｉｏｎｉｎｅａｆｔｅｒ４８ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅｏｆｃｅｌｌｌｉｎｅｗａｓ１６．３５％．３８．１０％ａｎｄ７３．５４％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｗｉｔｈｄｏｓｅ．ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ。ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｉｎｅｒｅａｓｉｎｇｏｆｓｅｌｅｎｏｍｅ－ｔｈｉｏｎｉｎｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｍａｎｎｅｒ．Ｔｈｅｒｅｅｘｉｓｔｅｄ

ｏｂｖｉｏｕｓｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ

ａｍｏｎｇｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ（Ｐ《０。０１）。Ａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅｓｔａｉｎｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｅｉｌｓ

收稿日期：２００８－０９－０２

基金项尉：吉林省人民政府人才开发基金资助课蹶（２００６Ｊ１９０２）．

作者简介：划艳波（１９７４一），瘦，讲师，博士研究嫩。点要从事前列腺瘸发病机制研究．

５１４北华大学学报（自然科学版）第９卷ｗｅｒｅａｐｏｐｔｏｔｉｃｓｔａｔｅｗｈｅｎｔｈｅｙｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ１．２５，２．５ａｎｄ５．０ｉｘｍｏｌ?Ｌ～ｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅ，ｔｈｅｎｕｍｂｅｒ

ｏｆａｐｏｐｔｏｔｉｅｃｅｌｌｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅｄｏｓｅ。Ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｗｈｅｎｔｈｅｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ１．２５．２．５０ａｎｄ５．００ｉｚｍｏｌ?Ｌ～ｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅａｆｔｅｒ４８ｈ，ｔｈｅａｐｏｐｔｏｔｉｃｒａｔｅｗａｓ５。３４％，８。７１％ａｎｄ１３。６％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｗｉｔｈｄｏｓｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ，ｔｈｅｒｅｅｘｉｓｔｅｄｏｂｖｉｏｕｓｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ

ａｍｏｎｇｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｃｔｉｖｅｃａｓｐａｓｅ３ｗａｓｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｏｆｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅｄｏｓｅ。Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ￥ｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅｃａｎｉｎｄｕｃｅｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｐｒｏｓｔａｔｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＤＵｌ４５ａｎｄｈａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔ，ｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｍａｙｂｅｒｅｌａｔｅｄｔｏａｃｔｉｖａｔｅｔｈｅｐａｔｈｗａｙｏｆ

ｃａｓｐａｓｅ?

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｐｏｐｔ０８ｉｓ；Ｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅ；Ｐｒｏｓｔａｔｉｃｎｅｏｐｌａｓｍ；Ｃｅｌｌｃｙｃｌｅ

前列腺癌是老年男性高发疾病，２００３年仅美黧发现新病例２２０９００入，死亡逛２８９００人．前列腺癌已经成为威胁老年男性健康非常重要的疾病之一ｕｊ．即使进行前列腺癌根治性手术，仍约有３０％的患者手术詹复发，因此，激素非依赖性前列腺癌成为治疗研究的又一热点．到目前为此，常规化疗对于激素毫车依赖性鞠转移蒋歹ｌｌ腺癌的治疗效果欠佳，因此，人们正在寻求副作用小而疗效可靠的药物泣ｊ。硒是入体必需的微量元素之一，人类流行病学研究发现硒的摄入量和癌症发生率呈负相关．硒摄人缺乏往往伴随癌症发生率的增加∞圳，而增加硒的摄人可降低某些癌症的发生率和死亡率，包括前列腺癌、子宫颈癌、直肠癌及乳腺癌等口引．目前，硒元素作为具有防癌抗癌效果勰微量元素，已弓ｌ起学术界的广泛重视，而网内关于硒蛋氨酸（ｍｅｔｈｙｌｓｅｌｅｎｉｎｉｅａｃｉｄ）抗前歹ｌ腺癌的骈究报道还较少．本实验旨在研究硒蛋氨酸对人前列腺癌细胞系ＤＵｌ４５生长和增殖的影响，并初步探讨其作用机制．

－ｌ材料与方法

１）主要试测：硒蛋氨酸由美国桂兰大学赠送，四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）为美国Ｓｉｇｍａ公司产品，激滔的ｅａｓｐａｓｅ３多克隧抗体麴子Ｔａｋａｒａ公霭，顺铭（ｄｉａｍｍｉｎｅｄｉｃｈｌｏｒｏｐｌａｔｉｎｕｍ，ＤＤＰ）为山东齐鲁制药厂生产．

２）细胞系及培养条件：人前列腺癌ＤＵｌ４５细胞株由美国社兰大学赠送，细胞培养于含１０％小牛瘟清的ＤＭＥＭ培养液巾，置于３７ｏＣ，５％ＣＯ：漫化的培养箱，待细胞长满８０％培养瓶时，分组热药．

３）实验分组：ＤＭＥＭ空白对照组，２ｉ出ｍｏｌ?ＬｑＤＤＰ组，硒蛋氮酸ｉ．２５，２．５０，５．００Ｉｘｍｏｌ?Ｌ。组．４）细胞形态观察：取对数生长期细胞，调整细胞密度为ｌ×１０５ｍＬ～，接种于２４孔板，ｌｍＬ／孑Ｌ。培养过夜后换瓶鲜的培养液，按前述分组加药，４８ｈ后倒置显微镜下观察细胞形态．

５）ＭＴＴ比色法：在９６孔培养板，接种细胞ｌ×１０５／孔，每组４孔，４４ｈ后每孔加ＭＷ（５ｇ?Ｌ－１）２０斗Ｌ，继续孵育４ｈ吸弃培养液，每孑Ｌ加入ＤＭＳＯ１００ｔｘＬ，震荡１０ｍｉｎ，用酶标仪（波长５７０ｎｍ）测定各孔吸光度值（点），计算细胞生长搀制率，搀簇率》３０％为细胞对该药敏感．抑制率＝［１一Ａ（试验组）崩（对照组）］×１００％。

６）吖啶橙染色：将１０ｍｇ吖啶橙溶于１００ｍＬｐＨ为６。８的ＰＢＳ中，过滤后４℃避光保存。细胞玻片经药物处理后４８ｈ，加入２０拉Ｌ的吖啶橙储存液，荧光显微镜下观察，拍照．

７）流式细胞仪检测：传代培养的ＤＵｌ４５细旅接种予培养瓶中（１ｘ１０６／瓶），次１３加药处理，４８ｈ矮收集缩您，冷ＰＢＳ洗２次，一２０℃７０％的冷乙酵刚定，加入１．５ｍＬＰＩ（５０ｍｇ?Ｌ卅）染色。混匀后上流式纲胞仪做单参数分析，用累积曲线分割法计算各期细胞比例．

８）免疫细胞化学：将大小适合的盖玻片放入６孔培养板中，接种纲胞力５×１０５／孑Ｌ，３７℃５％Ｃ０２中培养，次日加药，继续培养４８ｈ，ＰＢＳ清洗，４％多聚甲醛固定，常规方法观察细胞内激滔懿ｃａｓｐａｓｅ３表达情况．

９）统计举处理：数据处理采用ＳＰＳＳ９．０统计软件，细胞生长抑制率及细胞凋亡率用百分率表示，组闻比较采用独立样本间两两比较的Ｘ２检验．

２结果

２。｛缨胞彩态学观察

空白对照组细胞贴壁牢固，胞质中颗粒较少．经１。２５，２。５０，５．００Ｉｘｍｏｌ?Ｌ。硒蛋氨酸处理细胞４８ｈ后，细胞形态均发生明显改变：细胞呈类圆形，边缘毛糙不规则，胞质中颗粒增多，贴壁能力下降，艇出现悬浮细胞和细胞碎片，以５。００臻撒ｏｌ?Ｌ。组最为突出（与ＤＤＰ组类似）．表明硒蛋氨酸体外可以睨显据铡ＤＵｌ４５细惑垒长《觅图１）。

第６期洲铯波，等：硐琢钮酸对人前可４１杂癌ＤＵｌ４５细胞增殖呵厕亡的影响５１５

鞠１不同粼量的磺蛋氨酸怒灌ＤＵｌ４５缀脆勰ｈ磊的彩态学改变

Ｆｉｇ．１ＭｏｒｐｈｏｌｏｇｙｃｈａｎｇｅｓｏｆＤＵｌ４５ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅａｆｔｅｒ４８ｈｏｕｒｓ

２．２不同剂量硒甏氨酸对ＤＵｌ４５细胞增殖抑制｛乍用

ＭＴＵ结果显示，经１．２５，２．５０，５。００ｔｘｍｏｌ?Ｌ“硒蛋氨酸处理４８ｈ后，ＤＵｌ４５细胞Ａ值分另Ⅱ为０．７３士０。０４，０。５４±０。０５，０。２３４－０．０３，生长抑制率分别为１６．３５％，３８．１０％，７３．５４％，与对照组比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５），且随硒蛋氨酸浓度增加，抑刹作用逐渐增强，２。５０，５。００ｐ．ｍｏｌ?Ｌｑ硒蛋氮酸组与１．２５Ｉｘｍｏｌ?Ｌｔ硒蛋氨酸组比较差异具有显著性（Ｐ＜０。０５）．，

２．３吖啶橙染色检测细胞凋亡

荧光显微镜观察可觅空白对照组细胞呈均匀绿色，形态规则；经ｌ，２５，２。５０，５．００强ｍｏｌ?Ｌ以硒蛋氨酸处理４８ｈ后，ＤＵｌ４５细胞出现不规则橘黄色颗粒，随着硒蛋氨酸剂量增加，凋亡细胞率逐渐增加，望明曼剂量依赖性（见圈２）．

图２不同剂道的硒蛋氨酸处理ＤＵｌ４５细胞４８ｈ后吖啶橙染色观察细胞凋亡情况Ｆｉｇ．２ＡｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＤＵｌ４５ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆ

ｓｅｌｅｎｏｍｅ—ｔｈｉｏｎｉｎｅａｆｔｅｒ４８ｈｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅｓｔａｉｎｉｎｇ

２．４流式细胞术检测细胞凋亡

空南对照纽秃唆显酶凋亡峰．ＤＵｌ４５纲胞经

１．２５，２．５０，５．００Ｉｘｍｏｌ?Ｌ一硒蛋氨酸处理４８ｈ后，在Ｇｌ期前出现明显的凋亡峰；细胞凋亡率分剐为５．３４％，８．７１％和１３．６％，肿瘤细胞凋亡呈栽量依赖性；细胞周期发生改变，ｓ期和Ｇ；期细胞所占比例增多，硒蛋氨酸使细胞的生长阻滞在Ｇ，／Ｓ期（见

匿３）。

５１６北华大攀学报（自然科举版）第９卷

凰３不尚剂焘的硒蛋氮酸处瑷纲胞鸱ｈ后流戏绷胞术检测细胞凋意情泥

Ｆｉｇ．３ＡｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＤＵｌ４５ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆ

ｓｅｌｅｎｏｍｅ－ｔｈｉｏｎｉｎｅａｆｔｅｒ４８ｈｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ

２．５免疫细胞化学染色结果

空白对照组细胞激活的ｃａｓａｐａｅ３表达呈弱阳性，脆浆中只有少爨棕黄色颗粒，经ｌ。２５，２。５０，５。００ｌ童ｍｏｌ?Ｌｑ磷蛋氨酸处理４她磊，ＤＵｌ４５缁稳激活的ｃａｓａｐａｅ３表达爨逐渐增加，棕黄色颗粒明显增多，染色增强，以２．５０，５．００¨ｍｏｌ?Ｌ一组改变明显＜冤圈４）＋

图４不阊剂量的硒蛋氨酸处理Ｄｕｌ４５细胞４８ｈ藤，免疫细胞化学按术检测激瀵酶Ｃａｓｐａｓｅ３釜篷褒迭愦流

Ｆｉｇ。４ＤＵｌ４５ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆｓｅｌｅｎｏｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅａｆｔｅｒ４８ｈ。

ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｃｔｉｖｅｃａｓｐａｓｅ３ｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ

３讨论

硒与人体憋生理功能密切裰美，其参与体随多种生物酶的合成，对细胞的生长、繁殖和生理功熊越蓑重要的律恳研究表赣，硒对黪密骞黎好麓菝陡帮治疗作用，关于磷仡合物的抑癌机制，目前主要有以下４秭：１）含硒纯合物Ｗ降低化学致瘸物菔与ＤＮＡ

的共价结合，防止癌癍的发生；２）含磁化食物对某

第６期藏艳渡，等：舔援氮酸对入前列豫癣ＤＵｌ４５绣艴瓒殪与凋亡盼影＃惫５１７

些癌缨胞有特殊浆杀伤作用；３）当体内缨胞长时阀暴露予过多的氧化压力肘，纲胞会进入一种遗传不稳定状态，导致癌症的发生，而硒元素能参与并促进体内多种抗氧化酶的合成（如谷胱甘肽氧化还原酶、硫氧还原蛋白还原酶），缓解氧化压力，预防癣症的发生；４）含硒化合物可凋整和激活身体的免疫功能，从丽间接地抑制肿瘤的生长¨剖。

凋亡异常与肿瘤的发生、发展有着极其密切的关系，这也是近年来肿瘤防治领域的研究热点之一．细胞弼亡调控失效，会引起细胞过渡增殖或蠲亡减少，从而导致肿瘤韵发生。缨胞增殖与凋亡失败决定肿瘤的增长速度，其中比较重要的是细胞周期的调控，细胞被阻止在Ｇｌ／Ｓ期问Ｊ．目前已发现硒能触发细胞弼亡，不需要抑癌基因ｐ５３参与，其机制是诱导细脆循环蛋自的改变，阻止缎施瑙期Ｇ，／Ｓ向前继续分裂，使ＤＮＡ合成下降，硒一甲基硒代半胱氨酸导致细胞循环蔹白激酶ｅｄｋ２活性降低，使细胞分化不能通过Ｓ期，从而致使细胞生长受抑¨引．

本研究采用醑汀法观察硒鬣氨酸对ＤＵｌ４５细胞增殖盼影响，结果显示，硒蛋氨酸呈剂量依赖性抑铡ＤＵｌ４５细胞增殖；流式细胞仪检测发现硒蛋氨酸具有诱导ＤＵｌ４５细胞凋亡的能力，并且随着硒蛋氨酸作用浓度的升高，ＤＵｌ４５细胞发生凋亡的比率也随之增加；吖啶橙染色结果也显示，硒蛋氨酸诱导缅脆凋亡呈现翥ｊ羹依赖性，结果表明，硒蛋氨酸既可抑制ＤＵｌ４５纽胞增殖又可诱导其凋亡．

已知ｅａｓｐａｓｅ家族是细胞凋亡发生核调控的重要因素，ｃａｓｐａｓｅ８在细胞的凋亡中发挥启动作用，ｃａｓｐａｓｅ３为最蓬要的凋亡执行分子．各ｃａｓｐａｓｅ阎可裙嚣激活，进丽激发下一步的级联反应，导致缨胞凋亡【１¨．本研究免疫细胞化学染色结果，对照组ＤＵｌ４５细胞只有少量激活的ｃａｓｐａｓｅ３的表达，而硒蛋氨酸可上调激活的ｃａｓｐａｓｅ３表达．其机制可能为硒蛋氨酸激活了细胞内的凋亡信号通路中的ｅａｓｐａｓｅ３，因隽半胱氨酸蛋盘酶上有与锌结合的半胱氨酸活性位点，硒蛋氮酸与锌有较高的亲和力，从而使之与锌结合的ｃａｓｐａｓｅ释放，进而激活凋亡特异性核酸酶，降解细胞骨架蛋白Ｈ玉聆ｊ，使ＤＵｌ４５细胞凋亡，至于硒蛋氨酸诱导ＤＵｌ４５凋亡的信号转导通路尚需进一步探讨。

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【责任编辑：置坤】

硒蛋氨酸对人前列腺癌DU145细胞增殖与凋亡的影响

作者：刘艳波， 芦丽莉， 葛贺， 赵丽娟， 董妍， 赵雪俭， LIU Yan-bo， LU Lili， GE He ， ZHAO Li-juan， DONG Yan， ZHAO Xue-jian

作者单位：刘艳波,LIU Yan-bo(北华大学,基础医学院,吉林,吉林,132013;吉林大学,基础医学院,吉林,长春,130021)， 芦丽莉,葛贺,LU Lili,GE He(北华大学,基础医学院,吉林,吉林,132013)

， 赵丽娟,赵雪俭,ZHAO Li-juan,ZHAO Xue-jian(吉林大学,基础医学院,吉林,长春

,130021)， 董妍,DONG Yan(美国杜兰大学,Roswell,Park,癌化学防治教研室,美国,布法罗

,100029)

刊名：

北华大学学报（自然科学版）

英文刊名：JOURNAL OF BEIHUA UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)

年，卷(期)：2008,9(6)

参考文献(13条)

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北华大学学报（自然科学版）2008,9(6)

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