邻甲苯胺法测定血糖实验报告

邻甲苯胺法测定血糖实验报告

一、实验目的

实验旨在使用邻甲苯胺法测定血糖水平。

二、实验原理

邻甲苯胺法是一种常用的血糖测定方法，它是一种光敏催化方法，可以用来测定和分析人血液中的血糖含量。在这个过程中，一种名为邻甲苯胺的特殊分子会实现光敏催化，将血液中的血糖原子转化为光，根据转换出的光强度可以确定血液中血糖的含量。

三、实验材料

（1）血液标本；

（2）50mL蒸馏水；

（3）邻甲苯胺；

（4）吸光度测量仪；

（5）20mL分离管。

四、实验步骤

（1）将20mL分离管中放入50mL蒸馏水，加热至100℃；

（2）在分离管内加入4mg邻甲苯胺，搅拌均匀；

（3）将血液标本以1:1的比例加入分离管中，然后搅拌均匀；

（4）将分离管中的混合液放入吸光度测量仪，在660nm波长下进行测定；

（5）根据测量出的光强度可以计算出血液中的血糖浓度。

五、实验结果

根据测量出的光强度，可以计算得出血液中的血糖浓度为6.0 mmol/L。

六、实验结论

本次实验使用邻甲苯胺法测定血液中的血糖浓度，结果显示血液中的血糖浓度为6.0 mmol/L，结果合理有效。

邻甲苯胺法测定血清

邻甲苯胺法测定血清（浆）葡萄糖 [原理] 在热的醋酸溶液中，葡萄糖醛基与邻甲苯胺缩合、脱水，生成希夫氏碱（Schiff base ），经分子重排生成蓝绿色化合物，其颜色深浅在一定范围内与血糖浓度成正比。 [试剂] 1．邻甲苯胺试剂 称取硫脲(AR)2.5g ，溶于冰醋酸(AR)750ml 中。将此液转入1 L 容量瓶内，加邻甲苯胺150ml ，2.4%硼酸溶液100ml ，用冰醋酸定容至刻度。此溶液应置棕色瓶内室温保存，至少可应用2个月。新配制试剂应放置24h 后待“老化”使用，否则反应产物的吸光度低。 2．100mmol/L 葡萄糖标准贮存液 称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g ，溶于12mmol/L 苯甲酸溶液约70ml 中，以12mmol/L 苯甲酸溶液定容至100ml 。2h 以后方可使用。 3．5.0mmol/L 葡萄糖标准应用液 吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml 放于100ml 容量瓶中，用12mmol/L 苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。 4．0.3mol/L 三氯醋酸溶液 称取三氯醋酸5g ，溶于蒸馏水70ml 中，然后用蒸馏水定容至100ml ，混匀即可。 [主要器材] 1．试管及试管架 2．刻度吸量管 3．721型分光光度计 [操作步骤] 1． 血清、血浆、脑脊液及清亮的胸腹水按表8操作。 CHOH —CHOH CHOH —CHO HO —CH 2 葡萄糖 羟甲基糠醛 HC CH O C C CHO OH — CH 2 2 羟甲基糠醛 邻甲苯胺 醛亚胺（蓝绿色） HC CH O C C CHO OH —CH 2 HC CH O C C CH= OH —CH 2 N + H 2N

血糖含量的测定――邻甲苯胺法(O-toluidine boric,TB法)

血糖含量的测定――邻甲苯胺法（O-toluidine boric，TB法） 实验原理 血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。目前国 内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值：空腹全血为3.6～5.3毫摩尔/升（65～95 毫克/分升），血浆为 3.9～6.1毫摩尔/升。后者由于血中绝大部分非 糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高 或过低, 结果较可靠, 其正常值：空腹全血为3.3～5.6毫摩尔/升（6 0～100毫克/分升），血浆为3.9～6.4毫摩尔/升（70～115毫克/分升）。本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质 中加热脱水反应生成5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲 苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过比色可以定量。 试剂和器材 一、试剂 邻甲苯胺试剂：:称取硫脲1.5ｇ溶于750ｍL冰醋酸中, 加邻甲苯胺150 ｍL及饱和硼酸40ｍL, 混匀后加冰醋酸至1000ｍL, 置棕色瓶中，冰箱 保存。 葡萄糖标准溶液：5.0mg/mL，临用时稀释成1.0 mg/mL。 二、材料 人血清。 三、器材 具塞试管1.5×15cm（×8）；分光光度计。 操作方法 一、制作标准曲线

取6支试管编号后，按下表顺序加入试剂： 管号0 1 2 3 4 5 标准葡萄糖液(mL) 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 蒸馏水(mL) 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 邻甲苯胺试剂(mL) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 A630 加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用1c m比色杯，试剂空白为参比，测定 630nm 处吸光值，绘制标准曲线。 二、样品测定 取3支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定： 管号对照样品①样品② 稀释的未知血清样品(mL) 0 0.10 0.10 蒸馏水(mL) 0.10 0.00 0.00 邻甲苯胺试剂(mL) 5.0 5.0 5.0 A630 加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用 1 cm比色杯，试剂空白为参比，测定630nm 处吸光值，从标准曲线中可查出样品中血糖含量。 注意事项

激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定

生物化学实验 实验名称：激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定 时间：2014年6月9日星期一 姓名： 学号：201312201202003 指导老师：毛水龙老师 一，实验目的 掌握血糖的测定原理和方法；掌握血糖的正常范围及意义；熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。 二，实验原理 家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其；进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。 实验采取前后对照的方法，对家兔注射肾上腺素和胰岛素，并通过耳缘静脉采血，获取激素注射前后的血液样本，采用邻甲苯胺法处理样本，最终与标品比色得出结论。 1.调节血糖的激素有：胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。 2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体，通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶，同时抑制糖原合成酶，导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是：降低肝细胞cAMP水平，从而抑制

肝磷酸化酶，激活糖原合成酶，促进肝糖原的合成；胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成，阻遏糖异生关键酶的合成；胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散，促进糖的利用。

3.血液中的葡萄糖，在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛（或称羟甲基糠醛）。后者在与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫式碱（Schiffbase）。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色，即可求得待测血液中葡萄糖的含量。三，实验材料 1.材料：家兔两只,刀片，草酸钠，小烧杯。 2.试剂：①肾上腺素(1mg／lml)②胰岛素(20单位／ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯胺-硼酸⑥5％三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液 四，实验方法 1.取健康正常家兔一只，实验前饥饿14~16h左右，称体重。 2.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛，用酒精棉球擦拭使其充血，再用干棉球擦干。刀片划开耳缘静脉，使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中，注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。 3.给家兔注射肾上腺素（0.5mg/只），半小时后同样方法采得血液。 4.缓缓放入洁净试管内，加5%三氯醋酸3.6ml，同时摇动使之充分混匀。3000rpm离心5min，制得无蛋白血滤液（上清液）。

血清生化物质测定步骤

血糖测定方法（邻甲苯胺法） 一、原理：葡萄糖为一含醛基的己糖，在酸性与加热情况下脱水反应生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛，再与邻甲苯胺缩合成芳香族第一级胺青色的席弗氏碱。 二、试剂： 1、邻甲苯胺试剂：取冰醋酸920ml，加入硫脲（Thiourea）1.5g，待其溶解，加邻甲苯胺（o-Toluidine）80ml，充分混合后，取此液960ml加入饱和硼酸溶液40ml，混匀，放置于棕色瓶中。 2、饱和硼酸溶液：称取硼酸6g，以蒸馏水溶解并稀释至100ml，放置一夜，过滤即可应用。 3、葡萄糖贮存标准液（1ml=5mg）：将少量无水葡萄糖，CP置于硫酸干燥器内一夜。精确称取此葡萄糖500mg，以饱和苯甲酸溶液溶解并转移入100ml 容量瓶内，以饱和苯甲酸溶液加至刻度。此液可长期保存。 4、葡萄糖应用标准液（1ml=0.05mg）：取葡萄糖贮存标准液1ml置于100ml 容量瓶内，加入饱和苯甲酸溶液至刻度。 5、饱和苯甲酸溶液：称取苯甲酸（Benzoicacid）2.5g，于800ml蒸馏水中，加热溶解，冷却后加蒸馏水至1000ml。 三、操作： 放沸水煮沸8min，冷水冷却，用640nm或红色滤光板光电比色，用蒸馏水作空白，记录各读数。 计算：（测定-空白）/（标准-空白）*0.1*100/0.1=葡萄糖毫克%

血清白蛋白测定（酚试剂法） 一、原理：用硫酸钠将血清中球蛋白沉淀，所分离的白蛋白加酚试剂而呈蓝色， 与含酪氨酸的标准管比色，求得白蛋白量。血清总蛋白减去白蛋白即为球蛋白量。 白蛋白与球蛋白分离：球蛋白与白蛋白不同，具有易溶于稀盐溶液而不溶于浓盐溶液的特点。故以23%硫酸钠或21%亚硫酸钠溶液沉淀球蛋白。再利用乙醚将白蛋白与球蛋白分离。 二、试剂： 1、酪氨酸标准液（1ml=0.2mg）：精确称取酪氨酸（Tyrosine）0.2g，置于1000ml 容量瓶中，用0.1当量盐酸溶液稀释至刻度。 2、0.1当量盐酸溶液：取浓度为36.5%，浓度为11.9M的市售浓HCl加水配制 成1L: 取XL的上述浓盐酸,因为盐酸是1-1价的离子组成的酸,当量浓度等于MOL浓度,据配制前后溶质的MOL数相等,则有如下计算: (X*11.9)/0.1=1,X=0.0084L.将浓盐酸加入到1000ML的容量瓶中,再加水到1L 刻度为止即得0.1个当量的盐酸. 3、23%硫酸钠溶液：称取无水硫酸钠230g，加蒸馏水至1000ml。加热溶解， 冷却后补足蒸馏水量。 4、酚试剂：钨酸钠（NaWO4·2H2O）100g 钼酸钠（NaMO4·2H2O）25g 蒸馏水700ml 置于2000ml烧瓶内，再加入85%磷酸（H3PO4）50ml，浓盐酸（HCl）100ml。 应用回流冷凝器煮沸10小时（烧瓶内可加入小玻璃珠10数颗，以防煮沸时溶液冲入冷凝管而溢出）。除去冷凝管后，再加入硫酸锂150g，蒸馏水50ml，溴液（或30%过氧化氢）数滴，继续煮沸15分钟，以除去多余的溴（或过氧化氢）。因溴刺激性大，应在排气柜内进行。制成的酚试剂为鲜明黄色，保存于棕色瓶内备用。 5、10%氢氧化钠溶液：取氢氧化钠100g，加100ml蒸馏水至1000ml。

葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验

葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验.txt台湾一日不收复，我一日不过4级！如果太阳不出来了，我就不去上班了；如果出来了，我就继续睡觉！ 葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验 更新日期：2010-10-15 点击： 农嵩 摘要以生物化学方法—葡萄糖氧化酶法(GOD法)为对比方法，有机化学方法—邻甲苯胺法(O-T法)为候选方法作血糖浓度测定对比试验，考察分析两法的相关性及其优缺点，为将来改进教学实验及临床应用提供参考。实验结果表明，回归方程表达出系统误差不明显，相关系数r=0.985，两法相关性比较密切。 关键词血糖；GOD法；O-T法；相关分析 Contrast test on determination of blood sugar with methods of glucose-oxidase (GOD) and o-toluidine(O-T) Nong Song Dept. of Biochemistry, Youjiang Medical college for National Minorities (Bose 533000) Abstract Contrast test was made with GOD(contrast method) and O-T(candidate solution method) for determining blood sugar contents. The correlation and advantages and disadvantages of the two methods were observed and analyzed for the reference of improving teaching experiments and clinical application. Results showed that the systematic error expressed by regression equation was not obvious, correlation coefficient r=0.985. Correlation of the two methods was comparatively closed. Key words blood sugar; GOD method; O-T method; correlation analysis 血糖测定法大体分为四种：无机化学方法、有机化学方法、生物化学方法及近代科学技术，各存在不同的优缺点。GOD法测定血糖浓度的准确性、精密度已被公认是较好的［1］，而O-T法则定血糖是特异性最高的非酶法，本试验以GOD法为对比方法，以O-T法作候选方法，测定40例包括各种疾病的样品血糖浓度，所得结果用相关回归分析，考察两法的相关性，可反映出O-T法的系统误差。测定结果报道如下。 1 材料与方法 1.1 试剂GOD法用标佳有限公司提供的试剂盒。O-T试剂配制［1］：称取硫脲1.5g溶于750ml冰醋酸中，加邻甲苯胺150ml及饱和硼酸40ml，混匀后加冰醋酸至1000ml。 1.2 标本来源附属医院检验科提供的各种疾病血清样品40例。 1.3 仪器日立220A型紫外分光光度计。 1.4 操作方法 1.4.1 GOD法按表1操作。 表1 GOD法测定血糖操作程序

糖及其代谢物的测定

第八章糖及其代谢物的测定 第一节血清(浆)葡萄糖测定 血液中的葡萄糖称为血糖。血糖测定是临床生化检验中历史最久、占日常工作量比重较大的项目之一。过去测定血糖多采用全血，但目前多采用血清或血浆。测定血糖的方法很多，可分为三大类：氧化还原法、缩合法及酶法。国际上推荐的参考方法是已糖激酶法，但试剂比较昂贵，不适用于常规分析。我国已淘汰氧化还原法，推荐的方法是葡萄糖氧化酶法，而目前有些基层单位仍沿用邻甲苯胺法。 实验39 葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 【原理】葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 【试剂】 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0) 称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于蒸馏水800ml中，用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调pH至7.0，用蒸馏水定容至1L。 2．酶试剂称取过氧化物酶1 200U，葡萄糖氧化酶1 200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml中，用1 mol/L NaOH调pH至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。 3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。 4．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。 5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至l L。 6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L 苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。 7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。

胰岛素对血糖浓度的影响实验报告

胰岛素对血糖浓度的影响实验报告 胰岛素对血糖浓度的影响实验报告 实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 实验六胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响实验五葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 课程名称:生物化学与分子生物学实验课年级:2004专业、层次:临床医学本科授课教师:汪宗桂职称:助教学时:3学时基本教材:自编《生物化学与分子生物学实验指导》 教学目的与要求: 1、观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。 2、掌握血糖浓度的测定方法。 3、掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和方法。 4、掌握血糖浓度的正常参考值，了解血糖测定的临床意义。 大体内容与时间安排: 1、胰岛素和肾上腺素对血糖浓度影响的原理 5min 2、胰岛素和肾上腺素对血糖浓度影响的注意事项5min 3、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理 5min 4、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的操作改动及注意事项5min 5、学生做实验 100min 教学方法:讲授式+启发式 教学重点、难点: 重点:1、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理 2、葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的注意事项 难点:葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的注意事项 一、实验原理 (一)胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 激素是调节机体血糖浓度的重要因素。胰岛素能降低血糖，肾上腺素等激素能升高血糖。 本实验给两只家兔分别注射胰岛素或肾上腺素，取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量，观察注射前后血糖浓度变化，从而了解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。

(二)葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 本实验是葡萄糖氧化酶 (GOD)和过氧化物酶 (POD) 相偶联发生的偶联反应。 第一步:葡萄糖氧化酶利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。第二步:过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原 性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物(苯醌亚胺非那腙)。 二、操作步骤 (一)胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 1、动物准备:取正常家兔两只，实验前预先饥饿16小时，称体重(—般为2-3kg)。 2、注射激素前取血:—般多从耳缘静脉取血:剪去耳毛，用二甲苯擦拭兔耳，使其血管充血，再用干棉球擦干，于放血部位涂 一薄层凡士林，再用粗针头或刀片刺破静脉放血。采用葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法时，则将静脉血收集于干净试管中,静置至血清析出。取血完毕，用干棉球压迫血管止血. 3、注射激素:—只兔子注射胰岛素;皮下注射，剂量为kg体重。另一只兔子注射肾上腺素:皮下注射，剂量为kg体重。分别记录注射时间。 4、注射激素后取血:方法同上;取血时间:肾上腺素注射后30分钟;胰岛素注射后1小时。从注射胰岛素的兔子取血后，应立即用10ml 250g/L葡萄糖做腹腔内或皮下注射，以防家兔发生胰岛素休克(低血糖休克)。 5、测定血糖:分别测定各血样的糖含量，方法请见实验四“血糖测定”。 6、计算:计算注射胰岛素后血糖降低和注射肾上腺素后血糖增高的百分率: 血糖改变百分率(%)BS100% 注射前BS BS=注射后BS—注射前BS;“+”值表示BS升高;“—”值表示BS降低(BS—血糖)。 (二)葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 1、取试管3支，按下表操作。 葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤 加入物(ml) 血清 葡萄糖标准应用液

葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺微板法)

葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺微板法) 简介： 葡萄糖(Glucose, Dextrose ，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C 6H 12O 6，分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法。 Leagene 葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺微板法)检测原理是葡萄糖在加热的有机酸中脱水后能与邻甲苯胺缩合呈雪夫氏碱，后者呈蓝绿色，其最高吸收峰为420nm 颜色深浅与葡萄糖含量成正比，经酶标仪与标准品进行对比求得葡萄糖量。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定。本试剂盒的特点：1、特异性高，其测定结果为真糖值；2、不受还原物质干扰；3、无需去除血浆或血清中的蛋白质。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围(25mmol/L)，用蒸馏水稀释后检测。 ②细胞样本： a 、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，弃上清，留取沉淀。 b 、用PBS 或生理盐水清洗1~2次，，弃上清，留取沉淀。 c 、加入PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W ，每次3~5s ，间隔30s ，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。亦可用1~2% Triton X-100冰浴，制备好的裂解液不可离心，待用。 ③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)=1：9的比例，加入生理盐水或PBS ，冰浴条件下手动或机械匀浆。2500~3000g 离心10min ，取上清待用。 2、 制作葡萄糖标准曲线：取离心管5支，依次加入Glu 标准(10mg/ml)0.125ml 、0.25ml 、 0.5ml 、0.75ml 、1.0ml ，再以蒸馏水稀释至2.5ml 。具体见下表： Glu 标准(10mg/ml)(μl) 12.5 25 50 75 100 蒸馏水(μl) 237.5 225 200 175 150 编号 名称 TC0715 100T Storage 试剂(A): Glu 标准(10mg/ml) 1.5ml 4℃ 避光 试剂(B): O-Toluidine 显色液 50ml 4℃ 避光 使用说明书 1份

激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定论文书写

激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定 姓名：刘勇学号：201109155261 武汉科技大学医学院临床医学1106班湖北武汉430065 [摘要] 目的探讨胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响 方法采用邻甲苯胺法测血糖浓度 结果注射胰岛素的家兔血糖由101.0mg%降低到86.56mg%。注射肾上腺素的家兔血糖由132.0mg%升高到269.1mg%。 结论胰岛素用药后血糖降低，肾上腺素用药后血糖升高。 [关键词] 胰岛素；肾上腺素；血糖． 引言正常情况下，血糖浓度在各种因素调解下，维持相对恒定，但是现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症，目前并无良药可医，对于此种病当以预防为主。因此身为医学生，掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。 1 材料与方法 1.1 取预先饥饿14-16小时的正常家兔2只，称重。 1.2 从耳缘静脉采血：剪毛→二甲苯棉球擦拭→干棉球擦干→碘酒、酒精消毒→7号针头穿刺取血→放入加有抗凝剂（草酸钠：2mg / ml）的烧杯中→摇匀。 1.31只家兔肌肉注射胰岛素（5U / Kg , 规格：5U / ml），另一只家兔皮下注射肾上腺素（0.5 mg / 只，规格：mg / ml）。 1.4 30分钟后，分别从耳缘静脉取血或心脏取血。 1.5无蛋白血滤液的制备：取短试管4只，各加胰前、胰后、肾前、肾后等

抗凝血0.4 ml，用滤纸擦净粘附于吸管尖端外表面的血液，再加入5%三氯醋酸3.6ml，边加边摇，充分混匀。待血液由鲜红色变为暗红色（或酱油色），3000rpm 离心5min，上清即为无蛋白血滤液。 1.6 取试管6支，编号，按下表操作（单位：ml） 各管分别混匀，同时置于100℃水浴加热8分钟，流水冷却。630 nm进行比色，以空白管校正零点，读取各管光密度。 2 结果 2.1标准管光密度值为0.4123，胰前管的为0.4163，胰后管的为0.3569，肾前管0.5444，肾后管1.1094。

血糖实验

题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定 系部医学院 专业临床 班级临床1004 学号200909155140 姓名刘兴志 指导教师赵雪花 完成日期2011 年9 月16日

【摘要】 目的: （1）掌握血糖测定的原理和方法。 （2）掌握血糖正常的范围和意义。 （3）熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。 方法： 取正常家兔两只，饥饿14-16小时，各空腹取血10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5单位/公斤），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只），半个小时后再次取血。测量血糖浓度。 结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾上腺素的家兔，血糖浓度升高。 结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。 【关键词】 胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。 材料与方法 1.实验材料与试剂 正常家兔两只。肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉 球，饱和硼酸溶液（6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可），邻甲苯 胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液， 标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。 2.实验对象 正常家兔 3.实验方法步骤 3.1取正常家兔两只。实验前预先饥饿14-16h，称其体重并记录（2-3公斤为宜）。 3.2药前取血。先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充 血，再用干棉球擦干。碘酒，酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛 有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml血）的小烧杯收集10ml左右的血液。收集时注意 摇匀以防血液凝固。取血完毕，用干棉球压迫止血。 3.3 注射胰岛素和肾上腺素。取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5单位/ 公斤为宜），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜）。注射完毕后，稳定家兔情 绪，放回兔笼。 3.4药后取血。药后半小时，再次从耳缘静脉取血。方法同3.2。 3.5制备无蛋白学滤液。用微量加样器取抗凝血0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端 外表的血液，缓慢注入洁净小试管。然后加入5%三氯醋酸3.6ml，边加边摇匀。 最后置于离心机中，3000rpm离心五分钟，取得上清液即为无蛋白学滤液。按 此法，可制得药前药后血滤液。 3.6制备待测液。取4支试管，编号，按下表操作。

18生物化学实验吴宪Folin法测定血糖含量

18生物化学实验--吴宪-Folin法测定 血糖含量 标题：18生物化学实验——吴宪-Folin法测定血糖含量 一、实验目的 1.掌握吴宪-Folin法测定血糖含量的原理和方法。 2.学习使用分光光度计测量样品吸光度。 3.了解血糖的生理意义及其调节机制。 二、实验原理 吴宪-Folin法是一种利用邻甲苯胺和硫酸铜反应生成紫红色络合物的原理，通过测量该络合物在特定波长下的吸光度来测定血糖含量的方法。由于葡萄糖分子中含有醛基，因此可以利用这一特性进行测定。本实验采用吴宪-Folin法进行血糖含量的测定。 三、实验步骤 1.样品准备：收集受试者在禁食12小时后的静脉血，分离血清备用。 2.试剂准备：将邻甲苯胺、硫酸铜、碳酸钠等试剂按照配方准确称量，溶解定 容，现配现用。 3.测定步骤：将试剂和样品按照规定比例混合，在规定温度下静置一段时间， 用分光光度计在特定波长下测量吸光度，记录数据。 4.数据处理：根据吸光度和标准曲线计算血糖浓度。 四、实验结果与数据分析 1.数据记录：记录受试者血糖吸光度数据（表1）。 表1：血糖吸光度数据记录表

表2：血糖浓度计算表 3.数据统计：对所有受试者的血糖浓度进行平均值和标准差统计（表3）。 表3：血糖浓度统计表 平均值：x̄= ΣC/n (mg/dl) 标准差：s= [Σ(C-x̄)²/n]½ 五、结论总结与讨论 根据实验数据，我们得出以下结论： 1.所有受试者的血糖浓度均处于正常范围内。这表明受试者在禁食12小时后 的血糖水平处于生理正常范围。这一结果与我们所知的人体在禁食状态下的血糖调节机制相符。当人体处于禁食状态时，胰高血糖素分泌增加，促进肝糖原分解，使血糖水平维持在正常范围。 2.实验结果存在一定差异。这可能与个体差异、采血时间、实验操作等因素有 关。为了获得更为准确的数据，需要进一步改进实验方法，提高操作精度和标准化程度。此外，对于不同个体之间的比较，应考虑个体差异对实验结果的影响。

生物化学--实验七邻甲苯胺法测定血糖

生物化学--实验七邻甲苯胺法测定血糖实验七邻甲苯胺法测定血糖 【目的要求】 1.掌握邻甲苯胺血糖测定法的基本原理及操作方法。 2.熟悉邻甲苯胺血糖测定法的影响因素及控制方法。 3.了解邻甲苯胺血糖测定法的临床意义及应用。 【实验原理】 血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺(Schiff硷)。血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在680nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9,5.6mmol / L (70,100mg %)。 CHOH——CHOH HC——CH 酸中? CHOH CHOH—CHO C C—CHO HOHC 2HOHC O 2 HO 2 己醛糖羟甲基糠醛 CH3 CH 3 HC———CH HN— 2 C C—CH ,N— HOHC O 2 邻甲苯胺醛亚胺(兰色) 【实验准备】 一、器材 1. 721型分光光度计、沸水浴。 2. 5×15cm试管、刻度吸量管。 二、试剂

1.邻甲苯胺试剂称取硫脲(AR)级 2.5g,溶于750ml冰醋酸(AR级)中，将此溶 液转移入1L容量瓶内，加入刚蒸馏过的邻甲苯胺150ml，2.4, 硼酸溶液100ml及冰醋酸至1000ml刻度，置棕色瓶中至少可用两个月。 2.葡萄糖标准储存液(10 mg / ml) 用0.25,苯甲酸溶液配制。 3.葡萄糖标准应用液(1mg / ml) 取贮存液10ml放入100ml容量瓶中，用0.25,苯甲酸溶液稀释至100ml。 【实验操作】 1.采得待测血样(抗凝)后立即离心以分离血浆(3,000转离心15分钟)。 2.取干燥试管3支，分别标出号码，按下表添加试剂。 邻甲苯胺法测血糖操作表 管别测定管标准管空白管试剂(ml) 血清(浆) 0.20ml ?? ?? 葡萄糖标准液 ?? 0.20ml ?? 蒸馏水 ?? ?? 0.20ml 邻甲苯胺试剂 6.0ml 6.0ml 6.0ml 3.混匀各管内容物置沸水浴中加热15分钟后取出用流水冷却。 4.以空白管校正零点，读取各管680nm处吸光度值。 5.计算 测定管吸光度 100/0.2血糖mg%,× 葡萄糖标准液值× 标准管吸光度 【注意事项】 1.本法不需要除去蛋白质，邻甲苯胺试剂只与糖醛起反应，不与血中其他还原物质起反 应。故测定值较Folin-吴宪法为低。 2.显色反应与水的含量有关，故应使标准管和测定管的含水量一致。 3.温度 对显色反应有明显影响，煮沸时间和温度应准确控制。 4.显色后颜色不稳定，室

胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响实验设计

胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 【实验目的】 观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。 掌握血糖浓度的测定方法。 掌握血糖浓度的正常参考值、了解血糖测定的临床意义。 【实验原理】 血清中的糖称为血糖，绝大多数情况下都是葡萄糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。正常人在清晨空腹血糖浓度为80～120毫克/100ml。 使血糖浓度降低的激素：胰岛素 胰岛素对血糖的调节机制，首先是使肌肉和脂肪组织细胞膜对葡萄糖的通透性增加，利于血糖进入这些组织进行代谢。胰岛素还能诱导葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的合成，医学教|育网搜集整理加速细胞内葡萄糖的分解利用。胰岛素通过使细胞内cAMP含量减少，激活糖原合成酶和丙酮酸脱氢酶系，抑制磷酸化酶和糖异生关键酶等，使糖原合成增加，糖的氧化利用、糖转变为脂肪的反应增加，血糖去路增快；使糖原分解和糖异生减少或受抑制，使血糖来源减少，最终使血糖浓度降低。 使血糖浓度升高的激素：肾上腺素 肾上腺素的作用机制是通过肝和肌肉的细胞膜受体、cAMP、蛋白激酶级联激活磷酸化酶,加速糖原分解,使血糖升高.在肝脏,糖原分解为葡萄糖,在肌肉,则经糖酵解途径生成乳酸,并通过乳酸循环间接升高血糖水平.主要在应急情况下发挥调节作用.是强有力升高血糖的激素。 邻苯甲胺法：本实验采用邻甲苯胺法测定血糖，其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过比色可以定量 【实验试剂】 肝素抗凝剂、凡士林、二甲苯、抗凝剂、胰岛素、0.1%肾上腺素液、邻苯甲胺试剂、蒸馏水、葡萄糖标准液 【实验操作】 1.动物准备及采血 取空试管4支，编号1,2,3,4，分别加入肝素抗凝剂0.01ml。取空腹16小时以上的家兔两只，分别编号1,2，称体重并记录。 用耳静脉采血法:先剪去兔儿静脉的毛，再用二甲苯擦拭兔耳部静脉，使其充血，在其周围抹上凡士林防止血液污染，用刀片轻轻挑破边缘耳静脉，放血入含抗凝剂的试管1和2，约需2ml至3ml，边滴边摇，以防凝固，取血完毕，用干棉球压迫血管止血。 2.注射激素并采血 1号兔臀部皮下注射胰岛素，一小时后于心脏取血到抗凝管3，测定血糖，将2号兔臀部皮下注射0.1%肾上腺素液，剂量为每公斤体重0.4ml，观察兔子情况。30mins后，心脏取血入抗凝管4中。心脏采血法：将注射器肝素化后，置家兔于仰卧位，固定四肢，在左侧胸壁3至4肋间，摸到心搏最明显处，垂直进针，深度约3cm，当有落空感时，可感觉针尖随心搏而动，固定针头，采血8ml左右，放入抗凝管中。 3.测定注射前后的血糖 将收集的4管血液离心10mins，取上层血浆，分别制成胰岛素前1，胰岛素后2，肾上腺素前1，肾上腺后2。取干燥的试管6支，编号并按表操作，混匀，放入沸水浴15mins，冷却，

【诊断学总结】临床常用生物化学检测

【诊断学总结】临床常用生物化学检测 临床常用生物化学检测 第一节血糖及其代谢物检测 空腹葡萄糖检测： [参考值] 邻甲苯胺法为3.9-6.4mmol/L [临床意义] 1、增高见于 •1）1型或2型糖尿病； •2）内分泌疾病如巨人症或肢端肥大症、皮质醇增多症、甲状腺功能亢进症、嗜铬细胞瘤、胰高血糖素病等； •3）应激性高血糖：如颅脑损伤、脑卒中、心肌梗塞等； •4）药物影响：如噻嗪类利尿剂、口服避孕药等； •5）其他：妊娠呕吐、麻醉、脱水、缺氧、窒息等； •6）生理性增高如饱食、高糖饮食、剧烈运动、情绪紧张等。 2、减低见于 •1）胰岛素过多； •2）缺乏抗胰岛素激素； •3）肝糖原贮存缺乏性疾病； •4）其他。 口服葡萄糖耐量试验 [临床意义] 诊断糖尿病 两次空腹血糖分别≧ 7.0mmol/L，本试验高峰值≧11.1mmol/L，或2小时值≧11.1 mmol/L；随机血糖≧11.1mmol/L，且伴尿糖阳性；

或有多尿、口渴、多饮等临床症状者可确诊糖尿病。 糖耐量减低 指空腹血糖 <7.0 mmol/L，2小时血糖在7.8-11.1 mmol/L之间，多见于糖尿病前期、痛风、肥胖病、甲状腺功能亢进症、肢端肥大症、皮质醇增多症等。 低血糖现象 肝源性低血糖，空腹血糖常低于正常，口服糖后血糖高峰提前出现并高于正常， 2小时后不能降至正常；2型糖尿病早期也可出现低血糖症状；功能性低血糖患者，空腹血糖正常，服糖后血糖高峰也在正常范围内，但服糖后2-3小时可发生低血糖。 葡萄糖耐量曲线低平 常见于胰岛 B细胞瘤、甲亢、腺垂体功能减退症及肾上腺皮质功能减退症等。 血清胰岛素检测和胰岛素释放试验 [参考值] RIA法空腹：血胰岛素为10-20mu/L；胰岛素（mu/L） /血糖值（mg/dl）<0.3。 [临床意义] 糖尿病 1型糖尿病患者空腹胰岛素浓度明显减低，呈低平曲线，胰岛素与血糖的比值也明显降低。 2型糖尿病患者空腹胰岛素水平可正常、稍低或稍高，服糖后高峰延迟。

实验十 血糖的测定

实验十 血糖的测定 血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。 因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。 一、葡萄糖氧化酶法 【目的】 1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。 2. 掌握血糖测定的临床意义。 【原理】 葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下： 2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚 红色醌类化合物 2H 2O 2H 2O 2 O 2葡萄糖+葡萄糖酸+ GOD + 【器材】

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】 1. 0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0） 称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于800ml蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L盐酸）调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L。 2. 酶试剂 称取过氧化物酶1200U，葡萄糖氧化酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/L NaOH调pH至7.0，加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存，4℃可稳定3个月。 3. 酚溶液 称取重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500g/L的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释），用棕色瓶贮存。 4. 酶酚混合试剂 取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4℃可以存放一个月。 5. 12mmol/L苯甲酸溶液 溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水至1L。 6．葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，并移入100ml容量瓶内，再以12mmol/L苯甲酸溶液加至100ml。 7.葡萄糖标准应用液（5mmol/L） 吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml 于100ml 容量瓶中，加12mmol/L 苯甲酸溶液至刻度。 【操作】 取3 支试管,编号，按下表操作。

糖尿病实验室检查方案分析报告

糖尿病实验室检查 虽然糖尿病典型的“三多一少”症状明显与否反映糖尿病病情的轻重，但不少患者“三多一少”症状并不明显，而且在出现急慢性并发症时就不能单纯用“三多一少”症状来衡量，故应经常监测血糖、尿糖、酮体、糖化血红蛋白、C肽、胰岛素、血脂及肾功能等情况，通过这些指标的观察或检测，可及时把握病情的变化，判断病情的控制程度及评价治疗效果，及时调整用药剂量，进而有效地防治急慢性并发症。 一．血液检查 （一）血糖 血糖测定在糖尿病的诊断和病情监控方面有着重要的价值，血糖水平是判断糖尿病的唯一标准。血样标本不同，测定方法不同，血糖的正常值也不同，应注意鉴别。 1．血标本采集 血标本来源分静脉血、动脉血和毛细血管，又可分为空腹及餐后（葡萄糖负荷后）血。无论空腹血和餐后血，在我国血糖测定主要以静脉血为主，毛细血管末梢血为辅，而动脉血应用较少。耳血、趾血或手指血是微血管血，接近于动脉血，清晨空腹的微血管全血血糖数值基本上与静脉血的血糖相符，口服葡萄糖2小时后的微血管全血血糖比静脉全血血糖值高1.03mmol/L甚至更高，因此尽可能采用静脉血。 静脉血又分为全血、血浆及血清，血浆和血清血糖比全血血糖能更好地反映细胞外液的葡萄糖含量，因为全血含有红细胞，红细胞内含水比血浆少，而葡萄糖是溶于水的，全血内红细胞的葡萄糖被利用，因此全血血糖比血浆血糖值低15％左右，现多采用血浆测定血糖，不少医院采用静脉血清，其测定值与血浆相当。毛细血管末梢血测定值一般不可用于糖尿病的诊断，但可用于人群糖尿病普查，筛选及患者自我监测，目前发达国家普遍采用血糖仪测定毛细血管血糖，在我国已经开始推广应用，这种仪器体积小、便于携带、快速，较为准确，缺点是试纸条价格贵、保存期短，一般毛细血管血糖值比静脉血浆血糖值低。 2．血糖测定宜早 血标本采集后应立即测定血糖，若不能及时测定应分离血浆（或血清）冷冻保存。一般室温下血标本中的血糖以每小时0.4mmol/L的速度氧化降解，于4℃时每小时降解0.11mmol/L，在夏季气温很高时血糖降解更快，医生和患者在分析血糖结果时要考虑这些因素。 3．血糖测定方法 从测定原理上讲血糖测定有两类化学反应法，包括3种方法： （1）葡萄糖氧化酶法：利用葡萄糖与葡萄糖氧化酶之间的化学反应来测定葡萄糖浓度，该方法测定的糖为葡萄糖，不与其它糖发生反应，因此准确、可靠，目前国内已较广泛推广应用。需要指出的是结合现代电子技术发明的血糖仪，其应用原理也是葡萄糖氧化酶法。 （2）硫酸铜或高铁氰化物还原法：即传统的福一呈法，葡萄糖的醛基使硫酸铜值中的铜被还原为氧化铜，形成不同的颜色和沉淀，可间断反映血糖的浓度。此法因受其它因素影响较大，目前已被淘汰。

动物营养代谢病第七章营养代谢病检测技术

营养代谢病检测技术 第七章 本章目的： 本章要求了解营养代谢病检测技术的基本知识。 本章重点： １、血糖、蛋白质和脂肪代谢及微量元素测定。 ２、消化吸收代谢过程 本章难点： 维生素测定。 第一节蛋白质检测 第二节血糖检测 第三节脂肪代谢的检测 第四节微量元素检测 第五节维生素营养的检测 主要内容 一、血清总蛋白测定 二、血清白蛋白测定 三、血清蛋白电泳 四、血红蛋白测定 五、肌红蛋白测定 第一节蛋白质检测（Ketosis in dairy cows） 一、血清总蛋白测定 原理： 碱性溶液中蛋白质分子的肽键与铜离子作用，形成紫红色的复合物。这与两个尿素分子缩合生成缩二脲，在碱性条件下与铜离子作用形成紫红色反应相似，故称为双缩脲反应。 一、血清总蛋白测定 试剂： 6mol/L氢氧化钠溶液：溶解120g氢氧化钠于去离子水中，稀释至500ml，置聚乙烯瓶内盖紧保存。 双缩脲试剂：称3 g CuSO4•5H2O和9g酒石酸钾钠（KNaC4H4O4•4H2O），先分别溶于蒸馏水，加入碘化钾5g，待完全溶解后混合，加入6mol/L氢氧化钠100ml，最后以蒸馏水加至1L置聚乙烯瓶内盖紧贮存。 蛋白标准液：收集混合血清，用凯氏定氮法测定蛋白质含量，亦可用定值参考血清或标准蛋白作标准。 一、血清总蛋白测定 操作： 取三支试管按下表加入式样，混匀37摄氏度水浴放置十分钟，以空白管调零，540nm波长测定吸光度。 项目测定管标准管空白管 血清/ml 1.00 －－ 蛋白质标准液/ml － 1.00 －

理生盐水/ml －－1.00 双缩脲试剂/ ml 5.00 5.00 5.00 二、血清白蛋白测定 原理：在pH=4.2环境中，带正电荷的白蛋白（pI=4.9）可以与阴离子染料溴甲酚绿（BCG）结合，溶液由黄变蓝，在波长630nm具有最大光吸收，并与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，可求得血清中白蛋白含量。 二、血清白蛋白测定 试剂： 溴甲酚绿（BCG）试剂：于1L容量瓶中盛蒸镏水约400ml，加琥珀酸缓冲贮存液100ml，用吸管准确吸取BCG贮存液8ml加入，并将内壁沾的染料冲洗入液体中，加叠氮钠存液2.5 ml，聚氧化乙烯月桂醚贮存液2.5ml，最后用蒸馏水稀释至刻度，配好的BCG试剂pH应为4.15 ±0.05。 白蛋白标准液：40g/L，也可用定值参考血清。均需置冰箱保存。 二、血清白蛋白测定 操作： 血清白蛋白（g/L）= (Odu/Ods) ×标准白蛋白浓度（g/L） 同时测定血清总蛋白浓度，减去血清白蛋白浓度，可得血清球蛋白浓度，并可计算血清白蛋白/球蛋白比值。 三、血清蛋白电泳 电泳：带电的胶粒或大分子在外加电场中，向带相反电荷的电极作定向移动的现象称为电泳。 应用 1. 分离各种有机物：如蛋白质、酶、核酸等 2. 分析某种物质的纯度及分子量 电泳的基本原理 电场中推动带电质点运动的力（F）等于质点所带净电荷量（Q）与电场强度（E）的乘积。F＝QE 质点前移受阻力（F）影响，球形质点服从Stoke定律，即：F′＝6πrην（r半径，η介质粘度，ν质点移速） 质点在电场中稳定运动时：F＝F′即：QE＝6πrην 同电泳条件下不同物质因其分子大小（r）和带电量（Q）差异而有不同泳动速度，因此，一定时间可分离。 按其泳动速度从正极端起〔即速度最快）依次为白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白等条带，有的动物α-球蛋白和β-球蛋白可分为两个条带。 血清蛋白的pI大多在7.5以下，在pH8.6的巴比妥缓冲液中以负离子形式存在，并且蛋白质的分子量、立体构象、等电点以及形状也有差异，在电场中迁移速度不同，可以在醋酸纤维薄膜上分离成A、α1、α2、β和γ五条区带。 醋酸纤维素（二乙酸纤维素）薄膜具有匀一的泡沫状结构，渗透性强，对分子移动无阻力，用它作区带电泳的支持物，具有用样量少，分离清晰，无吸附作用。目前可用于血清蛋白、脂蛋白、糖蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面。 醋酸纤维素薄膜经1,4－二氧六环、透明液或液体石蜡处理即透明，因而可得背景为无色的