DNACTAB法提取

CTAB法提取DNA

1. 1.5 mL EP管加入两颗钢珠，取幼嫩（新长出来淡黄色的）的番茄小叶片100 mg 置于上述EP管中（可以用嫩芽松散地塞满EP管，不能压实）；

2. 加入700 μL提取buffer（2×CTAB+巯基乙醇，终浓度为2%巯基乙醇），磨样仪中55 Hz 100 s打碎；

3. 65℃水浴孵育30-60 min（时间越长越好，每5 min翻转摇一下）；

4. 待冷却后加入等体积氯仿：异戊醇（24:1）混合物，然后轻轻颠倒翻转5min；

5. 12000 rpm离心10 min；

6. 取上清于新Ep管中（300-400 μL），加入2倍上清液体积的预冷（-20℃）过的无水乙醇轻轻翻转至出现絮状DNA析出（翻转5-8次即可，要轻柔）；

7. 12000 rpm离心10 min；

8. 弃上清，加入70%无水乙醇900 μL洗涤2遍（每次洗涤时要吹起白色DNA 沉淀，翻转后12000 rpm离心5-10 min，弃上清时注意不要将沉淀倒掉，第二次洗涤弃上清后空管再离心一次，用枪头将管底的残液吸出，以便于晾干）。

9. 通风橱吹干2-3 h至管底看不到东西，加入50 μL无菌ddH2O+1 μL RNase 然后65℃水浴30min。（1ul测浓度，2ul跑胶）；-20℃保存。

2×CTAB配方：（来自宋国立：改良CTAB法快速提取棉花DNA）

Tris.HCl 0.1 M

EDTA 0.02 M

NaCl 1.5 M

PVP40 2%（w/v）

CTAB 2%（w/v）

PH8.0

500 mL: Tris 6.057 g

EDTA/EDTA2Na.2H2O 2.92 g/3.72 g

NaCl 43.83 g

PVP40 10 g

CTAB 10 g

浓盐酸调PH至8.0，定容至500 mL

回流提取法

回流提取法应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材为容量的1／3－1／2，溶剂浸过药材表面1-2cm在水浴中加热回流，一般保持沸腾约1小时。放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，大量生产中多采用连续提取法。 索氏提取法的优缺点是什么啊？ 1) 选择性好 2)索式萃取的选择性主要取决于目标物质和溶剂性质的相似性。萃取剂可用 CS2苯、甲醇等。通常的做法是将萃取剂按照极性不同的顺序进行多级萃取。从而提高了产品的萃取纯度；将不同类的物质分别萃取出来。 3)(2) 能耗低 4)由于索式萃取是直接对萃取剂进行加热，且选用的萃取剂一般沸点都较低， 从根本上保证了能量的快速传导和充分利用。而且萃取剂是在索式萃取器中循环利用的，这既减少了溶剂用量，又缩短了操作时间，大大降低了能耗。 5)(3) 设备简单、操作简便 6) 不同的分离方法有不同的操作方法，对应的实验设备也各有不同。但索式萃 取的设备简单、操作简便。且其造价低，体积小，适于实验室应用。 天然产物常用的提取方法? 浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。此法比较简单，可将药粉装入适当的容器中，加入适当的溶剂（多用水或稀醇），以能浸透药材稍有过量为度，时常振摇或搅拌，放置一日以上过滤，

药渣另加新溶剂。 如此再提2?3次。第2、3次浸渍时间可缩短。合并提取液，浓缩后可得提取物。本法不需加热（必要时温热），适用于有效成分遇热易破坏以及含多量淀粉、树胶、果胶、粘液质的天然药物的提取。但本法提取时间长，效率不高，特别用水浸渍时，水提取液易发霉变质，必要时应加适量的甲苯等防腐剂。 渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中，用适当的溶剂润湿膨胀24h?48h,然后不断地添加新溶剂。使其自上而下渗透过药材，自渗漉筒的下口收集提取液。当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，提取的过程是一种动态的过程，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速（宜成滴不宜成线），在渗漉过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗漉液颜色极浅或渗漉液的体积相当于原药材重的10 倍时，便可认为基本上已提取完全。在大量生产中常将收集的稀渗漉液作为另一批新原料的溶剂之用。本法溶剂消耗量大，费时长，操作仍嫌麻烦。 煎煮法：煎煮法是我国最早使用的传统的提取方法。操作时将中药粗粉放在适当的容器中（如砂锅、金属夹层锅等，应避免铁器），加水浸过药面，充分浸泡后，直火或蒸气加热煮，一般煮2?3次，每次?1h,煎煮次数及时间可按投药量及药材质地适当增减。直火加热时最好时常搅拌，以免局部药材受热太高，容易焦糊。此法简便，药材中大部分成分可被不同程度地提出， 但煎出液中杂质较多，且容易发生霉变，含挥发性成分及有效成分遇热易破 坏的中药不宜用此法。 回流提取法：应用有机溶剂加热提取时，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损

回流提取法说课讲解

精品文档 回流提取法 应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材为容量的1/3— 1 /2,溶剂浸过药材表面 1 —2cm在水浴中加热回流，一般保持沸腾约 1 小时。放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时, 或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高, 大量生产中多采用连续提取法。 索氏提取法的优缺点是什么啊？ 1）选择性好 索式萃取的选择性主要取决于目标物质和溶剂性质的相似性。萃取剂可用CS2苯、甲 醇等。通常的做法是将萃取剂按照极性不同的顺序进行多级萃取。从而提高了产品的萃取纯度；将不同类的物质分别萃取出来。 （2）能耗低 由于索式萃取是直接对萃取剂进行加热,且选用的萃取剂一般沸点都较低,从根本上保证了能量的快速传导和充分利用。而且萃取剂是在索式萃取器中循环利用的,这既减少了溶剂用量,又缩短了操作时间,大大降低了能耗。 （3）设备简单、操作简便不同的分离方法有不同的操作方法,对应的实验设备也各有不同。但索式萃取的设备简单、操作简便。且其造价低,体积小,适于实验室应用。 天然产物常用的提取方法? 浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。此法比较简单, 可将药粉装入适 当的容器中,加入适当的溶剂（多用水或稀醇）,以能浸透药材稍有过量为度,时常振摇或搅拌，放置一日以上过滤，药渣另加新溶剂。如此再提2?3次。第2、3次浸渍时间可缩短。 合并提取液,浓缩后可得提取物。本法不需加热（必要时温热）,适用于有效成分遇热易破坏 以及含多量淀粉、树胶、果胶、粘液质的天然药物的提取。但本法提取时间长,效率不高, 特别用水浸渍时,水提取液易发霉变质,必要时应加适量的甲苯等防腐剂。渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中,用适当的溶剂润湿膨胀24h ?48h ,然后不断地添加新溶剂。使其自上而下渗透过药材, 自渗漉筒的下口收集提取液。当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时, 上层的溶液或稀浸液便置换其位置, 造成良好的浓度差, 使扩散能较好地进行, 提取的过程是一种动态的过程,故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速（宜成滴不宜成线） ,在渗漉过程中随时自药面上补充新溶剂,使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗漉液颜色极浅或渗漉液的体积相当于原药材重的10倍时,便可认为基本上 已提取完全。在大量生产中常将收集的稀渗漉液作为另一批新原料的溶剂之用。本法溶剂消耗量大, 费时 长,操作仍嫌麻烦。 精品文档

回流提取法说课讲解

回流提取法 应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材为容量的1／3－1／2，溶剂浸过药材表面1－2cm。在水浴中加热回流，一般保持沸腾约1小时。放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，大量生产中多采用连续提取法。 索氏提取法的优缺点是什么啊？ 1)选择性好 索式萃取的选择性主要取决于目标物质和溶剂性质的相似性。萃取剂可用CS2、苯、甲醇等。通常的做法是将萃取剂按照极性不同的顺序进行多级萃取。从而提高了产品的萃取纯度；将不同类的物质分别萃取出来。 (2)能耗低 由于索式萃取是直接对萃取剂进行加热，且选用的萃取剂一般沸点都较低，从根本上保证了能量的快速传导和充分利用。而且萃取剂是在索式萃取器中循环利用的，这既减少了溶剂用量，又缩短了操作时间，大大降低了能耗。 (3)设备简单、操作简便 不同的分离方法有不同的操作方法，对应的实验设备也各有不同。但索式萃取的设备简单、操作简便。且其造价低，体积小，适于实验室应用。 天然产物常用的提取方法? 浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。此法比较简单，可将药粉装入适当的容器中，加入适当的溶剂(多用水或稀醇)，以能浸透药材稍有过量为度，时常振摇或搅拌，放置一日以上过滤，药渣另加新溶剂。如此再提2～3次。第2、3次浸渍时间可缩短。合并提取液，浓缩后可得提取物。本法不需加热(必要时温热)，适用于有效成分遇热易破坏以及含多量淀粉、树胶、果胶、粘液质的天然药物的提取。但本法提取时间长，效率不高，特别用水浸渍时，水提取液易发霉变质，必要时应加适量的甲苯等防腐剂。 渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中，用适当的溶剂润湿膨胀24h～48h，然后不断地添加新溶剂。使其自上而下渗透过药材，自渗漉筒的下口收集提取液。当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，提取的过程是一种动态的过程，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速（宜成滴不宜成线），在渗漉过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗漉液颜色极浅或渗漉液的体积相当于原药材重的10倍时，便可认为基本上已提取完全。在大量生产中常将收集的稀渗漉液作为另一批新原料的溶剂之用。本法溶剂消耗量大，费时长，操作仍嫌麻烦。

回流提取法

在大量生产中常将收集的稀渗漉液作为另一批新原料的溶剂之用。 长，操作仍嫌麻烦。 回流提取法 应用有机溶剂加热提取， 需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时， 可在 圆底 烧瓶上连接回流 冷凝器。瓶内装药材为容量的 1/3 — 1 /2,溶剂浸过药材表面 1-2cm 在 水浴中加热回流,一般保持沸腾约 1 小时。放冷过滤,再在药渣中加溶剂,作第二、三次加 热回流分别约半小时, 或至基本提尽有效成分为止。 此法提取效率较冷浸法高, 大量生产中 多采用连续提取法。 索氏提取法的优缺点是什么啊？ 1) 选择性好 索式萃取的选择性主要取决于目标物质和溶剂性质的相似性。 萃取剂可用CS2苯、甲 醇等。通常的做法是将 萃取剂 按照极性不同的顺序进行多级萃取。从而提高了产品的萃 取纯度；将不同类的物质分别萃取出来。 (2) 能耗低 由于索式萃取是直接对 萃取剂 进行加热，且选用的萃取剂一般沸点都较低，从根本上保 证了能量的快速传导和充分利用。而且萃取剂是在索式萃取器中循环利用的，这既减少 了溶剂用量，又缩短了操作时间，大大降低了能耗。 (3) 设备简单、操作简便 不同的分离方法有不同的操作方法，对应的实验设备也各有不同。但索式萃取的设备简 单、操作简便。且其造价低，体积小，适于实验室应用。 天然产物常用的提取方法 ? 浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。此法比较简单， 可将药粉装入适 当的容器中，加入适当的溶剂 (多用水或稀醇 )，以能浸透药材稍有过量为度，时常振摇或搅 拌,放置一日以上过滤, 药渣另加新溶剂。 如此再提 2? 3 次。第 2、 3 次浸渍时间可缩短。 合并提取液,浓缩后可得提取物。本法不需加热 (必要时温热 ),适用于有效成分遇热易破坏 以及含多量淀粉、树胶、果胶、粘液质的天然药物的提取。但本法提取时间长，效率不高， 特别用水浸渍时，水提取液易发霉变质，必要时应加适量的甲苯等防腐剂。 渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中，用适当的溶剂润湿膨胀 24h ?48h ，然后不断地添加新 溶剂。 使其自上而下渗透过药材, 自渗漉筒的下口收集提取液。 当溶剂渗进药粉溶出成分比 重加大而向下移动时, 上层的溶液或稀浸液便置换其位置, 造成良好的浓度差, 使扩散能较 好地进行， 提取的过程是一种动态的过程，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速 宜成滴 不宜成线) ，在渗漉过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或 当渗漉液颜色极浅或渗漉液的体积相当于原药材重的 10 倍时，便可认为基本上已提取完全。 本法溶剂消耗量大， 费时

回流提取法测量时应该注意哪些内容

回流提取法酸值测试仪测量时应该注意以下3条 测量变压器油酸值有回流提取法（回流法）和萃取法两种测量原理，回流法是符合GB/T 7599-1987 运行中变压器油、汽轮机油酸值测定，萃取法主要是遵循企标，第三方机构没有相关的检定标准，但从两者的测试结果比较，相差很小，在测试效率方面，萃取法要比回流法快很多，下面我们说说回流提取法测量时应该注意哪些内容。 （1）更换试剂 无水乙醇用尽重新更换一瓶即可，指示剂用尽取出原瓶，重新配制一瓶，再原样装回原位，中和液（乙醇—KOH）溶液用尽重新配制，再原样装回原位，重新进行一次仪器标定即可，更换过程中尽量干燥，避免掺杂水分，试剂的有效期有7天~6个月不等，一般建议使用前1~2天与我们联系，我们给您邮寄最新的溶剂，试剂如果超出有效时间请妥善处理，过期使用导致标定影响测试结果，标准酸过期同样无法标定。 （2）更换蠕动泵管 蠕动管是滴定时固定流量，蠕动管属于易损件，长久不用或者长期使用都会造成滴定不准，我们出库是配有备品件，更换时打开仪器上盖，向上拨动蠕动泵的拨杆，即可松开泵管的压板，取下磨损的旧泵管，退出旧泵管上的管箍，套在一根新的泵管上，再把新管原样装回泵体上，用拨杆把泵管压板压回原位即可，不用强行硬拉，以免损伤仪器。

（3）储存与标定 3.1 仪器使用完毕，请将蠕动泵的压臂松开，防止蠕动泵软管被压臂长期挤压，而造成损伤。 3.2仪器超过三个月不使用，建议用标准酸重新标定一次，标准酸无法使用时可到化学试剂市场购买，也可联系我司售后部门，核查后予以邮寄。 3.3清洗反应杯后应充分晾干，不能在有残存水分的情况下做实验，整个实验过程也不能有水进入反应杯，我们的建议是将反应杯置于烘箱等干燥位置。 3.4配制试剂和做实验时用到的玻璃器皿应完全干燥后再使用，避免杂质水分影响测试结果。 3.5配制试剂和做实验时使用的无水乙醇含量应大于99.8%，再不使用的情况下应密封保存。

溶剂提取法的各种方法与技术比较

溶剂提取法的各种方法与技术比较 方法 操作技术要点 适用范围 特点 浸渍法 冷浸法：在室温条件下浸渍，使 有效成分浸出 温浸法：在40-60℃之间浸渍，能浸出较多的有效成分 适用于有效成分遇热易破坏及含淀粉、果胶、黏液质、树胶等多糖物质较多的天然药物 操作方便、简单易行，水浸提液易霉变。必要时需加适量防腐剂 渗漉法 将药材粗粉置渗漉装置中，连续添加溶剂使渗过药粉，自上而下 流动，浸出有效成分（粉碎→浸润→装筒→排气→浸渍→渗漉→收集→渗漉液） 适用于提取遇热易破坏的成分 保持良好的浓度差，提取效率高于浸渍法，但溶剂消耗多，提取时间长 煎煮法 将药材加水加热煮沸，滤过去渣 后取煎煮液 适用于有效成分能溶于水且不易被水、热破坏的天然药物的提取 操作简单，提取效率高于冷浸法 回流提取法 使用回流提取装置，低沸点有机溶剂浸泡药材，通过加热浸出 液，使溶剂受热蒸发，经冷凝后变为液体流回浸出器，如此反复至浸出完全 适用于脂溶性较强的天 然药物化学成分的提取，如甾体、萜类、蒽醌类等 提取效率高，但溶剂消耗 量大，操作较麻烦。不宜提取对热不稳定的成分 连续回流提取法 实验室中常用索氏提取器，能用 少量的溶剂进行连续循环回流提取，充分将有效成分浸出完全 适用于脂溶性化合物，药量少时多用该法进行提取 提取效率高，溶剂用量少，不宜提取对热不稳定成分 超声提取法 将药材粉末置适宜的容器内，加 入定量溶剂，密闭后置超声提取器内，利用超声波浸提有效成分 既适用于遇热不稳定成分的提取，也适用于各种溶剂的提取 提取时间短，提取效率高，无需加热。但目前尚为实验室小规模使用 常用溶剂性质 溶剂 沸点（℃） 介电常数（20℃） 溶解度（20℃） 溶剂/水% 水/溶剂% 石油醚 30-120 1.89 不相混溶 环己烷 80.7 2.05 苯 80.1 2.23 7.8 20.0 乙醚 34.6 4.34 3.4 2.6 三氯乙烷 61.2 5.1 6.6 1.2 醋酸乙酯 77.1 6.4 7.94 2.98 正丁醇 117.7 17.8 8.5 16.4 丙酮 56.2 21.4 任意混合 乙醇 77.8 25.8 甲醇 64.6 33.7 水 100 81.0 天然药物各类成分极性与提取溶剂的关系 极性极弱 结构类型 适合提取溶剂

热回流提取

翻阅资料，参考了对山楂中原花青素的提取工艺, 在单因素实验和正交优化实验的基础上, 得出乙醇回流法提取山楂中原花青素的最佳工艺条件为: 乙醇浓度为70%, 提取温度为80°, 料液比为1：15, 提取时间为2h, 提取次数为2次, 在最佳工艺条件下, 提取率达到3. 14%。本次对葡萄籽的提取先采用水提取，再使用有机溶剂提取，若提取效果不佳，再使用超声波有机溶剂提取。 热回流法粗提取葡萄籽 实验原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在不同溶剂中的溶解度不同, 选用对有效成分溶解度大, 对杂质成分溶解度小的溶剂, 将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。 实验试剂：葡萄籽, 烘干, 粉碎; 香草醛( AR ), 其余试剂均为分析纯, 水为去离子水。 实验方法：1、准确称取粉碎后的葡萄籽粉5. 0g于250mL圆底烧瓶中, 加入75ml水，在80摄氏度下热回流提取2h, 取出过滤, 减压蒸馏, 用水定容, 得提取液, 测定溶液中原花青素的含量。 2、将1中过滤出来的残渣称重，量取对应体积的70%的乙醇，置于圆底烧瓶中，在80摄氏度下热回流提取2h, 取出过滤, 减压蒸馏, 用水定容, 得提取液, 测定溶液中原花青素的含量。 超声波法从葡萄籽中提取有效成分 实验原理：本实验采用有机溶剂提取葡萄籽中的原花青素, 而有机溶剂同样也能萃取脂肪油类, 因此, 在萃取之前必须先除去葡萄籽中的脂肪油类, 以提高目标产物的含量。原花青素能很好地溶于丙酮、乙酸乙酯、乙醇, 不溶于苯、氯仿、石油醚、庚烷等[ 3] 。根据溶解度差异, 本实验采用两级提取工艺, 先用石油醚脱脂, 然后用丙酮、乙酸乙酯、乙醇和水等溶剂提取原花青素。提取过程中用超声波震荡加强传质作用, 增加提取率。 实验方法：准确称取10 g 破碎葡萄籽, 加入30mL 石油醚, 常温浸泡48 h, 间歇搅拌。抽滤, 脱去溶剂和油脂。滤饼置于500 mL 三角烧瓶中, 加入200 mL 丙酮、乙醇或 者纯水, 在20~ 25室温下提取操作2 h, 全过程施加超声波震荡处理。抽滤, 并用少量溶剂洗涤滤饼3 次, 合并滤液和洗涤液置于500 mL 圆底烧瓶中, 用旋转蒸发仪浓缩至成为浆状物后移入蒸发皿中, 真空干燥成固体, 粉碎后即为葡萄籽提取物。

超声提取与回流提取

超声提取与回流提取 一、超声提取概述 超声波指频率高于20KHz，人的听觉阈以外的声波。 近年来，超声波技术在中药制剂提取工艺中的应用越来越受到关注。超声波技术用于天然产物有效成分的提取是一种非常有效的方法和手段。作为中药制剂取工艺的一种新技术，超声波提取具有广阔的前景。 1.1提取原理 超声波提取是利用超声波具有的机械效应，空化效应和热效应，通过增大介质分子的运动速度、增大介质的穿透力以提取生物有效成分。 （1）机械效应超声波在介质中的传播可以使介质质点在其传播空间内产生振动，从而强化介质的扩散、传播，这就是超声波的机械效应。超声波在传播过程中产生一种辐射压强，沿声波方向传播，对物料有很强的破坏作用，可使细胞组织变形，植物蛋白质变性；同时，它还可以给予介质和悬浮体以不同的加速度，且介质分子的运动速度远大于悬浮体分子的运动速度。从而在两者间产生摩擦，这种摩擦力可使生物分子解聚，使细胞壁上的有效成分更快地溶解于溶剂之中。（2）空化效应通常情况下，介质内部或多或少地溶解了一些微气泡，这些气泡在超声波的作用下产生振动，当声压达到一定值时，气泡由于定向扩散（rectieddiffvsion）而增大，形成共振腔，然后突然闭合，这就是超声波的空化效应。这种气泡在闭合时会在其周围产生几千个大气压的压力，形成微激波，它可造成植物细胞壁及整个生物体破裂，而且整个破裂过程在瞬间完成，有利于有效成分的溶出。 （3）热效应和其它物理波一样，超声波在介质中的传播过程也是一个能量的传播和扩散过程，即超声波在介质的传播过程中，其声能不断被介质的质点吸收，介质将所吸收的能量全部或大部分转变成热能，从而导致介质本身和药材组织温度的升高，增大了药物有效成分的溶解速度。由于这种吸收声能引起的药物组织内部温度的升高是瞬间的，因此可以使被提取的成分的生物活性保持不变。 此外，超声波还可以产生许多次级效应，如乳化、扩散、击碎等，这些作用也促进了植物体中有效成分的溶解，促使药物有效成分进入介质，并于介质充分混合，加快了提取过程的进行，并提高了药物有效成分的提取率。 1.2提取特点 （1）提取温度低：超声波提取时不需加热，温度在40℃—60℃，避免了中药常规煎煮法、回流法长时间加热对有效成分的不良影响，适用于对热敏物质的提取；同时，由于其不需加热，因而也节省了能源。 （2）提取时间短：与传统提取方法缩短2/3以上； （3）提取效率高：超声波提取提高了药物有效成分的提取率，节省了原料药

综合性设计实验---黄连素的提取--回流提取法

综合与设计性化学实验 黄连中黄连素的提取 合作小组成员： 邵雪王涛邓婷姚成银 一、实验目的 (1) 学习并掌握生物碱的提取方法和原理。 （2）学习减压蒸馏的操作技术。 （3）熟悉黄连素的化学结构，性质，提取原理和分离方法及其相关知识的综合作用。 二、实验仪器与药品 ⑴仪器 250ml圆底烧瓶回流冷凝管锥形瓶烧杯减压过滤装置 ⑵药品 黄连95%乙醇1%醋酸浓盐酸 三、实验原理 黄连素（也称小檗碱），属于生物碱，是中草药黄连的主要有效成分。其中含量可达4%~10%。除了黄连中含有黄连素以外，黄柏、白屈菜、伏牛花、三颗针等中草药中也含有黄连素，其中以黄连和黄柏中含量最高。

黄连素是黄色针状体，微溶于水和乙醇，较易溶于热水和热乙醇中，几乎不溶于乙醚，黄连素存在三种互变异构体，但自然界多以季铵碱的形式存在。黄连素的盐酸盐，氢碘酸盐，硫酸盐、硝酸盐均难溶于冷水，易溶于热水，其各种盐的纯化都比较容易。 N NH O O O O CHO OCH 3 33 OH N +O O 3 3 OH - （醇式） （醛式） （季铵碱式） 从黄连中提取黄连素，往往采用适当的溶剂（如乙醇、水、硫酸等）。在脂肪提取器中连续抽提，然后浓缩，再加以酸进行酸化，得到相应的盐。粗产品可以采取重结晶等方法进一步提纯。 黄连素被硝酸等氧化剂氧化，转变为樱红色的氧化黄连素。黄连素在强碱中部分转化为醛式黄连素，在此条件下，再加几滴丙酮，即可发生缩合反应，生成丙酮与醛式黄连素缩合产物的黄色沉淀。 四、实验步骤 1、溶剂的提取 ⑴称取10克中药黄连，切研碎磨烂，放入圆底烧瓶中，加入100ml 95%乙醇，装上回流冷凝管，加热回流0,5h,静置浸泡1h,减压过滤，滤渣重复上述操作处理两次（后两次提取可适当减少乙醇用量和缩短浸泡时间）。合并三次所得滤液

什么是回流提取法

什么是回流提取法？应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材为容量的1／3－1／2，溶剂浸过药材表面1－2cm。在水浴中加热回流，一般保持沸腾约1小时。放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，大量生产中多采用连续提取法。 索氏提取法的优缺点是什么啊？ 1)选择性好 索式萃取的选择性主要取决于目标物质和溶剂性质的相似性。萃取剂可用CS2、苯、甲醇等。通常的做法是将萃取剂按照极性不同的顺序进行多级萃取。从而提高了产品的萃取纯度；将不同类的物质分别萃取出来。 (2)能耗低 由于索式萃取是直接对萃取剂进行加热，且选用的萃取剂一般沸点都较低，从根本上保证了能量的快速传导和充分利用。而且萃取剂是在索式萃取器中循环利用的，这既减少了溶剂用量，又缩短了操作时间，大大降低了能耗。 (3)设备简单、操作简便 不同的分离方法有不同的操作方法，对应的实验设备也各有不同。但索式萃取的设备简单、操作简便。且其造价低，体积小，适于实验室应用。 天然产物常用的提取方法? 浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。此法比较简单，可将药粉装入适当的容器中，加入适当的溶剂(多用水或稀醇)，以能浸透药材稍有过量为度，时常振摇或搅拌，放置一日以上过滤，药渣另加新溶剂。如此再提2～3次。第2、3次浸渍时间可缩短。合并提取液，浓缩后可得提取物。本法不需加热(必要时温热)，适用于有效成分遇热易破坏以及含多量淀粉、树胶、果胶、粘液质的天然药物的提取。但本法提取时间长，效率不高，特别用水浸渍时，水提取液易发霉变质，必要时应加适量的甲苯等防腐剂。 渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中，用适当的溶剂润湿膨胀24h～48h，然后不断地添加新溶剂。使其自上而下渗透过药材，自渗漉筒的下口收集提取液。当溶剂渗进药粉溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，提取的过程是一种动态的过程，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速（宜成滴不宜成线），在渗漉过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗漉液颜色极浅或渗漉液的体积相当于原药材重的10倍时，便可认为基本上已提取完全。在大量生产中常将收集的稀渗漉液作为另一批新原料的溶剂之用。本法溶剂消耗量大，费时长，操作仍嫌麻烦。 煎煮法：煎煮法是我国最早使用的传统的提取方法。操作时将中药粗粉放在适当的容器中(如砂锅、金属夹层锅等，应避免铁器)，加水浸过药面，充分浸泡后，直火或蒸气加热煮，一

回流提取法之欧阳家百创编

回流提取法 欧阳家百（2021.03.07） 应用有机溶剂加热提取，需采取回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操纵时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材为容量的1／3－1／2，溶剂浸过药材概略1－2cm。在水浴中加热回流，一般坚持沸腾约1小时。放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流辨别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，年夜量生产中多采取连续提取法。 索氏提取法的优缺点是什么啊？ 1)选择性好 索式萃取的选择性主要取决于目标物质和溶剂性质的相似性。萃取剂可用CS2、苯、甲醇等。通常的做法是将萃取剂依照极性不合的顺序进行多级萃取。从而提高了产品的萃取纯度；将不合类的物质辨别萃取出来。 (2)能耗低 由于索式萃取是直接对萃取剂进行加热，且选用的萃取剂一般沸点都较低，从根本上包管了能量的快速传导和充分利用。并且萃取剂是在索式萃取器中循环利用的，这既减少了溶剂用量，又缩短了操纵时间，年夜年夜降低了能耗。 (3)设备简单、操纵简便 不合的别离办法有不合的操纵办法，对应的实验设备也各有不

合。但索式萃取的设备简单、操纵简便。且其造价低，体积小，适于实验室应用。 天然产品经常使用的提取办法? 浸渍法：根据溶剂的温度可分为热浸、温浸和冷浸等数种。此法比较简单，可将药粉装入适当的容器中，加入适当的溶剂(多用水或稀醇)，以能浸透药材稍有过量为度，时常振摇或搅拌，放置一日以上过滤，药渣另加新溶剂。如此再提2～3次。第2、3次浸渍时间可缩短。合并提取液，浓缩后可得提取物。本法不需加热(需要时温热)，适用于有效成分遇热易破坏以及含多量淀粉、树胶、果胶、粘液质的天然药物的提取。但本法提取时间长，效率不高，特别用水浸渍时，水提取液易发霉蜕变，需要时应加适量的甲苯等防腐剂。渗漉法：将中药粗粉装入渗漉筒中，用适当的溶剂润湿膨胀24h～48h，然后不竭地添加新溶剂。使其自上而下渗透过药材，自渗漉筒的下口收集提取液。当溶剂渗进药粉溶出成分比重加年夜而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，提取的过程是一种静态的过程，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速（宜成滴不宜成线），在渗漉过程中随时自药面上弥补新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗漉液颜色极浅或渗漉液的体积相当于原药材重的10倍时，即可认为基本上已提取完全。在年夜量生产中常将收集的稀渗漉液作为另一批新原料的溶剂之用。本法溶剂消耗量年夜，费时长，操纵仍嫌麻烦。煎煮法：煎煮法是我国最早使用的传统的提取办法。操纵时将中药