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原花青素对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用

龙源期刊网 https://www.wendangku.net/doc/8014458350.html,

作者：张微黄小民丁黎敏

来源：《中国医学创新》2012年第28期

【摘要】目的：探讨原花青素对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用。方法：体外培养内皮细胞，将细胞分为6组，即空白对照组（Control 组）、氧化损伤组

（H2O2组）、氧化损伤加入VitC对照组（VC+H2O2组）、氧化损伤加入原花青素5

μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L浓度组（procyanidin—L+H2O2组、procyanidin—M+H2O2组、procyanidin—H+H2O2组）。将750 μmol/L H2O2作用于加入VitC及不同浓度原花青素预培养24 h的内皮细胞，继续培养18 h，以细胞毒四唑盐（MTT）比色试验、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）作为检测指标。结果：原花青素呈剂量依赖性降低H2O2对内皮细胞的生长抑制率，降低MDA、LDH量，增加培养液中NO2—/NO3—含量，各指标比较差异有统计学意义（P

【关键词】原花青素； H2O2；内皮细胞；氧化损伤；动脉粥样硬化

细胞凋亡是由基因调控的一种细胞自主有序的死亡方式。细胞数量的稳定取决于细胞凋亡与增殖的动态平衡[1]。目前多项研究证实在动脉粥样硬化等心血管疾病发生发展过程的早

期，内皮细胞凋亡有其重要的作用[2]。内皮细胞（EC）凋亡的主要诱导因素就是活性氧（reactive oxygen species，ROS）的作用[3—5]。而针对这一诱导因素，抗氧化治疗对内皮细胞的凋亡具有保护作用[6—7]，因而寻找和开发可以减轻氧化应激对内皮细胞的损害，抑制EC

凋亡或死亡的药物对于临床应用有着重要意义。

原花青素（proanthocyanidin或procyanidin，PC）是在植物中广泛存在的具有抗氧化作用的多酚化合物的总称，属于生物类黄酮大家族中的一员，具有清除氧自由基、防止细胞老化、抗肿瘤、对抗血小板活化因子、改善微循环、调节免疫等多种作用。原花青素能否保护氧化损伤HUVEC，国内外相关相关报道不多。本实验研究采用体外培养VEC的方法，采用过氧化

氢导致其氧化损伤的模型，研究原花青素对HUVEC损伤过程中过氧化脂质、一氧化氮的影响。

1 材料与方法

1.1 主要材料原花青素（procyanidin）（南京替斯艾么中药研究所）溶于DMSO（上海生物工程有限公司）后避光保存，1640培养基、胰蛋白酶（杭州科易生物有限公司），VitC

（湖北天圣康迪制药有限公司），四氮唑兰（MTT）（AMRESCO公司），胎牛血清（Hyclone公司），MDA、NO、LDH试剂盒（南京建成生物工程公司），H2O2（30%，AR 级，国药集团化学试剂有限公司），临用时稀释，并在5 min内使用。