细胞工程1

细胞工程

生命科学学院张江丽

第一篇

细胞工程学基础

参考文献

1.王蒂.细胞工程学.北京：中国农业出版社，2003

2.安利国.细胞工程.北京：科学出版社，2005

3.李志勇.细胞工程.北京：科学出版社，2003

4.朱至清.植物细胞工程.北京：化学工业出版社，2003

5.徐永华.动物细胞工程.北京：化学工业出版社，2003

6.俞新大.细胞工程简明教程.南开大学生命科学学院

第一章绪论

细胞工程学是以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状，生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。

生物技术领域：细胞工程、基因工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程

生物技术：是指应用自然科学和工程原理，依靠微生物、动物和植物体作为反应器，将物料加工以提供产品来为社会服务的技术。

细胞工程的核心技术：

细胞培养与繁殖

目的：获得新性状、新个体、新物质

第一节细胞工程学的研究内容和任务

一、研究内容

㈠转基因动植物

指用细胞工程结合基因工程的方法将人们需要的目的基因导入受体动植物基因组中，使外源基因与其基因整合在一起，并随细胞分裂而增殖，在动植物体内表达，并稳定地遗传给后代。

㈡染色体工程

指借助于物理、化学等方法，使生物染色体数目、结构和功能发生改变的技术。㈢组织、器官或细胞培养

指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。

㈣原生质体培养

将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。

㈤植物胚胎培养

使胚或具胚器官（子房、胚珠等）在离体无菌条件下发育成正常植株的技术。㈥动物胚胎移植、胚胎培养和试管动物

动物胚胎移植指将动物体内发育的早期胚胎分离出来，将其移植到同期发情的其他未受孕母体生殖道内，代孕产生个体的技术。

试管动物指利用精子和卵子的体外受精、显微受精、胚胎体外培养和移植技术所获得的各种动物。

㈦克隆动物

是动物的无性繁殖，指不经两性结合，个体不断增殖、复制出外形、性能和基

因型一致的个体。

二、研究任务

研究离体培养条件下，

细胞、组织或器官所需营养条件和环境条件；

细胞、组织或器官的形态发生规律；

植物材料的快速大量繁殖方法；

细胞融合方法和机理；

再生个体的遗传和变异；

种质资源的离体保存机理和方法；

动物胚胎移植、胚胎体外生产及动物克隆技术等；

改良生物品种，为人类造福。

第二节细胞工程学发展历史

一、探索期（1859—1929）

（一）组织、器官或细胞离体培养技术的探索

1.1839年Schwann和Schleiden提出细胞学说时指出:“每一个细胞应该可以独立生活和发展，假如具有的条件正如它存在于有机体内一样。”

2.1859年，法国解剖学家Vulpian最早尝试将蛙胚尾部组织切下，放到普通水中“培养”，结果观察到了组织的生长和分化现象；

3.1880年，德国学者Arnold首次发现白细胞在淋巴液或血清中能够分裂；

4.1885年，Roux发现鸡神经板细胞在生理盐水中培养能存活数月，并创用了“外植培养”和“组织培养”一词；

5.1889年，Ljunggren将人的皮肤保存在腹水中几天至几周后再作移植手术获得成功；

6.1902年，德国植物生理学家Haberlandt提出：高等植物的体细胞可以不断分割，直至单个细胞。对植物组织培养的发展起了先导作用。

7.1904年，Hannig在无机盐和蔗糖溶液中培养了萝卜和辣根菜的胚，发现离体胚可以充分发育成熟，这是植物器官离体培养的第一个成功例子。

8.1903年，Jolly 用盖片悬滴法将蝾螈白细胞培养了将近一个月。

9.1906年，Beebe 和Ewing 用动物血清做培养基，将狗淋巴肉瘤细胞培养2h ，并观察到细胞生长现象。

10.1907年，Harrison 无菌淋巴液培养蛙胚髓管部的小片组织神经细胞突起建立了动物细胞培养的基本模式系统

11.Carrel 无菌操作观念带到了细胞体外培养鸡胚心肌组织培养长达34年

12.1923年，Carrel 卡式培养瓶

13. 1925年，Maximow 双盖片法

14.1926年，Strengeway 表玻璃培养法

15.1922年，Kotte 和Robbins 根尖和茎尖豌豆、玉米、棉花的茎尖、根尖离体培养缺绿的叶和根

16.1925年和1929年，Laibach 培养亚麻种间杂交幼胚获得成功并得到杂种。（二）动物克隆技术的探索

1892年，Driesch 最早用实验方法获得了克隆动物海胆

1892年Wilson 2细胞期的文昌鱼

二、成熟期（1930——1959）

（一）植物培养技术

1.培养方法和培养基（1930——1940）

1937年，White 建立了第一个由已知化合物组成的综合培养基。

2.器官形成和个体发育（1941——1959）

1941年，Overbeek 椰乳曼陀罗的心形期胚离体培养成熟

1948年，Skoog 和崔澄腺嘌呤和生长素的比例是控制芽形成的重要因素。

1951年，Nitsch 将果实、子房、未受精胚珠以及花器官的各个部分培养成功。

1953年，Muir 万寿菊和烟草的愈伤组织悬浮液单细胞液体培养

1956年，Miller 激动素细胞分裂素类活性更高

1957年，Skoog 和Miller 提出了植物激素控制器官形成的概念理论

1958年，Wickson 和Thimann 发现应用外源细胞分裂素可打破顶端优势，解除侧芽的休眠状态

1958年，Steward 和Reinert 体细胞胚或胚状体

（二）动物培养技术

1.培养技术

1923年，Carrel 设计的卡式瓶培养方法基础扩大空间、与菌隔离

1923年，Gey 创立了旋转管培养法；1934年Lewis 改良避免静置培养的弊端

1948年，Sanford 分离细胞培养法单个细胞

2.细胞融合技术

生物融合剂：麻疹病毒流行性腮腺炎病毒婴儿哮喘病毒副流感类病毒

1958年，Okada 灭活的仙台病毒细胞融合

3.克隆技术

（探索期研究无脊椎动物）

1938年，Spemann 蝾螈得到发育正常的孪生幼体

40—50年代，童第周孪生小鱼

结论：沿卵裂球方向分割

核移植技术

1938年，Spemann 提出核移植方法全能性验证

1939年，法Commandon 和de Fonbrune 核质杂交变形虫

1958—1959年，Danielli 核质对遗传起着同等重要的作用

1952年，King 和Briggs 豹蛙的囊胚细胞核移入同种蛙的成熟去核卵子中，获得了正常发育的胚胎。细胞的完整性

4.多倍体诱导技术

1939年，Fankhauser 和Griffiths 两栖类三倍体

1945年，Swardson 白鲑三倍体囊胚

1956，1957，1959 Swarup三棘刺鱼并饲养至性成熟

1972年，Purdom 两种海水鲽杂种三倍体

用于经济水生动物育种，目标：禽类和大家畜

三、迅速发展期（1960至今）

（一）植物培养技术的迅速发展

1.原生质体培养和细胞融合

1960年，英Cocking 酶解分离蕃茄根和烟草叶片原生质体

1971年，Nagata 和Takebe 烟草叶肉原生质体再生植株

1972年，Carlson 硝酸钠烟草第一株体细胞种间杂种植株

1974年，Kao 聚乙二醇大豆和烟草科间原生质体的融合同年Bonne 和Eriksson 叶绿体的摄取PEG 细胞融合剂

1975年，Cocking 鸡红细胞与酵母细胞的融合

1976年，Smith 诱导了人的HeLa 细胞与烟草细胞的融合界间

1978年，Melchers 马铃薯和番茄的融合实验获得了第一个属间杂种植株

1981年，Zimmerman 改变电场的方法诱导原生质体进行融合新方法物理融合1985年，Fujimura 第一例禾谷类作物—水稻再生植株

1986年，Spangenberg 甘蓝型油菜单个原生质体培养再生植株

2.微繁技术

1960年，Morel 快速无性繁殖兰花

繁殖系数高，脱毒，产业化，效益巨大

3.花药培养技术

1953年，Tulecke 银杏成熟花粉获得了愈伤组织

1957-1963 裸子植物

1973年，Nitsch 烟草花粉植株

1974年和1979年，Sunderland 建立了散落花粉系列培养法（花药漂浮）

1982年，Ghandimathi和Imamura 从烟草花蕾直接分离花粉培养获得成功

4.次生产物生产—产业化

1969年，Kaul 薯蓣皂苷配基

1973年，Furuya和Ishii 大量的人参皂苷

皂苷类、甾醇类、生物碱、醌类、氨基酸和蛋白质等

（二）动物培养技术的迅速发展

1.细胞融合技术

1965年，Harris 和Watkins 小鼠和人的体细胞融合基础研究

1975年，K?hler和Milstein 单克隆抗体

实验室----产业化

2.动物细胞与微生物的大规模培养及次生产物生产

生物反应器生产珍贵的生物制品

1962年，Capstick 大规模悬浮培养方法和技术的完善和改进

生产疫苗干扰素单克隆抗体抗生素维生素

3.克隆技术两栖类—鱼—哺乳动物我国“鱼”

4.胚胎移植和试管动物

5.胚胎干细胞

6.转基因动物生物反应器

第三节细胞工程学发展趋势和应用前景

一、医学

制药业诊断试剂的生产计划生育优生优育方面

二、农牧渔业

（一）品种改良

（二）新农药和兽药的生产（三）食品和饲料生产

三、化工

四、环境保护防治工业污染

五、能源

江苏省高中生物 第九讲 实验(一)学案 苏教版必修1

第九讲实验(一 ) 测试内容测试要求五年考情 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 实验原理 实验材料用具、实验方法步骤 实验结果及其分析 B A C 2013、2014、2015、2017(选)、 2016(主) 观察植物细胞的质壁分离和复原 实验原理 实验材料用具、实验方法步骤 实验结果及其分析 B A C 2015(选)、2016(选、主) 观察植物细胞的有丝分裂 实验原理 实验材料用具、实验方法步骤 实验结果及其分析 B A C 2013(主)、2015(选)、2016(主 ) 1.还原糖与________发生作用，生成________沉淀；脂肪被________染成________；蛋白质与________发生作用，产生________反应。 2.观察有丝分裂时常用的材料是____________细胞。染色体易被________________(如龙胆紫、醋酸洋红)染成深色。 3.有丝分裂装片的制作过程：________→________→________→________。 4.植物细胞的________相当于一层半透膜，当细胞液的浓度________外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁与原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性________，当细胞失水时，原生质层就会与细胞壁分离开来，也就是________。当细胞液的浓度________外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入细胞液中，使细胞质壁分离复原。 5.光学显微镜的放大倍数：显微镜的放大倍数等于________放大倍数与________放大倍数的________。物镜越长，放大倍数越________，距装片距离越________；目镜越长，放大倍数越________。 6.显微镜的成像特点：显微镜下所成的像是倒立的放大的虚像，如字母“b”所成的像是________。要移动物像到视野中央时，应向________方向移动装片。 1.斐林试剂与双缩脲试剂的比较 (1) 溶液浓度不同：斐林试剂中NaOH浓度为0.1 g/mL，CuSO4浓度为0.05 g/mL；双缩脲试剂中NaOH浓度为0.1 g/mL，CuSO4浓度为0.01 g/mL。 (2) 使用方法不同：斐林试剂使用时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合，然后立即使用，并需进行水浴加热后观察；双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液，再滴加几滴CuSO4溶液，振荡后直接观察。 2.光学显微镜的使用

细胞工程复习资料1

细胞工程知识点 第一章细胞工程 1、细胞工程：是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水 平，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或获得细胞产品的一门综合科学技术。 操作水平：细胞整体水平或细胞器水平。目的：定向改变遗传物质或获得细胞产品。理论基础：细胞全能性发酵工程目的：定向地改造菌种,大量生产微生物菌体或代谢产物。 2、重要应用：快速繁殖；种苗脱毒；动物胚胎工程快速繁殖优良/濒危品种；利用动植物细胞培养生产活性产物/药品（动物细胞融合---单克隆抗体；植物细胞大量培养----次生代谢产物）；新型动植物品种的培育；供医学器官修复或移植的组织工程；珍稀动植物资源的保存与保护 3、生物技术包括：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程四个方面。 动物细胞工程包括：细胞培养技术（组织培养、器官培养）；细胞融合技术；胚胎工程技术（核移植、胚胎分割等）； 克隆技术（单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆）。 植物细胞工程：植物组织/器官培养技术；细胞培养技术；原生质体融合与培养技术；亚细胞水平的操作技术等。 4、细胞工程与基因工程相比：前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术，后者是分子水平上的生物技术。（如克隆多莉羊技术是细胞水平上的技术，培育抗虫棉是分子水平上的技术。）细胞工程是基因工程的基础 第三章细胞工程实验室及实验基本操作 1、实验室包括：基本操作室、无菌操作室、培养室、鉴定分析室、温室等。 实验室应满足清洗、无菌操作、培养基制备、贮藏和培养鉴定等多方面工作的要求。 基本操作室包括：洗涤间、灭菌间、贮藏间、培养基配制间。无菌操作室分为：缓冲准备区、接种区。 2、消毒灭菌的方法： 物理方法：干热(烘箱)、湿热、过滤（0.25微米）、紫外灯、超声波等。 化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、双氧水、福尔马林等 （1）干热灭菌：适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。（3）过滤除菌法：适用于一些培养基、酶液、血清等。（2）湿热灭菌：适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121℃ 维持20~30min （4）射线灭菌：主要是利用紫外灯进行照射，适合实验室空气、操作台等，灭菌时间20-30min。 （5）火焰灼烧灭菌：用火焰灼烧达到灭菌目的，适用于接种器皿的灭菌。 （6）消毒剂：适用外植体、实验器皿、操作表面、皮肤等。 第二章(植物)细胞工程的理论基础 **1、生命特征属性包括：新陈代谢、应激性、自我复制。离体培养细胞可展现该物种的生命特性。 2、植物组织培养的类型 按材料的类别分：愈伤组织培养（最为常见的组织培养）；细胞培养（分为悬浮细胞培养和单细胞培养）； 器官培养（胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养）；原生质体培养 按培养方法分为：固体培养；液体培养；看护培养；微室培养；包埋培养。按培养过程分：初代培养；继代培养。 3、植物细胞全能性表现强弱： 营养生长中心> 形成层> 薄壁细胞> 厚壁细胞(木质化细胞) > 特化细胞(筛管、导管细胞)；

动物细胞工程1

动物细胞工程 1 一、单选题 1．下列关于细胞工程的叙述，正确的是（） A．骨髓瘤细胞经免疫处理，可以直接获得单克隆抗体 B．灭活的病毒为促细胞融合剂，可诱导原生质体的融合 C．用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂 D．核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体 2．下列关于动物的细胞融合技术及其应用的叙述，错误的是 A．细胞杂交时因染色体容易丢失，可用于基因定位 B．杂交瘤技术制备的单抗，可解决抗血清的异质性问题 C．细胞杂交时可采用电融合技术，合适的电场中质膜的脂双层被击穿 D．制备单抗时，经细胞融合、克隆可获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞3．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性4．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是A．植物组织培养和单克隆抗体——细胞的全能性 B．纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性 C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖 5．图为科研人员培育克隆猴“中中”的流程图。下列有关叙述正确的是（）

A．e的性状表现不受于b中的基因控制 B．图中涉及的技术有动物细胞培养、核移植、胚胎移植等 C．d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件 D．e诞生实验体现了a细胞的全能性 二、多选题 6．下列有关细胞工程技术在生产实践中应用的叙述，正确的是 A．愈伤组织细胞分裂能力强，可作为体细胞诱变育种的材料 B．植物花粉粒细胞容易获取，可作为培养单倍体植株的理想材料 C．动物胚胎细胞分化程度低、易恢复全能性，可优先作为核移植的受体细胞 D．自体皮肤生发层细胞分裂能力强且不会排斥，可作为烧伤患者皮肤移植母细胞 7．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如右图所示，a、b、c 表示现代工程技术，①②③表示通过相应技术经胚胎移植得到的个体，请据图回答，下列说法错误的是 A．若a 是核移植技术，①中个体的获得反映了动物细胞具有全能性

动物细胞工程知识点

动物细胞工程12月20日 动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理：细胞增殖 3、过程 分散成单个细胞， 制成细胞悬液 注意： ①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。 ③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。 思考回答： ⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养? 答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么? 答：不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 ⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高） ⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?

答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。 ⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4、重要概念 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 产生原因：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。 培养要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒，易于贴附。 ②细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 ③原代培养：动物组织消化后的初次培养 ④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。 5、培养条件： ⑴无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 ⑵营养： 成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。 培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基） ⑶温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ⑷气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。 6、应用：生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。基因工程中受体细胞的培养。用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。

植物烟草实验

烟草叶片愈伤组织诱导 摘要用不同成分培养基，附加0.8%琼脂，3%蔗糖，调pH5.8—6.0，取烟草叶片 作为外植体进行愈伤组织诱导培养，计算污染率、诱导率以及诱导情况，观察愈伤 组织的发生情况。实验表明，养分较高的培养基，外植体生长情况较好。当细胞分 裂素高于生长素的浓度时，有利于分化出芽；细胞分裂素低于生长素的浓度时，有 利于分化出根；当细胞分裂素及生长素的浓度适合时，愈伤组织不分化，但是生长 旺盛。 关键词：烟草叶片愈伤组织诱导 前言 烟草（Nicotiana tabacum）又名草烟，属茄科烟草属的一年生草本植物，本属约有60种，原产于美洲和大洋洲[1]。烟草是重要的经济作物和工业原料作物，其体内所含的烟碱等生物碱是非常宝贵的医药及化工原料[2]。有报道烟草细胞悬浮培养物获得细胞分裂素类物质，因此很有必要对烟草的组培快繁进行研究，以获得更有效的方法提高产率和产量。柯善强综述植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制[3]，戴冕进行了烟草叶肉原生质体再生植株的研究[4] ,徐瑞娟等通过烟草花序苞叶的离体培养分化出花芽[5],战淑敏用烟草叶组织培养直接获得再生植株[6]。本实验以烟草叶片组织为外植体进行组织培养，诱导愈伤组织，观察愈伤组织诱导情况。 1.材料与方法 1.1 配置培养基母液，每2人为一个小组，配置以下培养基，并分装，灭菌，然后室温下放置一周。 1.2 取烟草叶片取烟草的嫩叶片作外植体。先用自来水冲洗干净，再用蒸馏水洗2次后，置于超净台上，于无菌条件下先用75%的酒精浸泡30秒，然后置于无菌瓶中用10%次氯酸钠溶

液浸泡20分钟至30分钟，再用无菌水冲洗4次，最后在无菌培养皿中将嫩叶片切成1cm见方小块，接种在培养基中。 1.3.1 观察污染情况：观察是否有细菌性污染（菌斑呈粘液状,接种后1-2天出现）和真菌性污染（出现不同颜色霉菌,接种后3-10天出现），并计数。计算污染率。 污染率(%)=污染的材料数/总接种材料数×100%[7] 1.3.2 观察各培养基中的外植体产生愈伤组织的情况，愈伤组织出现时间和愈伤组织形态特征（颜色和质地等），计数形成愈伤组织的材料数，并计算诱导率。 诱导率(%)=形成愈伤组织的材料数/总接种材料数×100%[7] 2.结果及分析 2.1愈伤组织诱导情况 三天后发现部分组有细菌性污染（如图1），7天后发现部分有真菌性污染。计算出污染率和如表1所示： 表1. 愈伤组织诱导的污染情况 造成污染的可能原因有：叶片消毒灭菌不彻底，接种室超净工作台消毒不彻底，接种操作时操作不规范等等。 叶片在第4天后边缘慢慢上卷，外植体开始膨胀，于接种后第7 天膨大成圆拱型，愈伤首先发生在叶片边缘, 为黄绿色颗粒状，有些呈现半透明。随着进一步培养, 10天愈伤组织不断加大。 排除褐变及感染的外植体后，诱导情况如表2所示： 表2.愈伤组织诱导情况

杨淑慎《细胞工程》复习总结

第一章 细胞工程（Cell Engineering）是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。 1.植物细胞工程：以植物细胞组织为基本单位，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种或创造新物种，或加速繁殖植物新个体，或获得有用物质的过程。 2.动物细胞工程：以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作，使细胞产生某些人们所需要的生物学特性，从而改良品质，加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。 3.外植体：是指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。 4.培养基的基本成分：水、无机盐、有机成分、激素、其他。 5.细胞工程分类：器官、组织和细胞培养；原生质体培养；植物胚胎培养；动物胚胎工程；转基因动植物；胚胎干细胞；染色体工程。 6.细胞学说的提出者：Schwann和Schleiden 第三章 1.细胞的全能性：一个细胞所具有的产生完整个体的固有能力。 2.植物细胞按照分裂能力分为三类： 第一类是始终保持分裂能力，如茎尖、根尖及形成层细胞；第二类是永久失去分裂能力的终端分化细胞，如筛管、导管、气孔保卫细胞等特化细胞； 细胞，如表皮细胞及各种薄壁细胞。第三类是在通常情况下不分裂，但在受到外界刺激后可重新启动分裂的G 3.细胞脱分化（dedifferentiation）：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程 4.蛋白体的出现及细胞质密度的增加是细胞开始脱分化的标志。 5.细胞分化（Differentiation）：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。 6.极性（polarity）：是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。 7.器官发生：是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。 8.器官发生的类型：1）、先芽后根；2）、先根后芽；3）、根芽同步发生。 9.影响器官发生的因素：1）、激素；2）、光照；3）、培养物的年龄；4）、外植体的生理状态 10.体细胞胚：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞），统称为体细胞胚或胚状体。 11.体细胞胚定义的3方面界定： 1）、体细胞胚是离体培养的产物，只限于离体培养范围使用，以区别于无融合生殖胚。2）、体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚。3）、体细胞经过了胚胎发育过程，以区别于离体培养中器官发生形成个体的途径。 12.体细胞胚形成途径：1）、直接从外植体上产生体细胞胚 2）、由愈伤组织产生 3）、悬浮培养中由胚性细胞复合体表面产生 4）、由悬浮培养中游离的单细胞产生 5）、由单倍体细胞产生 13.愈伤组织：是一团无序生长的细胞，这些细胞大都处于随机分裂状态。 14.离体培养下细胞全能性表达是通过细胞分化和再分化实现的。 15.器官发生和体细胞胚胎发生是植物细胞再生个体的基本途径。 16.人工种子又称合成种子或体细胞种子：是将植物离体培养产生的体细胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中在适宜的条件下发芽出苗。 17.人工种子的优点： 1）、培养条件可以人为控制 具有省地省工可直接在田间播种等优点。2）、在人工种子制作中 可加入营养物质、植物生长调节剂、固氮菌、杀虫剂等。3）、用于制作人工种子的体细胞胚 可利用生物反应器大规模培养 大大提高了效率。4）、一些难以得到天然种子的珍稀植物或脱毒苗、基因工程植株 均可利用人工种子技术加速用于生产。 第九章和第四章 1.体细胞无性系：由任何形式的细胞培养所产生的植株统称为体细胞无性系。 2.体细胞无性系变异：由体细胞无性系表现出来的变异。 3.离体培养中的遗传与变异特点: 1)、离体培养中的遗传稳定性 2)、离体培养下的变异特点:变异的普遍性;变异的局限性;嵌合性4.培养类型 原生质体＞细胞＞组织器官。性细胞＞体细胞

1340064《植物细胞工程》课程教学大纲

GDOU-B-11-213 《植物细胞工程》课程教学大纲 课程简介 课程简介： 本课程以植物细胞工程有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术为主线，系统传授植物细胞的全能性、植物细胞脱分化和再分化、植物快速微繁殖、人工诱发单倍体、植物胚胎培养、植物单细胞培养与突变体筛选、原生质体培养、细胞融合、人工种子、超低温冷冻贮藏种质、细胞遗传转化体系等内容。 课程大纲 一、课程的性质与任务： 本课程为作物遗传专业研究生的专业课，其涉及当今生物科技领域的许多高新技术。本课程在专业性上起着承上启下的作用：植物学、植物生理生化和作物遗传学作为本课程的基础课程；基因工程和作物育种学则是本课程的延伸和提高课程。它将理论教学和技能性教学融为一体，是开展科学研究和生产开发的重要工具。 二．课程的目的与要求： 学生学完本课程后，应掌握植物细胞工程有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术。 三．面向专业： 本课程适宜作物遗传育种专业研究生选修。 四．先修课程： 学习本课程前，应先修《植物学》《植物生理生化》、《作物遗传学》、《作物栽培学》等有关课程。五．本课程与其它课程的联系： 先修课《植物学》为本课程打下植物发育的基础知识；《植物生理生化》为本课程打下植物生理生化的专业基础知识；《作物遗传学》为本课程打下植物遗传变异的专业基础知识；《作物栽培学》为本课程打下作物对光、温、水、肥环境条件要求的专业知识。本课程为后续课程《作物育种学》提供细胞水平的育种手段；为后续课程《基因工程》提供组织培养手段。 六．教学内容安排、要求、学时分配及作业： （教学要求按从高到低分掌握-A、理解-B、了解-C三种） 0 绪论（1学时） 0.1 植物细胞工程的概念和任务 植物细胞工程概念（A）。 植物细胞工程的内容（C）：器官培养、胚胎培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养、培养技术的延伸。 植物细胞工程的任务（B）：研究剌激因子和营养条件（无机和有机营养、激素）；环境条件（光、温、湿）；形态发生规律、遗传的稳定性和变异性。

动物细胞工程

细胞工程第一讲 一、概述 1、细胞工程（cell engineering ）定义 应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的原理方法与技术，按照人们的需要，在细胞水平上进行遗传操作，包括细胞融合、核质移植等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。 2、细胞工程的研究内容 （1）动植物细胞和组织培养 植物细胞培养主要用于育种和代谢产物制备，日本等国家用生物反应器培养人参细胞生产有效药用成分。 动物细胞培养用于制备单克隆抗体、疫苗、生长因子等。 （2）细胞融合 改良性状，培育新品种 （3）染色体工程 细胞工程 动植物细胞和组织培养 细胞融合 染色体工程 胚胎工程 细胞遗传工程 器官培养 组织培养 细胞培养 （快速繁育和产物大量制备） （改良性状，培育新品种） （培育新品种，单倍体和多倍体） （获得人们需要的成体） （无性繁殖，改变性状） 克隆 转基因技术

主要用于培育单倍体或多倍体新品种，如四倍体小麦，八倍体小黑麦 （4）胚胎工程 主要是获得人们需要的成体 如：胚胎分割技术、胚胎融合技术、卵核移植技术、体外授精技术等最成功应用于畜牧业获得优良品种与胚胎保存 对人类来说主要用于不孕症获得试管婴儿 （5）细胞遗传工程 克隆：无性繁殖，动物克隆指经无性繁殖而产生遗传性状完全相同的后代个体。 转基因技术：将外源基因整合到生物体内，能够表达并稳定遗传给后代的实验技术。 3、细胞工程的优势 （1）避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作，只需将细胞遗传物质直接转移到受体细胞中就能够形成杂交细胞。 （2）不仅可以在植物与植物之间、动物与动物之间、微生物与微生物之间，甚至可以在三者之间形成前所未有的杂交物种。 4、细胞工程发展 （1）萌芽阶段---理论渊源和早期的尝试（20世纪初-30年代中期）德国植物生理学家Haberlandt在1902年提出植物细胞的全能性。认为植物细胞有再生出完整植株的潜在能力。 美国生物学家Harrison 是公认的动物组织培养的创始人，1907年，以淋巴液为培养基观察了蛙胚神经细胞突起的生长过程，

细胞工程学教学大纲

《细胞工程学》教学大纲 课程名称：细胞工程学 课程类别：专业必修课 学时：32 学时 学分：2学分 考核方式：考试 适用专业：生物技术 开课学期：第5学期 一、课程性质、目的任务 《细胞工程》是通过对细胞及其组分的人工操作，研究生命活动规律；实现对动植物的遗传改造,用于农业、林业、园艺等生产实践；结合非生物材料等手段，生产用于治疗人类疾病或缺陷的人工器官，组织, 细胞及其代谢产物或用于深入研究的材料等为主要研究内容的一门新兴学科。 通过本课程的学习，使学生系统掌握该门学科形成与发展，理论与原理，技术与方法等基础知识，结合科研实际以及最新研究动态，使学生对本课程有一个全面的了解；以适应后基因组学时代在教学、科研和生产开发各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。 二、课程基本要求 通过对细胞工程学的特性和内容，细胞工程的主要类型和技术操作，细胞工程学研究的基本方法等进行阐述，使学生能够掌握如何将细胞工程学知识应用于生产实践。 三、学时分配

四、教学方法与考核 1．教学方法：讲授法、案例分析法 2．课程考核方法：考试 1）平时成绩占20%，期末考试成绩占80% 2）平时成绩评分标准 平时成绩（100分），包括学生课堂出勤情况（20分）、课堂发言及积极参与情况（20分）、课后作业完成情况及质量（60分）。此项成绩需由教师提供评分依据及记录。 3）期末成绩评分标准 以评分标准为依据，所得卷面成绩为准，以考试试卷形式考查，考试形式为笔试，满分100分，试题包括基本知识概念，知识的理解和应用，综合应用等能力等教学内容的考查。全面涵盖本课程知识重点和难点，渗透学科前沿及进展，能够真实反映学生对本课程的知识和能力的学习情况。 五、大纲正文 绪论（2学时） 【目的要求】 1. 了解细胞工程的发展历史。 2. 了解生物工程学的组成内容 3. 了解细胞工程的应用。 4. 理解生物工程学与其它学科之间的学科交叉。 5. 理解细胞工程学与生物工程的其他技术之间的联系。 6. 掌握细胞工程学的主要组成。 7. 培养严谨、认真的科学观。

植物细胞工程综合大实验

植物细胞工程综合大实验（一） ——培养基配制和无菌操作 一、实验目的与要求 熟练掌握器皿的洗涤 MS培养基的配制分装 培养基和物品的高压灭菌 实验室的消毒灭菌 植物材料的取材及流水冲洗 无菌操作 材料的培养观察 二、实验原理 植物细胞的全能性。 三、仪器设备与器具 电子天平、移液枪、冰箱、高压锅、超净工作台、 三角瓶、烧杯、容量瓶、培养皿、搪瓷缸、镊子、 解剖刀、酒精灯、试剂瓶、玻璃棒、线绳、pH试纸、封口膜、试管刷、洗涤剂、打火机等。 四、实验材料 彩云阁茎段（用于诱导愈伤组织） 茎节（用于诱导芽） 五、实验方法与步骤 （一）器皿的洗涤

一般器皿 有培养物但未污染的器皿 有培养物且污染的器皿 （二）MS培养基的配制分装 1、MS培养基母液的配制 母液A-F，每组配制A-E 100ml、F 50ml 0.1%升汞的配制 75%酒精的配制 6-BA NAA 2、MS培养基的配制 按每人配制100ml，分5小瓶。 过程如下；每组按1L配制，先取容器内加70%的蒸馏水； 加入蔗糖30g/L；量取母液A-F；加入PGR（自己设计）；用容量瓶定容；用0.1-1N NAOH或HCl调整pH5.6-5.8；每人分100ml；加琼脂粉8g/L；分装到5个小三角瓶中、封口。 （三）培养基和物品的高压灭菌 培养基、无菌水（每组至少5瓶）、空瓶（每组至少2个）、烧杯（每组至少1个）、培养皿（每组至少一套）、接种工具（2套），包好或者分好以备高压灭菌。 高压锅的使用。 （四）实验室的消毒灭菌

75%的酒精擦拭超净工作台内表面，新洁尔灭水进行超净工作台外表面、培养架表面、墙壁及其他房间表面的擦拭。 （五）植物材料的取材及流水冲洗 选取适宜的彩云阁茎节及茎段，切割成适宜大小后放在流水下冲洗。 （六）无菌操作 演示。 （七）材料的培养观察 接种完的材料放在培养室的培养架上进行培养。培养初期每天观察一次，持续1周。之后每2-3天观察一次。 统计指标： 污染率（%）= （污染的外植体个数／接种外植体的总数）×100%。 愈伤组织诱导率（%）= （长愈伤外植体个数／接种外植体总数）×100%。 芽诱导率（%）= （长芽外植体个数／接种外植体的总数）×100%。（八）结果与分析

植物保生长与环境实训大纲

《植物生长与环境》实验教学大纲 《植物生长与环境》实验是《植物生长与环境》课程教学过程中的重要环节，是对理论教学的重要补充和验证，是实践技能培养的重要途径。实验内容的安排以实用性为宗旨，以提高实践技能为目的，做到与理论教学相辅相成，互相促进，提高教学效果。 按校种植类专业教学计划要求，《植物生长与环境》实验分12个项目，教学30学时。 具体内容如下： 实验实训一显微镜的构造及使用方法 实验实训二植物的细胞结构的观察 实验实训三植物营养器官的观察 实验实训四植物生殖器官的观察 实验实训五快速测定种子生命力的方法 实验实训六土壤含水量测定与田间验墒技术 实验实训七土壤样品的采集与制备 实验实训八土壤酸碱度的测定 实验实训九降水量与空气湿度的观测 实验实训十土壤温度与空气温度的测定 实验实训十一土壤速效氮、磷、钾的测定

实验实训十二化学肥料定性鉴定 实训大纲 实验实训一显微镜的构造及使用方法 一、目的要求 1. 了解显微镜的构造、性能及成像原理。 2. 掌握显微镜的正确适用及维护方法。 二、实验内容 显微镜各部分的名称和作用。显微镜的使用方法。显微镜的保养与使用注意事项。 实验实训二植物的细胞结构的观察 一、目的要求： （1）学会制作和观察植物细胞的临时装片． （2）认识植物细胞的基本结构． （3）会画植物细胞结构图． 二、实验内容: 1、临时玻片标本切片的制作。 2、光学显微镜下植物细胞结构观察 3、生物绘图法。通过观察切片掌握细胞的基本结构。 三、实验作业 绘洋葱鳞叶表皮细胞结构图，并注明各部分名称

实验实训三植物营养器官的观察 一、目的要求 1、掌握双子叶植物和单子叶植物根的结构特点。了解种子植物的根尖分区。 2、掌握枝、芽和茎的外部形态和类型。掌握双子叶植物茎的内部构造。 3、掌握叶的组成、叶片的形态、叶脉的类型、单叶与复叶的区别、复叶的类型、叶序。掌握叶的解剖结构。 4、学会叶脉书签的制作。 二、实验内容： 根、茎、叶的形态描述和内部解剖结构的观察 三、实验作业 绘出根茎叶结构图 实验实训四植物生殖器官的观察 一、实验目的要求: 掌握花的基本结构及其形态变化，认识各种花和花序的类型。 重点掌握雄蕊和雌蕊的构造。 二、实验内容: 1、油菜花的观察

动物细胞工程试题及详解

动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

植物细胞工程

HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 烟草叶片愈伤组织诱导与植株再生的研究Research on Callus Induction and Plant Regeneration of Tobacco Leaves 姓名: 黄金波 CANDIDATE：Huang-Jin Bo 学号: 2012304200510 STUDENT ID：2012304200510 课程: 植物细胞工程实验CURRICULUM：Plant Cell Engineering Experiment 班级: MAJOR: 生技1201班Biotechnology 1201 指导老师：SUPERVISOR：柳俊齐迎春陈浩 Liu-Jun Qi-Ying Chun Chen-Hao 中国武汉 WUHAN， CHINA

二○一四年十二月DEC, 2014

烟草叶片愈伤组织诱导与植株再生的研究 黄金波 华中农业大学生命科学技术学院生技1201班 [摘要] [目的]以烟草叶片为材料，通过这次实验，基本掌握植物愈伤组织诱导与植株再 生的原理和方法，熟练掌握相关实验操作技术；另外，通过本次实验，完成烟草植株再生，并对比光照和黑暗等不同方法，对诱导愈伤组织状态和诱导率的影响，进行结果分析。 [方法]在无菌条件下，把烟草叶片剪成1cm2大小的小方块，先通过含0.25mg/L NAA和0.25mg/L BA的MS诱导培养基在光照和黑暗条件下诱导培养；三周后，转接到含0.25mg/L NAA和1.0mg/L BA的MS分化培养基中光照培养；两个月后，观察结果，统计分析。 [结果]诱导培养后，在光照条件下和在黑暗条件下培养的均有67.7%的被污染了；用剩下的33.3%全部接种到分化培养基上培养。结果表明分化率在光照条件下和在黑暗条件下无差别；每个愈伤组织分化芽数在光照条件下明显多于在黑暗条件下诱导；分化芽状态在黑暗和光照条件有一定的区别，分化植株苗在光照和黑暗条件下诱导没有明显区别。 [结论]光照条件和在黑暗条件下诱导可以影响愈伤分化芽数和分化芽状态。 [关键词] 烟草叶片；愈伤组织；细胞工程；分化；诱导；植株再生 Research on Callus Induction and Plant Regeneration of Tobacco Leaves Huang-Jin Bo Huazhong Agriculture University , College of Life Science and Technology , Biotechnology 1201 [Abstract] [Objective]Using tobacco leaves as materials, through the experiment, we should handle the basic principle and method of plant callus induction and plant regeneration，master related experiments’technology; In addition, through this experiment, to complete the tobacco plant regeneration, and compared different methods of callus induction, such as light and dark state, and the effects to the state and induction rate, then analyzing the results. [Method]The tobacco leaf was cut into 1 cm2 size small squares under aseptic conditions. Firstly induced in the MS induction medium with 0.25 mg/L NAA and 0.25 mg/L BA, under the condition of light and dark, respectively; Three weeks later, transferred to MS differentiation medium with 0.25 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA culturing under light; Two months later , observing the results, and analyzing the statistics. [Results]After the induction culturing, 67.7% materials were polluted both under the condition of light and dark; rest 33.3% materials were inoculated to the differentiation medium, continuing to cultivate. As a result, it was successfully. The results show that there are no obvious differences between with the light condition and dark condition. Each number of callus bud differentiation under the condition of the light induced significantly more than in the

2019-2020年高考生物精华学案 动物生命活动的调节之体液调节

2019-2020年高考生物精华学案动物生命活动的调节之体液调节 班级姓名学号日期编号：34 【考纲要求】 【复习目标】 （1）描述动物激素的调节 ①概述体液调节的概念 ②举例说明动物激素的概念和特点 ③简述人体内主要的内分泌腺所分泌激素的种类与主要作用 ④举例说出激素间的协同作用和拮抗作用 ⑤比较神经调节和激素调节的特点 （2）探讨动物激素在生产中的应用 ①了解动物激素在农业生产上的运用情况 ②评价动物激素在生产中应用的利与弊 【自主学习】 一、人体内主要的内分泌腺所分泌激素的种类与主要作用 （创新P167，考点2，要点整合表格）

二、甲状腺激素分泌的分级调节 三、激素调节的特点 四、神经调节和体液调节的关系 （创新P169，考点4） 【试试身手】 1、青蛙垂体提取液中有促进雌蛙排卵的激素，该激素作用的器官是 A、甲状腺 B、胰腺 C、卵巢 D、肾上腺 2、将蛙的卵巢放入含有蛙脑垂体提取液的培养液中，同时检测某种激素的含量。经过一段时 间培养后，再检测培养液中该激素的含量，发现该激素含量增加，这种激素是 A．促性腺激素释放激素 B．促性腺激素 C．促甲状腺激素 D．雌激素

3、右图为人体甲状腺激素分泌调节的示意图，下列叙述中错误的是 A．甲状腺机能亢进患者激素③分泌过多 B．缺碘时激素①和②浓度都高于正常水平 C．图中共有3处箭头表示负反馈调节 D．垂体还能分泌与激素③有相似生理效应的激素 4、有同一器官分泌，且生物效应相反的一组激素是 A．胰岛素和胰高血糖素 B．肾上腺素和肾上腺皮质激素 C．促甲状腺激素和生长激素 D．甲状腺激素和促甲状腺激素 5、右图①②③表示人体细胞间信息传递的三种主要方式。 下列描述错误的是 A. 方式①②的信息传递缓慢，方式③传递迅速 B. 方式③的信息传递不通过体液 C. 体温调节可能涉及①②③三种传递方式 D. 方式①②的信息传递都经过血液循环，存在反馈调节 6、关于人体激素的叙述，错误的是 A．激素在人体内作为信息物而发挥作用 B．激素在人体内含量较低，但有高效的生物催化作用 C．甲状腺激素除了促进人体产热，还有其他生理效应 D．正常人体内，激素的分泌受反馈调节 7、关于下丘脑功能的叙述，正确的是 ①可参与血糖平衡的调节②有调节躯体运动的高级中枢③可合成和分泌促甲状腺激素释 放激素④垂体通过下丘脑控制性腺的生长发育 A．①② B．②③ C．②④ D．①③ 8．研究发现，胰岛素必须与细胞膜上的胰岛素受体结合，才能调节血糖平衡。如果人体组织细胞膜缺乏该受体，则可能导致 A.细胞减缓摄取血糖，血糖水平过高 B.细胞减缓摄取血糖，血糖水平过低 C.细胞加速摄取血糖，血糖水平过高 D.细胞加速摄取血糖，血糖水平过低 9．在人体内，可以在同一细胞中产生的是

细胞工程(第二版)安利国第一章考试重点

细胞培养的设施与基本条件 1、细胞工程实验室的要求：能进行六个方面的工作：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒 灭菌处理和储藏。 2、细胞工程实验室通用的仪器设备主要有：超净工作台、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、 电热干燥箱、水纯化装置、低温冰箱、高压蒸汽消毒器。 3、无菌操作室：是相对密封、防尘、防菌的工作空间，理想的无菌操作室应划分为更衣间、 缓冲间及操作间。 4、动物与植物细胞工程实验室通用的仪器设备：超净工作台（侧流式和外流式）、倒置显 微镜（定期检查培养细胞器皿中的细胞生长情况，可及时调整培养条件）、电热干燥箱（鼓风式，优点是温度均匀，效果较好，缺点是升温过程较慢）、水纯化装置（离子交换纯水装置或蒸馏器纯化，市场上出售的制备纯水的设备有蒸馏式和过滤式两种，用于细胞培养的纯水装置应以三重纯水玻璃蒸馏器为好）、冰箱、压力蒸汽消毒器、细胞计数板和电子细胞计数仪、过滤除菌装置（Zeiss滤器、玻璃漏斗式滤器、微孔滤膜滤器）、离心机、移液管和吸管、离心管、移液器（电动移液器、微量移液器、多通道可调式微量移液器）、天平。 5、动物细胞工程实验室的常用仪器设备：培养箱（37°C、5%CO2）、显微操作仪、细胞 融合仪、细胞冷冻储存器（程序化冷冻仪、液氮容器）、培养用器皿（培养皿、培养瓶、培养板、旋转培养器）、手术器械。 6、植物细胞工程实验室的常用仪器设备：光照培养箱、人工气候室、摇床（水平往复式、 回旋式）、培养瓶。 7、典型的P4实验室由：更衣间、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 8、细胞培养最基本的要求包括：7点P16 9、二级生物安全的要求在一级生物安全的要求基础上，增加是那些内容？5点P16

动物细胞工程(1)

第三节动物细胞工程 动物细胞与组织培养、细胞核移植与动物体细胞克隆 学习目标： 1.简述动物细胞培养的过程、条件及其应用； 2.简述克隆动物的概念含义和基本原理； 3.简述体细胞核移植技术和动物克隆技术，以及应用前景； 课前导学： 一、动物细胞工程包括的主要技术 动物细胞工程的主要技术包括____ 、_____ 、___ ___、_______________、________________等技术。其中_________________________是其他动物细胞工程技术的基础。 二、动物细胞与组织培养 1．概念：动物细胞与组织培养是指在体模拟____ _ __，将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其、并维持原有和的技术。 2. 材料：动物或出生不久的的器官或组织。 3. 过程： （1）动物细胞培养： （2）动物组织培养： （3）动物细胞培养和动物组织培养的区别：动物细胞培养过程中需要用 __________________等使________________________________________________。 4.培养条件： （1）温度：最适温度是°C左右。 （2）PH：最适PH范围是_______。 （3）气体：主要是和，气体的含量不仅影响培养环境的，还直接影响。 （4）营养物质：如、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、和生长因子等。 5.培养基的种类： 天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。 合成培养基：人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。缺点是缺乏天然培养