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红叶石楠组培技术

红叶石楠组培技术

组织培养已成为当前农林种苗生产中的一种重要的繁殖手段,与常规的无性繁殖方法相比,它具有繁殖速度快、周年生产、产品一致性好等优点,尤其在繁殖一些种源稀缺的品种时,更能体现它的优势。红叶石楠是近年从国外引进的一个国际新品种,组织培养可以分以下几个步骤进行:外植体的取得→初代培养(无菌系的建立)→继代培养(增殖培养)→生根培养→炼苗及过渡移栽→移植到大田。

外植体的取得

选择红叶石楠的茎尖和茎段作为组培用的外植体。在取得红叶石楠母株后,先臵于温室内培养2周左右,期间注意不洒叶面水,每隔3-5天喷施一次杀菌剂,可有效降低初代培养时的污染率。在实际操作中,选取嫩枝先端未木质化和半木质化部分,剪成长10cm左右的单芽,茎段部分去叶留2mm左右叶柄,茎尖部分可保留半张小叶,以饱和洗衣粉溶液浸泡3分钟,用清水冲洗后备用。

初代培养

清洗后的外植体在接种前需进行消毒处理,在超净工作台上用75%酒精浸泡10秒钟,再转入0.15%升汞溶液中灭菌8分钟,倒去灭菌液,用事先准备好的无菌水冲洗4-5次,沥干水后,即可将带

腋芽的茎段或茎尖以生态学下端朝下,垂直接种到初代培养基上,以每瓶培养基接种一个外植体为宜。经过多次试验,初代培养基以1/2MS+蔗糖30g+琼脂7g+2.0BA+0.2IBA为最佳,pH值5.5-5.8,培养室温度控制在25℃-30℃之间,光照12小时。接种后一周左右腋芽开始萌动,30-40天可伸长到2cm左右,即可切下进入下一阶段的继代(增殖)培养。

继代培养(增殖培养)

一般第一次继代时增殖率较低,经2-3次继代后增殖数可达5倍左右。继代培养基可用MS+1.0BA+0.1IBA,pH值5.5-5.8之间,每日光照12小时。无根的试管苗经30-40天培养达到3cm左右时,即可切割以扩大繁殖。当继代苗达到一定数量后,可以进行生根培养。

生根培养

当红叶石楠无根苗长到高2cm左右时,可转移到生根培养基上培养。生根培养基可用1/2MS+0.2-0.3NAA,一般经一周左右可见红色根生成,30-40天后根长1-3cm,即可进行炼苗反驯化,准备移栽。

炼苗及过渡移栽

红叶石楠组培苗移栽可省略瓶内炼苗过程,如能在温室中拧松瓶盖放臵3-5天炼苗则更好,但要注意温度应控制在20℃-30℃之间。过渡移栽是整个组培过程中最为关键的一步,如失败,则前功尽弃。因此移栽前要准备充分,如能在早春和秋冬季移栽在温床上效果最佳。在实际操作中,应根据不同地区的气候特点而有所区别。在江浙一带,过渡苗床可建在普通单体塑料大棚内,床宽1.2m左右,床四周用砖砌高30cm,床底整平,有条件的可加铺地热加温线,上铺15-25cm的移栽基质,基质以蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1∶1为好。

组培苗是在无菌条件下繁育的,在移栽过程中对外界环境需要一个渐进的适应过程,因此需要对过渡苗床进行较为严格的消毒处理。实践中我们使用1000倍敌克松溶液浇透整个苗床基质,再用0.15%高锰酸钾溶液喷洒苗床表面及四周,24小时后即可移栽小苗。也可用800倍福尔马林喷洒苗床表面,用塑料薄膜密封24小时以上,再通风12小时,即可使用。

幼苗从瓶内取出后,用清水将根部的琼脂等洗净,同时应注意尽量减少根部损伤。种入苗床后,浇灌时尽可能选择清洁的水源,移栽当天喷施1/4-1/2MS营养液,并喷施800-1000倍甲基托布津或1000倍多菌灵药液,以后每隔一周喷施一次,需连续喷施3-4次,移栽初期需特别注意保持苗床和空气湿度,一般需全封闭管理一周左右,

再半封闭一周左右,根据天气情况在25天左右可逐步通风,除去覆盖物。在春秋季节移栽时,需遮荫三周左右,冬季遮荫二周左右即可。同时应注意控制苗床温度在15℃-30℃之间才利于成活,如环境温度超过35℃,则不宜移栽。一般过渡移栽50天后,小苗就可上盆移栽,春季就可移入大田。

大田移栽

大田移栽的时机应根据小苗生长情况和天气情况确定。一般小苗长至5cm以上移栽就可以保证95%以上成活率,如在10cm以上移栽则效果更好。大田移栽后期管理与其他方法繁殖的小苗一样操作即可。