文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 中草药De novo基因组测序分析

中草药De novo基因组测序分析

案例分析

> 印度大麻

大麻是最早被驯化的种植植物之一,其最独特的药

理特征是含有大麻素,其中一类重要物质Δ9四氢大

麻酚(THC)是主要的神经性大麻素,具有镇痛、

止吐和刺激食欲的作用。紫都库什(PK)品系大麻

中的THC含量比Finola品系中高,研究通过对PK大

麻进行全基因组测序,并与Finola大麻进行比较,

验证了PK大麻中的THC高产量和大麻素合成途径中

酶基因的高水平表达有关。

> 牛耳草

已完成全基因组测序中草药列表

物种名/拉丁名

印度大麻

Cannabis sativa

灵芝

Ganoderma lucidum

牛耳草

Boea hygrometrica

铁皮石斛

Dendrobium officinale

其他非常重要但还未测序的中草药物种10种大宗常用中药材:

DNA测序常见问题及分析

DNA测序过程可能遇到的问题及分析 对于一些生物测序公司(如Invitrogen等),我们的菌液或质粒经过PCR和酶切鉴定都没问题,但几天后的测序结果却无法另人满意。 为什么呢? PCR产物直接进行测序,在PCR产物长度以后将无反应信号,机器将产生许多N值。这是由于Taq酶能够在PCR反应的末端非特异性地加上一个A碱基,我们所用的T载体克隆PCR产物就是应用该原理,通常PCR产物结束的位点,PCR产物测序一般末端的一个碱基为A(绿峰),也就是双脱氧核甘酸ddNTP终止反应的位置之前的A,A后的信号会迅速减弱。 N值情况一般是由于有未去除的染料单体造成的干扰峰。该干扰峰和正常序列峰重叠在一起,有时机器377以下的测序仪无法正确判断出为何碱基。有时,在序列的起始端的小片段容易丢失,导致起始区信号过低,机器有时也无法正确判读。在序列的3’端易产生N值。一个测序反应一般可以读出900bp以上的碱基(ABI3730可以达到1200bp),但是,只有一般600bp以前的碱基是可靠的,理想条件下,多至700bp的碱基都是可以用的。一般在650bp以后的序列,由于测序毛细管胶的分辩率问题,会有许多碱基分不开,就会产生N值。测序模板本身含杂合序列,该情况主要发生在PCR产物直接测序,由于PCR产物本身有突变或含等位基因,会造成在某些位置上有重叠峰,产生N值。这种情况很容易判断,那就是整个序列信号都非常好,只有在个别位置有明显的重叠峰,视杂合度不同N值也不同。 测序列是从引物3’末端后第一个碱基开始的,所以就看不到引物序列。有两种方法可以得到引物序列。1.对于较短的PCR产物 (<600bp),可以用另一端的引物进行测序,从另一端测序可以一直测通,可以在序列的末端得到该引物的反向互补序列。对于较长的序列,一个测序反应测不通,就只能将PCR产物片段克隆到载体中,用载体上的通用引物(T7/SP6)进行测序。载体上的通用引物与所插入序列间

中药材性状鉴别经验术语

中药材性状鉴别经验术语 中药材经验鉴别术语形象地概括了中药材性状鉴别特点。具有这些特征的药材,一般为正品、真品;而伪品或混淆品则不具备这些特征。 1.一包针:药材千年健根茎的折断面,呈纤维束样外露,形似一包针。 2.大理石纹:某些药材的横断面,具有大理石样的纹理,如槟榔。 3.马牙芦:野山参的芦头上部,芦碗渐疏而大,边缘齐楞,凹下较紧,形如马牙齿状。 4.马头蛇尾瓦楞身:海马头似马头,身体似瓦楞状,尾部似蛇尾。 5.马尾状:白薇根茎下部两侧簇生多数细长的根,形似马的尾巴。 6.马尿气:天麻经水蒸煮时散发的特异气味,味似马尿的臭气。 7.小算盘珠:平贝母的鳞茎呈扁平圆球形,顶平开口见心,底部内陷,形如小算盘珠子。 8.三节芦:野山参芦头的上部为“马牙芦”,中部为“堆花芦”,下部为“圆芦”。 9.车轮纹:药材横切面有较稀疏的放射状结构,呈车轮状纹理,相间排列,如防己。 10.无影纹:羚羊角尖部光润如玉,对光透视可见中心部分有血丝或紫黑色斑纹,无裂。 11.云锦花纹:何首乌的横切面有云朵状花纹。 12.云头鹤茎:某些药材的根茎下部两侧膨大形似如意头,向上渐细如仙鹤的脖子,如白术。 13.凤眼:豹骨的肱骨下端内侧有一狭长形透孔。 14.水波纹:羚羊角外形有10~20个隆起的波状轮环纹。 15.方胜纹:蕲蛇的背部有纵向排列的24个呈“V”形灰白色的花纹。 16.乌鸦头:某些药材的根形似乌鸦的头部,习称“乌鸦头”,如川乌、草乌。 17.乌金衣:牛黄表皮附着的黑色光亮薄膜,形似乌金色。 18.乌云盖顶:羚羊角角尖部分多为黑棕色的盖顶。 19.长嘴:老鹳草的宿存花柱长2~4cm,由下往上卷,形似鹳喙。 20.石榴嘴:山楂的顶端有凸起的残留宿萼,中央凹陷,形似石榴宿萼。 21.皮松肉紧:黄芪的横切面皮部疏松,木部较结实。 22.玉带腰箍:毛慈菇的假球茎中部2~3个稍突起的节环,形似腰间玉带一样。 23.龙头凤尾:药材茎下部留有根须称龙头,茎上端留有半块叶片或叶柄,两者合称“龙头凤尾”,如霍山石斛。 24.白颈:广地龙腹部前端有一条浅色环带(生殖环带)。 25.合把:羚羊角用手握之,四指正好嵌入凹处。 26.芝麻点:天麻表面的退化须根痕,呈断续排列成环的小点。 27.过桥:黄连根茎有一段较细长,其中部分节间光滑如杆。 28.当门子:指麝香香囊中心黑色,有光泽的豆状颗粒。 29.朱砂点:药材横切面上棕红色芝麻点,色如朱砂,如苍术。 30.血丝:羚羊角角尖内部的红色斑纹。 31.同心环:某些药材横断面上的异形维管,排列成数层同心性圆形的环圈纹,如川牛膝。 32.观音坐莲:松贝平放时能端正稳坐,形似观音坐在莲花之上。 33.观音合掌:青贝外层的两瓣鳞叶,大小相近,相对抱合。 34.吐丝:菟丝子水煮后,种皮裂开,伸出黄白色卷旋状的胚,形似春蚕吐丝。 35.吐脂起霜:某些药材干燥后在表面析出的白色物,如苍术。 36.扫帚头:根类药材顶端纤维状毛,形似扫帚头状,如南柴胡等。 37.红小辫:天麻根茎上端的一段红棕色的干枯芽茎。 38.吸盘:动物类药材的吸附器官,多为中间凹陷的圆盘状,如水蛭、蛤蚧等。 39.芦头:根类药材顶端有盘节状短根茎,如桔梗。 40.芦碗:芦头上的半圆形或圆形的碗状茎痕,如人参。 41.连三朵:某些花类药材的花序常2~3朵连生,如款冬花。 42.纱纸皮:熊胆的胆囊皮用手撕之,可分层撕成细丝状,形如纱纸。 43.连珠状:某些根类药材形似串连起来的珠子样,如巴戟天。 44.连珠斑:蕲蛇腹部黑色类圆形斑纹,象连起来的珠子,亦称“念珠斑”。 45.肚脐眼:天麻根茎一端的圆形凹陷疤痕。

全基因组重测序数据分析

全基因组重测序数据分析 1. 简介(Introduction) 通过高通量测序识别发现de novo的somatic和germ line 突变,结构变异-SNV,包括重排 突变(deletioin, duplication 以及copy number variation)以及SNP的座位;针对重排突变和SNP的功能性进行综合分析;我们将分析基因功能(包括miRNA),重组率(Recombination)情况,杂合性缺失(LOH)以及进化选择与mutation之间的关系;以及这些关系将怎样使 得在disease(cancer)genome中的mutation产生对应的易感机制和功能。我们将在基因组 学以及比较基因组学,群体遗传学综合层面上深入探索疾病基因组和癌症基因组。 实验设计与样本 (1)Case-Control 对照组设计; (2)家庭成员组设计:父母-子女组(4人、3人组或多人); 初级数据分析 1.数据量产出:总碱基数量、Total Mapping Reads、Uniquely Mapping Reads统计,测序深度分析。 2.一致性序列组装:与参考基因组序列(Reference genome sequence)的比对分析,利用贝叶斯统计模型检测出每个碱基位点的最大可能性基因型,并组装出该个体基因组的一致序列。3.SNP检测及在基因组中的分布:提取全基因组中所有多态性位点,结合质量值、测序深度、重复性等因素作进一步的过滤筛选,最终得到可信度高的SNP数据集。并根据参考基 因组信息对检测到的变异进行注释。 4.InDel检测及在基因组的分布: 在进行mapping的过程中,进行容gap的比对并检测可信的short InDel。在检测过程中,gap的长度为1~5个碱基。对于每个InDel的检测,至少需 要3个Paired-End序列的支持。 5.Structure Variation检测及在基因组中的分布: 能够检测到的结构变异类型主要有:插入、缺失、复制、倒位、易位等。根据测序个体序列与参考基因组序列比对分析结果,检测全基因组水平的结构变异并对检测到的变异进行注释。

中药学专业知识一第八章常用中药的鉴别

中药学专业知识一第八章常用中药的鉴别 ■ 考点1 常用中药的特点总结 1.狗脊:近边缘1 ~ 4 mm 处有1 条棕黄色隆起的木质部环纹或条纹,偶有金黄色绒毛残留。 2.大黄:根茎髓部有“星点”。气清香,味苦而微涩,嚼之粘牙,有砂粒感。 3.何首乌:皮部散列“云锦状花纹” (异常维管束)。 4.商陆:切面木部隆起,形成数个突起的同心性环轮,俗称“罗盘纹”。气微,味稍甜,久嚼麻舌。 5.银柴胡: “珍珠盘”“砂眼”。 6.黄连:①味连:多分枝,常弯曲,集聚成簇,形如鸡爪;②雅连:多为单枝,“过桥”较长;③云连:弯曲呈钩状,多为单枝,较细小。 7.防己: “猪大肠”“车轮纹”。 8.延胡索:置沸水中煮至恰无白心时,取出,晒干。 9.人参: “芦头” (根茎)、“芦碗” (芦头上凹窝状茎痕)、“珍珠点” (须根上的明显的疣状突起)、“艼” (不定根,根茎上生长的)。 10.甘草: “菊花心”。气微, 味甜而特殊。 11.黄芪: 嚼之微有豆腥味 12.远志:气微,味苦、微辛,嚼之有刺喉感。

13.白芷: “疙瘩丁” (根表面皮孔样横向突起)。 14.当归: “归头” (根上端)、“归身” (主根)、“归尾” (支根)、“全归” (根的全体)。主产于甘肃岷县。当归一般栽培至第二年秋末采挖,捆成小把,上棚,以烟火慢慢熏干。 15.川芎:药材呈不规则结节状拳形团块;饮片呈蝴蝶状,习称“蝴蝶片”。 16.防风: 根头部有明显密集的环纹, 习称“蚯蚓头”。 17.玄参:气特异似焦糖, 味甘、微苦。 18.地黄:主产于河南省。烘焙,至内部变黑,约八成干,捏成团块,习称“生地黄”。 19.党参: “狮子头” (根头部有多数疣状突起的茎痕及芽)。 20.茅苍术: “朱砂点”“起霜” (暴露梢久,常可见析出白毛状结晶,习称“起霜” ;北苍术无起霜现象)。 21.川贝母: ①松贝: “怀中抱月” (外层磷叶2 瓣,大小悬殊,大瓣抱小瓣,未抱部分呈新月形);②青贝:鳞茎呈类扁球形,外侧鳞片大小相近,相对抱合,顶端多开口;③炉贝:“虎皮斑” (炉贝表面黄白色, 梢粗糙, 常有黄棕色斑块; 22.浙贝母:①珠贝:鳞茎呈扁球形,外侧鳞片略称肾形,较大而肥厚,呈元宝状;②大贝:为鳞茎外层单瓣鳞叶,略呈新月形, 断面白色至黄白色, 富粉性。 23.天麻:“红小辫”“鹦鹉嘴”。 25.羌活: “蚕羌”“竹节羌”“条羌”“大头羌”。 26.鸡血藤:韧皮部有树脂状分泌物呈红棕色至黑棕色, 与木部相间排列呈数个同心性椭圆形

DNA测序标准实验流程(V1.3版)

DNA测序标准实验流程(V1.2版)1.对DNA的要求 纯度:OD 260 / OD 280 = 1.6 ~ 2.0, PCR产物用量:每反应15 -20ng(片段大于3KB可加两倍DNA)。 质粒DNA用量:每反应20 -25ng(插入片段大于3KB质粒要加两倍DNA)。 1300载体本身序列就比较长,我们建议每反应加50-80ng。 每个小组一次配100份BD MIX(BD 0.4ul,5*buffer 1.8ul,water 2.8ul)长期保存,每个反应体系加5ul 2.P CR产物的测序PCR反应(测序PCR反应中只要加一个引物就可以,需要加热盖) 标准反应体系: 10ul体系 试剂用量 纯化的P CR产物(15-20 ng / μL) 1 μL (片段大于3KB可加两倍DNA) 引物(2 pmol / μL) 1 μL BigDye (2.5 x) 0.4 μL BigDye Seq Buffer (5 x) 1.8μL 灭菌去离子水 5.8μL 96 °C 1 min → (96 °C 10 sec → 50 °C 5 sec → 60 °C 2 min) x 25个循环→ 4 °C保温 质粒DNA的测序PCR反应 标准反应体系: 10ul体系 试剂用量 质粒DNA (20-25 ng / μL) 1 μL (插入片段大于3KB质粒要加两倍DNA) 引物(2 pmol / μL) 1 μL BigDye (2.5 x) 0.4 μL BigDye Seq Buffer (5 x) 1.8 μL 灭菌去离子水 5.8 μL 96 °C 1 min → (96 °C 10 sec → 50 °C 5 sec → 60 °C 2 min) x 25个循环→ 4 °C保温 注意:BigDye (2.5 x)是一种含有DNA聚合酶和荧光物质的混合物,非常昂贵,平时都放在-20度保存。加之前拿出来放在冰上融化,用完马上放回-20冰箱。BigDye (2.5 x)和BigDye Seq Buffer (5 x)可以混合后一起加到反应体系,有多的话可以放在-20冰箱,下次还能使用。 BIGDYE尽量避光,一般用铝珀纸遮盖。P CR样品处理过程中如在室温放置和酒精挥发阶段都尽量用铝珀纸遮盖或者放入抽屉,有利于样品的稳定性。 3.测序产物纯化 单个0.2 mL离心管离心方法: 1. 每孔加入1μL 7.5M NH3Ac,26μL 100%酒精,盖好,震荡4次。(酒精和NH3Ac先混合好,而且要比样品数多预算几个) 2. 台式离心机12000 x g 4°C离心20 min,马上用枪吸尽上清液。(DNA很微量,基本看不到,所以枪头不要碰到DNA沉积处) 3. 每孔加入100μL 75% 酒精,12000 x g 4°C离心10 min,马上用枪吸尽上清液。(如果不是马上操作,DNA沉淀很可能 浮起,被吸走,所以如果没有及时吸去上清的话,要重新离心5MINS。) 4. 让酒精在室温避光(抽屉)挥发干净(至少20mins),加入10 μL Hi-Di Formamide溶解DNA。 5. 在PCR仪上变性:95 °C 4 min,4 °C 4 min。上机测序。 96孔板整板离心方法: 1. 每孔加入1μL 7.5M NH3Ac,26μL 100%酒精,盖好,震荡4次。(酒精和NH3Ac先混合好,而且要比样品数多预算几个) 2. 板式离心机4000 x rpm 4°C离心30min;马上倒置96孔板,弃上清,倒置在洗水纸上,离心500rpm,1mins。 3. 加100μL 75% 酒精,4000 rpm 4°C离心20 min;马上倒置96孔板,弃上清,离心500rpm,1mins。 4.让酒精在室温避光(抽屉)挥发干净(至少15mins),加入10 μL Hi-Di For mamide溶解DNA。 5. 在PCR仪上变性:95 °C 4 min,4 °C 4 min。上机测序。 4. 部分相关试剂 酒精:100%酒精使用国产分析纯;75%酒精用去离子水配制。 BigDye (2.5 x) -20度保存 BigDye Seq Buffer (5 x) 4度保存 7.5M NH3Ac 4度保存 Hi-Di For mamide -20度保存 黄方亮 2009.10.27日整理

中药鉴别中常用的方法

1.中药鉴别中常用的方法是什么?为什么? 十九世纪至二十世纪,中药鉴别最常用的“四大鉴定”。 1.基原鉴定,即中药的原植(动)物鉴定,是应用生物分类学鉴定中药的生物学来源,确定其正确的学名,这是中药鉴定工作的基础。 2.性状鉴定,性状鉴定就是应用看、摸、闻、尝等方法,对中药的性状,包括形状、大小、色泽、表面、质地、断面、气味等特征进行观察,作为鉴别的依据,它是我国中医药工作者长期的丰富经验的总结,具有简单、快速、直观的特点,性状鉴别主要是观察完整的药材及饮片。 3.,显微鉴定,生药的显微鉴定主要是利用显微观察植(动)物生药内部的细胞、组织结构及细胞内含物,描述显微特征,制定显微鉴别的依据以鉴定真品、类似品或用品的一种方法。通常应用于单凭性状不易识别的生药,性状相似不易区别的多来源生药、破碎生药、粉末生药,以及用粉末、生药制成的丸散片丹等,中药成分制剂的鉴定。显微鉴定是一种专门技术,需要有植物解剖、植物显微化学的基本知识和显微切片的制作技术,显微鉴定也是鉴定中成药丸散片丹和制定品质标准的科学方法之一,对保证中成药的质量,有一定的科学意义和应用价值。 4.理化鉴定,是利用中药所含化学成分的某些物理性质或化学反应对中药进行定性和定量分析,一般应用于含不同化学成分、性状相似而又无明显显微鉴定特征的药材。 常用的现代中药鉴别方法: 由于物理、化学、生物学和计算机的加速发展使仪器分析的手段不断更新,紫外、红外、气相、高效液相、核磁共振、扫描电子显微镜、计算机图象处理分析、各种电泳、同功酶分析法、分子生物学技术、X射线衍射技术、差热分析技术、聚类分析法等均被吸收到中药鉴别的方法中来,大大的丰富了中药鉴别方法,形成了以“四大鉴别”法为基础,以理化分析为重点,逐步适应中药现代化并利于中药走向世界的一套更为科学、完善、先进的中药鉴别体系。 1.色谱法。色谱法是20世纪初产生,于60年代开始用于中药分析,经逐步完善最后列入1977年中国药典,并在以后各版药典的中药和成方制剂中的应用比例迅速上升,成为中药鉴别的最主要的方法之一。其理论基础是上述的层析法,根据色谱法的分离方法可为纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法。

高通量测序生物信息学分析(内部极品资料,初学者必看)

基因组测序基础知识 ㈠De Novo测序也叫从头测序,是首次对一个物种的基因组进行测序,用生物信息学的分析方法对测序所得序列进行组装,从而获得该物种的基因组序列图谱。 目前国际上通用的基因组De Novo测序方法有三种: 1. 用Illumina Solexa GA IIx 测序仪直接测序; 2. 用Roche GS FLX Titanium直接完成全基因组测序; 3. 用ABI 3730 或Roche GS FLX Titanium测序,搭建骨架,再用Illumina Solexa GA IIx 进行深度测序,完成基因组拼接。 采用De Novo测序有助于研究者了解未知物种的个体全基因组序列、鉴定新基因组中全部的结构和功能元件,并且将这些信息在基因组水平上进行集成和展示、可以预测新的功能基因及进行比较基因组学研究,为后续的相关研究奠定基础。 实验流程: 公司服务内容 1.基本服务:DNA样品检测;测序文库构建;高通量测序;数据基本分析(Base calling,去接头, 去污染);序列组装达到精细图标准 2.定制服务:基因组注释及功能注释;比较基因组及分子进化分析,数据库搭建;基因组信息展 示平台搭建 1.基因组De Novo测序对DNA样品有什么要求?

(1) 对于细菌真菌,样品来源一定要单一菌落无污染,否则会严重影响测序结果的质量。基因组完整无降解(23 kb以上), OD值在1.8~2.0 之间;样品浓度大于30 ng/μl;每次样品制备需要10 μg样品,如果需要多次制备样品,则需要样品总量=制备样品次数*10 μg。 (2) 对于植物,样品来源要求是黑暗无菌条件下培养的黄化苗或组培样品,最好为纯合或单倍体。基因组完整无降解(23 kb以上),OD值在1.8~2.0 之间;样品浓度大于30 ng/μl;样品总量不小于500 μg,详细要求参见项目合同附件。 (3) 对于动物,样品来源应选用肌肉,血等脂肪含量少的部位,同一个体取样,最好为纯合。基因组完整无降解(23 kb以上),OD值在1.8~2.0 之间;样品浓度大于30 ng/μl;样品总量不小于500 μg,详细要求参见项目合同附件。 (4) 基因组De Novo组装完毕后需要构建BAC或Fosmid文库进行测序验证,用于BAC 或Fosmid文库构建的样品需要保证跟De Novo测序样本同一来源。 2. De Novo有几种测序方式 目前3种测序技术 Roche 454,Solexa和ABI SOLID均有单端测序和双端测序两种方式。在基因组De Novo测序过程中,Roche 454的单端测序读长可以达到400 bp,经常用于基因组骨架的组装,而Solexa和ABI SOLID双端测序可以用于组装scaffolds和填补gap。下面以solexa 为例,对单端测序(Single-read)和双端测序(Paired-end和Mate-pair)进行介绍。Single-read、Paired-end和Mate-pair主要区别在测序文库的构建方法上。 单端测序(Single-read)首先将DNA样本进行片段化处理形成200-500bp的片段,引物序列连接到DNA片段的一端,然后末端加上接头,将片段固定在flow cell上生成DNA簇,上机测序单端读取序列(图1)。 Paired-end方法是指在构建待测DNA文库时在两端的接头上都加上测序引物结合位点,在第一轮测序完成后,去除第一轮测序的模板链,用对读测序模块(Paired-End Module)引导互补链在原位置再生和扩增,以达到第二轮测序所用的模板量,进行第二轮互补链的合成测序(图2)。 图1 Single-read文库构建方法图2 Paired-end文库构建方法

常用中药识别与鉴定

常用中药的识别与鉴定 一、填空题 1、常用中药识别的任务有本草考证、同名异物和同物异名现象、中药的真伪、中药的优劣。 2、煎药是的器皿最佳是陶器、砂锅,忌用铝锅、铁锅、铜锅、带油垢的锅等器皿。 3、中医最常用也最古老的剂型是汤剂,它具有吸收快、易发挥疗效和便于加减应用等特点。 4、旋覆花、车前子等药入汤剂需要包煎,阿胶、鹿角胶等胶类中药多饭后服用,砂仁、佩兰等芳香药入煎时需烊化。 5、我国最早的药物学专著是《神农本草经》,它将药物分为上品、中品和下品三类。 6、我国最早的国家药典是唐代的《唐本草》或《新修本草》,我国在十六世纪以前的医药成就的大总结,也被翻译成多国文字传播到国外的一部本草是《本草纲目》。 7、东北特产的人参、鹿茸、甘肃的当归、云南的三七、四川的川贝、黄连、川芎,广东的砂仁、江苏的薄荷、安徽的茯苓、丹皮,贵州的杜仲、天麻,宁夏的枸杞。 8、性状特征:海马的特征马头蛇尾瓦楞身,防风的蚯蚓头,党参的狮子盘头,川贝药材中的松贝具有怀中抱月与观音坐莲。 9、正名与别名:何首乌—铁秤砣山茱萸—枣皮 淫羊藿—仙灵脾朱砂—辰砂 1、人参来自于五加科植物人参的根,常见的加工品种有全须生晒参、红参和白参,全须生晒参的主要性状特征有具有芦碗的芦头、外皮黄白色,具少量的珍珠点,人参具有大补元气,生精固脱,强心安神的功效。 2、三七根据其采收加工部位的不同可以分为头子、剪口、荆条和绒根几种商品。三七具有散瘀止血、消肿定痛的显著疗效,临床多用于各种制剂,如云南白药、片仔癀。 3、天麻来自于兰科植物天麻的块茎,具有平肝、熄风、止痉的功效,其药材的性状特征主要有鹦哥嘴或红小辫、肚脐眼和点状环纹。以之为主药的中成药有天麻片、天麻胶囊、天麻杜仲胶囊等。 4、中药大黄来自于蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄和药用大黄的根与根茎,其炮制加工品有生大黄、熟大黄和酒大黄等,其主要活性成分是蒽醌类。 5、常用的清热燥湿的中药黄连来自于毛茛科植物黄连、三角叶黄连和云连的根茎,各自的药材商品名是味连、雅连和云连,三种药材的根茎上均具有过桥的特征。主要含有生物碱类成分。 6、川乌来自于毛茛科植物乌头的干燥母根,因其具有大毒,故需要炮制加工后入药,主要产于四川,其毒性成分来自于其体内的生物碱类成分,临床主要用于风寒湿痹症,临床应用时注意其配伍与煎法,炮制品入汤剂时需要先煎至少30分钟。 7、甘草作为临床及其常用的一味中药,在采收加工时有皮草和粉草之分,具有补脾益气,清热解毒,祛痰止咳,缓急止痛,调和诸药的功效。临床有十方九草和无草不成方之说,甘草不仅用于医药行业,还可以用于食品行业和美容行业。 8、常用的补气的中药有人参、西洋参、黄芪等,但人参偏重于大补元气,回阳救逆,常用于虚脱、休克等急症,效果较好。黄芪则以补虚为主,常用于体衰日久、言语低弱、脉细无力者。 1、杜仲来自于(杜仲科)植物杜仲的干皮,药材采收加工中需要进行(发汗)的处理,其药材特征是:(断面有细密银白色富弹性的胶丝相连)。杜仲具有(补肝肾、强筋骨、降血压、安胎)等诸多功效。 2、大青叶来源于(十字花科)植物菘蓝的叶,具有(清热解毒;凉血止血)的功效。 3、艾叶来源于菊科植物艾的叶,具有(散寒止痛,温经止血)的功效,是一个妇科良药,其药材性状特殊主要是(羽状深裂,裂片椭圆状披针形,边缘有不规则的粗锯齿)。 4、金银花来源于忍冬科植物忍冬的(花蕾),别名(双花)、(二宝花),主要产于(山东)(河南),性状特征主要有(花蕾呈细长棒状)、(表面黄白色或绿白色)、(短柔毛),气(清香)、味(微苦),主要含有(黄酮类)成分,具有(清热解毒)的作用。 5、菊花来源于菊科植物菊的(头状花序),药材按产地和加工方法不同,分为 (亳菊)、(滁菊)、(贡菊)、(杭菊)。菊花具有(散风清热)(平肝明目)的作 用。 6、海马的来源有(克氏海马)、(刺海马)、(三斑海马)、(大海马)或(小 海马),其性状特征主要是(马头蛇尾瓦楞身),具有(温肾壮阳、散肿消结) 的功效。 7、全蝎来源于(东亚钳蝎)的干燥全体,具有(息风镇痉,攻毒散结,通络 止痛)的功效。 8、鹿茸来源于鹿科动物(梅花鹿)和(马鹿)的雄兽未骨化的角,具有(补 肾阳,益精血,强筋骨)的功效。 二、术语解释 中药:我国中医历来用以治病的药物,概称为“中药”。中药是指依据中医学 的理论和临床经验用于医疗保健的药物。 中药材:既用于切制成中药饮片,供临床中医调配处方煎服,或磨成细粉服用 或调敷外用,又是供中药厂生产中成药或制药工业提取有效化学成分的原料药 中草药:中药与草药统称为“中草药”。 中药饮片:指将药材通过净制、切制和炮制,制成一定规格的直接供配方、制 剂使用的加工后药材,又称为“咀片”。 狮子盘头:中药党参根头部密集的疣状突起,习称为之。 蚯蚓头:中药防风根头部密集的环纹形似蚯蚓的体节,习称之。 挂甲:取牛黄粉末少许以水调和后涂于指甲上,能将指甲染成黄色,黄色经久 不褪,且指甲油清凉感。 鸡爪连:黄连药材中的味连,多个根茎簇生在一起,形如鸡爪,故称之为“鸡 爪连”。 过桥:黄连药材的根茎上节间延长,光滑如茎干,称之为“过桥”。 鹦哥嘴:天麻药材一端的干枯红棕色芽苞,称之为“鹦哥嘴”。 筒朴:厚朴的干皮呈卷筒状或双卷筒状,习称“筒朴”。 靴筒朴:为厚朴的近根部的干皮,其一端展开如喇叭口,习称“靴筒朴”。 鸡肠朴:为厚朴的根皮(根朴),呈单筒状或不规则块片,有的弯曲似“鸡肠”, 习称“鸡肠朴”。 三、问答题 中药的真伪是指什么?答:是指中药的品种正确与否。 影响中药质量的因素有哪些? 答:品种、产地、栽培条件、采收加工与贮藏运输等。需要加以说明。 常用中药识别的意义是什么? 答:“鉴定中药真伪优劣,确保中药质量”。中药的质量好坏和品种的真伪,直 接关系到治疗效果,因此,中药的真伪鉴别是十分重要的。我国历史悠久,中药 资源极其丰富。中药不仅一直对我国人民的医疗保健事业起着重要作用,而且 在国际上越来越受到广泛的重视。随之品种也越来越多,给中药材的识别应用 效果,带来了很大的困难。因此需要加强对常用中药的识别研究,以保证临床 用药的安全与有效。 性状鉴别的要素有哪些? 答:形状、大小、颜色、表面、质地、断面、气、味、水试特征与火试特征。 需要举例加以说明。 沉香与土沉香的比较: 共同点:均为含树脂的心材,火试冒浓烟及具强烈香气。具有行气止痛,调中 止呕,温肾纳气,壮阳除痹的功效。 区别点:沉香土沉香 (1)多为柱棒状,具结油多为不规则块片 (树脂) (2)表面稍平,斑纹多而表面凹凸不平,斑纹 色深少而色浅 (3)质坚实而重,能沉或质较坚而轻,多不沉 半沉于水于水 (4)香气浓香气淡 来自于五加科的常用中药有哪些?它们各自具有什么功效? 答:主要有人参、三七、西洋参。 人参具有大补元气,生精固脱,强心安神的功效。西洋参具有补气养阴,清火 生津的功效。 三七具有散瘀止血、消肿定痛的功效。 红花与西红花的区别 (1)来源的不同 红花——菊科植物红花的头状花序,西红花——鸢尾科植物西红花的柱头。 (2)性状特征不同 红花:花冠红黄色或红色,简部细长,上部5裂,裂片狭条形,长5~8mm;雄 蕊5,花药聚合呈筒状;柱头顶端微分叉,微露出花药筒外。质柔软。气微香, 味微苦; 西红花:呈线形,三分枝,长2~3cm。暗红色,上部较宽而略扁平,顶端边缘 呈不整齐的细齿状,内方有一短裂缝。下端有时带有黄色花柱。体轻,质松软, 无油润光泽,干后质脆易断。气特异,微有刺激性,味微苦。 (3)水试特征不同 红花:花浸水中,水染成金黄色; 西红花:入水则柱头膨胀,呈长喇叭状,可见橙黄色色素呈直线下降,并逐渐 扩散,水被染成黄色,无沉淀。 (4)功效不同 红花:性温、味辛,具有活血通径、散瘀止痛的作用;西红花:性凉,味甘、 微苦,具有调经止痛、活血祛瘀及解郁开结、凉血解毒等作用 (5)价格差异极大 3、举例说明动物类中药的应用方式有哪些? (1)全体入药:全蝎、蜈蚣、水蛭、斑蝥、土鳖虫、九香虫、青娘子、红娘 子等 (2)动物体的一部分入药: ①角类:鹿茸、鹿角、羚羊角。 ②鳞、甲类:穿山甲、龟甲、鳖甲、玳瑁等。 ③骨类:豹骨、狗骨、猴骨、猫骨等。 ④贝壳类:石决明、牡蛎、珍珠母、海螵蛸、蛤壳、瓦楞子、海月等。 ⑤脏器类:蛤膜油、鸡内金、紫河车、鹿鞭、水獭肝、刺猬皮等。 (3)生理产物:蝉蜕、蛇蜕、蜂蜜、蜂房、桑螵蛸等。 (4)动物的分泌物:麝香、蟾酥、龙涎香、虫白蜡、蜂蜡、熊胆粉等。 (5)病理产物:珍珠、牛黄、僵蚕、马宝、猴枣、狗宝等。 (6)排泄物:五灵脂、夜明砂、望月砂、蚕砂、白丁香(文鸟科动物麻雀及 山麻雀的干燥粪便) (7)雄体动物的部分:鹿角、麝香、鹿茸、羚羊角。 (8)雌体动物的部分:蛤蟆油、土鳖虫。 4、麝香的来源是什么?其经验鉴别的方法有哪些? 答:来源于鹿科动物原麝、林麝和马麝的雄体的香囊分泌物。 其经验鉴别的方法有: 1)手捏法:手捏个麝香,有弹性; 2)手搓法:麝香仁搓之成团,压之即散,不得有顶指、染指、粘指现象; 3)探针法:针刺检查,有冒槽现象; 4)水试法:“当门子”于开水中不散开,一段时间后取出,仍不散开,有香气; 5)葱检法:用葱汁染线1条,再穿过香囊,来回拉动数次,葱味消失者为真。 6)分墨法:磨墨于砚中,投入麝香粉少许,则墨汁分开。 5、中药石决明的不同来源的性状特征有哪些?

全基因组从头测序(de novo测序)

全基因组从头测序(de novo测序) https://www.wendangku.net/doc/8f17356693.html,/view/351686f19e3143323968936a.html 从头测序即de novo 测序,不需要任何参考序列资料即可对某个物种进行测序,用生物信息学分析方法进行拼接、组装,从而获得该物种的基因组序列图谱。利用全基因组从头测序技术,可以获得动物、植物、细菌、真菌的全基因组序列,从而推进该物种的研究。一个物种基因组序列图谱的完成,意味着这个物种学科和产业的新开端!这也将带动这个物种下游一系列研究的开展。全基因组序列图谱完成后,可以构建该物种的基因组数据库,为该物种的后基因组学研究搭建一个高效的平台;为后续的基因挖掘、功能验证提供DNA序列信息。华大科技利用新一代高通量测序技术,可以高效、低成本地完成所有物种的基因组序列图谱。包括研究内容、案例、技术流程、技术参数等,摘自深圳华大科技网站 https://www.wendangku.net/doc/8f17356693.html,/service-solutions/ngs/genomics/de-novo-sequencing/ 技术优势: 高通量测序:效率高,成本低;高深度测序:准确率高;全球领先的基因组组装软件:采用华大基因研究院自主研发的SOAPdenovo软件;经验丰富:华大科技已经成功完成上百个物种的全基因组从头测序。 研究内容: 基因组组装■K-mer分析以及基因组大小估计;■基因组杂合模拟(出现杂合时使用); ■初步组装;■GC-Depth分布分析;■测序深 度分析。基因组注释■Repeat注释; ■基因预测;■基因功能注释;■ ncRNA 注释。动植物进化分析■基因家族鉴定(动物TreeFam;植物OrthoMCL);■物种系统发育树构建; ■物种分歧时间估算(需要标定时间信息);■基因组共线性分析; ■全基因组复制分析(动物WGAC;植物WGD)。微生物高级分析 ■基因组圈图;■共线性分析;■基因家族分析; ■CRISPR预测;■基因岛预测(毒力岛); ■前噬菌体预测;■分泌蛋白预测。 熊猫基因组图谱Nature. 2010.463:311-317. 案例描述 大熊猫有21对染色体,基因组大小2.4 Gb,重复序列含量36%,基因2万多个。熊猫基因组图谱是世界上第一个完全采用新一代测序技术完成的基因组图谱,样品取自北京奥运会吉祥物大熊猫“晶晶”。部分研究成果测序分析结果表明,大熊猫不喜欢吃肉主要是因为T1R1基因失活,无法感觉到肉的鲜味。大熊猫基因组仍然具备很高的杂合率,从而推断具有较高的遗传多态性,不会濒于灭绝。研究人员全面掌握了大熊猫的基因资源,对其在分子水平上的保护具有重要意义。 黄瓜基因组图谱黄三文, 李瑞强, 王俊等. Nature Genetics. 2009. 案例描述国际黄瓜基因组计划是由中国农业科学院蔬菜花卉研究所于2007年初发起并组织,并由深圳华大基因研究院承担基因组测序和组装等技术工作。部分研究成果黄瓜基因组是世界上第一个蔬菜作物的基因组图谱。该项目首次将传

DNA测序结果分析比对(实例)

DNA测序结果分析比对(实例) 关键词:dna测序结果2013-08-22 11:59来源:互联网点击次数:14423 从测序公司得到的一份DNA测序结果通常包含.seq格式的测序结果序列文本和.ab1格式的测序图两个文件,下面是一份测序结果的实例: CYP3A4-E1-1-1(E1B).ab1 CYP3A4-E1-1-1(E1B).seq .seq文件可以用系统自带的记事本程序打开,.ab1文件需要用专门的软件打开。软件名称:Chromas 软件Chromas下载 .seq文件打开后如下图: .ab1文件打开后如下图: 通常一份测序结果图由红、黑、绿和蓝色测序峰组成,代表不同的碱基序列。测序图的两端(下图原图的后半段被剪切掉了)大约50个碱

基的测序图部分通常杂质的干扰较大,无法判读,这是正常现象。这也提醒我们在做引物设计时,要避免将所研究的位点离PCR序列的两端太近(通常要大于50个碱基距离),以免测序后难以分析比对。 我的课题是研究基因多态性的,因此下面要介绍的内容也主要以判读测序图中的等位基因突变位点为主。 实际上,要在一份测序图中找到真正确实的等位基因多态位点并不是一件容易的事情。一般认为等位基因位点假如在测序图上出现像套叠的两个峰,就是杂合子位点。实际比对后才知道,情况并非那么简单,下面测序图中标出的两个套峰均不是杂合子位点,如图并说明如下:

说明: 第一组套峰,两峰的轴线并不在同一位置,左侧的T峰是干扰峰;第二组套峰,虽两峰轴线位置相同,但两峰的位置太靠近了,不是杂合子峰,蓝色的C峰是干扰峰通常的杂合子峰由一高一略低的两个轴线相同的峰组成,此处的序列被机器误判为“C”,实际的序列应为“A”,通常一个高大碱基峰的前面 1~2个位点很容易产生一个相同碱基的干扰峰,峰的高度大约是高大碱基峰的1/2,离得越近受干扰越大。 一个摸索出来的规律是:主峰通常在干扰峰的右侧,干扰峰并不一定比主峰低。最关键的一点是一定要拿疑似为杂合子峰的测序图位点与测序结果的文本序列和基因库中的比对结果相比较;一个位点的多个样本相比较;你得出的该位点的突变率与权威文献或数据库中的突变率相比较。 通常,对于一个疑似突变位点来说,即使是国际上权威组织大样本的测序结果中都没有报道的话,那么单纯通过测序结果就判定它是突变点,是并不严谨的,因一份 PCR产物中各个碱基的实际含量并不相同,很难避免不产生误差的。对于一个未知突变位点的发现,通常还需要用到更精确的酶切技术。 (责任编辑:大汉昆仑王)

常用中药的鉴别大全带图片

常用中药的鉴别大全带图片 第一节常用植物类中药的鉴别 一、根及根茎类中药 狗脊 【性状】表面残留金黄色绒毛,近边缘处有1条棕黄色隆起的木质部环纹。 绵马贯众 【性状】表面密被叶柄残基及鳞片,断面黄白色维管束5-13个,环列。 细辛 【来源】马兜铃科。 【产地】吉林、辽宁、黑龙江。 【性状】常卷曲成团。气辛香,味辛辣、麻舌。 大黄 【性状】髓部可见星点,嚼之黏牙,有沙粒感。 何首乌 【性状】皮部有4~11个类圆形异常维管束环列形成“云锦状花纹”。 牛膝、川牛膝 【来源】苋科,牛膝主产河南,为“四大怀药”之一。 【性状】怀牛膝:散有多数黄白色点状维管束,断续排列成2-4轮。 川牛膝:维管束点状,排列成数轮同心环。 商陆 【性状】木部隆起形成数个突起的同心性环轮俗称“罗盘纹”。

【来源】石竹科银柴胡的干燥根。 【性状】具孔穴状或盘状凹陷,称“砂眼”,根头部有密集的疣状突起的芽苞、茎或根茎的残基,称“珍珠盘”。 太子参 【来源】石竹科植物孩儿参的干燥块根。 川乌、草乌、附子 【来源】毛茛科植物乌头干燥母根-川乌 北乌头的块根-草乌 乌头子根加工品-附子 【性状】 一、生川乌: 形成层环纹呈多角形,味辛辣、麻舌。 二、生草乌 具不定根残基(钉角),形成环多角形,味辛辣、麻舌。 白芍 【产地】浙江产称为杭白芍,为“浙八味”。 【采收】刮去粗皮,入沸水中略煮后除去外皮,或去皮后再煮。 【性状】味微苦、酸。 赤芍 【性状】断面粉白色或粉红色。味微苦、酸涩。 黄连 【来源】毛茛科植物黄连的根茎--味连 三角叶黄连的根茎--雅连 云连的根茎--云连

1.味连:多分枝,集聚成簇,形如鸡爪,节间平滑,称“过桥”,味极苦。 2.雅连:多单枝,“过桥”长。 3.云连:单枝,弯曲呈钩状,细小。 防己 【性状】断面富粉性,排列较稀疏的放射状纹理(车轮纹)。 延胡索 【产地】浙江,为“浙八味”之一。 【采收】沸水中煮至内部无白心。 板蓝根 【来源】十字花科植物菘蓝干燥根。 【产地】河北、江苏、河南、安徽。 【性状】皮部黄白色,木部黄色。 苦参 【来源】豆科苦参干燥根。 【性状】外皮多破裂反卷,味极苦。 葛根、粉葛 【来源】葛根—豆科野葛干燥根 粉葛—豆科甘葛藤干燥根 【性状】葛根—纤维性;粉葛—富粉性。 山豆根 【来源】豆科越南槐的干燥根及根茎。 【性状】豆腥气、味极苦。 北豆根 【来源】防己科蝙蝠葛干燥根茎。

基因组重测序分析流程-代码文件

差异位点分析流程步骤分解 数据准备: mkdir 1.QC cd 1.QC ln -s /root/mdna-data/reseq/1.QC/*.fastq . Ls cd .. mkdir 2.mapping cd 2.mapping ln -s /root/mdna-data/reseq/2.mapping/ref.fasta . 步骤1:参考基因建索引 cd 2.mapping ##bwa建索引: bwa index ref.fasta Expected Result:得到一系列BWA 进行alignment 需要的文件。 ##samtools建索引: samtools faidx ref.fasta Expected Result:生成refgene.fasta.fai。每行都是fasta 文件中每条contig 的record,每条record 由contig name, size, location, basesPerLine 和bytesPerLine 组成。 ##生成字典: java -jar /root/mdna_software/picard-tools-1.102/CreateSequenceDictionary.jar R=ref.fasta O=ref.dict Expected Result:生成refgene.dict。描述fasta 文件内容,类似SAM header 格式。 步骤2:bwa比对 ##用bwa作比对: nohup bwa aln -e 3 -i 10 -t 1 -R 100 -q 20 ref.fasta ../1.QC/test_trim1.fastq -f 1.sai & nohup bwa aln -e 3 -i 10 -t 1 -R 100 -q 20 ref.fasta ../1.QC/test_trim2.fastq -f 2.sai & nohup bwa aln -e 3 -i 10 -t 1 -R 100 -q 20 ref.fasta ../1.QC/test_trim_unpaired.fastq -f s.sai & jobs

看图认识中草药(一)教(学)案

看图认识中草药(一)教案 认识丝瓜、萝卜、金银花 教学目标: 1、能看图片认识丝瓜、萝卜和金银花的根、茎、叶、花、果实。 2、了解丝瓜、萝卜、金银花的药用价值。 3、了解中医故事《病入膏肓》的主要容。 教学重点: 认识中草药:丝瓜、萝卜、金银花,了解它们的药用价值。 教具准备: 丝瓜、萝卜、金银花的图片或实物 教学过程: 一、认识丝瓜 1、同学们你们吃过丝瓜吗?板书:丝瓜你知道丝瓜长什么样?指名回答 2、出示丝瓜图 (1)引导学生在图中找到丝瓜的茎、叶、花、果实相机板书:茎、叶、花、果实指名读,注意“茎”是后鼻音齐读 (2)学生自由读丝瓜的资料介绍找一找哪句花描写了丝瓜的茎,用直线画出。 (3)指名读描写茎的句子。齐读 (4)引导学生观察图片中丝瓜的茎,与句子容对照。 (5)同法学习丝瓜的叶、花、果实。 3、丝瓜除了可以食用之外还是一种中药,具有很高的药用价值。请读一读丝瓜药用价值的 资料,想一想,丝瓜具有哪些药用价值?和小组其他同学交流一下。 (1)自由读资料 (2)小组交流 (3)指名回答,全班交流 二、认识萝卜 1、丝瓜是同学们见过的一种蔬菜也是一种中药,萝卜,大家也不陌生吧?板书:萝卜 你对萝卜了解些什么?指名回答

2、出示两萝卜图或实物 (1)比较两种萝卜的区别 (2)自由读萝卜的资料介绍,找一找那句话是描写萝卜的根,用波浪线画出 (3)指名读描写根的句子 (4)你能在图上指出萝卜的根吗?指名上台看图找到萝卜的根 (5)同法学习萝卜的茎、叶、花 3、萝卜也是一味中药,有很重要的作用,自由读资料,想一想萝卜有哪些药用价值,再小组 交流。 (1)自由读 (2)小组交流 (3)指名回答,全班交流 三、认识金银花 1、出示金银花图板书:金银花 (1)指导学生观察金银花的茎、叶、花 (2)读一读资料,想想金银花名字的由来 (3)找一找那句话描写金银花的茎,用直线画出 (4)指名读,齐读,再看图对照 (5)同法学习叶、花 2、了解金银花的药用价值 (1)自由读资料,想一想金银花有哪些药用价值 (2)小组交流 (3)指名回答,全班交流 (4)师补充介绍几种金银花可以治疗的疾病 ★取金银花15克,生甘草3克,煎水含漱,可治咽喉炎。 ★取金银花60克,山楂20克,煎水代茶饮,可治感冒发热,头痛咽痛。 ★取金银花、菊花、山楂各10克,蜂蜜100克,加清水适量,煎煮30分钟,滤出药汁饮服,可治暑热头痛,心烦口渴。

三代基因组测序技术原理(简介)

三代基因组测序技术原理简介 【写在前面的话】:首先,这一篇博文中的内容并非原创,而是对多篇文献中内容的直接摘录,有些图片和资料还来自身边的同事(在此深表谢意!),再夹杂自己的零星想法,写在这里分享与大家,同时也是为了方便自己日后若有需要能够方便获得,文章比较长。 摘要:从1977年第一代DNA测序技术(Sanger法)1,发展至今三十多年时间,测序技术已取得了相当大的发展,从第一代到第三代乃至第四代,测序读长从长到短,再从短到长。虽然就当前形势看来第二代短读长测序技术在全球测序市场上仍然占有着绝对的优势位置,但第三和第四代测序技术也已在这一两年的时间中快速发展着。测序技术的每一次变革,也都对基因组研究,疾病医疗研究,药物研发,育种等领域产生巨大的推动作用。在这里我主要对当前的测序技术以及它们的测序原理做一个简单的小结。 图1: 测序技 术的发 展历程 生命体 遗传信 息的快 速获得 对于生 命科学 的研究 有着十分重要的意义。以上(图1)所描述的是自沃森和克里克在1953年建立DNA双螺旋结构以来,整个测序技术的发展历程。 第一代测序技术 第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格(Sanger)和考尔森(Coulson)开创的链终止法或者是1976-1977年由马克西姆(Maxam)和吉尔伯特(Gilbert)发明的化学法(链降解). 并在1977年,桑格测定了第一个基因组序列,是噬菌体X174的,全长5375个碱基1。自此,人类获得了窥探生命遗传差异本质的能力,并以此为开端步入基因组学时代。研究人员在Sanger法的多年实践之中不断对其进行改进。在2001年,完成的首个人类基因组图谱就是以改进了的Sanger法为其测序基础,Sanger法核心原理是:由于ddNTP的2’和3’都不含羟基,其在DNA的合成过程中不能形成磷酸二酯键,因此可以用来中断DNA合成反应,在4个DNA合成反应体系中分别加入一定比例带有放射性同位素标记的ddNTP(分为:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),通过凝胶电泳和放射自显影后可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列(图2)。这个网址为sanger测序法制作了一个小短片,形象而生动。

相关文档