非淋菌性尿道炎患者支原体检测及药敏分析

非淋菌性尿道炎患者支原体检测及药敏分析

发表时间：2013-09-18T15:34:54.077Z 来源：《医药前沿》2013年第25期供稿作者：张蕾郭良陈莉[导读] 近年来，NGU发病率不断增高，报告的病例数已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位，另由于治疗的不规范，其耐药性也在不断增加。

张蕾郭良陈莉（福建医科大学附属闽东医院检验科 355000）

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）25-0382-01 支原体是引起非淋性尿道炎(non － gonococcal urethritis，NGU) 的重要病原体，包括解脲支原体(ureaplasmaurealyticum，Uu) 和人型支原体(mycoplasmahominis，Mh) ，也可引起慢性前列腺炎、子宫内膜炎、输卵管炎以及盆腔炎等泌尿生殖道的其他疾病［1，2］。近年来，NGU发病率不断增高，报告的病例数已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位，另由于治疗的不规范，其耐药性也在不断增加。为了解本地区支原体感染及其耐药情况，对2011年1月～2013年1月就诊的1863例疑为泌尿生殖道感染患者进行支原体培养及药敏试验，为临床合理用药提供依据。

1 材料及方法：

1.1标本来源：2011年1月—2013年1月间，来我院门诊的1863例NGU患者。其中男性1056例，女性807例。

1.2标本采集：男性尿道分泌物标本用男性专用无菌棉拭子伸入尿道口2-4cm处停留约半分钟，轻转取含柱状上皮细胞标本。女性取宫颈口内1-2cm处的单层柱状上皮细胞，取样拭子不可触及阴道壁。

1.3方法：采用珠海浪峰生物技术有限公司生产的支原体培养药敏一体化试剂盒。于有效期内使用，严格按照说明书操作及判读。

2 结果：

1863份标本，支原体阳性715份，阳性率为38.4%。其中单纯解脲脲原体(UU)感染为618例(33.2%)，单纯人型支原体感染为13例(0.7%),UU和MH混合感染为84例(4.5%)。男性支原体阳性率为21.1%(223/1056),女性为60.8%(491/807)，经统计学χ2检验,P﹤0.05,二者有显著性差异。715例支原体阳性患者年龄主要在20-40岁间,占91.2%。

药敏结果：见表1：

表1 618例解脲支原体对12种抗生素的药敏结果

3 讨论

NGU 是主要的性传播疾病之一，在国外的发病率急剧上升，已超过其他性传播疾病居首位［3］。近年我国NGU发病率不断增高，报告的病例数也已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位。NGU的病因非常复杂，其中支原体感染是引起NGU的重要原因。支原体可以寄居在阴道黏膜并与其他菌群共生，在机体免疫力低下或黏膜受损的情况下发展成为致病微生物。Uu和Mh能使阴道黏膜、宫颈充血发红，分泌物增多引起阴道炎、宫颈炎等泌尿生殖系统疾病;Uu和Mh感染可致孕妇患生殖道绒毛膜羊膜炎，并由母婴垂直传播导致流产、死胎及新生儿早期死亡，或出生低体重儿、新生儿肺炎、新生儿脑膜炎等。Uu可通过破坏精子结构、降低精子的活动度和减弱其穿卵能力及识别卵子的能力、影响精子代谢等途径影响精子活力从而造成男性不育。因此及时对支原体感染作出诊断并选择合适的抗生素进行治疗非常重要。引起人类泌尿生殖道感染的支原体主要是UU和MH。本文结果表明UU是本地区NGU的主要病原体。女性支原体的检出率远高于男性，究其原因，除了女性泌尿生殖道系统的特殊结构导导致其较高的易感性外，还与男性尿道分泌物标本的采集质量有关，专用的男性尿道拭子往往无法采集到足量的柱状上皮细胞。因此，为了提高男性NGU患者的支原体检出率，多采集1-2份标本送检是必要的。

本文药敏结果显示支原体对红霉素的敏感率最低，只有8.2%，远低于国内相关文献报道[4，5]同时喹诺酮类药物的敏感率也有所降低，这可能与本地区大环内酯类药物的滥用有关。治疗本地区支原体引起的NGU应首选交沙霉素、强力霉素和美满霉素。参考文献:

[1] 黄宇烽．非淋菌性尿道炎实验诊断研究进展[J]．中华男科学，2004，10(1):3－8

[2] Hartmann M． Genital mycoplasmas[J]．J Dtsch Dermatol Ges，2009，7( 4) : 371 － 377 [3］Deguchi T，Maeda S．Mycoplasma genitalium: another important pathogenof nongonococcal urethritis[J]．J Urol，2002，167: 1210 － 1217

[4］路麒,张志刚.396例解脲脲原体药敏分析[J]中华医院感染学杂志,2003,13(9):889. [5］陈颖,张璞玉,等.支原体感染与非淋菌性尿道炎[J] 中华检验医学杂志,2003,26(12):802

非淋菌性尿道炎

非淋菌性尿道炎（nongonococcal urethritis NGU）：是指通过性交传染的一种尿道炎，尿道炎症状明显，但尿道分泌物中查不到淋球菌。 一、病原学 NGH最常见的病原体是沙眼衣原体，其次是支原体、阴道毛滴虫、白色念珠菌和单纯疱疹病毒等。据美国CDC报道，NGU患者中： 25%～50%的病例由沙眼衣原体（Chlamydia trochomatis CT）引起 20%～40%的病例由解脲支原体（Ureaplasma urealyticum UU）引起 2%～5%的病例由阴道毛滴虫引起 单纯疱疹病毒偶尔是NGU的病因 尚有少数病例病因目前尚不明了 （一）衣原体 衣原体广泛寄生于人类、哺乳动物及鸟类，仅少数致病，其中引起人类疾病的有沙眼衣原体（C.trachomatis）、肺炎衣原体（C.pncumoniae）和鹦鹉热衣原体（C.Psittaci）。 沙眼衣原体含4个生物变型(生物型)(biovar)： ●鼠和猪亚型尚未发现感染人类。 ●第3种是引起性病淋巴肉芽肿（Iymphogranuloma vencrcum:LGV）的生物型，即LGV型，可分为L1、L2、L2a、L3 4个血清型（serovars）。 ●第4种生物型（沙眼型）又可分为A~K 15个血清变型，A、B、Ba、C，4种血清型引起沙眼，D、Da、E、F、G、Ga、H、I、Ia、J、K，11种血清型引起泌尿生殖系统感染。 衣原体在细胞内生长繁殖，有独特的发育周期，可观察到两种不同的颗粒结构， ●一种为始体(Initial body，繁殖型)，呈圆形或卵圆形； ●另一种为原体(Elementary body，感染型)，呈球型。每个发育周期约需40小时。 衣原体对热敏感56℃-60℃仅能存活5-10分钟，在-70℃可保存数年。0.1%甲醛或0.5%石炭酸可将衣原体在短期内杀死，75%乙醇在半分钟内即可将衣原体杀死。 （二）支原体 支原体（Mycoplasma）广泛分布于自然界，有80余种，与人类有关的支原体有肺炎支原体(M.pneumonie,Mp)、人型支原体(M.hominis,Mh)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)和生殖支原体(M.genitalium,Mg)，前者引起肺炎，后者引起泌尿生殖系统感染。 支原体是一类能通过细菌滤器，没有细胞壁及前体，形态呈多形性，属于软皮体纲的一种原核微生物，支原体大小0.2-2.3um，是目前所知能在无生命培养基中生长繁殖的最小微生物。 生殖支原体是新近被发现的支原体，它是由Tully等于1981年首先从两例非淋菌性尿道炎患者尿道标本分离出来的，是泌尿道和生殖道感染的病原体之一。 支原体对热抵抗力与细菌相似，如45℃15-30分钟或55℃5-15分钟即被杀死，用石炭酸或来苏尔易将其杀死。 二、传染与流行 几乎所有沙眼衣原体感染都是性传播的。 出生时通过感染产道接触衣原体的婴儿。亦可获致感染，发生多种病变，包括结膜炎和肺炎。 生殖道衣原体感染主要是由D～K等血清型所致，以D，E，F诸型流行率最高，其次为G型。 衣原体感染与年龄关系密切，年轻人感染率较高，性伴越多，感染的机会也越高，在妇女，使用口服避孕药和宫颈异物的存在是衣原体感染的危险因素。 婴儿在通过产道时可发生生殖器的支原体移生(colonization)，1/3的女婴在生殖道可分离到脲原体，而人型支原体仅在少部分婴儿中分离到。 青春期后，移生主要是由于性接触引起。移生的增加与不同性伴侣的数目有关，女性移生的比例大于男性。此外男性和女性脲原体移生的比例大于人型支原体的比例。 NGU现已成为欧美各国最常见的性传播疾病之一，我国近年来病例数也不断增加。 三、发病机理与免疫反应 衣原体感染的疾病过程和临床表现，可能就是衣原体复制的组织损害和衣原体激起的炎症反应以及宿主细胞破坏的坏死物质等产生的综合影响。大多数衣原体感染都只是受累部位数量相对较少的部分细胞受到感染。沙眼衣原体对α、β、γ干扰素都敏感，γ干扰素似更重要，可能是对感染的控制而非对新感染的保护，与感染的清除有关。中和抗体能中和细胞培养中衣原体的传染性，抑制衣原体对非专业吞噬细胞表面的附着，或使之不能抑制吞噬溶酶体融合，或防止原体和始体通过交联表面蛋白而发生的形态学转变。

支原体感染的药敏分析

支原体感染的药敏分析 发表时间：2015-01-16T15:32:44.703Z 来源：《医药界》2014年9月第9期供稿作者：陈艳阳 [导读] ９种药敏试验中，美满霉素和强力霉素的敏感率最高，强烈推荐使用这两种药。 陈艳阳 （义乌市中医院检验科浙江金华３２２０００） 【中图分类号】Ｒ４４６．５【文献标识码】Ａ【文章编号】１５５０－１８６８（２０１４）０９【摘要】目的了解本地区生殖道支原体感染及耐药状况，为临床治疗支原体感染的抗生素选择提供参考依据。方法采用珠海丽珠试剂股份有限公司的药敏试剂盒，用液体培养的方法分离鉴定解脲支原体和人型支原体并做９种药敏实验。结果在２０２２例门诊病人中，解脲支原体阳性检查８００例，人型支原体阳性检出２１０例。解脲支原体的阳性检出率明显大于人型支原体阳性检出率。药敏试验结果显示，美满霉素和强力霉素的敏感率最高。结果分别为９６．６４％和９６．６４％。结论本地区支原体感染率较高，而且以解脲支原体（ＵＵ）为主。９种药敏试验中，美满霉素和强力霉素的敏感率最高，强烈推荐使用这两种药。 【关键词】性病药敏试验支原体 １临床资料及试验 １．１一般资料 所有标本均来源本院２０１３年１０月～２０１４年１０月门诊就诊病人，疑为非淋病性泌尿生殖道炎症，支原体培养的２０２２例门诊就诊者，标本为男性尿道、前列腺分泌物和女性宫颈分泌物，全部检测支原体和药敏测定。 １．２标本采集 标本采集前，患者应停止使用全身及局部抗生素１周以上。男性取前列腺液一滴于一次性无菌棉拭子上或接中段尿于无菌拭子管中。女性患者先清洁宫颈口分泌物，用一次性无菌棉拭子在宫颈管内１～２ｃｍ处取分泌物，拭子应在宫颈（或尿道）内旋转并至少停留２０ｓ以上，及时将标本接种到培养基。 １．３细菌培养及药敏分析 Ｕｕ、Ｍｈ培养及药敏试剂盒购自珠海丽珠试剂有限公司。药敏试验药物分别为强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星。将标本接种于液体培养基，摇匀后将培养液按每孔５０μｌ加入各反应孔中，加完后每孔滴加１～２滴无菌液体石蜡密封，盖上反应板，置３７℃恒温培养箱孵育，每２４ｈ，４８ｈ各观察一次，并做好记录。 ２结果 门诊送检标本２０２２例中，解脲支原体感染８００例，人型支原体感染２１０例。１０１０例支原体阳性标本对九种抗生素药敏结果见图表。 图表结果显示，解脲支原体和人型支原体敏感性最高的是美满霉素和强力霉素；解脲支原体敏感性较低的是氧氟沙星和左氟沙星；人型支原体耐药性较高，罗红霉素，克拉霉素，阿奇霉素都为百分百耐药。 ３讨论 支原体为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体结构也比较简单，多数呈球形，没有细胞壁，只有三层结构的细胞膜。泌尿生殖道感染有关的主要是解脲支原体和人型支原体两种，约有２０－３０％的非淋菌性尿道炎的病人，是由以上两种支原体引起的，是非淋菌性尿道炎及宫颈炎的第二大致病菌。据统计女性的支原体感染率更高些，说明女性的生殖道比男性生殖道更易生长支原体。另外，解脲支原体的感染率要比人型支原体的感染率为高。当支原体经尿道感染后，患者朋友可出现尿道炎症状，男性可继发支原体衣原体性慢性前列腺炎，女性可引起尿道炎、宫颈炎与前庭大腺炎。受到支原体感染，不能得到及时的治疗，还能引起不育［１］。 随着抗生素的广泛应用，支原体发病率增高，不规则大剂量抗生素治疗，病人反复感染或Ｕｕ与Ｍｈ合并感染，支原体菌株出现了较高的耐药性。从本试验结果显示，支原体对美满霉素和强力霉素较为敏感。而人型支原体对罗红霉素，克拉霉素，阿奇霉素均已耐药，不能作为首选药物治疗。阴道炎患者的支原体检测及时合理用药，对有效控制支体感染意义重大。由于支原体缺乏细胞壁，β内酰胺类抑制细胞壁合成的抗菌药对其无效［２］，同时支原体感染往往疗效慢、时间长，对于能否治愈，正确选药至关重要。本文推荐美满霉素和强力霉素作为目前治疗支原体感染的首选抗生素。本资料支原体对抗生素的敏感率有些与文献报道有差异［３］，可能与检测方法、地区差异

支原体培养及药敏阳性什么意思

支原体培养及药敏阳性什么意思 支原体培养及药敏呈现阳性，这说明感染了支原体，如果是已婚人士，一定要夫妻同治，在转阴以后说明彻底治好，但是要及时复查，避免出现反复发作的情况，治疗选择一些敏感的药物是比较重要的，这样对于治疗的效果会更好，除了治疗以外，平时要加强调养，注重饮食保健，保持充分的休息，在治疗期间不能有性生活。      ★支原体的治疗方法：1：需使用敏感抗生素，足量治疗(一般青霉素类没有作用)。2：必须治疗达到足够的时间。一般7-10天。同时注意，预防二次感染。(保持内裤干净，性伴侣同时治疗，禁忌酒和刺激性食物)。最好能在疾病治愈以后再要小孩。解脲支原体是一种通过性接触传播的疾病。3 四环素类及大环内酯类药物效果较佳，尤其是后者。二种或三种药物联合治疗为最好的方案。希舒美首剂1.0g，后0.5g/日，qd，5天1个疗程+美满霉素首剂200mg，后100mg，7天1个疗程+肤阴洁坐浴，1周后，复查白带培养及肝、肾功能。 4 及早到正规医院治疗，并且遵照医嘱定期复查，才能取得良好的疗效。

★支原体阴道炎的患病途径很多 包括性接触、直接接触、自体感染、医源性感染等。有不少女性检查出支原体感染属于携带者，也有些是自体感染(支原体)会寄生人体。解脲支原体感染主要通过性生活传播，多见于年轻性旺盛时期，尤多见于不洁性交后。当泌尿生殖道发生炎症，粘膜表面受损时解脲支原体易从破损口侵入，引起泌尿生殖道感染。解脲支原体感染后，患者大多无明显症状，因此，很难被患者觉察，也易造成医生漏诊。 解脲支原体可侵犯尿道、宫颈及前庭大腺，引起尿道炎、宫颈炎与前庭大腺炎;上行感染时，可引起子宫内膜炎、盆腔炎、 输卵管炎，尤其输卵管炎多见。解脲支原体感染造成的女性生殖器官病理性改变，是不孕不育的重要原因。 因此，女性一定要洁身自爱，注意养成良好的生活卫生习惯，杜绝支原体感染，发现患上支原体阴道炎后要及时到医院接受正规的治疗。

两种梅毒检测方法对比

第２０卷第１２期航空航天医药２００９年１２月２９ 两种梅毒检测方法对比 于晓明，胡雪峰，迟丽娜 （中航工业哈尔滨二四二医院，黑龙江哈尔滨１５００６６） 摘要目的：比较甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）、螺旋体明胶颗粒凝集试验（１１ＰＰＡ）两种梅毒血清学试验的检测结果。方法：将２００８～２００９年性病门诊１３８例确诊梅毒患者血清同时用甲苯胺红不加热血清试验 ７ｍｕｓＴ试验、螺旋体明胶颗粒凝集试验７ｒＰＰＡ试验检测，比较两种梅毒检测实验方法的灵敏度和特异性。结果：１３８份血清中，９８份血清ＴＲＵＳＴ阳性，１７份经抗梅毒治疗血清ＴＲｕｓＴ阴性，ＴＰＰＡ试验１３２份血清为阳性。结论：ＴＲＵｓＴ试验可作为梅毒的人群筛查、疗效、复发或再感染的检测指标，嗍试验是检测梅毒螺旋体抗体的特异性方法，主要作为梅毒的确证试验。两种不同方法同时进行梅毒检测，将减少漏诊、误诊率，为梅毒的确诊提 供参考依据，并且在判定梅毒的发展、痊愈及药物疗效方面都具有十分重要的意义。 关键词梅毒；甲苯胺红不加热血清试验（ＴＲＵＳＴ）；螺旋体明胶颗粒凝集试验（ＴＰＰＡ） 中图分类号：Ｒ４４６．１１文献标识码：Ａ文章编号：１００５—９３３４（２００９）１２—００２９—０２ ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅＤｉｆｆｅｒｅｎｔＭｅｔｈｏｄｓＥｘａｍｉｎｇＴｒｅｐｏｎｅｍａ／ＹＵＸ／ａｏ—ｍｉｎｇ，ＨＵＸｕｅ一乃ｎｇ，ＣＨＩ 厶一／／Ｈａｒｂｉｎ２４２ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＡＶＩＣ，Ｈａｒｂｉｎ１５００６６，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ０ｂｊＬ吣ｔｉｖｅ：ｔｏｓｅｌｅｃｔｔｈｅｂｅｓｔｓｃｒｅｅｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓｕｉｔｉｎｇｆｏｒｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓｂｙａｓｓｅｓｓｉｎｇｔｈｅｖａｌｉｄｉｔｙｏｆ ＴＲＵＳＴａｎｄＴＰＰＡ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴＲＵＳＴＷａｓｕｓｅｄｔｏｓｃｒｅｅｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｙｐｈｉｈｓｆｒｏｍｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓ。ａｎｄＴＰＰＡＷａｇｕｓｅｄｔｏ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔｓｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙＴＲＵＳＴ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ．ｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅａｎｄｆａｌｓｅｎｅｇａｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＴＲＵＳＴｗｅｒｅ３９．０２％，３．０３％，ａｎｄ６０．９８％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．１１１ｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅａｎｄｆａｌｓｅｎｅｇａｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＥＵＳＡｗｅｒｅ ９８．７３％。２０．５９％ａｎｄ１．２２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：ＴｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆＴＲＵＳＴａｎｄＥＬＩＳＡｉｓｔｈｅｆｉｒｓｔｃｈｏｉｃｅｔｏ∞ｒｅｅｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｙｐｈｉｌｉｓｆｒｏｍｂｌｏｏｄｄｏｎｏｒｓ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒｔｌｌｉｓｓｃｒｅｅｎｉｎｇｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓｔｏｂｌｏｏｄｓａｆｅｔｙ． ＫｅｙｗｏｒｄｓＴｒｅｐｏｎｅｍａ：ＴＲＵＳＴ；ＴＰＰＡ ｌ材料与方法 １．１一般资料１３８例患者均为性病门诊确诊者，其中男８３例，占印．１４％，女５５例，占３９．８６％。Ｉ期梅毒６８例，Ⅱ期梅毒５１例，Ⅲ期梅毒１９例。年龄１８～７２岁，平均３２岁。 １．２试剂ＴＲＵＳＴ试剂为上海荣盛生物技术有限公司提供。ＴＰＰＡ试剂为日本富士瑞必欧株式会社提供。试剂均在有效期内使用。 １．３方法ＴＲＵＳＴ试验：室温下，生理盐水稀释至ｌ：３２，每孔滴加心磷脂抗原，１００次／ｍｉｎ振荡器上水平振荡８ｍｉｎ，观察凝集结果，确定其阳性滴度。ＴＰＰＡ试验：室温下，在Ｕ型板上用稀释液将血清稀释，分别加入致敏和未致敏的明胶颗粒，孵育２ｈ观察结果。 ２结果 结果判定：ＴＲＵＳＴ过筛试验在漆圈中出现肉眼可见红色凝集块为阳性；若红色颗粒均匀分布未见凝集为阴性。ＴＰＨＡ确证试验（凝集）＋＋＋＋：红细胞形成膜状覆盖整个孔底，边缘形成皱褶；（凝集）＋＋＋：形成膜状覆盖部分孔底；（凝集）＋＋：形成膜状，边缘成圆环；（凝集）＋：成薄膜状，周围边有粗大圆环；（可凝）±：成纽扣状，中心稍薄；（不凝集）一：成光滑扣状结果表１。表ｌ１３８例梅毒患者的ＴＲＵＳＴ和ＴＰＰＡ试验结果（例％） 从表１两种方法检测为阳性的１３８份样本中。ＴＲＵＳＴ法检出１１１份，占８０％（１１１３８）；ＴＰＰＡ法检出１３３份，占９６．４％（１３３／１３８）；抗ＴＰＰＡ法阳性检出率明显高于ＴＲＵＳＴ法。 ３讨论 从表１中可看出６８例Ｉ期梅毒血清，ＴＰＰＡ阳性６４例，阳性率９４．１％，与顾伟鸣悼１报道的９６．３％结果相近，ＴＰＰＡ对Ｉ期梅毒的敏感度为９４．１％，对Ｉ期梅毒的敏感度高于ＴＲＵＳＴ。ＴＲＵＳＴ具有操作简便、报结果快、价格便宜等优点，可作为梅毒的人群筛查、疗效、复发或再感染的检测指标，当梅毒患者经抗梅毒治疗后，血清滴度下降，可作为疗效观察的指标。ＴＲＵＳＴ试验所用的抗原是从牛心提取的心磷脂和从鸡蛋黄提取的卵磷脂及胆固醇组成，中，结果清晰易读，稳定性好：缺点是许多因素影响结果，高脂皿症和抗心磷脂抗体阳性的血清均可干扰出现假阳性结果，而且该试验在非淋菌性尿道炎患者中存在生物学假阳

支原体感染与药敏分析

来自：杨传松,胡雪飞,廖晚珍. 2379例女性患者支原体感染情况与药敏分析[J]. 实验与检验 医学,2010,01:77-78. 2379例女性支原体感染情况与药敏分析 杨传松⒈胡雪飞⒉廖晚珍⒉ 【摘要】目的了解女性生殖道支原体（Mycoplasma）感染（主要为南昌地区）与药物敏感试验情况，为临床治疗提供依据。方法采用支原体试剂盒对2379例疑诊为生殖道感染女性患者的宫颈分泌物进行支原体培养、鉴定及药敏试验。结果2379份标本中，支原体检测阳性1503例，阳性率63.2%，其中解脲支原体（UU）46.0%（1094/2379），UU+ MH（人型支原体）混合感染及MH分别为15.4% (367/2379)、1.8%（42/2379）。药敏结果：支原体对强力霉素（Dox）、交沙霉素（Jos）、美满霉素（Min）的敏感率均在70%以上,另外,UU对克拉霉素（Cla）、四环素（Tet）也较敏感，分别为92.3%、84.7%，但Cla在MH及UU+ MH混合感染时，敏感率较低,仅为2.4%和7.4%；耐药率较高的是环丙沙星（Cip）、壮观霉素（Spe）等。结论本地区女性生殖道支原体感染以UU 为主，其次是UU+ MH混合感染，较敏感的抗菌药为：Dox、Jos、Min，仅UU 感染时还可选用Cla。为减低支原体的耐药率，建议临床根据药敏结果用药。 【关键词】支原体感染药敏非淋球菌尿道炎 支原体（Mycoplasma）是一类无细胞壁、形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞微生物，由于它们能形成有分枝的长丝，故称之为支原体［1］。感染人类的支原体有十余种，女性生殖道以人型支原体(MH)及解脲支原体（UU）最常见。MH感染多引起阴道炎、宫颈炎和输卵管炎，UU多引起非淋球菌性尿道（non-gonococcal urithritis,NGU）。支原体多与宿主共存，不表现感染症状，仅在某些条件下引起机会性感染，且常和其他致病菌共同致病［2］。大量的研究证明UU与自然流产、先天缺陷、死胎和不孕症有关［3］。支原体感染还是一种性传播疾病，近年来其发病率日趋上升且耐药株增多，受到医务工作者的关注。为了解本地区女性生殖道支原体感染与耐药情况，为临床用药提供参考，作者对来我院就诊的2379位女性患者宫颈分泌物做支原体检测，现将结果报告如下： ----------------------------------------------------- 作者单位：1. 南昌大学公共卫生学院2005级医学检验系 2. 南昌大学第一附属医院检验科 作者简介: 杨传松(1984.04.21),男, 南昌大学公共卫生学院2005级医学检验系学生. 通讯作者: 胡雪飞,E-mail:hxf123666@https://www.wendangku.net/doc/9010823476.html, 1资料与方法 1.1一般资料选自2009年1月~6月来我院妇产科门诊及住院的2379例女性 患者，进行宫颈分泌物检测。

支原体肺炎患儿D—二聚体检测及临床意义

支原体肺炎患儿D—二聚体检测及临床意义 目的探讨支原体肺炎血浆D二聚体水平变化及临床意义。方法回顾分析湖南省人医院儿童呼吸病区2012年1月～12月收治的肺炎支原体肺炎患儿，根据临床症状、病程、影像学特点分为普通肺炎支原体肺炎组50例，难治性支原体肺炎组35例。于住院第1 d抽取静脉血行D二聚体检测，难治组恢复期再次抽血检测。普通肺炎组与健康对照组比较，普通肺炎组与难治组比较，难治组急性期与恢复期比较，并对结果进行分析。结果普通肺炎组与健康对照组D二聚体水平差异无统计学意义（P>0.05），难治性支原体肺炎组急性期D二聚体水平显著高于普通肺炎组（P＜0.01），难治性支原体肺炎组急性期与恢复期D二聚体水平差异显著（P＜0.01）。难治性支原体肺炎病情严重程度与D二聚体水平有一定的相关性。结论通过检查D二聚体水平可早期发现诊断难治性肺炎支原体肺炎。在难治性支原体肺炎患儿的诊治过程中，监测D二聚体水平并及时干预，有利于疾病转归。 标签：肺炎支原体肺炎；D二聚体；儿童 肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）是介于细菌与病毒之间能自我复制的一种病原微生物，是社区获得性肺炎的常见病原体之一[1]。既往认为MPP临床表现较轻，部分病例呈自限性。近几年重症/难治性肺炎支原体肺炎（RMPP）病例有逐年增多的倾向[2]。早期识别發现RMPP病例实属必要。本文旨在探讨肺炎支原体肺炎患儿D二聚体水平，为早期发现RMPP提供参考依据。 D-二聚体（D-dimmer）是纤溶酶水解交联纤维蛋白降解后形成的特异性降解产物，是体内高凝状态和纤溶亢进的分子标记物之一。研究证实，感染的程度不同，可伴有不同程度和范围的凝血系统的激活，D-二聚体水平有不同的变化。本研究拟在通过检测、对比分析湖南省人医院儿童医学中心呼吸病区2012年1月～12月收治的支原体肺炎患儿的血浆D-二聚体水平，揭示难治性支原体肺炎组与肺炎组之间的血浆D-二聚体水平差异性，从而为难治性支原体肺炎严重程度判定和临床治疗提供另一条思路，现分析报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料资料来源于湖南省人医院儿童呼吸病区2012年1月～12月收治的肺炎支原体肺炎患儿。根据临床症状、病程、影像学特点分组。RMPP组：35例，男16例，女19例，年龄1～3岁5例，4～6岁19例，7～14岁11例，平均年龄（5.32±1.65）岁。MPP组：同期住院诊断MPP50例，男23例，女27例，年龄1～3岁9例，4～6岁23例，7～14岁18例，平均年龄（4.59±1.41）岁。健康对照组：儿童保健科体检儿童20例，男12例，女8例，平均年龄（3.87±1.18）岁。 1.2 MPP诊断标准参照《诸福棠实用儿科学》第7版[3]；起病4 w内双份血清支原体抗体的滴度升高有4 倍以上[4]；鼻咽部和口咽部的标本荧光定时定

非淋菌性尿道炎患者支原体检测及药敏分析

非淋菌性尿道炎患者支原体检测及药敏分析 发表时间：2013-09-18T15:34:54.077Z 来源：《医药前沿》2013年第25期供稿作者：张蕾郭良陈莉[导读] 近年来，NGU发病率不断增高，报告的病例数已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位，另由于治疗的不规范，其耐药性也在不断增加。 张蕾郭良陈莉（福建医科大学附属闽东医院检验科 355000） 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）25-0382-01 支原体是引起非淋性尿道炎(non － gonococcal urethritis，NGU) 的重要病原体，包括解脲支原体(ureaplasmaurealyticum，Uu) 和人型支原体(mycoplasmahominis，Mh) ，也可引起慢性前列腺炎、子宫内膜炎、输卵管炎以及盆腔炎等泌尿生殖道的其他疾病［1，2］。近年来，NGU发病率不断增高，报告的病例数已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位，另由于治疗的不规范，其耐药性也在不断增加。为了解本地区支原体感染及其耐药情况，对2011年1月～2013年1月就诊的1863例疑为泌尿生殖道感染患者进行支原体培养及药敏试验，为临床合理用药提供依据。 1 材料及方法： 1.1标本来源：2011年1月—2013年1月间，来我院门诊的1863例NGU患者。其中男性1056例，女性807例。 1.2标本采集：男性尿道分泌物标本用男性专用无菌棉拭子伸入尿道口2-4cm处停留约半分钟，轻转取含柱状上皮细胞标本。女性取宫颈口内1-2cm处的单层柱状上皮细胞，取样拭子不可触及阴道壁。 1.3方法：采用珠海浪峰生物技术有限公司生产的支原体培养药敏一体化试剂盒。于有效期内使用，严格按照说明书操作及判读。 2 结果： 1863份标本，支原体阳性715份，阳性率为38.4%。其中单纯解脲脲原体(UU)感染为618例(33.2%)，单纯人型支原体感染为13例(0.7%),UU和MH混合感染为84例(4.5%)。男性支原体阳性率为21.1%(223/1056),女性为60.8%(491/807)，经统计学χ2检验,P﹤0.05,二者有显著性差异。715例支原体阳性患者年龄主要在20-40岁间,占91.2%。 药敏结果：见表1： 表1 618例解脲支原体对12种抗生素的药敏结果 3 讨论 NGU 是主要的性传播疾病之一，在国外的发病率急剧上升，已超过其他性传播疾病居首位［3］。近年我国NGU发病率不断增高，报告的病例数也已升至我国重点防治的8种性传播疾病的第2位。NGU的病因非常复杂，其中支原体感染是引起NGU的重要原因。支原体可以寄居在阴道黏膜并与其他菌群共生，在机体免疫力低下或黏膜受损的情况下发展成为致病微生物。Uu和Mh能使阴道黏膜、宫颈充血发红，分泌物增多引起阴道炎、宫颈炎等泌尿生殖系统疾病;Uu和Mh感染可致孕妇患生殖道绒毛膜羊膜炎，并由母婴垂直传播导致流产、死胎及新生儿早期死亡，或出生低体重儿、新生儿肺炎、新生儿脑膜炎等。Uu可通过破坏精子结构、降低精子的活动度和减弱其穿卵能力及识别卵子的能力、影响精子代谢等途径影响精子活力从而造成男性不育。因此及时对支原体感染作出诊断并选择合适的抗生素进行治疗非常重要。引起人类泌尿生殖道感染的支原体主要是UU和MH。本文结果表明UU是本地区NGU的主要病原体。女性支原体的检出率远高于男性，究其原因，除了女性泌尿生殖道系统的特殊结构导导致其较高的易感性外，还与男性尿道分泌物标本的采集质量有关，专用的男性尿道拭子往往无法采集到足量的柱状上皮细胞。因此，为了提高男性NGU患者的支原体检出率，多采集1-2份标本送检是必要的。 本文药敏结果显示支原体对红霉素的敏感率最低，只有8.2%，远低于国内相关文献报道[4，5]同时喹诺酮类药物的敏感率也有所降低，这可能与本地区大环内酯类药物的滥用有关。治疗本地区支原体引起的NGU应首选交沙霉素、强力霉素和美满霉素。参考文献: [1] 黄宇烽．非淋菌性尿道炎实验诊断研究进展[J]．中华男科学，2004，10(1):3－8 [2] Hartmann M． Genital mycoplasmas[J]．J Dtsch Dermatol Ges，2009，7( 4) : 371 － 377 [3］Deguchi T，Maeda S．Mycoplasma genitalium: another important pathogenof nongonococcal urethritis[J]．J Urol，2002，167: 1210 － 1217 [4］路麒,张志刚.396例解脲脲原体药敏分析[J]中华医院感染学杂志,2003,13(9):889. [5］陈颖,张璞玉,等.支原体感染与非淋菌性尿道炎[J] 中华检验医学杂志,2003,26(12):802

第六节 支原体药敏

第六节支原体 支原体是一类目前所知能在无生命培养基中独立生活，自行繁殖的最小微生物。支原体感染的范围非常广泛，包括人，动物，植物，昆虫及组织培养的细胞。人体可分离出十几种支原体，其中一些对人有致病性如：肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体、生殖支原体、及发酵支原体等。能引起生殖泌尿系感染的支原体主要有两种，即解脲支原体和人型支原体。肺炎支原体主要引起呼吸道的感染。 支原体的体外药敏试验最早是在上世纪60年代提出。在过去的40多年中，很多研究采用肉汤稀释法和琼脂为基础的方法报道了支原体的抗菌活性，但一直没有一个公认的、标准的参考方法。在过去的几年，有关支原体体外药敏试验方法学的研究也有一些报道，但仍存在着一些不足。直至2011年CLSI M43指南出现，规范了支原体体外药敏实验的方法（微量肉汤法和琼脂稀释法）、明确了质控菌株及对不同抗生素的MIC范围、建立了临床用于支原体治疗药物的折点。因支原体培养时间较长，临床治疗支原体感染很难依靠培养及药敏的结果，基本上采用经验抗菌药物的治疗，因此支原体体外药敏试验对于临床分离株的耐药性监测以及新药的研发更具意义。 一、药敏的适应征 1.临床分离的支原体通常不需要进行药敏试验，可经验性使用抗菌药物治疗。 2.当临床经验性抗菌药物治疗效果不好时，而可用于支原体感染治疗的药物又非常的有限，需要进行支原体的体外药敏试验。目前，已知可能的耐药包括： 1）人型支原体、脲原体的某些种对四环素类药物的耐药。 2）人型支原体、脲原体的某些种对氟喹诺酮类药物的耐药。 3）肺炎支原体、脲原体某些种对大环内酯类药物的耐药。 4）人型支原体对克林霉素耐药。 这时就要考虑可用于治疗的药物中那些还可以用于耐药菌株的治疗。 3. 从无菌体液或生殖道以外的部位中分离的人型支原体、脲原体应做药敏，尽管人型支原体、脲原体的某些种常常是泌尿生殖道的致病菌。特别是从有播散性感染的患者如：新生儿或免疫低下患者的无菌部位分离的人型支原体、脲原体应进行体外药敏试验。 二、方法学 （一）肉汤稀释法 1. 微量肉汤稀释法 1）方法 在无菌的96孔板上，加入一定量的液体培养基（含有酚红指示剂），将测试的抗生素倍比稀释。加入终浓度为104～105CFU/ml新鲜培养物到不同抗生素浓度孔中。另外设立3个对照孔：阴性对照（只加培养基）；药物对照（肉汤 + 含抗生素肉汤）；阳性对照（肉汤 + 培养物）。加样完毕，在每孔里面滴加3到5滴无菌液体石蜡，防止长时间培养液体挥发影响实验结果准确性。盖上板盖，在适宜的温度和气体环境中培养，阳性对照孔正常生长后读取MIC。

两种血沉检测方法的比较分析

两种血沉检测方法的比较分析 发表时间：2012-02-01T09:20:22.603Z 来源：《中外健康文摘》2011年第38期供稿作者：杨占甲[导读] 统计学处理将所得数值导入2003版的EXCEL，并对其进行Student-t检验和相关性分析。 杨占甲（河南省郑州人民医院河南郑州450000） 【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）38-0080-01 【摘要】目的采用传统的魏氏法和倾斜管法两种方法来测定红细胞的沉降率，并对两种血沉检测方法进行比较分析。方法随机采集100例血液标本，对这100例血液标本同时采用倾斜管法和魏氏法两种方法进行红细胞沉降率的测定，并对两种血沉检测方法进行统计比较和分析。结果对两种血沉检测方法进行比较分析，两种方法测定的红细胞沉降率差异并不显著（P>0.05），没有统计学意义，相关性很好。结论采用倾斜管法对红细胞的沉降率进行测定是一种简单、便捷的方法，可以在特点的条件下使用，具有推广价值。【关键词】魏氏法倾斜管法红细胞沉降率相关性分析 红细胞沉降率是指在一定条件下，红细胞沉降速度的指标，简称为血沉，英文表示为ESR。一个健康人红细胞沉降率通常在一个比较狭窄的范围内上下波动，不会有大幅度的升降变化，而在很多病例情况的干涉下，红细胞沉降率会表现出明显的增快。血沉检查时非特异性试验的一种，但即使如此，将血沉结果与临床资料相互对照显示，血沉检查在临床上很可以有很多应用，可以辅助判断患者机体是否有炎症，患者病变是否有活动性等等，可以为临床检查提供参数具有很重要的参考价值，临床上也常常采用血沉检测的方法来作为试验诊断的方式。在进行红细胞血沉率的测定时，一定要及时进行，只有这样才不会影响记过，所以可以理解，在医院中，采集患者血液样本进行血沉测定时，并不是有专业的医务人员在实验室进行检测和诊断，而是当护士对患者抽血后，立刻将血液移到无菌处置室来进行血沉测定的，但是不可避免的是，护士可能同时有很多工作需要去处理，便不能保证在准确的时间1h读取血沉值，可能晚些甚至将其以往，有鉴于此，本文介绍另一种测量血沉的方法：倾斜管法，并在此将倾斜管法和魏氏法进行血沉比较分析。魏氏法是国际血液学标准化委员会推荐的常规方法，将倾斜管法与魏氏法进行比较分析更具有说服力。 1 资料与方法 1.1一般资料在2006年～2011年诊科病房的患有不同性质疾病的患者中，随机抽取100例患者的血液标本，其中男53例，女47例，年龄53～81岁，平均年龄67岁。 1.2方法清晨，在患者空腹的情况下从患者身上抽取血液，抽取患者的3.2ml的血液，并将其与3.8%枸橼酸钠溶液混合，枸橼酸钠溶液的体积控制在0.8ml，与此同时向其中注入两支魏氏血沉管至“0”刻度，结束后，将其分别放置在两个魏氏血沉架上，在放置时，两支试管放置的方式不同，其中一个按照常规方法放置，即垂直放置，1h后要低于血浆段的高度进行读取并记录，另一个要放置在特定的自制的等腰直角三角形架子上，保持倾斜45°角，并于10min后将血沉值读取。 1.3统计学处理将所得数值导入2003版的EXCEL，并对其进行Student-t检验和相关性分析。 2 结果 经过1h后采用魏氏法测得的血沉值平均为33.12±32.556mm/h，而经过10min后采用倾斜管法测得的血沉值平均为33.39±32.509mm/h，用统计学方法对两组数据进行Student-t检验，结果表明两种方法检测结果没有统计学意义（t=0.59，P=0.52>0.05），对两组结果进行相关性分析，分析结果显示两种方法的检测结果呈正相关，相关系数为r=0.97，数据显示两者相关性较好。 3 讨论 测量红细胞沉降率在临床上应用很广泛，将血沉结果与临床资料相互对照显示，血沉检查在临床上很可以有很多应用，可以辅助判断患者机体是否有炎症，患者病变是否有活动性等等，可以为临床检查提供参数具有很重要的参考价值，临床上也常常采用血沉检测的方法来作为试验诊断的方式。魏氏法是最经典最传统最常规最可靠的检测血沉的方法，魏氏法也是国际血液学标准化委员会推荐的常规方法，但是在实际应用中，魏氏法的过程比较复杂，需要手工操作，而且对观察记录的时间也有比较严格的要求，人们近年来一直在寻求一种更简便、更省事的测量血沉方法，比较熟悉的是采用自动电子血沉仪，这种电子血沉仪虽然更加便捷，且检测的时间也不长，但所得的检测结果受到很多外界因素的影响，但是仪器的成本比较高，并不是所有的医院都可以普及。倾斜管法对仪器并没有新的要求，而且检测的时间短，仅需10min便可，且检测结果可以直接读出来而并不需要进行换算，从两种血沉检测方法的比较分析中，倾斜管法与魏氏法几乎没有差别，相关性较好，对于血沉增高患者结果更加明显，所以倾斜管法适用于血沉增高患者或者需要经常复查血沉的患者，可以对其进行动态检测。 参考文献 [1]陆金春，李春德，黄宇烽.临床检验报告速查手册[M].上海：上海第二军医大学出版社,2009. [2]卢雁英，赖桂凤，郑丹丹．血液标本采集对检验结果的影响[J].包头医学院学报,2011(3):14-15. [3]马翠萍，魏以壁.二级医院检验科生物安全管理现状及对策[J]．医学理论与实践,2011(10):132-133. [4]李恵,高洪国,张元梅．两种红细胞沉降率检测方法的比较[J].齐齐哈尔医学院学报,2011(7):67-68.

柳州市女性生殖道支原体感染情况及药敏分析

柳州市女性生殖道支原体感染情况及药敏分析 发表时间：2015-10-13T09:25:18.707Z 来源：《医药前沿》2015年第21期供稿作者：侯云生覃小矿 [导读] 柳州市妇幼保健院检验科广西柳州但支原体感染患者治疗仍首选大环内酯类和四环素类，并结合患者的药敏结果合理的使用抗生素，减少耐药菌株的出现，提高治愈率。 侯云生覃小矿 （柳州市妇幼保健院检验科广西柳州 545001） 【摘要】目的：了解柳州市女性生殖道支原体的感染情况及药敏情况，给临床合理用药提供依据。方法：收集2014年1月至2014年12月在我院妇科门诊及中医科门诊共3358例阴道分泌物标本进行支原体培养及药敏分析。结果：3358例女性患者标本共检出支原体933例，阳性为27.8%，其中解脲脲原体（ureaplasma urealyticum, Uu）阳性率为15.3%（513/3358）,人型支原体（mycoplasma hominis, Mh）阳性率为4.1%（139/3358），Uu和Mh混合感染阳性率为8.4%（281/3358）。药物敏感分析，对Uu敏感性最高的是交沙霉素，其次是环脂红霉素和克拉霉素；对Mh敏感性最高的是交沙霉素和强力霉素；对Uu和Mh混合感染敏感性最高的是美满霉素和交沙霉素。结论：柳州地区女性生殖道支原体感染率较高，根据药敏结果可给临床合理的用药指导，以提高治愈率，减少耐药菌株的产生。 【关键词】女性生殖道；支原体；感染情况；药敏分析 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）21-0362-02 支原体是泌尿生殖道感染的常见病原体，以解脲脲原体（ureaplasma urealyticum,Uu）和人型支原体（mycoplasma hominis,Mh）较常见，其耐药率也随着抗生素的广泛应用变得严重，因此，为了解我院女性支原体感染情况及耐药情况，我们特收集了3358例女性阴道分泌物检测支原体，为临床诊断、治疗和预防支原体感染提供依据。现报告如下： 1.材料与方法 1.1 标本来源 2014年1月至12月柳州市妇幼保健院妇科门诊及中医科患者3358例，所有患者检测前一周均未使用抗生素。 1.2 标本采集清洁阴道，抹去宫颈口分泌物，将无菌棉拭子伸入宫颈口2～3cm处，旋转一周并停留片刻，取出后将分泌物立即送检。 1.3 培养严格按照珠海浪峰生物技术有限公司试剂盒说明书进行操作及判定结果，取样后立即处理标本，接种后至35～37℃温箱中，Uu培养24小时，Mh培养48小时，分别记录培养和药敏结果。 2.结果 2.1 3358例女性分泌物支原体感染情况 3358例标本共检出933例阳性病例，阳性率达到27.8%。其中Uu阳性513例，阳性率为 15.3%；Mh阳性139例，阳性率为4.1%；Uu和Mh混合感染281例，阳性率为8.4%。933例阳性女性分泌物支原体感染情况见表1。 表1 933例阳性女性分泌物支原体感染情况 3.讨论 支原体是一种缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它能引起非淋球菌性尿道炎（non-gonococcal u-rethritis,NGU）、女性阴道炎、尿道

支原体检测

支原体检验法 1 培养基 1.1 检验禽源细胞和由禽胚组织或其细胞制成的活疫苗，用改良Frey 氏培养基。 1.2 检验其他种类细胞和病毒活疫苗，用支原体培养基 1.3 检验血清用无血清的支原体培养基 2 检查法 2.1 样品处理每批制品取样3-5瓶，液体制品混合后备用；冻干制品加液体培养基复原成混悬液后混合。检测血清时用血清直接接种。 2.2 疫苗的检测 2.2.1 接种于观察每个样品需同时用以下两种方法检测 2.2.2.1 液体培养基培养将疫苗混合物5.0ml接种小瓶液体培养基中，再从小瓶中去0.2ml移植接种于1小管液体培养基中，将小瓶与小管置于37℃培养，分别于接种后5日、10日、15日从培养瓶中取出0.2ml培养物移植到小管液体培养基内，每日观察培养物有无颜色变黄或变红，如果无变化，则在最后一次移植小管培养、观察后14日后停止观察。在观察期内，如果发现小瓶或任一小管内液体颜色出现明显变化，在原pH变化达0.5时，应立即移植于液体培养基和固体培养基，观察在液体培养基中是否出现恒定的pH变化，及固体上有无典型的“煎蛋”状支原体菌落。 2.2.2.2 琼脂固体平板培养在每次液体培养物移植小管培养的同时，取培养物0.1-0.2ml接种于琼脂平板，置含5%-10%二氧化碳。潮湿的

环境、37℃下培养。此外，在液体培养基颜色出现变化，在原pH变化达到0.5时，也同时接种琼脂平板。每5-7日，在低倍显微镜下观察各琼脂平板上有无支原体菌落出现，经14日观察，仍无菌落时，停止观察。 2.2.2 对照每次检查需同时设置阳性、阴性对照，在同条件下培养观察。检测禽类疫苗时用滑液支原体作为对照，检测其他疫苗时用猪鼻支原体作为对照。 2.3 血清的检测取本血清50ml代替培养基中的马、猪血清，按附录38页培养基配方配成大瓶培养，按2.2.1.2项稀释、移植、培养，观察小管培养基的pH变化情况和琼脂平板上有无菌落。 3 结果判定 3.1 接种本物的任何一个琼脂平板上出现支原体菌落时，判定血清或者疫苗不合格。 3.2 阳性对照中至少有一个平板出现支原体菌落，而阴性对照中无支原体生长，则检验有效。 附注：上述小瓶培养基是指在100ml小瓶中盛20ml液体培养基；小管培养基是指在1.0cm*10cm中盛1.8ml培养基。小管与小瓶须用胶塞封口。

检测方法比较

激光散射速率法：激光散射技术是指用激光作光源，在入射光方向以外，借检测 散射光强度、频移及其角度依赖等而得到粒子重量、尺寸、分布及聚集态结构等信息的方法的统称，有着广阔的用途。就检测纳米材料而言，主要涉及频移及其角度依赖性的检测，这种散射技术又称动态光散射、准弹性光散射及光子相关光谱，分别以测定参数的性质、能量转移的大小及测定方法的原理而得名。 散射比浊法：散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90°直角，当向样品中加入凝血激活剂后，随样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的散射光强度逐步增加。当样品完全凝固以后，散射光的强度不再变化，通常是把凝固的起始点作为0%，凝固终点作为100%，把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理，描出凝固曲线 透射比浊测定法:是测定入射光强度由于溶液中粒子的散射而降低的程度，它并不直接测定散射的光强。这一点与分光光度测定法极为类似。用这种方法时，多用聚乙二醇（PEG）作为反应增强剂。这种非离子型聚合物可以降低抗原抗体复合物的溶解度。 免疫层析法:是近几年来国外兴起的一种快速诊断技术，其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品（尿液或血清）后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。 目的: 评估透射免疫比浊法和速率散射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的灵敏度和特异性.方法: 用免疫透射比浊法和速率散射比浊法同时检测了80例各种患者血清中CRP浓度. 结果: 两种方法在8～20 mg/L 、20～40 mg/L、40～80 mg/L、80～160 mg/L、160～300 mg/L范围内测定C 反应蛋白的相关系数是0.990、0.996、0.995、0.992、0.997,说明两种方法的相关性是良好的,而在低值1～8 mg/L的测定中两方法的相关系数为0.928.结论: 速率散射免疫比浊法在低值和高值测定中可以得到较为准确的CRP检测结果.

支原体检测SOP

支原体检测SOP 目的：制定支原体检验标准操作规程，确保检验操作正确。 范围：本标准适用于本公司主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞、病毒收获液、原液的支原体检验操作。 依据：《中国药典》2010年版三部通则3301支原体检测法。 一、培养法 1、检测原理：直接培养支原体于培养基中，观察其生长及菌落生成。 2、适用器材：灭菌锅、试管（带盖）、10ml移液管、1ml移液管、37℃培养箱、 3、检测步骤： （1）培养基的制备：【外购培养基】 （2）检测培养基的灵敏度： 将菌种接于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲传两代后，将培养物接种至待检培养基中，做10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7～10-9，接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3～10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基内。每个稀释度接种3支试管，置36℃±1℃培养7～14天，观察培养基变色结果。 结果判定以接种后培养基管数的2/3以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。 液体培养基的灵敏度：肺炎支原体（ATCC 15531株）应达到10-8，口腔支原体（ATCC 23714株）应达到10-4。 （3）培养基前处理： 检查支原体采用支原体液体培养基和支原体半流体培养基（或支原体琼脂培养基）。半流体培养基（或琼脂培养基）在使用前应煮沸10～15分钟，冷却至56℃左右，然后加入灭能小牛血清（培养基︰血清为8︰2），并可酌情加入适量青霉素，充分摇匀。液体培养基除无需煮沸外，使用前亦应同样补加上述成分。 （4）接种培养： 取每支装量为10ml的支原体液体培养基各4支、相应的支原体半流体培养基各2支（已冷却至36℃±1℃），每支培养基接种供试品0.5～1.0ml，置36℃±1℃培养21天。于接种后的第7天从4支支原体液体培养基中各取2支进行代次培养，每支培养基分别转种至相应的支原体半流体培养基及支原体液体培养基各2支，置36℃±1℃培养21天，每隔3天观察1次。 （5）结果判定： 无生长——合格； 疑有生长——加倍量复试——无生长——合格；