稳定性同位素内标与质谱检测

稳定性同位素内标与质谱检测

稳定性同位素内标是质谱方法（稳定性同位素稀释法）独有的，没有别的临床检测方法用到同位素内标。比如光吸收和免疫的方法，都无法分辨出被检测物和同位素内标的区别，因为它们的理化性质太接近了。如果真的加进内标，那测出来的值肯定大大的偏高。只有质谱才能把同位素内标和要检测的物质分得开，虽然它们的差别只有几个道尔顿。现在的内标基本都是稳定同位素标记的，最常见的是D和13C。同位素内标和被检测物是同一个物质，但是其中的几个氢原子被氘所取代，或者是12C换成了13C，理化性质基本不变。

同样是标记，13C就比D要好。但是D要比13C便宜很多。绝大多数D做的内标性能是很好的。出问题的经常是一些疏水性比较差，保留时间比较短的物质。出峰的时候跟很多其它物质一起出来，些许的偏差就能引起浓度测不准。

临床检测的数据要想测的准，离不开一条好的标准曲线。通俗来讲，标准曲线就像一把尺子。只有把尺子做准确了，才能把未知物品的长度测准确。从科学上来讲，标准曲线就是检测物质的浓度和仪器读数的一种线形关系。一般是浓度越高，读数越大。标准品的浓度是已知的，高中低都有。测完标准品以后，把它们的浓度和仪器测得的读数在x/y的坐标纸上一画，连一条线就成了。测未知的病人样品时，浓度（x）是未知的，只有仪器的读数(y)，通过这条曲线可以把y 换算成浓度。

标准品应该怎么做，怎么用，这里面有很多学问。质谱是新鲜技术，大多的检测项目还买不到标准品，只能自己配。做标准品需要有纯样品。最好的纯样品应该是浓度和纯度都有保证书的，这样用起来放心。如果是液体的溶液就更好了，省去自己称量和溶解的麻烦。高浓度的纯样品要稀释到不同的低浓度才能使用。用什么来稀释是下一个非常关键的步骤，这里面牵扯到基质效应。因为基质效应这块儿瓦是质谱临床应用里比较难理解的一个概念。

目前同位素内标广泛应用于临床检测中：

激素检测

儿茶酚胺检测

维生素检测

全谱氨基酸检测

全谱氨基酸

1-甲基-L-组氨酸（1MHis）L-组氨酸（His）

3-甲基-L-组氨酸（3MHis）δ-羟基赖氨酸（Hyl）L-α-氨基己二酸（Aad）羟基-L-脯氨酸（Hyp）

L-α-氨基正丁酸（Abu）L-异亮氨酸（Ile）

L-丙氨酸（Ala）L-亮氨酸（Leu）

L-氨肌肽（甲肌肽）（Ans）L-赖氨酸（Lys）

L-精氨酸（Arg）L-蛋氨酸，L-甲硫氨酸（Met）精氨基琥珀酸（Asa）L-正亮氨酸（Nle）

L-天门冬酰胺（Asn）L-正缬氨酸（Nva）

L-天门冬氨酸（Asp）L-鸟氨酸（Orn）

D，L-β-氨基异丁酸（bAib）O-磷酸乙醇胺（PEtN）

β-丙氨酸（bAla）L-苯基丙氨酸（Phe）

L-肌肽（Car）L-脯氨酸（Pro）

L-瓜氨酸（Cit）O-磷酸-L-丝氨酸（Pser）

胱硫醚，丙氨酸丁氨酸硫醚（Cth）肌氨酸（Sar）

L-胱氨酸（Cys）L-丝氨酸（Sar）

乙醇酸（Cys）牛磺酸（Tau）

γ-氨基正丁酸（GABA）L-苏氨酸（Thr）

L-谷氨酰胺（Gln）L-色氨酸（Trp）

L谷氨酸（Glu）L-酪氨酸（Tyr）

甘氨酸（Gly）L-缬氨酸（Val）

高瓜氨酸（Hcit）别异亮氨酸（Allo-lle）