谷物β-葡聚糖研究进展
葡聚糖检测方法
葡聚糖检测方法（试剂盒方法翻译） 一．提供试剂 瓶1：exo-1,3-β-Glucanase (100 U/mL) plus β-Glucosidase(20 U/mL) suspension, 2.0 mL 瓶2：Amyloglucosidase (1630 U/mL) plus invertase(500 U/mL) solution in 50 % v/v glycerol, 20 mL 瓶3：GOPOD Reagent Buffer. Buffer (48 mL,pH 7.4), p-hydroxybenzoic acid and sodium azide(0.4 % w/v). 瓶4：GOPOD Reagent Enzymes. Glucose oxidaseplus peroxidase and 4-aminoantipyrine. Freeze-dried powder. 瓶5：D-Glucose standard solution (5 mL, 1.00 mg/mL) in0.2 % w/v benzoic acid 瓶6：Contr ol yeast β-glucan preparation ( 2 g, β-glucan content stated on the bottle label). 二．提供试剂的处理 1.向瓶1中加入8ml醋酸钠缓冲液，分装-20℃存放。 2.直接使用瓶2中的试剂，稳定在4°C ~ 2年或者-20°C > 4 年。 3.将瓶3的GOPOD试剂用纯化稀释水定容到1L，稳定在4°C > 2年。 4.将瓶4的GOPOD试剂用纯化稀释水定容到1L，黑暗环境存放， 稳定在4 °C 2 - 3个月,在-20°C或> 12个月。
β-葡聚糖研究进展
?-葡聚糖的研究进展 程彦伟李魁赵江 燕麦β－葡聚糖是一种存在于大燕麦皮中的天然非淀粉类水溶性植物糖，其基本结构是由D葡萄糖以β14，β1-3糖苷键连接而成的线性多糖，这两种糖苷键的比例大致为7：3。 燕麦β－葡聚糖是一种水溶性膳食纤维，因其具有的黏性阻碍淀粉、蛋白质等物质的消化和吸收，并可增殖消化道有益菌，所以可对人体具有一些极为有利的生理功能：具有显著的降血脂、降血糖及提高免疫能力，维持肠道微生态环境等。另外，它还能加快确定人群的免疫细胞。对细菌感染的反应并控制住细菌感染的位置，使感染面尽快恢复；作为化妆品的有效成分，可以提高皮肤抗过敏能力，激活免疫功能，延缓皮肤衰老。燕麦水溶性膳食纤维和燕麦葡聚糖，可有效降低餐后血糖浓度和胰岛素水平，降低胆固醇和预防心血管疾病.燕麦纤维食品易被人体吸收，并且因含热量很低，既有利于减肥，又适合心脏病,高血压和糖尿病患者食疗的需要。 降低胆固醇 早在多年，科学家就发现bata一葡聚糖能够减少肠胃吸收脂肪酸的速率,降低人体胆固醇的合成.随着bata一葡聚糖研究的日趋成熟，学者们先后在动物及人体实验水平上进行了大量的实验,证实了bata一葡聚糖在降低胆固醇和低密度脂蛋白方面具有特 异的生理功能.科学家发现bata一葡聚糖对胆固醇的影响主要在于能显著降低血浆中 总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDI一TC),而对高密度脂蛋白(HDL)和甘油三醋(TG)没有明显影响仁。燕麦葡聚糖对高血脂人群有明显的降低胆固醇的作用。 有关燕麦葡聚糖降低胆固醇的机理目前有四种假说: ①可结合胆汁酸,增加了胆汁酸的排泄,从而降低胆汁酸水平和血浆胆固醇浓度。 ②可被肠道中微生物发酵而产生短链脂肪酸，可抑制肝脏中胆固醇的合成。 ③可促进LDL一C分解。 ④可在消化道中形成高粘度环境，阻碍消化道对脂肪，胆固醇和胆汁酸的吸收。 降血糖 每天食用葡聚糖燕麦食品后，患者血糖水平可降低约50%，使用燕麦食品有显著降低血糖作用燕麦汗葡聚糖可通过降低血脂含量，改善血液流动性能,加快糖类成分在吸收利用过程中的转运速度和效率，同时对糖尿病所并发的肝肾组织病变有良好的修复作用，并且可有效降低肝糖原的分解，从而导致血糖降低。 增强免疫力 燕麦葡聚糖具有免疫调节作用,燕麦p一葡聚糖可使小鼠淋巴细胞增值,增强小鼠 抵抗细菌侵袭的能力；可刺激小鼠腹膜巨噬细胞释放肿瘤坏死因子(TNF一ALPHAhe)和白介素一1(In-terlukinIL一1)及巨噬细胞p338DI的释放，经灌胃或肠外注射燕麦葡聚糖,小鼠血清免疫球蛋白数量明显增加，说明燕麦葡聚糖具有提高小鼠免疫力的作用。 抗癌功能
真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒(显色法)产品技术要求kehe
真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒（显色法） 适用范围：用于体外定量测定人血清样本中真菌(1-3)-β-D葡聚糖的含量。1.1 规格 24人份/盒、48人份/盒 1.2 主要组成成分 校准品靶值批特异，详见靶值单 质控范围批特异，详见靶值单 2.1 外观 反应主剂为白色冻干块状物，样品处理液、溶解液和主剂复溶液为无色透明液体。 2.2 装量 处理液、溶解液和主剂复溶液装量不小于标示量。 2.3 准确度
试剂盒的回收率须在85%～115%范围内。 2.4 重复性 检测浓度为125pg/mL的溶液，重复检测10次，其变异系数（CV）值应不大于10％。 2.5 线性 2.5.1在浓度[31.25,500]pg/mL范围内，其线性相关系数的绝对值r≥0.990; 2.5.2在浓度[31.25 ,125）pg/mL范围内，其线性绝对偏差的绝对值不大于12.5 pg/mL；在浓度[125 ,500]pg/mL范围内，其线性相对偏差的绝对值不大于10%。 2.6 空白限 试剂盒的空白限不大于16 pg/mL。 2.7 溯源性 根据GB/T21415的有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定等内容，溯源至企业工作校准品。 2.8 质控品赋值有效性 检测质控品，检测结果应在质控范围内。 2.9 批内瓶间差 同一批号的10个待检试剂盒对浓度为250pg/mL的标准溶液进行测试，重复10次，瓶间差的变异系数不得大于10%。 2.10 批间差 3个批号的试剂盒检测结果的变异系数应不大于15％。 2.11 稳定性 2.11.1 2℃～8℃保存，有效期12个月，取过有效期3个月以内的试剂盒进行测定，应符合2.3、2.3、2.5、2.6、2.7、2.8的要求； 2.11.2校准品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.3的要求； 2.11.3质控品溶解后，-20℃保存10天后进行测定，应符合2.8的要求； 2.11.4反应主剂溶解后，立即冻存至-20℃保存7天后进行测定，应符合2.3、2.5的要求。
真菌βD葡聚糖检测与真菌感染诊断
真菌β-D-葡聚糖检测与真菌感染诊断 一、概述 经研究表明，(1-3)-β-D-葡聚糖是一种广泛存在于真菌细胞壁的抗原成分, 占其干燥重量的80%～90%，其它微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液均不含有。深部真菌感染患者中血浆(1-3)-β-D-葡聚糖含量增高,两者存在相关性。? 当真菌进入人体血液或深部组织后，经吞噬细胞的吞噬、消化代谢后，（1-3）-β-D葡聚糖可从胞壁中释放出来，从而使血液或其它体液中（1-3）-β-D葡聚糖含量增高。当真菌在体内含量减少时，机体免疫可迅速对其清除。而在浅部真菌感染中，（1-3）-β-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，它在血液及无菌体液中的存在可以很大程度上视为IFI（深部真菌感染）的标志。 二、深部真菌感染的诊治 近年来，由于造血干细胞移植、实体器官移植的广泛开展、高强度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性真菌感染(invasive fungal infections，IFI)的患病率明显上升。IFI也日益成为导致骨髓及器官移植受者、接受化疗的恶性血液病和恶性肿瘤患者、AIDS以及其他危重病患者的严重并发症及重要死亡原因之一。由于缺少有效的早期诊断手段，深部真菌感染病死率居高不下。对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断，及早用药治疗。 常规病原学诊断“微生物培养”可为临床提供直接的诊断依据，但其培养方法耗时长（4-7天），不适宜用作早期诊断。并且，随着光谱抗生素、抗菌药物的大量应用，使得培养的阳性率极低。常用的免疫学方法，也由于抗原抗体反应的特异性差，往往对某一疑似真菌感染患者要作多种真菌抗原或抗体检测，既费时又不经济，而且当所用药盒的抗原谱或抗体谱不全时也极易造成漏诊。对一些以往接触过相应真菌抗原的个体，作抗体检测时还会出现阳性反应，因而对抗体的检测往往要求作动态观察才能作出诊断，期末属性较差。 有研究报道血清葡聚糖在念珠菌血症时明显升高，将其用于念珠菌血症的早期诊断明显优于传统的培养法和血清学诊断试验。虽然检测（1-3）-β-D葡聚糖只能提示有无真菌侵袭性感染，不能确定为何种真菌，但也可能转化为一种优势。因近年来，一些罕见的条件致病真菌也可引起深部感染，这就要求一种能迅速确定有无深部真菌感染的方法。因系统抗真菌药物种类较少，抗菌谱较广，且不因真菌种类而异，当检测到标本中的（1-3）-β-D葡聚糖含量较高时，可给予以系统治疗，不必耗时等待鉴定出种属，否则会贻误最佳治疗时机。 因此，血清（1-3）-β-D葡聚糖含量检测不失为一种实用的真菌感染早期诊断方法。并且，相关研究表明，（1-3）-β-D葡聚糖水平在确诊IFI患者的血清中出现持续升高，而随着药物的使用，对药物敏感者可很快出现（1-3）-β-D葡聚糖水平下降及转阴，而药物治疗无效人群（1-3）-β-D葡聚糖值无明显改变。因此，（1-3）-β-D葡聚糖可以用来判断药物的疗效，以协助临床医师及时进行药物种类及剂量的调整。 通过对人体体液进行（1-3）-β-D葡聚糖含量检测，可帮助判断人体是否已被真菌感染。对高危患者的样本进行连续分析，可为临床检测提供入侵真菌的量值或阴性预示值，为临床诊断和
史上最全的酵母葡聚糖科普(节选2)
史上最全的酵母葡聚糖科普(节选2)
史上最全的酵母葡聚糖（节选2） 原创作者：梁明丽 ●健康的身体是由哪些东西组成？ 完整的健康下，每个人都有良好的器官能正常运作，免疫上能抵御内在与外在的疾病。也就是說各个器官和腺体的健康依賴我們监测并抵御有害物质的能力。 而免疫能力受到遗传基因（DNA)的控制，1940年代中期研究发现健康人随着年龄的增长，抵抗力也逐渐下降。 饮食影响器官、腺体的健康，并且干扰每个人的基因，然而只有好的营养并不能使各个器官、腺体发挥先天的潜力，唯有摄取最好的食物，配合适当的酵母葡聚糖加以补充，人们才能舒解压力，增加抵抗疾病的能力，因此各器官、腺体要摄取特殊营养来提高免疫时，葡聚糖是绝对必要的。 ●我该使用哪些葡聚糖來帮助提高免疫？ 葡聚糖分为α-葡聚糖跟β-葡聚糖，以β-葡聚糖最具生理活性。而β-葡聚糖又分β-1,3葡聚糖，β-1,4葡聚糖，β-1,6葡聚糖。研究表明，葡聚糖的β-1，3/1，6葡聚糖结构，可以有效提升嗜中性粒细胞活性，加速化学趋化性，从而提高人体固有免疫力。在酵母β葡聚糖进行的九项人体临床中，选取的受试对象有中度生活压力人群（即亚健康状态）、毕业季学生、运动员、消防员、花粉过敏者等。临床研究证实酵母β葡聚糖可以提高人体先天免疫活性，对于上呼吸道感染、容易感冒、疲劳、精神状态不佳等，都有很好的缓解作用。
●哪里可以得到葡聚糖？ β-葡聚糖广泛存在于酵母、蘑菇、燕麦和大麦等食物里，其中β- 1,3 / 1,6存在于酵母和蘑菇葡聚糖，而β- 1,3 / 1,4存在于燕麦和大麦葡聚糖。 ●葡聚糖在体内如何发挥功效？ 当酵母β-葡聚糖进入人体后，其螺旋结构决定其不会在胃肠道内被水解成葡萄糖等单糖，而是与特异性受体相结合，通过胞吞作用（或胞饮作用），最终穿过肠上皮而进入淋巴系统，并从淋巴系统进入血液系统而发挥作用。酵母
葡聚糖的研究进展
?-葡聚糖的研究进展 燕麦β－葡聚糖是一种存在于大燕麦皮中的天然非淀粉类水溶性植物糖，其基本结构是由D葡萄糖以β14，β1-3糖苷键连接而成的线性多糖，这两种糖苷键的比例大致为7：3。 燕麦β－葡聚糖是一种水溶性膳食纤维，因其具有的黏性阻碍淀粉、蛋白质等物质的消化和吸收，并可增殖消化道有益菌，所以可对人体具有一些极为有利的生理功能：具有显著的降血脂、降血糖及提高免疫能力，维持肠道微生态环境等。作为化妆品的有效成分，可以提高皮肤抗过敏能力，激活免疫功能，延缓皮肤衰老。燕麦水溶性膳食纤维和燕麦葡聚糖，可有效降低餐后血糖浓度和胰岛素水平，降低胆固醇和预防心血管疾病.燕麦纤维食品易被人体吸收，并且因含热量很低，既有利于减肥，又适合心脏病,高血压和糖尿病患者食疗的需要。 降低胆固醇 早在多年，科学家就发现β一葡聚糖能够减少肠胃吸收脂肪酸的速率,降低人体胆固醇的合成.随着β一葡聚糖研究的日趋成熟，学者们先后在动物及人体实验水平上进行了大量的实验,证实了β一葡聚糖在降低胆固醇和低密度脂蛋白方面具有特异的生理功能.科学家发现β一葡聚糖对胆固醇的影响主要在于能显著降低血浆中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇,而对高密度脂蛋白没有明显影响。燕麦葡聚糖对高血脂人群有明显的降低胆固醇的作用。 降血糖 每天食用葡聚糖燕麦食品后，患者血糖水平可降低约50%，使用燕麦食品有显著降低血糖作用燕麦汗葡聚糖可通过降低血脂含量，改善血液流动性能,加快糖类成分在吸收利用过程中的转运速度和效率，同时对糖尿病所并发的肝肾组织病变有良好的修复作用，并且可有效降低肝糖原的分解，从而导致血糖降低。 抗癌作用 燕麦葡聚糖在肠道发酵产生的短链脂肪酸,能够降低葡萄糖苷酶,葡萄糖醛酸酶和脉酶等微生物代谢酶的活性；粘性的β一葡聚糖,还能增加肠道内次级胆酸的排出,这些酶及次级胆酸是结肠癌的诱发因子,因而燕麦葡聚糖具有抗癌作用. 改善肠道
β-葡聚糖、甘露寡糖的测定方法
A.1原理 根据β-葡聚糖和甘露寡糖在流动相和液相色谱柱的固定相之间具有不同的分配系数，将样品注入液相色谱柱，用H2O做流动相，糖类分子流出后，经示差检测器检测，用外标法定量。 A.2试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂；蒸馏水或去离子水或符合GB/T6682中规定的一级水或相当纯度的水。试验中所用制品按GB/T 603的规定制备。 A.2.1盐酸：37%。 A.2.2乙腈：色谱纯。 A.2.3氢氧化钠：40%。 A.2.4葡萄糖和甘露糖混合标液（1000mg/L）：分别称取葡萄糖和甘露糖各0.100g，用纯水定容100mL后用0.45μm微孔滤膜过滤，备用。 A.3仪器 A.3.1水浴锅。 A.3.2漩涡混合器。 A.3.3电炉。 A.3.4手提式压力蒸汽灭菌锅。 A.3.5高压液相色谱仪；带示差检测器。 A.4分析步骤 A.4.1样品处理 精确称取1.000g（准确至0.0002g）样品放入一个20mL的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中，加入7.5mL盐酸（37%），小心的将小瓶盖近后用漩涡混合器混合，得到均一的悬浮液。将小瓶放入30℃水浴中处理45min，每15min用漩涡混合器震荡混合一次。然后将悬浮物定量的转移到200mL杜氏瓶中（同时用约70-80mL的水洗涤后倒入瓶中），将瓶子放入高压灭菌锅121℃处理60min。完成后马上冷却，将溶液调pH到6-7，然后定容至200mL。使用0.45微米孔径的醋酸纤维素膜过滤备用。 A.4.2测定 A．4.2.1 液相色谱参考条件 A．4.2.1．1 色谱柱：Hyper REZ XP Carbohydrate Ca++，长300mm，内径7.7mm，粒径8μm。 A．4.2.1．2 柱温：70℃。 A．4.2.1．3 流动相：H2O，用前过0.22μm滤膜。 A．4.2.1．4 流速：0.6 ml/min。 A．4.2.1．5 进样体积:40μl。 A.4.3标准曲线的绘制
葡聚糖和壳聚糖的区别
壳聚糖(chitosan)又称脱乙酰甲壳素，是由自然界广泛存在的几丁质(chitin)经过脱乙酰作用得到的，化学名称为聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖。自1859年，法国人Rouget首先得到壳聚糖后，这种天然高分子的生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等优良性能被各行各业广泛关注，在医药、食品、化工、化妆品、水处理、金属提取及回收、生化和生物医学工程等诸多领域的应用研究取得了重大进展。针对患者，壳聚糖降血脂、降血糖的作用已有研究报告。同时，壳聚糖被作为增稠剂、被膜剂列入国家食品添加剂使用标准GB-2760. 应用 1、化妆品专用壳聚糖 化妆品专用壳聚糖具有良好的吸湿、保湿、调理、抑菌等功能；适用于润肤霜、淋浴露、洗面奶、摩丝、高档膏霜、乳液、胶体化妆品等；有效的弥补了一般壳聚糖的缺陷。2、絮凝剂专用壳聚糖 壳聚糖及其衍生物都是具有良好的絮凝、澄清作用。作为饮料的澄清剂，可使悬浮物迅速絮凝，自然沉淀，提高原液的得率；在中药提取液中，大分子的蛋白质、鞣酸和果胶，可以用壳聚糖溶液方便地除去，精制出纯度较高的中药有效成份；利用壳聚糖的吸附性，在水质净化方面有良好的效果。 3、农业、饲料、饵料专用壳聚糖 壳聚糖是天然的植物营养促长剂--叶面肥的原料，由壳聚糖复配而成的叶面肥，既能给植物杀虫，抗病，起到肥料的作用，又能分解土壤中动植物残体及微量金属元素，从而转化为植物的营养素，增强植物免疫力，促进植物的健康；虾壳、蟹壳中含有丰富的蛋白质、微量元素,动物食入吸收后，有良好的营养价值。 4、UTA(吸附剂)专用壳聚糖 UTA专用壳聚糖是经过特殊工艺加工的壳聚糖系列产品；它能有效地吸附蛋白，比一般壳聚糖的吸附要高40%。 5、烟草(烟胶)专用壳聚糖 该产品可与烟丝均匀混合，且能粘附于烟丝表面，可增强抗张强度、耐水性、耐破度，加工时不易破碎，适用于现代高速卷烟机；该烟草添加剂可使烟支的燃烧性能显著增强，具有降低烟草焦油和烟碱含量的作用，使烟支杂气减轻，烟气中有害物质减少，吸味得到改善，香气显露；也能够有效地抑制烟叶霉变，延长烟草的保存时间。 5、保健食品添加剂 壳聚糖难被人体胃肠消化吸收，当人把它们摄入体内后，它们可与相当于自身质量许多倍的甘油三酯、脂肪酸、胆汁酸和胆固醇等脂类化合物生成络合物，该络合物不被胃酸水解，不被消化系统吸收，从而阻碍人体吸收这类物质，使之穿肠而过排出体外。因此，壳聚糖类可以降脂，减少食品热量，可用作保健食品添加剂。Agullo等研究表明，壳二、三聚糖不仅具有非常爽口的甜味和调解血压、消除脂肪肝、降低胆固醇和增强免疫力的功能，而且还具有提高食品的保水性及水分调节作用，可作为糖尿病和肥胖病的保健食品添加剂。
葡聚糖在动物营养中的研究进展
葡聚糖在动物营养中的研究进展 2008-10-29 08:46:08.0 中国饲料在线独家报道 一、葡聚糖的结构特点 葡聚糖为右旋吡喃型葡萄糖聚合体，其相邻葡萄糖残基的碳1、2、3、4、6的半缩醛氧之间以葡糖苷键连接构成骨架，有α和β位两种结构形式。β-1，3-葡聚糖是一类广泛存在于微生物、植物乃至动物体内的大分子多糖，主链结构为B-1，3-糖苷键连接，通常还含有不同比例和大小的β-1，2/β-1，4/β-1，6-连接的支链，主要以细胞结构成分（如细胞壁）的形式存在，对异体宿主防御系统具有较强的诱导和活化作用，是一类活性强、毒副作用低的良好的生物应答效应物。 β-1，3-葡聚糖广泛存在于微生物和植物，尤其是真菌中，其有3个构象：无规则卷曲、单螺旋和性质稳定的三螺旋结构。其中三螺旋结构在自然界中最常见，但这种葡聚糖不溶于水。葡聚糖有两种存在形式：胶体态和水溶解态。脊椎动物由于缺乏特异性水解酶，葡聚糖在其体内降解方式主要为缓慢氧化，有时几个月后仍然以原型存在于体内；而其侧链比主链氧化快。葡聚糖是D-葡萄糖的聚合物，D-葡萄糖单元可通过1-2、1-3、1-4、1-6等糖苷键连接。酵母是一种重要的食品和工业微生物，在其细胞壁中存在β-1，6 分枝的碱不溶性β-D-1，3-葡聚糖，β-1，6分枝的碱溶性β-D-1，3-葡聚糖，中间插有β-1，3-键的无定性的酸溶性β- D- 1，6-葡聚糖，连接有蛋白质的无定性的酸溶性甘露聚糖等，其中β- D-1，3-葡聚糖占绝大多数。 二、葡聚糖的生物活性 β-1，3-葡聚糖的结构特异性在单糖组成、构型、糖苷键等初级结构水平均有所表现，它的受体可以区分多糖的上述结构，对同型甘露聚糖（mannan）和β-1，6-葡聚糖结构的石脐素(pustulan)等均不显识别活性，对由多种多糖组成的酵母多糖(zymosan)的识别活性也只与其中所含的β-1，3-葡聚糖成分有关。单糖的构型（α/β）是决定糖苷键定向及空间构象的关键因素之一，由β-型葡萄糖组成的β-1，3-葡聚糖有利于分子卷曲成螺旋结构，而由α型葡萄糖组成的α-1，3-葡萄糖形成的是带状结构，前者具有较强的抗癌及免疫调节活性。 通常β-1，3-葡聚糖的生物活性主要指抗肿瘤及免疫调节等药理活性，这些活性与分子大小有着明显应关系。大分子多糖具有较强的生物活性，但水溶性较差，能够基本保留其大分子活性的可溶性多糖，分子量多介于10-50KD，低于此限生物活性显著下降。活性最强的多糖是具有分支的β-1，3-葡聚糖，所有的活性多糖具有一个共同的结构：主链由β-(1-3)连接的葡萄糖基组成，沿主链随机分布着由β-(1-6)连接的葡萄糖基，呈梳状结构，生物活性的大小随多糖的精细结构和构象不同而变化。这些多糖的生物活性是因为其活化了宿主的免疫系统的结果，而不是直接的细胞毒性作用。活性最强的多糖来自于真菌的菌丝、子实体和发酵液。表2是一些具有生物活性的β-(1，3)-D-葡聚糖和它们的分支度。 表2：一些具有生物活性的β-1，3-葡聚糖及其分支度 对人和其它动物来说，β-1，3-葡聚糖的生物活性可能是生物进化和自然选择的结果，因为它代表的是一种典型的异己成分或病原菌成分，它的出现给机体输入了“外敌”入侵的信息，从而唤起机体对“异物”的广谱免疫排斥反应并形成记忆。β-1，3-葡聚糖与其受体细胞的识别反应是引发一系列抗癌生物应答反
葡聚糖标准编制说明
《混合型饲料添加剂β-1，3-D-葡聚糖》编制说明 一、产品简介 β-1,3-D-葡聚糖为原料，啤酒酵母粉为载体经混合制成的饲用混合型饲料添加剂β-1,3-D-葡聚糖。 二、任务来源、编制原则、标准起草过程 本公司生产的混合型饲料添加剂β-1,3-D-葡聚糖，目前尚无国家标准和行业标准，为了便于公司组织生产和交货验收，特制订本标准。本标准规定了混合型饲料添加剂β-1,3-D-葡聚糖的要求、试验方法、检验规则、标志、标签、包装、运输、贮存、保质期。 三、与现行法律、法规、强制性标准、推荐性标准的关系和贯彻情况。 GB/T 191-2008 包装储存图示标志 GB/T 5917.1-2008 饲料粉碎粒度测定两层筛筛分法 GB/T 6435-2014 饲料中水分的测定 GB/T 6438-2007 饲料中粗灰分的测定 GB 10648 饲料标签 GB/T 10649-2008 微量元素预混合饲料混合均匀度的测定 GB 13078 饲料卫生标准 GB/T 13079-1999 饲料中总砷的测定 GB/T 13080-1991 饲料中铅的测定方法 GB/T 13091-1991 饲料中沙门氏菌的检验方法 GB/T 18823-2010 饲料检测结果判定允许误差 JJF 1070-2005 定量包装商品净含量计量检验规则 国家质量监督检验检疫总局令第75号《定量包装商品计量监督管理办法》 农业部公告第2045号《饲料添加剂品种目录（2013）》 农业部公告第1773号《饲料原料目录》 四、确定主要技术指标 技术指标 项目指标 β-1,3-D-葡聚糖/% ≥20.0 水分/% ≤10 灰分/% ≤15 砷（以总砷计）/(mg/kg) ≤2.0 铅（以Pb计）/(mg/kg) ≤5.0 沙门氏菌不得检出 四、试验方法和和检验规则说明 高效液相色谱检测方法，需要带示差折光检测器。 六、主要参考资料 除引用标准外，无在国家正式刊物上发表的文献资料。
β-葡聚糖测定方法
β-葡聚糖酶活力测定方法(NY/T911-2004) ? 1.原理 β-葡聚糖酶能将木聚糖降解成还原性糖。还原性糖在沸水浴条件下可以与3,5-二硝基水杨酸（DNS)试剂反应显色反应。反应液颜色的深度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中β-葡聚糖酶的活力成正比。因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算反应液中β-葡聚糖酶的活力。 ? 2. 操作 ? 2.1.标准葡萄糖曲线的制作 2.1.1 吸取PH5.5的0.1M乙酸-乙酸钠+缓冲溶液4.0mL,加入DNS试剂5.0mL， 沸水浴加热5min。用自来水冷却至室温，用水定容至25.0mL,制成标准空白样。 2.1.2 分别吸取葡萄糖溶液1.00mL、2.00mL、 3.00mL、 4.00mL、 5.00mL、 6.00mL 和7.00mL,分别用PH5.5的0.1M醋酸缓冲溶液定容至100mL,配制成浓度为 0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.30mg/mL、0.40mg/mL、0.50mg、0.60mg/mL和0.70mg/mL 葡萄糖标准溶液。 2.1.3 分别取上述浓度系列的葡萄糖标准溶液各2.00mL（做两个平行），分别 加入到刻度试管中，再分别加入2.0mL缓冲液94.4)和5.0mLDNS试剂。电磁振荡3s-5s,沸水浴加热5min。然后用自来水冷却到室温，在用水定溶液至25mL。 以标准空白为对照调零，在540min处测定吸光度A值。 以葡萄糖糖浓度为Y轴、吸光度A值为X轴，绘制标准曲线。每次新配制DNS试剂均需要重新绘制标准曲线 ? 3. 酶样测定 吸取10.0mLβ-葡聚糖溶液,37℃平衡20min。 吸取10.0经过适当稀释的酶液，37℃平衡10min。 ?吸取2.00mL经过适当稀释的酶液（已经过37℃平衡），加入到刻度试管中，再加入5mLDNS试剂，电磁振荡3s-5s。然后加入8.0g/lβ-葡聚糖溶液2.0ml，37℃保温30min,沸水浴加热5min。用自来水冷却至室温，加水定容至25mL，电磁振荡3s-5s。以标准空白样(2.1.1)为空白对照，在540min处测定吸光度A 。 B
史上最全的酵母葡聚糖科普
史上最全的酵母葡聚糖（节选2） 原创作者：梁明丽 ?健康的身体是由哪些东西组成？ 完整的健康下，每个人都有良好的器官能正常运作，免疫上能抵御内在与外在的疾病。也就是說各个器官和腺体的健康依賴我們监测并抵御有害物质的能力。 而免疫能力受到遗传基因（DNA 的控制，1940年代中期研究发现健康人随着年龄的增长，抵抗力也逐渐下降。 饮食影响器官、腺体的健康，并且干扰每个人的基因，然而只有好的营养并不能使各个器官、腺体发挥先天的潜力，唯有摄取最好的食物，配合适当的酵母葡聚糖加以补充，人们才能舒解压力，增加抵抗疾病的能力，因此各器官、腺体要摄取特殊营养来提咼免疫时，葡聚糖是绝对必要的。 ?我该使用哪些葡聚糖來帮助提高免疫？ 葡聚糖分为a -葡聚糖跟B -葡聚糖，以B -葡聚糖最具生理活性。而B -葡聚糖又分B -1,3葡聚糖，B -1,4葡聚糖，B -1,6葡聚糖。研究表明，葡聚糖的B -1，3/1，6葡聚糖结构，可以有效提升嗜中性粒细胞活性，加速化学趋化性，从而提高人体固有免疫力。在酵母B葡聚糖进行的九项人体临床中，选取的受试对象有中度生活压力人群（即亚健康状态）、毕业季学生、运动员、消防员、花粉过敏者等。临床研究证实酵母B葡聚糖可以提高人体先天免疫活性，对于上呼吸道感染、容易感冒、疲劳、精神状态不佳等，都有很好的缓解作用。
?哪里可以得到葡聚糖？ B -葡聚糖广泛存在于酵母、蘑菇、燕麦和大麦等食物里，其中B - 1,3 / 1,6 存在于酵母和蘑菇葡聚糖，而B - 1,3 / 1,4 存在于燕麦和大麦葡聚糖。 ?葡聚糖在体内如何发挥功效? 酵母 A 葡聚糖作用原理 当酵母B -葡聚糖进入人体后，其螺旋结构决定其不会在胃肠道内被水解成 葡萄糖等单糖，而是与特异性受体相结合，通过胞吞作用（或胞饮作用），最终 穿过肠上皮而 进入淋巴系统，并从淋巴系统进入血液系统而发挥作用。酵母 B - 不肠灌淋巴组奴 腸頑上廈址胞 括控巨呃祖胸 活化： Mk 细 IS 耳他巨噬细 胞 TifflE B4R
β-葡聚糖测定方法
6.2 交联β-葡聚糖含量测定 AACC 32-23 6.2.1实验目的 在大麦、麦芽、麦芽汁和啤酒产品质量控制中经常需要测定其中的β-葡聚糖含量，Megazyme方法很好的解决了测定中的系列问题，本方法能够在一天内测定50-100个样品。本方法现在也适用于燕麦产品及燕麦纤维产品β-葡聚糖含量测定。 6.2.2实验原理 样品水化后加入真菌多糖酶在pH6.5缓冲液中培养，提取液离心（或过滤）后加入β-葡萄糖苷酶，在葡糖糖氧化－过氧化酶缓冲液保护下产生葡萄糖。 图6.1 葡聚糖测定原理示意图 Megazyme测试包：（可以测定100个样品） ⑴全套测定方法；⑵真菌多糖酶；⑶β-葡萄糖苷酶；⑷葡糖糖标准液；⑸大麦和燕麦纤维标准样品。 6.2.3实验试剂： ⑴真菌淀粉酶（bottle 1）〔（1-3）（1-4）β-D-葡萄糖4-葡聚糖水解酶〕：（活力>1000U/mL） 制备：1.0mL真菌淀粉酶用20mM NaH2PO4缓冲液（pH6.5）稀释至20.0mL。将溶液分装成5.0mL在冰箱中冷冻保存。最终真菌淀粉酶浓度50U/mL。 ⑵β-葡萄糖苷酶（bottle 2）：（活力>40U/mL） 制备：将 1.0mLβ-葡萄糖苷酶用50.0mM醋酸钠缓冲液（pH4.0）稀释至20.0mL。将溶液分装成5.0mL在冰箱中冷冻保存。最终β-葡萄糖苷酶浓度2U/mL。
⑶葡糖糖标准液：100μg?0.1mL，用0.2%叠氮化钠溶液溶解。 ⑷大麦标准样品：含量见标签。 ⑸燕麦纤维标准样品：含量见标签。 ⑹NaH2PO4缓冲液制备（20mM，pH6.5）：3.12g NaH2PO4－2H2O溶解于900ml蒸馏水中，用100mM氢氧化钠溶液（4g/L）将pH值调至6.5（大约需50mL），加0.2g叠氮化钠，将溶液定容至1L。4℃保存。 ⑺醋酸钠缓冲液（50mM，pH4.0）：饱和醋酸（2.9mL）加入900mL蒸馏水，用1M氢氧化钠调节pH值至4.0，加0.2g叠氮化钠，将溶液定容至1L，4℃保存。 ⑻葡萄糖氧化－过氧化酶缓冲液：建议使用Megazyme测试包里的高纯度葡萄糖氧化溶液和葡糖糖过氧化酶。将测试包的葡萄糖工作液（bottle 3）（50mL）稀释至1L。把测试包中的葡萄糖测定液（bottle 4）用1L葡萄糖工作液溶解（简称GOPOD）。为了保证GOPOD溶液的稳定性，应该在低温条件下在棕色瓶中避光保持。测定过程中从冰箱中取出的凉的GOPOD溶液可以直接加入测定管。 葡萄糖工作液包括：CaHPO4－2H2O（136.0g），NaOH （42.0g），酸（30.0g），叠氮化钠（4.0g）。 6.2.4仪器需求： ⑴聚丙烯具塞试管（35mL）； ⑵移液器：量程分别为100μL，200μL，5.0mL（用于Na2HPO4缓冲液和葡萄糖氧化－过氧化酶缓冲液），25mL（用蒸馏水）。 ⑶顶载天平：1/1000g。 ⑷漩涡混合器； ⑸分光光度计：510nm。 ⑹水浴锅：40℃和100℃水浴锅各一个。 ⑺秒表：一只。 ⑻离心机：离心力100g。 ⑼试验粉碎机：细度0.5mm。 6.2.5测定步骤： ⑴将燕麦用试验粉碎机粉碎成细度0.5mm的颗粒。 ⑵仔细称量燕麦粉样品（0.5g左右），放入35mL聚丙烯具塞试管。样品需要已知水分含量，以便最后转为干基。 ⑶向试管中加入1.0mL 50%（v/v）的乙醇溶液，使样品充分润湿。 ⑷加入5.0mL NaH2PO4缓冲液（20mM，pH6.5），在漩涡混合器上充分混合。
粗多糖的测定方法
粗多糖的测定方法(1) 1. 原理 分子量大于10，000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后，加入碱性铜试剂，选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖，沉淀部分与苯酚-H2SO4反应，生成有色物质，在485nm条件下，有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。 2. 适用范围 参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10，000道尔顿葡聚糖的样品。 3.仪器 （1）分光光度计 （2）离心机 （3）旋转混匀器 （4）恒温水浴锅 4.试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1）80%乙醇：800ml无水乙醇加水200ml。 （2）2.5 mol/L NaOH溶液：100 g NaOH加蒸馏水稀释至1 L，加入固体无水硫酸钠至饱和。（3）铜贮存液：称取3.0 g CuSO4 ·5H2O，30.0 g柠檬酸钠加水溶解至1 L。溶液可贮存2周。 （4）铜应用溶液：取铜贮存液50 ml，加水50 ml混匀后加入无水硫酸钠12.5 g，临用新配。 （5）洗涤液：取水50 ml，加入10 ml铜应用溶液，10 ml 2.5 mol/L NaOH溶液，混匀。（6）1.8 mol/L H2SO4：取100ml浓硫酸用水稀释至1L。 （7）20 g/L苯酚溶液：称取2.0g苯酚，加水溶解并稀释至100ml，混匀备用。 （8）葡聚糖标准液：称取500mg葡聚糖（分子量500,000D）于称量皿中，105℃干燥4h 至恒重，置于装有干燥硅胶的干燥器中冷却。准确称取100mg干燥后的葡聚糖，用水定容至100ml，葡聚糖标准浓度为1.0 mg/ml。 （9）葡聚糖标准应用液：吸取葡聚糖标准液10ml，用水稀释10倍，葡聚糖终浓度为0.1mg/ml。 粗多糖的测定方法(2) 5. 操作方法 5.1 样品处理 （1）样品提取：称取样品1～5g，加水100ml，沸水浴加热2h，冷却至室温，定容至200ml （V1），混匀后过滤，弃初滤液，收集余下滤液。 （2）沉淀高分子物质：准确吸取上述滤液100ml （V2），置于烧杯中，加热浓缩至10ml，冷却后，加入无水乙醇40ml，将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用80%乙醇洗涤3次，残渣供沉淀葡聚糖之用。 （3）沉淀葡聚糖：上述残渣用水溶解，并定容至50ml （V3），混匀后过滤，弃初始滤液后，取滤液2.0ml （V4），加入2.5mol/L NaOH 2.0ml，Cu应用溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2mim，冷却后以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用洗涤液洗涤3次，残渣供测定葡聚糖之用。 （4）测定葡聚糖：上述残渣用2.0mL 1.8mol/L H2SO4溶解，用水定容至100mL（V5）。准确吸取2.0ml（V6），置于25ml比色管中，加入1.0ml苯酚溶液，10ml浓硫酸，沸水浴煮沸2分钟，冷却比色。从标准曲线上查得相应含量，计算粗多糖含量。 5.2 标准曲线制备：
葡聚糖在饲料中影响
!$葡聚糖的抗营养作用及!$葡聚糖酶 在饲料中的应用 江西农业大学动物科技学院郭小权胡国良刘妹 摘要：本文对饲料中!$葡聚糖的化学结构特性及其在饲料中的含量和抗营养作用，!$葡聚糖酶的作用机理及其在猪与禽饲料中的应用效果和!$葡聚糖酶的质量衡量等问题进行了论述。关键词：!$葡聚糖抗营养作用!$葡聚糖酶作用机理 谷物%小麦、大麦、燕麦等麦类作物&及其副产品中普遍存在的一种抗营养因子—— —!$葡聚糖，因其难于被单胃动物%猪和禽&利用及具有高度的粘稠性，从而导致谷物及其副产品中的营养物质消化率低下，饲养效果差，进而限制了谷物及其副产品在饲料中的应用。为了缓解玉米供应日趋紧张，消除!$葡聚糖的抗营养作用，开发新的能量饲料资源—— —谷物及其副产品，提高麦类饲粮的营养价值及其转化率，应用!$葡聚糖酶作为一种新型饲料添加剂已日益为人们所重视。 !!$葡聚糖的化学结构特性及其在饲料中的含量 !$葡聚糖属于植物细胞壁中的结构性非淀粉多糖，是自然合成的多聚糖含量最多的糖类，由葡萄糖单元通过!$%!’’&，%!’(&糖苷键连接而成的)型葡萄糖聚合物%*+,-.//0,等，!11#&。!$葡聚糖一般分为水溶性%占大多数&和非水溶性两种。这主要受其结构中!$%!’’&糖苷键的含量和聚合度的影响。水溶性!$葡聚糖中%!’’&糖苷键与%!’(&糖苷键含量之比为!2 "345!2"36，而非水溶性!$葡聚糖中相应糖苷键含量之比为!2(3"。水溶性!$葡聚糖中约1#7由!$%!’’&糖苷键随机连接起来的纤维三糖和纤维四糖构成，剩余的!#7由!$%!’’&糖苷键连接的!#个或!#个以上!$%!’(&糖苷键组成的部分构成。在(#8或648条件下提取的水溶性!$葡聚糖分子量和粘度都较高。但二者在精细结构上却存在着差异，648下的提取物分子中由纤维三糖或纤维四糖连接构成的部分较少，分子量也比(#8条件下的提取物低些%900:;<=:等，!1>>&。 在不同的谷类饲料中!$葡聚糖的含量%见表$!&差异较大，这可能受禾谷类的来源及其生长地的气候条件等情况的影响。 "!$葡聚糖的抗营养作用 !$葡聚糖是谷物%特别是大麦&的主要非淀粉多糖%?@A&，它的粘稠性是谷物中的主要抗营养特性%*+:B0=:C!114&。!$葡聚糖的抗营养作用主要受其呈现的物理化学特性影响："粘度，在低浓度时，!$葡聚糖与水分子相互作用增加了溶液的粘度，随着其浓度的增加，则!$葡聚糖分子本身缠成网状结构%D β-葡聚糖酶活性测定 β-葡聚糖是由葡萄糖单体通过β-1，3和β-1，4糖苷键连接而成的D型葡萄糖聚合物，它主要存在于单子叶禾本科谷实中的糊粉层和胚乳细胞壁中。β-葡聚糖酶属于水解酶类，能有效地降解β-葡聚糖分子中的β-1，3和β-1，4糖苷键，使之降解为小分子。由于在饲料中，大麦的β-葡聚糖含量较高，难以被单胃动物消化利用，而且对饲料中各种养分的消化利用具有明显的干扰和抑制作用，成为麦类饲料中的抗营养因子。在饲料中添加β-葡聚糖酶，能有效地消除β-葡聚糖的抗营养作用，促进饲料中各种养分的消化和吸收利用，增进畜禽健康。在啤酒生产中，添加β-葡聚糖酶可以加快麦汁和啤酒的过滤速度、提高麦汁得率、增加可发酵糖的含量。此外，β-葡聚糖酶在造纸工业、日化工业等其它许多方面也有着广泛的应用，对β-葡聚糖酶的研究将越来越受到人们的重视。 β-葡聚糖酶活力的测定方法主要有3种：还原糖测定法（分光光度法）、粘度测定法和底物染色法。其中还原糖测定法简便实用，比较准确，而且结果重复性好，是广泛使用的一种酶活测定方法。其原理是：β-葡聚糖酶能将β-葡聚糖降解成寡糖和单糖，其具有的还原基团在沸水浴条件下可与DNS试剂发生显色反应，显色的深浅与还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中β-葡聚糖酶的活力成正比，因此，可以利用比色测定反应液的吸光度值来计算还原糖的生成量，从而得出β-葡聚糖酶的活力。但在该测定方法的具体操作中存在一些影响酶活力测定结果的因素，本文即对还原糖法测定β-葡聚糖酶活力的几个重要影响因素进行研究，并得出最佳测定条件。 1 材料与方法 1.1 菌株与培养基 1.1.1 发酵产酶菌株 黑曲霉（Aspergillus niger）A47菌株，由本实验室保藏。 1.1.2 固态发酵培养基 麸皮70 g、米糠27 g、NH4NO3 2.95 g、微量元素液0.05 ml、蒸馏水100 ml，pH值5.0，121 ℃灭菌20 min。 微量元素液的组成为：2 mol/l HCl溶液 5 ml、FeSO4 2.5 g、MnSO4·H2O 0.98 g、ZnCl2 0.83 g、CoCl2 1.0 g、蒸馏水100 ml。 β-葡聚糖与粗多糖： 粗多糖（crude polysacchairdes）是指以β-D-葡聚糖或α-D-葡聚糖或其他碳糖为主链的一系列高分子化合物。 粗多糖不止是包括β-葡聚糖，还有多种其他糖。包括活性多糖和非活性多糖，而只有有特殊结构，有侧链，有特定连结方式，并且还要有一定的分子量的多糖才具有活性，如：D-fraction免疫活性多糖，是β1-3、1-6连结，有侧链，并且平均分子量是100万。而α-1,4结构的淀粉，还有β-1,4结构的纤维素，无侧链，没有达一定的分子量，所以不具有免疫活性。 β-葡聚糖（也称为β-1,3/1,6-D-葡聚糖）是一种不能消化的多糖（长链糖类），通常存在于生物体的细胞壁上。和任何葡聚糖（葡萄糖的聚合物）一样，β-1,3/1,6-D-葡聚糖是由葡萄糖链接组合而成，但它和普通食糖不同，它具有复杂得多的结构，主要由若干重复的结构单元形成。 我们所有人一直被提醒不要过量摄入食糖，但β-葡聚糖并不包含在此范围内。事实上，为了使我们身体正常发挥功能，我们需要摄入少量的β-葡聚糖，因为在品种有限的和过分加工的食物中，已不再能够获得足够数量的β-葡聚糖。如淀粉中β-葡聚糖含量只有1%。 这种葡聚糖，即使微量或摄取不足都能产生重大影响。在世界范围内，不少著名的研究机构所展开的一个又一个实验证实，β-葡聚糖一旦和巨噬细胞膜外的受体结合，便激发巨噬细胞进入活跃状态，同时刺激细胞因子的合成。 也就是说，巨噬细胞在细胞外壁上含有一种特殊蛋白构成的受体，这受体与β-1,3/1,6-D-葡聚糖分子有着很强的亲和力，两者的结合能激活巨噬细胞，也提高了它们寻找清除健康威胁的能力。可以确切的表述：人体的巨噬细胞和β-葡聚糖成为彼此不可缺少的一对。一旦β-葡聚糖进入受体部位，它便激活这些强有力的健康卫士，将它们唤醒。 作为医生和科研工作者，我们必须在此解释清楚，这种必不可缺的糖类和通常可见于糕点店里的糖不是一回事，这种必需糖被称为多糖或复合糖，它们能激发人体多种细胞的免疫智能-免疫细胞进行彼此联络、协调工作，借以保持机体健康和均衡。 根据临床医生Donald J.Carrow 博士所说“从进化角度来看，现在已有证据表明，β-1,3/1,6-D-葡聚糖是大自然最广泛、最常见的巨噬细胞的激活物。” β-葡聚糖甚至经常能减轻癌症放疗和化疗的毒副作用，同时增强放疗、化疗的杀癌效果，延长癌症患者的生存时间、提高生存质量。 β-葡聚糖与舞茸β-葡聚糖： 但是，我们为什么以如此高的评价推崇β-葡聚糖，还一再地强调由舞茸中提取出来的β-葡聚糖呢？确切地说，许多生物反应调节物也能激发非特异性免疫反应，在各种各样的合成和生物质集中，每一种都具有完全不同的化学结构。草药中如黄芪属、紫锥花属等物种也被认为具有非特异性免疫调节作用。 而我们之所以特别推荐舞茸β-葡聚糖的原因之一，是基于它作为免疫补充剂所具有的非凡的效力被科学研究所论证，尤其是在抗化学毒素、生物病原体和辐射的危害，以及许多最致命的老年性疾病等方面的作用。此外，每天使用β-葡聚糖是有安全保证的。它几乎就是一种天然食物的浓缩体。这就更增加了我们对这种营养复合糖的需求。再审视我们每天的饮食，由于过度加工，这一不可缺少的物质已经丢失了。 大多数药用菇类如灵芝、香菇、冬虫夏草和舞茸都有通过刺激细胞介导的免疫作用从而提高免疫功能的共同特性。十分简单，菇类似乎能激活免疫系统巨噬细胞和T细胞，具有明显抗癌和抗感染特性。虽然许多菇类都含有β-葡聚糖，舞茸却和其他菇类有着实质性的区别。舞茸的功效最强，口服时依然保持其功效，当然也绝对安全。例如，Lentinan是一种β-葡聚糖酶活性测定(精)
正确认识粗多糖、β葡聚糖以及舞茸β葡聚糖之间的概念与关系